2013. gadā, skrituļslidojot, viņa guva plaukstas kaula lūzumu. Nezinot, ko darīt, devos uz BSPM, kur man ielika ģipsi. Pēc nedēļas es sapratu, ka kaut kas nav kārtībā, un draugi man ieteica sazināties ar Oļegu Arkadjeviču Jukhimčuku.
Pēc dažām dienām atnācu uz konsultāciju, kur uzzināju, ka kauli nedzīst pareizi un man nepieciešama operācija, lai uzstādītu plāksni.
Apkalpošana un attieksme pret pacientu no Oļega Arkadjeviča un viņa komandas ir visaugstākajā līmenī! Viss ir ātri, skaidri, profesionāli un humoristiski. Pēc operācijas - pilnvērtīgs “servisa” atbalsts. Potīte ir atveseļojusies, funkcionē kā iepriekš, nav sāpju vai lūzuma pazīmju, izņemot plānu rētu. 2018. gadā guvu ceļgala traumu, un bez šaubām atkal vērsos pie Oļega Arkadjeviča. Lieki piebilst, ka atkal salaboja, palīdzēja un nomierināja! Kopumā lielisks ārsts un brīnišķīgs cilvēks! No sirds iesaku!

Irina Životko

Pirms gada es guvu nopietnas traumas

Pirms gada guvu smagu potītes locītavas traumu, sarežģītu 2 kaulu lūzumu ar pārvietojumu, saišu plīsumu un daļēju muskuļu bojājumu.
Es dzīvoju Eiropā. Sazinājos ar daudzām klīnikām... Pēc neskaitāmām konsultācijām un diagnostikas, diemžēl, nepārprotamu slēdzienu no ārstiem nesaņēmu. Man izteiktais secinājums bija šāds: "Diez vai jūs staigāsit kā iepriekš."
Pēc draugu ieteikuma vērsos pēc profesionālas palīdzības pie Ukrainas klīnikas, viena no labākajiem ķirurgiem/traumatologiem, konkrēti Oļega Arkadijeviča Jukhimčuka.
Rezultāts:
1. Skaidra, ātra profesionāla pārbaude, un es pieņēmu lēmumu veikt operāciju.
2. Operācija noritēja labi. Tika uzstādīti implanti.
3. Saņēmu augsta līmeņa pēcoperācijas rehabilitācijas konsultāciju.
4. PILNĪGI atguvies bez mazākās traumas miņas!
BRAVO MŪSU ĀRSTIEM!!!

Mēs ar ārstu esam pazīstami jau ilgu laiku, daudzkārt viņu ārstējuši

Mēs ar ārstu esam pazīstami jau ilgu laiku, ne reizi vien ārstējām visus ģimenes locekļus, aka mammu pēc negadījuma 2006. gadā. Ar lielākās daļas plaukstu (plecu, plecu, ribu) lūzumiem viņa izoperēja tālumā, ilgi strādā, auklē onūkus, audzē pilsētu pie dača. Veselību jums, dakter, un visai jūsu dzimtenei! Jau iepriekš zinām, ka tiklīdz laizam, salmiņš ir jānostiprina!

Kvitočka

Kopā jau vairāk nekā 10 akmeņi

Jau vairāk nekā 10 gadus visa mana dzimtene mirst Oļegam Arkadijovičam. Turpmāk būs nepieciešama kvalificēta un efektīva palīdzība. 2017. gada 21. datumā Roka lauza kāju, lauza divus apakšstilba kaulus, bet lūzuma vietā “rožu rakstā” tika izķidāti pārējie locītavu locītavas. Uzreiz devāmies pie Oļega Arkadijoviča, tika veikta svarīga operācija, uzstādītas divas plātnes...tāpat es jau staigāju bez policijas, un tad viņi sāka staigāt kā pirms lūzuma. Šim dārgajam doktoram.

Antoņina

Vairāk nekā gadu cietu no Ahileja iekaisuma,

Es periodiski izmantoju Oļega Arkadjeviča pakalpojumus un iesaku viņu draugiem.
Vairāk kā gadu mocījos ar Ahileja iekaisumu, jau no rītiem staigāju kā Čārlijs Čaplins 🙁
Oļegs Arkadjevičs mani nolika uz grīdas mēneša laikā. Kolosāla pieredze, zelta rokas, gaiša galva un vienkārši labs cilvēks. Liels paldies!!!

P.S. Tiem, kas aktīvi nodarbojas ar sportu un rezultātā gūst traumas, ļoti iesaku Oļegu Arkadjeviču.

Aleksandrs

Oļegs Arkadijevič, liels paldies!!!

Oļegs Arkadijevič, liels paldies!!! 2015. gadā mans tēvs tika operēts, viņš pats ir ārsts, darbā viņš pavada 99% laika uz kājām, un, pateicoties jums, viņš turpina tādā pašā garā, bet tagad ar protezēšanu. gūžas locītava. Pats esmu ķirurgs, un atceros, kā viss gāja, varu teikt, ka gan pirmsoperācijas, gan pēcoperācijas periods pagāja ļoti “gludi”. Pēc 1,5 mēnešiem tētis jau bija operāciju zālē (akušieris-ginekologs), lai gan es atceros, ka jūs to teicāt agri :)), bet viņš to nevarēja izturēt. Jau šogad es iekaroju Hoverlu 3. reizi) Mēs atceramies jūs katru 14. februāri - operācijas dienu. PALDIES!!!

Jau 30 gadus tiek uzskatīts, ka angioģenēze, jaunu asinsvadu veidošanās process, varētu kļūt par svarīgu pretvēža terapijas mērķi. Un tikai nesen šī iespēja tika realizēta. Klīniskie dati liecina, ka humanizētās monoklonālās antivielas bevacizumabs, kura mērķis ir galvenā proangiogēnā molekula, asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF), var pagarināt pacientu ar metastātisku kolorektālo vēzi dzīvi, ja to lieto kā pirmās līnijas terapiju kombinācijā ar ķīmijterapijas zālēm. Šeit mēs apspriežam VECF funkcijas un nozīmi, lai parādītu, ka VEGF ir saprātīgs pretvēža terapijas mērķis.

Kas ir VEGF?

VEGF ir viens no strukturāli radniecīgu proteīnu saimes locekļiem, kas ir ligandi VEGF receptoru saimei. VEGF ietekmē jaunu asinsvadu attīstību (angioģenēzi) un nenobriedušu asinsvadu izdzīvošanu (asinsvadu atbalstu), saistoties ar diviem cieši saistītiem membrānas tirozīna kināzes receptoriem (VEGF receptoru-1 un VEGF receptoru-2) un aktivizējot tos. Šos receptorus ekspresē endotēlija šūnas asinsvadu sieniņās (1. tabula). VEGF saistīšanās ar šiem receptoriem ierosina signālu kaskādi, kas galu galā stimulē asinsvadu endotēlija šūnu augšanu, izdzīvošanu un proliferāciju. Endotēlija šūnas ir iesaistītas tādos dažādos procesos kā vazokonstrikcija un vazodilatācija, antigēnu prezentācija, kā arī kalpo kā ļoti svarīgi visu asinsvadu elementi - gan kapilāri, gan vēnas vai artērijas. Tādējādi, stimulējot endotēlija šūnas, VEGF ir galvenā loma angiogēzes procesā.

Kāpēc ir svarīgi veikt asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF cilvēkam)?

VEGF ir ārkārtīgi svarīgs adekvāti funkcionējošas asinsvadu sistēmas veidošanai embrioģenēzes laikā un agrīnā pēcdzemdību periodā, taču pieaugušajiem tā fizioloģiskā aktivitāte ir ierobežota. Eksperimenti ar pelēm parādīja sekojošo:

• Mērķtiecīgs bojājums vienai vai divām VEGF gēna alēlēm izraisa embrija nāvi
• VEGF inaktivācija agrīnā pēcdzemdību attīstības laikā ir arī letāla
• VEGF bojājumi pieaugušām pelēm nav saistīti ar acīmredzamām novirzēm, jo ​​tā loma aprobežojas ar folikulu attīstību, brūču dzīšanu un reproduktīvo ciklu mātītēm.

Angioģenēzes ierobežotā nozīme pieaugušajiem nozīmē, ka VEGF aktivitātes inhibīcija ir sasniedzams terapeitiskais mērķis.

Asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF; Angļu Asinsvadu endotēlija augšanas faktors) ir signālu proteīns, ko ražo šūnas, lai stimulētu vaskuloģenēzi (embrionālās asinsvadu sistēmas veidošanos) un angioģenēzi (jaunu asinsvadu augšanu esošā asinsvadu sistēmā). Pašlaik ir zināmi vairāki dažādi faktorišīs ģimenes (kas, savukārt, mūsdienās ir diezgan plašas augšanas faktoru klases apakšklase).

VEGF proteīni kalpo kā daļa no sistēmas, kas ir atbildīga par skābekļa piegādes atjaunošanu audiem situācijās, kad asinsrite ir nepietiekama. VEGF koncentrācija asins serumā palielinās bronhiālās astmas un cukura diabēta gadījumā. VEGF galvenās funkcijas ir jaunu asinsvadu radīšana embrionālajā attīstībā vai pēc traumas, muskuļu augšanas veicināšana pēc slodzes, kolaterālās cirkulācijas nodrošināšana (jaunu asinsvadu veidošana, vienlaikus bloķējot esošos).

Paaugstināta VEGF aktivitāte var izraisīt dažādas slimības. Tādējādi cietie vēža audzēji nevar izaugt lielāki par noteiktu ierobežotu izmēru, nesaņemot atbilstošu asins piegādi; audzēji, kas var izteikt VEGF, var augt un metastēties. Pārmērīga VEGF ekspresija var izraisīt noteiktu ķermeņa daļu (īpaši tīklenes) asinsvadu slimības. Dažas pēdējos gados izstrādātās zāles (piemēram, bevacizumabs) var kontrolēt vai palēnināt šādu slimību progresēšanu, inhibējot VEGF.

Pašreizējie pētījumi liecina, ka VEGF proteīni nav vienīgais angiogēzes aktivators. It īpaši, FGF2 Un HGF ir arī spēcīgi angiogēni faktori.

Klasifikācija

Cilvēka organismā svarīgāko lomu spēlē VEGF saimes proteīns, ko sauc VEGF-A. Šajā ģimenē ietilpst arī placentas augšanas faktors (PGF) un olbaltumvielas VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D. Tie visi tika atklāti vēlāk nekā VEGF-A (pirms to atklāšanas VEGF-A proteīnu vienkārši sauca par VEGF). Kopā ar iepriekšminēto tika atklāts VEGF proteīns, ko kodē vīrusi ( VEGF-E) un VEGF proteīnu, kas atrodams dažu čūsku indē ( VEGF-F).

Tips	Funkcija
VEGF-A	Endotēlija šūnu migrācija Endotēlija šūnu mitoze Metāna monooksigenāzes aktivitāte Integrīna aktivitāte α V β 3 Plaisu veidošanās asinsvados Poru veidošanās endotēlija šūnās Makrofāgu un granulocītu ķīmijtakss
VEGF-B	Embrionālā angioģenēze (jo īpaši miokarda audi)
VEGF-C	Limfātisko asinsvadu angioģenēze
VEGF-D	Limfātisko asinsvadu attīstība plaušās
PIGF	Vaskuloģenēze (kā arī angioģenēze išēmijas, iekaisuma, brūču dzīšanas un vēža gadījumā)

VEGF-A proteīna aktivitāte ir pētīta (kā norāda tās nosaukums) galvenokārt asinsvadu endotēlija šūnās, lai gan tas ietekmē citu šūnu tipu darbību (piemēram, stimulē monocītu/makrofāgu migrāciju, ietekmē neironus, vēža šūnas, nieru epitēliju). šūnas). Pētījumos in vitro Ir pierādīts, ka VEGF-A stimulē endotēlija šūnu mitoģenēzi un migrāciju. VEGF-A arī uzlabo un palielina mikrovaskulāro caurlaidību, un sākotnēji tika nosaukts par "asinsvadu caurlaidības faktoru".

Alternatīva klasifikācija

Jēdziens "VEGF proteīni" ir plašs jēdziens, kas aptver divas proteīnu grupas, kas rodas no viena gēna, kas satur 8 eksonus, alternatīvas splicēšanas RNS (mRNS). Šīs divas grupas atšķiras terminālā 8. eksona savienojuma vietā: olbaltumvielas ar proksimālo vietu apzīmē ar VEGFxxx, bet tās, kurām ir distālā vieta, apzīmē ar VEGFxxxb. Turklāt alternatīva 6. un 7. eksonu savienošana maina to heparīnu saistošās īpašības un aminoskābju sastāvu (cilvēkiem: VEGF121, VEGF121b, VEGF145, VEGF165, VEGF165b, VEGF189, VEGF206; grauzējiem šo proteīnu ortologi satur par vienu aminoskābi mazāk ). Šiem reģioniem ir svarīgas funkcionālas sekas VEGF variantiem, jo ​​terminālā savienojuma vieta (8. eksons) nosaka, vai olbaltumvielas ir proangiogēnas (angioģenēzes laikā izmantotā proksimālā savienojuma vieta) vai antiangiogēnas (distālā savienojuma vieta, ko izmanto normālos audos) . Turklāt 6. un 7. eksonu iekļaušana vai izslēgšana mediē mijiedarbību ar heparāna sulfāta proteoglikāniem un neiropilīna koreceptoriem uz šūnas virsmas, palielinot to spēju saistīt un aktivizēt VEGF receptorus ( VEGFR). Nesen tika pierādīts, ka pelēm VEGF-C proteīns ir svarīgs neiroģenēzes induktors subventrikulārās zonās, neizraisot angiogēnu iedarbību.

VEGF receptors

Visi VEGF proteīnu saimes pārstāvji stimulē šūnu reakcijas, saistoties ar receptoriem ar tirozīna kināzes aktivitāti uz šūnas virsmas; Šo proteīnu aktivācija notiek to transfosforilēšanas ceļā. Visiem VEGF receptoriem ir ārpusšūnu daļa, kas sastāv no 7 imūnglobulīniem līdzīgiem reģioniem, viena transmembrānas reģiona un intracelulāras daļas, kas satur tirozīna kināzes domēnu.

Ir trīs veidu receptori, kas apzīmēti ar VEGFR-1, VEGFR-2 un VEGFR-3. Turklāt, atkarībā no alternatīvas savienošanas, receptori var būt saistīti ar membrānu vai brīvi.

VEGF-A proteīns saistās ar VEGFR-1 (Flt-1) un VEGFR-2 (KDR/Flk-1) receptoriem; šajā gadījumā VEGFR-2 receptors darbojas kā starpnieks gandrīz visās zināmajās šūnu reakcijās pret VEGF. VEGFR-1 receptoru funkcijas ir mazāk definētas (lai gan tiek uzskatīts, ka tas modulē VEGFR-2 signālu pārraidi). Vēl viena VEGFR-1 funkcija ir tā, ka tā var darboties kā “tukšs” receptors, izolējot VEGF proteīnu no VEGFR-2 receptora (kas, šķiet, ir īpaši svarīgi angioģenēzes laikā embrija attīstības laikā).

Olbaltumvielas VEGF-C un VEGF-D (bet ne VEGF-A) ir ligandi trešajam receptoram (VEGFR-3), kas darbojas kā starpnieks. limfangioģenēze.

Ražošana ar šūnām

VEGFxxx proteīnu ražošanu var izraisīt šūnās, kas nesaņem pietiekami daudz skābekļa. Kad šūna piedzīvo skābekļa deficītu, tā rada vienu no transkripcijas faktoriem - hipoksijas izraisīto faktoru ( HIF). Šis faktors (papildus citām funkcijām - jo īpaši eritropoēzes modulācijai, t.i., sarkano asins šūnu veidošanās procesam kaulu smadzenēs) stimulē VEGFxxx proteīnu izdalīšanos. Pēc tam cirkulējošais proteīns VEGFxxx saistās ar VEGF receptoru uz endotēlija šūnām un aktivizē tirozīna kināzes darbību, izraisot angiogenēzi.

Pacientiem, kuri cieš no emfizēmas, tika konstatēts pazemināts VEGF līmenis plaušu artērijās.

Nierēs palielināta VEGFxxx ekspresija glomerulos tieši izraisa glomerulāru hipertrofiju, kas saistīta ar proteīnūriju.

VEGF līmeņa izmaiņas var liecināt par preeklampsijas agrīnajām stadijām.

Anti-VEGF terapija

Anti-VEGF terapijai ir svarīga loma noteiktu vēža veidu ārstēšanā (jo īpaši -

Satura rādītājs

1. Neoangioģenēzes regulēšana

2. Audzēja angioģenēze

Vaskuloendotēlija augšanas faktors

. Vaskuloendotēlija augšanas faktors C

. Vaskuloendotēlija augšanas faktors D

. VEGF receptori

. Fibroblastu augšanas faktors

. Epidermas augšanas faktors

. Transformējošais augšanas faktors α

. Transformējošais augšanas faktors β

. Trombocītu izcelsmes augšanas faktors

. Placentas augšanas faktors

. Hepatocītu augšanas faktors

. Angiogenīns

. Angiopoetīni-1 un -2

. Epitēlija izcelsmes pigmenta faktors

. Slāpekļa oksīds

. Matricas metaloproteināzes

. Endostatīns

. Cilmes šūnu faktors

. Leikēmijas šūnu inhibējošais faktors

. No smadzenēm iegūts neirotropiskais faktors

Sadaļas saīsinājumi

EGF - epidermas augšanas faktors

FGF - fibroblastu augšanas faktors

HGF - hepatocītu augšanas faktors

IGF - insulīnam līdzīgi augšanas faktori

MMPS - matricas metaloproteināzes

PDGF - trombocītu izcelsmes augšanas faktors

PLGF - placentas augšanas faktors

TGF - transformējošie augšanas faktori

TIMP inhibitori

MMP SCF – cilmes šūnu faktors

VEGF – vaskuloendoteliālais augšanas faktors

Augšanas faktori – polipeptīdi ar molekulārais svars 5-50 kDa, apvienoti trofisko regulējošo vielu grupā. Tāpat kā hormoniem, arī šiem faktoriem ir plašs bioloģiskās iedarbības spektrs uz daudzām šūnām – tie stimulē vai kavē mitoģenēzi, ķīmijaksi un diferenciāciju. Atšķirībā no hormoniem augšanas faktorus parasti ražo nespecializētas šūnas, kas atrodamas visos audos, un tiem ir endokrīna, parakrīna un autokrīna iedarbība. Endokrīnie faktori tiek ražoti un caur asinsriti tiek transportēti uz attālām mērķa šūnām. Sasniedzot savu "mērķi", viņi mijiedarbojas ar specializētiem mērķa šūnu augstas afinitātes receptoriem. Parakrīni faktori atšķiras ar to, ka tie izplatās difūzijas ceļā. Mērķa šūnu receptori parasti atrodas blakus ražotājšūnām. Autokrīni faktori ietekmē šūnas, kas ir šo faktoru tiešais avots. Lielākā daļa polipeptīdu augšanas faktoru darbojas parakrīnā vai autokrīnā veidā. Tomēr noteiktiem faktoriem, piemēram, insulīnam līdzīgajam augšanas faktoram (IGF), var būt endokrīna ietekme.

