През 2013 г., докато караше ролкови кънки, тя получи фрактура на фибулата. Не знаейки какво да правя, отидох в БСПМ, където ми сложиха гипс. Седмица по-късно разбрах, че нещо не е наред и приятели ме посъветваха да се свържа с Олег Аркадиевич Юхимчук.
Няколко дни по-късно дойдох на консултация, където разбрах, че костите не зарастват правилно и се налага операция за поставяне на пластина.
Обслужването и отношението към пациента от страна на Олег Аркадиевич и неговия екип е на първо ниво! Всичко е бързо, ясно, професионално и с хумор. След операцията - пълноценна "сервизна" поддръжка. Глезенът е възстановен, функционира както преди, без болка или следи от фрактура, с изключение на тънък белег. През 2018 г. имах контузия на коляното и без съмнение отново се обърнах към Олег Аркадиевич. Излишно е да казвам, че го оправиха отново, помогнаха и ме успокоиха! Като цяло страхотен лекар и прекрасен човек! Искрено го препоръчвам!

Ирина Животко

Преди година бях тежко ранен

Преди година получих тежка травма на глезенната става, комплексно счупване на 2 кости с разместване, скъсани връзки и частично мускулно увреждане.
Аз живея в Европа. Свързах се с много клиники... След множество консултации и диагностика, за съжаление, не получих еднозначно заключение от лекарите. Заключението, което ми каза, беше: „Едва ли ще ходиш както преди.“
По препоръка на мои приятели се обърнах за професионална помощ към украинската клиника, един от най-добрите хирурзи/травматолози, по-точно Олег Аркадиевич Юхимчук.
Резултат:
1. Ясен, бърз професионален преглед и взех решение да се подложа на операция.
2. Операцията мина добре. Бяха поставени импланти.
3. Получих консултация за следоперативна рехабилитация на високо ниво.
4. НАПЪЛНО възстановен без ни най-малък намек за нараняване!
БРАВО НА НАШИТЕ ЛЕКАРИ!!!

Познаваме лекаря отдавна, лекували сме го много пъти

С лекаря се познаваме отдавна, лекувал е всички членове на семейството повече от веднъж, известен още като мама след инцидента през 2006 г. С фрактури на повечето китки (рамо, рамо, ребра), тя претърпя операция в далечината, работи дълго време, гледа бебета onuks, расте града в дачата. Здраве на Вас, докторе, и на цялата Ви родина! Предварително знаем, че щом го оближем, трябва да укрепим сламката!

Квиточка

Вече повече от 10 скали общо

Вече повече от 10 години цялата ми родина умира за Олег Аркадийович. Оттук нататък ще е необходима квалифицирана и ефективна помощ. На 21-ви 2017 г. Рок счупи крака си, счупи две кости на пищяла, а другите кокалчета бяха изкормени на мястото на фрактурите в „розов модел“. Веднага отидохме при Олег Аркадийович, беше извършена важна операция, поставиха две пластини... точно така, аз вече вървях без полиция, а след това те започнаха да ходят както преди фрактурата. На този скъп доктор.

Антонина

Страдах от възпаление на ахилеса повече от година,

Периодично използвам услугите на Олег Аркадиевич и го препоръчвам на приятели.
Страдах от възпаление на ахилеса повече от година, вече ходех сутрин като Чарли Чаплин 🙁
Олег Аркадиевич ме постави на пода в рамките на един месец. Колосален опит, златни ръце, светла глава и просто добър човек. Благодаря ти много!!!

P.S. За тези, които активно се занимават със спорт и в резултат на това се нараняват, силно препоръчвам Олег Аркадиевич.

Александър

Олег Аркадиевич, благодаря ви много!!!

Олег Аркадиевич, благодаря ви много!!! През 2015 г. баща ми беше опериран, той самият е лекар, прекарва 99% от времето си на крак на работа и благодарение на вас продължава в същия дух, но вече с протези. тазобедрена става. Аз самият съм хирург и си спомням как мина всичко, мога да кажа, че както предоперативният, така и следоперативният период преминаха много „гладко“. След 1,5 месеца татко вече беше в операционната (акушер-гинеколог), въпреки че си спомням, че казахте това рано :)), но не издържа. Вече тази година покорих Ховерла за 3-ти път) Помним те всеки 14 февруари - деня на операцията. БЛАГОДАРЯ ТИ!!!

В продължение на 30 години се предполага, че ангиогенезата, процесът на образуване на нови кръвоносни съдове, може да се превърне във важна цел за противоракова терапия. И едва наскоро тази възможност беше реализирана. Клиничните данни показват, че лекарството бевацизумаб с хуманизирано моноклонално антитяло, което е насочено към ключова проангиогенна молекула, васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF), може да удължи живота на пациенти с метастатичен колоректален рак, когато се прилага като терапия от първа линия в комбинация с химиотерапевтични лекарства. Тук обсъждаме функциите и значението на VECF, за да покажем, че VEGF е разумна цел за противоракова терапия.

Какво е VEGF?

VEGF е един от членовете на семейството от структурно свързани протеини, които са лиганди за VEGF рецепторното семейство. VEGF влияе върху развитието на нови кръвоносни съдове (ангиогенеза) и оцеляването на незрели кръвоносни съдове (съдова подкрепа) чрез свързване и активиране на два тясно свързани мембранни тирозин киназни рецептора (VEGF рецептор-1 и VEGF рецептор-2). Тези рецептори се експресират от ендотелни клетки в стената на кръвоносните съдове (Таблица 1). Свързването на VEGF с тези рецептори инициира сигнална каскада, която в крайна сметка стимулира растежа, оцеляването и пролиферацията на васкуларните ендотелни клетки. Ендотелните клетки участват в такива разнообразни процеси като вазоконстрикция и вазодилатация, представяне на антиген, а също така служат като много важни елементи на всички кръвоносни съдове - както капиляри, така и вени или артерии. По този начин, чрез стимулиране на ендотелните клетки, VEGF играе централна роля в процеса на ангиогенеза.

Защо е важно да се използва съдов ендотелен растежен фактор (VEGF човешки)?

VEGF е изключително важен за формирането на адекватно функционираща съдова система по време на ембриогенезата и в ранния постнатален период, но при възрастни физиологичната му активност е ограничена. Експериментите с мишки показват следното:

• Целенасоченото увреждане на един или два алела на VEGF гена води до смърт на ембриона
• Инактивирането на VEGF по време на ранното постнатално развитие също е фатално
• Увреждането на VEGF при възрастни мишки не е придружено от очевидни аномалии, тъй като неговата роля е ограничена до фоликулното развитие, заздравяването на рани и репродуктивния цикъл при женските.

Ограниченото значение на ангиогенезата при възрастни означава, че инхибирането на активността на VEGF представлява осъществима терапевтична цел.

Васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF; Английски Васкуларен ендотелен растежен фактор) е сигнализиращ протеин, произведен от клетките за стимулиране на васкулогенезата (формиране на ембрионалната съдова система) и ангиогенезата (растеж на нови съдове в съществуваща съдова система). В момента са известни няколко различни факториот това семейство (което от своя страна е подклас на доста обширен клас от растежни фактори днес).

VEGF протеините служат като част от система, отговорна за възстановяване на доставката на кислород към тъканите в ситуации, когато кръвообращението е недостатъчно. Концентрацията на VEGF в кръвния серум се повишава при бронхиална астма и захарен диабет. Основните функции на VEGF са създаването на нови кръвоносни съдове в ембрионалното развитие или след нараняване, засилване на мускулния растеж след тренировка, осигуряване на колатерално кръвообращение (създаване на нови кръвоносни съдове, докато блокира съществуващите).

Повишената активност на VEGF може да доведе до различни заболявания. По този начин солидните ракови тумори не могат да растат по-големи от определен ограничен размер, без да получат адекватно кръвоснабдяване; тумори, които могат да експресират VEGF, могат да растат и да метастазират. Прекомерната експресия на VEGF може да причини съдови заболявания на определени части на тялото (по-специално на ретината). Някои лекарства, разработени през последните години (като бевацизумаб), могат да контролират или забавят прогресията на такива заболявания чрез инхибиране на VEGF.

Настоящите изследвания показват, че VEGF протеините не са единственият активатор на ангиогенезата. В частност, FGF2И HGFсъщо са мощни ангиогенни фактори.

Класификация

Най-важна роля в човешкия организъм играе протеин от семейството на VEGF, т.нар VEGF-A. Това семейство също включва плацентарен растежен фактор (PGF) и протеини VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D. Всички те са открити по-късно от VEGF-A (преди откриването им, протеинът VEGF-A се нарича просто VEGF). Наред с горното е открит VEGF протеинът, кодиран от вируси ( VEGF-E) и протеина VEGF, открит в отровата на някои змии ( VEGF-F).

