Metodas dažniausiai naudojamas serologinėse laboratorijose. Metodo esmė – naudojant standartinius izohemagliutinuojančius serumus, naudojant standartinius eritrocitus, nustatyti A ir B grupės antigenų buvimą ar nebuvimą. Reakcija su standartiniais serumais atliekama taip, kaip aprašyta aukščiau.
Reakcija su standartiniais eritrocitais atliekama taip.
Reikalinga įranga
Reakcijos su standartiniais eritrocitais įranga skiriasi tuo, kad jai reikalingi trijų kraujo grupių standartiniai eritrocitai: 0(I), A(II), B(III). Standartiniai raudonieji kraujo kūneliai ruošiami iš anksčiau žinomos kraujo grupės donorų kraujo ir laikomi 4-8 °C temperatūroje. Galiojimo laikas 2-3 dienos.
Reakcijos procedūra
1. Kraujas tyrimams paimamas iš venos į sausą mėgintuvėlį, centrifuguojamas arba paliekamas ramybėje 20-30 minučių, kad būtų gautas serumas.
2. Ant pažymėtos plokštelės pipete užlašinami trys dideli lašai (0,1 ml) tiriamojo kraujo serumo iš mėgintuvėlio, o šalia jų - vienas mažas lašelis (0,01 ml) standartinių eritrocitų grupių.
3. Tolesnė veikla atliekama panašiai kaip ir naudojant standartinius izohemagliutinuojančius serumus: atitinkami lašai sumaišomi su stiklinėmis lazdelėmis, tabletė kratoma, stebima 5 minutes, į agliutinacijos lašus įpilama izotoninio natrio chlorido tirpalo ir tada vertinamas rezultatas.
6-3 lentelė. Skerspjūvio kraujo grupės nustatymo rezultatų įvertinimas
Rezultatų interpretacija
Įvertinkite abiejų reakcijų duomenis (su standartiniais izohemagliutinuojančiais serumais ir standartiniais eritrocitais – 6-3 lentelė).
Reakcijos su standartiniais eritrocitais rezultatų aiškinimo ypatumas yra tas, kad 0 (I) grupės eritrocitai laikomi kontrole (jie nėra antigenų, todėl specifinė agliutinacijos reakcija su bet kokiu serumu iš esmės neįmanoma).
Kryžminio metodo rezultatas laikomas patikimu tik tuo atveju, jei, vertinant reakcijos su standartiniais izohemagliutinuojančiais serumais ir su standartiniais eritrocitais rezultatus, atsakymai apie tiriamą kraujo grupę sutampa. Jei taip neatsitiks, abi reakcijas reikia pakartoti.
Kraujo grupių nustatymas naudojant monokloninius antikūnus
Reikalinga įranga
Kraujo grupei nustatyti naudojami monokloniniai antikūnai, kurių gamybai naudojama hibridomos biotechnologija.
Hibridoma yra ląstelių hibridas, susidarantis kaulų čiulpų naviko ląstelei (mielomai) susiliejus su imuniniu limfocitu, sintezuojančiu specifinius monokloninius antikūnus. Hibridoma įgyja abiejų „tėvų“ savybes: auglio ląstelei būdingą gebėjimą neribotai augti ir imuniniam limfocitui būdingą antikūnų sintezę.
6-4 lentelė. Kraujo grupių nustatymo naudojant monokloninius antikūnus (koliklonus anti-A ir anti-B) rezultatų vertinimo schema
Sukurti standartiniai reagentai – monokloniniai antikūnai: anti-A ir anti-B koliklonai, naudojami eritrocitų agliutinogenams nustatyti.
Zoliklonai naudojami raudonos (anti-A) arba mėlynos (anti-B) spalvos liofilizuotų miltelių pavidalu, prieš pat tyrimą milteliai praskiedžiami izotoniniu natrio chlorido tirpalu.