Neoangioģenēzes regulēšana

Normāla audu darbība ir atkarīga no regulāras skābekļa piegādes pa asinsvadiem. Pēdējo desmit gadu laikā liela daļa pētījumu ir vērsta uz to, kā veidojas asinsvadi. Vaskuloģenēze embrijos ir process, kurā no endotēlija šūnu prekursoriem de novo veidojas asinsvadi. Angioģenēze ir jaunu asinsvadu veidošanās process no jau esošas asinsvadu sistēmas. Tam ir svarīga loma attīstībā, normālā audu augšanā, brūču dzīšanas procesā, sieviešu reproduktīvajā ciklā (placentas un dzeltenā ķermeņa attīstība, ovulācija), kā arī liela nozīme dažādu slimību ārstēšanā. Īpaša interese ir vērsta uz audzēja augšanu. Tā ir jauna asins piegādes veidošanās, kas ļauj audzējam augt. Šis process, kas aprakstīts kā audzēja angiogēze, ir arī neatņemama audzēja šūnu izplatīšanās un metastāžu augšanas sastāvdaļa. Neoangioģenēzes process ir nepieciešams audu ilgstošai adaptācijai bojājuma apstākļos. Šajā gadījumā notiek daļēja augšanas faktoru izdalīšanās asinīs, kam ir diagnostiska nozīme.

Izšķir šādus neoangioģenēzes posmus:

1. palielināta endotēlija caurlaidība un bazālās membrānas iznīcināšana;

2. endotēlija šūnu migrācija;

3. endotēlija šūnu proliferācija;

4. Endotēlija šūnu “nobriešana” un asinsvadu remodelācija.

Galvenais neoangioģenēzes procesu regulēšanas mehānisms ir angiogēno faktoru izdalīšanās, kuru avoti var būt endotēlija un tuklo šūnas, makrofāgi uc Angiogēno faktoru ietekmē endotēlija šūnas tiek aktivizētas (galvenokārt postkapilārajās venulās) un migrē ārpus bazālā membrāna ar galveno trauku zaru veidošanos. Tiek pieņemts, ka endotēlija adhēzijas molekulu, piemēram, E-selektīna, ekspresijas aktivizēšanai ir liela nozīme endotēlija šūnu migrācijas mehānismā. Stabilā stāvoklī endotēlija šūnas nevairojas un tikai reizēm (reizi 7-10 gados) dalās. Angiogēno augšanas faktoru un citokīnu ietekmē tiek aktivizēta endotēlija šūnu proliferācija, kas beidzas ar asinsvadu remodelāciju, pēc kuras jaunizveidotais trauks iegūst stabilu stāvokli.

Jaunu asinsvadu augšanu nosaka līdzsvars starp tā stimulatoriem un inhibitoriem. Ja stimulantu attiecība pret asinsvadu veidošanās inhibitoriem ir zema, neoangioģenēze tiek bloķēta vai ir zema intensitāte; gluži pretēji, pie augstām attiecībām aktīvi tiek aktivizēta neoangioģenēze.

Neoangioģenēzes stimulatori: vaskuloendotēlija augšanas faktors (VEGF), fibroblastu augšanas faktors (FGF), angiogenīns, epidermas augšanas faktors (EGF), trombocītu izcelsmes augšanas faktors (PDGF), transformējošie augšanas faktori α (TGF-α) un β (TGF-). β), insulīnam līdzīgais augšanas faktors 1 (IGF-1), NO, interleikīns-8 un nespecifiski faktori, piemēram, matricas metaloproteināzes (MMP).

Neoangioģenēzes inhibitori: endostatīns, šķīstošie VEGF receptori (sVEGFR), trombospondīns, angiostatīns (plazminogēna fragments), vasostatīns, restīns, MMP inhibitori (TIMP-1, TIMP-2).

Audzēja angioģenēze

Atšķirībā no normālas, normālas asinsvadu sistēmas, kas ātri nobriest un stabilizējas, audzēja asinsvadiem ir strukturālas un funkcionālas novirzes. Tie nesatur pericītus - šūnas, kas funkcionāli saistītas ar asinsvadu endotēliju un ir ārkārtīgi svarīgas asinsvadu struktūru stabilizēšanai un nobriešanai. Turklāt asinsvadu1. 2. 3. 4. Šim audzēju tīklam ir haotiska organizācija, ar līkumainību un paaugstinātu asinsvadu caurlaidību, un tā izdzīvošana un proliferācija ir atkarīga no augšanas faktoriem. Šīs asinsvadu anomālijas, kas lielā mērā ir saistītas ar pārmērīgu augšanas faktoru veidošanos, rada labvēlīgus apstākļus audzēja augšanai.

Vēža šūnām raksturīgs neoangioģenēzes stimulatoru līmeņa paaugstināšanās. Ja nav asins piegādes, audzēji iegūst skābekli un barības vielas difūzijas ceļā un parasti neaug vairāk par 1-2 mm diametrā. Angioģenēzes sākums izraisa jaunas asins piegādes veidošanos un veicina strauju audzēja augšanu un metastāzes, kas tādējādi ir aktivizējušās. Lai gan audzēja angioģenēzē ir iesaistīti daudzi augšanas faktori, ir konstatēts, ka VEGF ir visspēcīgākais un dominējošais no tiem. Asins piegādes traucējumi audzējam var nomākt tā turpmāko augšanu. Tiek pieņemts, ka audzēja augšanas bloķēšana ir iespējama, nomācot angioģenēzes augšanas faktoru veidošanos un aktivitāti vai tieši ietekmējot jaunizveidotos, nenobriedušos asinsvadus. Šī audzēja ietekmēšanas metode neizraisa izskaušanu, bet tikai ierobežo tā augšanu, pārvēršot slimību par gausu hronisku procesu. Anti-VEGF terapija nomāc jaunu audzēja asinsvadu augšanu un izraisa jaunizveidoto asinsvadu gultņu apvērsumu.

Vaskuloendotēlija augšanas faktors (VEGF, VEGF A)

VEGF ir heterodimērs glikoproteīna augšanas faktors, ko ražo dažādi šūnu veidi. Ir identificēti vismaz 5 VEGF-A varianti: VEGF 121, VEGF 165, VEGF 183, VEGF 189, VEGF 206. Citi VEGF varianti ir apzīmēti ar VEGF-B, -C, -D. VEGF 165 ir dominējošā forma lielākajā daļā audu. Kapoši sarkoma ekspresē VEGF 121 un VEGF 165. VEGF 121 un VEGF 165 ir šķīstošas ​​formas, savukārt VEGF 189 un VEGF 206 ir saistīti ar heparīnu saturošiem membrānas proteoglikāniem. Atšķirībā no citiem endotēlija šūnu mitogēniem, piemēram, bFGF (galvenā forma) un PDGF, VEGF tiek sintezēts kā 226 aminoskābju prekursors.

VEGF ir potenciāls asinsvadu epitēlija šūnu mitogēns. Tam ir spēcīga ietekme uz asinsvadu caurlaidību, tas ir spēcīgs angiogēns proteīns dažādās eksperimentālās sistēmās un piedalās neovaskularizācijas procesos patoloģiskās situācijās. Starp VEGF un bFGF ir sinerģiska ietekme uz angiogēzes indukciju. VEGF spēja ietekmēt asinsvadu caurlaidību nozīmē, ka šis augšanas faktors var tikt iesaistīts asins-smadzeņu barjeras funkciju mainīšanā subnormālos un patoloģiskos apstākļos. VEGF-A arī izraisa vazodilatāciju caur NO sintetāzes ceļu endotēlija šūnās un var aktivizēt monocītu migrāciju.

VEGF-A var noteikt pacientu plazmā un serumā, bet tā līmenis serumā ir ievērojami augstāks. Īpaši augstu līmeni var konstatēt cistu saturā, kas veidojas pacientiem ar smadzeņu audzējiem vai ascīta šķidrumā. Trombocīti pēc agregācijas atbrīvo VEGFA un var būt vēl viens galvenais audzēja šūnu avots. Dažādi pētījumi ir parādījuši, ka augsta seruma VEGF-A līmeņa saistība ar sliktu prognozi pacientiem ar ļaundabīgiem audzējiem var būt saistīta ar paaugstinātu trombocītu skaitu. Audzēji var izdalīt citokīnus un augšanas faktorus, kas stimulē megakariocītu veidošanos kaulu smadzenēs un palielina trombocītu skaitu. Tas savukārt var izraisīt vēl vienu, netiešu VEGF-A piegādes palielināšanos audzējā. Turklāt VEGF-A ir iesaistīts daudzos citos patoloģiskos procesos, kas saistīti ar palielinātu angiogenēzi vai palielinātu asinsvadu caurlaidību. Piemēri, kuros VEGF-A spēlē nozīmīgu lomu, ir psoriāze un reimatoīdais artrīts, kā arī olnīcu hiperstimulācijas sindroms. Diabētiskā retinopātija ir saistīta arī ar augstu intraokulāro VEGF-A līmeni, un VEGFA funkcijas kavēšana var izraisīt neauglību dzeltenā ķermeņa funkcijas bloķēšanas dēļ. VEGF-A nozīme audzēja augšanā ir skaidri pierādīta, izmantojot VEGF receptorus, lai bloķētu proliferāciju in vivo, kā arī bloķējot antivielas pret VEGF vai kādu no VEGF receptoriem. Tā rezultātā iejaukšanās VEGF-A funkcijā ir kļuvusi par galveno interešu jomu tādu zāļu izstrādē, kuru mērķis ir bloķēt angiogenēzi un metastāzes. Šobrīd šādu antagonistu izstrādē ir iesaistīti vairāk nekā 110 farmācijas uzņēmumi visā pasaulē. Viņu pieejas ietver VEGF-A vai tā receptoru antagonistus, selektīvus tirozīna kināzes inhibitorus. VEGF signālu noteikšanai var būt ļoti svarīga terapeitiskā ietekme uz daudzām slimībām, un tā var kalpot par pamatu turpmāku (anti) angiogēnu terapiju izstrādei.

Vaskuloendotēlija augšanas faktors C (VEGF-C)

VEGF-C pieder pie VEGF saimes. Ir pierādīts, ka tam piemīt angiogēnas un limfangiogēnas īpašības. VEGF ģimene un to receptori ir iesaistīti asinsvadu endotēlija attīstībā un augšanā. Divas šīs ģimenes olbaltumvielas, VEGF-C un -D, caur VEGFR3 receptoru iedarbojas uz limfātisko asinsvadu endotēlija šūnām, darbojoties kā mitogēni.

VEGF-C ekspresija ir saistīta ar onkohematoloģiskām slimībām. VEGF-C ekspresija kopā ar receptoriem veicina audzēja šūnu izdzīvošanu un proliferāciju. Paaugstināta VEGF-C ekspresija ir pierādīta kuņģa-zarnu trakta ļaundabīgos audzējos, kur tas korelē ar invāziju, limfmezglu metastāzēm un samazinātu dzīvildzi.

Vaskuloendotēlija augšanas faktors D (VEGF-D)

VEGF-D (pazīstams arī kā c-fos-inducējams faktors vai FIGF) ir ļoti līdzīgs VEGF-C. Tam ir strukturāla homoloģija un receptoru specifiskums, kas ir līdzīgs VEGF-C, tāpēc tiek uzskatīts, ka VEGF-D un VEGF-C var klasificēt VEGF apakšgrupā. VEGF-D sākotnēji tiek sintezēts kā prekursoru proteīns, kas papildus centrālajam VEGF receptoru saistošajam homoloģijas domēnam (VHD) satur unikālus N- un C-gala propeptīdus. N- un C-gala propeptīdi nav atrasti citos VEGF saimes locekļos. Šie propeptīdi tiek proteolītiski šķelti biosintēzes laikā, kā rezultātā veidojas nobriedusi, izdalīta forma, kas sastāv no monovalentiem VHD dimēriem.

Tāpat kā VEGF-C, arī VEGF-D uz šūnu virsmas saistās ar tirozīna kināzes VEGF receptoru 2 (VEGF R2/Flk-1/KDR) un VEGFR3. Šie receptori ir lokalizēti uz asinsvadu un limfātiskās endotēlija šūnām un ir atbildīgi par angiogenēzi un limfoģenēzi. Nobriedušā VEGFD forma saistās ar šiem receptoriem ar lielāku afinitāti nekā sākotnējā VEGF-D pro forma. Ir pierādīta VEGF-D gēna ekspresija jaunattīstības embrijos, īpaši plaušu mezenhīmā. VEGF-D ir lokalizēts arī audzēja šūnās. Pieaugušo audos VEGF-D mRNS tiek ekspresēts sirdī, plaušās, skeleta muskuļos un tievajās zarnās.

VEGF receptori (sVEGFR-1, sVEGFR-2)

Daudzi citokīnu receptori pastāv šķīstošā formā pēc proteolītiskās šķelšanās un atdalīšanas no šūnas virsmas. Šie šķīstošie receptori spēj saistīt un neitralizēt apritē esošos citokīnus. Ir trīs VEGF-A receptori: VEGFR-1 (Flt-1), -2 (KDR) un -3 (Flt-4). Visi no tiem satur septiņus Ig līdzīgus atkārtojumus ekstracelulārajos domēnos. VEGFR1-R3 galvenokārt izpaužas asinsvadu oderējuma proliferējošā endotēlijā un/vai infiltrējošos cietos audzējos. Tomēr VEGFR2 ir plašāk pārstāvēts nekā VEGFR1 un tiek ekspresēts visās asinsvadu izcelsmes endotēlija šūnās. VEGFR2 atrodas arī endotēlija un perivaskulāro kapilāru šūnās lamina sēklu kanāliņos, Leidiga šūnās un Sertoli šūnās. VEGFR2 saistās ar VEGF-A, -C un -D. Atšķirībā no VEGFR1, kas ar augstu afinitāti saista gan PlGF, gan VEGF, VEGFR2 saistās tikai ar VEGF, nevis ar augstu afinitāti PlGF.

Šiem receptoriem ir svarīga loma angiogenēzē. sVEGFR-1 ir šī procesa inhibitors. Saistoties ar VEGF, tas novērš VEGF mijiedarbību ar mērķa šūnām. VEGFR2 funkcionāla inaktivācija ar antivielām var traucēt angiogēzes procesu un novērst audzēja šūnu invāziju. Asinsvadu endotēlija šūnās HIV-1 Tat proteīna izraisīto angiogēzi mediē VEGFR2. Tat īpaši saistās un aktivizē VEGFR2. Tat izraisīto angiogēzi inhibē līdzekļi, kas var bloķēt VEGFR2.

Fibroblastu augšanas faktors (FGF)

FGF ģimene pašlaik ietver 19 dažādus proteīnus. Sākotnēji tika raksturotas divas formas: skāba (aFGF) un bāziska (bFGF).

a un bFGF ir dažādu gēnu produkti, un tiem ir līdz 53% homoloģija. AFGF molekulu attēlo vienkārša polipeptīdu ķēde ar m.m. 16,8 kDa. Mm. dažādas bFGF formas svārstās no 16,8 līdz 25 kDa. Funkcionālās atšķirības starp bFGF formām netika konstatētas.

FGF bioloģiskās aktivitātes ir dažādas. Tie ir mitogēni dažādām neiroektodermālās un mezenhimālās izcelsmes šūnām, potenciālie mitogēni un angioģenēzes stimulatori, atbalsta un stimulē dažādu neironu tipu šūnu diferenciāciju in vivo un in vitro. Papildus a un bFGF saime ietver onkoproteīnus int-2 (FGF-3) un hst (FGF-4), FGF-5, keratinocītu augšanas faktoru un asinsvadu endotēlija augšanas faktoru. FGF-3 un -4 ir cieši saistīti ar bFGF, kas pats par sevi, visticamāk, ir potenciāls onkogēns. Klīniskie dati apstiprina bFGF lomu audzēja neoangioģenēzē. Tādējādi šī faktora līmeņa paaugstināšanās korelē ar procesa agresivitātes pakāpi daudzos cietos audzējos, leikēmijā, limfomās bērniem un pieaugušajiem un var kalpot kā prognostisks faktors audzēja procesa agresivitātei. bFGF ir nepieciešams asinsvadu sistēmas attīstībai un uzturēšanai embrioģenēzes laikā, tas ir arī galvenais angiogēnais faktors agrīnai atveseļošanai un sirds un asinsvadu slimībām.

epidermas augšanas faktors (EGF)

EGF ir lodveida proteīns ar m.m. 6,4 kDa, kas sastāv no 53 aminoskābju atlikumiem, kas darbojas kā spēcīgs mitogēns uz dažādām endodermālās, ektodermālās un mezodermālās izcelsmes šūnām. EGF ir atrodams asinīs, cerebrospinālajā šķidrumā, pienā, siekalās, kuņģa un aizkuņģa dziedzera sulā. Arī augšanas faktors urīnā, kas pazīstams kā urogastrons, ir identisks EGF. Galvenā EGF sintēzes vieta ir siekalu dziedzeri. EGF kontrolē un stimulē epidermas un epitēlija šūnu, tostarp fibroblastu, nieru epitēlija, glia šūnu, olnīcu granulozes šūnu un vairogdziedzera šūnu, proliferāciju in vitro. EGF arī stimulē embriju šūnu proliferāciju un palielina kalcija izdalīšanos no kaulaudiem. Tas veicina kaulu rezorbciju un ir spēcīgs ķīmiskais atraktants fibroblastiem un epitēlija šūnām. EGF viens pats un kombinācijā ar citiem citokīniem ir vissvarīgākais faktors, kas veicina brūču dzīšanas un angioģenēzes procesus. Tas darbojas arī kā kuņģa skābes sekrēcijas inhibitors. Augsts EGF līmenis ir noteiktos ķermeņa šķidrumos, piemēram, siekalās, urīnā, kuņģa sulā, sēklu šķidrumā un pienā.

