גורם אנטי-גרעיני על קו התא HEp-2 (ANF)היא בדיקה לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים על ידי אימונופלואורסצנטי עקיף.

בזאבת אדמנתית מערכתית (SLE) ומחלות ראומטיות סיסטמיות אחרות, התגובה החיסונית מכוונת נגד אנטיגנים של נוקלאופרוטאין, כלומר. קומפלקסים של חומצות גרעין וחלבונים. מתחמי נוקלאופרוטאין אנדוגניים אלה נוצרים במהלך תהליך האפופטוזיס של תאי אפיתל ודומים לחלקיקים ויראליים זרים. האצת תהליכי אפופטוזיס בהשפעת הקרנה אולטרה סגולה, זיהום ויראליו תרופות, מעורר תגובות אוטואימוניות ב-SLE. במהלך אפופטוזיס, אנטיגנים עיקריים של נוגדנים מתעבים לגופים אפופטוטיים, שהופכים למטרות של נוגדנים עצמיים. נכון להיום, תוארו כ-200 סוגי נוגדנים לנוקלאופרוטאין וחומצות ריבונוקלאיות, המכונות נוגדנים אנטי-גרעיניים. במחלות אוטואימוניות, לנוגדנים עצמיים לאנטיגנים גרעיניים אין השפעה ציטוטוקסית ישירה על תאים אנושיים, עם זאת, קומפלקסים חיסוניים מסוגלים לעורר דלקת אימונולוגית, במיוחד במקומות שבהם כלי הדם דקים במיוחד, כולל הכליות, העור, מערכת העצבים המרכזית, סינוביום של מפרקים, וצדר.

בדיקת גורם אנטי-גרעיני (ANF) היא השיטה העיקרית לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים, המאפשרת זיהוי של נוגדנים עצמיים לחומצות גרעין (dsDNA, ssDNA, RNA), ריבונוקלאופרוטאין וכן לרוב האנטיגנים הקונפורמטיביים והבלתי מסיסים.

נוגדנים אנטי-גרעיניים מתגלים על ידי התקשרותם לאנטיגנים תוך-תאיים של קו תאי אפיתל אנושי רציף (HEp-2). הגרעין והציטופלזמה של תאי HEp-2 מכילים את כל האנטיגנים האופייניים ל גוף האדם, המאפשר לזהות את כל הנוגדנים האנטי-גרעיניים העיקריים בבדיקה אחת. השיטה של ​​אימונופלואורסצנטי עקיף על קו התאים HEp2 מומלצת כסטנדרט הזהב לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים על ידי מומחים אירופאים (EASIgroup2010) ואמריקאים מובילים (ACRANATaskforce2008). בשל המגוון של אנטיגנים נוגדנים אנטי-גרעיניים, לא ניתן לטהר או לסנתז את כולם לשימוש בבדיקות חיסוניות של אנזימים לזיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים.

חיוביות ל-ANF על קו התאים HEp-2 נצפית בזאבת אדמנתית מערכתית (SLE), מחלות ראומטיות מערכתיות ומחלות אוטואימוניות רבות, מה שהופך אותה לבדיקה אוניברסלית בבדיקת חולים עם פתולוגיה אוטואימונית. תוצאה חיובית ANF ​​נצפתה ביותר מ-90% מהחולים עם מחלות מפוזרות רקמת חיבור, כגון זאבת אדמנתית מערכתית וצורות עוריות של מחלה זו, סקלרודרמה וזנייה, מחלת רקמת חיבור מעורבת, תסמונת סיוגרן. זיהוי של ANF יש חשיבות רבהבאבחון של נוער דלקת מפרקים שגרוניתו מחלות אוטואימוניותכָּבֵד. ניתן למצוא נציגים של משפחה זו של נוגדנים עצמיים במחלות אוטואימוניות רבות אחרות (תירואידיטיס, סוכרת), זיהומיות ( דלקת כבד ויראלית), דלקתי ו מחלות אונקולוגיות. השכיחות של ANF מגיעה ל-1-3% בקלינית אנשים בריאיםועולה מעט באנשים מעל גיל 65. אנשים עם טיטר ANF גבוה נמצאים בסיכון מוגבר לפתח מחלות אוטואימוניות.

אינדיקציות:

• זאבת אדמנתית מערכתית.
• זאבת עורית תת-חריפה וסוגים אחרים של זאבת עורית.
• מחלה מעורבתרקמת חיבור.
• תסמונת סיוגרן ומחלות נלוות.
• סקלרודרמה מפוזרת ומקומית, תסמונת CREST.
• מיופתיות דלקתיות (פולימיוזיטיס ודרמטומיוזיטיס).
• דלקת מפרקים כרונית לנוער.
• דלקת כבד אוטואימונית.
• שחמת מרה ראשונית וכולנגיטיס טרשתית.
• פולינוירופתיה ומיאליטיס.

הכנה


מומלץ לתרום דם בבוקר, בין השעות 8:00-12:00. הדם נלקח על קיבה ריקה או 4-6 שעות לאחר הארוחה האחרונה. מותר לשתות מים ללא גז וסוכר. ערב הבדיקה יש להימנע מעומס מזון.

פרשנות של תוצאות
יחידות מדידה: טיטר.

ערכי התייחסות:<1:160 (отрицательно).

התוצאה של קביעת ה-ANF היא הטיטר, שהוא הערך של הדילול הסופי של הסרום שבו נשארת פלואורסצנטיות משמעותית של הגרעין. ככל שהמכנה של השבר גבוה יותר, דילול הסרום גדול יותר, כך יש יותר נוגדנים בסרום של החולה. טיטר דילול סרום גבוה משקף זיקה וריכוז גבוהים של נוגדנים עצמיים.

זיהוי רמות גבוהות (1/640 ומעלה) מצביע על סבירות גבוהה למחלה ראומטית מערכתית או מחלת כבד אוטואימונית ומצריך בדיקה קלינית, מעבדתית ומכשירנית מדוקדקת. היעדר רמות גבוהות של גורמים אנטי-גרעיניים מפחית באופן משמעותי את הסבירות למחלות אוטואימוניות מערכתיות.

