Πίνακας 2 του παραρτήματος της Διαδικασίας διενέργειας ιατρικής εξέτασης για μέθη (αλκοολική, ναρκωτική ή άλλη τοξική), εγκεκριμένη με εντολή του Υπουργείου Υγείας Ρωσική Ομοσπονδία(σχέδιο), «Επίπεδα οριακών τιμών για την περιεκτικότητα σε ναρκωτικά, ψυχοτρόπες ουσίες, άλλα ΧΗΜΙΚΕΣ ΟΥΣΙΕΣκαι τους μεταβολίτες τους, που προσδιορίζονται με μεθόδους επιβεβαιωτικής ανάλυσης».

Σημείωση: κατώτατο όριοείναι η ελάχιστη συγκέντρωση μιας ουσίας (του μεταβολίτη της) σε ένα βιολογικό αντικείμενο, που προσδιορίζεται με μεθόδους προκαταρκτικής ή επιβεβαιωτικής ανάλυσης, κατά τον εντοπισμό της οποίας το αποτέλεσμα της μελέτης θεωρείται θετικό.

Στην πραγματικότητα ένας παρόμοιος πίνακας που ονομάζεται " Επίπεδα κατωφλίου για μεθόδους επιβεβαιωτικής ανάλυσης ούρων" δίνεται στο Κεντρικό Χημικο-Τοξικολογικό Εργαστήριο στο Τμήμα Αναλυτικής και Ιατροδικαστικής Τοξικολογίας του Κράτους εκπαιδευτικό ίδρυμαπιο ψηλά επαγγελματική εκπαίδευσηΠρώτο κράτος της Μόσχας Ιατρικό Πανεπιστήμιομε το όνομα I.M. Sechenov (TsKhTL GOU VPO First Moscow State Medical University named after I.M. Sechenov) του Υπουργείου Υγείας της Ρωσικής Ομοσπονδίας με ημερομηνία 30 Αυγούστου 2011 Αρ. 179-25/12I, όπου όμως, μεταξύ άλλων, οι συγκεντρώσεις της φαινοβαρβιτάλης αναφέρονται (1 "000 ng/ml), άλλες ουσίες από την ομάδα των βαρβιτουρικών (100 ng/ml) και της κοτινίνης (100 ng/ml). Ανάπτυξη της Ρωσικής Ομοσπονδίας με ημερομηνία 27 Ιανουαρίου 2006 Αρ. 40 "Στις η οργάνωση χημικών και τοξικολογικών μελετών σε αναλυτική διαγνωστικήπαρουσία αλκοόλ, ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών στο ανθρώπινο σώμα», ανέπτυξε και ενέκρινε απαιτήσεις για τη διεξαγωγή χημικών και τοξικολογικών μελετών για αναλυτική διάγνωση της παρουσίας ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών στο ανθρώπινο σώμα».

Ειδικότερα, σύμφωνα με την παράγραφο 12 της ενημερωτικής επιστολής, κατά τη διεξαγωγή ιατρικής εξέτασης οδηγών οχημάτων, τον έλεγχο μαθητών, τη διεξαγωγή χημικών και τοξικολογικών μελετών κατά την εφαρμογή σε πολίτες και άλλες περιπτώσεις που ορίζονται από το νόμο, δοκιμή υγρών στοματική κοιλότητα(σάλιο) είναι απαράδεκτο, δεδομένου ότι δεν επιτρέπει την αξιόπιστη διαπίστωση της παρουσίας ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών στο ανθρώπινο σώμα. Οι ελεγχόμενες ουσίες μπορούν να ανιχνευθούν στο στοματικό υγρό (σάλιο) εντός χρονικού διαστήματος που δεν υπερβαίνει τις αρκετές ώρες από τη στιγμή της κατανάλωσης.

Απαιτήσεις για τεχνικά μέσα που χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών (τους μεταβολίτες τους) σε δείγματα ούρων κατά τη διάρκεια προκαταρκτικών χημικών και τοξικολογικών μελετών (Παράρτημα αριθ. 1 έως Μεθοδικές συστάσεις: Κανόνες διεξαγωγής χημικών και τοξικολογικών μελετών για τον προσδιορισμό της παρουσίας στο σώμα των μαθητών γενικά εκπαιδευτικούς οργανισμούςκαι επαγγελματικών εκπαιδευτικών οργανισμών, καθώς και εκπαιδευτικών οργανισμών ανώτερη εκπαίδευσηώστε να έγκαιρη ανίχνευσηπαράνομη κατανάλωση ναρκωτικών και ψυχοτρόπων ουσιών, ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών (μεταβολίτες τους) / Αναπτύχθηκε από: Ένωση ειδικών και οργανισμών εργαστηριακών υπηρεσιών «Federation of Laboratory Medicine», επιμέλεια του επικεφαλής ελεύθερου επαγγελματία στην αναλυτική και ιατροδικαστική τοξικολογίας του Υπουργείου Υγείας της Ρωσίας, Dr. h.n., καθηγητής B.N. Izotov και επικεφαλής ελεύθερος επαγγελματίας κλινικός ειδικός εργαστηριακή διάγνωσηΥπουργείο Υγείας της Ρωσίας, Διδάκτωρ Ιατρικών Επιστημών, Καθηγητής A. G. Kochetov // Μόσχα, 2015)

Απαιτήσεις για τεχνικά μέσα που χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση ναρκωτικών, ψυχοτρόπων και άλλων τοξικών ουσιών (τους μεταβολίτες τους) σε δείγματα ούρων κατά τη διεξαγωγή επιβεβαιωτικών χημικών-τοξικολογικών μελετών (Παράρτημα αρ. 2 στην παραπάνω πηγή)

Ταυτόχρονα, κατά την παροχή υπεράσπισης σε περιπτώσεις διοικητικών αδικημάτων σύμφωνα με τα άρθρα 12.8 και 12.27 Μέρος 3 του Κώδικα Διοικητικών Αδικημάτων της Ρωσικής Ομοσπονδίας, καθώς και σε περιπτώσεις που προβλέπουν ποινική ευθύνη για οδήγηση σε κατάσταση μέθης (άρθρα 264 και 264.1 του του Ποινικού Κώδικα της Ρωσικής Ομοσπονδίας), δεν πρέπει να ξεχνάμε ότι η διοικητική ευθύνη προκύπτει σε περίπτωση παρουσίας ναρκωτικών ή ψυχοτρόπων ουσιών στο ανθρώπινο σώμα, ανεξάρτητα από τη συγκέντρωσή τους στο ανθρώπινο σώμα, στο αίμα και στα ούρα .