Тип	функция
VEGF-A	Ендотелна клетъчна миграция Митоза на ендотелните клетки Метан монооксигеназна активност Интегринова активност α V β 3 Образуване на празнини в кръвоносните съдове Създаване на пори в ендотелните клетки Хемотаксис за макрофаги и гранулоцити
VEGF-B	Ембрионална ангиогенеза (по-специално миокардна тъкан)
VEGF-C	Ангиогенеза на лимфните съдове
VEGF-D	Развитие на лимфните съдове в белите дробове
PIGF	Васкулогенеза (както и ангиогенеза при исхемия, възпаление, заздравяване на рани и рак)

Активността на протеина VEGF-A е изследвана (както подсказва името му) главно в съдови ендотелни клетки, въпреки че засяга функционирането на други видове клетки (например стимулира миграцията на моноцити/макрофаги, засяга неврони, ракови клетки, бъбречен епител клетки). В изследванията инвитроДоказано е, че VEGF-A стимулира митогенезата и миграцията на ендотелните клетки. VEGF-A също подобрява и повишава микроваскуларната пропускливост и първоначално е наречен "фактор на съдовата пропускливост".

Алтернативна класификация

Концепцията за "VEGF протеини" е широка концепция, обхващаща две групи протеини, които възникват от алтернативен сплайсинг на информационна РНК (mRNA) на един ген, съдържащ 8 екзона. Тези две групи се различават по мястото на снаждане на крайния 8-ми екзон: протеини с проксимално място са обозначени като VEGFxxx, а тези с дистален сайт са обозначени като VEGFxxxb. В допълнение, алтернативното снаждане на екзони 6 и 7 променя техните хепарин-свързващи свойства и аминокиселинен състав (при хора: VEGF121, VEGF121b, VEGF145, VEGF165, VEGF165b, VEGF189, VEGF206; при гризачи ортолозите на тези протеини съдържат една аминокиселина по-малко ). Тези области имат важни функционални последици за VEGF вариантите, тъй като крайното място на снаждане (екзон 8) определя дали протеините са проангиогенни (проксимално място на снаждане, използвано по време на ангиогенеза) или антиангиогенни (дистално място на снаждане, използвано в нормална тъкан). В допълнение, включването или изключването на екзони 6 и 7 медиират взаимодействия с хепаран сулфат протеогликани и невропилинови корецептори на клетъчната повърхност, повишавайки тяхната способност да свързват и активират VEGF рецепторите ( VEGFR). Наскоро беше показано, че при мишки VEGF-C протеинът е важен индуктор на неврогенезата в субвентрикуларните зони, без да упражнява ангиогенни ефекти.

VEGF рецептор

Всички членове на семейството VEGF протеини стимулират клетъчните реакции чрез свързване към рецептори с тирозин киназна активност на клетъчната повърхност; активирането на тези протеини става чрез тяхното трансфосфорилиране. Всички VEGF рецептори имат извънклетъчна част, състояща се от 7 имуноглобулиноподобни области, една трансмембранна област и вътреклетъчна част, съдържаща тирозин киназен домен.

Има три вида рецептори, обозначени като VEGFR-1, VEGFR-2 и VEGFR-3. Също така, в зависимост от алтернативния сплайсинг, рецепторите могат да бъдат мембранно свързани или свободни.

Протеинът VEGF-A се свързва с рецепторите VEGFR-1 (Flt-1) и VEGFR-2 (KDR/Flk-1); в този случай рецепторът VEGFR-2 действа като медиатор в почти всички известни клетъчни реакции към VEGF. Функциите на VEGFR-1 рецептора са по-малко дефинирани (въпреки че се смята, че модулира VEGFR-2 сигнализирането). Друга функция на VEGFR-1 е, че той може да действа като "празен" рецептор, изолирайки протеина VEGF от рецептора VEGFR-2 (което изглежда особено важно по време на ангиогенезата по време на ембрионалното развитие).

Протеините VEGF-C и VEGF-D (но не и VEGF-A) са лиганди за третия рецептор (VEGFR-3), който действа като посредник лимфангиогенеза.

Производство от клетки

Производството на VEGFxxx протеини може да се задейства в клетки, които не получават достатъчно кислород. Когато една клетка изпитва недостиг на кислород, тя произвежда един от транскрипционните фактори - хипоксия-индуцируем фактор ( HIF). Този фактор (в допълнение към други функции - по-специално, модулиране на еритропоезата, т.е. процесът на образуване на червени кръвни клетки в костния мозък) стимулира освобождаването на протеини VEGFxxx. След това циркулиращият протеин VEGFxxx се свързва с VEGF рецептора на ендотелните клетки и активира действието на тирозин киназата, задействайки ангиогенезата.

При пациенти, страдащи от емфизем, са установени понижени нива на VEGF в белодробните артерии.

В бъбреците повишената експресия на VEGFxxx в гломерулите директно причинява гломерулна хипертрофия, свързана с протеинурия.

Промените в нивата на VEGF могат да показват ранните стадии на прееклампсия.

Анти-VEGF терапия

Анти-VEGF терапията играе важна роля в лечението на някои видове рак (по-специално -

Съдържание

1. Регулиране на неоангиогенезата

2. Туморна ангиогенеза

Васкулоендотелен растежен фактор

. Васкулоендотелен растежен фактор С

. Васкулоендотелен растежен фактор D

. VEGF рецептори

. Фактор на растежа на фибробластите

. Епидермален растежен фактор

. Трансформиращ растежен фактор α

. Трансформиращ растежен фактор β

. Тромбоцитен растежен фактор

. Фактор на растежа на плацентата

. Фактор на растежа на хепатоцитите

. Ангиогенин

. Ангиопоетини-1 и -2

. Пигментен фактор от епителен произход

. Азотен оксид

. Матриксни металопротеинази

. ендостатин

. Фактор на стволови клетки

. Инхибиторен фактор на левкемични клетки

. Невротропен фактор, получен от мозъка

Съкращения на раздела

EGF - епидермален растежен фактор

FGF - фибробластен растежен фактор

HGF - хепатоцитен растежен фактор

IGF - инсулиноподобни растежни фактори

MMPS - матрични металопротеинази

PDGF - тромбоцитен растежен фактор

PLGF - плацентарен растежен фактор

TGF - трансформиращи растежни фактори

ТИМП инхибитори

MMP SCF - фактор на стволови клетки

VEGF - васкулоендотелен растежен фактор

Растежни фактори - полипептиди с молекулно тегло 5-50 kDa, обединени в група трофични регулаторни вещества. Подобно на хормоните, тези фактори имат широк спектър от биологични ефекти върху много клетки - те стимулират или инхибират митогенезата, хемотаксиса и диференциацията. За разлика от хормоните, растежните фактори обикновено се произвеждат от неспециализирани клетки, открити във всички тъкани, и имат ендокринни, паракринни и автокринни ефекти. Ендокринните фактори се произвеждат и транспортират до отдалечени целеви клетки чрез кръвния поток. Достигайки своята „цел”, те взаимодействат със специализирани рецептори с висок афинитет на целевите клетки. Паракринните фактори се различават по това, че се разпространяват чрез дифузия. Рецепторите на прицелните клетки обикновено се намират близо до клетките продуценти. Автокринните фактори засягат клетките, които са пряк източник на тези фактори. Повечето полипептидни растежни фактори действат по паракринен или автокринен начин. Някои фактори обаче, като например инсулиноподобен растежен фактор (IGF), могат да имат ендокринни ефекти.

Регулиране на неоангиогенезата

Нормалното функциониране на тъканите зависи от редовното доставяне на кислород от кръвоносните съдове. Разбирането как се образуват кръвоносните съдове фокусира голяма част от изследователските усилия през последното десетилетие. Васкулогенезата в ембрионите е процесът, чрез който кръвоносните съдове се образуват de novo от прекурсори на ендотелни клетки. Ангиогенезата е процес на образуване на нови кръвоносни съдове от вече съществуваща съдова система. Играе важна роля за развитието, нормалния растеж на тъканите, заздравяването на рани, репродуктивния цикъл при жените (развитие на плацентата и жълтото тяло, овулация), а също така играе важна роля при различни заболявания. Особен интерес е насочен към растежа на тумора. Това е образуването на ново кръвоснабдяване, което позволява на тумора да расте. Този процес, описан като туморна ангиогенеза, също е неразделна част от разпространението на туморните клетки и растежа на метастазите. Процесът на неоангиогенеза е необходим за дълготрайна адаптация на тъканите при условия на увреждане. В този случай се получава частично освобождаване на растежни фактори в кръвта, което има диагностично значение.

Различават се следните етапи на неоангиогенезата:

1. повишена ендотелна пропускливост и разрушаване на базалната мембрана;

2. миграция на ендотелни клетки;

3. пролиферация на ендотелни клетки;

4. “узряване” на ендотелните клетки и съдово ремоделиране.

