Ang reaksyon ng Schick ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon o kawalan ng kinakailangang antas ng antitoxin sa dugo upang maprotektahan ang katawan mula sa dipterya. Sa kasalukuyan, ang reaksyong ito ay hindi gaanong ginagamit dahil sa pagpapakilala ng mga mas sensitibong pamamaraan (RPGA) sa pagsasanay.
Ang reaksyon ng Schick ay isinasagawa sa mga batang nabakunahan laban sa dipterya na nakakumpleto ng pagbabakuna at hindi bababa sa isang muling pagbabakuna. Sa edad na 13 taon at mas matanda, ang reaksyon ay maaaring masuri kahit na may hindi kilalang kasaysayan ng pagbabakuna. Ang estado ng anti-diphtheria immunity ay sinuri nang hindi mas maaga kaysa sa 6 na buwan pagkatapos ng huling revaccination at hindi mas maaga kaysa sa dalawang buwan pagkatapos ng isang matinding sakit.
Ang Schick reaction ay ibinibigay din sa mga bagong dating na bata sa mga grupong disadvantaged ng dipterya, kapag walang impormasyon tungkol sa mga pagbabakuna. Ang mga batang may negatibong reaksyon ng Schick ay hindi tumatanggap ng karagdagang pagbabakuna. Ang mga karagdagang pagbabakuna, anuman ang immune layer sa pangkat, ay ibinibigay sa mga bata na may positibo at kaduda-dudang mga reaksyon.
Ang mga resulta ng reaksyon ni Schick ay ipinasok sa accounting card pang-iwas na pagbabakuna(f. 63) na nagsasaad ng petsa kung kailan ginawa at nasubok ang reaksyon, ang batch ng lason at ang institusyong gumawa ng lason.
Upang maisagawa ang reaksyon ng Schick, ginagamit ang diluted active (unheated) diphtheria toxin. Ang 0.2 ml ay naglalaman ng isang Chic na dosis.
Upang maisagawa ang reaksyon ng Schick, ang isang gramo (tuberculin) na mga syringe ay dapat gamitin, maingat na masuri na may tumpak na mga pagtatapos, na hindi pinapayagan ang likido na dumaan sa pagitan ng mga dingding ng hiringgilya at ng piston nito.
Mahigpit na ipinagbabawal na gawin ang reaksyon ng Schick sa lugar kung saan isinagawa ang muling pagbabakuna laban sa tuberculosis sa araw na iyon, gayundin ang paggamit ng mga hiringgilya, karayom at iba pang instrumento na ginagamit para sa pagbabakuna laban sa tuberculosis.
Ang balat sa lugar ng iniksyon ay pinupunasan ng cotton wool na binasa ng 70% ethyl alcohol. Ang lason (0.2 ml) ay tinuturok sa loob ng balat gitnang bahagi ibabaw ng palmar kadalasan ang kaliwang bisig. Ang pagpapakilala ay isinasagawa nang dahan-dahan sa isang kilalang boltahe, katangian ng intradermal injection ng likido. Ang iniksyon ay ginawa na may napakababang pagkahilig ng syringe patungo sa bisig, halos kahanay sa ibabaw ng balat. Ang hiwa ng karayom ay dapat na ganap na pumasok sa balat at makikita sa pamamagitan ng epidermis. Sa lugar ng pag-iiniksyon, dapat na mabuo ang isang maputi-puti, mahusay na tinukoy na vesicle (papule) na may diameter na humigit-kumulang 1 cm, na may indentation sa lugar ng mga follicle ng buhok ("balat ng lemon"). Ang vesicle (papule) na ito ay lumulutas sa loob ng 10 hanggang 15 minuto. Kung, kapag ang isang lason ay na-injected, ang isang vesicle (papule) ay hindi nabubuo o mabilis na nawala, ito ay nagpapahiwatig na ang iniksyon ay ginawa nang hindi tama, malalim, at ang lason na pumasok sa ilalim ng balat ay maaaring hindi maging sanhi ng isang reaksyon. Bilang resulta, maaaring makuha ang mga maling resulta.
