Godine 2013. na rolanju je zadobila prijelom fibule. Ne znajući što da radim, otišao sam u BSPM gdje su mi stavili gips. Tjedan dana kasnije shvatio sam da nešto nije u redu, a prijatelji su mi savjetovali da kontaktiram Olega Arkadijeviča Juhimčuka.
Nekoliko dana kasnije došao sam na konzultacije, gdje sam saznao da kosti ne zarastaju kako treba i da moram na operaciju ugradnje pločice.
Usluga i odnos prema pacijentu Olega Arkadijeviča i njegovog tima je na vrhunskoj razini! Sve je brzo, jasno, profesionalno i duhovito. Nakon operacije - potpuna "uslužna" podrška. Gležanj se oporavio, funkcionira kao prije, nema bolova niti tragova prijeloma, osim tankog ožiljka. 2018. sam imao ozljedu koljena i bez sumnje sam se ponovno obratio Olegu Arkadijeviču. Nepotrebno je reći da su ga opet popravili, pomogli i razuvjerili me! Sve u svemu, odličan liječnik i prekrasna osoba! Iskreno ga preporučam!

Irina Životko

Prije godinu dana bio sam teško ozlijeđen

Prije godinu dana zadobio sam ozbiljnu ozljedu skočnog zgloba, kompleksan prijelom 2 kosti s pomakom, puknuće ligamenata i djelomično oštećenje mišića.
Živim u Europi. Kontaktirao sam mnoge klinike... Nakon brojnih konzultacija i dijagnostika, nažalost, nisam dobio jednoznačan zaključak liječnika. Zaključak koji mi je izrečen bio je: "Malo je vjerojatno da ćeš hodati kao prije."
Na preporuku prijatelja obratio sam se za stručnu pomoć ukrajinskoj klinici, jednom od najboljih kirurga/traumatologa, točnije Olegu Arkadijeviču Juhimčuku.
Proizlaziti:
1. Jasan i brz stručni pregled i donio sam odluku o operaciji.
2. Operacija je dobro prošla. Ugrađeni su implantati.
3. Dobio sam konzultacije o postoperativnoj rehabilitaciji na visokoj razini.
4. POTPUNO oporavljen bez ikakve naznake ozljede!
BRAVO ZA NAŠE LIJEČNIKE!!!

Doktora poznajemo dugo, liječili smo ga mnogo puta

Doktoricu poznajemo dugo, više puta je liječila sve članove obitelji, zvanu Mama nakon nesreće 2006. godine. S prijelomima većine zapešća (rame, rame, rebra), podvrgnuta je operaciji u daljini, radi dugo vremena, čuva onukiv, raste grad na dači. Zdravlje Vama, doktore, i cijeloj Vašoj domovini! Unaprijed znamo da čim ga poližemo treba ojačati slamu!

Kvitočka

Već više od 10 stijena ukupno

Već više od 10 godina cijela moja domovina umire za Olegom Arkadijovičem. Od sada će biti potrebna kvalificirana i učinkovita pomoć. Dana 21. 2017. Rock je slomila nogu, slomila dvije potkoljenice, a ostali zglobovi su na mjestu prijeloma eviscerirani u "ružičastom uzorku". Odmah smo otišli kod Olega Arkadijoviča, napravljena je važna operacija, postavljene su dvije pločice... tek tako, već sam hodao bez policije, a onda su oni krenuli kao prije prijeloma. Ovom dragom doktoru.

Antonina

Više od godinu dana patio sam od upale Ahilove žile,

Povremeno koristim usluge Olega Arkadijeviča i preporučujem ga prijateljima.
Bolovao sam od upale Ahilova više od godinu dana, već sam ujutro hodao kao Charlie Chaplin 🙁
Oleg Arkadijevič spustio me na pod u roku od mjesec dana. Kolosalno iskustvo, Zlatne ruke, Bistra glava i jednostavno dobra osoba. Hvala vam puno!!!

p.s. Za one koji se aktivno bave sportom i zbog toga se ozlijede, toplo preporučujem Olega Arkadijeviča.

Aleksandar

Oleg Arkadijevič, hvala vam puno!!!

Oleg Arkadijevič, hvala vam puno!!! 2015. godine moj otac je operiran, i sam je liječnik, 99% vremena na poslu provodi na nogama, a zahvaljujući vama nastavlja u istom duhu, ali sada s protetikom. zglob kuka. I sam sam kirurg i sjećam se kako je sve prošlo, mogu reći da je i predoperativno i postoperativno razdoblje prošlo vrlo “glatko”. Nakon 1,5 mjeseca tata je već bio u operacijskoj sali (opstetričar-ginekolog), iako se sjećam da ste to rekli rano :)), ali nije mogao izdržati. Već sam ove godine po treći put osvojio Hoverlu) Sjećamo te se svakog 14. veljače - na dan operacije. HVALA VAM!!!

Već 30 godina sugeriralo se da bi angiogeneza, proces stvaranja novih krvnih žila, mogla postati važna meta terapije protiv raka. I tek nedavno je ova prilika realizirana. Klinički podaci pokazali su da lijek za humanizirano monoklonsko protutijelo bevacizumab, koji ciljano djeluje na ključnu proangiogenu molekulu, faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF), može produžiti život pacijenata s metastatskim kolorektalnim karcinomom kada se primjenjuje kao prva linija terapije u kombinaciji s kemoterapijskim lijekovima. Ovdje raspravljamo o funkcijama i značaju VECF-a kako bismo pokazali da je VEGF razumna meta za terapiju protiv raka.

Što je VEGF?

VEGF je jedan od članova obitelji strukturno srodnih proteina koji su ligandi za obitelj VEGF receptora. VEGF utječe na razvoj novih krvnih žila (angiogeneza) i preživljavanje nezrelih krvnih žila (vaskularna potpora) tako što se veže i aktivira dva blisko povezana membranska receptora tirozin kinaze (VEGF receptor-1 i VEGF receptor-2). Ove receptore eksprimiraju endotelne stanice u stijenci krvnih žila (Tablica 1). Vezanje VEGF na ove receptore pokreće signalnu kaskadu koja u konačnici stimulira rast, preživljavanje i proliferaciju vaskularnih endotelnih stanica. Endotelne stanice su uključene u tako različite procese kao što su vazokonstrikcija i vazodilatacija, prezentacija antigena, a također služe kao vrlo važni elementi svih krvnih žila - i kapilara i vena ili arterija. Stoga, stimulirajući endotelne stanice, VEGF igra središnju ulogu u procesu angiogeneze.

Zašto je važno raditi vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF human)?

VEGF je iznimno važan za formiranje adekvatno funkcionirajućeg krvožilnog sustava tijekom embriogeneze iu ranom postnatalnom razdoblju, no u odraslih je njegova fiziološka aktivnost ograničena. Pokusi na miševima pokazali su sljedeće:

• Ciljano oštećenje jednog ili dva alela VEGF gena dovodi do smrti embrija
• Inaktivacija VEGF-a tijekom ranog postnatalnog razvoja također je fatalna
• Oštećenje VEGF-a kod odraslih miševa nije popraćeno nikakvim očitim abnormalnostima jer je njegova uloga ograničena na razvoj folikula, zacjeljivanje rana i reproduktivni ciklus kod ženki.

Ograničena važnost angiogeneze kod odraslih znači da inhibicija aktivnosti VEGF predstavlja izvediv terapeutski cilj.

Faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF; Engleski Faktor rasta vaskularnog endotela) je signalni protein koji proizvode stanice za stimulaciju vaskulogeneze (formiranje embrionalnog vaskularnog sustava) i angiogeneze (rast novih žila u postojećem krvožilnom sustavu). Trenutno ih je poznato nekoliko razni faktori ove obitelji (koja je, pak, podrazred prilično opsežne klase faktora rasta danas).

VEGF proteini služe kao dio sustava odgovornog za obnavljanje opskrbe tkiva kisikom u situacijama kada je cirkulacija krvi nedovoljna. Koncentracija VEGF u krvnom serumu je povećana kod bronhijalne astme i dijabetes melitusa. Glavne funkcije VEGF-a su stvaranje novih krvnih žila u embrionalnom razvoju ili nakon ozljede, pospješivanje rasta mišića nakon vježbanja, osiguravanje kolateralne cirkulacije (stvaranje novih krvnih žila uz blokiranje postojećih).

Povećana aktivnost VEGF može dovesti do raznih bolesti. Dakle, čvrsti tumori raka ne mogu narasti više od određene ograničene veličine bez odgovarajuće opskrbe krvlju; tumori koji mogu eksprimirati VEGF mogu rasti i metastazirati. Prekomjerna ekspresija VEGF može uzrokovati vaskularne bolesti pojedinih dijelova tijela (osobito mrežnice). Neki lijekovi razvijeni posljednjih godina (kao što je bevacizumab) mogu kontrolirati ili usporiti napredovanje takvih bolesti inhibicijom VEGF.

Trenutna istraživanja pokazuju da VEGF proteini nisu jedini aktivator angiogeneze. Posebno, FGF2 I HGF također su snažni angiogenetski čimbenici.

Klasifikacija

Najvažniju ulogu u ljudskom tijelu ima protein iz obitelji VEGF, tzv VEGF-A. Ova obitelj također uključuje faktor rasta placente (PGF) i bjelančevine VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D. Svi su oni otkriveni kasnije od VEGF-A (prije njihovog otkrića VEGF-A protein se jednostavno nazivao VEGF). Uz navedeno, otkriven je i VEGF protein kodiran virusima ( VEGF-E), i VEGF protein koji se nalazi u otrovu nekih zmija ( VEGF-F).

Tip	Funkcija
VEGF-A	Migracija endotelnih stanica Mitoza endotelnih stanica Aktivnost metan monooksigenaze Aktivnost integrina α V β 3 Stvaranje praznina u krvnim žilama Stvaranje pora u endotelnim stanicama Kemotaksija za makrofage i granulocite
VEGF-B	Embrionalna angiogeneza (osobito tkiva miokarda)
VEGF-C	Angiogeneza limfnih žila
VEGF-D	Razvoj limfnih žila u plućima
PIGF	Vaskulogeneza (kao i angiogeneza kod ishemije, upale, zacjeljivanja rana i raka)

Aktivnost VEGF-A proteina proučavana je (kao što mu ime kaže) uglavnom u vaskularnim endotelnim stanicama, iako utječe na funkcioniranje drugih vrsta stanica (na primjer, stimulira migraciju monocita/makrofaga, utječe na neurone, stanice raka, bubrežni epitel stanice). U istraživanju in vitro Pokazalo se da VEGF-A stimulira mitogenezu i migraciju endotelnih stanica. VEGF-A također poboljšava i povećava mikrovaskularnu propusnost i izvorno je nazvan "faktor vaskularne propusnosti".

Alternativna klasifikacija

Koncept "VEGF proteina" je širok koncept koji pokriva dvije skupine proteina koji nastaju alternativnim spajanjem glasničke RNA (mRNA) jednog gena koji sadrži 8 egzona. Ove se dvije skupine razlikuju po mjestu spajanja terminalnog 8. egzona: proteini s proksimalnim mjestom označeni su VEGFxxx, a oni s distalnim mjestom označeni su VEGFxxxb. Osim toga, alternativno spajanje egzona 6 i 7 mijenja njihova svojstva vezanja heparina i sastav aminokiselina (u ljudi: VEGF121, VEGF121b, VEGF145, VEGF165, VEGF165b, VEGF189, VEGF206; u glodavaca ortolozi ovih proteina sadrže jednu aminokiselinu manje ). Ove regije imaju važne funkcionalne posljedice za VEGF varijante, jer terminalno mjesto spajanja (egzon 8) određuje jesu li proteini proangiogeni (proksimalno mjesto spajanja korišteno tijekom angiogeneze) ili antiangiogeno (distalno mjesto spajanja korišteno u normalnom tkivu). Osim toga, uključivanje ili isključivanje egzona 6 i 7 posreduje u interakcijama s heparan sulfat proteoglikanima i koreceptorima neuropilina na površini stanice, povećavajući njihovu sposobnost vezanja i aktiviranja VEGF receptora ( VEGFR). Nedavno je pokazano da je kod miševa VEGF-C protein važan induktor neurogeneze u subventrikularnim zonama, bez ispoljavanja angiogenih učinaka.

VEGF receptor

Svi članovi VEGF obitelji proteina stimuliraju stanične odgovore vezanjem na receptore s aktivnošću tirozin kinaze na površini stanice; aktivacija ovih proteina događa se njihovom transfosforilacijom. Svi VEGF receptori imaju izvanstanični dio koji se sastoji od 7 regija sličnih imunoglobulinima, jedne transmembranske regije i unutarstaničnog dijela koji sadrži domenu tirozin kinaze.

Postoje tri vrste receptora, označenih kao VEGFR-1, VEGFR-2 i VEGFR-3. Također, ovisno o alternativnom spajanju, receptori mogu biti vezani za membranu ili slobodni.

Protein VEGF-A veže se na receptore VEGFR-1 (Flt-1) i VEGFR-2 (KDR/Flk-1); u ovom slučaju, VEGFR-2 receptor djeluje kao posrednik u gotovo svim poznatim reakcijama stanica na VEGF. Funkcije VEGFR-1 receptora su manje dobro definirane (iako se vjeruje da modulira VEGFR-2 signalizaciju). Druga funkcija VEGFR-1 je da može djelovati kao "prazan" receptor, izolirajući VEGF protein od VEGFR-2 receptora (što se čini posebno važnim tijekom angiogeneze tijekom embrionalnog razvoja).

Proteini VEGF-C i VEGF-D (ali ne VEGF-A) su ligandi za treći receptor (VEGFR-3), koji djeluje kao posrednik limfangiogeneza.

Proizvodnja stanicama

Proizvodnja VEGFxxx proteina može se pokrenuti u stanicama koje ne primaju dovoljno kisika. Kada stanica doživi nedostatak kisika, ona proizvodi jedan od faktora transkripcije - faktor inducibilan hipoksijom ( FZO). Ovaj čimbenik (uz druge funkcije - posebice modulaciju eritropoeze, tj. procesa stvaranja crvenih krvnih stanica u koštanoj srži) potiče otpuštanje VEGFxxx proteina. Cirkulirajući protein VEGFxxx zatim se veže za VEGF receptor na endotelnim stanicama i aktivira djelovanje tirozin kinaze, pokrećući angiogenezu.

Kod pacijenata koji boluju od emfizema utvrđena je smanjena razina VEGF-a u plućnim arterijama.

U bubrezima, povećana ekspresija VEGFxxx u glomerulima izravno uzrokuje glomerularnu hipertrofiju povezanu s proteinurijom.

Promjene u razinama VEGF mogu ukazivati ​​na rane faze preeklampsije.

Anti-VEGF terapija

Anti-VEGF terapija igra važnu ulogu u liječenju određenih vrsta raka (osobito -

Sadržaj

1. Regulacija neoangiogeneze

2. Tumorska angiogeneza

Vaskuloendotelni faktor rasta

. Vaskuloendotelni faktor rasta C

. Vaskuloendotelni faktor rasta D

. VEGF receptori

. Faktor rasta fibroblasta

. Epidermalni faktor rasta

. Transformirajući faktor rasta α

. Transformirajući faktor rasta β

. Trombocitni faktor rasta

. Faktor rasta placente

. Faktor rasta hepatocita

. Angiogenin

. Angiopoetini-1 i -2

. Pigmentni faktor epitelnog podrijetla

. Dušikov oksid

. Matriksne metaloproteinaze

. Endostatin

. Faktor matičnih stanica

. Čimbenik inhibicije stanica leukemije

. Neurotropni faktor dobiven iz mozga

Kratice odjeljaka

EGF - epidermalni faktor rasta

FGF - faktor rasta fibroblasta

HGF - faktor rasta hepatocita

IGF – faktori rasta slični inzulinu

MMPS - matrične metaloproteinaze

PDGF - faktor rasta trombocita

PLGF - faktor rasta placente

TGF - transformirajući faktori rasta

inhibitori TIMP

MMP SCF - faktor matičnih stanica

VEGF - vaskuloendotelni faktor rasta

Čimbenici rasta - polipeptidi sa Molekularna težina 5-50 kDa, spojeni u skupinu trofičkih regulatornih tvari. Poput hormona, ti čimbenici imaju širok raspon bioloških učinaka na mnoge stanice - potiču ili inhibiraju mitogenezu, kemotaksiju i diferencijaciju. Za razliku od hormona, faktore rasta obično proizvode nespecijalizirane stanice koje se nalaze u svim tkivima i imaju endokrine, parakrine i autokrine učinke. Endokrini čimbenici se proizvode i krvotokom transportiraju do udaljenih ciljnih stanica. Dostižući svoj “cilj” stupaju u interakciju sa specijaliziranim receptorima visokog afiniteta ciljnih stanica. Parakrini čimbenici razlikuju se po tome što se šire difuzijom. Receptori ciljnih stanica obično se nalaze u blizini stanica proizvođača. Autokrini čimbenici utječu na stanice koje su izravan izvor tih čimbenika. Većina polipeptidnih čimbenika rasta djeluje na parakrini ili autokrini način. Međutim, određeni čimbenici, kao što je faktor rasta sličan inzulinu (IGF), mogu imati endokrine učinke.