בטירים נמוכים (עד 1/160), ניתן להבחין בגורם אנטי-גרעיני ב-1-2% מהאנשים הבריאים וקרובי משפחה של חולים עם מחלות מערכתיות. שכיחות הטיטרים החיוביים באוכלוסייה עולה מעט עם הגיל. רמות נמוכות של נוגדנים אנטי-גרעיניים יכולים להופיע במחלות אוטואימוניות, זיהומיות ואונקולוגיות רבות. היעדר טיטר גבוה של נוגדנים אנטי-גרעיניים מפחית באופן משמעותי את הסבירות לתהליך ראומטי מערכתי וניתן להשתמש בו כדי לשלול ולא לאשר את האבחנה.

ישנן מספר מחלות שבהן מערכת ההגנה טועה בתאי הגוף שלו בתור זרים, ולאחר מכן היא מתחילה לתקוף אותם בטעות. רוב הפתולוגיות האוטואימוניות הן כרוניות ומהוות איום רציני על הבריאות. על מנת לזהות מחלות אלו בשלב המוקדם ביותר של התפתחותן, הרופאים רושמים ניתוח ANF. קיצור זה מייצג "גורם אנטי-גרעיני". חלק מהדיווחים מתייגים את המחקר כ-ANA. המשמעות היא "בדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים". ANF ​​הוא מדד משמעותי מבחינה קלינית המסייע לרופא ליצור את משטר הטיפול היעיל ביותר ולמנוע התפתחות של סיבוכים.

מהות השיטה

החומר הביולוגי למחקר הוא דם. כאשר כל מיקרואורגניזם פתוגני חודר לגוף, המערכת החיסונית מתחילה לייצר נוגדנים ספציפיים, שתפקידם להרוס אנטיגנים זרים. מהות השיטה היא איתור וקביעה כמותית של חומרים אלו ברקמת חיבור נוזלית.

הרופאים אומרים כי בדיקת הדם ANF היא בדיקת מעבדה בעלת רמה גבוהה של תוכן מידע. בעזרתו, ניתן לזהות כל פתולוגיות אוטואימוניות אפילו בשלב מוקדם של התפתחותן.

נוגדנים ספציפיים מתגלים לעתים קרובות גם אצל אנשים הסובלים מצורות חמורות של הפטיטיס, אונקולוגיה ומחלות זיהומיות מסוימות. ניתן לזהות חומרים אלו גם באנשים בריאים. מצב זה דורש גישה משולבת לזיהוי הגורם.

ניתוח ANF כולל לפעמים הערכת התוכן הכמותי של אימונוגלובולינים. נוכחותם עשויה להעיד על התפתחות קולגנוזיס ומחלות ראומטיות.

אינדיקציות

חשוב לדעת שבדיקת דם ANF היא מחקר שנקבע כדי לאשר או לשלול נוכחות של פתולוגיות אוטואימוניות, כמו גם להעריך את יעילות הטיפול.

רופא עשוי לחשוד במחלה על סמך התסמינים הבאים:

• מצב ממושך של חום ללא סיבות ברורות.
• תחושות כואבות במפרקים.
• דרגת עייפות מוגברת.
• כאבים בשרירים ובמפרקים.
• ביטויי עור ללא סיבות ברורות.
• פרקים תכופים של התכווצויות שרירים.
• טמפרטורת גוף מוגברת.
• הפחתת משקל הגוף.
• פרקים קבועים של בחילה.
• כְּאֵב רֹאשׁ.
• לקות שמיעה.
• שִׁלשׁוּל.

בנוסף, ניתוח ANF נקבע אם יש חשד למחלה ראומטית. המחקר מתבצע לאחר קבלת תוצאות אבחון מעבדה, שבהן האינדיקטורים של ESR, CEC וחלבון C-reactive מוגברים.

מה זה מראה

בדיקת דם ANF מאפשרת לך לזהות פתולוגיות בעלות אופי אוטואימוני. המחקר הוא אינפורמטיבי לגבי המחלות הבאות:

• זאבת אדמנתית מערכתית.
• דלקת אנצפלומיאליטיס חריפה.
• מחלת סיוגרן.
• דלקת מפרקים שגרונית.
• אלופציה אראטה.
• מחלת אדיסון.
• אנקילוזינג ספונדיליטיס.
• תסמונת אנטי-פוספוליפיד.
• אנמיה המוליטית אוטואימונית.
• פמפיגואיד שוורי.
• דלקת כבד אוטואימונית.
• מחלת צליאק.
• פתולוגיות אוטואימוניות של האוזן הפנימית.
• מחלות של צ'אגס.
• תסמונת צ'ורג-שטראוס.
• מחלת ריאות חסימתית כרונית.
• דרמטומיוזיטיס.
• מחלת קרוהן.
• סוכרת מסוג I.
• תסמונת Goodpasture.
• דלקת בלוטת התריס של השימוטו.
• מחלת גרייבס.
• תסמונת גיליין-באר.
• מחלות קוואסאקי.
• Hidradenitis suppurativa.
• נפרופתיה ראשונית.
• פורפורה טרומבוציטופנית אידיופטית.
• דלקת שלפוחית ​​השתן אינטרסטיציאלית.
• זאבת אריתמטית.
• תסמונת שארפ.
• סקלרודרמה בצורת טבעת.
• טרשת נפוצה.
• נרקולפסיה.
• נוירומיוטוניה.
• פמפיגוס וולגריס.
• סַפַּחַת.
• תופעת ריינו.
• דלקת כלי דם.
• גרנולומטוזיס של וגנר.

זוהי רשימה חלקית של מחלות. חשוב שהניתוח של ANF יראה התפתחות של פתולוגיות אוטואימוניות בשלב המוקדם ביותר של מהלכן. זה מאפשר לרופא להחליט על טקטיקות טיפול ולאחר מכן להעריך את יעילותו.

הכנה

איסוף החומר הביולוגי מתבצע בשעות הבוקר. יש צורך לתרום דם על בטן ריקה. את הארוחה האחרונה יש לקחת לפחות 4 שעות לפני. יחד עם זאת, שתיית מים מקובלת בכל זמן ובכל כמות. צריכת אלכוהול אסורה.