Reakcijos technika
Anti-A ir anti-B zoliklonai užlašinami ant baltos tabletės, vienas didelis lašas (0,1 ml) po atitinkamais užrašais: anti-A ir anti-B. Šalia jų užlašinamas vienas nedidelis lašelis (0,01 ml) tiriamo kraujo. Sumaišius komponentus, agliutinacijos reakcija stebima 2-3 minutes.
Rezultatų interpretacija
Rezultatų įvertinimas labai paprastas (6-4 lentelė).
Kraujo grupės nustatymo metodas naudojant koliklonus leidžia atsisakyti standartinių izohemagliutinuojančių serumų, gautų iš donoro kraujo.
Kraujas turi ypatingų imunogenetinių savybių, pagal kurias visus žmones galima suskirstyti į tam tikras grupes. Kiekvienas žmogus turi žinoti, kuriai kraujo grupei jis priklauso. To gali prireikti kritiniu atveju Medicininė priežiūra kai dėl kokių nors priežasčių neįmanoma patikimai nustatyti kraujo grupės. Tai patvirtino mokslininkai. Nustačius savo kraujo grupę, žmogus galės sužinoti savo sveikatos ypatybes ir laiku užkirsti kelią ligoms.
AB0 grupės sistemą Landsteineris atskleidė pasauliui dar 1900 m. Vėliau buvo tiriami ir kiti žmonių ir gyvūnų kraujo skirtumai (pvz.,).
Priklausymas kraujo grupei yra fiksuotas genetinis kodas, ir yra paveldima su kitomis individualiomis savybėmis. Antigeno susidarymas vyksta prenataliniu laikotarpiu, o jo specifinės savybės nekeičia visą žmogaus gyvenimą.
Kraujo sistemos elementai
Skystoje judrioje kraujo plazmoje tolygiai pasiskirsto ląstelių elementai: eritrocitai, leukocitai ir trombocitai. Susidarę elementai užima iki 35-45% viso kraujo tūrio. Be to, plazmoje yra riebalų ląstelių dalelių, vadinamųjų „kraujo dulkių“ (hemokonija). gali turėti specifinių antigenų (agliutinogenų A ir B). Kraujo plazmoje galima aptikti antikūnų (agliutininų α ir β). Antigenų ir antikūnų deriniai leidžia klasifikuoti kraujo grupes pagal ABO sistemą.
Kitų tipų kraujo sistemos pasirenka tik antigenų buvimą raudonuosiuose kraujo kūneliuose. Antikūnai prieš juos dažniausiai atsiranda, kai recipientui suleidžiama netinkamo kraujo, imunologinio ir vaisiaus.
Pagal AB0 sistemą visi žmonės skirstomi į šias grupes:
- Pirmas 0 (I) () – raudonuosiuose kraujo kūneliuose nėra antigenų, o serume randami agliutininai α ir β
- Antrasis A (II) – turi agliutinogeną A
- Trečias B (III) () – yra agliutinogeno B
- Ketvirtasis AB (IV) – eritrocitų agliutinogenai A ir B yra fiksuoti kartu.
AB0 sistema leidžia išvengti pavojingų pasekmių su netinkamu kraujo perpylimu. Siekiant idealaus kraujo suderinamumo, būtina, kad donoro kraujas atitiktų tą pačią ABO sistemos grupę kaip ir paciento kraujas. Svetimos kraujo grupės perpylimas gali sukelti imunologinį nesuderinamumą ir sukelti perpylimo komplikacijų. Prieš procedūrą reikia ištirti kraujo sudėtį ir atlikti suderinamumo testų seriją.
Laboratoriniai komponentai
Norint nustatyti kraujo grupę, pacientui nereikia specialaus pasiruošimo, tik reikia susilaikyti nuo alkoholio ir jo nevartoti vaistai analizės išvakarėse.
Su savimi pasiimkite gydytojo siuntimą į laboratoriją. Pravartu iš anksto įsigyti vienkartinį kraujo paėmimo rinkinį ar švirkštą – tai patikimai apsaugos nuo galimos infekcijos mėginio ėmimo proceso metu. arba venų. U kūdikis kraujas dažniausiai imamas iš kulno.