Ang reaksyon ay isinasaalang-alang pagkatapos ng 72 o 96 na oras. Ang mga resulta ay tinasa tulad ng sumusunod:
a) positibo ang reaksyon ng Schick kung ang pamumula at paglusot ay lilitaw sa lugar ng iniksyon ng lason. Ang antas ng reaksyon ay ipinahiwatig: "+" - kung ang pamumula ay may diameter na 1 -1.5 cm, (+ + "- kung 1.5 - 3 cm, "+ + + " - kung higit sa 3 cm;
b) negatibo ang reaksyon ng Schick kapag walang pamumula o paglusot sa lugar ng iniksyon ng lason;
c) ang reaksyon ng Schick ay kaduda-dudang kung ang pamumula at paglusot sa pangangasiwa ng lason ay alinman sa hindi malinaw na ipinahayag, o kung ang reaksyon ay binibigkas, ang diameter ng pamumula ay humigit-kumulang 0.5 cm (ipinahiwatig ng "±").
Contraindications sa reaksyon ng Schick: spasmophilia, epilepsy, pustular disease, contact sa mga pasyente viral hepatitis, bronchial hika.
Allergens at toxins
Mga diagnostic na gamot
Human antipertussis immunoglobulin antitoxic (Russia)
Purified concentrated liquid anti-diphtheria serum para sa mga kabayo (Russia)
Mga serum at immunoglobulin
Dry tuberculosis vaccine BCG-M (para sa banayad na pangunahing pagbabakuna, Russia)
Tuberculosis vaccine (BCG) dry para sa intradermal administration (Russia)
Akt-Hib (Hib-vac, South Korea)
Pertussis monovaccine (Russia)
Naglalaman ng pertussis bacteria, preservative - mertiolate. Gamitin lamang para sa mga epidemiological indication sa mga lugar ng impeksyon sa pertussis.
Naglalaman ng 10 mcg ng polysaccharide bawat dosis Haemophilus influenzae type b, conjugated na may tetanus toxoid, preservative - trometamol. Ginagamit para sa pagbabakuna ng mga bata mula sa 2 buwan ayon sa epidemiological indications.
Mycobacterium bovis BCG-1. Ang strain ng bakuna ay nakuha sa pamamagitan ng pangmatagalang (sa loob ng 13 taon) na paglilinang ng bovine mycobacterium tuberculosis sa ilalim ng hindi kanais-nais na mga kondisyon sa isang daluyan ng patatas-glycerin na may pagdaragdag ng apdo. Ginagamit para sa tiyak na pag-iwas tuberkulosis. Ang pagbabakuna ay isinasagawa sa mga araw ng 5-7 ng buhay, kapag ang katawan ay libre mula sa mycobacterial infection. Ang lahat ng malulusog na bata, kabataan at mga nasa hustong gulang na wala pang 30 taong gulang na negatibong reaksyon sa tuberculin ay napapailalim sa muling pagbabakuna. Ang mekanismo ng kaligtasan sa sakit sa tuberculosis ay hindi pa ganap na isiniwalat. SA klinikal na kasanayan Ang pangunahing criterion para sa intensity ng immunity sa bakuna ay ang paglipat ng negatibong reaksyon ng balat sa tuberculin patungo sa positibo.
Naglalaman ng mga live na bakterya ng strain ng bakuna na pinatuyo sa isang 1.2% na solusyon ng sodium glutamate Mycobacterium bovis BCG-1. Ginagamit para sa banayad na tiyak na pag-iwas sa tuberculosis (pangunahing pagbabakuna) sa mga bagong silang sa mga lugar na may hindi kanais-nais na sitwasyon para sa tuberculosis.
Naglalaman ng mga antibodies laban sa diphtheria bacilli exotoxin. Ang aktibidad na antitoxic ay ipinahayag sa mga internasyonal na yunit (10,000 at 20,000 IU/ml). Ginagamit upang gamutin ang mga pasyenteng may dipterya. Bilang karagdagan sa mga therapeutic na layunin, ginagamit ang anti-diphtheria serum upang matukoy ang toxigenicity ng mga kultura ng diphtheria bacilli sa reaksyon ng pag-ulan ng gel.