מנוחה מסומנת יום אחד לפני המחקר. מתח פיזי ופסיכו-רגשי מובילים לרוב לתוצאות שגויות. העישון אסור חצי שעה לפני תרומת דם.

יש צורך ליידע את הרופא לגבי התרופות שאתה נוטל בעת מתן מרשם לבדיקת ANF. זאת בשל העובדה שהרכיבים הפעילים של חלק מהתרופות מעוררים ייצור של נוגדנים ויכולים גם לגרום לזאבת הנגרמת על ידי תרופות. תוצאות שליליות כוזבות הן לרוב תוצאה של נטילת גלוקוקורטיקוסטרואידים.

אם נקבעו למטופל פרוצדורות פיזיות או בדיקות אינסטרומנטליות, יש לבצע אותן רק לאחר תרומת דם.

אוסף של חומר ביולוגי

זה מתבצע בבוקר. החומר הביולוגי הוא דם ורידי. האיסוף שלו מתבצע על פי האלגוריתם הסטנדרטי. ככלל, דם נלקח מוריד הממוקם על המרפק.

לאחר קבלת רקמת החיבור הנוזלית, מופק ממנה סרום. זה מה שצריך כדי לבצע את הניתוח.

סוגי מחקרים ותיאורם

נכון לעכשיו, ניתן לזהות נוגדנים בחומר ביולוגי במספר דרכים:

1. שימוש במיקרוסקופ אימונופלואורסצנטי עקיף. אם קיימים חומרים ספציפיים בדם, הם יתחילו להיקשר לאנטיגנים גרעיניים ספציפיים. מעבדות משתמשות באלמנטים שיכולים להאיר בספקטרום נפרד. לאחר מכן, החומר הביולוגי נבדק בקפידה תחת מיקרוסקופ. ניתן לחשוד במחלה לפי סוג הזוהר. שיטה זו מוכרת כאינפורמטיבית ביותר בקביעת הערך של נוגדנים אנטי-גרעיניים. סוג אחד של טכניקה הוא מחקר באמצעות תאי HEp. ניתוח של ANF במקרה זה כולל נטילת חומר ביולוגי מהגרון. התהליך אינו קשור לתחושות כואבות או לא נוחות אחרות. חשוב לדעת כי בדיקת הדם ANF HER-2 היא כיום הבדיקה המדויקת ביותר. תאי אפיתל מהגרון מודגרים בסרום, ולאחר מכן הם משולבים גם עם חומרים פלורסנטים.
2. בעזרתו, המהות היא שכאשר מתרחשת האינטראקציה של נוגדנים ואנטיגנים, צבע התמיסה משתנה. נוכחות של גוון כזה או אחר מאפשרת לחשוד בנוכחות של פתולוגיה מסוימת.

יש לפענח את ניתוח ה-ANF על ידי הרופא המטפל. אם יש תוצאות חיוביות של הבדיקה, נקבעו בדיקות נוספות. האבחנה הסופית אינה נעשית על סמך מסקנה של ניתוח אחד.

ערכים תקינים

התוצאה הטובה ביותר היא כזו שבה נעדרים נוגדנים אנטי-גרעיניים. עם זאת, כדאי לזכור שניתן למצוא אותם גם אצל אנשים בריאים לחלוטין. במקרה זה, יש לציין מחקר חוזר.

התקן לניתוח ANF הוא טיטר לא יותר מ-1:160. יתר על כן, אינדיקטור זה רלוונטי הן למבוגרים והן לילדים.

בעת פענוח בדיקת הדם ANF, חשוב לקחת בחשבון את המידע הבא:

• טיטר נמוך לא מבטיח שאין פתולוגיה אוטואימונית. על פי הסטטיסטיקה, ל-5% מהמטופלים יש תוצאות בדיקה שליליות.
• אם לאדם יש את כל הסימפטומים של מחלה אוטואימונית, והניתוח מצביע על ההפך, הרופא אינו שולל את נוכחות המחלה. במצבים כאלה, מבוצעת בנוסף בדיקת אנזים חיסונית.

ניתוח ANF המבוצע באמצעות תאי HEp-2 נחשב נורמלי אם הטיטר אינו גבוה מ-1:160. תוצאה של יותר מ-1:640 מצביעה על החמרה של פתולוגיות ראומטיות. במהלך תקופת ההפוגה של המחלה, הטיטר יורד ל-1:320. במקרה זה, רק רופא יוכל לזהות את העובדה מה מצביע אינדיקטור נמוך כל כך, בהתבסס על נתוני האנמנזה והמאפיינים האישיים של בריאות המטופל.

ANF ​​עלה

על ידי קשירה לאנטיגנים, הם יוצרים קומפלקס חיסוני. האחרון, בתורו, הוא גורם טריגר להתפתחות התהליך הדלקתי בדפנות כלי הדם. כתוצאה מכך, אדם מפתח את הסימפטומים המדאיגים הראשונים של מחלות מערכתיות. הניתוח מראה טיטר גבוה.

במקרה זה, ניתן לזהות פתולוגיה על ידי קביעת סוג הזוהר. פרשנות התוצאות:

• הוֹמוֹגֵנִי. זוהר כזה עשוי להצביע על נוכחות של זאבת אדמנתית מערכתית, דלקת כבד כרונית וסקלרודרמה.
• שׁוּלִי. תמיד מדברים על פיתוח
• גַרגִירִי. מחלות אפשריות: תסמונת סיוגרן, זאבת אדמנתית מערכתית, דלקת מפרקים שגרונית, פתולוגיה של רקמת חיבור מעורבת.
• גרעיני. סוג זה של זוהר אופייני לזאבת אדמנתית מערכתית, פולימיוזיטיס, תסמונת סיוגרן וסקלרודרמה.
• צנטרומרי. פתולוגיות אפשריות: הסתיידות עור, תפקוד לקוי של הוושט, תסמונת Raynaud, telangiectasia, sclerodactyly.
• ציטופלזמה. זוהר כזה מעיד על מחלות כבד אוטואימוניות או פולימיוזיטיס.