Основният механизъм за регулиране на процесите на неоангиогенеза е освобождаването на ангиогенни фактори, източници на които могат да бъдат ендотелни и мастоцити, макрофаги и др. Под въздействието на ангиогенни фактори ендотелните клетки се активират (главно в посткапилярните венули) и мигрират отвъд базална мембрана с образуване на клонове на главните съдове. Предполага се, че активирането на експресията на ендотелни адхезионни молекули, например Е-селектин, е от голямо значение в механизма на миграция на ендотелни клетки. В стабилно състояние ендотелните клетки не пролиферират и само от време на време (веднъж на 7-10 години) се делят. Под въздействието на ангиогенни растежни фактори и цитокини се активира пролиферацията на ендотелните клетки, която завършва с ремоделиране на съда, след което новообразуваният съд придобива стабилно състояние.

Растежът на нови съдове се определя от баланса между неговите стимулатори и инхибитори. При ниско съотношение на стимуланти към инхибитори на васкуларното образуване, неоангиогенезата е блокирана или с ниска интензивност; напротив, при високи съотношения, неоангиогенезата се задейства активно.

Стимулатори на неоангиогенезата: васкулоендотелен растежен фактор (VEGF), фибробластен растежен фактор (FGF), ангиогенин, епидермален растежен фактор (EGF), тромбоцитен растежен фактор (PDGF), трансформиращи растежни фактори α (TGF-α) и β (TGF- β), инсулиноподобен растежен фактор 1 (IGF-1), NO, интерлевкин-8 и неспецифични фактори като матрични металопротеинази (MMP).

Инхибитори на неоангиогенезата: ендостатин, разтворими VEGF рецептори (sVEGFR), тромбоспондин, ангиостатин (плазминогенен фрагмент), вазостатин, рестин, ММР инхибитори (TIMP-1, TIMP-2).

Туморна ангиогенеза

За разлика от нормалната, нормална васкулатура, която узрява и се стабилизира бързо, туморните кръвоносни съдове имат структурни и функционални аномалии. Не съдържат перицити – клетки, функционално свързани със съдовия ендотел и изключително важни за стабилизирането и узряването на съдовите структури. В допълнение, съдови1. 2. 3. 4. Тази туморна мрежа има хаотична организация, с изкривяване и повишена съдова пропускливост и нейното оцеляване и пролиферация зависят от растежните фактори. Тези съдови аномалии, които до голяма степен се дължат на прекомерното производство на растежни фактори, създават благоприятни условия за растеж на тумора.

Раковите клетки се характеризират с повишаване на нивото на стимулаторите на неоангиогенезата. При липса на кръвоснабдяване туморите получават кислород и хранителни вещества чрез дифузия и обикновено не растат повече от 1-2 mm в диаметър. Началото на ангиогенезата води до образуването на ново кръвоснабдяване и улеснява бързия растеж и метастази на тумора, който по този начин е станал активен. Въпреки че много растежни фактори участват в туморната ангиогенеза, VEGF е установено, че е най-мощният и доминиращ от тях. Нарушаването на кръвоснабдяването на тумора може да потисне последващия му растеж. Предполага се, че блокирането на туморния растеж е възможно чрез потискане на образуването и активността на растежни фактори на ангиогенезата или чрез директно въздействие върху новообразувани, незрели кръвоносни съдове. Този метод на въздействие върху тумора не води до унищожаване, а само ограничава растежа му, превръщайки заболяването в бавен хроничен процес. Анти-VEGF терапията потиска растежа на нови туморни съдове и предизвиква обръщане на новообразуваните съдови легла.

Васкулоендотелен растежен фактор (VEGF, VEGF A)

VEGF е хетеродимерен гликопротеинов растежен фактор, произведен от различни типове клетки. Идентифицирани са поне 5 варианта на VEGF-A: VEGF 121, VEGF 165, VEGF 183, VEGF 189, VEGF 206. Други VEGF варианти са обозначени с VEGF-B, -C, -D. VEGF 165 е преобладаващата форма в повечето тъкани. Саркомът на Капоши експресира VEGF 121 и VEGF 165. VEGF 121 и VEGF 165 са разтворими форми, докато VEGF 189 и VEGF 206 са свързани с хепарин-съдържащи мембранни протеогликани. За разлика от други митогени на ендотелни клетки като bFGF (основната форма) и PDGF, VEGF се синтезира като прекурсор от 226 аминокиселини.

VEGF е потенциален митоген за васкуларните епителни клетки. Той има силен ефект върху съдовата пропускливост, е мощен ангиогенен протеин в различни експериментални системи и участва в процесите на неоваскуларизация в патологични ситуации. Съществува синергичен ефект между VEGF и bFGF върху индуцирането на ангиогенеза. Способността на VEGF да повлиява съдовата пропускливост предполага възможността за участието на този растежен фактор в промяната на функциите на кръвно-мозъчната бариера при субнормални и патологични състояния. VEGF-A също така причинява вазодилатация чрез NO синтетазния път в ендотелните клетки и може да активира миграцията на моноцити.

VEGF-A може да бъде открит в плазмата и серума на пациентите, но нивото му в серума е значително по-високо. Изключително високи нива могат да бъдат намерени в съдържанието на кисти, образувани при пациенти с мозъчни тумори или в асцитна течност. Тромбоцитите освобождават VEGFA при агрегация и могат да бъдат друг основен източник за туморни клетки. Различни проучвания показват, че връзката на високите серумни нива на VEGF-A с лошата прогноза при пациенти със злокачествени заболявания може да бъде свързана с повишен брой тромбоцити. Туморите могат да секретират цитокини и растежни фактори, които стимулират производството на мегакариоцити в костния мозък и увеличават броя на тромбоцитите. Това, от своя страна, може да доведе до друго, индиректно увеличение на доставката на VEGF-A към тумора. Освен това, VEGF-A участва в много други патологични процеси, свързани с повишена ангиогенеза или повишена съдова пропускливост. Примери, при които VEGF-A играе важна роля, включват псориазис и ревматоиден артрит, както и синдром на хиперстимулация на яйчниците. Диабетната ретинопатия също е свързана с високи вътреочни нива на VEGF-A и инхибирането на функцията на VEGFA може да доведе до безплодие поради блокиране на функцията на жълтото тяло. Значението на VEGF-A за туморния растеж е ясно демонстрирано чрез използване на VEGF рецептори за блокиране на пролиферацията in vivo, както и блокиране на антитела срещу VEGF или един от VEGF рецепторите. В резултат на това намесата във функцията на VEGF-A се превърна в основна област на интерес за разработването на лекарства, насочени към блокиране на ангиогенезата и метастазите. В момента повече от 110 фармацевтични компании по света участват в разработването на такива антагонисти. Техните подходи включват антагонисти на VEGF-A или неговите рецептори, селективни инхибитори на тирозин киназата. Насочването към VEGF сигнализиране може да има много важни терапевтични последици за много заболявания и да служи като основа за разработването на бъдещи (анти)ангиогенни терапии.

Васкулоендотелен растежен фактор С (VEGF-C)

VEGF-C принадлежи към семейството на VEGF. Доказано е, че има ангиогенни и лимфангиогенни свойства. Фамилията VEGF и техните рецептори участват в развитието и растежа на съдовия ендотел. Два протеина от това семейство, VEGF-C и -D, упражняват регулаторен ефект върху ендотелните клетки на лимфните съдове чрез VEGFR3 рецептора, действайки като митогени.

Експресията на VEGF-C е свързана с онкохематологични заболявания. Експресията на VEGF-C заедно с рецепторите насърчава оцеляването и пролиферацията на туморни клетки. Повишената експресия на VEGF-C е показана при стомашно-чревни злокачествени заболявания, където тя корелира с инвазия, метастази в лимфни възли и намалена преживяемост.

Васкулоендотелен растежен фактор D (VEGF-D)

VEGF-D (известен също като c-fos-индуцируем фактор или FIGF) е много подобен на VEGF-C. Той има структурна хомология и рецепторна специфичност, подобни на VEGF-C, така че се смята, че VEGF-D и VEGF-C могат да бъдат класифицирани в подсемейството на VEGF. VEGF-D първоначално се синтезира като прекурсорен протеин, съдържащ уникални N- и C-терминални пропептиди в допълнение към централния VEGF рецептор-свързващ хомологичен домен (VHD). N- и С-терминални пропептиди не са открити в други членове на семейството на VEGF. Тези пропептиди се разцепват протеолитично по време на биосинтеза, което води до образуването на зряла, секретирана форма, състояща се от моновалентни VHD димери.

Подобно на VEGF-C, VEGF-D се свързва на клетъчната повърхност с тирозин киназа VEGF рецептор 2 (VEGF R2/Flk-1/KDR) и VEGFR3. Тези рецептори са локализирани върху васкуларни и лимфни ендотелни клетки и са отговорни за ангиогенезата и лимфогенезата. Зрялата форма на VEGFD се свързва с тези рецептори с по-голям афинитет от оригиналната проформа на VEGF-D. Показана е експресията на VEGF-D гена в развиващите се ембриони, особено в белодробния мезенхим. VEGF-D също е локализиран в туморни клетки. В тъканите на възрастни VEGF-D иРНК се експресира в сърцето, белите дробове, скелетните мускули и тънките черва.