EGF ir svarīga loma kanceroģenēzē. Noteiktos apstākļos tas var izraisīt šūnu ļaundabīgu audzēju. EGF inducē proto-onkogēnus c-fos un c-myc. Imūnreaktīvā EGF bioloģiskā iedarbība ir līdzīga TGF-α iedarbībai. Ir svarīgi atzīmēt, ka abi faktori saistās ar tiem pašiem receptoriem. Tomēr EGF efektivitāte ir par 50% augstāka nekā TGF-α.

Transformējošais augšanas faktors α (TGF-α)

Galvenais TGF-α avots ir karcinomas. Makrofāgi un keratinocīti (iespējams, citas epitēlija šūnas) arī izdala TGF-α. TGF-α stimulē fibroblastus un endotēlija attīstību. Tas ir angiogēns faktors. Tāpat kā EGF, arī TGF-α ir iesaistīts šūnu proliferācijas regulēšanā, kā arī audzēja šūnu augšanas regulēšanā.

Transformējošais augšanas faktors β (TGF-β)

TGF-β saime ietver homologu heterodimēru proteīnu grupu TGFβ-1, -2, -3 un -4. Galvenā izoforma, ko izdala šūnas imūnsistēma, ir TGF-β1. Visi TGF-β sastāv no 112 aminoskābju atlikumiem. TGF-β2 struktūrai ir 50% homoloģija ar TGF-β1 pirmajās 20 aminoskābju atlikumos un 85% fragmentam 21-36. Funkcionālās aktivitātes atšķirības starp TGF-β1 un -β2 netika konstatētas. TGF-β ražo daudzu veidu šūnas un audi: aktivēti T-limfocīti un makrofāgi, trombocīti, nieres, placenta.

Faktors tiek ražots neaktīvā formā, kas kopā ar galveno dimēru satur prekursoru molekulas papildu ķēžu fragmentus. Aktivizācija notiek šo fragmentu šķelšanās veidā ar proteināžu palīdzību (plazmīns, katepsīns utt.). TGF-β ir vērsta arī uz dažādām šūnām, jo ​​tā augstas afinitātes receptoru ekspresija ir plaši izplatīta. Kad TGFβ iedarbojas uz imūnsistēmu, dominē inhibējošā iedarbība. Faktors nomāc hematopoēzi, iekaisuma citokīnu sintēzi, limfocītu reakciju uz IL-2, -4 un -7, kā arī citotoksisku NK un T šūnu veidošanos. Tajā pašā laikā tas uzlabo starpšūnu matricas proteīnu sintēzi, veicina brūču dzīšanu un ir anaboliska iedarbība.

Saistībā ar polimorfonukleārajiem leikocītiem TGF-β darbojas kā iekaisuma citokīnu antagonists. TGF-β gēna izslēgšana izraisa letālas ģeneralizētas iekaisuma patoloģijas attīstību, kuras pamatā ir autoimūns process. Tādējādi tas ir imūnās atbildes un, galvenokārt, iekaisuma reakcijas atgriezeniskās saites regulēšanas elements. Tajā pašā laikā TGF-β ir svarīgs arī humorālās reakcijas attīstībai: tas pārslēdz imūnglobulīnu biosintēzi uz IgA izotipu. Stimulē angioģenēzi. TGF-β līmenis plazmā pozitīvi korelē ar audzēja vaskularizāciju.

Trombocītu atvasināts augšanas faktors (PDGF)

PDGF ir viens no potenciālajiem mitogēnajiem polipeptīdiem, kas atrodami cilvēka asinīs. Sastāv no divām ķēdēm: A un B, kas saistītas ar AA-, BB- un AB izoformām. Šīs trīs izoformas atšķiras gan pēc funkcionālajām īpašībām, gan pēc sekrēcijas veida. Kamēr AA un AB formas tiek ātri izdalītas no ražotāja šūnas, BB forma joprojām ir galvenokārt saistīta ar ražojošo šūnu. Tikai PDGF dimēra formas var saistīties ar receptoriem. Ir identificēti divi dažādi receptoru veidi. α receptors saistās ar A vai B polipeptīdu, bet β receptors saistās tikai ar B polipeptīdu. Viss bioloģisko efektu spektrs ir saistīts ar šīm trim PDGF molekulām un diviem receptoriem, to diferenciālo ekspresiju un sarežģītiem intracelulāriem mehānismiem, kas regulē to darbību. PDGF avots serumā ir trombocītu α-granulas, lai gan makrofāgi un endotēlija šūnas var arī ražot šo faktoru. Atsevišķos posmos jaundzimušā aortas placentas šūnas un gludās muskulatūras šūnas kalpo arī kā PDGF avots.

AA izoformu galvenokārt izdala fibroblasti, asinsvadu gludās muskulatūras šūnas, osteoblasti, astrocīti, COLO (resnās zarnas karcinomas) un WLM (Vilma audzēja) šūnas. BB sintēze ir saistīta ar makrofāgiem, Langerhans saliņu šūnām, neangiogēno epitēliju un SW (vairogdziedzera karcinomas) šūnu līniju. Šūnas, kas ražo abas ķēdes (A un B), ietver neironus, nieru mezangiālās šūnas, gliomas un mezoteliomas šūnu līnijas un trombocītus. Sākotnējie dati liecināja, ka cilvēka trombocīti satur aptuveni 70% PDGF-AB un 30% -BB. Tomēr jaunākie pētījumi liecina, ka var būt līdz 70% PDGF-AA, un agrākie atklājumi ir artefakts. Izdalītā(-o) PDGF dimēra(-u) veids ir atkarīgs no saražotās mRNS, un to var ietekmēt arī translācijas efektivitāte, sekrēcija un intracelulārā degradācija.

B ķēdes un c-sis proto-onkogēna strukturālā identitāte liecina, ka PDGF var būt nozīme vīrusu izraisītā inficēto šūnu ļaundabīgā transformācijā. PDGF ir iesaistīts akūtu iekaisumu, brūču dzīšanas un rētu veidošanās regulēšanā. No alveolārajiem makrofāgiem atbrīvotais PDGF ir iesaistīts plaušu fibrozes attīstībā. Ir arī konstatēts, ka PDGF ir saistīts ar aterosklerozes, glomerulonefrīta, mielofibrozes un keloīdu veidošanos. Tāpat kā EGF, PDGF inducē proto-onkogēnu, piemēram, fos, myc un jun. PDGF ir arī visuresošs CNS neironos, kur tiek uzskatīts, ka tam ir svarīga loma šūnu izdzīvošanā un reģenerācijā, mediējot glia šūnu proliferāciju un diferenciāciju.

Placentas augšanas faktors (PlGF)

PlGF - glikoproteīns ar m.m. 46-50 kDa, kas pieder VEGF saimei (42% homoloģija ar VEGF). PlGF ir arī homologs, kaut arī tālāk, ar PDGF augšanas faktoru saimi. Ir divas PlGF izoformas: -1 un -2, kas atšķiras ar heparīnu saistošā domēna klātbūtni PlGF-2. PlGF mediē ekstravillozā trofoblasta proliferāciju. Kā norāda nosaukums, PlGF pirmo reizi tika identificēts normālos apstākļos cilvēka placentā. Tas izpaužas citos audos, piemēram, kapilāros un nabas vēnu endotēlijā, kaulu smadzenēs, dzemdē, NK šūnās un keratinocītos. PlGF palielinās arī dažādos patoloģiskos apstākļos, ieskaitot brūču dzīšanu un audzēju veidošanos. Salīdzinot ar VEGF, PlGF loma neovaskularizācijā ir mazāk skaidra. Tas var palielināt endotēlija šūnu dzīves ilgumu, augšanu un migrāciju in vitro un veicināt asinsvadu veidošanos dažos in vivo modeļos. PlGF aktivitāte var rasties, tieši mijiedarbojoties faktoram ar VEGFR1. Ir ierosināts, ka VEGFR1 darbojas kā VEGF rezervuārs un ka PlGF, saistoties ar receptoru, izspiež VEGF, atbrīvojot to, lai aktivizētu VEGFR2. PlGF var sinerģiski uzlabot VEGF izraisīto angiogenēzi un asinsvadu caurlaidību. PlGF koncentrācija palielinās 4 reizes no fizioloģiskās grūtniecības pirmā trimestra beigām līdz otrā trimestra beigām.

Hepatocītu augšanas faktors (HGF)

HGF, ko sauc arī par izkliedes faktoru (SF), sastāv no divām apakšvienībām, kas savienotas ar disulfīda saiti: α (69 kDa) un β (34 kDa). HGF ir daudzfunkcionāls citokīns, kas darbojas kā mitogēns, kas saistīts ar tā funkciju organoģenēzē un audu atjaunošanā. Tam ir spēja stimulēt asinsvadu veidošanos un šūnu proliferāciju, kas liecina par tā iesaistīšanos ļaundabīgā augšanā un metastāzēs plaušu, krūts, aizkuņģa dziedzera, adenokarcinomas, multiplās mielomas un hepatocelulārās karcinomas gadījumā. Krūts vēža audzēja šūnās HGF spēcīgi inducē bcl-x ekspresiju un tādējādi inhibē apoptozi. HGF nepārtraukti ražo stromas šūnas kaulu smadzenes un stimulē hematopoēzi.

Angiogenīns (ANG)

ANG ir vienas ķēdes neglikozilēts polipeptīds ar m.m. 14 kDa, kas pieder RISBASE ribonukleāžu saimei (ribonukleāzes ar īpašām bioloģiskām funkcijām). Šīs ģimenes molekulām piemīt ne tikai ribonukleāzes aktivitāte, bet arī īpaša bioloģiska iedarbība. ANG ir 35% secības identitāte ar aizkuņģa dziedzera ribonukleāzi. Ir pierādīts, ka aminoskābju līmenī cilvēka angiogenīns ir par 75% identisks peles ANG un “darbojas” peles sistēmās. ANG ekspresē endotēlija šūnas, gludās muskulatūras šūnas, fibroblasti, kolonnveida zarnu epitēlijs, limfocīti, primārās adenokarcinomas šūnas un dažas audzēja šūnu līnijas. Angiogenīna receptors nav zināms. Tiek uzskatīts, ka angiogenīna darbībai ir nepieciešams aktīns kā receptors vai saistoša molekula.

Funkcionāli ANG visbiežāk ir saistīta ar angioģenēzes procesu. Tiek uzskatīts, ka sākotnēji tas saistās ar aktīnu, kam seko aktīna-ANG kompleksa disociācija, kam seko audu plazminogēna aktivatora aktivizēšana. Rezultātā veidojas plazmīns, kas veicina bazālās membrānas komponentu, piemēram, laminīna un fibronektīna, noārdīšanos. Pamata membrānas iznīcināšana ir nepieciešams priekšnoteikums endotēlija šūnu migrācijai neovaskularizācijas laikā. Lai gan šķiet, ka ANG galvenokārt darbojas ekstravaskulāri vai perivaskulāri, cirkulējošais ANG ir konstatēts normālā serumā koncentrācijās aptuveni ng/ml. Patoloģiskos procesos pacientiem ar aizkuņģa dziedzera vēzi un artēriju oklūziju tika konstatēts paaugstināts ANG līmenis.

Angiopoetīni-1 un -2 (Ang)

Ang-1 un -2 ir glikoproteīni, kas pieder augšanas faktoru saimei, kas regulē asinsvadu audu attīstību. Ang-1 sastāv no 498 aminoskābju atlikumiem, Ang-2 - no 467. Ang-1 un -2 AK sekvences ir 60% identiskas. Abi Ang mijiedarbojas ar receptoru tirozīna kināzi-2 (Tie-2), kas galvenokārt atrodas uz endotēlija šūnām. Tomēr ir vismaz trīs alternatīvi Ang-1 savienošanas varianti, un divas alternatīvas formas nespēj aktivizēt Tie-2. Tādējādi tie darbojas kā Ang-1 galvenās aktīvās formas endogēnie slāpētāji. Turklāt Ang-1 un -2 darbojas kā konkurenti mijiedarbībai ar Tie-2 receptoru, tāpēc Ang-2 atkarībā no šūnas veida darbojas kā Tie-2 receptoru slāpētājs vai aktivators.

Ang-1 un -2 ir ļoti izteikti embrijā straujas asinsvadu audu attīstības laikā. Ang-1 gēna dzēšana izraisa nāvējošas sekas embrijā nopietnu sirds un asinsvadu attīstības defektu dēļ. Lai gan Ang-2 nav tik nozīmīgas lomas kā Ang-1 embrija asinsvadu sistēmas veidošanā, tās trūkuma gadījumā tiek traucēta arī vaskularizācija, kas izraisa priekšlaicīgu nāvi. Pieaugušā organismā Ang-1 galvenokārt sintezē endotēlija šūnas, megakariocīti un trombocīti, un Ang-2 izpaužas lokāli: olnīcās, dzemdē un placentā. Ang-1 regulē asinsvadu attīstību un pārveidošanu un palielina endotēlija šūnu izdzīvošanu. Endotēlija šūnu izdzīvošana Ang-1 mijiedarbības ar Tie-2 laikā ietver PI3K/AKT mehānismu, un šūnu migrācija tās pašas mijiedarbības laikā (ligands/receptors) notiek, piedaloties vairākām kināzēm (PI3K, PAK, FAK). Turpretim Ang-2, darbojoties atsevišķi, ierosina endotēlija šūnu nāvi un asinsvadu regresiju, lai gan sinerģiski ar VEGF var veicināt jaunu asinsvadu veidošanos. Ja Ang-1 darbojas sinerģiski ar VEGF, tā pārprodukcija palielina audu vaskularizāciju. Tādējādi Ang-1 un -2, kā likums, darbojas kā antagonisti, kas kopīgi regulē asinsvadu augšanu.

Angiopoetīnu darbība neaprobežojas tikai ar asinsrites asinsvadu endotēliju - tie var piedalīties limfoidās sistēmas asinsvadu veidošanā. Ang-1 ir arī citi bioloģiski efekti, piemēram, tas uzlabo neitrofilu un eozinofilu adhēziju un migrāciju, kā arī regulē asinsvadu sieniņu caurlaidību. Ang-1 var arī izraisīt nervu šūnu augšanu un izdzīvošanu un regulēt dendritisko šūnu organizāciju. Paaugstināts Ang-1 un -2 līmenis uzlabo ļaundabīgo audzēju angiogenēzi. Augsta cirkulējošā Ang-1 koncentrācija ir saistīta ar hipertensiju un vēža patoloģijām.

Pigmenta epitēlija izcelsmes faktors (PEDF)

PEDF (mw 50 kDa, pieder serpīnu saimei) vispirms tika identificēts kā faktors, ko izdala tīklenes epitēlija šūnas un kas veicina neironu izdzīvošanu in vitro un in vivo. No otras puses, ir pierādīts, ka PEDF spēj izraisīt kapilāru endotēlija šūnu apoptozi, tādējādi saglabājot tīklenes avaskulāro raksturu. Daudzās oftalmoloģiskajās slimībās, kurām raksturīga tīklenes inervācijas un mikrovaskulāras disregulācijas traucējumi, PEDF ir svarīgs acu slimību regulators. Turklāt ir pierādīts, ka PEDF ir daudzfunkcionāla pretvēža aktivitāte eksperimentālajā neiroblastomā, jo PEDF, ko ražo Schwann šūnas, izraisa diferencētu, mazāk ļaundabīgu fenotipu neiroblastomas šūnās, veicina Schwann šūnu turpmāku augšanu un izdzīvošanu, kā arī inhibē angioģenēzi.

Slāpekļa oksīds (NO)

NO bioloģiskā iedarbība ir plaši atzīta pēc tam, kad tā tika identificēta kā no endotēlija atkarīgs relaksējošs faktors (EDRF), kas ir atbildīgs par tā spēcīgajām vazodilatējošām īpašībām. Kopš tā laika NO ir identificēts kā pleiotrops bioloģiskais mediators, kas regulē dažādas funkcijas: no nervu darbības līdz imūnsistēmas regulēšanai. Tas ir brīvais radikālis, kura pusperiods in vivo ir aptuveni dažas sekundes. Šajā sakarā netiešai NO noteikšanai bioloģiskajos šķidrumos izmanto stabilāku NO metabolītu, nitrītu (NO 2-) un nitrātu (NO 3-) līmeni. Piemēri ir izmainīti līmeņi, kas saistīti ar sepsi, reprodukciju, infekcijām, hipertensiju, fiziskā aktivitāte, 2. tipa cukura diabēts, hipoksija un vēzis.

NO veidojas, oksidējoties L-arginīnam, piedaloties NADPH. Oksidācija notiek, piedaloties vienai no trim NO sintāzes (NOS) saimes enzīmu izoformām, veidojot citrulīnu. NOS saimes locekļi ietver neironu (nNOS/NOS1), endotēlija (eNOS/NOS3) un inducējamās (iNOS/NOS2) NO sintāzes. Kā norāda nosaukums, nNOS bagātīgi ekspresē CNS un PNS neironi, un tā ir atrodama arī citu audu šūnās, tostarp skeleta muskuļu miocītos, plaušu epitēlija šūnās un ādas tuklo šūnās; eNOS ekspresē endotēlijs, un to var noteikt arī neironos, ādas fibroblastos, keratinocītos un folikulu šūnās vairogdziedzeris, hepatocīti un gludās muskulatūras šūnas. iNOS tiek ekspresēts dažādos audos, tostarp hondrocītos, epitēlija šūnās, hepatocītos, glia audos un dažādos imūnsistēmas šūnu tipos. Kopumā eNOS un nNOS ekspresija notiek nepārtraukti, un to regulē Ca2+ atkarīgais kalmodulīns, savukārt iNOS sintēzi inducē endotoksīni un iekaisuma citokīni, un tā ir salīdzinoši nejutīga pret Ca2+.