ANF ​​שודרג לאחור

הפחתת רמת הנוגדנים האנטי-גרעיניים חשובה מבחינה קלינית אך ורק בחיזוי ובניטור מחלות מערכתיות קיימות ומזוהות בעבר.

אינדיקטור ANF תלוי ישירות בעוצמת התהליך הפתולוגי. בהקשר זה, הירידה שלו היא סימן חיובי, המעיד על כך שהטיפול הצליח והמחלה נכנסה לשלב ההפוגה.

יַחַס

כל פתולוגיה אוטואימונית דורשת גישה טיפולית ספציפית. מטרת בדיקת דם ל-ANF היא לזהות נוגדנים ברקמת חיבור נוזלית ולהעריך את אופי האינטראקציה שלהם עם אנטיגנים ספציפיים. בהתבסס על תוצאות האבחון, הרופא יכול לבצע אבחנה מקדימה. יש צורך במחקר נוסף כדי לאשר זאת. ורק לאחר מכן הרופא מכין משטר טיפול. בחירת התרופות תלויה ישירות באיזו פתולוגיה מזוהה באדם.

מחיר

ניתן לבצע בדיקת ANF במעבדה עצמאית, במרפאה פרטית או במוסד רפואי ציבורי. חשוב לדעת שלא כל מרפאות התקציב מספקות שירות כזה. יש לברר עם דלפק הקבלה לגבי זמינותו.

הלימודים משולמים אפילו במוסדות רפואיים ציבוריים. עלות הניתוח תלויה ישירות במדיניות התמחור של המרפאה, המורכבת מגורמים רבים. המחיר המינימלי הוא 1000 רובל, המקסימום אינו עולה על 1700 רובל. בנוסף, יש לשלם בנוסף עבור דגימת דם. העלות של שירות זה, ככלל, אינה עולה על 200 רובל.

סוף כל סוף

הקיצור ANF מייצג גורם אנטי-גרעיני. בדרך כלל, זה לא אמור להיות קיים בדם של אדם בריא או שהריכוז שלו צריך להיות פחות מ-1:160. ניתוח ל-ANF נקבע על מנת לזהות פתולוגיות אוטואימוניות בחולה בשלב המוקדם ביותר של התפתחותן.

מהות השיטה: כאשר חומרים מעוררים חודרים לגוף, מערכת ההגנה מתחילה לייצר נוגדנים. תפקידם לתקוף אנטיגנים ולהרוס אותם. כדי לזהות תגובה זו, דם ורידי נאסף מהמטופל, ולאחר מכן הפרדת הסרום. אנטיגנים ספציפיים מתווספים לאחרונים ותגובות נוספות מוערכות.

נוגדנים אנטי-גרעיניים- השם הכללי של קבוצת נוגדנים המכוונים נגד מרכיבים שונים של התא, המראה שלהם קשור למחלות אוטואימוניות, בעיקר.

מילים נרדפות: נוגדנים אנטי-גרעיניים, גורם אנטי-גרעיני, גורם אנטי-גרעיני, נוגדנים לאנטיגנים גרעיניים (גרעיניים) שניתנים לחילוץ, נוגדנים אנטי-גרעיניים, מצע Hep-2, ANA-Hep2, זיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים פלואורסצנטי, ANA, FANA

נוגדנים אנטי-גרעיניים הם

קומפלקס של נוגדנים (יותר מ-200), בעיקר אימונוגלובולינים G (לעתים קרובות יותר IgM ו-IgA), מופיעים כתוצאה מהפרה של מנגנון האוטו-סובלנות במחלות אוטואימוניות וראומטיות.

במקרים מסוימים, התגובה החיסונית מכוונת לא נגד זרים, אלא נגד הרקמות של האדם עצמו. במקרה הזה הם מדברים על מחלת כשל חיסוני. ונוגדנים שמיוצרים לתאים שלהם או למרכיביהם נקראים אוטואימונית.

לרוב האנשים יש בדם כמות קטנה(!) של נוגדנים עצמיים, שאינם ביטוי למחלה.

רק במקרה של התמוטטות רצינית במערכת החיסון, רמת הנוגדנים העצמיים הופכת למוגברת ומספיקה לאבחנה.

ANA יכול להיות חיובי עוד לפני הופעת התסמינים הראשונים של המחלה. לכ-95% מהחולים עם זאבת אדמנתית מערכתית יש בדם נוגדנים אנטי-גרעיניים. נוכחותם של תסמיני לופוס מאשרת את האבחנה.

מנגנון חינוך

• חשיפה לקרניים אולטרה סגולות על העור מובילה להפעלה של מוות תאי מתוכנת (אפופטוזיס), שהיא תגובה נורמלית של הגוף, אך במקרה של מחלות מערכתיות הן נודדות בו זמנית בהמוניהן
• רכיבי תאים שבעבר לא היו נגישים ובלתי נראים למערכת החיסון, כמו נוקלאולי, היסטונים, קרום גרעיני וכו', הם "עירומים", ומקרופאגים, במקום פשוט "להיפטר" מהחומר הזה, משדרים עליו אות לאורך שרשרת התגובה החיסונית
• לימפוציטים מסוג B, בתגובה לאות ממקרופאג, מתחילים לייצר נוגדנים אנטי-גרעיניים, הנקשרים לאנטיגן המתאים ויוצרים קומפלקסים חיסוניים (אנטיגן גרעיני + נוגדן IgG, IgM, IgA)
• קומפלקסים חיסוניים מתיישבים על קרום הבסיס של איברים ורקמות שונות, במיוחד כלי דם, ומפעילים את מערכת המשלים - תגובה דלקתית מקומית
• התוצאה היא נזק וחוסר תפקוד של האיבר

נוגדנים אנטי-גרעיניים מכוונים נגד מבנים שונים של תא תקין.