VEGF рецептори (sVEGFR-1, sVEGFR-2)

Много цитокинови рецептори съществуват в разтворима форма след протеолитично разцепване и отделяне от клетъчната повърхност. Тези разтворими рецептори са способни да свързват и неутрализират цитокините в кръвообращението. Има три рецептора за VEGF-A: VEGFR-1 (Flt-1), -2 (KDR) и -3 (Flt-4). Всички те съдържат седем Ig-подобни повторения в извънклетъчните домени. VEGFR1-R3 се експресира главно в пролифериращ ендотел на съдовата обвивка и/или инфилтриращи солидни тумори. VEGFR2 обаче е по-широко представен от VEGFR1 и се експресира във всички ендотелни клетки от съдов произход. VEGFR2 също присъства в ендотелни и периваскуларни капилярни клетки в ламината на семенните тубули, клетки на Лайдиг и клетки на Сертоли. VEGFR2 свързва VEGF-A, -C и -D. За разлика от VEGFR1, който свързва както PlGF, така и VEGF с висок афинитет, VEGFR2 свързва само VEGF, а не PlGF с висок афинитет.

Тези рецептори играят важна роля в ангиогенезата. sVEGFR-1 е инхибитор на този процес. Чрез свързване с VEGF, той предотвратява взаимодействието на VEGF с целевите клетки. Функционалното инактивиране на VEGFR2 от антитела може да наруши процеса на ангиогенеза и да предотврати инвазията на туморни клетки. В съдовите ендотелни клетки индуцираната от HIV-1 Tat протеин ангиогенеза се медиира от VEGFR2. Tat специфично се свързва и активира VEGFR2. Индуцираната от Tat ангиогенеза се инхибира от средства, които могат да блокират VEGFR2.

Фибробластен растежен фактор (FGF)

Фамилията FGF в момента включва 19 различни протеина. Първоначално бяха характеризирани две форми: кисела (aFGF) и основна (bFGF).

a и bFGF са продукти на различни гени и имат до 53% хомология. Молекулата aFGF е представена от проста полипептидна верига с m.m. 16,8 kDa. Ммм различните форми на bFGF варират от 16,8 до 25 kDa. Не са открити функционални разлики между формите на bFGF.

Биологичните активности на FGF са разнообразни. Те са митогени за различни клетки от невроектодермален и мезенхимен произход, потенциални митогени и стимулатори на ангиогенезата, поддържат и стимулират диференциацията на клетки от различни типове неврони in vivo и in vitro. В допълнение към a и bFGF, семейството включва онкопротеините int-2 (FGF-3) и hst (FGF-4), FGF-5, кератиноцитен растежен фактор и съдов ендотелен растежен фактор. FGF-3 и -4 са тясно свързани с bFGF, който сам по себе си е вероятно да бъде потенциален онкоген. Клиничните данни подкрепят ролята на bFGF в туморната неоангиогенеза. По този начин повишаването на нивото на този фактор корелира със степента на агресивност на процеса при много солидни тумори, левкемия, лимфоми при деца и възрастни и може да служи като прогностичен фактор за агресивността на туморния процес. bFGF е необходим за развитието и поддържането на съдовата система по време на ембриогенезата; той също е основният ангиогенен фактор при ранно възстановяване и сърдечно-съдови заболявания.

Епидермален растежен фактор (EGF)

EGF е глобуларен протеин с m.m. 6,4 kDa, състоящ се от 53 аминокиселинни остатъка, който действа като мощен митоген върху различни клетки от ендодермален, ектодермален и мезодермален произход. EGF се намира в кръвта, цереброспиналната течност, млякото, слюнката, стомашния и панкреатичния сок. Растежният фактор в урината, известен като урогастрон, също е идентичен на EGF. Основното място на синтеза на EGF са слюнчените жлези. EGF контролира и стимулира пролиферацията на епидермални и епителни клетки, включително фибробласти, бъбречен епител, глиални клетки, овариални гранулозни клетки и клетки на щитовидната жлеза in vitro. EGF също така стимулира пролиферацията на ембрионалните клетки и повишеното освобождаване на калций от костната тъкан. Той насърчава костната резорбция и е силен хемоатрактант за фибробластите и епителните клетки. EGF самостоятелно и в комбинация с други цитокини е най-важният фактор, медииращ процесите на заздравяване на рани и ангиогенеза. Той също така действа като инхибитор на секрецията на стомашна киселина. Високи нива на EGF присъстват в определени телесни течности, като слюнка, урина, стомашен сок, семенна течност и мляко.

EGF играе важна роля в канцерогенезата. При определени условия може да причини злокачествено заболяване на клетките. EGF индуцира протоонкогените c-fos и c-myc. Биологичните ефекти на имунореактивния EGF са подобни на тези на TGF-α. Важно е да се отбележи, че и двата фактора се свързват с едни и същи рецептори. Въпреки това, ефективността на EGF е 50% по-висока от TGF-α.

Трансформиращ растежен фактор α (TGF-α)

Основният източник на TGF-α са карциномите. Макрофагите и кератиноцитите (вероятно други епителни клетки) също секретират TGF-α. TGF-α стимулира фибробластите и развитието на ендотела. Това е ангиогенен фактор. Подобно на EGF, TGF-α участва в регулирането на клетъчната пролиферация, както и в регулирането на растежа на туморни клетки.

Трансформиращ растежен фактор β (TGF-β)

Семейството TGF-p включва група от хомоложни хетеродимерни протеини TGFp-1, -2, -3 и -4. Основната изоформа, секретирана от клетките имунна система, е TGF-β1. Всички TGF-βs се състоят от 112 аминокиселинни остатъка. Структурата на TGF-p2 има 50% хомология с TGF-p1 върху първите 20 аминокиселинни остатъка и 85% за фрагмент 21-36. Не са открити разлики във функционалната активност между TGF-β1 и -β2. TGF-β се произвежда от много видове клетки и тъкани: активирани Т-лимфоцити и макрофаги, тромбоцити, бъбреци, плацента.

Факторът се произвежда в неактивна форма, съдържаща, заедно с основния димер, фрагменти от допълнителни вериги на прекурсорната молекула. Активирането се осъществява под формата на разцепване на тези фрагменти с помощта на протеинази (плазмин, катепсин и др.). TGF-β също е насочен към различни клетки, тъй като експресията на неговия рецептор с висок афинитет е широко разпространена. Когато TGFβ действа върху имунната система, инхибиторните ефекти преобладават. Факторът потиска хемопоезата, синтеза на възпалителни цитокини, реакцията на лимфоцитите към IL-2, -4 и -7 и образуването на цитотоксични NK и Т клетки. В същото време подобрява синтеза на протеини на междуклетъчния матрикс, подпомага заздравяването на рани и има анаболен ефект.

По отношение на полиморфонуклеарните левкоцити, TGF-β действа като антагонист на възпалителните цитокини. Изключването на TGF-β гена води до развитие на фатална генерализирана възпалителна патология, която се основава на автоимунен процес. По този начин той е елемент от обратната регулация на имунния отговор и преди всичко на възпалителния отговор. В същото време TGF-β също е важен за развитието на хуморалния отговор: той превключва биосинтезата на имуноглобулини към IgA изотипа. Стимулира ангиогенезата. Плазмените нива на TGF-β положително корелират с туморната васкуларизация.

Тромбоцитен растежен фактор (PDGF)

PDGF е един от потенциалните митогенни полипептиди, открити в човешката кръв. Състои се от две вериги: А и В, свързани в АА-, ВВ- и АВ изоформи. Тези три изоформи се различават както по функционални свойства, така и по начин на секреция. Докато АА и АВ формите бързо се секретират от продуцентската клетка, ВВ формата остава главно свързана с продуциращата клетка. Само димерни форми на PDGF могат да се свързват с рецепторите. Идентифицирани са два различни типа рецептори. α рецепторът свързва или А, или В полипептид, докато β рецепторът свързва само В полипептид. Целият спектър от биологични ефекти се дължи на тези три PDGF молекули и два рецептора, тяхната диференциална експресия и сложни вътреклетъчни механизми, регулиращи тяхната активност. Източникът на PDGF в серума са тромбоцитните α-гранули, въпреки че макрофагите и ендотелните клетки също могат да произвеждат този фактор. На определени етапи клетките на плацентата и гладкомускулните клетки на аортата на новороденото също служат като източник на PDGF.