Regulacija neoangiogeneze

Normalno funkcioniranje tkiva ovisi o redovitoj isporuci kisika krvnim žilama. Razumijevanje načina nastajanja krvnih žila usredotočilo je velik dio istraživačkih napora u posljednjem desetljeću. Vaskulogeneza u embrija je proces kojim se krvne žile formiraju de novo od prekursora endotelnih stanica. Angiogeneza je proces stvaranja novih krvnih žila iz već postojećeg krvožilnog sustava. Ima važnu ulogu u razvoju, normalnom rastu tkiva, zacjeljivanju rana, reproduktivnom ciklusu kod žena (razvoj posteljice i žutog tijela, ovulacija), a također ima veliku ulogu u raznim bolestima. Poseban interes usmjeren je na rast tumora. To je stvaranje nove opskrbe krvlju koja omogućuje rast tumora. Ovaj proces, opisan kao tumorska angiogeneza, također je sastavni dio širenja tumorskih stanica i rasta metastaza. Proces neoangiogeneze nužan je za dugotrajnu prilagodbu tkiva u uvjetima oštećenja. U tom slučaju dolazi do djelomičnog oslobađanja faktora rasta u krv, što ima dijagnostički značaj.

Razlikuju se sljedeći stupnjevi neoangiogeneze:

1. povećana propusnost endotela i razaranje bazalne membrane;

2. migracija endotelnih stanica;

3. proliferacija endotelnih stanica;

4. “sazrijevanje” endotelnih stanica i vaskularna remodelacija.

Glavni mehanizam za regulaciju procesa neoangiogeneze je oslobađanje angiogenih čimbenika, čiji izvori mogu biti endotelne i mastocite, makrofagi itd. Pod utjecajem angiogenih čimbenika, endotelne stanice se aktiviraju (uglavnom u postkapilarnim venulama) i migriraju izvan bazalna membrana s formiranjem ogranaka glavnih žila. Pretpostavlja se da je aktivacija ekspresije endotelnih adhezijskih molekula, primjerice E-selektina, od velike važnosti u mehanizmu migracije endotelnih stanica. U stabilnom stanju endotelne stanice ne proliferiraju i samo se povremeno (jednom u 7-10 godina) dijele. Pod utjecajem angiogenih čimbenika rasta i citokina aktivira se proliferacija endotelnih stanica, koja završava pregradnjom žile, nakon čega novonastala žila poprima stabilno stanje.

Rast novih žila određen je ravnotežom između njegovih stimulatora i inhibitora. Pri niskom omjeru stimulansa prema inhibitorima vaskularne tvorbe neoangiogeneza je blokirana ili niskog intenziteta, naprotiv, pri visokim omjerima neoangiogeneza se aktivno pokreće.

Stimulatori neoangiogeneze: vaskuloendotelni faktor rasta (VEGF), faktor rasta fibroblasta (FGF), angiogenin, epidermalni faktor rasta (EGF), trombocitni faktor rasta (PDGF), transformirajući faktori rasta α (TGF-α) i β (TGF- β), faktor rasta sličan inzulinu 1 (IGF-1), NO, interleukin-8 i nespecifični čimbenici kao što su matrične metaloproteinaze (MMP).

Inhibitori neoangiogeneze: endostatin, topljivi VEGF receptori (sVEGFR), trombospondin, angiostatin (fragment plazminogena), vazostatin, restin, inhibitori MMP (TIMP-1, TIMP-2).

Tumorska angiogeneza

Za razliku od normalne, normalne vaskulature, koja brzo sazrijeva i stabilizira se, tumorske krvne žile imaju strukturne i funkcionalne abnormalnosti. Ne sadrže pericite - stanice funkcionalno povezane s vaskularnim endotelom i iznimno važne za stabilizaciju i sazrijevanje vaskularnih struktura. Osim toga, vaskularni1. 2. 3. 4. Ova mreža tumora ima kaotičnu organizaciju, s tortuoznošću i povećanom vaskularnom propusnošću, a njezino preživljavanje i proliferacija ovise o čimbenicima rasta. Ove vaskularne abnormalnosti, koje su u velikoj mjeri posljedica prekomjerne proizvodnje faktora rasta, stvaraju uvjete pogodne za rast tumora.

Za stanice raka karakteristično je povećanje razine stimulatora neoangiogeneze. U nedostatku opskrbe krvlju, tumori dobivaju kisik i hranjive tvari difuzijom i obično ne narastu više od 1-2 mm u promjeru. Početak angiogeneze dovodi do stvaranja nove opskrbe krvlju i olakšava brzi rast i metastazu tumora, koji je time postao aktivan. Iako su mnogi čimbenici rasta uključeni u tumorsku angiogenezu, VEGF se pokazao najsnažnijim i najdominantnijim od njih. Poremećaj opskrbe krvlju tumora može potisnuti njegov kasniji rast. Pretpostavlja se da je blokiranje rasta tumora moguće suzbijanjem stvaranja i aktivnosti čimbenika rasta angiogeneze ili izravnim djelovanjem na novostvorene, nezrele krvne žile. Ova metoda utjecaja na tumor ne uzrokuje eradikaciju, već samo ograničava njegov rast, pretvarajući bolest u tromi kronični proces. Anti-VEGF terapija suzbija rast novih tumorskih žila i uzrokuje preokret novonastalih vaskularnih slojeva.

Vaskuloendotelni faktor rasta (VEGF, VEGF A)

VEGF je heterodimerni glikoproteinski faktor rasta koji proizvode različite vrste stanica. Identificirano je najmanje 5 varijanti VEGF-A: VEGF 121, VEGF 165, VEGF 183, VEGF 189, VEGF 206. Druge varijante VEGF označene su kao VEGF-B, -C, -D. VEGF 165 je dominantan oblik u većini tkiva. Kaposijev sarkom eksprimira VEGF 121 i VEGF 165. VEGF 121 i VEGF 165 su topljivi oblici, dok su VEGF 189 i VEGF 206 vezani na membranske proteoglikane koji sadrže heparin. Za razliku od drugih mitogena endotelnih stanica kao što su bFGF (glavni oblik) i PDGF, VEGF se sintetizira kao prekursor od 226 aminokiselina.

VEGF je potencijalni mitogen za vaskularne epitelne stanice. Ima snažan učinak na vaskularnu propusnost, snažan je angiogenetski protein u različitim eksperimentalnim sustavima, te sudjeluje u procesima neovaskularizacije u patološkim situacijama. Postoji sinergistički učinak između VEGF i bFGF na indukciju angiogeneze. Sposobnost VEGF-a da utječe na vaskularnu propusnost implicira mogućnost uključenosti ovog faktora rasta u mijenjanje funkcija krvno-moždane barijere u subnormalnim i patološkim stanjima. VEGF-A također uzrokuje vazodilataciju kroz put NO sintetaze u endotelnim stanicama i može aktivirati migraciju monocita.

VEGF-A se može dokazati u plazmi i serumu bolesnika, ali je njegova razina u serumu znatno viša. Izuzetno visoke razine mogu se pronaći u sadržaju cista nastalih kod bolesnika s tumorima mozga ili u ascitnoj tekućini. Trombociti oslobađaju VEGFA nakon agregacije i mogu biti još jedan glavni izvor tumorskih stanica. Različite studije su pokazale da povezanost visokih serumskih razina VEGF-A s lošom prognozom u bolesnika s malignim bolestima može biti u korelaciji s povišenim brojem trombocita. Tumori mogu lučiti citokine i čimbenike rasta koji stimuliraju proizvodnju megakariocita u koštanoj srži i povećavaju broj trombocita. To pak može dovesti do drugog, neizravnog povećanja isporuke VEGF-A tumoru. Štoviše, VEGF-A je uključen u mnoge druge patološke procese povezane s povećanom angiogenezom ili povećanom vaskularnom propusnošću. Primjeri u kojima VEGF-A igra važnu ulogu uključuju psorijazu i reumatoidni artritis, kao i sindrom hiperstimulacije jajnika. Dijabetička retinopatija također je povezana s visokim intraokularnim razinama VEGF-A, a inhibicija funkcije VEGFA može dovesti do neplodnosti zbog blokade funkcije žutog tijela. Važnost VEGF-A za rast tumora jasno je pokazana korištenjem VEGF receptora za blokiranje proliferacije in vivo, kao i blokiranjem antitijela na VEGF ili jedan od VEGF receptora. Kao posljedica toga, interferencija s funkcijom VEGF-A postala je glavno područje interesa za razvoj lijekova usmjerenih na blokiranje angiogeneze i metastaza. Trenutno je više od 110 farmaceutskih tvrtki diljem svijeta uključeno u razvoj takvih antagonista. Njihovi pristupi uključuju antagoniste VEGF-A ili njegovih receptora, selektivne inhibitore tirozin kinaze. Usmjeravanje VEGF signalizacije može imati vrlo važne terapeutske implikacije za mnoge bolesti i poslužiti kao osnova za razvoj budućih (anti)angiogenih terapija.

Vaskuloendotelni faktor rasta C (VEGF-C)

VEGF-C pripada obitelji VEGF. Dokazano je da ima angiogena i limfangiogena svojstva. Porodica VEGF i njihovi receptori uključeni su u razvoj i rast vaskularnog endotela. Dva proteina iz ove obitelji, VEGF-C i -D, imaju regulatorni učinak na endotelne stanice limfnih žila preko VEGFR3 receptora, djelujući kao mitogeni.

Ekspresija VEGF-C povezana je s onkohematološkim bolestima. Ekspresija VEGF-C zajedno s receptorima potiče preživljavanje i proliferaciju tumorskih stanica. Povećana ekspresija VEGF-C prikazana je u gastrointestinalnim zloćudnim bolestima, gdje je u korelaciji s invazijom, metastazama u limfnim čvorovima i smanjenim preživljavanjem.

Vaskuloendotelni faktor rasta D (VEGF-D)

VEGF-D (također poznat kao c-fos-inducibilni faktor ili FIGF) vrlo je sličan VEGF-C. Ima strukturnu homologiju i specifičnost receptora sličnu VEGF-C, pa se vjeruje da se VEGF-D i VEGF-C mogu klasificirati u VEGF potfamiliju. VEGF-D se inicijalno sintetizira kao prekursorski protein koji sadrži jedinstvene N- i C-terminalne propeptide uz središnju homolognu domenu vezivanja VEGF receptora (VHD). N- i C-terminalni propeptidi nisu pronađeni u drugim članovima VEGF obitelji. Ovi propeptidi se proteolitički cijepaju tijekom biosinteze, što rezultira stvaranjem zrelog, izlučenog oblika koji se sastoji od monovalentnih VHD dimera.

Poput VEGF-C, VEGF-D se veže na površini stanice za tirozin kinazu VEGF receptor 2 (VEGF R2/Flk-1/KDR) i VEGFR3. Ovi receptori su lokalizirani na vaskularnim i limfnim endotelnim stanicama i odgovorni su za angiogenezu i limfogenezu. Zreli oblik VEGFD veže se na te receptore s većim afinitetom od izvornog pro oblika VEGF-D. Pokazana je ekspresija VEGF-D gena u embrijima u razvoju, posebno u plućnom mezenhimu. VEGF-D je također lokaliziran u tumorskim stanicama. U tkivima odraslih, VEGF-D mRNA se eksprimira u srcu, plućima, skeletnim mišićima i tankom crijevu.

VEGF receptori (sVEGFR-1, sVEGFR-2)

Mnogi citokinski receptori postoje u topljivom obliku nakon proteolitičkog cijepanja i odvajanja od površine stanice. Ovi topivi receptori sposobni su vezati i neutralizirati citokine u cirkulaciji. Postoje tri receptora za VEGF-A: VEGFR-1 (Flt-1), -2 (KDR) i -3 (Flt-4). Svi oni sadrže sedam ponavljanja sličnih Ig u izvanstaničnim domenama. VEGFR1-R3 se uglavnom eksprimira u proliferirajućem endotelu vaskularne ovojnice i/ili infiltrirajućim solidnim tumorima. VEGFR2 je, međutim, zastupljeniji od VEGFR1 i eksprimira se u svim endotelnim stanicama vaskularnog podrijetla. VEGFR2 je također prisutan u endotelnim i perivaskularnim kapilarnim stanicama u lamini sjemenih tubula, Leydigovim stanicama i Sertolijevim stanicama. VEGFR2 veže VEGF-A, -C i -D. Za razliku od VEGFR1, koji veže i PlGF i VEGF s visokim afinitetom, VEGFR2 veže samo VEGF, a ne PlGF s visokim afinitetom.

Ovi receptori igraju važnu ulogu u angiogenezi. sVEGFR-1 je inhibitor ovog procesa. Vezanjem za VEGF sprječava interakciju VEGF-a s ciljnim stanicama. Funkcionalna inaktivacija VEGFR2 protutijelima može poremetiti proces angiogeneze i spriječiti invaziju tumorskih stanica. U vaskularnim endotelnim stanicama, angiogeneza izazvana HIV-1 Tat proteinom posredovana je VEGFR2. Tat specifično veže i aktivira VEGFR2. Tat-inducirana angiogeneza je inhibirana sredstvima koja mogu blokirati VEGFR2.

Faktor rasta fibroblasta (FGF)

Obitelj FGF trenutno uključuje 19 različitih proteina. U početku su karakterizirana dva oblika: kiseli (aFGF) i bazični (bFGF).

a i bFGF su proizvodi različitih gena i imaju do 53% homologije. Molekula aFGF predstavljena je jednostavnim polipeptidnim lancem s m.m. 16,8 kDa. Mm. različiti oblici bFGF kreću se od 16,8 do 25 kDa. Nisu pronađene funkcionalne razlike između bFGF oblika.

Biološke aktivnosti FGF-a su različite. Oni su mitogeni za različite stanice neuroektodermalnog i mezenhimalnog podrijetla, potencijalni mitogeni i stimulatori angiogeneze, podupiru i potiču diferencijaciju stanica različitih tipova neurona in vivo i in vitro. Osim a i bFGF, obitelj uključuje onkoproteine ​​int-2 (FGF-3) i hst (FGF-4), FGF-5, faktor rasta keratinocita i faktor rasta vaskularnog endotela. FGF-3 i -4 blisko su povezani s bFGF-om, koji je i sam po sebi potencijalni onkogen. Klinički podaci podupiru ulogu bFGF-a u neoangiogenezi tumora. Dakle, povećanje razine ovog faktora korelira sa stupnjem agresivnosti procesa kod mnogih solidnih tumora, leukemije, limfoma u djece i odraslih i može poslužiti kao prognostički faktor za agresivnost tumorskog procesa. bFGF je neophodan za razvoj i održavanje krvožilnog sustava tijekom embriogeneze, a također je i glavni angiogenetski faktor u ranom oporavku i kardiovaskularnim bolestima.

Epidermalni faktor rasta (EGF)

EGF je globularni protein s m.m. 6,4 kDa, koji se sastoji od 53 aminokiselinska ostatka, koji djeluje kao snažan mitogen na različite stanice endodermalnog, ektodermalnog i mezodermalnog podrijetla. EGF se nalazi u krvi, cerebrospinalnoj tekućini, mlijeku, slini, želučanom i pankreasnom soku. Faktor rasta u mokraći poznat kao urogastron također je identičan EGF-u. Glavno mjesto sinteze EGF-a su žlijezde slinovnice. EGF kontrolira i stimulira proliferaciju epidermalnih i epitelnih stanica, uključujući fibroblaste, bubrežni epitel, glijalne stanice, granulozne stanice jajnika i stanice štitnjače in vitro. EGF također potiče proliferaciju embrionalnih stanica i pojačano otpuštanje kalcija iz koštanog tkiva. Pospješuje resorpciju kosti i snažan je kemoatraktant za fibroblaste i epitelne stanice. EGF sam i u kombinaciji s drugim citokinima najvažniji je čimbenik koji posreduje u procesima zacjeljivanja rana i angiogeneze. Djeluje i kao inhibitor lučenja želučane kiseline. Visoke razine EGF-a prisutne su u određenim tjelesnim tekućinama, kao što su slina, urin, želučani sok, sjemena tekućina i mlijeko.

EGF ima važnu ulogu u karcinogenezi. Pod određenim uvjetima može uzrokovati malignitet stanica. EGF inducira protoonkogene c-fos i c-myc. Biološki učinci imunoreaktivnog EGF-a slični su onima TGF-α. Važno je napomenuti da se oba faktora vežu na iste receptore. Međutim, učinkovitost EGF-a je 50% veća od TGF-α.