Ενόψει των ανωτέρω, ταυτοποίηση στο πλαίσιο φαρμακευτικών εξετάσεων, χημικοτοξικολογικών μελετών, ιατροχημικών μελετών ναρκωτικών ναρκωτικά, ψυχοτρόπες και τοξικές ουσίες και ουσίες που προκαλούν μέθη, ακόμη και στο επίπεδο, ας πούμε, του «ορίου ανίχνευσης της χρησιμοποιούμενης μεθόδου» αποτελεί λόγο για την προσέλκυση του οδηγού όχημαγια διοικητική ή ποινική ευθύνη σύμφωνα με τα σχετικά άρθρα του Κώδικα της Ρωσικής Ομοσπονδίας για τα διοικητικά αδικήματα ή/και του Ποινικού Κώδικα της Ρωσικής Ομοσπονδίας.

Για πληροφορίες - " "

Τα κριτήρια για την αντιμικροβιακή δράση του φαρμάκου είναι ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση(MIC) και ελάχιστη βακτηριοκτόνο συγκέντρωση(MBK). Το MIC είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση αντιβιοτικών που αναστέλλει πλήρως in vitro ορατός βακτηριακή ανάπτυξη. Εκφράζεται σε mg/l ή μg/ml. Το MBC είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση αντιβιοτικού που προκαλεί βακτηριοκτόνο δράση. Για τον προσδιορισμό του, είναι απαραίτητο να εμβολιαστούν δοκιμαστικοί σωλήνες στους οποίους δεν υπάρχει οπτικά ανάπτυξη σε πυκνό θρεπτικό άγαρ που δεν περιέχει αντιβιοτικό. Αυτός ο δείκτης έχει μεγάλο κλινική σημασία. Με βάση τη μέθοδο της σειριακής αραίωσης, έχουν δημιουργηθεί μικρομέθοδοι που περιλαμβάνουν τη χρήση μικρότερου όγκου θρεπτικού μέσου. Επί του παρόντος, για τη διεξαγωγή αυτού του τύπου έρευνας, παράγονται πολυάριθμα εμπορικά κιτ, τα οποία αποτελούνται από ξηρές σταθεροποιημένες αραιώσεις αντιβιοτικών σε θρεπτικό μέσο, ​​τα οποία αραιώνονται με ένα εναιώρημα του εξεταζόμενου μικροβίου. Αυτά τα κιτ μπορούν να αποθηκευτούν υπό κανονικές συνθήκες, εξαλείφοντας την ανάγκη παρασκευής αραιώσεων μέσων και αντιβιοτικών σε εργαστηριακές συνθήκες. Οι δοκιμές μικροαραίωσης έχουν επίσης το πλεονέκτημα ότι ενσωματώνονται σε ένα αυτοματοποιημένο σύστημα.

Με βάση τα δεδομένα που ελήφθησαν (διάμετρος ζώνης αναστολής ανάπτυξης ή τιμή MIC), οι μικροοργανισμοί χωρίζονται σε ευαίσθητους, μέτρια ανθεκτικούς και ανθεκτικούς. Για τη διάκριση μεταξύ αυτών των κατηγοριών, χρησιμοποιούνται οι λεγόμενες οριακές συγκεντρώσεις αντιβιοτικών, οι οποίες δεν είναι σταθερές τιμές. Αναθεωρούνται καθώς αλλάζει η ευαισθησία του μικροβιακού πληθυσμού. Η ανάπτυξη και αναθεώρηση των κριτηρίων ερμηνείας πραγματοποιείται από κορυφαίους ειδικούς (χημειοθεραπευτές, μικροβιολόγους) που είναι μέλη ειδικών επιτροπών. Ένα από αυτά είναι η Εθνική Επιτροπή Προτύπων Κλινικών Εργαστηρίων ( Νεθνικός ντο ommitteefor ντογραμμικός μεγάλοεργαστηριο μικρό tandards – NCCLS), που διοργανώθηκε στις Η.Π.Α. Επί του παρόντος, τα πρότυπα NCCLS χρησιμοποιούνται ως διεθνή πρότυπα για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων του προσδιορισμού της ευαισθησίας των βακτηρίων κατά τη διάρκεια πολυκεντρικών μικροβιολογικών και κλινικές μελέτες.

Προσδιορισμός βακτηριακής ευαισθησίας στα αντιβιοτικά.Το κριτήριο για την ευαισθησία των μικροοργανισμών στα αντιβιοτικά είναι η ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση (MIC) του αντιβιοτικού, η οποία καθυστερεί την ανάπτυξη του παθογόνου υπό τυπικές πειραματικές συνθήκες.

Για τον καθορισμό ΑΝΤΙΣΤΑΣΗ ΚΑΤΑ ΤΩΝ ΝΑΡΚΩΤΙΚΩΝΧρησιμοποιούν καθημερινή καθαρή καλλιέργεια του παθογόνου που απομονώνεται από το σώμα του ασθενούς και ένα τυπικό θρεπτικό μέσο (AGV ή άγαρ Mueller-Hinton) για τον εμβολιασμό του.

Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας των μικροοργανισμών στα αντιβιοτικά πραγματοποιείται με τη μέθοδο της διάχυσης με δίσκο ή τη μέθοδο των σειριακών αραιώσεων του αντιβιοτικού σε υγρά ή στερεά μέσα.