Naglalaman ng immunologically active fraction ng donor blood plasma na may mga antibodies sa exotoxin ng pertussis microbe (hindi bababa sa 750 units ng antitoxic anti-pertussis antibodies). Ginagamit sa paggamot ng whooping cough.
Naglalaman ng purified diphtheria toxin bawat 0.2 ml ng 1/40 DLM Guinea Pig Toxin. Ginagamit para sa mga intradermal na pagsusuri para sa layunin ng immunodiagnosis. Sa mga indibidwal, ang isang nagpapasiklab na reaksyon ay bubuo sa lugar ng iniksyon. Kung ang dugo ay naglalaman ng higit sa 0.03 IU ng antitoxin, negatibo ang pagsusuri. Dati, ang Schick test ay kadalasang ginagamit upang makilala ang mga indibidwal na madaling kapitan ng dipterya. Sa kasalukuyan, dahil sa posibilidad ng mga komplikasyon, ang paggamit nito ay limitado sa mahigpit na mga indikasyon ng epidemya.
Toxins (mula sa Greek toxikon - lason), mga sangkap na pinagmulan ng bacterial na maaaring humadlang sa physiological function, na humahantong sa sakit o kamatayan sa mga hayop at tao. Sa likas na kemikal, ang lahat ng mga lason ay mga protina o polypeptides. Iba ito sa ibang organic at inorganic Nakakalason na sangkap Kapag ang mga toxin ay pumasok sa katawan, nagiging sanhi ito ng pagbuo ng mga antibodies.
Para sa ilang mga nakakahawang sakit (diphtheria, scarlet fever) upang matukoy ang lakas ng immune system at pagkamaramdamin ng mga bata, mga pagsusuri sa intradermal gamit ang naaangkop na diluted toxins. Ang isang positibong reaksyon (lokal na pamamaga ng balat sa lugar ng iniksyon ng lason) ay sanhi ng nakakalason na epekto ng lason sa tisyu ng balat. Ang negatibong resulta ng reaksyon ay ipinaliwanag sa pamamagitan ng neutralisasyon ng lason na ipinasok sa balat ng kaukulang antitoxin na nilalaman. sa immune organism sapat na dami para sa layuning ito.
Ang mga lason ay nakukuha mula sa mga nakakalason na strain ng microbes (diphtheria bacillus o scarlet fever streptococcus) sa pamamagitan ng inoculation sa isang likidong nutrient medium (open hearth broth), na sinusundan ng pagsasala sa pamamagitan ng bacterial filter. Mula sa mga nakuhang lason, inihanda ang diagnostic toxins na Schick (diphtheria) at Dika (scarlet fever). Ang mga lason ay ibinibigay sa intradermally, sa halagang 0.2 ml (Shika) at 0.1 ml (Dika), sa gitnang bahagi ng panloob na ibabaw ng bisig.
Ang mga anatoxin ay mga filtrate ng mga kultura ng sabaw ng mga toxigenic microorganism na nawala ang kanilang toxicity dahil sa espesyal na paggamot, ngunit napanatili sa isang makabuluhang lawak ang mga antigenic at immunogenic na katangian ng orihinal na mga lason.
Kapag ipinakilala sa katawan ng tao o hayop, ang mga toxoid ay nagdudulot ng pagbuo ng antitoxic immunity, pinapayagan ng ari-arian na ito na gamitin ang mga ito para sa pag-iwas sa mga Nakakahawang sakit, na batay sa pagkilos ng mga exotoxin na itinago ng mga pathogen, pati na rin para sa hyperimmunization ng mga hayop na gumagawa ng mga antitoxic serum.
Anuman ang uri ng toxoid, ang immunogenicity at antigenicity nito ay tinutukoy ng mga kaukulang katangian ng orihinal na lason. Samakatuwid, ang mga laboratoryo na gumagawa ng mga gamot na ito ay nagbibigay ng malaking pansin sa paglikha ng pinakamainam na kondisyon para sa pagbuo ng lason.