סוגי נוגדנים אנטי-גרעיניים:

• anti-Ro (SS-A) - נוגדנים לחלבונים הקשורים ל-RNA Y1-Y5 ב-spliceosomes
• anti-Jo1 - נוגדנים לאנטיגן הציטופלזמי Jo-1
• אנטי-Sm
• anti-La (SS-B) - נוגדנים לחלבון הקשורים ל-RNA פולימראז-3
• anti-Sci 70 - נוגדנים לטופואיזומראז גרעיני
• anti-U1 RNP - נוגדנים ל-U1 ribonucleoprotein
• נוגדנים אנטיצנטרומרים
• נוגדנים אנטי-היסטונים

אינדיקציות

• אבחון של זאבת אדמנתית מערכתית, תסמונת שרגן

זאבת אדמנתית מערכתית

זאבת אדמנתית מערכתית- מחלה אוטואימונית של רקמת חיבור וכלי דם. זוהי המחלה הקשה ביותר של רקמת החיבור, הגורמת לכאבים עזים במפרקים, נזק לעור ("פרפר"), ממברנות סרואיות, לב, כליות, מערכת העצבים, הריאות והפרעות טרופיות.

תסמינים

• דלקת פרקים - דלקת במפרק, המתבטאת בכאב, נפיחות, פגיעה בתנועתיות, אדמומיות בעור ועלייה בטמפרטורה מעליו.
• דלקת של הציפוי החיצוני של הלב או הצדר (או) ממקור לא ידוע
• שינויים בתוצאות (, - חלבון או תאי דם אדומים בשתן)
• - הרס ככל שהרמה עולה
• תרומבוציטופניה - מספר מופחת ב
• - מספר מופחת ב
• תסמיני עור - פריחה, עיבוי העור, במיוחד לאחר פעילות
• תסמונת Raynaud - שינוי צבע תקופתי של הבהונות והידיים (כחול ואדמומיות) עם רגישות וכאב לקויים
• תסמינים נוירולוגיים ופסיכיאטרים לא טיפוסיים
• עלייה בטמפרטורת הגוף, עייפות, ירידה במשקל,

שיטות

קיימות שתי שיטות לקביעת נוגדנים אנטי-גרעיניים בדם.

מיקרוסקופ אימונופלואורסצנטי עקיף(FANA - בדיקת נוגדנים fluorescent antinuclear) על תכשיר של תאי Hep-2 (שורת תאים המתקבלת מאדנוקרצינומה של הגרון) - נוגדנים אנטי-גרעיניים (אם קיימים) נקשרים לאנטיגנים של תאי Hep-2, מוסיפים תוויות זוהרות מיוחדות הנצמדות למכלול שנוצר ומתחת עוצמת וסוג הזוהר נבדקים באמצעות מיקרוסקופ. השיטה הטובה ביותר לחקר נוגדנים אנטי-גרעיניים. שם אחר - .

תוצאת המחקר כתובה בצורה של טיטר - דילול הדם המקסימלי שבו נראה הזוהר, מתואר גם סוג הקרינה (במקרה של תוצאה חיובית). ככל שיש יותר נוגדנים, הטיטר גבוה יותר. טיטרים נמוכים נחשבים לשליליים, בעוד שטירים גבוהים מצביעים על ריכוז מוגבר של נוגדנים אנטי-גרעיניים.

סוגי הקרינה בהערכת ANA:

• הומוגנית (דיפוזית, הומוגנית) - עבור זאבת אדמנתית מערכתית, מחלות רקמת חיבור מעורבות (MCTD)
• גרגירי (גרגירי) - עבור זאבת אדמנתית מערכתית, תסמונת סיוגרן, סקלרודרמה, דלקת מפרקים שגרונית ו-MCTD - הכי לא ספציפי
• nucleolar (nucleolar) - עבור סקלרודרמה ופולימיוזיטיס
• centromeric - לסקלרודרמה ולתסמונת CREST
• ציטופלזמה - דרמטומיוזיטיס, פולימיוזיטיס, מחלות כבד אוטואימוניות, שחמת מרה ראשונית

דוגמה לתוצאה חיובית של בדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים: " דילול/טיטר חיובי 1:320, תמונה הומוגנית“.

אלגוריתם של פעולות הרופא לאחר בדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים בשיטת FANA

• תוצאת בדיקה שלילית לנוגדנים אנטי-גרעיניים + תסמינים - ביצוע בדיקות: אנטי-רו ואנטי-Jo1
• תוצאת בדיקה חיובית לנוגדנים אנטי-גרעיניים + נוכחות/היעדר תסמינים - ערוך בדיקות לאנטי-DNA, אנטי-Sm, אנטי-רו, אנטי-היסטון ואנטי-צנטרומרים, אנטי-Sci-70, אנטי-U1 RNP, אנטי-Jo1 - תלוי ב הביטויים מחלות

בדיקת אנזימים חיסונית

בדיקת אנזים אימונו (ELISA)) - נוגדנים הנמצאים בדם נקשרים לאנטיגן המתאים, מה שמוביל לשינוי בצבע התמיסה.

• פחות מ-1.0 U - תוצאה שלילית (רגיל)
• 1.1-2.9 U - חיובי חלש (דורש חזרה)
• 3.0-5.9 U - חיובי
• יותר מ-6.0 - חיובי חד

תוצאה חיובית של בדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים- זו לא אבחנה, אלא סימן קריאה לגבי הצורך במחקר נוסף. דורש בדיקה תקופתית, יסודית יותר כדי לזהות מחלה אפשרית מוקדם ככל האפשר.

תוצאת בדיקה שלילית לנוגדנים אנטי-גרעיניים מצביעה על היעדרם בדם, אך אינה שוללת אבחנה של מחלה אוטואימונית.

נוֹרמָה

בדרך כלל, אין נוגדנים אנטי-גרעיניים בדם.

מחקר נוסף

• ניתוח שתן כללי
• בדיקות ראומטיות - קצב שקיעת אריתרוציטים (ESR),
• קומפלקסים חיסוניים במחזור
• משלים את רכיב C3
• משלים את רכיב C4

מה משפיע על התוצאה?