Sakarā ar to, ka NO šķīst lipīdos, tas netiek uzglabāts, bet tiek sintezēts de novo un brīvi izkliedējas caur membrānām. NO ietekmi uz mērķa šūnām veicina dažādi mehānismi. Piemēram, enzīma guanilciklāzes (GC) aktivācija ar NO starpniecību katalizē otrā ziņotāja 3',5'-cikliskā guanozīna monofosfāta (cGMP) veidošanos. cGMP ir iesaistīts vairākās bioloģiskās funkcijās, piemēram, gludās muskulatūras kontrakcijas regulēšanā, šūnu dzīves laikā, proliferācijā, aksonu funkcijās, sinaptiskajā plastiskumā, iekaisumos, angiogēzē un ciklisko nukleotīdu kanālu aktivitātē. NO ir arī pretaudzēju un pretmikrobu līdzeklis, pateicoties mehānismiem, kas pārvēršas par peroksinitrītu (ONOO-), veidojot S-nitrozotiolus un samazinot arginīna krājumus. Vēl viena iespējamā NO loma ir mitohondriju elpošanas kavēšana, inhibējot citohroma oksidāzi. NO var arī mainīt proteīna aktivitāti, izmantojot pēctranslācijas nitrozilāciju, piesaistot cisteīna atlikumu tiola grupu.

Matricas metaloproteināzes (MMP)

Cilvēka MMP ir matricu noārdošu enzīmu saime. MMP ir spēja noārdīt gandrīz visas saistaudos atrodamās ekstracelulārās matricas sastāvdaļas (kolagēns, fibronektīns, laminīns, proteoglikāni utt.). Papildus līdzībām aminoskābju secības līmenī, visi MMP veidojas no neaktīviem prekursoriem, kas ārpusšūnu faktoru ietekmē tiek pārvērsti aktīvās substrātu noārdošās proteināzēs. MMP veidošanās avoti ir fibroblasti, makrofāgi, asinsvadu sienas gludās muskulatūras šūnas un neitrofīli. Jebkurš audzējs ir spēcīgs MMP veidošanās induktors stromas šūnās. Veicinot audzēja augšanas un metastāžu invāziju, MMP tajā pašā laikā ir spēcīgi neoangioģenēzes stimulatori. Endogēni un sintētiskie MMP inhibitori tiek izmantoti kā potenciāli pretvēža līdzekļi, kuru galvenais mērķis ir nomākt neoangioģenēzi.

Endostatīns

Bioloģiski aktīvs kolagēna VIII C-gala fragments ar m.m. 20 kDa. Pieder kolagēnam līdzīgu proteīnu saimei. Lai normālos apstākļos izvairītos no pārmērīgas asinsvadu augšanas, jaunu veidošanās un oriģinālo asinsvadu pārveidošanās procesus kontrolē atbilstoši augšanas faktori. Audzēja angioģenēzes laikā tiek novērota asinsvadu iekļūšana augošā audzēja masā. Endostatīns īpaši kavē endotēlija šūnu proliferāciju. Attiecīgi tas kavē angiogenēzi un audzēja augšanu. Endostatīna terapija pašlaik tiek veikta 1. fāzes klīniskajos pētījumos.

Citi diagnostiski nozīmīgi augšanas faktori

Cilmes šūnu faktors (SCF)

SCF ražotāji ir kaulu smadzeņu stromas šūnas, fibroblasti, endotēlija šūnas un Sertoli šūnas. Tās galvenās mērķa šūnas ir hematopoētiskās cilmes šūnas, dažādu hematopoētisko līniju un tuklo šūnu agrīnie prekursori. SCF aktivizē multipotentu cilmes šūnu diferenciāciju sinerģiski ar IL-3, GM-CSF un IL-7 un eritropoetīnu. Tas ir iesaistīts jaunāko T-limfocītu prekursoru formu proliferācijas uzturēšanā aizkrūts dziedzerī. Saistībā ar tuklo šūnām tas ir galvenais augšanas faktors un ķīmijaktiskais līdzeklis.

SCF ir svarīga klīniska nozīme kā limfocītu un eritrocītu prekursoru diferenciācijas induktors. SCF noteikšana ir nozīmīga mielodisplastiskā sindroma ārstēšanā un pēc kaulu smadzeņu transplantācijas.

Leikēmijas šūnu inhibējošais faktors (LIF)

LIF uzlabo hematopoētisko šūnu prekursoru proliferāciju. Ir pierādīts, ka LIF izraisa kaheksijas sindroma attīstību vēža slimniekiem. LIF receptoru komponents gp130 (CD130) ir daļa no IL-6 un -11 receptoriem.

No smadzenēm iegūts neirotrofiskais faktors (BDNF)

Kopā ar šo faktoru ģimenē ietilpst nervu augšanas faktors, neirotrofīni-3 un -4. BDNF stimulē nervu audu, galvenokārt holīnerģisko neironu, augšanu smadzenēs. Ir pierādīts, ka BDNF ietekmē šo šūnu augšanu, vielmaiņu un iekšējo struktūru. Neirotropo faktoru galvenais mērķis ir aizsargāt neironus no apoptozes.

UDC 616-006

Asinsvadu endotēlija AUGŠANAS FAKTORS — KLĪNISKI NOZĪMĪGS ĻAundabīgā NEOFOLISMA INDIKATORS

© E.S. Geršteins, D.N. Kušlinskis, L.V. Adamjans, N.A. Ognerubovs

Atslēgas vārdi: VEGF; VEGF-R; angioģenēze; audzēji; prognoze.

Tiek prezentēti mūsu pašu pētījumu rezultāti un nozīmīgākie literatūras dati, kas norāda, ka galvenais pozitīvais neoangioģenēzes regulators, asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF), ir klīniski nozīmīgs dažādu vēža prognostiskais faktors, kā arī mūsdienu mērķtiecības mērķis. zāles ar dažādiem darbības mehānismiem. Tā kā seroloģiskā marķiera loma diagnostikai un uzraudzībai prasa turpmāku izpēti.

Vispārīgas idejas par angiogēzes regulēšanu.

Angioģenēze ir jaunu kapilāru procesu atzarošanās process no jau esošiem asinsvadiem. Šis sarežģītais process ietver vismaz četrus posmus: asinsvadu bazālās membrānas un starpšūnu matricas proteolītisku iznīcināšanu, endotēlija šūnu migrāciju un piesaisti, to proliferāciju un, visbeidzot, cauruļveida struktūru veidošanos.

Šobrīd liela uzmanība tiek pievērsta ļaundabīgo audzēju neoangioģenēzes problēmai, jo vairs nav šaubu, ka audzējs nevar attīstīties un augt, ja tajā neveidojas plašs asinsvadu tīkls, kas nodrošina šūnu apgādi ar skābekli un barības vielām. . Interese par šo problēmu radās pirms vairāk nekā 30 gadiem, taču vēl salīdzinoši nesen galvenā neoangioģenēzes aktivitātes īpašība audzējos bija asinsvadu blīvuma audzēja audos (mikrovaskulārais blīvums) novērtējums mikroskopiski. Un tikai salīdzinoši nesen, studiju rezultātā molekulārie mehānismi Angioģenēze, kas intensīvi attīstās pēdējo 10-15 gadu laikā, ir pierādījusi vairāku regulējošu angiogēno un antiangiogēno faktoru klātbūtni, kuru dinamiskais līdzsvars nodrošina jaunu asinsvadu veidošanos un proliferāciju audzēja iekšpusē.

Angioģenēzes regulēšanā vienā vai otrā veidā ir iesaistīti daudzi zināmi augšanas faktori un citokīni, piemēram, bāziskie un skābie fibroblastu augšanas faktori (oFGF un cFGF), epidermas augšanas faktors (EGF), α- un P-transformējošie augšanas faktori (TGF). ), trombocītu izcelsmes endotēlija šūnu augšanas faktors/timidīna fosforilāze, audzēja nekrozes faktors, interleikīni utt. Tomēr vissvarīgākais pozitīvais angiogēzes regulators neapšaubāmi ir asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF), ko sauc arī par asinsvadu caurlaidības faktoru. Šī proteīna unikalitāte slēpjas faktā, ka atšķirībā no visiem citiem augšanas faktoriem tas ir mitogēns tikai attiecībā uz endotēlija šūnām, lai gan jaunākie dati liecina, ka autokrīna

VEGF ietekme uz audzēja šūnām, kas to ražo.

VEGF ir homodimērs, ļoti glikozilēts proteīns ar mol. kas sver 46-48 ^a, pastāv vismaz piecās izoformās ar līdzīgu bioloģisko aktivitāti, bet būtiski atšķiras pēc biopieejamības. VEGF biopieejamību lielā mērā nosaka molekulas lielums, un tā tiek regulēta ģenētiskā līmenī alternatīvas mRNS splicēšanas laikā, kā arī epigenomiski sintezēto molekulu proteolītiskās šķelšanās laikā, piedaloties plazminogēna aktivācijas sistēmai. Galvenais asinsvadu augšanas regulators ir VEGF A, savukārt VEGF C galvenokārt regulē limfangioģenēzi. Galvenās VEGF A šķīstošās formas ir molekulas ar 121 un 165 aminoskābju atlikumiem, un tās ir arī galvenās VEGF bioloģiski aktīvās formas. Tiek uzskatīts, ka audos galvenā VEGF izoforma ir VEGF-165.

Uz endotēlija šūnu virsmas ir 3 VEGF receptori, kas ir tipiskas receptoru tirozīnkināzes. VEGF 1. tipa receptors (VEGFR1) ir flt-1 gēna produkts, 2. tipa receptoru (VEGFR2) sauc par KDR, un tas ir peles flk-1 gēna produkta cilvēka homologs, un, visbeidzot, 3. tipa receptors (VEGFR3) ir flt-4 gēna produkts. Atšķirībā no VEGFR1 un 2, tas mijiedarbojas nevis ar klasisko VEGF (VEGF A), bet ar tā homologu -VEGF C. Visi receptori ir transmembrānas glikoproteīni ar mol. kas sver 170235 ^a. Efektīvai VEGF saistīšanai ar receptoriem ir nepieciešama tā mijiedarbība ar heparīnam līdzīgajiem ekstracelulārās matricas komponentiem.

Papildus mitogēnu aktivētās proteīnkināzes kaskādei, kas raksturīga lielākajai daļai receptoru kināžu, kas regulē ar proliferāciju saistīto gēnu ekspresiju, svarīgākie gēni, ko endotēlija šūnās regulē VEGF, ir c-ets-1 proto-onkogēns, kas kodē transkripcijas faktors Ets-1. Pētījumi, izmantojot in situ hibridizāciju, ir parādījuši, ka c-ets-1 tiek ekspresēts endotēlija šūnās agrīnā asins veidošanās stadijā.

vēnu trauki. Tā produkts Ets-1 veicina šo šūnu angiogēnā fenotipa izpausmi, aktivizējot gēnu transkripciju un sekojošu proteāžu sintēzi svarīgākajām proteāzēm, kas noārda ekstracelulāro matricu (ECM), - urokināzes tipa plazminogēna aktivatoru, stromelizīnu, kolagenāzi 1, MMP-1, 3 un 9, kā arī p2-integrīns. Šie efekti sasniedz maksimumu 2 stundas pēc VEGF (kā arī citu angiogēno faktoru - cFGF, oFGF un EGF) pievienošanas, un tos inhibē antisense oligonukleotīdi ets-1. Proteāžu aktivācijai ir trīs svarīgas sekas angiogēzes stimulēšanai: tā veicina endotēlija šūnu sadalīšanos un to invāziju asinsvadu bazālajā slānī, ģenerē ECM noārdīšanās produktus, kas veicina endotēlija šūnu ķīmijaksi, kā arī aktivizē un mobilizē augšanas faktorus, kas atrodas ECM.

VEGF loma krūts vēža angiogēzes regulēšanā. Pirmie pierādījumi par saistību starp VEGF ekspresiju un angiogēzes aktivitāti krūts audzējos tika iegūti no klīniskā materiāla un publicēti 1994.–1995. Japānas pētnieku grupa. Pirmajā pētījumā, ko veica imūnhistoķīmija un kurā piedalījās 103 pacienti ar krūts vēzi, viņi parādīja, ka mikrovaskulāru blīvums un tā augšana, ko noteica VIII faktora antigēna imūnķīmiska krāsošana, bija ievērojami augstāki audzējos ar intensīvu VEGF krāsošanu nekā audzējiem ar vāju krāsojumu. . VEGF lokalizējas galvenokārt audzēja šūnu citoplazmā. Pēc tam viņi paplašināja izmeklēto pacientu grupu līdz 328 cilvēkiem un, apstiprinot iepriekš minētos modeļus, arī parādīja, ka VEGF ekspresija korelē ar cita angiogēna faktora - trombocītu izcelsmes endotēlija šūnu augšanas faktora - ekspresiju. Vēlāk šie autori veica kvantitatīvu enzīmu saistītu imūnsorbcijas analīzi par VEGF saturu primārajos krūts vēža audos un parādīja, ka VEGF koncentrācija ļoti vaskularizētos audzējos bija ievērojami augstāka nekā vāji vaskularizētos audzējos. Tomēr netika atrasta saistība starp VEGF un diviem citiem potenciāli angiogēniem faktoriem - oFGF un hepatocītu augšanas faktoru audos. Šo divu faktoru koncentrācijas arī nekorelēja ar mikrovaskulāra blīvuma parametriem.

Tika iegūti arī interesanti dati. Izmantojot imūnhistoķīmisko metodi, viņi salīdzināja VEGF, tā receptoru flt-1, arī oFGF un α- un P-TGF ekspresiju krūts vēzī un apkārtējos normālajos krūts audos. Izrādījās, ka no visiem pētītajiem parametriem audzēja šūnās ievērojami palielinājās tikai VEGF ekspresija, salīdzinot ar normālām. VEGF ekspresijas palielināšanās krūts vēža audos, salīdzinot ar krūts audiem, kas nav audzēji, ir pierādīta arī ar RNS hibridizācijas metodēm. Visi šie pētījumi sniedza pirmos pierādījumus par VEGF svarīgo lomu krūts vēža neoangioģenēzē un tās nozīmi audzēja augšanā. Lai tiešāk pierādītu šo hipotēzi, bija nepieciešami eksperimentāli pētījumi, lai apstiprinātu krūts vēža šūnu radītā VEGF ietekmi uz angioģenēzi. Par vienu no pirmajiem šādiem pierādījumiem var uzskatīt darbu

H. Džans u.c. , kurā VEGF-121 gēns tika transfekēts estrogēnu-

atkarīgā krūts vēža šūnu līnija MCF-7. Transfektēto šūnu (V12) VEGF ekspresija un sekrēcija tika apstiprināta ar trim neatkarīgām metodēm: konkurētspējīgu radioreceptoru testu,

cilvēka endotēlija šūnu augšanas stimulēšana in vitro un angiogēzes aktivizēšana truša radzenē. Pārstādot plikām pelēm, klona V12 šūnas radīja vairāk vaskularizētu audzēju ar neviendabīgāku asinsvadu sadalījumu nekā vecāku MCF-7 šūnas. No V12 šūnām radušos audzēju augšanas ātrums bija lielāks nekā audzējiem no sākotnējās šūnu līnijas, bet saglabājās šūnu atkarība no hormoniem un to jutība pret tamoksifēnu. Tādējādi ir pierādīts, ka krūts vēža šūnām, kas pastāvīgi ražo VEGF, ir noteiktas izaugsmes priekšrocības.

Vēl viens pierādījums VEGF ietekmei uz krūts vēža augšanu un metastāzēm ir eksperimenti ar antivielām pret šo faktoru. Tādējādi eksperimentos ar pelēm ar spontānu krūts vēzi, kam raksturīgs augsts metastāžu biežums plaušās, tika pierādīts, ka poliklonālās antivielas pret VEGF kavē audzēja augšanu par 44% un samazina plaušu metastāžu skaitu un lielumu par 73 un 84%. , attiecīgi.

Interesantu modeli dažādu krūšu audu angiogēnā potenciāla pārbaudei in vivo izstrādāja H. Lichtenbeld et al. . Viņi ievietoja audzēja gabalus un normālus piena dziedzeru audus kamerā, ko veidoja kailu peļu muguras ādas kroka, un novērtēja angiogēzes indukciju. Tika konstatēts, ka visi krūts vēža paraugi, kā arī krūšu audi ar hiperplāziju un apokrīno metaplāziju būtiski aktivizē angiogenēzi. Histoloģiski neizmainīti krūts audu laukumi no pacientēm ar krūts vēzi 66% gadījumu stimulēja angioģenēzi, bet audi no vesela dziedzera iegūti no kosmētiskās operācijas, neietekmēja angioģenēzi. Visos gadījumos angiogēzes indukcija notika paralēli VEGF ražošanai audzēja vai krūts šūnās.

Klasiskais angiogēzes regulēšanas modelis krūts vēža gadījumā (tāpat kā jebkura cita audzēja gadījumā) paredz parakrīnas sistēmas klātbūtni, kurā augšanas faktoru (VEGF) ražo audzēja šūnas, un tā receptori, kas uztver signālu, atrodas uz asinsvadu endotēlija. šūnas. Šādas parakrīnas sistēmas esamību krūts vēža gadījumā labi ilustrē L. Brauna u.c. dati. , kas pētīja audu paraugus no 68 krūts vēža pacientēm, izmantojot RNS in situ hibridizāciju, un parādīja, ka invazīvas, metastātiskas un intraduktālas krūts karcinomas šūnās ir izteikta VEGF ekspresija, un asinsvadu endotēlija šūnās, kas iekļūst šajos audzējos, ir izteikta VEGFR1 un VEGFR2 ekspresija. Tika iegūti līdzīgi dati

A. Kranz et al. tomēr šie autori atrada VEGFR2 arī uz piena dziedzeru kanālu epitēlija šūnām. Ir arī citi pierādījumi, ka krūts vēža šūnas satur VEGF receptorus, un VEGF un VEGFR2 ekspresijas līmenis korelē ar audzēja šūnu proliferācijas indeksu, ko nosaka Ki-67 antigēna ekspresija. Ir pierādīts, ka gan audzēja, gan stromas šūnas, kas izolētas no primārajām cilvēka krūts karcinomām, ražo VEGF in vitro, un tā līmenis

ražošana ir ievērojami augstāka nekā atbilstošām šūnām, kas izolētas no normāliem piena dziedzeriem. Kurā PCR metode analīze parādīja, ka VEGFR2 dominē audzēja šūnās, un tikai VEGFR1 tiek ekspresēts stromas šūnās. Tādējādi, papildus savai tiešajai funkcijai - ne-angioģenēzes stimulēšanai, VEGF krūts vēža gadījumā var spēlēt arī audzēja un/vai stromas šūnu proliferācijas auto/parakrīna regulatora lomu.