Transformirajući faktor rasta α (TGF-α)

Glavni izvor TGF-α su karcinomi. Makrofagi i keratinociti (moguće druge epitelne stanice) također izlučuju TGF-α. TGF-α stimulira razvoj fibroblasta i endotela. To je angiogeni faktor. Poput EGF-a, TGF-α je uključen u regulaciju stanične proliferacije, kao i u regulaciju rasta tumorskih stanica.

Transformirajući faktor rasta β (TGF-β)

Obitelj TGF-β uključuje skupinu homolognih heterodimernih proteina TGFβ-1, -2, -3 i -4. Glavna izoforma koju izlučuju stanice imunološki sustav, je TGF-β1. Svi TGF-β sastoje se od 112 aminokiselinskih ostataka. Struktura TGF-β2 ima 50% homologije s TGF-β1 preko prvih 20 aminokiselinskih ostataka i 85% za fragment 21-36. Nisu pronađene razlike u funkcionalnoj aktivnosti između TGF-β1 i -β2. TGF-β proizvode mnoge vrste stanica i tkiva: aktivirani T-limfociti i makrofagi, trombociti, bubrezi, placenta.

Faktor se proizvodi u neaktivnom obliku, sadržavajući, uz glavni dimer, fragmente dodatnih lanaca molekule prekursora. Aktivacija se događa u obliku cijepanja ovih fragmenata uz pomoć proteinaza (plazmin, katepsin, itd.). TGF-β također cilja na različite stanice jer je ekspresija njegovog receptora visokog afiniteta široko rasprostranjena. Kada TGFβ djeluje na imunološki sustav, prevladavaju inhibitorni učinci. Čimbenik potiskuje hematopoezu, sintezu upalnih citokina, odgovor limfocita na IL-2, -4 i -7 te stvaranje citotoksičnih NK i T stanica. Istodobno pospješuje sintezu proteina međustaničnog matriksa, pospješuje zacjeljivanje rana i ima anabolički učinak.

U odnosu na polimorfonuklearne leukocite, TGF-β djeluje kao antagonist upalnih citokina. Isključivanje TGF-β gena dovodi do razvoja fatalne generalizirane upalne patologije koja se temelji na autoimunom procesu. Dakle, on je element povratne regulacije imunološkog odgovora i, prije svega, upalnog odgovora. U isto vrijeme, TGF-β je također važan za razvoj humoralnog odgovora: on prebacuje biosintezu imunoglobulina na izotip IgA. Stimulira angiogenezu. Razine TGF-β u plazmi pozitivno koreliraju s vaskularizacijom tumora.

Trombocitni faktor rasta (PDGF)

PDGF je jedan od potencijalnih mitogenih polipeptida pronađenih u ljudskoj krvi. Sastoji se od dva lanca: A i B, povezanih u AA-, BB- i AB izoformama. Ove tri izoforme razlikuju se i po funkcionalnim svojstvima i po načinu izlučivanja. Dok se oblici AA i AB brzo izlučuju iz stanice proizvođača, oblik BB ostaje uglavnom povezan sa stanicom koja proizvodi. Samo dimerni oblici PDGF mogu se vezati na receptore. Identificirane su dvije različite vrste receptora. α receptor veže ili A ili B polipeptid, dok β receptor veže samo B polipeptid. Cijeli spektar bioloških učinaka duguje se ovim trima molekulama PDGF i dvama receptorima, njihovoj različitoj ekspresiji i složenim unutarstaničnim mehanizmima koji reguliraju njihovu aktivnost. Izvor PDGF u serumu su α-granule trombocita, iako makrofagi i endotelne stanice također mogu proizvesti ovaj faktor. U određenim stadijima stanice posteljice i glatke mišićne stanice aorte novorođenčeta također služe kao izvor PDGF-a.

Izoformu AA prvenstveno izlučuju fibroblasti, stanice glatkih mišića krvnih žila, osteoblasti, astrociti, stanice COLO (karcinom debelog crijeva) i WLM (Wilmov tumor). Sinteza BB povezana je s makrofagima, stanicama Langerhansovih otočića, neangiogenim epitelom i staničnom linijom SW (karcinom štitnjače). Stanice koje proizvode oba lanca (A i B) uključuju neurone, mezangijske stanice bubrega, stanične linije glioma i mezotelioma i trombocite. Početni podaci sugeriraju da su ljudske trombocite sadržavale približno 70% PDGF-AB i 30% -BB. Međutim, novije studije su pokazale da može biti prisutno i do 70% PDGF-AA, a raniji nalazi su artefakt. Vrsta izlučenog dimera PDGF ovisi o proizvedenoj mRNA, a na nju može utjecati i učinkovitost translacije, sekrecija i unutarstanična razgradnja.

Strukturni identitet lanca B i protoonkogena c-sis sugerira da bi PDGF mogao igrati ulogu u malignoj transformaciji inficiranih stanica izazvanoj virusom. PDGF je uključen u regulaciju akutne upale, zacjeljivanje rana i stvaranje ožiljaka. PDGF oslobođen iz alveolarnih makrofaga uključen je u razvoj plućne fibroze. Također je utvrđeno da je PDGF povezan s razvojem ateroskleroze, glomerulonefritisa, mijelofibroze i stvaranja keloida. Poput EGF, PDGF inducira ekspresiju protoonkogena kao što su fos, myc i jun. PDGF je također sveprisutno prisutan u neuronima CNS-a, gdje se smatra da ima važnu ulogu u preživljavanju i regeneraciji stanica, posredujući u proliferaciji i diferencijaciji glija stanica

Placentni faktor rasta (PlGF)

PlGF - glikoprotein s m.m. 46-50 kDa, pripada obitelji VEGF (42% homologije s VEGF). PlGF je također homologan, iako daleko, obitelji faktora rasta PDGF. Postoje dvije izoforme PlGF: -1 i -2, koje se razlikuju po prisutnosti heparin-vezne domene u PlGF-2. PlGF posreduje u proliferaciji ekstraviloznog trofoblasta. Kao što mu ime govori, PlGF je prvi put identificiran u normalnim uvjetima u ljudskoj placenti. Eksprimira se u drugim tkivima kao što su kapilare i endotel umbilikalne vene, koštana srž, maternica, NK stanice i keratinociti. PlGF je također povećan u različitim patološkim stanjima, uključujući zacjeljivanje rana i stvaranje tumora. U usporedbi s VEGF-om, uloga PlGF-a u neovaskularizaciji je manje jasna. Može produžiti životni vijek, rast i migraciju endotelnih stanica in vitro, te potaknuti stvaranje krvnih žila u nekim in vivo modelima. Aktivnost PlGF-a može se dogoditi izravnom interakcijom faktora s VEGFR1. Predloženo je da VEGFR1 djeluje kao spremnik za VEGF, te da PlGF, nakon vezanja na receptor, istiskuje VEGF, oslobađajući ga da aktivira VEGFR2. PlGF može sinergistički poboljšati VEGF-induciranu angiogenezu i vaskularnu propusnost. Koncentracija PlGF raste 4 puta od kraja prvog do kraja drugog trimestra fiziološke trudnoće.

Faktor rasta hepatocita (HGF)

HGF, koji se naziva i faktor raspršenja (SF), sastoji se od dvije podjedinice povezane disulfidnom vezom: α (69 kDa) i β (34 kDa). HGF je multifunkcionalni citokin koji djeluje kao mitogen, što je povezano s njegovom funkcijom u organogenezi i obnavljanju tkiva. Ima sposobnost stimuliranja stvaranja krvnih žila i proliferacije stanica, što ukazuje na njegovu uključenost u maligni rast i metastaze u plućima, dojci, gušterači, adenokarcinomu, multiplom mijelomu i hepatocelularnom karcinomu. U tumorskim stanicama raka dojke, HGF snažno inducira ekspresiju bcl-x i tako inhibira apoptozu. HGF kontinuirano proizvode stromalne stanice koštana srž te potiče hematopoezu.

angiogenin (ANG)

ANG je jednolančani neglikozilirani polipeptid s m.m. 14 kDa, koja pripada RISBASE obitelji ribonukleaza (ribonukleaza s posebnim biološkim funkcijama). Molekule ove obitelji pokazuju ne samo aktivnost ribonukleaze, već imaju i posebne biološke učinke. ANG ima 35% identičnosti sekvence s ribonukleazom pankreasa. Pokazalo se da je na razini aminokiselina ljudski angiogenin 75% identičan mišjem ANG-u i "radi" u mišjim sustavima. ANG eksprimiraju endotelne stanice, stanice glatkih mišića, fibroblasti, stupčasti intestinalni epitel, limfociti, stanice primarnog adenokarcinoma i neke tumorske stanične linije. Angiogenin receptor je nepoznat. Vjeruje se da je aktin, kao receptor ili vezna molekula, potreban za djelovanje angiogenina.

Funkcionalno, ANG je najčešće povezan s procesom angiogeneze. Smatra se da se u početku veže za aktin, nakon čega slijedi disocijacija aktin-ANG kompleksa nakon čega slijedi aktivacija tkivnog aktivatora plazminogena. Kao rezultat toga nastaje plazmin koji potiče razgradnju komponenti bazalne membrane kao što su laminin i fibronektin. Destrukcija bazalne membrane nužan je preduvjet za migraciju endotelnih stanica tijekom neovaskularizacije. Iako se čini da ANG djeluje prvenstveno ekstravaskularno ili perivaskularno, cirkulirajući ANG otkriven je u normalnom serumu u koncentracijama reda veličine ng/mL. U patološkim procesima, povišene razine ANG-a otkrivene su kod pacijenata koji boluju od raka gušterače i arterijske okluzije.

Angiopoetini-1 i -2 (Ang)

Ang-1 i -2 su glikoproteini koji pripadaju obitelji faktora rasta koji reguliraju razvoj vaskularnog tkiva. Ang-1 se sastoji od 498 aminokiselinskih ostataka, Ang-2 - od 467. AK sekvence Ang-1 i -2 su 60% identične. Oba Anga stupaju u interakciju s receptorom tirozin kinaza-2 (Tie-2), koji je pretežno prisutan na endotelnim stanicama. Međutim, postoje najmanje tri alternativne varijante spajanja Ang-1, s dva alternativna oblika koji ne uspijevaju aktivirati Tie-2. Dakle, oni djeluju kao endogeni supresori glavnog aktivnog oblika Ang-1. Osim toga, Ang-1 i -2 djeluju kao konkurenti za interakciju s Tie-2 receptorom, tako da Ang-2, ovisno o tipu stanice, djeluje ili kao supresor ili kao aktivator Tie-2 receptora.

Ang-1 i -2 jako su izraženi u embriju tijekom brzog razvoja vaskularnog tkiva. Brisanje gena Ang-1 dovodi do smrtonosnih posljedica u embriju zbog ozbiljnih nedostataka u razvoju srca i krvnih žila. Iako Ang-2 nema tako značajnu ulogu kao Ang-1 u formiranju vaskularnog sustava embrija, u njegovoj odsutnosti vaskularizacija je također oštećena, što uzrokuje ranu smrt. U odraslom organizmu Ang-1 pretežno sintetiziraju endotelne stanice, megakariociti i trombociti, a Ang-2 se eksprimira lokalno: u jajnicima, maternici i placenti. Ang-1 regulira razvoj i remodeliranje krvnih žila te povećava preživljavanje endotelnih stanica. Preživljavanje endotelnih stanica tijekom interakcije Ang-1 s Tie-2 uključuje mehanizam PI3K/AKT, a migracija stanica tijekom iste interakcije (ligand/receptor) događa se uz sudjelovanje nekoliko kinaza (PI3K, PAK, FAK). Nasuprot tome, Ang-2, djelujući sam, inicira smrt endotelnih stanica i regresiju krvnih žila, iako sinergistički s VEGF-om može pospješiti stvaranje novih žila. Ako Ang-1 djeluje sinergistički s VEGF-om, njegova prekomjerna proizvodnja dovodi do povećane vaskularizacije tkiva. Dakle, Ang-1 i -2, u pravilu, djeluju kao antagonisti koji zajednički reguliraju vaskularni rast.

Djelovanje angiopoetina nije ograničeno na vaskularni endotel krvotoka - oni mogu sudjelovati u stvaranju krvnih žila limfnog sustava. Ang-1 ima i druge biološke učinke, na primjer, pojačava adheziju i migraciju neutrofila i eozinofila, te regulira propusnost vaskularne stijenke. Ang-1 također može potaknuti rast i preživljavanje živčanih stanica i regulirati organizaciju dendritičnih stanica. Povišene razine Ang-1 i -2 pojačavaju angiogenezu zloćudnih bolesti. Visoke koncentracije cirkulirajućeg Ang-1 povezane su s hipertenzijom i patologijama raka.

Čimbenik pigmentnog epitela (PEDF)

PEDF (mw 50 kDa, pripada obitelji serpina) prvi je put identificiran kao čimbenik koji izlučuju epitelne stanice retine i potiče preživljavanje neurona in vitro i in vivo. S druge strane, pokazalo se da PEDF ima svojstvo induciranja apoptoze kapilarnih endotelnih stanica, čime se održava avaskularna priroda mrežnice. U mnogim oftalmološkim bolestima karakteriziranim disregulacijom retinalne inervacije i mikrovaskulature, PEDF je važan regulator u očnim bolestima. Osim toga, pokazalo se da PEDF ima višenamjensko antitumorsko djelovanje u eksperimentalnom neuroblastomu, budući da PEDF proizveden od strane Schwannovih stanica inducira diferencirani, manje maligni fenotip u stanicama neuroblastoma, potiče daljnji rast i preživljavanje Schwannovih stanica i inhibira angiogenezu.

Dušikov oksid (NO)

Biološki učinci NO naširoko su prepoznati nakon njegove identifikacije kao faktora opuštanja ovisnog o endotelu (EDRF), odgovornog za njegova snažna vazodilatacijska svojstva. NO je od tada identificiran kao pleiotropni biološki medijator koji regulira razne funkcije: od živčane aktivnosti do regulacije imunološkog sustava. To je slobodni radikal s kratkim in vivo poluživotom od oko nekoliko sekundi. U tom smislu, za neizravno određivanje NO u biološkim tekućinama koristi se razina stabilnijih metabolita NO, nitrita (NO 2-) i nitrata (NO 3-). Primjeri uključuju izmijenjene razine povezane sa sepsom, reprodukcijom, infekcijama, hipertenzijom, tjelesna aktivnost, dijabetes tipa 2, hipoksija i rak.

NO nastaje oksidacijom L-arginina uz sudjelovanje NADPH. Oksidacija se odvija uz sudjelovanje jednog od tri izoforme enzima obitelji NO sintaze (NOS) uz stvaranje citrulina. Članovi obitelji NOS uključuju neuronske (nNOS/NOS1), endotelne (eNOS/NOS3) i inducibilne (iNOS/NOS2) NO sintaze. Kao što mu ime govori, nNOS obilno eksprimiraju neuroni CNS-a i PNS-a, a nalazi se i u stanicama drugih tkiva, uključujući miocite skeletnih mišića, epitelne stanice pluća i mastocite kože; eNOS se eksprimira u endotelu i također se može otkriti u neuronima, fibroblastima kože, keratinocitima i folikularnim stanicama Štitnjača, hepatocita i glatkih mišićnih stanica. iNOS se izražava u različitim tkivima, uključujući hondrocite, epitelne stanice, hepatocite, glijalno tkivo i različite tipove stanica imunološkog sustava. Općenito, ekspresija eNOS i nNOS događa se kontinuirano i regulirana je Ca2+-ovisnim kalmodulinom, dok je sinteza iNOS-a inducirana endotoksinom i upalnim citokinima i relativno je neosjetljiva na Ca2+.

Zbog činjenice da je NO topiv u lipidima, on se ne pohranjuje, već se sintetizira de novo i slobodno difundira kroz membrane. Učinci NO na ciljne stanice posredovani su različitim mehanizmima. Na primjer, NO-posredovana aktivacija enzima gvanilil ciklaze (GC) katalizira stvaranje drugog glasnika 3',5'-cikličkog gvanozin monofosfata (cGMP). cGMP je uključen u niz bioloških funkcija, poput regulacije kontrakcije glatkih mišića, životnog vijeka stanice, proliferacije, funkcije aksona, sinaptičke plastičnosti, upale, angiogeneze i aktivnosti cikličkih nukleotidnih kanala. NO je također antitumorsko i antimikrobno sredstvo kroz mehanizme pretvorbe u peroksinitrit (ONOO-), stvaranje S-nitrozotiola i smanjenje zaliha arginina. Još jedna pretpostavljena uloga NO je inhibicija disanja mitohondrija putem inhibicije citokrom oksidaze. NO također može modificirati aktivnost proteina putem post-translacijske nitrozilacije kroz vezanje preko tiolne skupine cisteinskih ostataka.