Μέθοδος διάχυσης δίσκου.Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας στα αντιβιοτικά με τη μέθοδο του χάρτινου δίσκου βασίζεται στη διάχυση του αντιβιοτικού στο θρεπτικό μέσο. Η συγκέντρωση των αντιβιοτικών στους δίσκους επιλέγεται με τέτοιο τρόπο ώστε οι διάμετροι των ζωνών αναστολής ανάπτυξης των τυπικών μικροοργανισμών δοκιμής να πληρούν τα διεθνή πρότυπα. Αυτή η συγκέντρωση αντιστοιχεί στη μέση θεραπευτική δόση για τυπικά στελέχη μικροοργανισμών.

Το παρασκευασμένο εναιώρημα μικροοργανισμών ενοφθαλμίζεται στην επιφάνεια ενός ειδικού μέσου (AGV ή άγαρ Mueller-Hinton) σε τρυβλία Petri. Στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας αποστειρωμένα τσιμπιδάκια, τυποποιημένοι χάρτινοι δίσκοι εμποτισμένοι σε διαλύματα διαφόρων αντιβιοτικών τοποθετούνται στην εμβολιασμένη επιφάνεια σε ίση απόσταση μεταξύ τους, από τις άκρες και το κέντρο του κυπέλλου (μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν ειδικές συσκευές και διανομείς). Τα ενοφθαλμισμένα πιάτα διατηρούνται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία βέλτιστη για την ανάπτυξη των υπό μελέτη βακτηρίων. Εάν τα βακτήρια είναι ευαίσθητα σε αυτό το αντιβιοτικό, τότε σχηματίζεται μια ζώνη αναστολής ανάπτυξης γύρω από τον δίσκο. Η διάμετρος της ζώνης αναστολής ανάπτυξης αντιστοιχεί στον βαθμό ευαισθησίας του υπό μελέτη μικροοργανισμού σε ένα δεδομένο αντιβιοτικό. Το τελικό αποτέλεσμα αξιολογείται με τη χρήση ειδικών πινάκων που υποδεικνύουν τις διαμέτρους των ζωνών αναστολής ανάπτυξης τυπικών καλλιεργειών, ευαίσθητων, ανθεκτικών και μετρίως ανθεκτικών.

Η μέθοδος δίσκου δεν παρέχει αξιόπιστα δεδομένα κατά τον προσδιορισμό της ευαισθησίας των μικροοργανισμών σε πολυπεπτιδικά αντιβιοτικά που διαχέονται ελάχιστα στο άγαρ (για παράδειγμα, πολυμυξίνη, ριστομυκίνη). Επίσης, αυτή η μέθοδος δεν επιτρέπει τον προσδιορισμό της ελάχιστης ανασταλτικής συγκέντρωσης του αντιβιοτικού.

Μέθοδος σειριακής αραίωσης.Αυτή η μέθοδος καθορίζει την ελάχιστη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που αναστέλλει την ανάπτυξη της εξεταζόμενης βακτηριακής καλλιέργειας (MIC, MIC). Για να γίνει αυτό, παρασκευάστε πρώτα ένα μητρικό διάλυμα που περιέχει μια ορισμένη συγκέντρωση αντιβιοτικού (μg/ml ή μονάδες/ml) ​​σε ειδικό διαλύτη ή ρυθμιστικό διάλυμα. Στη συνέχεια, όλες οι επόμενες αραιώσεις στον ζωμό (σε όγκο 1 ml) παρασκευάζονται από το κύριο διάλυμα, μετά το οποίο 0,1 ml του δοκιμαστικού βακτηριακού εναιωρήματος που περιέχει 10 6 - 10 7 βακτηριακά κύτταρα σε 1 ml προστίθεται σε κάθε αραίωση. Προσθέστε 1 ml ζωμού (χωρίς αντιβιοτικό) και 0,1 ml βακτηριακού εναιωρήματος (έλεγχος καλλιέργειας) στον τελευταίο δοκιμαστικό σωλήνα. Οι καλλιέργειες επωάζονται στους 37 0 C μέχρι την επόμενη μέρα, μετά την οποία τα αποτελέσματα του πειράματος σημειώνονται από τη θολότητα του θρεπτικού μέσου, σε σύγκριση με τον έλεγχο. Ο τελευταίος δοκιμαστικός σωλήνας με διαφανές θρεπτικό μέσο υποδεικνύει επιβράδυνση της ανάπτυξης της βακτηριακής καλλιέργειας υπό μελέτη, υπό την επίδραση της ελάχιστης ανασταλτικής (ανασταλτικής) συγκέντρωσης (MIC, MIC) του αντιβιοτικού που περιέχεται σε αυτό. Για να εκτιμηθεί η ελάχιστη βακτηριοκτόνος συγκέντρωση (MBC), η σπορά πραγματοποιείται σε στερεό θρεπτικό μέσο χωρίς αντιβιοτικό από δοκιμαστικούς σωλήνες χωρίς ανάπτυξη. Το MBC θεωρείται ότι είναι η ελάχιστη συγκέντρωση αντιβιοτικού που προκαλεί το θάνατο του μικροοργανισμού, ο οποίος χαρακτηρίζεται από την απουσία ανάπτυξης σε τρυβλία Petri με θρεπτικό μέσο.