• תרופות - פרוקאינאמיד, פניטואין, פניצילין, הידראלזין
• זיהומים חריפים בדרכי הנשימה והצטננות, כל מחלה זיהומית חריפה או כרונית

סיבות ל-ANA

1. מחלות רקמת חיבור מערכתיות

• - 95-100%, זיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים קובע את האבחנה
• (5-25%)
• (100%)
• (30-50%)
• דלקת מפרקים שגרונית נעורים (20-50%)
• (40-70%)
• (30-80%)
• (תסמונת שארפ) 100%
• דלקת כבד אוטואימונית (

נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA, ANA, anti-nuclear antibodies, antinuclear factor-ANF) - שיטת NIF על קו התא HEp-2 עם קביעת סוג הזוהר.- אינדיקטור למחלות רקמת חיבור אוטואימונית. ANA היא קבוצה של נוגדנים עצמיים לחלבונים ורכיבים אחרים (כולל DNA) המצויים בגרעיני התא. אינדיקציות עיקריות לשימוש: שלילת האבחנה - זאבת אדמנתית מערכתית (ההערכה היא ש-ANA מופיעה ב-90% מהמקרים של SLE, במילים אחרות, תוצאה שלילית עם הסתברות של כ-90% אינה כוללת את האבחנה של SLE), דיפרנציאלית. אבחון של קולגנוזות מערכתיות (זאבת אדמנתית מערכתית, סקלרודרמה, דלקת קרום העורקים הנודולרית, דרמטומיוזיטיס), דלקת כבד פעילה כרונית.

עד כה תוארו יותר מ-200 זנים של ANA, המכוונים נגד חומצות גרעין, היסטונים, חלבוני ממברנה גרעינית, רכיבי ספליזוזום, ריבונוקלאורפרוטאינים, חלבונים גרעיניים וצנטרומרים. במקביל, הם פוגעים ברקמת חיבור, מה שתרם להכנסת קביעת הגורם האנטי-גרעיני כבדיקה למחלות רקמת חיבור מערכתיות. המונח "גורם אנטי-גרעיני" מתייחס לבדיקה לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים בשיטה של ​​אימונופלוארסצנציה עקיפה.

אחת השיטות לזיהוי גורם אנטי-גרעיני בדם (נוגדנים אנטי-גרעיניים) היא השיטה של ​​אימונופלוארסנציה עקיפה על ידי מריחת סרום חולה על תאי רקמה של קו התא האנושי הרציף HEp-2 (סרטן אפיתל אנושי של תאי הגרון של Hep-2 קו, המכיל אנטיגנים גרעיניים שונים), תוך שימוש בצמוד מסומן עם נוגדנים אנושיים. קווי תאים אנושיים אחרים יכולים לשמש גם כמצעים, אך בשל המורפולוגיה הטובה שלהם וקלות הטיפוח שלהם, Hep-2 הפך למצע מקובל עבור אימונופלואורסצנטי עקיף. שיטה לאיתור ANF פותחה על ידי Tan בשנת 1982, תוך שימוש בקו התא האפיתליואיד הרציף האנושי HEp-2 כמצע. שורת תאים זו, שמקורה באדנוקרצינומה של גרון אנושית, היא תא אפיתל קשקשי פוליפלואידי גדול שאינו קרטיניז, היוצר חד-שכבה על זכוכית. הסרום של המטופל מודגרת עם מצע הרקמה, ונוגדנים אנטי-גרעיניים מהנסיוב של המטופל (אם קיימים) נקשרים לאנטיגנים הגרעיניים המתאימים. אתרי קשירה של נוגדנים אוטומאטיים מזוהים באמצעות אנטי-סרום אנטי-אנושי המסומן עם פלואורססאין. תוצאות התגובה מוערכות במיקרוסקופיה באמצעות מיקרוסקופ זוהר והערכה ויזואלית של אופי הזוהר של נוגדנים קשורים. בין היתרונות של HEp-2 (בהשוואה לחיתוך קריו של רקמות בעלי חיים) ניתן לציין את התדירות הגבוהה של חלוקת תאים, המאפשרת לזהות נוגדנים לאנטיגנים המתבטאים רק במהלך חלוקת התא, ואת היעדר מטריצה ​​תאית של רקמה, מה שמקשה לדמיין זוהר ספציפי בהשוואה לקטעים היסטולוגיים. במחלות מסוימות, כגון SLE, סקלרודרמה מערכתית (טרשת מערכתית) וזיהומים מסוימים, מערכת החיסון של החולה תופסת את הגרעינים (חלבונים גרעיניים) של תאי הרקמה שלו כזרים ומייצרת להם נוגדנים (נוגדנים אנטי-גרעיניים - AHA). במקביל, הם פוגעים ברקמת חיבור, מה שתרם להכנסת קביעת הגורם האנטי-גרעיני כבדיקה למחלות רקמת חיבור מערכתיות.

כאשר מפרשים נתונים, יש לקחת בחשבון שספקטרום AHA כולל קבוצה גדולה של נוגדנים עצמיים ל-DNA, נוקלאופרוטאין, היסטונים, ריבונוקלאופרוטאין גרעיני ורכיבים גרעיניים אחרים. לפיכך, מטרת הבדיקה היא לאתר נוגדנים שונים לרכיבים גרעיניים וציטופלזמיים שהתגלו לראשונה ב-SLE. בהמשך הורחבו קריטריוני האבחון של הבדיקה עקב גילוי נוגדנים אלו במחלות רקמות חיבור אחרות.