Matriksne metaloproteinaze (MMP)

Ljudski MMP su obitelj enzima koji razgrađuju matriks. MMP imaju sposobnost razgradnje gotovo svih komponenti izvanstaničnog matriksa koji se nalaze u vezivnom tkivu (kolagen, fibronektin, laminin, proteoglikani itd.). Uz sličnosti na razini aminokiselinskog slijeda, svi MMP-i nastaju iz neaktivnih prekursora koji se pod utjecajem izvanstaničnih čimbenika pretvaraju u aktivne proteinaze koje razgrađuju supstrat. Izvori stvaranja MMP su fibroblasti, makrofagi, glatke mišićne stanice vaskularne stijenke i neutrofili. Svaki tumor je snažan induktor stvaranja MMP u stromalnim stanicama. Dok potiču invaziju na rast tumora i metastaze, MMP su u isto vrijeme snažni stimulatori neoangiogeneze. Endogeni i sintetski inhibitori MMP koriste se kao potencijalni antitumorski agensi, čija je glavna svrha suzbijanje neoangiogeneze.

Endostatin

Biološki aktivni C-terminalni fragment kolagena VIII s m.m. 20 kDa. Pripada obitelji proteina sličnih kolagenu. Kako bi se izbjegao prekomjerni vaskularni rast u normalnim uvjetima, procesi stvaranja novih i remodeliranja izvornih krvnih žila kontroliraju se odgovarajućim faktorima rasta. Tijekom tumorske angiogeneze opaža se prodiranje krvnih žila u rastuću tumorsku masu. Endostatin specifično inhibira proliferaciju endotelnih stanica. Sukladno tome, inhibira angiogenezu i rast tumora. Terapija endostatinom trenutno je u fazi 1 kliničkih ispitivanja.

Drugi dijagnostički značajni čimbenici rasta

Faktor matičnih stanica (SCF)

Proizvođači SCF su stromalne stanice koštane srži, fibroblasti, endotelne stanice i Sertolijeve stanice. Njegove glavne ciljne stanice su hematopoetske matične stanice, rani predani prekursori stanica različitih hematopoetskih linija i mastocita. SCF aktivira diferencijaciju multipotentnih progenitorskih stanica sinergistički s IL-3, GM-CSF i IL-7 i eritropoetinom. Uključen je u održavanje proliferacije najmlađih oblika prekursora T-limfocita u timusu. U odnosu na mastocite, glavni je čimbenik rasta i kemotaktičko sredstvo.

SCF ima važno kliničko značenje kao induktor diferencijacije prekursora limfocita i eritrocita. Određivanje SCF je od značajnog interesa u liječenju mijelodisplastičnog sindroma i nakon transplantacije koštane srži.

Čimbenik inhibicije stanica leukemije (LIF)

LIF pojačava proliferaciju prekursora hematopoetskih stanica. Dokazano je da LIF uzrokuje razvoj sindroma kaheksije kod pacijenata oboljelih od raka. LIF receptorska komponenta gp130 (CD130) dio je receptora za IL-6 i -11.

Neurotrofični faktor koji potiče iz mozga (BDNF)

Uz ovaj faktor, obitelj uključuje faktor rasta živaca, neurotrofine-3 i -4. BDNF potiče rast živčanog tkiva, uglavnom kolinergičkih neurona u mozgu. Dokazano je da BDNF utječe na rast, metabolizam i unutarnju strukturu tih stanica. Glavna svrha neurotropnih čimbenika je zaštita neurona od apoptoze.

UDC 616-006

FAKTOR RASTA VASKULARNOG ENDOTELA - KLINIČKI ZNAČAJAN POKAZATELJ U MALIGNOM NEOFOLIZMU

© E.S. Gershtein, D.N. Kushlinsky, L.V. Adamyan, N.A. Ognerubov

Ključne riječi: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumori; prognoza.

Prikazani su rezultati vlastitog istraživanja i najznačajniji literaturni podaci koji ukazuju da je ključni pozitivni regulator neoangiogeneze - vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF) - klinički značajan prognostički čimbenik u različitim onkološkim bolestima, ali i meta suvremene medicine. ciljani lijekovi s različitim mehanizmima djelovanja. Njegova uloga kao serološkog markera za dijagnozu i praćenje zahtijeva daljnje proučavanje.

Općenite ideje o regulaciji angiogeneze.

Angiogeneza je proces grananja novih kapilarnih procesa iz već postojećih krvnih žila. Ovaj složeni proces uključuje najmanje četiri faze: proteolitičku destrukciju vaskularne bazalne membrane i međustaničnog matriksa, migraciju i pričvršćivanje endotelnih stanica, njihovu proliferaciju i, konačno, stvaranje tubularnih struktura.

Trenutno se velika pažnja posvećuje problemu neoangiogeneze u malignim tumorima, budući da više nema sumnje da se tumor ne može razviti i rasti bez formiranja razgranate mreže krvnih žila u njemu, osiguravajući opskrbu stanica kisikom i hranjivim tvarima. . Zanimanje za ovaj problem javilo se prije više od 30 godina, no sve do relativno nedavno glavna karakteristika aktivnosti neoangiogeneze u tumorima bila je mikroskopska procjena gustoće krvnih žila u tumorskom tkivu (mikrovaskularna gustoća). I to relativno nedavno, kao rezultat studiranja molekularni mehanizmi Angiogeneza, koja se intenzivno razvija u posljednjih 10-15 godina, pokazala je prisutnost niza regulacijskih angiogenih i antiangiogenih čimbenika, čija dinamička ravnoteža osigurava stvaranje i proliferaciju novih žila unutar tumora.

Mnogi poznati faktori rasta i citokini, kao što su bazični i kiseli faktori rasta fibroblasta (oFGF i cFGF), epidermalni faktor rasta (EGF), α- i P-transformirajući faktori rasta (TGF), uključeni su u regulaciju angiogeneze na jedan način ili drugo.), čimbenik rasta endotelnih stanica trombocita/timidin fosforilaze, čimbenik nekroze tumora, interleukini, itd. Međutim, najvažniji pozitivni regulator angiogeneze je nedvojbeno vaskularni endotelni čimbenik rasta (VEGF), koji se naziva i faktor vaskularne propusnosti. Jedinstvenost ovog proteina leži u činjenici da je, za razliku od svih ostalih čimbenika rasta, mitogen samo u odnosu na endotelne stanice, iako noviji podaci pokazuju da autokrini

učinak VEGF-a na tumorske stanice koje ga proizvode.

VEGF je homodimerni, visoko glikozilirani protein s mol. težine 46-48 ^a, koji postoji u najmanje pet izoformi sa sličnim biološkim djelovanjem, ali značajno različitim u bioraspoloživosti. Bioraspoloživost VEGF-a uvelike je određena veličinom molekule i regulirana je na genetskoj razini tijekom alternativnog spajanja mRNA, kao i epigenomski tijekom proteolitičkog cijepanja sintetiziranih molekula uz sudjelovanje aktivacijskog sustava plazminogena. Ključni regulator rasta krvnih žila je VEGF A, dok VEGF C prvenstveno regulira limfangiogenezu. Glavni topljivi oblici VEGF A su molekule veličine 121 i 165 aminokiselinskih ostataka, a ujedno su i glavni biološki aktivni oblici VEGF. U tkivima se smatra da je glavni izooblik VEGF-a VEGF-165.

Na površini endotelnih stanica postoje 3 receptora za VEGF, koji su tipični receptor tirozin kinaze. VEGF receptor tipa 1 (VEGFR1) produkt je gena flt-1, receptor tipa 2 (VEGFR2) naziva se KDR i ljudski je homolog produkta gena mišjeg flk-1, i konačno receptor tipa 3 (VEGFR3) je produkt gena flt-4 . Za razliku od VEGFR1 i 2, on ne stupa u interakciju s klasičnim VEGF (VEGF A), već s njegovim homologom -VEGF C. Svi receptori su transmembranski glikoproteini s mol. težine 170235 ^a. Učinkovito vezanje VEGF-a na receptore zahtijeva njegovu interakciju s heparinu sličnim komponentama izvanstaničnog matriksa.

Uz kaskadu protein kinaze aktivirane mitogenom, zajedničku većini receptorskih kinaza, koja regulira ekspresiju gena povezanih s proliferacijom, najvažniji geni koje regulira VEGF u endotelnim stanicama uključuju c-ets-1 protoonkogen, koji kodira transkripcijski faktor Ets-1. Studije koje su koristile in situ hibridizaciju pokazale su da se c-ets-1 eksprimira u endotelnim stanicama tijekom ranih faza stvaranja krvi.

venske žile. Njegov produkt Ets-1 potiče manifestaciju angiogenog fenotipa ovih stanica, aktivirajući transkripciju gena i naknadnu sintezu proteina najvažnijih proteaza koje razgrađuju izvanstanični matriks (ECM), - aktivator plazminogena tipa urokinaze, stromelizin, kolagenaza 1, MMP-1, 3 i 9, kao i p2-integrin. Ovi učinci postižu najviše 2 sata nakon dodatka VEGF (kao i drugih angiogenih čimbenika - cFGF, oFGF i EGF) i inhibiraju ih antisense oligonukleotidi za ets-1. Aktivacija proteaza ima tri važne posljedice za poticanje angiogeneze: olakšava dezintegraciju endotelnih stanica i njihovu invaziju u bazalni sloj krvnih žila, stvara produkte razgradnje ECM-a koji potiču kemotaksu endotelnih stanica, te također aktivira i mobilizira faktore rasta koji se nalaze u ECM.

Uloga VEGF u regulaciji angiogeneze kod raka dojke. Prvi dokaz o povezanosti ekspresije VEGF-a i aktivnosti angiogeneze u tumorima dojke dobiven je iz kliničkog materijala i objavljen 1994.-1995. skupina japanskih istraživača. U prvoj studiji, provedenoj imunohistokemijom i koja je uključivala 103 pacijentice s rakom dojke, pokazali su da su gustoća mikrožila i njihov rast, određeni imunokemijskim bojanjem za antigen faktora VIII, značajno veći u tumorima s intenzivnim bojenjem na VEGF nego u tumorima sa slabim bojenjem . VEGF je lokaliziran pretežno u citoplazmi tumorskih stanica. Naknadno su proširili ispitivanu skupinu pacijenata na 328 osoba i, potvrdivši gore navedene obrasce, također pokazali da je ekspresija VEGF-a u korelaciji s ekspresijom drugog angiogenog čimbenika - faktora rasta endotelnih stanica izvedenog iz trombocita. Kasnije su ovi autori proveli kvantitativnu enzimski imunosorbentnu analizu sadržaja VEGF u tkivima primarnog raka dojke i pokazali da je koncentracija VEGF u visoko vaskulariziranim tumorima značajno viša nego u slabo vaskulariziranim. Međutim, nije pronađena povezanost između razina VEGF-a u tkivima i dva druga potencijalno angiogena čimbenika - oFGF-a i faktora rasta hepatocita. Koncentracije ova dva faktora također nisu korelirale s parametrima gustoće mikrožila.

Dobiveni su i zanimljivi podaci. Koristeći imunohistokemijsku metodu, usporedili su ekspresiju VEGF-a, njegovog receptora flt-1, također oFGF-a i α- i P-TGF-a u raku dojke i okolnom normalnom tkivu dojke. Ispostavilo se da je od svih ispitivanih parametara jedino ekspresija VEGF bila značajno povećana u tumorskim stanicama u usporedbi s normalnim. Povećanje ekspresije VEGF u tkivu raka dojke u usporedbi s netumorskim tkivom dojke također je dokazano metodama RNA hibridizacije. Sve ove studije pružile su prve dokaze o važnoj ulozi VEGF-a u neoangiogenezi raka dojke i njegovoj važnosti za rast tumora. Kako bi se izravnije dokazala ova hipoteza, bile su potrebne eksperimentalne studije kako bi se potvrdio učinak VEGF-a koji proizvode stanice raka dojke na angiogenezu. Jedan od prvih takvih dokaza može se smatrati djelom

H. Zhang i sur. , u kojem je gen VEGF-121 transfektiran u estrogen-

ovisna stanična linija raka dojke MCF-7. Ekspresija i lučenje VEGF-a od strane transfektiranih stanica (V12) potvrđeno je trima neovisnim metodama: kompetitivnim testom radioreceptora,

stimulacija rasta ljudskih endotelnih stanica in vitro i aktivacija angiogeneze u rožnici kunića. Kada su transplantirane u gole miševe, stanice klona V12 proizvele su više vaskularizirane tumore s heterogenijom distribucijom krvnih žila od roditeljskih stanica MCF-7. Brzina rasta tumora nastalih iz stanica V12 bila je veća nego kod tumora iz izvorne stanične linije, dok je hormonska ovisnost stanica i njihova osjetljivost na tamoksifen bila očuvana. Tako je pokazano da stanice raka dojke koje stalno proizvode VEGF imaju određene prednosti u rastu.

Još jedan dokaz utjecaja VEGF-a na rast i metastaziranje raka dojke su pokusi s antitijelima na ovaj faktor. Tako je u pokusima na miševima sa spontanim rakom dojke, karakteriziranim visokom učestalošću metastaza u plućima, pokazano da poliklonska protutijela na VEGF inhibiraju rast tumora za 44% i smanjuju broj i veličinu plućnih metastaza za 73 i 84% , odnosno.

Zanimljiv model za ispitivanje angiogenog potencijala različitih tkiva dojke in vivo razvili su H. Lichtenbeld i sur. . Stavili su komadiće tumora i normalnog tkiva dojke u komoru formiranu od dorzalnog kožnog nabora golih miševa i procijenili indukciju angiogeneze. Utvrđeno je da svi uzorci raka dojke, kao i tkiva dojke s hiperplazijom i apokrinom metaplazijom, značajno aktiviraju angiogenezu. Histološki nepromijenjena područja tkiva dojke pacijentica s rakom dojke stimulirala su angiogenezu u 66% slučajeva, a tkivo zdrave žlijezde dobiveno iz estetske operacije, nije utjecao na angiogenezu. U svim slučajevima, indukcija angiogeneze dogodila se paralelno s proizvodnjom VEGF-a od strane stanica tumora ili dojke.

Klasični model regulacije angiogeneze kod raka dojke (kao i kod bilo kojeg drugog tumora) predviđa prisutnost parakrinog sustava u kojem faktor rasta (VEGF) proizvode tumorske stanice, a njegovi receptori koji percipiraju signal nalaze se na vaskularnom endotelu. Stanice. Postojanje takvog parakrinog sustava kod raka dojke dobro ilustriraju podaci L. Brown i sur. , koji je proučavao uzorke tkiva 68 pacijentica s rakom dojke koristeći RNA in situ hibridizaciju i pokazao da u stanicama invazivnog, metastatskog i intraduktalnog karcinoma dojke postoji izražena ekspresija VEGF, au vaskularnim endotelnim stanicama koje prodiru u ove tumore postoji izražena ekspresija VEGF-a. ekspresija VEGFR1 i VEGFR2. Dobiveni su slični podaci

A. Kranz i sur. međutim, ti su autori također pronašli VEGFR2 na duktalnim epitelnim stanicama dojke. Postoje i drugi dokazi da stanice raka dojke sadrže VEGF receptore, a razina ekspresije VEGF i VEGFR2 korelira s indeksom proliferacije tumorskih stanica, određenim ekspresijom Ki-67 antigena. Pokazalo se da i tumorske i stromalne stanice izolirane iz primarnih karcinoma dojke kod ljudi proizvode VEGF in vitro, a njegove razine

proizvodnja je značajno veća od one odgovarajućih stanica izoliranih iz normalnih mliječnih žlijezda. pri čemu PCR metoda analiza je pokazala da VEGFR2 prevladava u tumorskim stanicama, a samo VEGFR1 je izražen u stromalnim stanicama. Dakle, osim svoje izravne funkcije - stimulacije neangiogeneze, VEGF u raku dojke može imati i ulogu auto/parakrinog regulatora proliferacije tumorskih i/ili stromalnih stanica.

Pretpostavlja se da VEGF može igrati još jednu ulogu u raku dojke: preko flt-1 receptora stimulira migraciju makrofaga u tumorsko tkivo, koji su, pak, stimulatori aniogeneze, jer sintetiziraju različite angiogene čimbenike, uklj. i sam VEGF. Konkretno, R. Leek i sur. , ispitavši uzorke tkiva 96 pacijenata s rakom dojke, pokazao je pozitivnu korelaciju između indeksa infiltracije tumorskog tkiva makrofagima i razine ekspresije VEGF.