Kraujo grupės nustatymo pagrindas yra agliutinacijos reakcija, kurios metu susidaro sulipę raudonųjų kraujo kūnelių dribsniai. Nustatyti laboratoriniai tyrimai kraujo grupė apima standartinį serumą ir eritrocitus tirpalo pavidalu, kontrolinius reagentus, fiziologinis tirpalas(natrio chloridas 0,9%) ir specialios balto plastiko ar porceliano lėkštės, pipetės.
Kad laboratorija būtų patikima, oro temperatūra turi būti 21-24°C ir ryškus apšvietimas. Turi būti patikrinta, ar visi sunaudojami komponentai atitinka vieną seriją, naudojimo sąlygas ir laikymo sąlygas. Suspensijos, nuosėdų ar drumstumo buvimas eritrocitų tirpaluose ir serume yra nepriimtinas.
Nustatymas serumais
Baltoje plokštelėje eilės tvarka pažymėti 0, A, B kraujo grupių pavadinimai. Ant plokštelės, esančios priešais jos užrašą, užlašinami dideli 0(I), A(II), B(III) grupių standartinio serumo lašai. o šalia kitos serijos serumo: gaunamos dvi eilės lašai
Klaidoms pašalinti naudojami skirtingų serijų reagentai. Kiekvienas standartinio serumo lašas atsargiai sumaišomas su nedideliu paciento kraujo lašeliu. Visos manipuliacijos atliekamos pipete arba stikline lazdele. Tada plokštelė šiek tiek pakratoma ir kiekviename laše įvertinamas tyrimo rezultatas. Jei per penkias minutes susidaro agliutinuotų raudonųjų kraujo kūnelių dribsniai, rezultatas laikomas teigiamu.
Norėdami išskirti galima klaida, kiekvienas kraujo lašas lėkštėje sumaišomas su lašeliu fiziologinio tirpalo ir palaukite dar penkias minutes. Jei dribsniai pradeda nusėsti visuose lašuose, reakcija stebima sumaišant tiriamąjį kraują ir standartinį AB(IV) grupės serumo tirpalą. Pastaruoju atveju raudonųjų kraujo kūnelių agregacija neturėtų būti registruojama.
Kraujo grupės nustatymas pagal gautus rezultatus:
- 1 grupė – raudonieji kraujo kūneliai nesulipo nė viename laše
- – teigiama kraujo reakcija su 0(I) ir B(III) grupių serumais
- Trečioji grupė – kraujo agliutinacija su standartiniais serumais 0(I) ir A(II)
- – teigiamas rezultatas trimis lašais ir neigiamas su kontroliniu serumu AB(IV).
Yra kryžminis plazmos tipo nustatymo metodas, kuriame papildomai naudojami standartiniai raudonieji kraujo kūneliai. Šis kraujo grupės nustatymo metodas padeda nustatyti plazmos grupės antikūnus α ir β bei atveria daugiau pilnas aprašymas kraujo. Kryžminis metodas naudojamas prieš kraujo perpylimą. Iš anksto paimami veninio kraujo mėginiai, jis nusodinamas ir plazma atskiriama nuo susidariusių elementų.
Kartais vietoj standartinių serumų naudojami Tsoliklon tirpalai su monokloniniais antikūnais. Jie gaunami dalyvaujant genų inžinerijos technologijoms.
Kada, labai svarbu kvalifikacijos lygis medicinos darbuotoja, jo tikslumas ir dėmesingumas. Klaidingo rezultato priežastis gali būti neteisinga reagentų uždėjimo tvarka, nešvarių ar šlapių pipečių naudojimas, netinkami reagentai ir kontrolinio tyrimo nepaisymas.
Rezultatų retumas
Analizuojant medicininę statistiką, paaiškėja, kad pirmoji kraujo grupė yra labiausiai paplitusi – iki 65% visų Žemės gyventojų. Po jos seka antra su 25% rezultatu ir trečia (apie 8% gyventojų). Rečiausias rezultatas nustatant kraujo grupes yra ketvirtoji grupė, ypač su neigiamu Rh faktoriumi.