Изоформата АА се секретира предимно от фибробласти, съдови гладкомускулни клетки, остеобласти, астроцити, COLO (карцином на дебелото черво) и WLM (тумор на Wilm) клетки. Синтезът на ВВ е свързан с макрофаги, островни клетки на Лангерханс, неангиогенен епител и SW (тиреоиден карцином) клетъчна линия. Клетките, които произвеждат и двете вериги (А и В), включват неврони, бъбречни мезангиални клетки, клетъчни линии на глиома и мезотелиом и тромбоцити. Първоначалните данни предполагат, че човешките тромбоцити съдържат приблизително 70% PDGF-AB и 30% -BB. Въпреки това, по-нови проучвания показват, че може да присъства до 70% PDGF-AA, а по-ранните открития са артефакт. Типът на секретирания PDGF димер(и) зависи от произведената иРНК и може също да бъде повлиян от ефективността на транслацията, секрецията и вътреклетъчното разграждане.

Структурната идентичност на B веригата и c-sis протоонкогена предполага, че PDGF може да играе роля в индуцираната от вирус злокачествена трансформация на инфектирани клетки. PDGF участва в регулирането на острото възпаление, заздравяването на рани и образуването на белези. PDGF, освободен от алвеоларните макрофаги, участва в развитието на белодробна фиброза. Установено е също, че PDGF е свързан с развитието на атеросклероза, гломерулонефрит, миелофиброза и образуване на келоиди. Подобно на EGF, PDGF индуцира експресията на протоонкогени като fos, myc и jun. PDGF също присъства повсеместно в невроните на ЦНС, където се смята, че играе важна роля в клетъчното оцеляване и регенерация, като медиира пролиферацията и диференциацията на глиални клетки

Плацентарен растежен фактор (PlGF)

PlGF - гликопротеин с м.м. 46-50 kDa, принадлежащи към семейството на VEGF (42% хомология с VEGF). PlGF също е хомоложен, макар и по-отдалечен, на семейството на PDGF растежни фактори. Има две изоформи на PlGF: -1 и -2, различаващи се по наличието на хепарин-свързващ домен в PlGF-2. PlGF медиира пролиферацията на екстравилозен трофобласт. Както подсказва името му, PlGF е идентифициран за първи път при нормални условия в човешката плацента. Той се експресира в други тъкани като капиляри и ендотелиум на пъпната вена, костен мозък, матка, NK клетки и кератиноцити. PlGF също се повишава при различни патологични състояния, включително заздравяване на рани и образуване на тумори. В сравнение с VEGF, ролята на PlGF в неоваскуларизацията е по-малко ясна. Той може да увеличи продължителността на живота, растежа и миграцията на ендотелните клетки in vitro и да насърчи съдовото образуване в някои in vivo модели. Активността на PlGF може да възникне чрез директно взаимодействие на фактора с VEGFR1. Предполага се, че VEGFR1 действа като резервоар за VEGF и че PlGF се свързва с рецептора, измествайки VEGF, освобождавайки го, за да активира VEGFR2. PlGF може синергично да подобри VEGF-индуцираната ангиогенеза и съдовата пропускливост. Концентрацията на PlGF нараства 4 пъти от края на първия до края на втория триместър на физиологичната бременност.

Хепатоцитен растежен фактор (HGF)

HGF, наричан още фактор на разсейване (SF), се състои от две субединици, свързани чрез дисулфидна връзка: α (69 kDa) и β (34 kDa). HGF е многофункционален цитокин, който действа като митоген, което е свързано с неговата функция в органогенезата и възстановяването на тъканите. Той има способността да стимулира образуването на кръвоносни съдове и клетъчната пролиферация, което предполага участието му в злокачествен растеж и метастази в белите дробове, гърдата, панкреаса, аденокарцином, мултиплен миелом и хепатоцелуларен карцином. В туморните клетки на рак на гърдата, HGF индуцира силно bcl-x експресия и по този начин инхибира апоптозата. HGF се произвежда непрекъснато от стромални клетки костен мозъки стимулира хемопоезата.

ангиогенин (ANG)

ANG е едноверижен негликозилиран полипептид с m.m. 14 kDa, който принадлежи към семейството рибонуклеази RISBASE (рибонуклеази със специални биологични функции). Молекулите от това семейство проявяват не само рибонуклеазна активност, но имат и специални биологични ефекти. ANG има 35% идентичност на последователността с панкреатичната рибонуклеаза. Доказано е, че на ниво аминокиселини, човешкият ангиогенин е 75% идентичен с миши ANG и „работи“ в миши системи. ANG се експресира от ендотелни клетки, гладкомускулни клетки, фибробласти, колонен чревен епител, лимфоцити, първични аденокарциномни клетки и някои туморни клетъчни линии. Ангиогениновият рецептор е неизвестен. Смята се, че актинът, като рецептор или свързваща молекула, е необходим за действията на ангиогенина.

Функционално АНГ най-често се свързва с процеса на ангиогенеза. Смята се, че първоначално се свързва с актин, последвано от дисоциация на комплекса актин-ANG, последвано от активиране на тъканния плазминогенен активатор. В резултат на това се образува плазмин, който насърчава разграждането на компонентите на базалната мембрана като ламинин и фибронектин. Разрушаването на базалната мембрана е необходимо предварително условие за миграцията на ендотелните клетки по време на неоваскуларизацията. Въпреки че ANG изглежда действа предимно екстраваскуларно или периваскуларно, циркулиращият ANG е открит в нормален серум при концентрации от порядъка на ng/mL. При патологични процеси са открити повишени нива на ANG при пациенти, страдащи от рак на панкреаса и артериална оклузия.

Ангиопоетини-1 и -2 (Ang)

Ang-1 и -2 са гликопротеини, принадлежащи към семейството на растежни фактори, които регулират развитието на съдовата тъкан. Ang-1 се състои от 498 аминокиселинни остатъка, Ang-2 - от 467. АК последователностите на Ang-1 и -2 са 60% идентични. И двата Angs взаимодействат с рецептора тирозин киназа-2 (Tie-2), който присъства предимно в ендотелните клетки. Има обаче поне три алтернативни варианта на снаждане на Ang-1, като две алтернативни форми не успяват да активират Tie-2. По този начин те действат като ендогенни супресори на основната активна форма на Ang-1. В допълнение, Ang-1 и -2 действат като конкуренти за взаимодействие с рецептора Tie-2, така че Ang-2, в зависимост от типа клетка, действа или като супресор, или като активатор на рецептора Tie-2.

Ang-1 и -2 са силно експресирани в ембриона по време на бързото развитие на съдовата тъкан. Изтриването на гена Ang-1 води до летални последици в ембриона поради сериозни дефекти в развитието на сърцето и кръвоносните съдове. Въпреки че Ang-2 не играе толкова важна роля, колкото Ang-1 при формирането на съдовата система на ембриона, в негова липса васкуларизацията също е нарушена, което причинява ранна смърт. При възрастния организъм Ang-1 се синтезира предимно от ендотелни клетки, мегакариоцити и тромбоцити, а Ang-2 се експресира локално: от яйчниците, матката и плацентата. Ang-1 регулира развитието и ремоделирането на кръвоносните съдове и увеличава оцеляването на ендотелните клетки. Оцеляването на ендотелните клетки по време на взаимодействието на Ang-1 с Tie-2 включва механизма PI3K/AKT, а клетъчната миграция по време на същото взаимодействие (лиганд/рецептор) се осъществява с участието на няколко кинази (PI3K, PAK, FAK). Обратно, Ang-2, действайки самостоятелно, инициира смърт на ендотелни клетки и съдова регресия, въпреки че синергично с VEGF може да насърчи образуването на нови съдове. Ако Ang-1 действа синергично с VEGF, неговото свръхпроизводство води до повишена тъканна васкуларизация. По този начин Ang-1 и -2, като правило, действат като антагонисти, които съвместно регулират съдовия растеж.

Действието на ангиопоетините не се ограничава до съдовия ендотел на кръвния поток - те могат да участват в образуването на съдовете на лимфоидната система. Ang-1 има и други биологични ефекти, например, подобрява адхезията и миграцията на неутрофили и еозинофили и регулира пропускливостта на съдовата стена. Ang-1 може също да индуцира растежа и оцеляването на нервните клетки и да регулира организацията на дендритните клетки. Повишените нива на Ang-1 и -2 засилват ангиогенезата на злокачествените заболявания. Високите концентрации на циркулиращия Ang-1 са свързани с хипертония и ракови патологии.

Пигментен епителен фактор (PEDF)

PEDF (mw 50 kDa, принадлежи към семейството на серпин) за първи път е идентифициран като фактор, секретиран от епителните клетки на ретината и насърчаващ оцеляването на невроните in vitro и in vivo. От друга страна е доказано, че PEDF има свойството да индуцира апоптоза на капилярни ендотелни клетки, като по този начин поддържа аваскуларния характер на ретината. При много офталмологични заболявания, характеризиращи се с дисрегулация на инервацията на ретината и микроваскулатурата, PEDF е важен регулатор при очни заболявания. Освен това е доказано, че PEDF има многофункционална антитуморна активност при експериментален невробластом, тъй като PEDF, произведен от Schwann клетки, индуцира диференциран, по-малко злокачествен фенотип в клетките на невробластома, насърчава по-нататъшния растеж и оцеляването на Schwann клетки и инхибира ангиогенезата.