Izlučivanje VEGF iz stanica raka dojke inducirano je različitim vanjskim i unutarnjim čimbenicima. P. Scott i sur. , proučavajući utjecaj hipoksije, hipoglikemije, kiselosti, ženskih spolnih steroidnih hormona i vitamina D na ekspresiju 4 glavne izoforme VEGF-a od strane kultiviranih stanica raka dojke s različitim biološkim fenotipovima, pokazalo je da se te stanice značajno razlikuju u bazalnoj ekspresiji VEGF mRNA te u svojoj osjetljivosti na razne podražaje. U isto vrijeme, pokazalo se da je hipoksija najsnažniji stimulus koji izaziva VEGF za sve tipove stanica, a steroidni hormoni nisu imali praktički nikakav učinak na ekspresiju VEGF. R. Bos i sur. pokazalo je da u stimulaciji neoangiogeneze pod utjecajem hipoksije važnu ulogu ima HIF-1, transkripcijski faktor induciran u uvjetima hipoksije, čija visoka razina u tkivu raka dojke korelira s visokim indeksom proliferacije, povećanom ekspresijom VEGF i estrogenski receptori (ER). Ekspresija HIF-1 i VEGF u stanicama raka dojke nije povezana s razinom ekspresije induktora apoptoze p53. Istodobno, inhibitor apoptoze bcl-2 pojačava stimulirajući učinak hipoksije na sintezu VEGF u stanicama raka dojke. Hibridizacijska analiza pokazala je da stanični klonovi MCF-7 s prekomjernom ekspresijom bcl-2 i povećanim metastatskim potencijalom i otpornošću na adriamicin imaju višu razinu ekspresije mRNA najangiogenijih izoformi VEGF - VEGF-121 i VEGF-165 - od originalnog MCF-klona 7. U in vivo eksperimentima, bcl-2-transfektirane stanice formirale su tumore s većim stupnjem vaskularizacije i većom ekspresijom VEGF nego roditeljske stanice.

S druge strane, pokazalo se da VEGF, koji je čimbenik preživljavanja endotelnih stanica, ne samo da potiče njihovu proliferaciju, već i potiskuje apoptozu inducirajući ekspresiju bcl-2. Zanimljivo, VEGF je imao slično djelovanje i na stanice raka dojke, tj. bio je anti-apoptotski faktor ne samo za endotelne stanice, već i za same tumorske stanice.

Razni faktori rasta i signalni sustavi uključeni su u regulaciju ekspresije VEGF u stanicama raka dojke. Posebno je nekoliko studija pokazalo važnu ulogu erbB obitelji receptorskih tirozin kinaza i nekih njihovih liganada. Tako su L. Yen i sur. ispitivanjem panela staničnih linija

Rak dojke sa stabilnom prekomjernom ekspresijom "receptora upravitelja" erbB-2 bez liganda pokazao je da heregulin-P1, u interakciji s receptorima erbB-3 i erbB-4, inducira izlučivanje VEGF u većini proučavanih staničnih linija raka dojke, ali ne u normalnim stanicama dojke žlijezde. Bazalno izlučivanje VEGF-a bilo je povećano u stanicama s povišenim razinama erbB-2, au stanicama T47D s funkcionalno inaktiviranim erbB-2 smanjeno je ne samo bazalno izlučivanje VEGF-a, već i njegova indukcija heregulinom. Naknadno je pokazano da učinak heregulina na sintezu VEGF-a uključuje jedan od klasičnih signalnih putova koji uključuju fosfatidilinozitol 3-kinazu i protein kinazu B (Akt), nakon čega slijedi indukcija transkripcijskog faktora HIF-1, koji stimulira ekspresiju VEGF gena.

Regulatori ekspresije VEGF u stanicama raka dojke očito su također neki faktori rasta iz obitelji TGF-β. Koncentracije TGF-P1 i VEGF u tumorima i krvnom serumu pacijenata oboljelih od raka dojke pozitivno su korelirale jedna s drugom, au in vitro pokusima, TGF-P1 je inducirao proizvodnju VEGF-a u uzgojenim stanicama MDA-MB-231. Drugo istraživanje pokazalo je da je istodobna visoka ekspresija TGF-β2 i njegovih receptora karakteristična za tumore s velikom gustoćom mikrožila.

Do sada je pitanje hormonske regulacije sinteze VEGF u stanicama raka dojke spolnim steroidima, posebno estrogenima, ostalo kontroverzno. Iako je indukcija VEGF-posredovane angiogeneze u endometriju pomoću estrogena gotovo sigurna, postojanje sličnog mehanizma kod raka dojke nije jasno dokazano. J. Rujhola i sur. korištenjem stanične kulture MCF-7 pokazalo je da 17P-estradiol (E2) uzrokuje dvofazno povećanje sinteze VEGF mRNA, praćeno nakupljanjem odgovarajućeg proteina u mediju kulture. Taj je učinak blokirao čisti antiestrogen ICI 182.780, što upućuje na sudjelovanje ER-a u njegovoj provedbi. U isto vrijeme, takvi klasični antiestrogeni kao što su tamoksifen i toremifen, koji imaju djelomični estrogenski učinak, ne samo da nisu inhibirali VEGF-inducirajuće djelovanje E2, već su i sami inducirali VEGF sintezu. Sudjelovanje RE u regulaciji sinteze VEGF u stanicama raka dojke potvrđeno je i molekularno biološkim studijama S. Hydera i sur. koji je pokazao da gen VEGF sadrži dvije sekvence koje su homologne klasičnim elementima osjetljivim na estrogen i specifično vežu oba oblika ER - ER-a i ER-r.

Međutim, čini se da priroda djelovanja estrogena i antiestrogena na sintezu VEGF ovisi o tipu stanica raka dojke. Tako su J. Kurebayashi i sur. opisao staničnu liniju humanog raka dojke KPL-1, čiji je rast bio stimuliran s ICI 182.780 i potisnut s E2 in vivo. U isto vrijeme, E2-propionat je potisnuo angiogenezu i potaknuo apoptozu u tumorima formiranim od stanica KPL-1. U uvjetima in vitro, E2 nije utjecao niti na sintezu VEGF-a niti na brzinu stanične proliferacije. Zanimljivo je da je ekspresija VEGF u KPL-1 stanicama inducirana medroksiprogesteron acetatom.

Poticajni učinak progestina na sintezu VEGF u stanicama raka dojke također su primijetili S. Hyder i sur. . Proučavajući staničnu liniju T47-D, otkrili su

je li progesteron ovisno o dozi povećao razinu VEGF-a u mediju kulture za 3-4 puta sa maksimalan učinak u koncentraciji od 10 nM. Istodobno, drugi steroidni hormoni (estrogeni, androgeni i glukokortikoidi) nisu utjecali na proizvodnju VEGF, a učinak progestina nije se očitovao u drugim staničnim linijama raka dojke - hormonski ovisnim MCF-7, ZR-75 i hormonu -neovisni MDA-MB^L Učinak progesterona na T47-stanice D je blokiran antiprogestinom RU-486, što ukazuje na uključenost klasičnog receptorskog mehanizma. Zanimljivo, prema K. Heer i sur. , razina VEGF u krvnom serumu žena značajno je smanjena u lutealnoj fazi menstrualnog ciklusa i u obrnuti odnos na razinu progesterona u krvnom serumu. Serum dobiven tijekom tog razdoblja stimulirao je proizvodnju VEGF-a stanicama MCF-7 u manjoj mjeri nego serum dobiven u prvoj fazi menstrualnog ciklusa.

Zanimljive obrasce u vezi s hormonskom regulacijom angiogeneze u mliječnoj žlijezdi pokazali su R. Greb i sur. . Proučavajući ekspresiju glavnih izoformi VEGF-A pomoću PCR analize u tumorima i okolnom nepromijenjenom tkivu dojke 19 pacijentica s rakom dojke, otkrili su da su razine ekspresije VEGF u nepromijenjenoj žlijezdi značajno više u pacijentica u premenopauzi nego u postmenopauzi bolesnika, a značajno se smanjuje s povećanjem dobi bolesnika. Istodobno, ekspresija VEGF-a u tumorskom tkivu nije ovisila o dobi i menopauzalnom statusu bolesnica. Autori vjeruju da je u normalnim mliječnim žlijezdama angiogeneza pod hormonskom kontrolom, ali tijekom maligne transformacije ta se kontrola gubi.

Osim najpoznatijeg i najraširenijeg angiogenog čimbenika VEGF-A, koji je gore opisan, postoji još nekoliko članova obitelji VEGF - VEGF-B, C i D. Funkcija VEGF-C je do danas najjasnije definirana: vjeruje se da stimulira limfangiogenezu interakcijom s receptorima VEGF tipa 3 (flt-4), koji se nalaze na endotelnim stanicama limfnih žila. Eksperimentalne studije na golim miševima pomoću novog limfnog endotelnog markera LYVE-1 pokazale su da prekomjerna ekspresija VEGF-C u stanicama raka dojke značajno pojačava intratumorsku limfangiogenezu i stimulira stvaranje metastaza u regionalnim limfnim čvorovima i plućima. Prethodno su J. Kurebayashi i sur. pomoću PCR analize dokazano je da se, za razliku od VEGF-A i B, koji su prisutni u tkivu raka dojke bez obzira na njegov stadij, VEGF-C otkriva samo u tumorima koji su metastazirali u limfne čvorove, a VEGF-D se otkriva samo u upalnim rak dojke. S druge strane, prema R. Valtola i sur. Ekspresija VEGF-C receptora doista je povećana u invazivnim i intraduktalnim karcinomima dojke u usporedbi s normalnom dojkom i fibroadenomima, ali povećana ekspresija VEGF receptora tipa 3 primijećena je na endotelnim stanicama krvnih žila, a ne limfnih žila. S tim u vezi, autori smatraju da je VEGF-C, kao i VEGF-A, angiogenetski faktor prvenstveno za krvne žile, iako ne isključuju njegovo sudjelovanje u regulaciji limfangiogeneze.

Općenito, pozornost se pridaje ulozi limfangiogeneze i ligand-receptorskih sustava koji je reguliraju u procesima metastaziranja solidnih tumora, a posebno raka dojke. U zadnje vrijeme sve više pažnje.

Prema tome, VEGF igra važnu i raznoliku ulogu u raku dojke, stimulirajući rast tumora i širenje kroz složene parakrine i autokrine učinke kako izravno na endotel krvnih žila tako i na tumorske stanice i stromu tumora, makrofage koji infiltriraju tumor i stanice limfnih žila. Sve ovo nam omogućuje da VEGF smatramo vrlo obećavajućim biološkim markerom za prognozu raka dojke i jednim od glavnih ciljeva antiangiogene antitumorske terapije.

Klinički značaj određivanja VEGF kod raka dojke. Gore smo već citirali niz radova u kojima se, na temelju kliničkog materijala, razne metode(imunohistokemijski, imunoenzimski, hibridizacija) pokazali su povećanu ekspresiju VEGF u tkivu raka dojke i njegovu povezanost s tradicionalnim pokazateljima koji karakteriziraju aktivnost neoangiogeneze u tumorskom tkivu. Sveukupno, prema rezultatima analize baze podataka Medline, studiju kliničkog značaja razine tkivnog VEGF-a kod raka dojke provelo je 14 skupina istraživača. Ponovno treba napomenuti da gotovo svi istraživači koji su radili takve usporedbe, neovisno o korištenim metodama, bilježe povećanje ekspresije VEGF u tkivu raka dojke u usporedbi s okolnim histološki nepromijenjenim tkivom dojke, kao i s benignim tumorima. Također nema kontroverzi u pogledu izravne korelacije razine ekspresije VEGF s aktivnošću neoangiogeneze u tumorskom tkivu.

Po prvi put, nepovoljnu prognostičku vrijednost visoke ekspresije VEGF kod raka dojke uočili su M. Toi i sur. . Retrospektivnom analizom rezultata promatranja 328 bolesnika u čijim je tumorima ekspresija VEGF procijenjena imunohistokemijskom metodom, pokazali su da je u univarijatnoj analizi prognoza preživljenja bez relapsa u bolesnika s VEGF-pozitivnim tumorima značajno lošija nego u bolesnika s VEGF-negativni tumori. Važnost VEGF-a za predviđanje preživljenja bez bolesti također su pokazali M. Relf i sur. , koji je odredio ekspresiju odgovarajuće RNA u tumorskim tkivima 64 pacijentice s rakom dojke. Istodobno, prema A. Obermairu i sur. , razina VEGF-a mjerena enzimskim imunotestom nije imala značajan učinak na prognozu preživljenja bez relapsa kod 89 pacijentica s rakom dojke koje su pregledali.

Najzanimljivije bi trebale biti one studije u kojima se procjenjivala prognostička vrijednost VEGF-a u različitim kliničkim skupinama bolesnica s rakom dojke, uzimajući u obzir liječenje. Rezultate takve detaljne analize objavile su dvije skupine: G. Gasparini i sur. i B. Linderholm i sur. . U radu iz 1997. G. Gasparini i sur. prikazao je rezultate kvantitativnog enzimskog imunosorbentnog određivanja koncentracije VEGF u citosolima tumora 260 bolesnica s karcinomom dojke bez metastaza u limfne čvorove. Bolesnici su praćeni u prosjeku 66 mjeseci. U isto vrijeme, VEGF u širokom rasponu

koncentracijska zona (od 5 do 6523 pg/mg proteina) nađena je u 95% tumora. Njegova razina nije korelirala s poznatim prognostičkim čimbenicima: dobi i menopauzalnim statusom bolesnica, histološkim tipom, veličinom i receptorskim statusom tumora, ali se pokazala statistički značajnim prediktorom preživljenja bez relapsa i ukupnog preživljenja prema rezultatima univarijantnu i multivarijantnu analizu. Stoga je citosolna razina VEGF pokazatelj prognoze u bolesnika s ranim stadijima raka dojke, što omogućuje formiranje skupine s povećanim rizikom od recidiva i metastaza.

U kasnijoj publikaciji ove grupe autora, komparativna procjena prognostički značaj VEGF i drugog angiogenog čimbenika timidin fosforilaze (TF - platelet-derived endothelial cell growth factor) u bolesnica s rakom dojke s metastazama u limfne čvorove koje su primale kemoterapiju prema režimu CMP (137 bolesnica) ili hormonsku terapiju tamoksifenom (164) pacijenata). Citosolne koncentracije VEGF bile su slične u obje skupine. U skupini bolesnica koje su primale tamoksifen, razina VEGF-a bila je u pozitivnoj korelaciji s dobi bolesnica i bila je obrnuto proporcionalna razini receptora za steroidne hormone. U ovoj skupini je razina VEGF-a, uz broj zahvaćenih limfnih čvorova te koncentracije ER i RP, bila značajan neovisni prognostički čimbenik u rezultatima univarijatne i multivarijatne analize. Najbolje rezultate liječenja tamoksifenom treba očekivati ​​u bolesnika s niska razina VEGF u tumoru i zahvaćenost manje od tri limfna čvora tumorskim procesom. Niska razina VEGF pokazala se neovisnim čimbenikom povoljne prognoze u skupini bolesnika na kemoterapiji. U ovoj skupini TF je također značajan prognostički čimbenik, a prognoza je povoljna s visokim razinama ovog proteina.

U jednoj od najnovijih studija O. Oa8ragipii a1. Multifaktorski prognostički model za bolesnice s ranim stadijima raka dojke uključivao je i prirodne inhibitore angiogeneze - trombospondine 1 i 2, ali njihov doprinos u predviđanju bezrelapsnog i ukupnog preživljenja nije bio statistički značajan.

Dakle, prema podacima ove istraživačke skupine, sažetim u nekoliko preglednih članaka, VEGF je prognostički pokazatelj aktivnosti angiogeneze kod raka dojke koji najviše obećava. Njegova visoka razina ukazuje

o nepovoljnoj prognozi i ranog i uznapredovalog karcinoma dojke. Od ostalih regulatora angiogeneze jedino TF daje određeni doprinos prognozi, a njegovo se značenje očituje samo tijekom kemoterapije uznapredovalog raka dojke.

Prognostičku vrijednost VEGF-a kod neuznapredovalog karcinoma dojke također su proučavali i potvrdili B. biliary et al. . Oni su enzimskim imunološkim testom odredili sadržaj VEGF-a u citosolima tumora 525 bolesnika bez metastaza u limfnim čvorovima (T1.2K0M0), od kojih 500 nije bilo postoperativno liječeno. Medijan praćenja bio je 46 mjeseci. Za razliku od prethodno citiranih istraživača, oni su pronašli izravnu korelaciju između razine VEGF-a i veličine tumora, kao i stupnja njegove malignosti te obrnutu korelaciju.

lacija razina VEGF i RE. Stopa preživljenja pacijenata s koncentracijama VEGF u citosolu ispod srednje razine (2,4 pg/µg DNA) bila je značajno viša nego u bolesnika s nižim razinama VEGF. U multivarijatnoj analizi, razina VEGF bila je najznačajniji neovisni prognostički čimbenik, superioran u odnosu na druge poznate pokazatelje. Značajno smanjenje preživljenja s visokom razinom VEGF u tumoru također je nađeno u prognostički povoljnoj skupini ER-pozitivnih bolesnika.