Μέθοδος σειριακής αραίωσης αντιβιοτικού σε μέσο άγαρ.Σε αυτή την περίπτωση, είναι δυνατό να ελεγχθεί η ευαισθησία πολλών καλλιεργειών μικροοργανισμών σε διαφορετικές συγκεντρώσεις ενός δεδομένου αντιβιοτικού σε ένα πείραμα. Διάφορες αραιώσειςΤο αντιβιοτικό παρασκευάζεται σε αποστειρωμένο μέσο άγαρ. Για να γίνει αυτό, προσθέστε την απαιτούμενη ποσότητα του αρχικού διαλύματος αντιβιοτικού, ανακατέψτε καλά και αδειάστε σε αποστειρωμένα πιάτα Petri. Αφού σκληρύνει το άγαρ, ο πάτος του φλιτζανιού χωρίζεται από έξω σε τομείς με μαρκαδόρο. Κάθε καλλιέργεια υπό μελέτη ραβδώνεται με χρήση βακτηριολογικού βρόχου σε συγκεκριμένο τομέα σε πιάτα με διαφορετικές συγκεντρώσεις του αντιβιοτικού. Σπορά των μελετημένων καλλιεργειών σε πλάκες με διαφορετικές συγκεντρώσειςΤο αντιβιοτικό μπορεί να γίνει χρησιμοποιώντας ένα απλικατέρ που σας επιτρέπει να εμβολιάζετε ταυτόχρονα 12-15 καλλιέργειες ανά φλιτζάνι. Στη συνέχεια τα πιάτα τοποθετούνται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία βέλτιστη για την ανάπτυξη και την ανάπτυξη των βακτηρίων που μελετώνται. Τα αποτελέσματα λαμβάνονται υπόψη από την παρουσία ή την απουσία βακτηριακής ανάπτυξης σε σύγκριση με την ανάπτυξη στο μέσο στην πλάκα ελέγχου. Τα βακτήρια θεωρούνται ευαίσθητα στο αντιβιοτικό σε συγκέντρωση στην οποία η ανάπτυξή τους αναστέλλεται πλήρως.

Μέθοδος e-test.Αυτή η μέθοδος συνδυάζει τα πλεονεκτήματα της μεθόδου σειριακής αραίωσης και της μεθόδου του δίσκου. Αντί για δίσκους, χρησιμοποιούνται λωρίδες («χάρακες») διηθητικού χαρτιού εμποτισμένου με αντιβιοτικό και στη βάση της λωρίδας η συγκέντρωση του αντιβιοτικού θα είναι ελάχιστη και στην «κορυφή» - μέγιστη. Οι λωρίδες τοποθετούνται στην επιφάνεια του θρεπτικού άγαρ που έχει σπαρθεί με την καλλιέργεια που μελετάται. Εάν τα βακτήρια είναι ευαίσθητα στη δράση αυτό το φάρμακο, γύρω από τις περιοχές της λωρίδας που περιέχουν τις ανασταλτικές συγκεντρώσεις της, εμφανίζεται μια ελλειψοειδής ζώνη αναστολής ανάπτυξης. Η αριθμητική τιμή της συγκέντρωσης αντιβιοτικού στη βάση αυτής της ζώνης υποδεικνύει το MIC αυτού του αντιβιοτικού για μια δεδομένη καλλιέργεια.

ΠΡΟΣ ΤΗΝ ευαίσθητοςΑυτά περιλαμβάνουν στελέχη μικροοργανισμών των οποίων η ανάπτυξη αναστέλλεται σε συγκεντρώσεις του φαρμάκου που βρίσκονται στον ορό του αίματος του ασθενούς όταν χρησιμοποιούνται κανονικές δόσεις αντιβιοτικών.

ΠΡΟΣ ΤΗΝ μέτρια σταθερήΑυτά περιλαμβάνουν στελέχη των οποίων η αναστολή ανάπτυξης απαιτεί συγκεντρώσεις που δημιουργούνται στον ορό του αίματος κατά τη χορήγηση των μέγιστων δόσεων του φαρμάκου.

Βιώσιμοςείναι μικροοργανισμοί των οποίων η ανάπτυξη δεν καταστέλλεται από το φάρμακο σε συγκεντρώσεις που δημιουργούνται στον οργανισμό όταν χρησιμοποιούνται οι μέγιστες επιτρεπόμενες δόσεις.

Ερωτήσεις ελέγχου.

Ορίστε τον όρο «αντιβιοτικά». Οι κύριες ομάδες αντιβιοτικών, ανάλογα με τον τρόπο παρασκευής: φυσικά, ημισυνθετικά, συνθετικά. Ονομάστε τον επιστήμονα που ανέπτυξε τη θεωρία της χημειοθεραπείας. Ποιες ιδιότητες είναι καθοριστικές κατά την επιλογή ενός φαρμάκου χημειοθεραπείας; Ποιος είναι ο δείκτης χημειοθεραπείας, γράψτε τον τύπο του, ποιος πρέπει να είναι; Προσδιορίστε τα πρώτα αντισπειροχετικά φάρμακα. το πρώτο αντιβακτηριακό φάρμακο και το όνομα του επιστήμονα που το έλαβε. Ποια είναι τα ονόματα των Ρώσων επιστημόνων που ανακάλυψαν για πρώτη φορά τις αντιβακτηριακές ιδιότητες της πράσινης μούχλας; Ονομάστε τον επιστήμονα που μελέτησε τις αντιβακτηριακές ιδιότητες του καλουπιού Penicillium και έκανε μια προσπάθεια να απομονώσει την πενικιλίνη. Επιστήμονες που έλαβαν για πρώτη φορά σκευάσματα πενικιλίνης. Παραγωγοί αντιβιοτικών - δώστε παραδείγματα. Ταξινόμηση των αντιβιοτικών κατά προέλευση, χημική σύνθεση, σύμφωνα με το φάσμα δράσης. Μηχανισμός δράσης αντιβιοτικών: στόχοι (σημεία εφαρμογής αντιβιοτικών διάφορες ομάδες). Τύποι δράσης - βακτηριοκτόνος και βακτηριοστατικός. πώς να τα προσδιορίσετε σε ένα πείραμα in vitro; Αντιιικά αντιβιοτικά, μηχανισμοί δράσης τους. Σε ποιες μονάδες μετράται η δράση των αντιβιοτικών; Συνθήκες αποθήκευσης αντιβιοτικών.