Азотен оксид (NO)

Биологичните ефекти на NO са широко признати след идентифицирането му като ендотелиум-зависим релаксиращ фактор (EDRF), отговорен за неговите мощни вазодилататорни свойства. Оттогава NO е идентифициран като плейотропен биологичен медиатор, който регулира различни функции: от нервната дейност към регулирането на имунната система. Това е свободен радикал с кратък in vivo полуживот от около няколко секунди. В тази връзка нивото на по-стабилни NO метаболити, нитрити (NO 2-) и нитрати (NO 3-) се използва за индиректно определяне на NO в биологични течности. Примерите включват променени нива, свързани със сепсис, репродукция, инфекции, хипертония, физическа дейност, диабет тип 2, хипоксия и рак.

NO се образува при окисление на L-аргинин с участието на NADPH. Окисляването се извършва с участието на една от трите изоформи на ензими от семейството на NO синтаза (NOS) с образуването на цитрулин. Членовете на семейството NOS включват невронни (nNOS/NOS1), ендотелни (eNOS/NOS3) и индуцируеми (iNOS/NOS2) NO синтази. Както подсказва името му, nNOS се експресира в изобилие от неврони на CNS и PNS и също се намира в клетки на други тъкани, включително миоцити на скелетните мускули, белодробни епителни клетки и кожни мастоцити; eNOS се експресира от ендотела и може също да бъде открит в неврони, кожни фибробласти, кератиноцити и фоликуларни клетки щитовидната жлеза, хепатоцити и гладкомускулни клетки. iNOS се експресира в различни тъкани, включително хондроцити, епителни клетки, хепатоцити, глиална тъкан и различни видове клетки на имунната система. Като цяло експресията на eNOS и nNOS се осъществява непрекъснато и се регулира от Ca2+-зависим калмодулин, докато синтезът на iNOS се индуцира от ендотоксин и възпалителни цитокини и е относително нечувствителен към Ca2+.

Поради факта, че NO е разтворим в липиди, той не се съхранява, а се синтезира de novo и дифундира свободно през мембраните. Ефектите на NO върху прицелните клетки се медиират чрез различни механизми. Например, NO-медиирано активиране на ензима гуанилил циклаза (GC) катализира образуването на втория посредник 3',5'-цикличен гуанозин монофосфат (cGMP). cGMP участва в редица биологични функции, като регулиране на свиването на гладката мускулатура, живота на клетката, пролиферация, аксонална функция, синаптична пластичност, възпаление, ангиогенеза и активност на цикличен нуклеотиден канал. NO също е противотуморен и антимикробен агент чрез механизми на превръщане в пероксинитрит (ONOO-), образуване на S-нитрозотиоли и намаляване на запасите от аргинин. Друга предполагаема роля на NO е инхибирането на митохондриалното дишане чрез инхибиране на цитохромоксидазата. NO може също да модифицира протеиновата активност чрез пост-транслационно нитрозилиране чрез прикрепване чрез тиоловата група от цистеинови остатъци.

Матриксни металопротеинази (ММР)

Човешките ММР са семейство ензими, разграждащи матрицата. ММР имат способността да разграждат почти всички компоненти на извънклетъчния матрикс, намиращ се в съединителната тъкан (колаген, фибронектин, ламинин, протеогликани и др.). В допълнение към приликите на ниво аминокиселинна последователност, всички ММР се образуват от неактивни прекурсори, които се превръщат в активни субстрат-разграждащи протеинази под въздействието на извънклетъчни фактори. Източниците на образуване на MMP са фибробласти, макрофаги, гладкомускулни клетки на съдовата стена и неутрофили. Всеки тумор е мощен индуктор на образуването на ММР в стромалните клетки. Докато насърчават инвазията на туморния растеж и метастазите, MMPs са в същото време мощни стимулатори на неоангиогенезата. Като потенциални противотуморни средства се използват ендогенни и синтетични ММР инхибитори, чиято основна цел е да потискат неоангиогенезата.

ендостатин

Биологично активен С-терминален фрагмент на колаген VIII с m.m. 20 kDa. Принадлежи към семейството на колагеноподобните протеини. За да се избегне прекомерен съдов растеж при нормални условия, процесите на образуване на нови и ремоделиране на оригинални съдове се контролират от подходящи растежни фактори. По време на туморната ангиогенеза се наблюдава проникване на кръвоносни съдове в нарастващата туморна маса. Ендостатинът специфично инхибира пролиферацията на ендотелните клетки. Съответно, той инхибира ангиогенезата и туморния растеж. Терапията с ендостатин в момента преминава фаза 1 на клинични изпитвания.

Други диагностично значими растежни фактори

Фактор на стволови клетки (SCF)

Производители на SCF са стромалните клетки на костния мозък, фибробластите, ендотелните клетки и клетките на Сертоли. Неговите основни таргетни клетки са хематопоетични стволови клетки, ранно ангажирани прекурсори на клетки от различни хематопоетични линии и мастни клетки. SCF активира диференциацията на мултипотентни прогениторни клетки синергично с IL-3, GM-CSF и IL-7 и еритропоетин. Той участва в поддържането на пролиферацията на най-младите форми на Т-лимфоцитните прекурсори в тимуса. По отношение на мастните клетки, той е основен растежен фактор и хемотаксичен агент.

SCF има важно клинично значение като индуктор на диференциация на лимфоцитни и еритроцитни прекурсори. Определянето на SCF представлява значителен интерес при лечението на миелодиспластичен синдром и след трансплантация на костен мозък.

Инхибиторен фактор на левкемични клетки (LIF)

LIF усилва пролиферацията на прекурсори на хемопоетични клетки. Доказано е, че LIF причинява развитието на синдром на кахексия при пациенти с рак. LIF рецепторният компонент gp130 (CD130) е част от рецепторите за IL-6 и -11.

Мозъчен невротрофичен фактор (BDNF)

Заедно с този фактор семейството включва нервен растежен фактор, невротрофини-3 и -4. BDNF стимулира растежа на нервната тъкан, главно на холинергичните неврони в мозъка. Доказано е, че BDNF влияе върху растежа, метаболизма и вътрешната структура на тези клетки. Основната цел на невротропните фактори е да предпазват невроните от апоптоза.

UDC 616-006

РАСТЕЖЕН ФАКТОР НА СЪДОВИЯ ЕНДОТЕЛ – КЛИНИЧНО ЗНАЧИМ ПОКАЗАТЕЛ ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕН НЕОФОЛИЗЪМ

© E.S. Герщейн, Д.Н. Кушлински, Л.В. Адамян, Н.А. Огнерубов

Ключови думи: VEGF; VEGF-R; ангиогенеза; тумори; прогноза.

Представени са резултатите от нашите собствени изследвания и най-значимите литературни данни, показващи, че ключовият положителен регулатор на неоангиогенезата, васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF), е клинично значим прогностичен фактор при различни видове рак, както и цел на съвременните целеви лекарства с различен механизъм на действие. Ролята му като серологичен маркер за диагностика и мониторинг изисква допълнително проучване.

Общи идеи за регулацията на ангиогенезата.

Ангиогенезата е процес на разклоняване на нови капилярни процеси от вече съществуващи кръвоносни съдове. Този сложен процес включва най-малко четири етапа: протеолитично разрушаване на васкуларната базална мембрана и извънклетъчния матрикс, миграция и прикрепване на ендотелни клетки, тяхната пролиферация и накрая образуването на тубулни структури.

Понастоящем се обръща много внимание на проблема с неоангиогенезата при злокачествени тумори, тъй като вече няма съмнение, че туморът не може да се развие и расте без образуването на обширна мрежа от съдове в него, осигуряваща снабдяването на клетките с кислород и хранителни вещества . Интересът към този проблем възникна преди повече от 30 години, но до сравнително наскоро основната характеристика на активността на неоангиогенезата в туморите беше микроскопска оценка на плътността на кръвоносните съдове в туморната тъкан (микроваскуларна плътност). И то сравнително наскоро, в резултат на учене молекулярни механизмиАнгиогенезата, която се развива интензивно през последните 10-15 години, демонстрира наличието на редица регулаторни ангиогенни и антиангиогенни фактори, чийто динамичен баланс осигурява образуването и пролиферацията на нови съдове в тумора.