Upang makakuha ng mga lason na may mataas na lakas, ang mga strain ay kinakailangan na nakikilala sa pamamagitan ng isang partikular na binibigkas na kakayahang makagawa ng mga lason sa ilalim ng mga artipisyal na kondisyon. Hindi lahat ng strain ng toxigenic bacteria ay may mga katangiang ito. Para sa mga layunin ng produksyon, ang mga strain ay ginagamit na inangkop sa mga artipisyal na kapaligiran at patuloy na nagpapanatili ng kakayahang bumuo ng mga lason.
Ang mga kultura ng mga ahente na bumubuo ng lason ay iniimbak alinman sa isang tuyo na estado o sa media na pinakamainam para sa isang partikular na uri ng bakterya. Bago gamitin para sa seeding mass batch, ang mga strain ay ipinapasa sa medium na ginamit upang makuha ang lason.
Ang lahat ng iba pang mga bagay ay pantay, ang lakas ng mga lason ay tinutukoy ng kalidad ng medium ng kultura, kaya binibigyang pansin ng mga laboratoryo ang paghahanda ng media ng kultura. Ang mga hilaw na materyales, kemikal at iba pang sangkap na kasama sa kapaligiran ay napapailalim sa pinakamaingat na kontrol sa mga biochemical laboratories ng mga institute ng produksyon.
Para sa pagbuo ng lason, ginagamit ang likidong nutrient media, na kinabibilangan ng tubig ng karne at mga produkto ng peptic (Martin broth, Ramon's medium) o tryptic (Pope's medium) digestion ng karne.
Ang proseso ng hydrolysis ng karne ay kinokontrol sa pamamagitan ng pagtukoy sa kabuuang amine nitrogen at ang koepisyent ng pagkasira ng protina, na kinakalkula mula sa ratio ng amine nitrogen sa kabuuan. Ginagamit din ang casein na walang karne, semi-synthetic media.
Ang mga karbohidrat (glucose, maltose o isang halo ng mga ito) ay idinagdag sa nutrient medium na nilayon para sa pagbuo ng lason. Kapag ang mga carbohydrates ay fermented, ang isang malaking halaga ng enerhiya ay inilabas, na kinakailangan para sa mga proseso ng synthesis na nagaganap sa pagbuo ng kultura. Ang pagdaragdag ng carbohydrates ay kapansin-pansing nagpapataas ng lakas ng mga lason na ginawa sa kapaligiran.
Bilang karagdagan sa mga carbohydrates, ang ilang mga metal ay kinakailangan sa kaunting dosis para sa pagbuo ng lason. Ang pagbuo ng lason ng diphtheria bacillus ay pinipigilan ng labis na bakal sa kapaligiran gaya ng kawalan nito. Sa pagkakaroon ng pinakamainam na halaga ng bakal, ang pagbuo ng lason ay tumataas nang husto.
Ang pagbuo ng lason ay ganap na nangyayari sa isang tiyak na pH ng kapaligiran. Samantala, sa panahon ng paglaki ng kultura, nagbabago ang halaga ng pH at maaaring umabot sa mga halaga na pumipigil sa pagbuo ng lason.
Upang maalis ito, ang mga buffer substance ay idinagdag upang mapanatili ang nais na halaga ng pH. Ang isa sa mga sangkap na ito na may mga katangian ng buffer ay sodium acetate, na idinagdag sa sabaw sa halagang 0.5-0.75 %.
Depende sa mga biological na katangian ng mikrobyo na gumagawa ng lason, iba't ibang kondisyon paglilinang at, sa partikular, ang aeration ng kapaligiran ay kinokontrol. Ang diphtheria bacillus ay bumubuo ng isang lason sa ilalim ng mga kondisyon ng maximum na aeration; sa kabaligtaran, ang tetanus bacillus at iba pang mga toxigenic anaerobes ay hindi nangangailangan ng oxygen. Ayon ito ang unang pagkakataon Sa pangalawang kaso, ang kultura ay lumago sa isang manipis na layer ng daluyan na may malaking contact surface na may hangin; sa pangalawang kaso, ang daluyan ay ibinuhos sa isang mataas na layer at iba't ibang mga oxygen adsorbents (cotton wool, dry red blood cells) ay idinagdag.