Kraujo grupės nustatymo rezultatus analizę atlikęs medicinos darbuotojas įrašo į ambulatorinę kortelę arba asmens dokumentą (pasą). Turi būti įrašyta tyrimo data ir atsakingo medicinos specialisto parašas.
INSTRUKCIJOS
Apie manipuliavimo techniką
„Kraujo grupės nustatymas naudojant
serumai (pagal ABO sistemą) »
pagal specialybę
2-79 01 01 „Medicina“,
2-79 01 31 „Slauga“
Kraujo grupės nustatymas naudojant
standartinis izohemagliutinuojantis
serumas (pagal ABO sistemą)
Indikacijos: kraujo perpylimo poreikis, pasiruošimas operacijai.
Medžiaga parama:
1) dvi serijos standartinių hemagliutinuojančių serumų specialiose lentynose;
2) buteliukas su izotoniniu natrio chlorido tirpalu;
3) paženklintos tabletės;
5) pipetė kraujui paimti;
6) pipetės izotoniniam tirpalui;
7) smėlio laikrodis 5 minutes;
8) pirštinės;
9) reguliuojama dezinfekavimo priemonė.
Kraujo grupės nustatymas atliekamas gerai apšviestoje patalpoje, kurios temperatūra nuo +15 iki +20 °C. Manipuliacija atliekama su pirštinėmis. Jei yra odos sužalojimų, slaugytoja laikinai nušalinama nuo darbo. Jei kraujo pateko ant odos ar gleivinių, gydykite pagal galiojančias instrukcijas.
Vykdymo seka:
1. Patikrinkite standartinių hemagliutinuojančių serumų kokybę:
1) spalviniu žymėjimu;
2) išvaizda(lengvas, skaidrus);
3) ampulės saugumas;
4) ar yra teisingai suprojektuota etiketė, nurodanti kraujo grupę, titrą, galiojimo laiką, paruošimo vietą;
2. Padėkite ant stalo:
1) du trijų grupių (O, A, B) standartinių hemagliutinuojančių serumų rinkiniai iš dviejų serijų ir viena ampulė su AB serumu (IV), kiekvienoje ampulėje turi būti pipetė;
2) buteliukas su izotoniniu tirpalu, pipete;
3) steriliai paženklinta tabletė;
4) stiklinės stiklinės (stiklo strypai);
5) pipetė kraujui paimti;
6) smėlio laikrodis;
3. Ant planšetinio kompiuterio užrašykite savo vardą ir pavardę. pacientas, kraujo grupė;
4. Mūvėkite pirštines;
5. Į atitinkamas tabletės angas užlašinkite tabletę po 1 lašą (0,1 ml) trijų grupių dviejų serijų standartinio hemagliutinuojamojo serumo;
6. Į atitinkamą ląstelę įlašinkite 1 lašą kraujo iš piršto arba iš mėgintuvėlio pipete;
7. Į kiekvieną tabletės angą, šalia serumo, įlašinkite 1 nedidelį lašą (0,1 ml) tiriamojo kraujo kraujyje: reagento santykis -1:10 (kraują imkite iš didelio lašo naudodami skirtingus stiklinius strypus);
8. Sumaišę kraują sumaišykite su reagentu, švelniai pasukite tabletę rankose. Į serumo su raudonaisiais kraujo kūneliais lašus, kur įvyko agliutinacija, įlašinti 1 lašą 0,9% natrio chlorido tirpalo, bet ne anksčiau kaip po 3 minučių;
9. Įvertinkite rezultatą praėjus 5 minutėms nuo reakcijos pradžios:
1) agliutinacijos reakcija gali būti teigiama ir neigiama;
2) jei buvo duotas serumas teigiama reakcija Tai reiškia, kad kraujyje yra abiejų AB agliutinogenų, tokiu atveju reikia atlikti papildomą kontrolinį tyrimą su standartiniu AB (IV) grupės serumu;
10. Dezinfekuokite atliekas.
Indikacijos: kraujo ir jo komponentų perpylimo poreikis.