Ονομάστε και περιγράψτε πιθανές παρενέργειεςμε αντιβιοτική θεραπεία. Ορίστε την έννοια της «αντοχής των μικροβίων στα φάρμακα». Τύποι αντοχής στα φάρμακα. Φυσικό και επίκτητο (πρωτογενές και δευτερογενές). Γενετικοί μηχανισμοί αντοχής στα φάρμακα: χρωμοσωμικός και πλασμιδικός. Φαινοτυπικοί μηχανισμοί αντοχής στα φάρμακα - όνομα και χαρακτηριστικό. Ορθολογική χρήση αντιβιοτικών - ονομάστε τις μεθόδους. Ονομάστε φάρμακα που είναι αναστολείς ενζύμων που καταστρέφουν τα αντιβιοτικά. Περιγράψτε μεθόδους για τον προσδιορισμό της ευαισθησίας των μικροβίων στα αντιβιοτικά.

Ανάλυση της ικανότητας των βακτηρίων να πολλαπλασιάζονται και να αναπτύσσονται σε μέσα που περιέχουν φθίνουσες συγκεντρώσεις φαρμακευτική ουσία, σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση του αντιβιοτικού (MIC), τον ανασταλτικό ρόλο των βακτηρίων in vitro (Πίνακας 3(vet7)). Το μέγεθος αυτής της δόσης καθορίζει την επιλογή ενός φαρμάκου που μπορεί να επιτύχει παρόμοιες συγκεντρώσεις in vivo και αποτελεί τη βάση για τη σύγκριση της σχετικής ευαισθησίας του σώματος με άλλα φάρμακα. Πιστεύεται ότι για να εξασφαλιστεί η αποτελεσματικότητα, η συγκέντρωση της φαρμακευτικής ουσίας στο σημείο της μόλυνσης θα πρέπει να είναι τουλάχιστον ίση με την τιμήελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση του αντιβιοτικού. Από την άλλη πλευρά, οι συγκεντρώσεις του φαρμάκου στο πλάσμα πρέπει γενικά να είναι υψηλότερες για να διασφαλιστούν επαρκείς συγκεντρώσεις στους ιστούς. Ωστόσο, μια αδικαιολόγητη αύξηση των δόσεων αντιμικροβιακών φαρμάκων προκειμένου να επιτευχθεί μια ελάχιστη δόση αντιβιοτικού που αναστέλλει την ανάπτυξη συγκεκριμένου τύπου βακτηρίων in vitro μπορεί να οδηγήσει στη συσσώρευση του φαρμάκου στον οργανισμό του λήπτη σε τοξικές δόσεις.

Το «κρίσιμο MIC» για μια συγκεκριμένη φαρμακευτική ουσία είναι η υψηλότερη εύλογα ασφαλής συγκέντρωση του φαρμάκου που μπορεί να επιτευχθεί χρησιμοποιώντας μια κλινικά αποδεκτή δόση και οδό χορήγησης του φαρμάκου (Πίνακας 3(vet7)). Το MIC εξαρτάται από συγκεκριμένου τύπουβακτηριακή καλλιέργεια και συγκεκριμένο είδος φαρμακευτικής ουσίας. Ταυτόχρονα, το κρίσιμο MIC είναι συγκεκριμένο για έναν συγκεκριμένο αποδέκτη και μια συγκεκριμένη φαρμακευτική ουσία. Έτσι, το κρίσιμο MIC θα είναι το ίδιο για οποιονδήποτε οργανισμό (Πίνακας 3(vet7)). Η κρίσιμη τιμή συγκέντρωσης για έναν συγκεκριμένο οργανισμό μπορεί να διαφέρει ανάλογα με το ζωικό είδος (λόγω διαφορών στην ευαισθησία ή στα πρότυπα κατανομής). φάρμακο) και ένα συγκεκριμένο εργαστήριο. Θα πρέπει να επικοινωνήσετε με το εργαστήριο που παρέχει δεδομένα σχετικά με τις μεθόδους καλλιέργειας και την ευαισθησία στα αντιβιοτικά για να ληφθούν οι κρίσιμες τιμές που χρησιμοποιούνται στις μελέτες του.

Με βάση τα δεδομένα αραίωσης in vitro, τα βακτήρια ταξινομούνται ως ευαίσθητα (S) σε ένα συγκεκριμένο φάρμακο εάν το MIC είναι σημαντικά χαμηλότερο από την κρίσιμη τιμή για αυτόν τον δείκτη. Η ανάπτυξη παθογόνων μικροοργανισμών με ενδιάμεσες (MS) ή ενδιάμεσες (IS) τιμές ευαισθησίας αναστέλλεται όταν η συγκέντρωση του φαρμάκου πλησιάζει την κρίσιμη τιμή MIC. Τέτοια βακτήρια μπορούν να προκαλέσουν αρνητικές αντιδράσεις στο σώμα του ασθενούς ή να μην έχουν καμία επίδραση σε αυτό. Το MIC για ανθεκτικά (R) βακτήρια υπερβαίνει την κρίσιμη ελάχιστη δόση. Η αποτελεσματική συγκέντρωση στο σώμα του ασθενούς ενός τέτοιου φαρμάκου που επηρεάζει έναν συγκεκριμένο μικροοργανισμό είναι απίθανο να επιτευχθεί. Σε τέτοιες περιπτώσεις, ο κίνδυνος συσσώρευσης του φαρμάκου σε τοξικές δόσεις μπορεί επίσης να υπερτερεί του πιθανού οφέλους της θεραπείας. Η κρίσιμη ελάχιστη δόση των αντιβακτηριακών αντιβιοτικών νέας γενιάς είναι σε ορισμένες περιπτώσεις πιο δύσκολο να προσδιοριστεί λόγω της μετάβασης στην επαγγελματική ευέλικτη επισήμανση των δοσολογικών σειρών.