Ang temperatura at tagal ng paglilinang ay nag-iiba para sa iba't ibang mikrobyo. Karaniwan sa proseso ng pagbuo ng lason ay ang pangangailangan para sa perpektong kontrol ng temperatura sa thermostat. Ang mga pagbabago sa temperatura ay negatibong nakakaapekto sa lakas ng lason. Samakatuwid, ang mga thermostat kung saan nangyayari ang pagbuo ng lason ay nilagyan ng mga tumpak na thermostat.
Sa bawat indibidwal na kaso, ang tagal ng paglaki ng isang kultura ay tinutukoy ng intensity ng pagbuo ng lason sa isang naibigay na serye ng media. Upang malutas ang isyu kung kailan ititigil ang paglilinang, ang lakas ng lason na pH ng daluyan ay tinutukoy sa iba't ibang oras ng paglilinang.
Kapag ang lakas ng lason ay umabot sa pinakamataas nito, ito ay nahihiwalay sa mga microbial na katawan; ito ay ginagawa sa pamamagitan ng pagsasala sa pamamagitan ng mga espesyal na bacterial filter (anaerobic microorganisms) o ordinaryong papel na mga filter (diphtheria bacillus).
Ang paglipat ng mga nakakalason na filtrate sa vanatoxin ay isinasagawa sa pamamagitan ng matagal na pagkakalantad sa formaldehyde sa temperatura na 39-40 °C. Ang Formalin ay pinagsama sa mga libreng amino na grupo ng mga amino acid, polypeptides at mga toxin na protina, at samakatuwid ay nawawala ang mga nakakalason na katangian nito. Ang paglipat ng vanatoxin toxin ay nangyayari sa loob ng 3-4 na linggo. Para sa tamang pagbuo ng toxoid, ang pH ng lason ay mahalaga. Ang pinaka-kanais-nais ay isang neutral o bahagyang alkalina na reaksyon ng kapaligiran.
Ang mga anatoxin ay nailalarawan sa pamamagitan ng ganap na hindi nakakapinsala sa mga hayop. Gayunpaman, kung hindi sila ganap na na-neutralize, maaari silang magpanatili ng mga lason ng lason, na nagdudulot ng huli na pinsala sa sensitibong katawan. Samakatuwid, kapag sinusuri ang pagiging hindi nakakapinsala ng mga toxoid, ang mga hayop ay sinusubaybayan sa loob ng mahabang panahon. Ang hindi nakakapinsala ng mga toxoid ay hindi maibabalik. Walang epekto ang humahantong sa pagpapanumbalik ng nawalang toxicity.
Ang mga toxoid ay halos ganap na nananatili mga katangian ng antigenic lason. Maaari itong suriin iba't ibang pamamaraan sa vitro (reaksyon ng flocculation, reaksyon na nagbubuklod ng toxoid) at sa mga eksperimento sa mga hayop kung saan ang pangangasiwa ng toxoid ay nagiging sanhi ng pagbuo ng kaukulang mga antitoxin at ang paglikha ng antitoxic immunity.
Ang mga toxoid ay nagpapatuloy; pinahihintulutan nila ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw, lumalaban sa pagkilos mataas na temperatura at matatag sa pangmatagalang imbakan.
Bilang karagdagan sa mga tiyak na protina, ang mga toxoid ay naglalaman din ng mga ballast substance, kung saan maaari silang ilabas sa pamamagitan ng iba't ibang mga pamamaraan. Ang mga ito ay batay sa kakayahan ng mga toxoid na mamuo kapag puspos ng mga neutral na asing-gamot, mga asing-gamot mabigat na bakal, acids (hydrochloric, trichloroacetic, metaphosphoric), pati na rin sa pagkakaroon ng ethyl at methyl alcohol sa mababang temperatura. Ang mga pamamaraang ito ay kasalukuyang ginagamit upang makakuha ng purified, concentrated toxoids.
Ang mga toxoid ay na-adsorbed sa iba't ibang mga hindi matutunaw na sangkap (phosphorus salts, aluminum hydroxide), ito ay ginagamit upang maghanda ng sorbed toxoids, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng mabagal na pagsipsip sa katawan, bilang isang resulta kung saan ang isang mas matinding immune system ay maaaring makuha.