Būtinos sąlygos: patalpa su geru apšvietimu ir temperatūra nuo 15 o iki 25 o C.
Įranga: du dviejų skirtingų serijų I (O), II (A), III (B) grupių standartinių hemagliutinuojančių serumų rinkiniai ir viena IV (AB) serumo ampulė (sausa, švari pipetė dedama į kiekvieną ampulę su serumu ), buteliukas su izotoniniu natrio chlorido tirpalu su pipete, švariai nuplaunama sausa speciali paženklinta arba molinė plokštelė, stiklinės stiklinės, stiklinės lazdelės, sterilios ieties formos adatos piršto mėsai pradurti, sterilūs marlės rutuliukai, alkoholis, smėlio laikrodis 5 minutes.
| Etapai | Loginis pagrindas |
| 1.Prieš pradėdami darbą nusiplaukite rankas ir užsimaukite sterilias pirštines. | Medicinos personalo, dirbant su krauju, infekcinės saugos tikslais. |
| 2. Patikrinkite, ar kiekviena standartinio serumo ampulė turi pasą – etiketę, kurioje nurodyta kraujo grupė, partijos numeris, titras, galiojimo laikas, pagaminimo vieta. Draudžiama naudoti ampulę be etiketės. Serumas turi būti lengvas ir skaidrus, ampulė nepažeista, titras ne mažesnis kaip 1:32. Serumai dedami į specialias stelažus 2 eilėmis. | Standartiniai serumai: I (O) – bespalvis – be juostelių etiketėje; II (A) – mėlyna – etiketėje 2 juostelės mėlynos spalvos; III (B) – raudona – etiketėje yra 3 raudonos juostelės; IV (AB) – geltona – etiketėje yra 4 geltonos juostelės. Dribsnių ir nuosėdų buvimas yra išrūgų netinkamumo požymis. Serumai su pasibaigęs saugykla netinkama naudoti. |
| 3. Vieną lašą serumo iš dviejų I (O), II (A), III (B) grupių serijų užlašinkite ant standartinės plokštelės arba spalvotu pieštuku padalinkite į 4 kvadratus. | Lėkštėje, padalytoje spalvotu pieštuku, kiekviename kvadrate būtina nurodyti kraujo grupę. Ant standartinės lėkštutės arba spalvotu pieštuku padalijus į 4 kvadratus užlašinkite po vieną lašą serumo iš dviejų I (O), II (A), III (B), IV (AB) serijų, kad pašalintumėte klaidas nuskaitant rezultatą. |
| 4.Kraujo lašas iš mėgintuvėlio ar piršto užlašinamas pipete ar stikline lazdele arba šalia kiekvieno serumo lašo (kraujo turi būti 10 kartų mažiau nei serume) ir sumaišoma su skirtingomis stiklinėmis lazdelėmis arba skirtingi kampai stiklinė skaidrė. | Norint gauti kraujo iš piršto, piršto galiukas apdorojamas spiritu, o oda perveriama adata – ietimi. Pirmasis kraujo lašas pašalinamas marlės rutuliuku, o po to skirtingi stiklelio kampai, kad būtų išvengta klaidingos agliutinacijos reakcijos. |
| 5.Sumaišę lėkštę švelniai pasukite rankose. | Greitesniam ir tikslesniam raudonųjų kraujo kūnelių agliutinacijai. |
| 6. Atsiradus agliutinacijai, bet ne anksčiau kaip po 3 minučių, į kiekvieną serumo su raudonaisiais kraujo kūneliais, kur įvyko agliutinacija, lašą įlašinkite po 1 lašą 0,9% natrio chlorido, sumaišykite plokštelę purtydami ir stebėkite, kol praeis 5 minutės. | Esant teigiamai izohemagliutinacijos reakcijai, dribsniai ir grūdeliai iš lipnių raudonųjų kraujo kūnelių neatsiskiria, kai pridedamas ir maišomas izotoninis natrio chlorido tirpalas. At neigiama reakcija Serumo lašai ant plokštelės yra skaidrūs, vienodai rausvos spalvos, juose nėra dribsnių ar grūdelių. |