Τα φάρμακα πρέπει να επιλέγονται με τέτοιο τρόπο ώστε, όταν χορηγούνται σε πρόγραμμα που αποτρέπει τη συσσώρευση του φαρμάκου σε τοξικές δόσεις, να είναι δυνατή η επίτευξη μέγιστης συγκέντρωσης φαρμάκου στο πλάσμα που υπερβαίνει σημαντικά το MIC. Πολλά βακτήρια θα είναι ευαίσθητα στις επιδράσεις ενός συγκεκριμένου φαρμάκου σε συγκεντρώσεις πολύ κάτω από την κρίσιμη ελάχιστη δόση. Η διαφορά μεταξύ της κρίσιμης τιμής και της εγγενούς τιμής MIC μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη σύγκριση της σχετικής αποτελεσματικότητας διαφορετικών αντιμικροβιακών. Για παράδειγμα, για την αμικακίνη, η κρίσιμη τιμή είναι 32 μg/ml, επομένως το E. coli με MIC 2 μg/ml είναι σχετικά πιο ευαίσθητο στην αμικακίνη από το E. coli με MIC 16 μg/ml. Και τα δύο είδη θα πρέπει να θεωρούνται ευαίσθητα (αν και το δεύτερο είδος μπορεί να θεωρηθεί ως ενδιάμεσης ευαισθησίας), αλλά η ανάπτυξη των βακτηρίων του πρώτου είδους φαίνεται να αναστέλλεται σε μεγαλύτερο βαθμό. Εάν το ίδιο είδος E. coli με τιμή MIC 2 μg/ml σε σχέση με την αμοξικιλλίνη έχει τιμή MIC 16 μg/ml (με κρίσιμη τιμή 32 μg/ml), τότε η ανάπτυξη αυτού του μικροοργανισμού πιθανώς να είναι αποτρέπεται ευκολότερα με τη χρήση αμικασίνης παρά αμοξικιλλίνης, επειδή η τιμή MIC της αμικασίνης είναι πιο μακριά από την κρίσιμη τιμή MIC της από την τιμή MIC της αμοξικιλλίνης.

Αν και οι διαφορές μεταξύ των τιμών MIC για ένα συγκεκριμένο βακτηριακό είδος και ένα συγκεκριμένο φάρμακο (16 ή 32) μπορεί να φαίνονται αρκετά μεγάλες (ιδιαίτερα στο πλαίσιο του ορίου συγκέντρωσης του φαρμάκου στο πλάσμα), μια τέτοια διαφορά αντιστοιχεί μόνο σε ένα διάλυμα σε δοκιμαστικός σωλήνας. Αυτό είναι ένα παράδειγμα του κινδύνου υπερεκτίμησης των δεδομένων ευαισθησίας. Εάν η τιμή MIC ενός συγκεκριμένου οργανισμού είναι αρκετά κοντά στην κρίσιμη τιμή, τότε, λόγω πιθανών διαφορών στην ερμηνεία, σε αυτόν τον μικροοργανισμό μπορεί να αποδοθεί ένας βαθμός ευαισθησίας "S" ή "MS" σε ένα εργαστήριο και το "R" σε άλλο, λόγω πιθανών διαφορών στην ερμηνεία. Τέτοιες πιθανές αποκλίσεις στην αξιολόγηση είναι ένας λόγος για τον οποίο η χρήση φαρμάκων για τα οποία ένας συγκεκριμένος οργανισμός έχει ευαισθησία στην ΠΣ (ή εάν η τιμή MIC είναι κοντά στο κρίσιμο) πρέπει να αποφεύγεται, εκτός εάν η συγκέντρωση του φαρμάκου στο σημείο της μόλυνσης μπορεί να είναι μεγάλη υψηλότερη από την τιμή MIC που προσδιορίστηκε στην in vitro δοκιμασία. Ένα ενδεικτικό παράδειγμα θα ήταν η χρήση φαρμάκων που απεκκρίνονται μέσω των νεφρών για τη θεραπεία της λοίμωξης. ουροποιητικού συστήματοςή χρήση φαρμάκων που απεκκρίνονται από τη χολή για τη θεραπεία μιας λοίμωξης χοληφόρος οδός. Η συσσώρευση ορισμένων φαρμάκων από λευκοκύτταρα (φθοροκινολόνες, μακρολίδες) μπορεί επίσης να οδηγήσει σε συγκεντρώσεις φαρμάκου στους ιστούς που υπερβαίνουν σημαντικά την MIC (ή την κρίσιμη τιμή MIC), παρά τις χαμηλότερες συγκεντρώσεις στο πλάσμα.

Το MIC των βακτηρίων μπορεί να αλλάξει κατά τη διάρκεια επακόλουθων λοιμώξεων που προκαλούνται από βακτήρια του ίδιου είδους και μπορεί επίσης να αλλάξει κατά τη διάρκεια της μολυσματικής νόσου. Μια αύξηση στο MIC μπορεί απλώς να αντανακλά μια διαφορετική προσέγγιση στην αξιολόγηση της δοκιμασίας (ιδιαίτερα εάν οι διαφορές ανιχνεύονται μόνο με αραίωση in vitro), αλλά μπορεί επίσης να οφείλεται στην ανάπτυξη αντοχής σε ένα συγκεκριμένο φάρμακο. Σε τέτοιες περιπτώσεις το μάθημα αντιμικροβιακή θεραπείαμπορεί να αλλάξει με τη χρήση ενός πρόσθετου φαρμάκου ή τη μετάβαση σε ένα νέο, περισσότερο αποτελεσματικό φάρμακο. Σε πολυμικροβιακές λοιμώξεις, η τιμή MIC ενός συγκεκριμένου φαρμάκου είναι πιθανό να είναι διαφορετική για κάθε μολυσματικό βακτήριο. Πιστεύεται ότι είναι ευκολότερο να αποτραπεί η ανάπτυξη βακτηρίων με χαμηλής αξίας MIC σε σχέση με μια συγκεκριμένη φαρμακευτική ουσία από την ανάπτυξη ενός μικροοργανισμού με υψηλότερη τιμή MIC σε σχέση με την ίδια φαρμακευτική ουσία.