Prema istim autorima, visoka razina VEGF također ima nepovoljnu prognostičku vrijednost kada pacijentice s ranim stadijima raka dojke primaju lokoreginalnu radioterapiju. Pregledana su 302 bolesnika s medijanom praćenja od 56 mjeseci. VEGF je bio jedini neovisni prediktor ukupnog preživljenja (relativni rizik 3,6) u cijeloj skupini, kao i preživljenja bez relapsa u prognostički najpovoljnijim skupinama bolesnika s malim tumorima (T1) i ER-pozitivnim tumorima. Autori sugeriraju da visoke intratumorske razine VEGF mogu odgovarati radiorezistentnom fenotipu i ukazivati ​​na potrebu za dodatnim sustavnim liječenjem.

B. Linderholm i sur. također je ispitao skupinu od 362 pacijentice s rakom dojke s metastazama u limfnim čvorovima, od kojih je 250 primalo adjuvantnu hormonsku terapiju, a 112 - adjuvantnu kemoterapiju. U univarijantnoj analizi VEGF se pokazao značajnim prediktorom preživljenja bez bolesti i ukupnog preživljenja u cjelokupnoj populaciji pacijenata, kao i u skupini koja je primala endokrinu terapiju. U skupini bolesnika na kemoterapiji razina VEGF-a utjecala je samo na ukupno preživljenje. U multivarijantnoj analizi, VEGF je ostao značajan samo za ukupno preživljenje.

Tako je ova skupina istraživača pokazala i prognostički značaj VEGF-a za različite kliničke skupine bolesnica s rakom dojke, što je sažeto u publikaciji iz 2000. godine koja uključuje podatke o 83 pacijentice s različitim stadijima raka dojke. Ovaj je rad također pokazao prognostički značaj istovremenog proučavanja VEGF-a i mutantnog p53. Relativni rizik od smrti porastao je 2,7 puta u skupini s visokim sadržajem VEGF i pozitivnim p53 i samo u

1.7 u skupinama s jednim od ovih nepovoljnih čimbenika.

U kooperativnoj studiji, koja je obuhvatila ukupno 495 bolesnika iz dvije različite klinike, na temelju podataka univarijatne i multivarijatne analize, koja je uz tradicionalne pokazatelje uključivala angiogenin, oFGF i aktivatore plazminogena, pokazalo se da je VEGF najvažniji prognostički parametar za bolesnice s karcinomom dojke bez metastaza u limfnim čvorovima. A nedavno je još jedna skupina istraživača potvrdila da intratumorska razina VEGF daje dodatni doprinos takozvanom Nottinghamskom prognostičkom indeksu, koji se koristi za formiranje visokorizičnih skupina među pacijenticama s ranim stadijima raka dojke.

Posebno mjesto zauzima studija J. Foekensa i sur. [b1], koji je odredio koncentraciju VEGF-a u konzerviranim ekstraktima metodom enzimskog imunološkog testa.

ukupno 845 pacijentica s uznapredovalim rakom dojke kod kojih se bolest vratila. 618 od tih bolesnica primalo je adjuvantnu postoperativnu hormonsku terapiju tamoksifenom, a 227 bolesnica primalo je postoperativnu kemoterapiju. Pokazalo se da je citosolna koncentracija VEGF u tumorima bolesnika u kojih je došlo do relapsa tijekom prve godine promatranja bila značajno viša nego u bolesnika s duljim razdobljem bez relapsa. Također je uočeno da je razina VEGF u primarnom tumoru viša u bolesnika s primarnim metastazama u unutarnje organe nego u bolesnika s metastazama u kostima i mekim tkivima. Visoke razine VEGF-a, prema univarijatnoj i multivarijatnoj analizi, pokazale su se neovisnim pokazateljem niske osjetljivosti i na tamoksifen i na kemoterapiju.

Općenito, 13 od 14 studija koje je objavilo 8 neovisnih skupina istraživača pokazalo je da je visoka razina VEGF-a neovisni čimbenik u lošoj prognozi raka dojke u ranim stadijima i/ili njegovoj niskoj osjetljivosti na tradicionalne vrste hormona ili kemoterapije u uznapredovali rak dojke. U tom smislu, predloženo je da se razmotri mogućnost uključivanja različitih antiangiogenih lijekova u režime adjuvantnog liječenja pacijenata s visokim intratumorskim koncentracijama VEGF. Treba napomenuti da jedinstveni metodološki pristupi i kriteriji za identifikaciju pacijenata s visokim razinama VEGF-a još nisu razvijeni, te će za njihovo stvaranje biti potrebne daljnje kooperativne studije.

Paralelno s proučavanjem kliničke važnosti tkivne razine VEGF u raku dojke, postavlja se pitanje odražava li se povećana ekspresija VEGF u tumoru na razinu ovog proteina u serumu/plazmi i je li koncentracija cirkulirajućeg VEGF proučava se odgovarajuća karakteristika njegovog sadržaja i aktivnosti angiogeneze u tumoru. Godine 1996.-1997 Objavljene su prve studije koje su pokazale povećanje razine VEGF u krvi oboljelih od raka. Tako su Y. Yamamoto i sur. [b2], pregledavši veliku skupinu pacijenata i darivatelja, uključujući 137 pacijentica s rakom dojke, otkrili su da je razina VEGF u krvnom serumu 8,8% bolesnica s rakom dojke premašila njihov utvrđeni prag od 180 pg/ml. Razina VEGF u serumu korelirala je s opsegom procesa i s razinom ekspresije VEGF u tumorskom tkivu, a glavni izooblik VEGF u serumu bio je VEGF-^5.

L. Dirix i sur. [b3] ispitivali su skupinu od 132 bolesnika s metastatskim karcinomom s različitim primarnim dijagnozama. Smatrali su da je razina VEGF povišena ako je prelazila 95% interval pouzdanosti kontrolne skupine i iznosila 500 pg/ml. VEGF je bio povišen u 57% bolesnika s neliječenim metastatskim rakom, bez obzira na mjesto. Tijekom liječenja, razina VEGF-a porasla je u 2/3 bolesnika s progresijom bolesti iu manje od 10% bolesnika s pozitivnom dinamikom.

P. Salven i sur. [b4] također je pokazalo da je u različitim tipovima tumora (uključujući rak dojke), serumska razina VEGF-a kod diseminiranog karcinoma (171,711 pg/ml; medijan - 214 pg/ml) značajno viša nego u zdravih darivatelja (1-177 pg /ml; medijan - 17 pg/ml) i u bolesnika s lokaliziranim procesom (8-664 pg/ml; medijan - 158 pg/ml). U 74% neliječenih bolesnika

U bolesnika s diseminiranim karcinomom razina VEGF-a u krvnom serumu prelazi 200 pg/ml, a uspješnim liječenjem se smanjuje. Slične obrasce primijetili su A. Kraft i sur. [b5]: prema njihovim podacima, povišena razina VEGF-a uočena je u serumu 0-2G% bolesnika s lokaliziranim tumorskim procesom i 11-65% bolesnika s metastatskim procesom. Međutim, treba napomenuti da su u ovoj studiji razine VEGF-a u zdravih darivatelja (30-1752 pg/ml; medijan - 294 pg/ml; gornji 95% interval pouzdanosti - 883 pg/ml) bile značajno više od onih koje su prijavili drugi autori. U ovoj studiji, kao iu radu B. Zebrowskog i sur. [bb], dokazano je značajno povećanje koncentracije VEGF u ascitnim tekućinama kod pacijenata oboljelih od raka u usporedbi s ascitesom netumorskog podrijetla.

U novijem radu, P. Salven et al. [b7] prikazuje rezultate određivanja koncentracije VEGF u krvnom serumu 105 bolesnica s benignim i malignim tumorom dojke. Pokazalo se da su razine VEGF u krvnom serumu pacijenata s metastatskim rakom dojke (7-1347 pg/ml; medijan - 186 pg/ml) značajno povećane u usporedbi s pacijentima s benignim tumorima (2-328 pg/ml; medijan -57 pg/ml). Razine VEGF-a u bolesnica s lokalno uznapredovalim rakom dojke (11-539 pg/ml; medijan - 104 pg/ml) također su više nego u bolesnica s benignim tumorima, ali razlika nije statistički značajna. U bolesnika s metastatskim rakom koji su primali specifično liječenje, razina VEGF-a bila je znatno niža nego u bolesnika koji su primali samo simptomatsko liječenje. Također je zanimljivo da je kod lokalno uznapredovalog procesa razina VEGF u krvnom serumu bolesnika s invazivnim duktalnim karcinomom (medijan - 107 pg/ml) bila značajno viša nego u bolesnika s invazivnim lobularnim karcinomom (medijan - 44 pg/ml). ), a kod potonjih je čak niža nego kod benignih tumora. Ovo se opažanje dobro slaže s podacima A. Lee i sur. [b8], koji je pokazao da je u tkivu duktalnog karcinoma dojke sadržaj VEGF mRNA i proteina značajno veći nego u tkivu lobularnog karcinoma. Istodobno, duktalni i lobularni karcinom nisu se razlikovali u gustoći mikrožila, a samo je kod duktalnog karcinoma postojala izravna korelacija između razine VEGF mRNA i proteina i pokazatelja gustoće žila. Može se pretpostaviti da je VEGF regulator angiogeneze prvenstveno kod duktalnog raka dojke.

Zanimljive su komparativne studije u kojima je istovremeno određivan sadržaj/ekspresija VEGF u tumorskom tkivu i krvnom serumu. G. Callagy i sur. [b9], koji su određivali tkivnu ekspresiju VEGF-a imunohistokemijskom metodom, došli su do zaključka da je upravo taj pokazatelj, a ne koncentracija VEGF-a u serumu, u korelaciji s gustoćom mikrožila i stadijem raka dojke te je stoga pouzdaniji prognostički faktor od razine VEGF u krvnom serumu. Također nisu pronašli vezu između serumskih razina VEGF-a i njegove ekspresije u tumoru.

Najreprezentativniju komparativnu studiju proveli su J. Adams i sur. . Odredili su sadržaj VEGF u serumu i plazmi te ekspresiju VEGF u tumorima (imunohistokemijski) 201 pacijentice s lokaliziranim i uznapredovalim karcinomom dojke, benignim tumorima dojke.

šume i zdrave žene. Kod metastatskog raka dojke zabilježen je značajan porast razine VEGF-a u plazmi i serumu u usporedbi s normalnom. Sadržaj VEGF u krvnoj plazmi u bolesnika s metastatskim rakom dojke također je značajno povećan u usporedbi s bolesnicima s benignim tumorima i lokaliziranim rakom dojke. Kod lokaliziranog raka dojke uočen je samo porast razine VEGF u krvnoj plazmi u odnosu na kontrolu. Autori vjeruju da mjerenje VEGF u krvnoj plazmi u velikoj mjeri odražava njegovu proizvodnju od strane tumora, budući da je serumski VEGF pretežno trombocitnog podrijetla. Paradoksalno, najviše razine VEGF-a u serumu i plazmi pronađene su kod pacijenata s rakom dojke koji su bili u remisiji tijekom liječenja tamoksifenom. Razine cirkulirajućeg VEGF-a nisu bile u korelaciji ni s jednim od poznatih kliničko-patoloških čimbenika, uključujući mikrovaskularnu gustoću i tkivnu ekspresiju UROR-a.

Stoga je otvorena mogućnost korištenja razine VEGF-a u krvi (i serumu i plazmi) kao adekvatne zamjene za tkivnu ekspresiju ovog proteina pri procjeni aktivnosti angiogeneze kod raka dojke te predviđanju ishoda bolesti i učinkovitosti terapije. još nije dokazano.

ECEC-ovisna angiogeneza kao cilj za antitumorsku terapiju raka dojke. S obzirom na ključnu ulogu angiogeneze u održavanju rasta i širenja raka dojke i ključnu ulogu VEGF-a u ovom procesu, mnogi su autori odavno zaključili da ciljana supresija ekspresije VEGF-a i/ili njegovih učinaka može biti obećavajući pristup razvoju raka dojke. novi režimi adjuvantnog liječenja ove bolesti. Predloženo je korištenje tvari koje relativno nespecifično blokiraju interakciju različitih faktora rasta s receptorima tirozin kinaze, posebno manje toksičnih analoga suramina, kao antiangiogenih sredstava. Također se pretpostavljalo da bi antiangiogena sredstva mogla biti posebno učinkovita u kombinaciji s lijekovima aktiviranim u uvjetima hipoksije, budući da bi supresija angiogeneze stvorila uvjete pogodne za aktivaciju tih lijekova. Poseban naglasak stavljen je na činjenicu da će čisto antiangiogena terapija najvjerojatnije dovesti ne do regresije tumora, već do zaustavljanja njegovog daljnjeg rasta. S tim u vezi, ukazano je na potrebu razvoja kliničkih i biokemijskih kriterija za procjenu učinkovitosti antiangiogenih lijekova.

Trenutno, samo u Sjedinjenim Državama, više od 20 lijekova koji na ovaj ili onaj način utječu na angiogenezu prolazi kroz klinička ispitivanja, uglavnom faza I. Među njima su vrlo specifični lijekovi kao što su monoklonska protutijela u VEOP (Genereil) i njegovim receptorima (IMC-1C11), inhibitori interne tirozin kinaze VEGF receptora (na primjer, 7B6474), blokatori VEGF mitogenog prijenosa signala (SIII668 i SV416), prirodni (Leova8-M ) i sintetski (Magita8la1, Propita8a1, VMB-275291, COb-3) inhibitori matričnih proteinaza, prirodni (angiostatin i endostatin) i sintetski (TYP-470) inhibitori proliferacije ili induktori apoptoze ( Combre8la1m) endotelnih stanica i

Također postoji niz lijekova s ​​različitim ili nejasnim mehanizmima djelovanja.

I Roictap dijeli antiangiogene lijekove na izravne i neizravne inhibitore angiogeneze. Izravne inhibitore naziva tvarima koje izravno utječu na endotelne stanice. To su već spomenuti angiostatin, endostatin, TYP-470, Cotchain, kao i takvi prirodni inhibitori angiogeneze kao što su trombospondini, faktor pigmentni epitel. Karakteristična značajka takvih lijekova je da oni, u pravilu, ne izazivaju rezistenciju u endotelnim stanicama i stoga se mogu koristiti dugo vremena. Neizravni inhibitori uključuju lijekove koji utječu na proizvodnju angiogenih čimbenika od strane tumorskih stanica ili blokiraju djelovanje tih čimbenika u jednoj ili drugoj fazi. To su monoklonska antitijela ili antisens nukleotidi na VEGF i njegove receptore. Budući da je djelovanje neizravnih inhibitora izravno povezano s tumorskom stanicom i njezinom sposobnošću da proizvodi angiogene čimbenike, vjerojatnost pojave rezistencije na te lijekove približno je ista kao i kod tradicionalnih antitumorskih lijekova.

Zanimanje za antiangiogenu antitumorsku terapiju trenutno je toliko veliko da se broj publikacija posvećenih pretkliničkim i kliničkim studijama u ovom području mjeri u stotinama, stoga ćemo se u ovom pregledu fokusirati samo na radove koji se izravno odnose na rak dojke.

Klinički najnapredniji je lijek s nepoznatim mehanizmom antiangiogenog djelovanja - talidomid. Sedamdesetih godina prošlog stoljeća korišten je kao sedativ i bio je zabranjen zbog svojih teratogenih nuspojava, koje su bile posljedica njegovih antiangiogenih svojstava. Trenutačno se pokušava iskoristiti antiangiogeni potencijal talidomida u liječenju zloćudnih tumora, a već je u fazi II kliničkih ispitivanja. Među 66 pacijenata uključenih u ovu studiju koji su primali 100 mg talidomida svake večeri, bilo je 12 pacijenata s rakom dojke. Nije bilo objektivnog odgovora na lijek u bolesnika s rakom dojke, iako je djelomičan odgovor ili stabilizacija primijećena u 6 od 18 bolesnika s rakom bubrega uključenih u istu studiju.

Istodobno, raniji pokusi indukcije angiogeneze u rožnici kunića pod utjecajem VEOP-producirajućeg klona stanica MCP-7 pokazali su da analog talidomida linomid u dozi od 100 mg/kg tjelesne težine učinkovito inhibira taj proces. .

M. A8apo e1 a1. , pokazalo je da anti-VEGF monoklonsko protutijelo MY833 potiskuje rast ksenografta ljudskog raka dojke u golih miševa. Međutim, inhibicijski učinak MY833 nije bio u korelaciji niti s količinom VEGF-a koju luči tumor niti s ekspresijom VEGF receptora. U drugim pokusima, prilikom presađivanja sferoida formiranih stanicama raka dojke linija MCP-7, 7YA-75 i BK-VYA-3 u potkožnu dorzalnu komoru atimičnih miševa, pokazalo se da monoklonsko protutijelo na VEGF A.4.6. 1 u dnevnoj dozi od 200 µg značajno potiskuje angiogenu aktivnost ovih staničnih linija i pojačava antitumorsku aktivnost doksorubicina u ovim modelima.