| 7. Po 5 minučių perskaitykite reakciją sklindančioje šviesoje. Jei agliutinacija neaiški, į serumo ir kraujo mišinį papildomai įlašinamas vienas lašas 0,9% natrio chlorido tirpalo, po to pateikiama išvada apie priklausomybę grupei; galimi šie 4 deriniai: a) visi trys abiejų serijų serumai nesukelia agliutinacijos. Ištirtas I grupės (O) kraujas; b) neigiama izohemagliutinacijos reakcija su I (O) ir III (B) grupių serumu, tirtu II (A) grupės krauju; c) izohemagliutinacijos reakcija yra neigiama naudojant III (B) grupės serumą abiejose serijose ir teigiama su I (O) ir II (A) grupių serumais. Ištirtas III (B) grupės kraujas; d) I (O), II (A), III (B) grupių serumai duoda teigiamą reakciją abiejose serijose. Kraujas priklauso IV (AB) grupei. Tačiau prieš pateikiant tokią išvadą, tuo pačiu metodu būtina atlikti izohemagliutinacijos reakciją su standartiniu IV grupės (AB) serumu. Neigiama izohemagliutinacijos reakcija leidžia galutinai priskirti tiriamąjį kraują IV grupei (AB). | a) agliutinacijos nebuvimas visuose lašuose rodo, kad tiriamame kraujyje nėra agliutinogeno, t.y. kraujas priklauso I (O) grupei; b) agliutinacijos pradžia lašuose su serumu O (I) ir B (III) rodo, kad kraujyje yra agliutinogeno A, t.y. kraujas priklauso II (A) grupei; c) agliutinacijos buvimas lašuose su I (O) ir II (A) grupių serumais rodo, kad tiriamajame kraujyje yra agliutinogeno B, t.y. kraujas priklauso III (B) grupei; d) agliutinacija visuose lašuose rodo agliutinogenų A ir B buvimą tiriamame kraujyje, t.y. kraujas priklauso IV (AB) grupei, tačiau, atsižvelgiant į tai, kad dėl nespecifinės reakcijos galima agliutinacija su visais serumais, būtina į lėkštelę užlašinti IV grupės (AB) serumo lašą ir įlašinti 1 lašą testo. kraujo serumas ir kraujas perpilami santykiu 10:1 ir rezultatas stebimas per 5 minutes. Jei agliutinacija nevyksta, tada tiriamas kraujas priskiriamas IV (AB) grupei. |
| 8. Kitų derinių nustatymas rodo neteisingą paciento kraujo grupės nustatymą. | Esant silpnai agliutinacijai ir visais abejotinais atvejais kraujas pakartotinai tiriamas standartiniais kitų serijų serumais. |
| 9. Kraujo grupės nustatymo klaidos ir neaptikta agliutinacija gali atsirasti dėl: 1) silpno standartinio serumo aktyvumo arba mažo eritrocitų agliutiniškumo; 2) perteklinis tiriamojo kraujo kiekis, pridėtas į standartinį serumą; 3) uždelsta agliutinacijos reakcija su aukštos temperatūros aplinką. | Kad išvengtumėte klaidų: 1) naudokite aktyvų serumą, kurio titras yra pakankamai aukštas 1:32; 2) tiriamojo kraujo ir standartinio serumo tūrio santykis yra 1:10; 3) tyrimas atliekamas ne aukštesnėje kaip 25 o C temperatūroje; 4) įvertinti rezultatus ne anksčiau kaip po 5 minučių po tyrimo; 5) griežtai ir atidžiai laikytis visų tyrimo taisyklių. |
Užduotis Nr.1.
Yra 6 metu vaikas stacionarinis gydymas su askaridozės diagnoze. Slaugos apžiūros metu slaugytoja gauti šie duomenys: skundai dėl pykinimo, vėmimo, bambos skausmo, apetito praradimo, svorio kritimo, nuovargis, neramus miegas, nakties siaubas. Serga kelias savaites.