Dahil sa kanilang hindi nakakapinsala, mataas na antigenicity at immunogenicity, ang mga toxoid ay ang pinakamahalagang paraan ng pag-iwas at therapy para sa ilang mga sakit.
Sa kasalukuyan, ang mga toxoid ay nakuha: diphtheria, tetanus, botulinum, staphylococcal, dysentery, mula sa mga toxin na ginawa ng mga pathogen ng gas gangrene, pati na rin mula sa kamandag ng ahas.
"-~-" $mga taong may antitoxin sa dugo (ayon kay Greer)
°--«> % ng mga tao tungkol sa positibong reaksyon. Schick (ayon kay Park at Tsknger) bar - saklaw ng diphtheria Distribusyon ayon sa edad: mga taong may antitoxin sa dugo (sa%); mga taong may positibong reaksyon ng Schick (sa%); saklaw ng dipterya (°/ooo bawat edad). sa edad na higit sa 5 taon, isinasaisip ang kamag-anak na pambihira ng negatibong Sh. wala pang 5 taong gulang. Sa wakas III. R. Ginagamit din ito bilang layuning kontrol sa bisa ng mga preventive vaccination laban sa dipterya. Ang pagiging epektibong ito ay napatunayan sa pamamagitan ng paglipat ng isang positibo (bago ang pagbabakuna) Sh. negatibo pagkatapos ng pagbabakuna (karaniwan ay 6 na linggo pagkatapos ng huling pagbabakuna). Pamamaraan para sa paggawa ng Sh. r.: 1. Upang maihanda ang kinakailangang pagbabanto ng lason sa kinakailangang dami, magsimula sa Dim toxin. Sabihin nating Dim of toxin = 0.0032. Upang maghanda ng lason na naglalaman ng I/4l) Dim sa 0.2 volume, magpatuloy tulad ng sumusunod: kumuha ng lOODlm, sa kasong ito = 0.32, at magdagdag ng physiological solution sa 10.0, i.e. 9.68. Kumuha ng 1.0 nitong dilution (i.e. 10 Dim) at idagdag ito sa 79.0 physiol. solusyon. Pagkatapos sa 80.0 ng pangalawang pagbabanto mayroong 10.Dim; sa 1 cm 3 samakatuwid - V" Dim, at sa 0.2 - Vio Dim. Para sa bawat pagbabanto, kinakailangan na kumuha ng sariwa, tuyo na pipette, hugasan ito ng hindi bababa sa 10 beses. Sa kasong ito, kinakailangan ang espesyal na katumpakan sa pagsukat at katumpakan ng mga pipette (kalahati ng inihanda na pagbabanto ng lason ay ibinubuhos sa isang hiwalay na prasko at inilagay sa isang paliguan ng tubig na kumukulo sa loob ng 10 minuto; sa gayon, ang isang pinainit na lason ay nakuha para sa "kontrol") . Sa view ng ang katunayan na ang lason, diluted physiol. solusyon, mabilis na nawawala ang aktibidad nito, mas maginhawang kumuha ng atbp. para sa pagbabanto. borate buffer solution (tingnan. reaksyon ni Dick) kung saan ang natunaw na lason ay nagpapanatili ng lakas nito sa loob ng ilang buwan. 2. Ang pag-iniksyon ay isinasagawa nang mahigpit na intradermally, pinaka-maginhawa gamit ang isang tuberculin syringe na may napakanipis na platinum needle (No. 18, 19). Ang karayom ay dapat magkaroon ng isang maikling barb. Kapag nag-iniksyon, ang balbas ay dapat hawakan palabas. Ang lason ay ibinibigay nang dahan-dahan na may isang tiyak na katangian ng pag-igting ng intradermal na iniksyon ng likido, at bilang isang resulta, ang isang well-demarcated bubble (Quaddel) ay nabuo sa lugar ng pag-iiniksyon, na may mga depression sa lugar ng mga follicle ng buhok. 3. Ang aktibong lason ay tinuturok sa balat ng bisig ng kaliwang kamay, ang pinainit na lason ay itinurok sa balat ng bisig ng kanang kamay. Sa panahon ng mass production III. R. Inirerekomenda na gawin ito ng dalawang doktor nang sabay-sabay - ang isa ay nag-iniksyon ng aktibo, ang isa naman ay pinainit na lason. 