Τα κριτήρια για την αντιμικροβιακή δράση του φαρμάκου είναι ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση(IPC) και ελάχιστη βακτηριοκτόνο συγκέντρωση(MBK). Το MIC είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση αντιβιοτικών που αναστέλλει πλήρως in vitro ορατός βακτηριακή ανάπτυξη. Εκφράζεται σε mg/l ή μg/ml. Το MBC είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση αντιβιοτικού που προκαλεί βακτηριοκτόνο δράση. Για τον προσδιορισμό του, είναι απαραίτητο να σπαρθούν οι δοκιμαστικοί σωλήνες (οπτικά δεν υπάρχει ανάπτυξη) σε πυκνό θρεπτικό άγαρ που δεν περιέχει αντιβιοτικό. Αυτός ο δείκτης έχει μεγάλη κλινική σημασία. Με βάση τη μέθοδο της σειριακής αραίωσης, έχουν δημιουργηθεί μικρομέθοδοι που περιλαμβάνουν τη χρήση μικρότερου όγκου θρεπτικού μέσου. Επί του παρόντος, για τη διεξαγωγή αυτού του τύπου έρευνας, παράγονται πολυάριθμα εμπορικά κιτ, που αποτελούνται από αποξηραμένα σταθεροποιημένα αραιώματα αντιβιοτικών, τα οποία αραιώνονται με ένα εναιώρημα του εξεταζόμενου μικροβίου. Αυτά τα κιτ μπορούν να αποθηκευτούν υπό κανονικές συνθήκες, εξαλείφοντας την ανάγκη παρασκευής αραιώσεων μέσων και αντιβιοτικών στο εργαστήριο. Οι δοκιμές μικροαραίωσης έχουν επίσης το πλεονέκτημα ότι ενσωματώνονται σε ένα αυτοματοποιημένο σύστημα.

Με βάση τα δεδομένα που ελήφθησαν (διάμετρος ζώνης αναστολής ανάπτυξης ή τιμή MIC), οι μικροοργανισμοί χωρίζονται σε ευαίσθητους, μέτρια ανθεκτικούς και ανθεκτικούς. Για τη διάκριση μεταξύ αυτών των κατηγοριών, χρησιμοποιούνται οι λεγόμενες οριακές συγκεντρώσεις αντιβιοτικών, οι οποίες δεν είναι σταθερές τιμές. Αναθεωρούνται καθώς αλλάζει η ευαισθησία του μικροβιακού πληθυσμού. Η ανάπτυξη και αναθεώρηση των κριτηρίων ερμηνείας πραγματοποιείται από κορυφαίους ειδικούς (χημειοθεραπευτές, μικροβιολόγους) που είναι μέλη ειδικών επιτροπών. Ένα από αυτά είναι η Εθνική Επιτροπή Προτύπων Κλινικών Εργαστηρίων ( Νεθνικός ντοεπιτροπή για ντογραμμικός μεγάλοεργαστηριο μικρό tandards – NCCLS), που διοργανώθηκε στις Η.Π.Α. Επί του παρόντος, τα πρότυπα NCCLS χρησιμοποιούνται ως διεθνή πρότυπα για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων των δοκιμών βακτηριακής ευαισθησίας σε πολυκεντρικές μικροβιολογικές και κλινικές μελέτες.

Προσδιορισμός βακτηριακής ευαισθησίας στα αντιβιοτικά

Το κριτήριο για την ευαισθησία των μικροοργανισμών στα αντιβιοτικά είναι η ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση (MIC) ή η ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση (MIC) του αντιβιοτικού, η οποία αναστέλλει την ανάπτυξη του παθογόνου υπό τυπικές πειραματικές συνθήκες.

Για τον προσδιορισμό της αντοχής στο φάρμακο, χρησιμοποιείται μια καθημερινή καθαρή καλλιέργεια του παθογόνου που απομονώνεται από το σώμα του ασθενούς και ένα τυπικό θρεπτικό μέσο (AGV ή άγαρ Mueller-Hinton) για τον εμβολιασμό του.

Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας των μικροοργανισμών στα αντιβιοτικά πραγματοποιείται με τη μέθοδο της διάχυσης με δίσκο ή τη μέθοδο των σειριακών αραιώσεων του αντιβιοτικού σε υγρά ή στερεά μέσα.

Μέθοδος διάχυσης δίσκου

Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας στα αντιβιοτικά με τη μέθοδο του χάρτινου δίσκου βασίζεται στη διάχυση του αντιβιοτικού στο θρεπτικό μέσο. Η συγκέντρωση των αντιβιοτικών στους δίσκους επιλέγεται με τέτοιο τρόπο ώστε οι διάμετροι των ζωνών αναστολής ανάπτυξης των τυπικών μικροοργανισμών δοκιμής να πληρούν τα διεθνή πρότυπα. Αυτή η συγκέντρωση αντιστοιχεί στη μέση θεραπευτική δόση για τυπικά στελέχη μικροοργανισμών.

Το παρασκευασμένο εναιώρημα μικροοργανισμών ενοφθαλμίζεται στην επιφάνεια ενός ειδικού μέσου (AGV ή άγαρ Mueller-Hinton) σε τρυβλία Petri. Στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας αποστειρωμένα τσιμπιδάκια, τυποποιημένοι χάρτινοι δίσκοι εμποτισμένοι σε διαλύματα διαφόρων αντιβιοτικών τοποθετούνται στην εμβολιασμένη επιφάνεια σε ίση απόσταση μεταξύ τους, από τις άκρες και το κέντρο του κυπέλλου (μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν ειδικές συσκευές και διανομείς). Τα ενοφθαλμισμένα πιάτα διατηρούνται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία βέλτιστη για την ανάπτυξη των υπό μελέτη βακτηρίων. Εάν τα βακτήρια είναι ευαίσθητα σε αυτό το αντιβιοτικό, μια ζώνη αναστολής της ανάπτυξης θα σχηματιστεί γύρω από το δίσκο. Η διάμετρος της ζώνης αναστολής ανάπτυξης αντιστοιχεί στον βαθμό ευαισθησίας του υπό μελέτη μικροοργανισμού σε ένα δεδομένο αντιβιοτικό. Το τελικό αποτέλεσμα αξιολογείται με τη χρήση ειδικών πινάκων που υποδεικνύουν τις διαμέτρους των ζωνών αναστολής ανάπτυξης τυπικών καλλιεργειών, ευαίσθητων, ανθεκτικών και μετρίως ανθεκτικών.