Objektyviai: oda blyški, poodinis riebalinis sluoksnis neišsivysčius, palpuojant skauda bambos srityje. Išmatos pagal berniuką be patologijos.
Kelionės tikslas:
1. Išmatos ant manęs / kirminas
2. Bendras kraujo tyrimas
4. Dieta Nr.5
Užduotys:
1. Nustatyti, kokie poreikiai yra pažeisti, ir paciento problemas.
2. Pagrįskite paciento problemas.
3. Apibrėžkite tikslus ir motyvuotai sukurkite slaugos intervencijos planą.
4. Grandymas dėl enterobiozės
2 užduotis.
Pacientas skundžiasi temperatūros pakilimu iki 39°C, silpnumu, viso kūno silpnumu, raumenų skausmais, sąnarių skausmais, skausmu judant. akių obuoliai, sausas skausmingas kosulys, herpetiniai bėrimai ant lūpų.
Objektyviai: oda didelė drėgmė, viršutinė lūpa herpetiniai bėrimai, junginės hiperemija, ašarojimas, ryklės hiperemija, sunkus kvėpavimas plaučiuose. Širdies susitraukimų dažnis – 86 per minutę, kraujospūdis 110/70 mm Hg. Art. Kepenys ir blužnis nepadidėja. Fiziologinis poveikis yra nepastebimas.
Kraujo tyrime: L - 4,5 * 10 9 /l, p/i - 3; s/ya - 40; l-52; m-5; ESR-18mm/val.
Pratimas
1. Nustatyti paciento problemas, kurių pasitenkinimas yra sutrikęs; suformuluoti ir pagrįsti paciento problemas.
2. Išsikelk tikslus ir sudaryk planą. slaugos intervencijos su motyvacija.
3. Paaiškinkite insulino nustatymo taisykles.
Kraujo grupės nustatymas atliekamas gerai apšviestoje patalpoje +15 - +25 0 C temperatūroje.
Lentelėje, skirtoje kraujo grupei nustatyti, kairėje pusėje parašyta 0ab (anti-A+B), viduryje - Ab (anti-B), o dešinėje - Ba (anti-A), viršutinis kraštas– asmens, kurio kraujo grupė nustatoma, pavardė ir inicialai.
Tinkamai nurodant kraujo grupę, ant plokštelės užlašinamas vienas didelis lašas (0,1 ml) atitinkamų 2 serijų grupių standartinių serumų. Iš viso gaunami 6 lašai, kurie sudaro dvi eiles po tris lašus tokia tvarka iš kairės į dešinę: 0ab (anti-A + B), Ab (anti-B) ir Ba (anti-A).
Prie kiekvieno serumo lašelio lašinamas nedidelis lašelis (0,01 ml) tiriamojo kraujo, išlaikant santykį 10:1.
Sumaišykite serumo lašą su kraujo lašeliu, naudodami atskirą švarų stiklinę lazdelę.
Išmaišę lašus, lėkštę pakratykite, tada palikite 1-2 min. ir vėl periodiškai purtykite.
Reakcijos eiga stebima 5 minutes. Agliutinacija prasideda per pirmąsias 10-30 sekundžių, tačiau stebėjimas turėtų būti atliekamas iki 5 minučių, nes vėliau gali agliutinuotis su raudonaisiais kraujo kūneliais, turinčiais silpnų A arba B antigenų atmainų.
Po 3 minučių į serumo mišinio su eritrocitais, kuriuose įvyko agliutinacija, lašus įlašinamas vienas lašas (0,05 ml) izotoninio natrio chlorido tirpalo ir tęsiamas stebėjimas periodiškai kratant plokštelę, kol praeis 5 minutės.
Rezultato įvertinimas: reakcija kiekviename laše gali būti teigiama (yra raudonųjų kraujo kūnelių agliutinacija) arba neigiama (agliutinacijos nebuvimas).
Įvairūs teigiamų ir neigiamų rezultatų deriniai leidžia spręsti apie tiriamo kraujo priklausomybę grupei (žr. 1 lentelę).