Tiek pieņemts, ka VEGF krūts vēža gadījumā var būt arī cita loma: caur flt-1 receptoriem tas stimulē makrofāgu migrāciju audzēja audos, kas savukārt ir anioģenēzes stimulatori, jo sintezē dažādus angiogēnos faktorus, t.sk. un pats VEGF. Jo īpaši R. Leek et al. , pārbaudot audu paraugus no 96 krūts vēža pacientiem, parādīja pozitīvu korelāciju starp makrofāgu audzēja audu infiltrācijas indeksu un VEGF ekspresijas līmeni.

Krūts vēža šūnu VEGF sekrēciju izraisa dažādi ārēji un iekšēji faktori. P. Scott et al. , pētot hipoksijas, hipoglikēmijas, skābuma, sieviešu dzimuma steroīdu hormonu un D vitamīna ietekmi uz 4 galveno VEGF izoformu ekspresiju kultivētās krūts vēža šūnās ar dažādiem bioloģiskiem fenotipiem, parādīja, ka šīs šūnas būtiski atšķiras gan VEGF mRNS bazālajā ekspresijā. un savā jutīgumā pret dažādiem stimuliem. Tajā pašā laikā hipoksija izrādījās visspēcīgākais VEGF inducējošais stimuls visiem šūnu tipiem, un steroīdu hormoni praktiski neietekmēja VEGF ekspresiju. R. Bos et al. parādīja, ka neoangioģenēzes stimulācijā hipoksijas ietekmē svarīga loma ir HIF-1, hipoksijas apstākļos inducētam transkripcijas faktoram, kura augstais līmenis krūts vēža audos korelē ar augstu proliferācijas indeksu, paaugstinātu VEGF un estrogēnu receptori (ER). HIF-1 un VEGF ekspresija krūts vēža šūnās nav saistīta ar apoptozes induktora p53 ekspresijas līmeni. Tajā pašā laikā apoptozes inhibitors bcl-2 pastiprina hipoksijas stimulējošo iedarbību uz VEGF sintēzi krūts vēža šūnās. Hibridizācijas analīze parādīja, ka MCF-7 šūnu kloniem, kas pārmērīgi ekspresē bcl-2 un kuriem ir paaugstināts metastātiskais potenciāls un rezistence pret adriamicīnu, ir augstāks angiogēnāko VEGF izoformu - VEGF-121 un VEGF-165 - mRNS ekspresijas līmenis nekā sākotnējam MCF-klonam. 7. In vivo eksperimentos ar bcl-2 transfektētās šūnas veidoja audzējus ar lielāku vaskularizācijas pakāpi un augstāku VEGF ekspresiju nekā vecāku šūnas.

No otras puses, ir pierādīts, ka VEGF, kas ir endotēlija šūnu izdzīvošanas faktors, ne tikai stimulē to proliferāciju, bet arī nomāc apoptozi, izraisot bcl-2 ekspresiju. Interesanti, ka VEGF bija līdzīga darbība un uz krūts vēža šūnām, t.i., tas bija anti-apoptotisks faktors ne tikai endotēlija šūnām, bet arī pašām audzēja šūnām.

VEGF ekspresijas regulēšanā krūts vēža šūnās ir iesaistīti dažādi augšanas faktori un signalizācijas sistēmas. Jo īpaši vairāki pētījumi ir parādījuši receptoru tirozīna kināžu erbB saimes un dažu to ligandu nozīmīgo lomu. Tādējādi L. Yen et al. pārbaudot šūnu līniju paneli

Krūts vēzis ar stabilu ligandu nesaturošā “vadītāja receptora” erbB-2 pārmērīgu ekspresiju parādīja, ka heregulīns-P1, mijiedarbojoties ar erbB-3 un erbB-4 receptoriem, inducē VEGF sekrēciju lielākajā daļā pētīto krūts vēža šūnu līniju, bet ne. normālos krūšu šūnu dziedzeros. Bāzes VEGF sekrēcija tika palielināta šūnās ar paaugstinātu erbB-2 līmeni, un T47D šūnās ar funkcionāli inaktivētu erbB-2 tika samazināta ne tikai bazālā VEGF sekrēcija, bet arī tās indukcija ar heregulīnu. Pēc tam tika parādīts, ka heregulīna ietekme uz VEGF sintēzi ietver vienu no klasiskajiem signalizācijas ceļiem, kas ietver fosfatidilinozīta 3-kināzi un proteīnkināzi B (Akt), kam seko transkripcijas faktora HIF-1 indukcija, kas stimulē ekspresiju. VEGF gēnu.

VEGF ekspresijas regulatori krūts vēža šūnās acīmredzot ir arī daži TGF-β saimes augšanas faktori. TGF-P1 un VEGF koncentrācija krūts vēža pacientu audzējos un asins serumā pozitīvi korelēja viena ar otru, un in vitro eksperimentos TGF-P1 izraisīja VEGF veidošanos kultivētās MDA-MB-231 šūnās. Cits pētījums parādīja, ka vienlaicīga augsta TGF-β2 un tā receptoru ekspresija ir raksturīga audzējiem ar augstu mikrovadu blīvumu.

Līdz šim jautājums par VEGF sintēzes hormonālo regulēšanu krūts vēža šūnās ar dzimumsteroīdiem, īpaši estrogēniem, joprojām ir pretrunīgs. Lai gan VEGF mediētās angioģenēzes indukcija endometrijā ar estrogēnu ir praktiski droša, līdzīga mehānisma esamība krūts vēža gadījumā nav skaidri pierādīta. J. Rujhola u.c. izmantojot MCF-7 šūnu kultūru, tika parādīts, ka 17P-estradiols (E2) izraisa divfāzu pieaugumu VEGF mRNS sintēzē, ko papildina atbilstošā proteīna uzkrāšanās barotnē. Šo efektu bloķēja tīrais antiestrogēns ICI 182.780, kas liecina par ER līdzdalību tā ieviešanā. Tajā pašā laikā tādi klasiskie antiestrogēni kā tamoksifēns un toremifēns, kuriem ir daļēja estrogēna iedarbība, ne tikai neinhibēja E2 VEGF inducējošo iedarbību, bet arī paši inducēja VEGF sintēzi. RE dalību VEGF sintēzes regulēšanā krūts vēža šūnās apstiprina arī S. Hyder et al. molekulārie bioloģiskie pētījumi. kurš pierādīja, ka VEGF gēns satur divas sekvences, kas ir homologas klasiskajiem estrogēnu jutīgajiem elementiem un īpaši saistās ar abām ER formām - ER-a un ER-r.

Tomēr šķiet, ka estrogēnu un antiestrogēnu darbības raksturs uz VEGF sintēzi ir atkarīgs no krūts vēža šūnu veida. Tādējādi J. Kurebajaši u.c. aprakstīja cilvēka krūts vēža šūnu līniju KPL-1, kuras augšanu stimulēja ICI 182.780 un in vivo nomāca E2. Tajā pašā laikā E2-propionāts nomāca angiogēzi un stimulēja apoptozi audzējos, ko veido KPL-1 šūnas. In vitro apstākļos E2 neietekmēja ne VEGF sintēzi, ne šūnu proliferācijas ātrumu. Interesanti, ka VEGF ekspresiju KPL-1 šūnās izraisīja medroksiprogesterona acetāts.

S. Hyder et al. atzīmēja arī progestīnu inducējošo ietekmi uz VEGF sintēzi krūts vēža šūnās. . Pētot T47-D šūnu līniju, viņi atklāja

vai progesterons no devas atkarīgi palielināja VEGF līmeni barotnē 3-4 reizes ar maksimālais efekts 10 nM koncentrācijā. Tajā pašā laikā citi steroīdu hormoni (estrogēni, androgēni un glikokortikoīdi) neietekmēja VEGF veidošanos, un progestīnu iedarbība neizpaudās citās krūts vēža šūnu līnijās - hormonatkarīgajā MCF-7, ZR-75 un hormonā. -neatkarīgs MDA-MB^L Progesterona ietekmi uz T47- šūnām D bloķēja antiprogestīns RU-486, kas liecina par klasiskā receptoru mehānisma iesaistīšanos. Interesanti, ka saskaņā ar K. Heer et al. VEGF līmenis sieviešu asins serumā ir ievērojami samazināts menstruālā cikla luteālajā fāzē un ir apgrieztā attiecība par progesterona līmeni asins serumā. Šajā periodā iegūtais serums MCF-7 šūnās stimulēja VEGF ražošanu mazākā mērā nekā serums, kas iegūts menstruālā cikla pirmajā fāzē.

Interesantus modeļus attiecībā uz angioģenēzes hormonālo regulēšanu piena dziedzeros demonstrēja R. Greb et al. . Izpētījuši VEGF-A galveno izoformu ekspresiju, izmantojot PCR analīzi audzējos un apkārtējos neizmainītajos krūts audos 19 pacientēm ar krūts vēzi, viņi atklāja, ka VEGF ekspresijas līmenis neizmainītajā dziedzerī bija ievērojami augstāks pacientiem pirmsmenopauzes periodā nekā pēcmenopauzes periodā. pacientiem, un ievērojami samazinās, pieaugot pacientu vecumam. Tajā pašā laikā VEGF ekspresija audzēja audos nebija atkarīga no pacientu vecuma un menopauzes stāvokļa. Autori uzskata, ka normālos piena dziedzeros angiogēze tiek kontrolēta hormonāli, bet ļaundabīgās transformācijas laikā šī kontrole tiek zaudēta.

Papildus vispazīstamākajam un izplatītākajam angiogēnajam faktoram VEGF-A, kas aprakstīts iepriekš, ir vēl vairāki VEGF saimes pārstāvji - VEGF-B, C un D. VEGF-C funkcija līdz šim ir visskaidrāk definēta: Tiek uzskatīts, ka tas stimulē limfangioģenēzi, mijiedarbojoties ar VEGF 3. tipa (flt-4) receptoriem, kas atrodas uz limfātisko asinsvadu endotēlija šūnām. Eksperimentālie pētījumi ar plikām pelēm, izmantojot jaunu limfātiskā endotēlija marķieri LYVE-1, parādīja, ka pārmērīga VEGF-C ekspresija krūts vēža šūnās ievērojami uzlabo intraaudzēju limfangioģenēzi un stimulē metastāžu veidošanos reģionālajos limfmezglos un plaušās. Iepriekš J. Kurebajaši u.c. izmantojot PCR analīzi, tika pierādīts, ka atšķirībā no VEGF-A un B, kas atrodas krūts vēža audos neatkarīgi no to stadijas, VEGF-C tiek atklāts tikai audzējos, kas metastējušies limfmezglos, un VEGF-D tiek konstatēts tikai iekaisuma gadījumos. krūts vēzis. Savukārt, pēc R. Valtola u.c. VEGF-C receptoru ekspresija patiešām ir palielināta invazīvās un intraduktālās krūts karcinomās, salīdzinot ar normālām krūts un fibroadenomām, bet palielināta 3. tipa VEGF receptoru ekspresija tika novērota asinsvadu, nevis limfas asinsvadu endotēlija šūnās. Šajā sakarā autori uzskata, ka VEGF-C, tāpat kā VEGF-A, ir angiogēns faktors galvenokārt asinsvadiem, lai gan tie neizslēdz tā dalību limfangioģenēzes regulēšanā.

Kopumā uzmanība tiek pievērsta limfangioģenēzes un to regulējošo ligandu-receptoru sistēmu lomai cieto audzēju metastāžu procesos un jo īpaši krūts vēža gadījumā. Nesen arvien vairāk uzmanības.

Tādējādi VEGF ir svarīga un daudzveidīga loma krūts vēža ārstēšanā, stimulējot audzēja augšanu un izplatīšanos ar sarežģītu parakrīnu un autokrīnu iedarbību gan tieši uz asinsvadu endotēliju, gan uz audzēja šūnām un audzēja stromu, audzēju infiltrējošiem makrofāgiem un limfātisko asinsvadu šūnām. Tas viss ļauj uzskatīt VEGF par ļoti daudzsološu bioloģisko marķieri krūts vēža prognozēšanai un vienu no galvenajiem antiangiogēnās pretaudzēju terapijas mērķiem.

VEGF noteikšanas klīniskā nozīme krūts vēža gadījumā. Iepriekš mēs jau esam citējuši vairākus darbus, kuros, pamatojoties uz klīnisko materiālu, dažādas metodes(imūnhistoķīmiskais, imūnenzīms, hibridizācija) parādīja paaugstinātu VEGF ekspresiju krūts vēža audos un tās saistību ar tradicionālajiem rādītājiem, kas raksturo neoangioģenēzes aktivitāti audzēja audos. Kopumā saskaņā ar Medline datu bāzes analīzes rezultātiem audu VEGF līmeņa klīniskās nozīmes pētījumu krūts vēža gadījumā veica 14 pētnieku grupas. Vēlreiz jāatzīmē, ka gandrīz visi pētnieki, kas veikuši šādus salīdzinājumus, neatkarīgi no izmantotajām metodēm atzīmē VEGF ekspresijas pieaugumu krūts vēža audos, salīdzinot ar apkārtējiem histoloģiski nemainītajiem krūts audiem, kā arī ar labdabīgiem audzējiem. Nav arī strīdu par VEGF ekspresijas līmeņa tiešu korelāciju ar neoangioģenēzes aktivitāti audzēja audos.

Pirmo reizi augstas VEGF ekspresijas nelabvēlīgo prognostisko vērtību krūts vēža gadījumā atzīmēja M. Toi et al. . Retrospektīvi analizējot 328 pacientu novērošanas rezultātus, kuru audzējos VEGF ekspresija tika novērtēta ar imūnhistoķīmisko metodi, viņi parādīja, ka viendimensiju analīzē bezrecidīva dzīvildze pacientiem ar VEGF pozitīviem audzējiem bija ievērojami sliktāka nekā pacientiem ar VEGF pozitīviem audzējiem. VEGF negatīvi audzēji. VEGF nozīmi dzīvildzes bez slimībām prognozēšanā pierādīja arī M. Relfs et al. , kas noteica atbilstošās RNS ekspresiju audzēja audos 64 pacientiem ar krūts vēzi. Tajā pašā laikā, saskaņā ar A. Obermair et al. VEGF līmenim, kas izmērīts ar enzīmu imūntestu, nebija būtiskas ietekmes uz 89 pārbaudīto krūts vēža pacientu bez recidīva izdzīvošanas prognozi.

Interesantākie ir tie pētījumi, kuros VEGF prognostiskā vērtība novērtēta dažādās krūts vēža pacientu klīniskajās grupās, ņemot vērā ārstēšanu. Šādas detalizētas analīzes rezultātus publicēja divas grupas: G. Gasparini et al. un B. Linderholms et al. . 1997. gada rakstā G. Gasparini et al. iepazīstināja ar 260 pacientu ar krūts vēzi bez metastāzēm limfmezglos kvantitatīvās ar enzīmu saistītās imūnsorbcijas rezultātus VEGF koncentrācijas noteikšanai audzēju citozolos. Pacienti tika novēroti vidēji 66 mēnešus. Tajā pašā laikā VEGF plašā diapazonā

koncentrācijas zona (no 5 līdz 6523 pg/mg proteīna) konstatēta 95% audzēju. Tā līmenis nekorelēja ar zināmiem prognostiskajiem faktoriem: pacientu vecumu un menopauzes stāvokli, audzēja histoloģisko tipu, lielumu un receptoru statusu, taču tas izrādījās statistiski nozīmīgs bezrecidīva un kopējās dzīvildzes prognozētājs saskaņā ar gan vienfaktoru, gan daudzfaktoru analīze. Tādējādi VEGF citozola līmenis ir prognozes rādītājs pacientiem ar krūts vēža agrīnām stadijām, ļaujot veidot grupu ar paaugstinātu recidīvu un metastāžu risku.

Nākamajā šīs autoru grupas publikācijā salīdzinošs novērtējums VEGF un cita angiogēnā faktora timidīna fosforilāzes (TF – trombocītu izcelsmes endotēlija šūnu augšanas faktora) prognostiskā nozīme krūts vēža pacientēm ar metastāzēm limfmezglos, kuras saņēma ķīmijterapiju saskaņā ar CMP shēmu (137 pacienti) vai hormonterapiju ar tamoksifēnu (164). pacienti). Citozola VEGF koncentrācija abās grupās bija līdzīga. Pacientu grupā, kas saņēma tamoksifēnu, VEGF līmenis pozitīvi korelēja ar pacientu vecumu un bija apgriezti saistīts ar steroīdu hormonu receptoru līmeni. Šajā grupā VEGF līmenis kopā ar skarto limfmezglu skaitu un ER un RP koncentrācijām bija nozīmīgs neatkarīgs prognostiskais faktors vienfaktoru un daudzfaktoru analīzes rezultātos. Labākie rezultāti no ārstēšanas ar tamoksifēnu jāsagaida pacientiem ar zems līmenis VEGF audzējā un mazāk nekā trīs limfmezglu iesaistīšanās audzēja procesā. Zems VEGF līmenis izrādījās neatkarīgs labvēlīgas prognozes faktors pacientu grupā, kas saņēma ķīmijterapiju. Šajā grupā TF ir arī nozīmīgs prognostiskais faktors, un prognoze ir labvēlīga ar augstu šī proteīna līmeni.

Vienā no jaunākajiem O. Oa8ragipii pētījumiem a1. Daudzfaktoru prognozes modelis pacientēm ar krūts vēža agrīnām stadijām ietvēra arī dabiskos angiogēzes inhibitorus – trombospondīnus 1 un 2, taču to ieguldījums recidīvu brīvas un kopējās dzīvildzes prognozēšanā nebija statistiski nozīmīgs.

Tādējādi saskaņā ar šīs pētnieku grupas datiem, kas apkopoti vairākos apskata rakstos, VEGF ir perspektīvākais angioģenēzes aktivitātes prognostiskais rādītājs krūts vēža gadījumā. Tā augstais līmenis norāda

par nelabvēlīgo prognozi gan agrīna, gan progresējoša krūts vēža gadījumā. No citiem angiogēzes regulatoriem tikai TF dod zināmu ieguldījumu prognozes veidošanā, un tā nozīme izpaužas tikai progresējoša krūts vēža ķīmijterapijas laikā.