Značajno antitumorsko djelovanje na ksenografte raka dojke primijećeno je i kod specifičnog inhibitora niske molekularne težine vEGF receptora tirozin kinaze (oba tipa 1 i 2) - 7B4190. Jednokratna oralna primjena ovog lijeka u dozama koje nisu imale izravni antiproliferativni učinak na tumorske stanice značajno je suzbila rast ustanovljenih tumora veličine oko 0,5 cm3. Još jedan inhibitor tirozin kinaze ima antiangiogeno djelovanje protiv ksenografta raka dojke - dobro poznati lijek 7B1839 (Ige88a), koji je selektivni inhibitor EGF receptora tirozin kinaze i već prolazi klinička ispitivanja. Pretpostavlja se da ovaj lijek ne djeluje izravno na VEGF receptore, već suprimira indukciju sinteze VEGF pod utjecajem liganda EGF receptora. Očigledno, drugi blokator EGF-ovisnog puta prijenosa mitogenog signala, Herceptin, humanizirano monoklonsko protutijelo na Herb2/neu, ima sličan neizravan učinak na angiogenezu.

Lijekovi koji ometaju funkciju mikrotubula također su učinkoviti inhibitori angiogeneze. Tako je još 1997. godine Klauber N. eii a1. pokazalo je da 2-metoksiestradiol i taksol, koji imaju slična svojstva, inhibiraju VEGF-induciranu angiogenezu za 54 odnosno 37%. U isto vrijeme, 2-metoksiestradiol je suzbio rast ljudskog raka dojke implantiranog u atimične miševe za 60%. Antiangiogena svojstva taksola također je pokazala B. bau e1 a1. na miševima s dobro vaskulariziranim transgenim tumorom dojke MeH. Učinak je primijećen pri necitotoksičnim dozama taksola (3-6 mg/kg/dan) i bio je povezan sa supresijom lučenja VEGF.

Predloženo je da se ovo svojstvo taksola koristi za procjenu učinkovitosti liječenja pacijenata s metastatskim rakom dojke. Njihova studija uključila je 14 pacijenata koji su primali monoterapiju taksolom u dozi od 175 mg/m2 IV u tri ciklusa od po 21 dan. U svih bolesnika određena je serumska razina VEGF-a metodom enzimskog imunosorbensa prije početka liječenja i nakon svake od 21-dnevnih kura. Kod 3 bolesnika došlo je do djelomičnog odgovora na liječenje, kod 6 do stabilizacije i kod 5 do progresije bolesti. Serumske razine VEGF-a prije liječenja bile su značajno povišene u 8 od 14 pacijenata. Prosječna razina VEGF-a smanjila se nakon liječenja u bolesnika s djelomičnim učinkom i stabilizacijom i nije se značajno promijenila u bolesnika s progresijom. Štoviše, postotak normalizacije razine VEGF-a ili njegovog smanjenja za više od 50% bio je značajno viši u bolesnika s djelomičnim odgovorom (5/9) nego u bolesnika s progresijom (0/5). Autori vjeruju da stabilizirajući učinak taksola u bolesnika s uznapredovalim rakom dojke može biti povezan sa supresijom lučenja VEGF i, sukladno tome, inhibicijom angiogeneze.

Objavljeni pokusi na miševima s imunodeficijencijom pokazali su mogućnost korištenja genske terapije za suzbijanje angiogeneze i inhibiciju rasta raka dojke. Miševima sa zrelim Mca-4 tumorima dva puta je u razmaku od 7 dana ubrizgan plazmid koji sadrži gen za prirodni inhibitor angiogeneze endostatin. Otkriven je 14 dana nakon prve primjene

smanjenje težine tumora kod pokusnih miševa za 51% u odnosu na kontrolnu skupinu. Istodobno, povećanje udaljenosti između tumorskih stanica i najbližih krvnih žila, smanjenje ukupne gustoće krvnih žila i povećanje apoptoze uočeno je u tumorima koji sadrže i eksprimiraju endostatinski gen.

Drugi pristup genetskog inženjeringa antiangiogenoj terapiji raka dojke je upotreba anti-sens cDNA za VEGF. S.A. Im i sur. transficirane ljudske stanice raka dojke MDA231-MB linije s adenovirusnim vektorom koji sadrži istu cDNA za VEGF-165 (Ad5CMV-alphaVEGF). U in vitro sustavu, ova transfekcija je rezultirala smanjenim izlučivanjem VEGF bez značajnog utjecaja na rast stanica. Injekcija Ad5CMV-alphaVEGF in vivo u tumore formirane od MDA231-MB stanica u golim miševima rezultirala je supresijom rasta tumora, smanjenom ekspresijom VEGF proteina u tumorskom tkivu i smanjenom mikrovaskularnom gustoćom u usporedbi sa skupinom kojoj je ubrizgan vektor koji nije sadržavao anti- VEGF cDNA.

Time je eksperimentalno dokazana mogućnost primjene različitih vrsta izravne i neizravne antiangiogene terapije u liječenju bolesnica s rakom dojke. Nažalost, nijedna od ovih metoda još nije dokazala svoju učinkovitost u klinici. Štoviše, većina je autora sklona vjerovati da se antiangiogena terapija (osobito izravna), koja je za velike tumore pretežno citostatska, a ne citotoksična, ne bi trebala koristiti kao samostalna metoda liječenja, već kao važan dodatak standardnim terapijskim režimima.

KNJIŽEVNOST

1. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angiogeneza i fibrinolitički sustav // Semin. Thromb. Hemost. 1996. V. 22. br. 6. str. 517-524.

2. Ferrara N. Uloga faktora rasta vaskularnog endotela u patološkoj angiogenezi // Breast Cancer Res. Liječiti. 1995. V. 36. br. 2. str. 127137.

3. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Sudjeluje li transkripcijski faktor c-ets1 u regulaciji angiogeneze i invazije tumora? // Folia Biol. (Praha). 1994. V. 40. br. 5. str. 301-313.

4. Sato Y. Transkripcijski faktor ETS-1 kao molekularna meta za inhibiciju angiogeneze // Hum. Ćelija. 1998. V. 11. br. 4. str. 207-214.

5. Iwasaka C., Tanaka K., Abe M., Sato Y. Ets-1 regulira angiogenezu inducirajući ekspresiju aktivatora plazminogena tipa urokinaze i matrične metaloproteinaze-1 i migraciju vaskularnih endotelnih stanica // J. Cell Physiol . 1996. V. 169. br. 3. str. 522-531.

6. Mignatti P., Rifkin D.B. Aktivatori plazminogena i matrične metaloproteinaze u angiogenezi // Enzyme Protein. 1996. V. 49. P. 117-137.

7. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Povezanost ekspresije faktora rasta vaskularnog endotela s tumorskom angiogenezom i ranim relapsom primarnog raka dojke // Jpn. J. Cancer Res. 1994. V. 85. br. 10. str. 1045-1049.

8. Toi M., Inada K., Hoshina S., Suzuki H., Kondo S., Tominaga T. Faktor rasta vaskularnog endotela i faktor rasta endotelnih stanica izvedenih iz trombocita često se koeksprimiraju kod visoko vaskulariziranog raka dojke kod ljudi. Cancer Res. 1995. V. 1. br. 9. str. 961-964.

9. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Tumorska angiogeneza u raku dojke: njezina važnost kao prognostičkog pokazatelja i povezanost s ekspresijom faktora rasta vaskularnog endotela Breast Cancer Res. Liječiti. 1995. V. 36. br. 2. str. 193-204.

10. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Kvantitativna analiza faktora rasta vaskularnog endotela u primarnom raku dojke Rak. 1996. V. 77. br. 6. str. 1101-1106.

11. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Regulacija ekspresije endotelnog faktora rasta kod raka dojke // Gan To Kagaku Ryoho. 1996. V. 23. Suppl. 1. Str. 75-79.

12. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Ekspresija faktora rasta vaskularnog endotela, njegovih receptora i drugih angiogenih faktora

čimbenici raka dojke kod ljudi // Cancer Res. 1996. V. 56. br. 9. str. 2013-2016.

13. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Kitsuki H., Uchiyama A., Kuroki S., Tanaka M., Torisu M. Vaskularni endotelni faktor rasta i trombocitni faktor rasta potencijalni su angiogeni i metastatski čimbenici raka dojke kod ljudi // Surgery. 1996. V. 119. br. 3.

14. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Tsukahara Y., Kojima M., Uchiyama A., Kuroki S., Torisu M., Tanaka M. Procjena c-erbB2 i rasta vaskularnog endotela faktor ekspresije mRNA u aspiratima tanke igle iz ranih karcinoma dojke: prijeoperativno određivanje malignog potencijala // Eur. J. Surg. Oncol. 1998. V. 24. br. 1. str. 28-33.

15. Guidi A.J., Schnitt S.J., Fischer L., Tognazzi K., Harris J.R., Dvorak H.F., Brown L.F. Ekspresija faktora vaskularne propusnosti (vaskularni endotelni faktor rasta) i angiogeneza u bolesnika s duktalnim karcinomom in situ dojke // Rak. 1997. V. 80. broj 10. Str. 1945-1953.

16. Zhang H.T., Craft P., Scott P.A., Ziche M., Weich H.A., Harris A.L., Bicknell R. Poboljšanje rasta tumora i vaskularne gustoće transfekcijom čimbenika rasta vaskularnih endotelnih stanica u stanice ljudskog karcinoma dojke MCF-7. Natl. Inst. raka 1995. V. 87. br. 3. str. 213-219.

17. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., Wang N., Liu T. Učinak antitijela protiv faktora rasta vaskularnog endotela na rast tumora i metastaze J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1998. V. 124. br. 11. str. 615-620.

18. Wang G., Yang Z., Shou C. // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1997. V. 19. br. 6. str. 407-409.

19. Lichtenbeld H.C., Barendsz-Janson A.F., van Essen H., Struijker Boudier H., Grifioen A.W., Hillen H.F. Angiogeni potencijal malignih i nemalignih tkiva ljudskih grudi u in vivo modelu angiogeneze // Int. J. Rak. 1998. V. 77. br. 3. str. 455-459.

20. Brown L.F., Guidi A.J., Schnitt S.J., Van De Water L., Iruela-Arispe M.L., Yeo T.K., Tognazzi K., Dvorak H.F. Formiranje vaskularne strome u karcinomu in situ, invazivnom karcinomu i metastatskom karcinomu dojke // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. br. 5. str. 1041-1056.

21. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Molekularni medijatori tumorske angiogeneze: pojačana ekspresija i aktivacija receptora faktora rasta vaskularnog endotela KDR u primarnom raku dojke // Int. J. Rak. 1999. V. 84. br. 3. str. 293-298.

22. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Ko-ekspresija faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF) i njegovih receptora (flk-1 i flt-1) u hormonima induciranom raku dojke u plemenitog štakora // Br. J. Rak.

1999. V. 81. br. 8. str. 1335-1343.

23. Speirs V., Atkin S.L. Proizvodnja VEGF i ekspresija VEGF receptora Flt-1 i KDR u primarnim kulturama epitelnih i stromalnih stanica izvedenih iz tumora dojke // Br. J. Rak. 1999. V. 80. br. 5-6. P. 898-903.

24. Leek R.D., Hunt N.C., Landers R.J., Lewis C.E., Royds J.A., Harris A.L. Infiltracija makrofaga povezana je s ekspresijom VEGF i EGFR kod raka dojke // J. Pathol. 2000. V. 190. br. 4. str. 430-436.

25. Scott P.A., Gleadle J.M., Bicknell R., Harris A.L. Uloga sustava za osjet hipoksije, kiselosti i reproduktivnih hormona u varijabilnosti indukcije faktora rasta vaskularnog endotela u staničnoj liniji humanog karcinoma dojke // Int. J. Rak. 1998. V. 75. br. 5. str. 706-712.

26. Bos R., Zhong H., Hanrahan C.F., Mommers E.C., Semenza G.L., Pinedo H.M., Abeloff M.D., Simons J.W., van Diest P.J., van der Wall

E. Razine faktora-1 alfa inducibilnog hipoksijom tijekom karcinogeneze dojke // J. Natl. Inst. raka 2001. V. 93. br. 4. str. 309-314.

27. Biroccio A., Candiloro A., Mottolese M., Sapora O., Albini A., Zupi G., Del Bufalo D. Prekomjerna ekspresija Bcl-2 i hipoksija sinergistički djeluju na modulaciju ekspresije faktora rasta vaskularnog endotela i in vivo an- giogeneza u liniji karcinoma dojke // FASEB J. 2000. V. 14. Br. 5. P. 652-660.

28. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., Bouchier Hayes D.J. Vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF) pojačava BCL-2 i inhibira apoptozu u stanicama adenokarcinoma dojke kod ljudi i miševa // Br. J. Rak. 2001. V. 85. br. 2. str. 273-278.

29. Yen L., You X.L., Al Moustafa A.E., Batist G., Hynes N.E., Mader S., Meloche S., Alaoui-Jamali M.A. Heregulin selektivno pojačava sekreciju faktora rasta vaskularnog endotela u stanicama raka i stimulira angiogenezu // Oncogene. 2000. V. 19. br. 31. str. 3460-3469.

30. Laughner E., Taghavi P., Chiles K., Mahon P.C., Semenza G.L. HER2 (neu) signalizacija povećava brzinu sinteze hipoksijom inducibilnog faktora 1alfa (HIF-1alfa): novi mehanizam za ekspresiju vaskularnog endotelnog faktora rasta posredovanog HIF-1 // Mol. Cell Biol. 2001. V. 21. br. 12. str. 3995-4004.

31. Blancher C., Moore J.W., Robertson N., Harris A.L. Učinci genskih mutacija ras i von Hippel-Lindau (VHL) na ekspresiju čimbenika inducibilnog hipoksijom (HIF)-1alpha, HIF-2alpha i faktora rasta vaskularnog endotela i njihovu regulaciju pomoću fosfatidilinozitola 3"-

Kinaza/Akt signalni put // Cancer Res. 2001. V. 61. br. 19. str. 7349-7355.

32. Donovan D., Harmey J.H., Toomey D., Osborne D.H., Redmond H.P., Bouchier-Hayes D.J. TGF beta-1 regulacija proizvodnje VEGF stanicama raka dojke // Ann. Surg. Oncol. 1997. V. 4. br. 8. str. 621-627.

33. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Ekspresija faktora rasta, faktora inhibicije rasta i njihovih receptora kod invazivnog karcinoma dojke. I: Popis u potrazi za autokrinim i parakrinim petljama // J. Pathol. 1998. V. 184. br. 1. str. 44-52.

34. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk, P., Baak, J.P. Ekspresija faktora rasta, faktora inhibicije rasta i njihovih receptora u invazivnom raku dojke. II: Korelacije s proliferacijom i angiogenezom // J. Pathol. 1998. V. 184. br. 1. str. 53-57.

35. De Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Ekspresija faktora rasta, receptora faktora rasta i proteina povezanih s apoptozom u invazivnom raku dojke: odnos prema stopi apoptoze // Breast Cancer Res. Liječiti. 2001. V. 66. br. 3. str. 201-208.

36. Hyder S.M., Stancel G.M. Regulacija VEGF u reproduktivnom traktu pomoću spolnih steroidnih hormona // Histol. Histopathol. 2000. V. 15. br. 1. str. 325-234.

37. Ruohola J.K., Valve E.M., Karkkainen M.J., Joukov V., Alitalo K., Harkonen P.L. Čimbenici rasta vaskularnog endotela različito su regulirani steroidnim hormonima i antiestrogenima u stanicama raka dojke // Mol. Endokrinol stanica. 1999. V. 149. br. 1-2. Str. 29-40.

38. Hyder S.M., Nawaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Identifikacija funkcionalnih elemenata odgovora na estrogen u genu koji kodira za potentni angiogeni čimbenik faktor rasta vaskularnog endotela // Cancer Res. 2000. V. 60. br. 12. str. 3183-3190.

39. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Paradoksalni hormonski odgovori KPL-1 stanica raka dojke in vivo: značajna uloga angiogeneze u rastu tumora // Oncology. 2000. V. 59. br. 2. str. 158-165.

40. Hyder S.M., Murthy L., Stancel G.M. Progestinska regulacija faktora rasta vaskularnog endotela u stanicama raka dojke kod ljudi // Cancer Res.

1998. V. 58. br. 3. str. 392-395.

41. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Farmakološki i endogeni progestini induciraju ekspresiju faktora rasta vaskularnog endotela u stanicama raka dojke kod ljudi // Int. J. Rak. 2001. V. 92. br. 4. str. 469473.

42. Heer K., Kumar H., Speirs V., Greenman J., Drew P.J., Fox J.N., Carleton P.J., Monson J.R., Kerin M.J. Faktor rasta vaskularnog endotela kod žena u predmenopauzi — pokazatelj najboljeg vremena za operaciju raka dojke? // Br. J. Rak. 1998. V. 78. br. 9. str. 1203-1207.