4. Countdown Sh.r. ay ginagampanan ng dalawang beses: pagkatapos ng 24 na oras upang isaalang-alang ang mga maling reaksyon at pagkatapos ng 96 na oras, kapag ang totoong Sh. umabot sa kasukdulan nito. Lit.: Zdrodovsky P., Mga modernong problema ng tiyak na prophylaxis ng diphtheria, Arch. biol. Sciences, vol. XXXV, ser. A, isyu. 2, 1934; Doull J., Mga salik na nakakaimpluwensya sa pumipili na pamamahagi ng tn diphtheria, Journ. ol pigilan, med., v. IV, 1930; Frost W., Impeksyon, kaligtasan sa sakit at sakit sa epidemiology ng diphtheria, Ibid., v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets a reaction de Schick negative, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxin-antitoxin immunization laban sa diphtheria, Journ. Amer. med. Ass., v. LXXIX, p. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick V., Die Diphtherietoxin-Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, No. 47; S iegl J., Zur Frage der Entsteudderhung Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo-reaksyon al"anatoxine diphterique ou anatoxf-reaksyon, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Tingnan din ang lit. sa Art. Scarlet fever. G. Orlov.
Mga pamamaraan ng cytochemical ituloy ang pagkilala sa mga kemikal at enzymatic na sangkap sa mga selula, gamit ang mga reaksyon ng kulay para dito. Pinapanatili ang mga cytochemical na gamot cellular na istraktura, na nagbibigay-daan para sa pagkakakilanlan ng mga cell at intracellular localization ng compound na pinag-aaralan. Iyon ang dahilan kung bakit ang kagustuhan sa hematology ay ibinibigay hindi sa biochemical, labor-intensive, mapanirang cellular na istraktura at nauugnay sa isang napaka-magkakaibang populasyon ng cell, ngunit sa mga cytochemical na pamamaraan.
Cytochemistry pinatunayan na sa mga morphologically identical na mga cell mayroong makabuluhang pagkakaiba sa kemikal at enzymatic.
Glycogen (CHIK reaction) (PAS) - Paraan ng Hotchkiss - Mac Minus
Ang prinsipyo ng reaksyon ng CHIC. Nakikilala ang mga polysaccharides sa pamamagitan ng isang reaksyon na nag-oxidize ng mga grupo ng alkohol, na na-convert sa mga grupo ng aldehyde, at nakikilala ang huli sa pamamagitan ng isang reaksyon ng kulay sa Schiff reagent.
Mga reagents para sa reaksyon ng CHIC: 1. Pag-aayos ng alcohol-formalin mixture: 9 parts absolute ethyl alcohol+1 bahagi 40% formaldehyde; mag-imbak sa temperatura na +4°.
2. Periodic acid, 1% solusyon sa tubig. Ang solusyon ay walang kulay. Mag-imbak sa isang brown na bote ng salamin, sa madilim, sa temperatura ng laboratoryo. Ang isang dilaw na solusyon ay hindi magagamit.
3. Reagent ni Schiff. Dilute ang 1 g ng basic fuchsin sa 200 ML ng distilled water sa kumukulong punto. Gumalaw ng 5 minuto, palamig hanggang 50°, salain at magdagdag ng 20 ML ng normal na hydrochloric acid. Palamig sa 25°, magdagdag ng 2 g ng sodium o potassium metabisulfite, na ganap na nagbibigay ng solusyon. Ang solusyon ay dapat tumayo ng isang araw sa madilim at malamig na kondisyon (+4°). Pagkatapos ay magdagdag ng 2 g activated carbon, makipag-chat ng 1 min. at salain.
Ang resultang filtrate ay transparent at walang kulay. Ang isang bahagyang madilaw-dilaw na tint ay pinapayagan; kung ang solusyon ay nagiging kulay rosas, ito ay nagiging hindi magagamit. Mag-imbak sa temperatura na +4° sa isang hermetically sealed brown glass bottle.