Много известни растежни фактори и цитокини участват в регулирането на ангиогенезата по един или друг начин, като основни и киселинни фибробластни растежни фактори (oFGF и cFGF), епидермален растежен фактор (EGF), α- и P-трансформиращи растежни фактори (TGF ), произхождащ от тромбоцитите ендотелен клетъчен растежен фактор/тимидин фосфорилаза, фактор на туморна некроза, интерлевкини и т.н. Въпреки това, най-важният положителен регулатор на ангиогенезата несъмнено е съдовият ендотелен растежен фактор (VEGF), наричан още фактор на съдовия пермеабилитет. Уникалността на този протеин се крие във факта, че за разлика от всички други растежни фактори, той е митогенен само по отношение на ендотелните клетки, въпреки че последните данни показват, че автокринните

ефектът на VEGF върху туморните клетки, които го произвеждат.

VEGF е хомодимерен, силно гликозилиран протеин с мол. с тегло 46-48 ^a, съществуващи в най-малко пет изоформи с подобна биологична активност, но значително различни в бионаличността. Бионаличността на VEGF до голяма степен се определя от размера на молекулата и се регулира на генетично ниво по време на алтернативен сплайсинг на иРНК, както и епигеномно по време на протеолитичното разцепване на синтезираните молекули с участието на системата за активиране на плазминогена. Ключов регулатор на растежа на кръвоносните съдове е VEGF A, докато VEGF C основно регулира лимфангиогенезата. Основните разтворими форми на VEGF A са молекули с размери 121 и 165 аминокиселинни остатъка и те също са основните биологично активни форми на VEGF. В тъканите се смята, че основната изоформа на VEGF е VEGF-165.

На повърхността на ендотелните клетки има 3 рецептора за VEGF, които са типични рецепторни тирозин кинази. VEGF рецептор тип 1 (VEGFR1) е продукт на гена flt-1, рецептор тип 2 (VEGFR2) се нарича KDR и е човешкият хомолог на мишия генен продукт flk-1 и накрая рецептор тип 3 (VEGFR3) е продукт на гена flt-4. За разлика от VEGFR1 и 2, той взаимодейства не с класическия VEGF (VEGF A), а с неговия хомолог -VEGF C. Всички рецептори са трансмембранни гликопротеини с мол. с тегло 170235 ^a. Ефективното свързване на VEGF към рецепторите изисква неговото взаимодействие с хепарин-подобни компоненти на екстрацелуларния матрикс.

В допълнение към митоген-активираната протеин киназна каскада, обща за повечето рецепторни кинази, която регулира експресията на гени, свързани с пролиферацията, най-важните гени, регулирани от VEGF в ендотелните клетки, включват c-ets-1 протоонкогена, който кодира транскрипционен фактор Ets-1. Проучвания, използващи in situ хибридизация, показват, че c-ets-1 се експресира в ендотелни клетки по време на ранните етапи на образуване на кръв.

венозни съдове. Неговият продукт Ets-1 насърчава проявата на ангиогенния фенотип на тези клетки, активирайки генната транскрипция и последващия протеинов синтез на най-важните протеази, които разграждат извънклетъчния матрикс (ECM), - плазминогенен активатор от урокиназа, стромелизин, колагеназа 1, ММР-1, 3 и 9, както и р2-интегрин. Тези ефекти достигат максимум 2 часа след добавянето на VEGF (както и други ангиогенни фактори - cFGF, oFGF и EGF) и се инхибират от антисенс олигонуклеотиди към ets-1. Активирането на протеазите има три важни последици за стимулиране на ангиогенезата: улеснява разпадането на ендотелните клетки и тяхната инвазия в базалния слой на кръвоносните съдове, генерира продукти на разграждане на ECM, които насърчават хемотаксиса на ендотелните клетки, и също така активира и мобилизира растежни фактори, разположени в ECM.

Ролята на VEGF в регулирането на ангиогенезата при рак на гърдата. Първото доказателство за връзката между експресията на VEGF и активността на ангиогенезата при тумори на гърдата е получено от клиничен материал и публикувано през 1994-1995 г. група японски изследователи. В първото проучване, проведено чрез имунохистохимия и включващо 103 пациенти с рак на гърдата, те показаха, че плътността на микросъдовете и техния растеж, определени чрез имунохимично оцветяване за антиген на фактор VIII, са значително по-високи при тумори с интензивно оцветяване за VEGF, отколкото при тумори със слабо оцветяване . VEGF е локализиран предимно в цитоплазмата на туморните клетки. Впоследствие те разшириха изследваната група пациенти до 328 души и, след като потвърдиха горните модели, също показаха, че експресията на VEGF корелира с експресията на друг ангиогенен фактор - тромбоцитен растежен фактор на ендотелни клетки. По-късно тези автори проведоха количествен ензимно-свързан имуносорбентен анализ на съдържанието на VEGF в първичните тъкани на рак на гърдата и показаха, че концентрацията на VEGF в силно васкуларизирани тумори е значително по-висока, отколкото в слабо васкуларизирани. Въпреки това, не е открита връзка между тъканните нива на VEGF и два други потенциално ангиогенни фактора - oFGF и хепатоцитен растежен фактор. Концентрациите на тези два фактора също не корелират с параметрите на плътността на микросъдовете.

Получиха се и интересни данни. Използвайки имунохистохимичен метод, те сравняват експресията на VEGF, неговия рецептор flt-1, също oFGF и α- и P-TGF при рак на гърдата и околната нормална тъкан на гърдата. Оказа се, че от всички изследвани параметри, само експресията на VEGF е значително повишена в туморните клетки в сравнение с нормалните. Увеличаване на експресията на VEGF в тъкан от рак на гърдата в сравнение с нетуморна тъкан на гърдата също е демонстрирано чрез методи на РНК хибридизация. Всички тези проучвания предоставят първите доказателства за важната роля на VEGF в неоангиогенезата при рак на гърдата и значението му за туморния растеж. За да се докаже по-директно тази хипотеза, бяха необходими експериментални изследвания, за да се потвърди ефектът на VEGF, произведен от клетките на рак на гърдата, върху ангиогенезата. Едно от първите такива доказателства може да се счита за работата

H. Zhang et al. , в който генът VEGF-121 е трансфектиран в естроген-

зависима клетъчна линия от рак на гърдата MCF-7. Експресията и секрецията на VEGF от трансфектирани клетки (V12) се потвърждава от три независими метода: конкурентен радиорецепторен анализ,

стимулиране на растежа на човешки ендотелни клетки in vitro и активиране на ангиогенезата в роговицата на заек. Когато се трансплантират в голи мишки, клонираните V12 клетки произвеждат повече васкуларизирани тумори с по-хетерогенно разпределение на кръвоносните съдове, отколкото родителските MCF-7 клетки. Скоростта на растеж на тумори, възникващи от V12 клетки, е по-висока от тази на тумори от оригиналната клетъчна линия, докато хормоналната зависимост на клетките и тяхната чувствителност към тамоксифен са запазени. По този начин е показано, че раковите клетки на гърдата, които постоянно произвеждат VEGF, имат определени предимства в растежа.

Друго доказателство за влиянието на VEGF върху растежа и метастазите на рака на гърдата са експериментите с антитела срещу този фактор. Така при експерименти върху мишки със спонтанен рак на гърдата, характеризиращ се с висока честота на метастази в белите дробове, беше показано, че поликлоналните антитела срещу VEGF инхибират растежа на тумора с 44% и намаляват броя и размера на белодробните метастази със 73 и 84% , съответно.

Интересен модел за тестване на ангиогенния потенциал на различни гръдни тъкани in vivo е разработен от H. Lichtenbeld et al. . Те поставят парчета тумор и нормална тъкан на млечната жлеза в камера, образувана от дорзалната кожна гънка на голи мишки и оценяват индукцията на ангиогенеза. Установено е, че всички проби от рак на гърдата, както и тъкан на гърдата с хиперплазия и апокринна метаплазия значително активират ангиогенезата. Хистологично непроменени участъци от гръдна тъкан от пациенти с рак на гърдата стимулират ангиогенезата в 66% от случаите, а тъкан от здрава жлеза, получена от козметични операции, не повлияват ангиогенезата. Във всички случаи, индукцията на ангиогенеза настъпва успоредно с производството на VEGF от туморни или клетки на гърдата.

Класическият модел на регулиране на ангиогенезата при рак на гърдата (както при всеки друг тумор) предвижда наличието на паракринна система, в която растежният фактор (VEGF) се произвежда от туморни клетки, а неговите рецептори, които възприемат сигнала, са разположени върху съдовия ендотелен клетки. Съществуването на такава паракринна система при рак на гърдата е добре илюстрирано от данните на L. Brown et al. , който изследва тъканни проби от 68 пациенти с рак на гърдата, използвайки РНК in situ хибридизация и показа, че в клетките на инвазивен, метастатичен и интрадуктален карцином на гърдата има изразена експресия на VEGF, а във васкуларните ендотелни клетки, проникващи в тези тумори, има изразен експресия на VEGFR1 и VEGFR2. Получени са подобни данни

A. Kranz и др. , обаче, тези автори също откриха VEGFR2 върху млечните дуктални епителни клетки. Има други доказателства, че раковите клетки на гърдата съдържат VEGF рецептори и нивото на експресия на VEGF и VEGFR2 корелира с индекса на пролиферация на туморни клетки, определен от експресията на Ki-67 антигена. Доказано е, че както туморните, така и стромалните клетки, изолирани от първичен карцином на гърдата при хора, произвеждат VEGF in vitro и неговите нива

производството е значително по-високо от това на съответните клетки, изолирани от нормални млечни жлези. При което PCR методанализът показа, че VEGFR2 преобладава в туморните клетки и само VEGFR1 се експресира в стромални клетки. Така освен пряката си функция - стимулиране на неангиогенезата, VEGF при рак на гърдата може да играе и ролята на авто/паракринен регулатор на туморна и/или стромална клетъчна пролиферация.