בדיקות סקר לקביעת סך ANA משתמשות בדרך כלל בקבוצה של האנטיגנים הבאים, שהם הסמנים העיקריים של מחלות רקמת חיבור אוטואימוניות: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP/Sm, J01, צנטרומר B.
האנטיגנים העיקריים המשמשים בערכות מודרניות לאיתור נוגדנים גרעיניים ממחלקת IgG מיוצגים על ידי הסט הבא:

1. SS-A (Ro) - ריבונוקלאופרוטאין גרעיני (פוליפפטידים). נוגדנים אליהם נמצאים לעתים קרובות יותר בסקלרודרמה מערכתית (60% מהמקרים), בתסמונת סיוגרן (עד 70% מהמקרים) וב-SLE (עד 30% מהמקרים). מאמינים שאם מתגלים נוגדנים אלו בדם של נשים הרות, זהו אינדיקטור לסיכון לעלייה בהתרחשות של תסמונת דמוית זאבת ביילוד בילד שזה עתה נולד (תסמונת זאבת ילודים). נוגדנים אימהיים אלו חוצים את השליה וגורמים לנזק לעובר, מה שמוביל לאנמיה המוליטית וטרומבוציטופניה. השלכות חמורות כוללות פגיעה במערכת ההולכה של הלב של הילד (עד גירוי לב קבוע). צוין כי נשים שהייתה להן טיטר משמעותי של נוגדנים אלו במהלך ההריון, ללא סימנים קליניים ברורים, מפתחות לאחר מכן מחלה אוטואימונית כלשהי, כולל SLE.
2. SS-B (La) - חלבונים גרעיניים. נוגדנים אליהם מתגלים בעד 60% מהמקרים עם תסמונת סיוגרן וב-15% מהמקרים עם SLE.
3. Scl-70 הוא חלבון אנזים המעורב בחילוף החומרים של חומצות גרעין (topoisomerase-1). נוגדנים לחלבון זה הם הספציפיים ביותר לסקלרודרמה מערכתית (עד 70% מהמקרים).
4. DNA דו-גדילי הוא DNA מקורי. נוגדנים ל-DNA הם הספציפיים ביותר ב-SLE (עד 80% מהמקרים) והם כמעט בלתי ניתנים לזיהוי בדלקת מפרקים שגרונית וסקלרודרמה.
5. RNP/Sm - קומפלקס האנטיגן RNP/Sm מורכב מ-U1-ribonucleoproteins: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; וגם מ-Sm-polypeptides: SmA | , SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. נוגדנים הנוצרים לאנטיגנים אלו הם הספציפיים ביותר למחלות רקמת חיבור מעורבות - כלומר. בנוכחות תסמינים של סקלרודרמה, דלקת מפרקים שגרונית, SLE, polymyositis (כ-95% מהמקרים) ובמידה פחותה של SLE (עד 30% מהמקרים).
6. Jo-1 הוא אנזים - aminoacyl transport RNA synthetase. נוגדנים עצמיים לחלבון זה משמעותיים מבחינה אבחנתית עבור מיוסיטיס (פולימיוזיטיס/דרמטומיוזיטיס).
7. CENP-B (Centromere) - לאיתור נוגדנים אנטי-צנטרומריים (Anti-Centromer B), לצורך אבחון תסמונת CREST (תסמונת זו היא שילוב של הסתיידות עור, תסמונת Raynaud, הפרעות תנועתיות של הוושט, סקלרודקטליה, טלנגיקטזיה). תסמונת CREST מתייחסת לגרסה של טרשת מערכתית (טרשת מערכתית). נוגדנים אלו בחולים מצביעים על מהלך חיובי של סקלרודרמה מערכתית ומצביעים על פגיעה קלה באיברים פנימיים.
8. תאי Hep-2 הם תאי קרצינומה של אפיתל גרון אנושיים של שושלת Hep-2 המכילים אנטיגנים גרעיניים רבים ושונים, כולל אנטיגן SS-A (Ro) ואנטיגנים צנטרומרים. נוגדנים ל-Hep-2 נמצאים בחולים עם polymyositis ו-dermatomyositis בעד 90% מהמקרים.
9. מיטוכונדריה (PDC) - PDC - קומפלקס pyruvate dehydrogenase. קבוצה גדולה של נוגדנים אנטי-מיטוכונדריים הם נוגדנים עצמיים הנוצרים כנגד האנזימים של קומפלקס פירובאט דהידרוגנאז, הממוקמים במיטוכונדריה של תאים ומעורבים בדה-קרבוקסילציה חמצונית של פירובט.

ANAs נמצאים לעתים קרובות בשחמת מרה.

AHAs בדרך כלל אינם חודרים לתאים חיים ולכן אינם מזיקים. אבל לפעמים הם יוצרים קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים שגורמים לנזק לרקמות (כמו ב-SLE, נזק לכליות). בשל מעורבותם של איברים רבים בתהליך הפתולוגי, הערך האבחוני של קביעת ה-AHA קטן ותוצאות הניתוח מאשרות רק באופן חלקי את הנתונים הקליניים.

בנוסף למחלות ראומטיות, ANA נמצאות גם בהפטיטיס פעילה כרונית בעד 50% מהמקרים. התרחשות (טיטרים נמוכים) אפשרית במחלות דלקתיות, אונקולוגיה וזיהומים ויראליים.

• תדירות השוואתית של גילוי נוגדנים אנטי-גרעיניים.
  

  מחלה ומצב	תדירות זיהוי, %
  SLE	95-100
  דלקת כבד לופואידית (שם חדש - הפטיטיס אוטואימונית כרונית)	70 -80%
  תסמונת פלטי (Felty. 1924) - דלקת מפרקים שגרונית + טחול + נויטרופניה + לויקופניה + לימפדנופתיה.	95-100
  סקלרודרמה מערכתית	75-80
  תסמונת לופוס הנגרמת על ידי תרופות (הידראלזין, פרוקאינאמיד, איזוניאזיד)	בערך 50
  תסמונת סיוגרן (פגיעה אוטואימונית מערכתית ברקמת החיבור. מאופיינת במעורבות של בלוטות האקסוקריניות, בעיקר הרוק והדמעות, בתהליך הפתולוגי, ומהלך פרוגרסיבי כרוני).	40-75
  קרובי משפחה בריאים קלינית של חולה עם SLE	בערך 25
  דיסקואיד לופוס אריתמטוזוס	15-50
  דלקת מפרקים כרונית לנוער, דלקת מפרקים שגרונית	15-30
  פריארטריטיס נודוסה	15-25
  דרמטומיוזיטיס ופולימיוזיטיס	10-30
  שִׁגָרוֹן	בסביבות 5
  תסמונת ריינו	15-20

מידע כללי על המחקר

קביעת גורם אנטי-גרעיני (ANF) הוא "תקן הזהב" לאיתור נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA) ואבחון מחלות אוטואימוניות.