4. Green light -1% aqueous solution.
5. Diastasis: non-liquefied human saliva o 0.1% solution ng amylolytic-diastatic enzyme sa physiological saline.
Teknik para sa pagsasagawa ng reaksyon ng CHIC
1) 10 minutong pag-aayos ng mga smears na may pinaghalong alkohol at formalin; banlawan ng distilled water;
2) oksihenasyon na may 1% na solusyon ng periodic acid, 10 minuto; banlawan ng distilled water;
3) paglamlam ng Schiff's reagent sa isang natatakpan na lalagyan, sa dilim at malamig, sa loob ng 2 oras; banlawan ng tubig na tumatakbo;
4) contrast staining na may 1% green-light sa loob ng 1 minuto; pagbabanlaw ng tubig na tumatakbo.
Nakatalagang kontrol pahid sumailalim sa pagpapapisa ng itlog na may diastase, 60 min. sa temperatura ng silid upang piliing alisin ang glycogen. Pagkatapos hugasan ng distilled water, pinoproseso ito ayon sa karaniwang pamamaraan.
Pagsusuri ng mga resulta ng reaksyon ng CHIC
Glycogen, pininturahan ng pulang-pula Kulay pula, ay lumilitaw sa anyo ng mga butil o nakakalat. Ang mga mature smear granulocytes ay ginagamit upang subaybayan ang reaksyon. Bilang karagdagan sa glycogen CHIC positibong reaksyon Gumagawa din sila ng iba pang mga carbohydrate substance, tulad ng mucin, mucoproteins, cerebrosides, at fibrin. Ang pagkita ng kaibhan ng glycogen mula sa mga sangkap na ito ay isinasagawa sa pamamagitan ng pre-treatment na may diastase, pagkatapos kung saan ang glycogen ay hindi na nabahiran.
SA granulocytes Ang glycogen ay nasa isang dispersed form na nasa promyelocyte stage at nagsisimulang tumaas habang ito ay tumatanda. Sa normal na kondisyon, ang mga lymphocyte ay negatibo o 20% sa mga ito ay maaaring maglaman ng ilang maliliit na butil ng glycogen. Ang mga monocytes ay negatibo o pinong butil-butil.
Intensity pangkulay tinutukoy ng semi-quantitative. Sa reaksyon, ang PAS ay makikita sa anyo ng isang glycogen indicator, o ang average na indicator ng reaksyon (Astaldi). Normal na tagapagpahiwatig saklaw ng glycogen mula 0.10 hanggang 0.30. Karaniwan, ang mga pathological lymphocyte lamang ang nagpapakita ng load degree na higit sa 3.
Ito ay ipinahiwatig ng paraan ng reaksyon ng CHIC:
a) Kapag nagtatakda differential diagnosis ilang mga cytological na uri ng acute leukemia:
- Ang mga myeloblast at promyeloid ay PHIK-negative o nakakakuha ng mahinang diffuse na kulay. Ang mga katawan ng Auer ay nagbibigay ng isang positibong reaksyon, na humihina pagkatapos ng panunaw na may laway.
- Ang mga lymphoblast sa talamak na leukemia at lymphosarcoma ay nagbibigay ng matalas na CHIC-positive na reaksyon sa anyo ng mga butil o malalaking bloke ng glycogen.
- Ang mga erythroblast sa erythremia at acute erythroleukemia ay nagbibigay ng isang positibong nakakalat o butil-butil na reaksyon, sa kaibahan sa mga normal na erythroblast, na PAS-negatibo;
- Ang mga monocytoid blast ay hindi pare-parehong mahinang positibo, na may pinong granularity.
b) Para sa layunin ng pagsusuri at pagsubaybay sa pagiging epektibo ng paggamot para sa talamak na lymphatic leukemia: ang isang mataas na tagapagpahiwatig ng glycogen ay nagpapahiwatig ng isang malubhang anyo ng sakit at isang matinding pagbabala.
Paglago ng glycogen sa pathological lymphocytes, isang phenomenon na hindi katangian ng leukemia, ito ay ipinaliwanag sa pamamagitan ng isang pagtaas sa metabolic aktibidad sa anumang uri ng lymphoid paglaganap.
c) Upang ibahin ang mga selula ng Gaucher mula sa iba pang mga macrophage na may akumulasyon.