1 lentelė
Pliuso ženklas (+) rodo agliutinacijos buvimą, minuso ženklas (-) rodo jo nebuvimą.
Kaip matyti iš lentelės, rezultatas vertinamas atsižvelgiant į tiriamų raudonųjų kraujo kūnelių reakciją su standartiniais Oab (anti-A+B), Ab (anti-B), Ba (anti-A) serumais. . Tais atvejais, kai gaunamas teigiamas visų trijų grupių serumo rezultatas, siekiant pašalinti nespecifinę agliutinaciją, atliekamas kontrolinis tyrimas su standartiniu ABO(IV) grupės serumu, kuriame nėra grupės agliutininų. Tik agliutinacijos nebuvimas šiame kontroliniame mėginyje leidžia teisingu laikyti teigiamą rezultatą su Oab (anti-A+B), Ab (anti-B), Ba (anti-A) grupių serumais, t.y. tiriamas kraujas priklauso AB(IV) grupei. Esant panagliutinacijai, t.y. agliutinacija su visais serumais ir atitinkamai nesugebėjimas nustatyti priklausomybės grupei pagal ABO sistemą, paciento kraujas turi būti siunčiamas į SPC arba į OPK izoserologo apžiūrai.
3. ABO kraujo grupės nustatymas naudojant monokloninius reagentus anti-A, anti-B, anti-AB.
Reagentai anti-A, anti-B, anti-AB skirti ABO sistemos žmogaus kraujo grupėms nustatyti tiesioginėse hemagliutinacijos reakcijose ir naudojami vietoj polikloninio imuninio hemagliutinacijos serumo arba lygiagrečiai su jais.
Tyrimo atlikimo tvarka:
Ant tabletės ar plokštelės užlašinkite anti-A, anti-B, anti-AB reagentus, naudodami atskiras pipetes, vieną didelį lašą (0,1 ml) po atitinkamomis etiketėmis.
Šalia reagentų lašų užlašinkite vieną nedidelį lašelį tiriamojo kraujo (0,01-0,03 ml).
Sumaišykite kraują su reagentu (tabletės duobutėje - kruopščiai nuplautu sausu rutuliuku, purtant tabletę; lėkštėje - su švaria atskira sausa lazdele).
Reakcijos su reagentais eiga turi būti stebima švelniai kratant plokštelę ar tabletę 5 minutes. Eritrocitų agliutinacija paprastai įvyksta per pirmąsias 3-5 sekundes, tačiau stebėjimą reikia tęsti, nes vėliau atsiranda agliutinacija su eritrocitais, turinčiais silpnų A arba B antigenų tipų.
Kiekvieno lašo reakcijos rezultatas gali būti teigiamas arba neigiamas. Teigiamas rezultatas išreiškiamas raudonųjų kraujo kūnelių agliutinacija (sulipimu). Agliutinatai matomi plika akimi mažų raudonų agregatų pavidalu, kurie greitai susilieja į didelius dribsnius. Esant neigiamai reakcijai, lašas išlieka tolygiai raudonos spalvos, o agliutinatų jame neaptinkama.
Agliutinacijos reakcijos rezultatų apskaičiavimas nustatant kraujo grupes naudojant monokloninius reagentus pateiktas 2 lentelėje:
2 lentelė
(+ ) – agliutinacijos buvimas; ( - ) – agliutinacijos nebuvimas
At teigiamas rezultatas agliutinacijos reakcijos su visais reagentais turi pašalinti spontanišką nespecifinę tiriamųjų raudonųjų kraujo kūnelių agliutinaciją, kuriai ant paviršiaus reikia sumaišyti 1 lašą izotoninio natrio chlorido tirpalo su 1 lašu tiriamųjų raudonųjų kraujo kūnelių. Kraujas gali būti priskiriamas AB(IV) grupei tik tuo atveju, jei izotoniniame natrio chlorido tirpale nėra raudonųjų kraujo kūnelių agliutinacijos.