הפתוגנזה של מחלות רקמת חיבור מערכתיות (SCTD) קשורה קשר הדוק להפרעות במערכת החיסון ולייצור מוגבר של נוגדנים למבנים של התאים של האדם עצמו. נוגדנים עצמיים למרכיבי גרעין התא - נוגדנים אנטי-גרעיניים - מקיימים אינטראקציה עם חומצות גרעין וחלבונים גרעיניים, אנטיגנים ציטופלזמיים, המתבטאים בשינויים דלקתיים ברקמות ובאיברים, כאבים במפרקים ובשרירים, עייפות קשה, ירידה במשקל ושינויים בעור. ANAs נמצאים במחלות אוטואימוניות רבות, אך הם הנפוצים ביותר בזאבת אריתמטית מערכתית (SLE). ANAs מופיעים בלמעלה מ-90% מהחולים עם מחלות רקמת חיבור מערכתיות; כיום תוארו כ-200 זנים, המאוחדים בשם אחד - גורם אנטי-גרעיני.

בעת קביעת ANF על ידי הקרנה עקיפה, נעשה לרוב שימוש בקו הרציף של תאי אפיתל של אדנוקרצינומה גרון אנושית HEp-2. תאי HEp-2 הם מצע נוח מאוד למחקר מעבדתי, מכיוון שיש להם גרעינים גדולים וגדלים בשכבה אחת על שקופיות זכוכית. ANAs מזוהים על ידי קישור לאנטיגנים תוך תאיים של תאי HEp-2.

במהלך המחקר, תאי אפיתל HEp-2 גדלים על שקופיות זכוכית, מקובעים ומודגרים בסרום מטופל מדולל. לאחר הסרת הסרום העודף, התאים מודגרים בנוגדנים המסומנים בפלואורסצין, ואז נשטפים שוב ונבדקים באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי. במקרה זה, טיטר הנוגדנים וסוג הזוהר נקבעים. טיטר גדול מ-1:160 נחשב למשמעותי מבחינה אבחנתית. במהלך החמרה של מחלות ראומטיות הוא עולה על 1:640, ובמהלך הפוגה הוא יורד ל-1:160-1:320. ככל שיש יותר נוגדנים, הטיטר גבוה יותר. בהתבסס על סוג הזוהר, ניתן לזהות את המטרות של נוגדנים אנטי-גרעיניים, שהוא בעל חשיבות קלינית רבה וקובע את הטקטיקה לבדיקה נוספת של המטופל. העיקריים שבהם הם סוגים היקפיים, גרגיריים (קטנים/גדולים), גרעיניים, צנטרומריים וציטופלזמיים של צביעה גרעינית. לכל סוג של זוהר מאפיינים מאוד אופייניים המאפשרים להבחין בין אפשרות אחת לאחרת.

צביעה הומוגנית (דיפוזית) קשורה בנוכחות נוגדנים ל-DNA דו-גדילי, היסטונים ואופייני ל-SLE ולזאבת הנגרמת על ידי תרופות.

הארה היקפית נגרמת מהתפלגות היקפית של כרומטין בגרעין, קשורה לנוגדנים ל-DNA וספציפית ל-SLE. חשוב להבדיל בין סוג זה של זוהר לבין צביעה של הממברנה הגרעינית, המופיעה במחלות כבד אוטואימוניות.

צביעה גרגירית (מנומרת, רשתית) היא השכיחה ביותר והפחות ספציפית; היא מזוהה במחלות אוטואימוניות רבות. האוטואנטיגנים במקרה זה הם קומפלקסים של נוקלאופרוטאין בגרעין (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B אנטיגנים ו-PCNA).

טיטר גבוה מאוד של ANF עם סוג גס-גרגירי של זוהר מצביע לרוב על מחלת רקמת חיבור מעורבת.

צביעה גרעינית (גרעינית) נגרמת על ידי היווצרות נוגדנים למרכיבי הגרעין (RNA polymerase-1, NOR, U 3 RNP, PM/Scl), המתגלה בסקלרודרמה, מחלת סיוגרן. ANA לעיתים עולה במחלות אנדוקריניות (סוכרת מסוג 1, דלקת בלוטת התריס, תירוטוקסיקוזיס, תסמונת פוליאנדוקרינית), מחלות עור (פסוריאזיס, פמפיגוס), במהלך ההריון, לאחר השתלת איברים ורקמות, בחולים המודיאליזה.

זוהר צנטרומר מופיע בנוכחות נוגדנים לצנטרומרים של כרומוזומים ואופיינית לצורה של סקלרודרמה - תסמונת CREST.

הסוג הציטופלזמי של זוהר קשור לנוגדנים לסינטטאז tRNA, בפרט ל-Jo-1, האופייני לדרמטומיוזיטיס ולפולימיוזיטיס. סוג זה של צביעה נקבע גם בנוכחות נוגדנים למרכיבים אחרים של הציטופלזמה בדלקת כבד אוטואימונית ושחמת מרה ראשונית.

זיהוי סימולטני של סוגים שונים של זוהר מצביע על נוכחות של סוגים שונים של נוגדנים.

אצל אנשים בריאים, זוהר עדין גרגירים עשוי להתגלות בטיטר נמוך, בינוני או גבוה של ANA, אך בדרך כלל אין לזהות סוגים גס-גרגרים או הומוגניים של זוהר.

בהתאם לתוצאות הערכת סוג הזוהר, מפותחות טקטיקות טיפול נוספות עבור המטופל ונקבעות מחקרים נוספים כדי להבהיר את הספקטרום של ANA.

למה משמש המחקר?

• לאבחון מחלות רקמת חיבור מערכתיות.
• לאבחנה מבדלת של מחלות ראומטיות.
• להעריך את יעילות הטיפול במחלות אוטואימוניות.
• לפקח על מהלך מחלות רקמת חיבור מערכתיות.

מתי מתוכנן הלימודים?

• לתסמינים של מחלה אוטואימונית (חום ממושך, כאבי פרקים, עייפות, ירידה במשקל, שינויים בעור).
• בעת זיהוי שינויים האופייניים למחלות רקמת חיבור מערכתיות (עלייה ב-ESR, רמת חלבון C-reactive, מתחמי חיסון במחזור).