VEGF prognostisko vērtību neprogresējoša krūts vēža gadījumā ir pētījuši un apstiprinājuši arī B. biliary et al. . Viņi ar enzīmu imūnanalīzi noteica VEGF saturu audzēju citozolos 525 pacientiem bez metastāzēm limfmezglos (T1.2K0M0), no kuriem 500 pēcoperācijas nav saņēmuši nekādu ārstēšanu. Vidējais novērošanas ilgums bija 46 mēneši. Atšķirībā no iepriekš citētajiem pētniekiem, viņi atklāja tiešu korelāciju starp VEGF līmeni un audzēja lielumu, kā arī tā ļaundabīguma pakāpi un apgrieztu korelāciju.

VEGF un RE līmeni. Pacientiem ar citozola VEGF koncentrāciju zem vidējā līmeņa (2,4 pg/µg DNS) izdzīvošanas rādītājs bija ievērojami augstāks nekā pacientiem ar zemāku VEGF līmeni. Daudzfaktoru analīzē VEGF līmenis bija nozīmīgākais neatkarīgais prognostiskais faktors, kas ir pārāks par citiem zināmajiem rādītājiem. Būtiska dzīvildzes samazināšanās ar augstu VEGF līmeni audzējā tika konstatēta arī prognostiski labvēlīgajā ER pozitīvo pacientu grupā.

Pēc šo pašu autoru domām, augstam VEGF līmenim ir arī nelabvēlīga prognostiskā vērtība, ja pacientes ar agrīnu krūts vēža stadiju saņem lokoreginālu staru terapiju. Tika pārbaudīti 302 pacienti ar vidējo novērošanas periodu 56 mēneši. VEGF bija vienīgais neatkarīgais vispārējās dzīvildzes (relatīvais risks 3,6) prognozētājs visā grupā, kā arī dzīvildze bez recidīviem prognostiski labvēlīgākajās pacientu grupās ar maziem audzējiem (T1) un ER pozitīviem audzējiem. Autori norāda, ka augsts intratumorālais VEGF līmenis var atbilst radiorezistentam fenotipam un norāda uz nepieciešamību pēc papildu sistēmiskas ārstēšanas.

B. Linderholms u.c. pārbaudīja arī 362 krūts vēža pacientu grupu ar metastāzēm limfmezglos, no kurām 250 saņēma adjuvantu hormonterapiju un 112 - adjuvantu ķīmijterapiju. Viendimensiju analīzē VEGF izrādījās nozīmīgs slimības brīvas un vispārējās dzīvildzes prognozētājs visā pacientu populācijā, kā arī grupā, kas saņēma endokrīno terapiju. Pacientu grupā, kas saņēma ķīmijterapiju, VEGF līmenis ietekmēja tikai kopējo dzīvildzi. Daudzfaktoru analīzē VEGF saglabājās nozīmīgs tikai attiecībā uz kopējo dzīvildzi.

Tādējādi šī pētnieku grupa arī demonstrēja VEGF prognostisko nozīmi dažādām krūts vēža pacientu klīniskajām grupām, kas tika apkopota 2000. gada publikācijā, kurā bija iekļauti dati par 83 pacientiem ar dažādām krūts vēža stadijām. Šis darbs arī parādīja prognostisko nozīmi vienlaicīgam VEGF un mutanta p53 pētījumam. Relatīvais nāves risks pieauga 2,7 reizes grupā ar augstu VEGF saturu un pozitīvu p53 un tikai

1,7 grupās ar kādu no šiem nelabvēlīgajiem faktoriem.

Kooperatīvā pētījumā, kurā kopumā piedalījās 495 pacienti no divām dažādām klīnikām, pamatojoties uz datiem no vienfaktoru un daudzfaktoru analīzes, kurā kopā ar tradicionālajiem indikatoriem tika iekļauti angiogenīna, oFGF un plazminogēna aktivatori, tika parādīts, ka VEGF ir vissvarīgākais. prognostiskais parametrs pacientēm ar krūts vēzi bez metastāzēm limfmezglos. Un nesen cita pētnieku grupa apstiprināja, ka VEGF intratumorālais līmenis sniedz papildu ieguldījumu tā sauktajā Notingemas prognostiskajā indeksā, ko izmanto, lai veidotu augsta riska grupas pacientiem ar agrīnās krūts vēža stadijas.

Īpašu vietu ieņem J. Foekens u.c. pētījums. [b1], kurš noteica VEGF koncentrāciju konservētos ekstraktos, izmantojot enzīmu imūnanalīzes metodi.

kopumā 845 pacienti ar progresējošu krūts vēzi, kuriem attīstījās slimības recidīvs. 618 no šiem pacientiem saņēma adjuvantu pēcoperācijas hormonālo terapiju ar tamoksifēnu, un 227 pacienti saņēma pēcoperācijas ķīmijterapiju. Izrādījās, ka VEGF citozoliskā koncentrācija audzējos pacientiem, kuriem recidīvs notika pirmajā novērošanas gadā, bija ievērojami augstāka nekā pacientiem ar ilgāku bez recidīva periodu. Tika arī atzīmēts, ka VEGF līmenis primārajā audzējā ir augstāks pacientiem ar primārām metastāzēm iekšējos orgānos nekā pacientiem ar metastāzēm kaulos un mīkstajos audos. Augsts VEGF līmenis saskaņā ar vienfaktoru un daudzfaktoru analīzi izrādījās neatkarīgs zemas jutības rādītājs gan pret tamoksifēnu, gan ķīmijterapiju.

Kopumā 13 no 14 pētījumiem, ko publicēja 8 neatkarīgas pētnieku grupas, pierādīja, ka augsts VEGF līmenis ir neatkarīgs faktors sliktai krūts vēža prognozei agrīnā stadijā un/vai tā zemajai jutībai pret tradicionālajiem hormonu vai ķīmijterapijas veidiem. progresējošs krūts vēzis. Šajā sakarā tika ierosināts apsvērt iespēju iekļaut dažādas antiangiogēnas zāles adjuvanta terapijas shēmās pacientiem ar augstu intraaudzēja VEGF koncentrāciju. Jāpiebilst, ka vienotas metodoloģiskās pieejas un kritēriji pacientu ar augstu VEGF līmeni identificēšanai vēl nav izstrādāti, un to izveidei būs nepieciešami turpmāki kooperatīvie pētījumi.

Paralēli VEGF audu līmeņa klīniskās nozīmes izpētei krūts vēža gadījumā tiek risināts jautājums par to, vai paaugstināta VEGF ekspresija audzējā atspoguļojas šī proteīna līmenī serumā/plazmā un vai cirkulējošā VEGF koncentrācija ir tiek pētīta adekvāta tā satura un angioģenēzes aktivitātes īpašība audzējā. 1996.-1997.gadā Tika publicēti pirmie pētījumi, kas pierādīja VEGF līmeņa paaugstināšanos vēža slimnieku asinīs. Tādējādi Y. Yamamoto et al. [b2], pārbaudot lielu pacientu un donoru grupu, tostarp 137 pacientes ar krūts vēzi, konstatēja, ka VEGF līmenis asins serumā 8,8% pacientu ar krūts vēzi pārsniedz noteikto sliekšņa līmeni 180 pg/ml. VEGF līmenis serumā korelēja ar procesa apjomu un VEGF ekspresijas līmeni audzēja audos, un galvenā VEGF izoforma serumā bija VEGF-^5.

L. Dirikss u.c. [b3] pārbaudīja 132 pacientu grupu ar metastātisku vēzi ar dažādām primārajām diagnozēm. Viņi uzskatīja, ka VEGF līmenis ir paaugstināts, ja tas pārsniedz kontroles grupas 95% ticamības intervālu un sasniedza 500 pg/ml. VEGF bija paaugstināts 57% pacientu ar neārstētu metastātisku vēzi neatkarīgi no vietas. Ārstēšanas laikā VEGF līmenis palielinājās 2/3 pacientu ar slimības progresēšanu un mazāk nekā 10% pacientu ar pozitīvu dinamiku.

P. Salvens u.c. [b4] arī parādīja, ka dažāda veida audzējiem (ieskaitot krūts vēzi) VEGF līmenis serumā izplatītā vēža gadījumā (171 711 pg/ml; mediāna - 214 pg/ml) ir ievērojami augstāks nekā veseliem donoriem (1-177 pg). /ml; mediāna - 17 pg/ml) un pacientiem ar lokalizētu procesu (8-664 pg/ml; mediāna - 158 pg/ml). 74% neārstētu pacientu

Pacientiem ar diseminētu vēzi VEGF līmenis asins serumā pārsniedza 200 pg/ml, un ar veiksmīgu ārstēšanu tas pazeminājās. Līdzīgus modeļus atzīmēja A. Kraft et al. [b5]: pēc viņu datiem paaugstināts VEGF līmenis serumā tiek novērots 0-2G% pacientu ar lokalizētu audzēja procesu un 11-65% pacientu ar metastātisku procesu. Tomēr jāņem vērā, ka šajā pētījumā VEGF līmenis veseliem donoriem (30-1752 pg/ml; mediāna - 294 pg/ml; augšējais 95% ticamības intervāls - 883 pg/ml) bija ievērojami augstāks nekā citu ziņoto donoru līmenis. autori. Šajā pētījumā, tāpat kā B. Zebrovska u.c. [bb] tika pierādīts ievērojams VEGF koncentrācijas pieaugums ascītiskajos šķidrumos vēža slimniekiem, salīdzinot ar neaudzēja izcelsmes ascītu.

Jaunākā darbā P. Salven et al. [b7] sniedz VEGF koncentrācijas noteikšanas rezultātus asins serumā 105 pacientēm ar labdabīgiem un ļaundabīgiem krūts audzējiem. Ir pierādīts, ka VEGF līmenis asins serumā pacientiem ar metastātisku krūts vēzi (7-1347 pg/ml; mediāna - 186 pg/ml) ir ievērojami paaugstināts, salīdzinot ar pacientēm ar labdabīgiem audzējiem (2-328 pg/ml; mediāna -57 pg/ml). Arī VEGF līmenis pacientēm ar lokāli progresējošu krūts vēzi (11-539 pg/ml; mediāna - 104 pg/ml) ir augstāks nekā pacientēm ar labdabīgiem audzējiem, taču atšķirība nav statistiski nozīmīga. Pacientiem ar metastātisku vēzi, kuri saņēma specifisku ārstēšanu, VEGF līmenis bija ievērojami zemāks nekā pacientiem, kas saņēma tikai simptomātiska ārstēšana. Interesanti arī tas, ka ar lokāli progresējošu procesu VEGF līmenis asins serumā pacientiem ar invazīvu kanālu vēzi (vidēji - 107 pg/ml) bija ievērojami augstāks nekā pacientiem ar invazīvu lobulāro vēzi (vidēji - 44 pg/ml). ), un pēdējā tas bija pat zemāks nekā labdabīgiem audzējiem. Šis novērojums labi saskan ar A. Lī et al. [b8], kurš parādīja, ka ductal krūts vēža audos VEGF mRNS un proteīna saturs ir ievērojami augstāks nekā lobulārā vēža audos. Tajā pašā laikā kanāla un lobulārais vēzis neatšķīrās pēc mikroasinsvadu blīvuma, un tikai vadu vēža gadījumā bija tieša korelācija starp VEGF mRNS un olbaltumvielu līmeni un asinsvadu blīvuma rādītājiem. Var pieņemt, ka VEGF ir angiogēzes regulators galvenokārt ductal krūts vēža gadījumā.

Interesanti ir salīdzinošie pētījumi, kuros vienlaikus tika noteikts VEGF saturs / ekspresija audzēja audos un asins serumā. G. Calagy et al. [b9], kas ar imūnhistoķīmisko metodi noteica VEGF ekspresiju audos, nonāca pie secinājuma, ka tieši šis rādītājs, bet ne VEGF koncentrācija serumā, korelē ar mikroasinsvadu blīvumu un krūts vēža stadiju un tāpēc ir. ticamāks prognostiskais faktors nekā VEGF līmenis asins serumā. Viņi arī neatrada saistību starp VEGF līmeni serumā un tā ekspresiju audzējā.

Reprezentatīvāko salīdzinošo pētījumu veica J. Adams et al. . Viņi noteica VEGF saturu serumā un plazmā un VEGF ekspresiju audzējos (imūnhistoķīmiski) 201 pacientam ar lokalizētu un progresējošu krūts vēzi, labdabīgiem krūts audzējiem.

meži un veselas sievietes. Metastātiska krūts vēža gadījumā tika novērots ievērojams VEGF līmeņa pieaugums gan plazmā, gan serumā, salīdzinot ar normālu. VEGF saturs asins plazmā pacientiem ar metastātisku krūts vēzi arī bija ievērojami palielināts, salīdzinot ar pacientiem ar labdabīgiem audzējiem un lokalizētu krūts vēzi. Lokalizēta krūts vēža gadījumā tika novērots tikai VEGF līmeņa pieaugums asins plazmā, salīdzinot ar kontroli. Autori uzskata, ka VEGF mērījumi asins plazmā lielā mērā atspoguļo tā ražošanu audzējā, jo VEGF serumā galvenokārt ir trombocītu izcelsme. Paradoksāli, bet augstākais VEGF līmenis serumā un plazmā tika konstatēts pacientiem ar krūts vēzi, kuriem ārstēšanas ar tamoksifēnu laikā bija remisija. Cirkulējošais VEGF līmenis nekorelēja ne ar vienu no zināmajiem klīniski patoloģiskajiem faktoriem, ieskaitot mikrovaskulāro blīvumu un UROR audu ekspresiju.

Tādējādi iespēja izmantot VEGF līmeni asinīs (gan serumā, gan plazmā) kā adekvātu aizstājēju šī proteīna ekspresijai audos, novērtējot angioģenēzes aktivitāti krūts vēža gadījumā un prognozējot slimības iznākumu un terapijas efektivitāti. vēl nav pierādīts.

No ECEC atkarīga angiogenēze kā pretvēža terapijas mērķis krūts vēža gadījumā. Ņemot vērā angiogēzes būtisko lomu krūts vēža augšanas un izplatības uzturēšanā un VEGF galveno lomu šajā procesā, daudzi autori jau sen ir secinājuši, ka mērķtiecīga VEGF ekspresijas un/vai tās ietekmes nomākšana var būt daudzsološa pieeja krūts vēža attīstībai. jaunas adjuvantas ārstēšanas shēmas šai slimībai. Ir ierosināts kā antiangiogēnus līdzekļus izmantot vielas, kas salīdzinoši nespecifiski bloķē dažādu augšanas faktoru mijiedarbību ar tirozīna kināzes receptoriem, jo ​​īpaši mazāk toksiskus suramīna analogus. Tika arī pieņemts, ka antiangiogēnie līdzekļi varētu būt īpaši efektīvi, ja tie tiek kombinēti ar zālēm, kas aktivizētas hipoksijas apstākļos, jo angiogēzes nomākšana radītu labvēlīgus apstākļus šo zāļu aktivizēšanai. Īpašs uzsvars tika likts uz to, ka tīri antiangiogēna terapija, visticamāk, novedīs nevis pie audzēja regresijas, bet gan pie tā tālākas augšanas apturēšanas. Šajā sakarā tika norādīts uz nepieciešamību izstrādāt klīniskos un bioķīmiskos kritērijus antiangiogēno zāļu efektivitātes novērtēšanai.

Pašlaik tikai Amerikas Savienotajās Valstīs vairāk nekā 20 zāles, kas vienā vai otrā veidā ietekmē angiogenēzi, tiek pakļautas klīniskajiem pētījumiem, galvenokārt I fāzei. To vidū ir tādas diezgan specifiskas zāles kā monoklonālās antivielas VEOP (Genereil) un tā receptoros (IMC-1C11), VEGF receptoru iekšējās tirozīna kināzes inhibitori (piemēram, 7B6474), VEGF mitogēno signālu pārraides blokatori (SIII668 un SV416), dabiskie (Leova8-M ) un sintētiskie (Magita8la1, Propita8a1, VMB-275291, COb-3) matricas proteināžu inhibitori, dabiskie (angiostatīns un endostatīns) un sintētiskie (TYP-470) proliferācijas inhibitori vai apoptozes induktori ( Combre8la1m) endotēlija šūnu un

Ir arī vairākas zāles ar atšķirīgiem vai neskaidriem darbības mehānismiem.

I Roictap sadala antiangiogēnās zāles tiešos un netiešos angiogēzes inhibitoros. Viņš atsaucas uz tiešajiem inhibitoriem kā vielām, kas tieši ietekmē endotēlija šūnas. Tie ir jau minētie angiostatīns, endostatīns, TYP-470, Cotchain, kā arī tādi dabiskie angioģenēzes inhibitori kā trombospondīni, faktors pigmenta epitēlijs. Šādu zāļu raksturīga iezīme ir tāda, ka tās, kā likums, neizraisa rezistenci endotēlija šūnās un tāpēc tās var lietot ilgu laiku. Netiešie inhibitori ietver zāles, kas ietekmē audzēja šūnu angiogēno faktoru veidošanos vai bloķē šo faktoru darbību vienā vai otrā stadijā. Tās ir monoklonālas antivielas vai antisense nukleotīdi pret VEGF un tā receptoriem. Tā kā netiešo inhibitoru darbība ir tieši saistīta ar audzēja šūnu un tās spēju radīt angiogēnus faktorus, rezistences iespējamība pret šīm zālēm ir aptuveni tāda pati kā tradicionālajiem pretvēža līdzekļiem.

Interese par antiangiogēno pretaudzēju terapiju šobrīd ir tik liela, ka šīs jomas preklīniskajiem un klīniskajiem pētījumiem veltīto publikāciju skaits mērāms simtos, tāpēc šajā apskatā koncentrēsimies tikai uz darbiem, kas tieši saistīti ar krūts vēzi.

Klīniski vismodernākās ir zāles ar nezināmu antiangiogēnas iedarbības mehānismu – talidomīds. 20. gadsimta 70. gados tas tika izmantots kā nomierinošs līdzeklis un tika aizliegts tā teratogēno blakusparādību dēļ, kas radās tā antiangiogēno īpašību dēļ. Pašlaik tiek mēģināts izmantot talidomīda antiangiogēno potenciālu ļaundabīgo audzēju ārstēšanā, un tam jau notiek II fāzes klīniskie pētījumi. No 66 šajā pētījumā iekļautajiem pacientiem, kuri katru vakaru saņēma 100 mg talidomīda, bija 12 pacienti ar krūts vēzi. Pacientiem ar krūts vēzi nebija objektīvas atbildes reakcijas uz šīm zālēm, lai gan daļēja atbildes reakcija vai stabilizācija tika novērota 6 no 18 pacientiem ar nieru vēzi, kas iekļauti tajā pašā pētījumā.