Η μέθοδος δίσκου δεν παρέχει αξιόπιστα δεδομένα κατά τον προσδιορισμό της ευαισθησίας των μικροοργανισμών σε πολυπεπτιδικά αντιβιοτικά που διαχέονται ελάχιστα στο άγαρ (για παράδειγμα, πολυμυξίνη, ριστομυκίνη). Επίσης, αυτή η μέθοδος δεν επιτρέπει τον προσδιορισμό της ελάχιστης ανασταλτικής συγκέντρωσης του αντιβιοτικού.

ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση- ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση.

Ένας δείκτης της δράσης ενός αντιβιοτικού σε μια βακτηριακή καλλιέργεια, ίσος με την ελάχιστη συγκέντρωσή του στην οποία συμβαίνει πλήρης αναστολή της βακτηριακής ανάπτυξης.

(Πηγή: "Αγγλο-ρωσικό επεξηγηματικό λεξικό γενετικών όρων." Arefiev V.A., Lisovenko L.A., Μόσχα: VNIRO Publishing House, 1995)

• - η ελάχιστη συγκέντρωση απολυμαντικού που προκαλεί πλήρη θάνατο τυπικών δοκιμαστικών στελεχών βακτηρίων σε εναιώρημα ή στην επιφάνεια του μέσου σε σύντομο χρονικό διάστημα...

  Λεξικό μικροβιολογίας

• - η ελάχιστη συγκέντρωση χημειοθεραπευτικής ή αντισηπτικής ουσίας που προκαλεί πλήρη καταστολή της ανάπτυξης ενός δεδομένου μικροοργανισμού ορατού με γυμνό μάτι σε μέσα υπό τυπικές πειραματικές συνθήκες...

  Λεξικό μικροβιολογίας

• - Η ελάχιστη συγκέντρωση του πυροσβεστικού παράγοντα στον αέρα στον οποίο παρατηρείται η κατάσβεση του πυρσού διάχυσης n-επτανίου υπό τις συνθήκες ενός τυπικού πειράματος. Πηγή: GOST 4...

  Γλωσσάρι όρων έκτακτης ανάγκης

• - λογικό ένα σύστημα που αποτελεί αποδυνάμωση της εποικοδομητικής λογικής και της διαισθητικής λογικής λόγω της εξαίρεσης από τα αξιώματα της αρχής «κάθε πρόταση προκύπτει από μια αντίφαση»...

  Φιλοσοφική Εγκυκλοπαίδεια

• - Δες Καημένε...

  Προβολικός φιλοσοφικό λεξικό

• - μικρότερη τιμήκέρδη που είναι απαραίτητα για τη διατήρηση της εταιρείας, τη συνέχιση της λειτουργίας της, την πρόληψη της κατάρρευσης...

  Οικονομικό λεξικό

• - την ελάχιστη αξία κέρδους που απαιτείται για τη διατήρηση της επιχείρησης, τη συνέχιση της λειτουργίας της, την αποφυγή κατάρρευσης...

  Εγκυκλοπαιδικό Λεξικό Οικονομικών και Νομικών

• - σωματίδιο πυρήνα, ελάχιστο νουκλεόσωμα - σωματίδιο πυρήνα, μονάδα συσκευασίας DNA, που υπάρχει σταθερά κατά τον σχηματισμό της δομής του νουκλεοσώματος και περιλαμβάνει 146 ζεύγη νουκλεοτιδίων και ένα οκταμερές ιστονών πυρήνα ...

  ΜΟΡΙΑΚΗ ΒΙΟΛΟΓΙΑκαι γενετική. Λεξικό

• - βλέπε Συγκέντρωση κατωφλίου...

  Μεγάλο ιατρικό λεξικό

• - τη χαμηλότερη συγκέντρωση ογκομετρικών πυροσβεστικών μέσων στον αέρα, η οποία εξασφαλίζει στιγμιαία κατάσβεση μιας φλόγας διάχυσης μιας ουσίας υπό πειραματικές συνθήκες. Πηγή: «House: Construction Terminology», M.: Buk-press, 2006...

  Λεξικό κατασκευής

• - τη χαμηλότερη συγκέντρωση δηλητηρίου σε αντικείμενα περιβάλλον, προκαλώντας ναρκωτική κατάσταση στο 50% των πειραματόζωων. Υποδεικνύεται με το σύμβολο CN50...

  Οικολογικό λεξικό

• - Αρχικό περιθώριο. Το ποσό των κεφαλαίων που απαιτείται για το άνοιγμα μιας θέσης στην αγορά παραγώγων...

  Λεξικό επιχειρηματικών όρων

• Λεξικό επιχειρηματικών όρων

• - Το ελάχιστο χρηματικό ποσό που καθορίζεται στο ενημερωτικό δελτίο μιας νέας εταιρείας το οποίο, κατά τη γνώμη των διευθυντών της, πρέπει να συγκεντρωθεί για να καταστεί βιώσιμη η εταιρεία...

  Οικονομικό Λεξικό

• - η μικρότερη αξία κέρδους που απαιτείται για τη διατήρηση της επιχείρησης Στα αγγλικά: Οριακό κέρδοςΒλ. επίσης: Πωλήσεις εξισορρόπησης κερδών  ...

  Οικονομικό Λεξικό

• - λογικό σύστημα, που αποτελεί αποδυνάμωση της διαισθητικής λογικής και της εποικοδομητικής λογικής λόγω της εξαίρεσης του τύπου ⌉A ⊃ ... από τα αξιώματα

  Μεγάλη Σοβιετική Εγκυκλοπαίδεια

«ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση» σε βιβλία