43. Greb R.R., Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Razine ekspresije mRNA faktora rasta vaskularnog endotela A (VEGF-A) smanjuju se nakon menopauze u normalnom tkivu dojke, ali ne i u lezijama raka dojke // Br. J. Rak. 1999. V. 81. br. 2. str. 225-231.

44. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., Claffey K., DetmarM. Indukcija tumorske limfangiogeneze pomoću VEGF-C potiče metastaze raka dojke // Nat. Med. 2001. V. 7. br. 2. str. 192-198.

45. Kurebayashi J., Otsuki T., Kunisue H., Mikami Y., Tanaka K., Yamamoto S., Sonoo H. Ekspresija članova obitelji faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF) kod raka dojke // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. br. 9. str. 977-981.

46. ​​​​Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 i njegov ligand VEGF -C su povezani s angiogenezom kod raka dojke // Am. J. Pathol. 1999. V. 154. br. 5. str. 1381-1390.

47. Ohhashi T. // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 2001. V. 102. br. 6. str. 435-439.

48. Obermair A., ​​​​Kucera E., Mayerhofer K., Speiser P., Seifert M., Czer-wenka K., Kaider A., ​​​​Leodolter S., Kainz C., Zeillinger R. Rast vaskularnog endotela faktor (VEGF) kod raka dojke u ljudi: korelacija s preživljenjem bez bolesti // Int. J. Rak. 1997. V. 74. br. 4. str. 455458.

49. Relf M., LeJeune S., Scott P.A., Fox S., Smith K., Leek R., Moghaddam A., Whitehouse R., Bicknell R., Harris A.L. Ekspresija angiogenih čimbenika faktora rasta vaskularnih endotelnih stanica, kiselog i bazičnog faktora rasta fibroblasta, faktora rasta tumora beta-1, faktora rasta endotelnih stanica izvedenih iz trombocita, faktora rasta placente i plei-otrofina u ljudskom primarnom raku dojke i njegova povezanost s angiogeneza // Cancer Res. 1997. V. 57. br. 5. str. 963-969.

50. Gasparini G., Toi M., Gion M., Verderio P., Dittadi R., Hanatani M., Matsubara I., Vinante O., Bonoldi E., Boracchi P., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T. Prognostički značaj proteina faktora rasta vaskularnog endotela u karcinomu dojke s negativnim čvorovima // J. Natl. Inst. raka

1997. V. 89. br. 2. str. 139-147.

51. Gasparini G., Toi M., Miceli R., Vermeulen P.B., Dittadi R., Bigan-zoli E., Morabito A., Fanelli M., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T., Di-rix L.Y., Gion M. Klinička važnost faktora rasta vaskularnog endotela i timidin fosforilaze u bolesnika s pozitivnim čvorovima dojke

rak liječen ili adjuvantnom kemoterapijom ili hormonskom terapijom // Cancer J. Sci. Am. 1999. V. 5. br. 2. str. 101-111.

52. Gasparini G. Prognostička vrijednost faktora rasta vaskularnog endotela kod raka dojke // Onkolog. 2000. V. 5. Suppl. 1. Str. 37-44.

53. Gasparini G. Klinički značaj određivanja surogatnih markera angiogeneze kod raka dojke // Crit. vlč. Oncol. Hematol. 2001. V. 37. br. 2. str. 97-114.

54. Gasparini G., ToiM., Biganzoli E., Dittadi R., Fanelli M., Morabito A., Boracchi P., Gion M. Trombospondin-1 i -2 u karcinomu dojke s negativnim čvorovima: korelacija s angiogenim faktorima, p53, katepsin D, hormonski receptori i prognoza // Oncology. 2001. V. 60. br. 1. str. 72-

55. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Predviđa li faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF) lokalni relaps i preživljenje kod raka dojke s negativnim čvorovima liječenim radioterapijom? // Br. J. Rak.

1999. V. 81. br. 4. str. 727-732.

56. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. p53 i ekspresija faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF) predviđaju ishod kod 833 pacijentice s primarnim karcinomom dojke Int. J. Rak.

2000. V. 89. br. 1. str. 51 -62.

57. Linderholm B., Grankvist K., Wilking N., Johansson M., Tavelin B., Henriksson R. Korelacija sadržaja faktora rasta vaskularnog endotela s recidivima, preživljenjem i prvim mjestom relapsa kod karcinoma dojke s pozitivnim čvorovima nakon adjuvanta. liječenje / / J. Clin. Oncol.

2000. V. 18. br. 7. str. 1423-1431.

58. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Klinički značaj angiogenih čimbenika kod raka dojke // Breast Cancer Res. Liječiti. 1998. V. 52. br. 1-3. Str. 159-173.

59. Eppenberger U., Kueng W., Schlaeppi J.M., Roesel J.L., Benz C., Mueller H., Matter A., ​​​​Zuber M., Luescher K., Litschgi M., SchmittM., Foekens J.A., Eppenberger- Castori S. Markeri tumorske angiogeneze i proteolize neovisno definiraju visokorizične i niskorizične podskupine pacijenata s rakom dojke s negativnim čvorovima // J. Clin. Oncol. 1998. V. 16. br. 9. str. 3129-3136.

60. Coradini D., Boracchi P., Daidone M.G., Pellizzaro C., Miodini P., Ammatuna M., Tomasic G., Biganzoli E. Doprinos faktora rasta vaskularnog endotela Nottinghamskom prognostičkom indeksu kod raka dojke s negativnim čvorovima / / Br . J. Rak. 2001. V. 85. br. 6. str. 795-797.

61. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., LookM.P., Meijer van Gelder M.E., Geurts Moespot A., van der Kwast T.H., Sweep C.G., Klijn J.G. Visoke tumorske razine faktora rasta vaskularnog endotela predviđaju loš odgovor na sistemsku terapiju kod uznapredovalog raka dojke // Cancer Res. 2001. V. 61. br. 14. str. 5407-5414.

62. Yamamoto Y., Toi M., Kondo S., Matsumoto T., Suzuki H., Kitamu-raM., Tsuruta K., Taniguchi T., Okamoto A., Mori T., YoshidaM., Ike-da T. ., Tominaga T. Koncentracije faktora rasta vaskularnog endotela u serumima normalnih kontrola i pacijenata s rakom // Clin. Cancer Res. 1996. V. 2. br. 5. str. 821-826.

63. Dirix L.Y., Vermeulen P.B., Pawinski A., Prove A., Benoy I., De Pooter C., Martin M., Van Oosterom A.T. Povišene razine angiogenih citokina osnovnog faktora rasta fibroblasta i faktora rasta vaskularnog endotela u serumu pacijenata s rakom // Br. J. Rak. 1997. V. 76. br. 2. str. 238-243.

64. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Serumski vaskularni endotelni faktor rasta često je povišen kod diseminiranog raka // Clin. Cancer Res. 1997. V. 3. br. 5. str. 647-651.

65. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Faktor rasta vaskularnog endotela u serumima i izljevima pacijenata sa malignom i nemaligne bolesti // Rak. 1999. V. 85. br. 1. str. 178-187.

66. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. Jr., Ellis L.M. Razine faktora rasta vaskularnog endotela i indukcija permeabilnosti kod malignih pleuralnih izljeva // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. br. 11. str. 3364-3368.

67. Salven P., Perhoniemi V., Tykka H., Maenpaa H., Joensuu H. Serumske razine VEGF u žena s benignim tumorom dojke ili rakom dojke // Breast Cancer Res. Liječiti. 1999. V. 53. br. 2. str. 161-166.

68. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Invazivni lobularni i invazivni duktalni karcinom dojke pokazuje različite obrasce ekspresije vaskularnog endotelnog faktora rasta i angiogeneze // J. Pathol.

1998. V. 185. br. 4. str. 394-401.

69. Callagy G., Dimitriadis E., Harmey J., Bouchier-Hayes D., Leader M., Kay E. Imunohistokemijsko mjerenje vaskularnog endotelnog faktora rasta tumora kod raka dojke. Pouzdaniji prediktor stadija tumora od gustoće mikrožila ili faktora rasta vaskularnog endotela u serumu // Appl. Imunohistokemija. Molecul. Morphol. 2000. V. 8. br. 2. str. 104-109.

70. Adams J., Carder P.J., Downey S., Forbes M.A., MacLennan K., Allgar V., Kaufman S., Hallam S., Bicknell R., Walker J.J., Cairnduff

F., Selby P.J., Perren T.J., Lansdown M., Banks R.E. Vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF) u raku dojke: usporedba VEGF plazme, seruma i tkiva te gustoće mikrožila i učinci tamoksifena // Cancer Res. 2000. V. 60. br. 11. str. 2898-2905.

71. Harris A.L. Terapija protiv angiogeneze i strategije za njenu integraciju s adjuvantnom terapijom // Recent Results Cancer Res. 1998. V. 152. P. 341-352.

72. Harris A.L., Zhang H., Moghaddam A., Fox S., Scott P., Pattison A., Gatter K., Stratford I., Bicknell R. Angiogeneza raka dojke – novi pristupi terapiji putem antiangiogeneze, lijekovi koji aktiviraju hipoksiju , i vaskularno ciljanje // Breast Cancer Res. Liječiti. 1996. V. 38. br. 1. str. 97108.

73. Kerbel R.S., Viloria Petit A., Klement G., Rak J. "Slučajni" lijekovi protiv angiogeneze. inhibitori transdukcije signala usmjereni protiv onkogena i konvencionalni kemoterapijski agensi kao primjeri // Eur. J. Rak. 2000. V. 36. br. 10. str. 1248-1257.

74. Folkman J. Angiogenesis // Harrison’s Textbook of Internal Medicine, 15. izdanje. /ed. od E. Braunwalda, A.S. Fauci, D. L. Kasper, S. L. Hauser, D.L. Longo, J.L. Jameson. N. Y.: McGraw-Hill, 2001. Str. 517-530.

75. Eisen T., Boshoff C., Mak I., Sapunar F., Vaughan M.M., Pyle L., Johnston S.R., Ahern R., Smith I.E., Gore M.E. Kontinuirana niska doza talidomida: studija faze II kod uznapredovalog melanoma, raka bubrežnih stanica, jajnika i dojke // Br. J. Rak. 2000. V. 82. br. 4. str. 812-817.

76. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomid blokira angiogenezu transfektantima vaskularnog endotelnog faktora rasta karcinoma dojke // Br. J. Rak. 1998. V. 77. br. 7. str. 11231129.

77. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Široki spektar antitumorske aktivnosti neutralizirajućeg monoklonskog protutijela na ljudski vaskularni endotelni faktor rasta // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. br. 1. str. 93-100.

78. Borgstrom P., Gold D.P., Hillan K.J., Ferrara N. Važnost VEGF za angiogenezu raka dojke in vivo: implikacije intravitalne mikroskopije kombiniranih tretmana s anti-VEGF neutralizirajućim monoklonskim protutijelom i doksorubicinom // Anticancer Res. 1999. V. 19. br. 5B. P. 4203-4214.

79. Wedge S.R., Ogilvie D.J., DukesM., Kendrew J., Curwen J.O., Hennequin L.F., Thomas A.P., Stokes E.S., Curry B., Richmond G.H., Wadsworth P.F. ZD4190: oralno aktivni inhibitor signalizacije faktora rasta vaskularnog endotela sa antitumorskom učinkovitošću širokog spektra // Cancer Res. 2000. V. 60. br. 4. str. 970-975.

80. Ciardiello F., Caputo R., Bianco R. Damiano V., Fontanini G., Cuccato S., De Placido S., Bianco A.R., Tortora G. Inhibicija proizvodnje faktora rasta i angiogeneze u ljudskim stanicama raka pomoću ZD1839 ( Iressa), selektivni inhibitor tirozin kinaze receptora epidermalnog faktora rasta // Clin. Cancer Res. 2001. V. 7. br. 5. str. 1459-1465.

81. Kerbel R.S. Stečena otpornost na antitumorski učinak protutijela koja blokiraju receptor epidermalnog faktora rasta in vivo: uloga za promijenjenu angiogenezu tumora Cancer Res. 2001. V. 61. br. 13. str. 5090-5101.

82. Klauber N., Parangi S., Flynn E., Hamel E., D'Amato R.J. Inhibicija angiogeneze i raka dojke kod miševa pomoću inhibitora mikrotubula 2-metoksiestradiola i taksola // Cancer Res. 1997. V. 57. broj 1. str. 81-86.

83. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Paclitaxel (Taxol): inhibitor angiogeneze kod visoko vaskulariziranog transgenog raka dojke // Cancer Biother. Radiopharm. 1999. V. 14. br. 1. str. 31-36.

84. Lissoni P., Fugamalli E., Malugani F., Ardizzoia A., Secondino S., Tancini G., Gardani G.S. Kemoterapija i angiogeneza kod uznapredovalog karcinoma: pad faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF) kao prediktor kontrole bolesti tijekom terapije taksolom kod metastatskog raka dojke // Int. J Biol. Markeri. 2000. V. 15. br. 4. str. 308-311.

85. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Intratumoralna primjena endostatin plazmida inhibira vaskularni rast i perfuziju u MCa-4 mišjim karcinomima dojke Cancer Res. 2001. V. 61. br. 2. str. 526-531.

86. Jm S.A., Kim J.S., Gomez Manzano C., Fueyo J., Liu T.J., Cho M.S., Seong C.M., Lee S.N., Hong Y.K., Yung W.K. Inhibicija rasta raka dojke in vivo genskom terapijom antiangiogeneze s adenovirusom posredovanim antisense-VEGF // Br. J. Rak. 2001. V. 84. br. 9. str. 12521257.

nocTynma b pegaKunro 16. lipnja 2013

Gershtein E.S., Kushlinskiy D.N., Adamyan L.V., Ognerubov N.A. ČIMBNIK RASTA VASKULARNOG ENDOTELA-KLINIČKI VRIJEDAN MARKER U MALIGNIM NEOPLAZMAMA

Rezultati istraživanja autora i najreprezentativniji literaturni podaci koji pokazuju da je ključni pozitivni regulator neoangiogeneze - faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF)

klinički značajan prognostički čimbenik u različitim onkološkim bolestima, te su prikazane molekularne mete za nekoliko suvremenih lijekova s ​​različitim mehanizmima djelovanja. Njegovu ulogu kao serološkog čimbenika za dijagnostiku i praćenje potrebno je dodatno istražiti.

Ključne riječi: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumori; prognoza.

Gershtein Elena Sergeevna, Ruski onkološki istraživački centar nazvan po. N.N. Blokhin RAMS, Moskva, Ruska Federacija, doktor bioloških znanosti, profesor, vodeći istraživač u Laboratoriju za kliničku biokemiju Istraživačkog instituta klinička onkologija, e-mail: [e-mail zaštićen]

Gerstein Elena Sergejevna, N.N. Blokhin Ruski onkološki znanstveni centar RAMS, Moskva, Ruska Federacija, doktor biologije, profesor, vodeći znanstveni djelatnik kliničke biokemije SRI kliničkog onkološkog laboratorija, e-mail: [e-mail zaštićen]

Kushlinsky Dmitry Nikolaevich, Ruski znanstveni centar za porodništvo, ginekologiju i perinatologiju nazvan po. U I. Kulakova, Moskva, Ruska Federacija, ginekološki onkolog, e-mail: [e-mail zaštićen]

Kushlinskiy Dmitriy Nikolayevich, Istraživački centar za porodništvo, ginekologiju i perinatologiju nazvan po V.I. Kulakov, Moskva, Ruska Federacija, ginekološki onkolog, e-mail: [e-mail zaštićen]

Adamyan Leila Vladimirovna, Ruski znanstveni centar za porodništvo, ginekologiju i perinatologiju nazvan po.

U I. Kulakova, Moskva, Ruska Federacija, doktor medicinskih znanosti, profesor, akademik Ruske akademije medicinskih znanosti, zamjenik. direktor, e-mail: [e-mail zaštićen]

Adamyan Leyla Vladimirovna, Istraživački centar za porodništvo, ginekologiju i perinatologiju nazvan po V.I. Kulakov, Moskva, Ruska Federacija, doktor medicine, profesor, akademik RAMS, zamjenik ravnatelja, e-mail: [e-mail zaštićen]

Ognerubov Nikolay Alekseevich, Državno sveučilište Tambov. GR. Derzhavina, Tambov, Ruska Federacija, doktor medicinskih znanosti, profesor, voditelj. Zavod za onkologiju, operativnu kirurgiju i topografska anatomija, e-mail: [e-mail zaštićen]

Ognerubov Nikolay Alekseyevich, Tambovsko državno sveučilište nazvano po G.R. Deržavin, Tambov, Ruska Federacija, doktor medicine, profesor, voditelj odjela za onkologiju, operativnu kirurgiju i topografsku anatomiju, e-mail: [e-mail zaštićen]