Tajā pašā laikā agrākie eksperimenti par angiogēzes indukciju truša radzenē MCP-7 šūnu VEOP producējošā klona ietekmē parādīja, ka talidomīda analoga linomīds devā 100 mg/kg ķermeņa svara efektīvi kavē šo procesu. .

M. A8apo e1 a1. , parādīja, ka anti-VEGF monoklonālā antiviela MY833 nomāc cilvēka krūts vēža ksenotransplantāta augšanu plikām pelēm. Tomēr MY833 inhibējošā iedarbība nebija saistīta ne ar audzēja izdalītā VEGF daudzumu, ne ar VEGF receptoru ekspresiju. Citos eksperimentos, transplantējot sferoīdus, ko veido krūts vēža šūnas MCP-7, 7YA-75 un BK-VYA-3 līnijas krūts vēža šūnās bezatimijas peļu zemādas dorsālajā kamerā, tika parādīts, ka monoklonālā antiviela pret VEGF A.4.6. 1 dienas devā 200 μg ievērojami nomāc šo šūnu līniju angiogēno aktivitāti un uzlabo doksorubicīna pretvēža aktivitāti šajos modeļos.

Ievērojama pretvēža aktivitāte uz krūts vēža ksenotransplantātiem tika novērota arī specifiskajam vEGF receptoru tirozīna kināzes inhibitoram ar zemu molekulmasu (gan 1., gan 2. tipu) - 7B4190. Šo zāļu vienreizēja perorāla lietošana devās, kurām nebija tiešas antiproliferatīvas iedarbības uz audzēja šūnām, ievērojami nomāca konstatēto audzēju augšanu, kuru izmērs ir aptuveni 0,5 cm3. Citam tirozīna kināzes inhibitoram ir antiangiogēna iedarbība pret krūts vēža ksenotransplantātiem - labi zināmajam medikamentam 7B1839 (Ige88a), kas ir selektīvs EGF receptoru tirozīna kināzes inhibitors un jau tiek klīniski izmēģinājumi. Tiek pieņemts, ka šīs zāles tieši neiedarbojas uz VEGF receptoriem, bet nomāc VEGF sintēzes indukciju EGF receptoru ligandu ietekmē. Acīmredzot citam no EGF atkarīgā mitogēno signālu pārraides ceļa bloķētājam Herceptin, humanizētai monoklonālai antivielai pret Herb2/neu, ir līdzīga netieša ietekme uz angioģenēzi.

Zāles, kas traucē mikrotubulu darbību, ir arī efektīvi angioģenēzes inhibitori. Tātad tālajā 1997. gadā Klauber N. eii a1. parādīja, ka 2-metoksiestradiols un taksols, kuriem ir līdzīgas īpašības, inhibē VEGF izraisītu angiogēzi attiecīgi par 54 un 37%. Tajā pašā laikā 2-metoksiestradiols par 60% nomāca cilvēka krūts vēža augšanu, kas implantēts bezatimiskās pelēm. Taksola antiangiogēnās īpašības ir pierādījis arī B. bau e1 a1. pelēm ar labi vaskularizētu transgēnu krūts audzēju MeH. Ietekme tika novērota, lietojot taksola necitotoksiskas devas (3-6 mg/kg/dienā), un tā bija saistīta ar VEGF sekrēcijas nomākšanu.

Šo taksola īpašību tika ierosināts izmantot, lai novērtētu pacientu ar metastātisku krūts vēzi ārstēšanas efektivitāti. Viņu pētījumā bija iekļauti 14 pacienti, kuri saņēma taksola monoterapiju devā 175 mg/m2 IV trīs kursus, katrs pa 21 dienu. Visiem pacientiem VEGF līmenis serumā tika noteikts, izmantojot ar enzīmu saistītu imūnsorbcijas metodi pirms ārstēšanas sākuma un pēc katra 21 dienu ilga kursa. 3 pacientiem bija daļēja atbildes reakcija uz ārstēšanu, 6 - stabilizēšanās un 5 - slimības progresēšana. VEGF līmenis serumā pirms ārstēšanas bija ievērojami paaugstināts 8 no 14 pacientiem. Vidējais VEGF līmenis pēc ārstēšanas samazinājās pacientiem ar daļēju efektu un stabilizēšanos un būtiski nemainījās pacientiem ar progresēšanu. Turklāt VEGF līmeņa normalizēšanās procents vai tā samazināšanās par vairāk nekā 50% bija ievērojami augstāks pacientiem ar daļēju atbildes reakciju (5/9) nekā pacientiem ar progresēšanu (0/5). Autori uzskata, ka taksola stabilizējošā iedarbība pacientiem ar progresējošu krūts vēzi var būt saistīta ar VEGF sekrēcijas nomākšanu un attiecīgi angiogēzes inhibīciju.

Publicētie eksperimenti ar imūndeficīta pelēm parādīja iespēju izmantot gēnu terapiju, lai nomāktu angiogēzi un kavētu krūts vēža augšanu. Pelēm ar nobriedušiem Mca-4 audzējiem divreiz ar 7 dienu intervālu audzējā tika injicēta plazmīda, kas satur dabiskā angiogēzes inhibitora endostatīna gēnu. 14 dienas pēc pirmās ievadīšanas tas tika atklāts

audzēju svara samazināšanās eksperimentālajām pelēm par 51%, salīdzinot ar kontroles grupu. Tajā pašā laikā audzējos, kas satur un ekspresē endostatīna gēnu, tika novērots attāluma palielināšanās starp audzēja šūnām un tuvākajiem asinsvadiem, asinsvadu kopējā blīvuma samazināšanās un apoptozes palielināšanās.

Vēl viena gēnu inženierijas pieeja krūts vēža antiangiogēnai terapijai ir anti-sense cDNS izmantošana VEGF. S.A. Im et al. transficētas cilvēka krūts vēža šūnas no MDA231-MB līnijas ar adenovīrusu vektoru, kas satur to pašu cDNS VEGF-165 (Ad5CMV-alphaVEGF). In vitro sistēmā šī transfekcija izraisīja VEGF sekrēcijas samazināšanos, būtiski neietekmējot šūnu augšanu. Ad5CMV-alfaVEGF in vivo injicēšana audzējos, ko veidojušas MDA231-MB šūnas kailām pelēm, izraisīja audzēja augšanas nomākšanu, VEGF proteīna ekspresijas samazināšanos audzēja audos un mikrovaskulārā blīvuma samazināšanos, salīdzinot ar grupu, kas injicēta ar vektoru, kas nesatur anti- VEGF cDNS.

Tādējādi ir eksperimentāli pierādīta iespēja izmantot dažāda veida tiešu un netiešu antiangiogēno terapiju krūts vēža pacientu ārstēšanā. Diemžēl neviena no šīm metodēm klīnikā vēl nav pierādījusi savu efektivitāti. Turklāt lielākā daļa autoru sliecas uzskatīt, ka antiangiogēno terapiju (īpaši tiešo), kas pārsvarā ir citostatiska, nevis citotoksiska lieliem audzējiem, nevajadzētu izmantot kā neatkarīgu ārstēšanas metodi, bet gan kā svarīgu papildinājumu standarta terapijas shēmām.

LITERATŪRA

1. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angioģenēze un fibrinolītiskā sistēma // Semin. Trombs. Hemost. 1996. V. 22. Nr. 6. P. 517-524.

2. Ferrara N. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora loma patoloģiskā angioģenēzē // Breast Cancer Res. Ārstēt. 1995. V. 36. Nr. 2. P. 127137.

3. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Vai transkripcijas faktors c-ets1 piedalās angioģenēzes un audzēja invāzijas regulēšanā? // Folia Biol. (Praha). 1994. V. 40. Nr. 5. P. 301-313.

4. Sato Y. Transkripcijas faktors ETS-1 kā molekulārais mērķis angioģenēzes inhibēšanai // Hum. Šūna. 1998. V. 11. Nr. 4. P. 207-214.

5. Iwasaka C., Tanaka K., Abe M., Sato Y. Ets-1 regulē angioģenēzi, inducējot urokināzes tipa plazminogēna aktivatora un matricas metaloproteināzes-1 ekspresiju un asinsvadu endotēlija šūnu migrāciju // J. Cell Physiol . 1996. V. 169. Nr. 3. P. 522-531.

6. Mignatti P., Rifkins D.B. Plazminogēna aktivatori un matricas metaloproteināzes angiogenēzē // Enzīmu proteīns. 1996. V. 49. P. 117-137.

7. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresijas saistība ar audzēja angioģenēzi un agrīnu recidīvu primārā krūts vēža gadījumā // Jpn. J. Cancer Res. 1994. V. 85. Nr. 10. P. 1045-1049.

8. Toi M., Inada K., Hoshina S., Suzuki H., Kondo S., Tominaga T. Asinsvadu endotēlija augšanas faktors un trombocītu izcelsmes endotēlija šūnu augšanas faktors bieži tiek koekspresēti ļoti vaskularizētā cilvēka krūts vēža gadījumā. Clin. Cancer Res. 1995. V. 1. Nr. 9. P. 961-964.

9. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Audzēja angioģenēze krūts vēža gadījumā: tās nozīme kā prognostiskais indikators un saistība ar asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresiju Breast Cancer Res. Ārstēt. 1995. V. 36. Nr. 2. P. 193-204.

10. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora kvantitatīvā analīze primārā krūts vēža gadījumā. Cancer. 1996. V. 77. Nr. 6. P. 1101-1106.

11. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Regula of endothelial growth factor expressions in breast cancer // Gan To Kagaku Ryoho. 1996. V. 23. Papild. 1. P. 75-79.

12. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora, tā receptoru un citu angiogēno vielu izpausme

faktori cilvēka krūts vēža gadījumā // Cancer Res. 1996. V. 56. Nr. 9. P. 2013-2016.

13. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Kitsuki H., Uchiyama A., Kuroki S., Tanaka M., Torisu M. Asinsvadu endotēlija augšanas faktors un trombocītu izcelsmes augšanas faktors ir potenciāli angiogēns un metastātiskie faktori cilvēka krūts vēža gadījumā // Ķirurģija. 1996. V. 119. Nr.3.

14. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Tsukahara Y., Kojima M., Uchiyama A., Kuroki S., Torisu M., Tanaka M. Assessment of c-erbB2 and vascular endothelial growth faktora mRNS ekspresija smalkas adatas aspirātos no agrīnām krūts karcinomām: ļaundabīgā potenciāla pirmsoperācijas noteikšana // Eur. J. Surg. Oncol. 1998. V. 24. Nr.1. P. 28-33.

15. Guidi A.J., Schnitt S.J., Fischer L., Tognazzi K., Harris J.R., Dvoraks H.F., Brown L.F. Asinsvadu caurlaidības faktora (asinsvadu endotēlija augšanas faktora) ekspresija un angioģenēze pacientiem ar krūts kanāla karcinomu in situ // Vēzis. 1997. V. 80. Nr. 10. P. 1945-1953.

16. Zhang H.T., Craft P., Scott P.A., Ziche M., Weich H.A., Harris A.L., Bicknell R. Audzēja augšanas un asinsvadu blīvuma uzlabošana, transfekējot asinsvadu endotēlija šūnu augšanas faktoru MCF-7 cilvēka krūts karcinomas šūnās. Natl. Cancer Inst. 1995. V. 87. Nr. 3. P. 213-219.

17. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., Wang N., Liu T. Antivielu ietekme pret asinsvadu endotēlija augšanas faktoru uz audzēja augšanu un metastāzēm J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1998. V. 124. Nr. 11. P. 615-620.

18. Vans G., Jangs Z., Šou Č. // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1997. V. 19. Nr. 6. P. 407-409.

19. Lichtenbeld H.C., Barendsz-Janson A.F., van Essen H., Struijker Boudier H., Grifioen A.W., Hillen H.F. Ļaundabīgo un ļaundabīgo cilvēka krūts audu angiogēnais potenciāls in vivo angiogēzes modelī // Int. J. Vēzis. 1998. V. 77. Nr. 3. P. 455-459.

20. Brown L.F., Guidi A.J., Schnitt S.J., Van De Water L., Iruela-Arispe M.L., Yeo T.K., Tognazzi K., Dvoraks H.F. Asinsvadu stromas veidošanās karcinomā in situ, invazīvā karcinomā un metastātiskā krūts karcinomā // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. Nr. 5. P. 1041-1056.

21. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Audzēja angioģenēzes molekulārie mediatori: asinsvadu endotēlija augšanas faktora receptoru KDR pastiprināta ekspresija un aktivācija primārā krūts vēža gadījumā // Int. J. Vēzis. 1999. V. 84. Nr. 3. P. 293-298.

22. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) un tā receptoru (flk-1 un flt-1) koekspresija hormonu izraisītā piena vēzē cildenajā žurkā // Br. J. Vēzis.

1999. V. 81. Nr. 8. P. 1335-1343.

23. Speirs V., Atkin S.L. VEGF ražošana un VEGF receptoru Flt-1 un KDR ekspresija epitēlija un stromas šūnu primārajās kultūrās, kas iegūtas no krūts audzējiem // Br. J. Vēzis. 1999. V. 80. Nr.5-6. 898.-903. lpp.

24. Leek R.D., Hunt N.C., Landers R.J., Lewis C.E., Royds J.A., Harris A.L. Makrofāgu infiltrācija ir saistīta ar VEGF un EGFR ekspresiju krūts vēža gadījumā // J. Pathol. 2000. V. 190. Nr. 4. P. 430-436.

25. Skots P.A., Glīdls J.M., Biknels R., Hariss A.L. Hipoksijas noteikšanas sistēmas, skābuma un reproduktīvo hormonu loma asinsvadu endotēlija augšanas faktora indukcijas mainīgumā cilvēka krūts karcinomas šūnu līnijās // Int. J. Vēzis. 1998. V. 75. Nr. 5. P. 706-712.

26. Bos R., Zhong H., Hanrahan C.F., Mommers E.C., Semenza G.L., Pinedo H.M., Abeloff M.D., Simons J.W., van Diest P.J., van der Wall

E. Hipoksijas izraisītā faktora-1 alfa līmeņi krūts kanceroģenēzes laikā // J. Natl. Cancer Inst. 2001. V. 93. Nr. 4. P. 309-314.

27. Biroccio A., Candiloro A., Mottolese M., Sapora O., Albini A., Zupi G., Del Bufalo D. Bcl-2 pārmērīga ekspresija un hipoksija sinerģiski darbojas, lai modulētu asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresiju un in vivo an- giogenesis krūts karcinomas līnijā // FASEB J. 2000. V. 14. Nr. 5. P. 652-660.

28. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., Bouchier Hayes D.J. Asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF) pārregulē BCL-2 un inhibē apoptozi cilvēka un peles piena dziedzeru adenokarcinomas šūnās // Br. J. Vēzis. 2001. V. 85. Nr. 2. P. 273-278.

29. Yen L., You X.L., Al Moustafa A.E., Batist G., Hynes N.E., Mader S., Meloche S., Alaoui-Jamali M.A. Heregulīns selektīvi regulē asinsvadu endotēlija augšanas faktora sekrēciju vēža šūnās un stimulē angiogenēzi // Onkogēns. 2000. V. 19. Nr. 31. P. 3460-3469.

30. Laughner E., Taghavi P., Chiles K., Mahon P.C., Semenza G.L. HER2 (neu) signalizācija palielina hipoksijas izraisītā faktora 1alfa (HIF-1alfa) sintēzes ātrumu: jauns mehānisms HIF-1 mediētā asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresijai // Mol. Cell Biol. 2001. V. 21. Nr. 12. P. 3995-4004.

31. Blancher C., Moore J.W., Robertson N., Harris A.L. Ras un fon Hipela-Lindau (VHL) gēnu mutāciju ietekme uz hipoksijas inducējamo faktoru (HIF)-1alfa, HIF-2alfa un asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresiju un to regulēšana ar fosfatidilinozītu 3"-

Kinase/Akt Signaling Pathway // Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 19. P. 7349-7355.

32. Donovans D., Hārmijs J. H., Tomijs D., Osborns D. H., Redmonds H. P., Bušjē-Hajs, D. Dž. TGF beta-1 regulēšana VEGF ražošanai ar krūts vēža šūnām // Ann. Surg. Oncol. 1997. V. 4. Nr. 8. P. 621-627.

33. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Augšanas faktoru, augšanu kavējošu faktoru un to receptoru ekspresija invazīvā krūts vēža gadījumā. I: Inventarizācija autokrīnas un parakrīnas cilpas meklējumos // J. Pathol. 1998. V. 184. Nr. 1. P. 44-52.

34. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk, P., Baak, J.P. Augšanas faktoru, augšanu inhibējošo faktoru un to receptoru izpausme invazīvā krūts vēža gadījumā. II: Korelācijas ar proliferāciju un angiogenēzi // J. Pathol. 1998. V. 184. Nr. 1. P. 53-57.

35. De Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Augšanas faktoru, augšanas faktoru receptoru un ar apoptozi saistīto proteīnu ekspresija invazīvā krūts vēža gadījumā: saistība ar apoptozes ātrumu // Breast Cancer Res. Ārstēt. 2001. V. 66. Nr. 3. P. 201-208.

36. Hyder S.M., Stancel G.M. VEGF regulēšana reproduktīvajā traktā ar dzimumsteroīdu hormoniem // Histol. Histopatols. 2000. V. 15. Nr.1. P. 325-234.

37. Ruohola J.K., Valve E.M., Karkkainen M.J., Joukov V., Alitalo K., Harkonen P.L. Asinsvadu endotēlija augšanas faktorus krūts vēža šūnās atšķirīgi regulē steroīdu hormoni un antiestrogēni // Mol. Šūnu Endokrinols. 1999. V. 149. Nr.1-2. 29.-40.lpp.

38. Hyder S.M., Navaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Funkcionālo estrogēnu atbildes elementu identificēšana gēnā, kas kodē spēcīgo angiogēno faktoru, asinsvadu endotēlija augšanas faktoru // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 12. P. 3183-3190.

39. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Paradoksālās hormonu atbildes KPL-1 krūts vēža šūnās in vivo: nozīmīga angioģenēzes loma audzēja augšanā // Onkoloģija. 2000. V. 59. Nr. 2. P. 158-165.

40. Haiders S.M., Mērtijs L., Stensels G.M. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora progestīna regulēšana cilvēka krūts vēža šūnās // Cancer Res.

1998. V. 58. Nr. 3. P. 392-395.

41. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Farmakoloģiskie un endogēnie progestīni inducē asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresiju cilvēka krūts vēža šūnās // Int. J. Vēzis. 2001. V. 92. Nr. 4. P. 469473.

42. Hērs K., Kumars H., Spīrss V., Grīnmens Dž., Drū P. Dž., Fokss Dž. N., Kārletons P. Dž., Monsons Dž. Asinsvadu endotēlija augšanas faktors sievietēm pirmsmenopauzes periodā — labākā laika rādītājs krūts vēža operācijai? // Br. J. Vēzis. 1998. V. 78. Nr. 9. P. 1203-1207.

43. Greb R.R., Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora A (VEGF-A) mRNS ekspresijas līmenis samazinās pēc menopauzes normālos krūts audos, bet ne krūts vēža bojājumos // Br. J. Vēzis. 1999. V. 81. Nr. 2. P. 225-231.

44. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., Claffey K., DetmarM. Audzēja limfangioģenēzes indukcija ar VEGF-C veicina krūts vēža metastāzes // Nat. Med. 2001. V. 7. Nr. 2. P. 192-198.

45. Kurebayashi J., Otsuki T., Kunisue H., Mikami Y., Tanaka K., Yamamoto S., Sonoo H. Expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) family members in breast cancer // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. Nr. 9. P. 977-981.

46. ​​Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 un tā ligands VEGF -C ir saistīti ar angiogenēzi krūts vēža gadījumā // Am. J. Pathols. 1999. V. 154. Nr. 5. P. 1381-1390.

47. Ohhashi T. // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 2001. V. 102. Nr. 6. P. 435-439.

48. Obermair A., ​​​​Kucera E., Mayerhofer K., Speiser P., Seifert M., Czer-wenka K., Kaider A., ​​​​Leodolter S., Kainz C., Zeillinger R. Asinsvadu endotēlija augšana faktors (VEGF) cilvēka krūts vēža gadījumā: korelācija ar dzīvildzi bez slimībām // Int. J. Vēzis. 1997. V. 74. Nr. 4. P. 455458.

49. Relfs M., LeJūns S., Skots P.A., Fokss S., Smits K., Leks R., Mogadams A., Vaithauss R., Biknels R., Hariss A.L. Angiogēno faktoru asinsvadu endotēlija šūnu augšanas faktora, skābā un bāziskā fibroblastu augšanas faktora, audzēja augšanas faktora beta-1, trombocītu izcelsmes endotēlija šūnu augšanas faktora, placentas augšanas faktora un pleiotropīna ekspresija cilvēka primārā krūts vēža gadījumā un to saistība ar angioģenēze // Cancer Res. 1997. V. 57. Nr. 5. P. 963-969.

50. Gasparini G., Toi M., Gion M., Verderio P., Dittadi R., Hanatani M., Matsubara I., Vinante O., Bonoldi E., Boracchi P., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora proteīna prognostiskā nozīme mezglu negatīvā krūts karcinomas gadījumā // J. Natl. Cancer Inst.

1997. V. 89. Nr. 2. P. 139-147.

51. Gasparini G., Toi M., Miceli R., Vermeulen P.B., Dittadi R., Bigan-zoli E., Morabito A., Fanelli M., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T., Di-rix L.Y., Gion M. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora un timidīna fosforilāzes klīniskā nozīme pacientiem ar mezglu pozitīvu krūti

vēzis, kas ārstēts ar adjuvantu ķīmijterapiju vai hormonu terapiju // Cancer J. Sci. Am. 1999. V. 5. Nr. 2. P. 101-111.

52. Gasparini G. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora prognostiskā vērtība krūts vēža gadījumā // Onkologs. 2000. V. 5. Papild. 1. P. 37-44.

53. Gasparini G. Angioģenēzes surogātmarķieru noteikšanas klīniskā nozīme krūts vēža gadījumā // Crit. Rev. Oncol. Hematols. 2001. V. 37. Nr. 2. P. 97-114.

54. Gasparini G., ToiM., Biganzoli E., Dittadi R., Fanelli M., Morabito A., Boracchi P., Gion M. Trombospondin-1 un -2 in mezglu negatīvs krūts vēzis: korelācija ar angiogēniem faktoriem, p53, katepsīns D, hormonu receptori un prognoze // Onkoloģija. 2001. V. 60. Nr. 1. P. 72-

55. Linderholms B., Tavelins B., Grankvists K., Henrikssons R. Vai asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF) prognozē lokālu recidīvu un izdzīvošanu ar staru terapiju ārstētā mezglu negatīvā krūts vēža gadījumā? // Br. J. Vēzis.

1999. V. 81. Nr. 4. P. 727-732.

56. Linderholms B., Linds B., Tavelins B., Grankvists K., Henrikssons R. p53 un asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) ekspresija prognozē iznākumu 833 pacientēm ar primāru krūts karcinomu. J. Vēzis.

2000. V. 89. Nr.1. P. 51 -62.

57. Linderholms B., Grankvists K., Vilkings N., Johansons M., Tavelins B., Henrikssons R. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora satura korelācija ar recidīviem, izdzīvošanu un pirmo recidīvu vietu primārajā mezglu pozitīvā krūts karcinomā pēc adjuvanta ārstēšana / / J. Clin. Oncol.

2000. V. 18. Nr. 7. P. 1423-1431.

58. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Angiogēno faktoru klīniskā nozīme krūts vēža gadījumā // Breast Cancer Res. Ārstēt. 1998. V. 52. Nr.1-3. 159.-173.lpp.

59. Eppenberger U., Kueng W., Schlaeppi J.M., Roesel J. L., Benz C., Mueller H., Matter A., ​​​​> Zuber M., Luescher K., Litschgi M., SchmittM., Foekens J.A., Eppenberger- Castori S. Audzēja angioģenēzes un proteolīzes marķieri neatkarīgi nosaka mezglu negatīvo krūts vēža pacientu augsta un zema riska apakšgrupas // J. Clin. Oncol. 1998. V. 16. Nr. 9. P. 3129-3136.

60. Coradini D., Boracchi P., Daidone M.G., Pellizzaro C., Miodini P., Ammatuna M., Tomasic G., Biganzoli E. Contribution of vascular endothelial growth factor to the Notingham prognostic index in node-negative breast cancer / / Br . J. Vēzis. 2001. V. 85. Nr. 6. P. 795-797.

61. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., LookM.P., Meijer van Gelder M.E., Geurts Moespot A., van der Kwast T.H., Sweep C.G., Klijn J.G. Augsts asinsvadu endotēlija augšanas faktora audzēja līmenis paredz sliktu reakciju uz sistēmisku terapiju progresējoša krūts vēža gadījumā // Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 14. P. 5407-5414.

62. Yamamoto Y., Toi M., Kondo S., Matsumoto T., Suzuki H., Kitamu-raM., Tsuruta K., Taniguchi T., Okamoto A., Mori T., YoshidaM., Ike-da T. .., Tominaga T. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora koncentrācija normālu kontroles un vēža pacientu serumos // Clin. Cancer Res. 1996. V. 2. Nr. 5. P. 821-826.

63. Dirix L.Y., Vermeulen P.B., Pawinski A., Prove A., Benoy I., De Pooter C., Martin M., Van Oosterom A.T. Paaugstināts angiogēno citokīnu pamata fibroblastu augšanas faktora un asinsvadu endotēlija augšanas faktora līmenis vēža pacientu serumos // Br. J. Vēzis. 1997. V. 76. Nr. 2. P. 238-243.

64. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Seruma asinsvadu endotēlija augšanas faktors bieži ir paaugstināts izplatītā vēža gadījumā // Clin. Cancer Res. 1997. V. 3. Nr. 5. P. 647-651.

65. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Vascular endothelial growth factor in the sera and effusions of patients with malignant un neļaundabīga slimība // Vēzis. 1999. V. 85. Nr. 1. P. 178-187.

66. Zebrovskis B.K., Jano S., Liu V., Šahīns R.M., Hiklins D.D., Putnams Dž.B. Jr., Eliss L.M. Asinsvadu endotēlija augšanas faktora līmenis un caurlaidības indukcija ļaundabīgos pleiras izsvīdumos // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. Nr. 11. P. 3364-3368.

67. Salven P., Perhoniemi V., Tykka H., Maenpaa H., Joensuu H. Seruma VEGF līmenis sievietēm ar labdabīgu krūts audzēju vai krūts vēzi // Breast Cancer Res. Ārstēt. 1999. V. 53. Nr. 2. P. 161-166.

68. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Invasive lobular and invasive ductal carcinoma of the krūts parāda atšķirīgus asinsvadu endotēlija augšanas faktora ekspresijas un angioģenēzes modeļus // J. Pathol.

1998. V. 185. Nr. 4. P. 394-401.

69. Callagy G., Dimitriadis E., Harmey J., Bouchier-Hayes D., Leader M., Kay E. Immunohistochemical mērījums audzēja asinsvadu endotēlija augšanas faktors krūts vēža gadījumā. Uzticamāks audzēja stadijas prognozētājs nekā mikrovaskulārais blīvums vai seruma asinsvadu endotēlija augšanas faktors // Appl. Imūnhistoķīmija. Molekula. Morphol. 2000. V. 8. Nr. 2. P. 104-109.

70. Adams J., Kārders P.J., Daunijs S., Forbes M.A., Maklennans K., Allgars V., Kaufmens S., Hallams S., Biknels R., Vokers Dž.Dž., Kērndfa

F., Selbijs P.J., Perrens T.J., Lansdauns M., Banks R.E. Asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF) krūts vēža gadījumā: plazmas, seruma un audu VEGF un mikrovadu blīvuma un tamoksifēna ietekmes salīdzinājums // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 11. P. 2898-2905.

71. Hariss A.L. Antiangioģenēzes terapija un stratēģijas tās integrēšanai ar adjuvantu terapiju // Recent Results Cancer Res. 1998. V. 152. P. 341-352.

72. Hariss A.L., Džans H., Moghadams A., Fokss S., Skots P., Patisons A., Gaters K., Stratfords I., Biknels R. Krūts vēža angioģenēze — jaunas pieejas terapijai, izmantojot antiangioģenēzi, hipoksijas aktivētas zāles , un asinsvadu mērķauditorijas atlase // Breast Cancer Res. Ārstēt. 1996. V. 38. Nr. 1. P. 97108.

73. Kerbel R.S., Viloria Petit A., Klement G., Rak J. "Nejaušas" antiangiogēnas zāles. piemēri pret onkogēniem vērsti signālu transdukcijas inhibitori un parastie ķīmijterapijas līdzekļi // Eur. J. Vēzis. 2000. V. 36. Nr. 10. P. 1248-1257.

74. Folkman J. Angiogenesis // Harrison’s Textbook of Internal Medicine, 15. izd. /red. autors: E. Braunvalds, A.S. Fauči, D.L. Kaspers, S.L. Hauzers, D.L. Longo, J.L. Džeimsons. N. Y.: McGraw-Hill, 2001. 517.-530. lpp.

75. Eizens T., Bošofs K., Maks I., Sapunars F., Vons M. M., Pīls L., Džonstons S. R., Aherns R., Smits I. E., Gors M. E. Nepārtraukta zemas devas talidomīds: II fāzes pētījums ar progresējošu melanomu, nieru šūnu, olnīcu un krūts vēzi // Br. J. Vēzis. 2000. V. 82. Nr. 4. P. 812-817.

76. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomide blocks angiogenesis by breast carcinoma vascular endothelial growth factor transfectants // Br. J. Vēzis. 1998. V. 77. Nr. 7. P. 11231129.

77. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Plašs neitralizējošas monoklonālās antivielas pretvēža darbības spektrs pret cilvēka asinsvadu endotēlija augšanas faktoru // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. Nr.1. 93.-100.lpp.

78. Borgstrom P., Gold D.P., Hillan K.J., Ferrara N. VEGF nozīme krūts vēža angioģenēzē in vivo: ietekme no intravitālās mikroskopijas kombinētās terapijas ar anti-VEGF neitralizējošu monoklonālu antivielu un doksorubicīnu // Anticancer Res. 1999. V. 19. Nr.5B. P. 4203-4214.

79. Wedge S.R., Ogilvie D.J., DukesM., Kendrew J., Curwen J.O., Hennequin L.F., Thomas A.P., Stokes E.S., Curry B., Richmond G.H., Wadsworth P.F. ZD4190: perorāli aktīvs asinsvadu endotēlija augšanas faktora signālu inhibitors ar plaša spektra pretvēža efektivitāti // Cancer Res. 2000. V. 60. Nr. 4. P. 970-975.

80. Ciardiello F., Caputo R., Bianco R. Damiano V., Fontanini G., Cuccato S., De Placido S., Bianco A. R., Tortora G. Inhibition of growth factor production and angiogenesis in human cancer cells by ZD1839 ( Iressa), selektīvs epidermas augšanas faktora receptoru tirozīna kināzes inhibitors // Clin. Cancer Res. 2001. V. 7. Nr. 5. P. 1459-1465.

81. Kerbel R.S. Iegūtā rezistence pret epidermas augšanas faktoru receptorus bloķējošo antivielu pretvēža iedarbību in vivo: nozīme izmainītā audzēja angioģenēzē. Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 13. P. 5090-5101.

82. Klauber N., Parangi S., Flynn E., Hamel E., D'Amato R. J. Angioģenēzes un krūts vēža inhibīcija pelēm ar mikrotubulu inhibitoriem 2-metoksiestradiolu un taksolu // Cancer Res. 1997. V. 57. Nr.1. P. 81-86.

83. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Paklitaksels (Taxol): angioģenēzes inhibitors ļoti vaskularizētā transgēnā krūts vēža gadījumā // Cancer Biother. Radiopharm. 1999. V. 14. Nr.1. 31.-36.lpp.

84. Lissoni P., Fugamalli E., Malugani F., Ardizzoia A., Secondino S., Tancini G., Gardani G.S. Ķīmijterapija un angiogēze progresējoša vēža gadījumā: asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) samazināšanās kā slimības kontroles prognozētājs taksola terapijas laikā metastātiska krūts vēža gadījumā // Int. J Biol. Marķieri. 2000. V. 15. Nr. 4. P. 308-311.

85. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Endostatīna plazmīda intratumorāla ievadīšana inhibē asinsvadu augšanu un perfūziju MCa-4 peles piena karcinomās. Cancer Res. 2001. V. 61. Nr. 2. P. 526-531.

86. Jm S.A., Kim J.S., Gomez Manzano C., Fueyo J., Liu T.J., Cho M.S., Seong C.M., Lee S.N., Hong Y.K., Yung W.K. Krūts vēža augšanas kavēšana in vivo ar antiangioģenēzes gēnu terapiju ar adenovīrusu mediētu antisense-VEGF // Br. J. Vēzis. 2001. V. 84. Nr. 9. P. 12521257.

nocTynma b pegaKunro 16 Hoa6pa 2013 r.

Geršteins E.S., Kušlinskis D.N., Adamjans L.V., Ognerubovs N.A. Asinsvadu ENDOTĒLIĀLĀ AUGŠANAS FAKTORS — KLĪNISKI VĒRTĪGS MARĶERIS ĻAundabīgo audzēju gadījumā

Autoru pētījumu rezultāti un reprezentatīvākie literatūras dati liecina, ka galvenais pozitīvais neoangiogene-sis regulators - asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF) - ir

Tiek parādīts klīniski nozīmīgs prognostiskais faktors dažādu onkoloģisko slimību gadījumā un molekulārie mērķi vairākām modernām zālēm ar dažādiem darbības mehānismiem. Tā kā seroloģiskā faktora loma diagnostikā un uzraudzībā ir jāturpina pētīt.

Atslēgas vārdi: VEGF; VEGF-R; angioģenēze; audzēji; prognoze.

Gershtein Jeļena Sergeevna, Krievijas Onkoloģijas pētniecības centrs nosaukts. N.N. Blohins RAMS, Maskava, Krievijas Federācija, bioloģijas zinātņu doktors, profesors, Pētniecības institūta Klīniskās bioķīmijas laboratorijas vadošais pētnieks klīniskā onkoloģija, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Geršteins Jeļena Sergejevna, N.N. Blohins Krievijas Onkoloģijas zinātniskais centrs RAMS, Maskava, Krievijas Federācija, bioloģijas doktors, profesors, Klīniskās onkoloģijas laboratorijas SRI klīniskās bioķīmijas vadošais pētnieks, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Kušlinskis Dmitrijs Nikolajevičs, Krievijas Dzemdniecības, ginekoloģijas un perinatoloģijas zinātniskais centrs, nosaukts pēc vārda. UN. Kulakova, Maskava, Krievijas Federācija, ginekoloģiskā onkoloģe, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Kušlinskis Dmitrijs Nikolajevičs, Dzemdniecības, ginekoloģijas un perinatoloģijas pētniecības centrs nosaukts V.I. Kulakovs, Maskava, Krievijas Federācija, ginekoloģiskais onkologs, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Adamjans Leila Vladimirovna, Krievijas Dzemdniecības, ginekoloģijas un perinatoloģijas zinātniskais centrs.

UN. Kulakova, Maskava, Krievijas Federācija, medicīnas zinātņu doktore, profesore, Krievijas Medicīnas zinātņu akadēmijas akadēmiķe, vietniece. direktors, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Adamyan Leyla Vladimirovna, Dzemdniecības, ginekoloģijas un perinatoloģijas pētniecības centrs, kas nosaukts V.I. Kulakovs, Maskava, Krievijas Federācija, medicīnas doktors, profesors, RAMS akadēmiķis, direktora vietnieks, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Ognerubovs Nikolajs Aleksejevičs, Tambovas Valsts universitāte. G.R. Deržavina, Tambova, Krievijas Federācija, medicīnas zinātņu doktors, profesors, vadītājs. Onkoloģijas nodaļa, Operatīvā ķirurģija un topogrāfiskā anatomija, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]

Ognerubovs Nikolajs Aleksejevičs, Tambovas Valsts universitāte, kas nosaukta G.R. Deržavins, Tambovs, Krievijas Federācija, medicīnas doktors, profesors, Onkoloģijas, operatīvās ķirurģijas un topogrāfiskās anatomijas nodaļas vadītājs, e-pasts: [aizsargāts ar e-pastu]