Предполага се, че VEGF може да играе и друга роля при рака на гърдата: чрез flt-1 рецепторите той стимулира миграцията на макрофаги в туморната тъкан, които от своя страна са стимулатори на анионогенезата, тъй като синтезират различни ангиогенни фактори, вкл. и самият VEGF. По-специално, R. Leek et al. , като изследва тъканни проби от 96 пациенти с рак на гърдата, демонстрира положителна корелация между индекса на инфилтрация на туморна тъкан от макрофаги и нивото на експресия на VEGF.

Секрецията на VEGF от раковите клетки на гърдата се индуцира от различни външни и вътрешни фактори. П. Скот и др. , изучавайки влиянието на хипоксията, хипогликемията, киселинността, женските полови стероидни хормони и витамин D върху експресията на 4-те основни VEGF изоформи от култивирани клетки от рак на гърдата с различни биологични фенотипове, показа, че тези клетки се различават значително както в базалната експресия на VEGF иРНК и в неговата чувствителност към различни стимули. В същото време се оказа, че хипоксията е най-мощният VEGF-индуциращ стимул за всички типове клетки, а стероидните хормони практически нямат ефект върху експресията на VEGF. R. Bos и др. показват, че в стимулирането на неоангиогенезата под влияние на хипоксия, важна роля играе HIF-1, транскрипционен фактор, индуциран при условия на хипоксия, чието високо ниво в тъканта на рак на гърдата корелира с висок индекс на пролиферация, повишена експресия на VEGF и естрогенни рецептори (ER). Експресията на HIF-1 и VEGF в клетките на рак на гърдата не е свързана с нивото на експресия на индуктора на апоптоза р53. В същото време инхибиторът на апоптозата bcl-2 засилва стимулиращия ефект на хипоксията върху синтеза на VEGF в клетките на рака на гърдата. Хибридизационният анализ показа, че MCF-7 клетъчни клонове, свръхекспресиращи bcl-2 и имащи повишен метастатичен потенциал и резистентност към адриамицин, имат по-високо ниво на експресия на иРНК на най-ангиогенните VEGF изоформи - VEGF-121 и VEGF-165 - отколкото оригиналния MCF-клон 7. При in vivo експерименти, bcl-2-трансфектирани клетки образуват тумори с по-висока степен на васкуларизация и по-висока експресия на VEGF, отколкото родителските клетки.

От друга страна, доказано е, че VEGF, който е фактор за оцеляване на ендотелните клетки, не само стимулира тяхната пролиферация, но също така потиска апоптозата чрез индуциране на експресията на bcl-2. Интересното е, че VEGF имаше подобно действиеи върху клетките на рак на гърдата, т.е. това е антиапоптотичен фактор не само за ендотелните клетки, но и за самите туморни клетки.

Различни растежни фактори и сигнални системи участват в регулирането на експресията на VEGF в клетките на рака на гърдата. По-специално, няколко проучвания демонстрират важната роля на erbB семейството на рецепторни тирозин кинази и някои от техните лиганди. Така L. Yen et al. чрез изследване на панел от клетъчни линии

Ракът на гърдата със стабилна свръхекспресия на свободния от лиганд „рецептор за управление“ erbB-2 показа, че heregulin-P1, взаимодействайки с рецепторите erbB-3 и erbB-4, индуцира секреция на VEGF в повечето от изследваните клетъчни линии на рак на гърдата, но не в нормалните клетки на гърдата жлези. Базалната секреция на VEGF е повишена в клетки с повишени нива на erbB-2, а в T47D клетки с функционално инактивиран erbB-2, не само базалната секреция на VEGF е намалена, но също и неговата индукция от херегулин. Впоследствие беше показано, че ефектът на херегулин върху синтеза на VEGF включва един от класическите сигнални пътища, включващи фосфатидилинозитол 3-киназа и протеин киназа B (Akt), последвани от индукция на транскрипционния фактор HIF-1, който стимулира експресията на VEGF гена.

Регулаторите на експресията на VEGF в клетките на рака на гърдата очевидно също са някои растежни фактори от семейството на TGF-β. Концентрациите на TGF-P1 и VEGF в тумори и кръвен серум на пациенти с рак на гърдата корелират положително помежду си и в in vitro експерименти TGF-P1 индуцира производството на VEGF от култивирани MDA-MB-231 клетки. Друго проучване показа, че едновременната висока експресия на TGF-β2 и неговите рецептори е характерна за тумори с висока плътност на микросъдове.

Досега въпросът за хормоналната регулация на синтеза на VEGF в клетките на рак на гърдата от полови стероиди, особено естрогени, остава спорен. Въпреки че индукцията на VEGF-медиирана ангиогенеза в ендометриума от естроген е почти сигурна, съществуването на подобен механизъм при рак на гърдата не е ясно демонстрирано. J. Rujhola и др. използвайки MCF-7 клетъчна култура показа, че 17P-естрадиол (Е2) причинява двуфазно повишаване на синтеза на VEGF иРНК, придружено от натрупване на съответния протеин в културалната среда. Този ефект е блокиран от чистия антиестроген ICI 182.780, което предполага участието на ER в неговото прилагане. В същото време такива класически антиестрогени като тамоксифен и торемифен, които имат частичен естрогенен ефект, не само не инхибират VEGF-индуциращия ефект на Е2, но също така сами индуцират VEGF синтеза. Участието на RE в регулацията на синтеза на VEGF в клетките на рака на гърдата се потвърждава и от молекулярно-биологични изследвания от S. Hyder et al. който демонстрира, че VEGF генът съдържа две последователности, които са хомоложни на класическите естроген-чувствителни елементи и специфично свързват двете форми на ER - ER-a и ER-r.

Обаче естеството на действието на естрогените и антиестрогените върху синтеза на VEGF изглежда зависи от вида на раковите клетки на гърдата. Така J. Kurebayashi et al. описват клетъчната линия на човешкия рак на гърдата KPL-1, чийто растеж е стимулиран от ICI 182.780 и потиснат от Е2 in vivo. В същото време Е2-пропионатът потиска ангиогенезата и стимулира апоптозата в тумори, образувани от KPL-1 клетки. In vitro, Е2 не повлиява нито синтеза на VEGF, нито скоростта на клетъчна пролиферация. Интересно е, че експресията на VEGF в KPL-1 клетки се индуцира от медроксипрогестерон ацетат.

Индуциращият ефект на прогестините върху синтеза на VEGF от ракови клетки на гърдата също е отбелязан от S. Hyder et al. . Изследвайки клетъчната линия T47-D, те откриха

дали прогестеронът дозозависимо повишава нивото на VEGF в културалната среда с 3-4 пъти максимален ефектпри концентрация от 10 nM. В същото време други стероидни хормони (естрогени, андрогени и глюкокортикоиди) не повлияват производството на VEGF, а ефектът на прогестините не се проявява в други клетъчни линии на рак на гърдата - хормонално зависими MCF-7, ZR-75 и хормон -независим MDA-MB^L Ефектът на прогестерона върху T47-клетки D е блокиран от антипрогестина RU-486, което предполага участието на класически рецепторен механизъм. Интересното е, че според K. Heer et al. , нивото на VEGF в кръвния серум на жените е значително намалено в лутеалната фаза на менструалния цикъл и е в обратна зависимоствърху нивото на прогестерона в кръвния серум. Серумът, получен през този период, стимулира производството на VEGF от MCF-7 клетки в по-малка степен от серума, получен в първата фаза на менструалния цикъл.

Интересни модели по отношение на хормоналната регулация на ангиогенезата в млечната жлеза са демонстрирани от R. Greb et al. . След като са изследвали експресията на основните изоформи на VEGF-A с помощта на PCR анализ в тумори и заобикалящата непроменена тъкан на гърдата на 19 пациенти с рак на гърдата, те откриват, че нивата на експресия на VEGF в непроменената жлеза са значително по-високи при пациенти в пременопауза, отколкото при постменопауза пациенти и значително намалява с увеличаване на възрастта на пациентите. В същото време експресията на VEGF в туморната тъкан не зависи от възрастта и менопаузалния статус на пациентите. Авторите смятат, че в нормалните млечни жлези ангиогенезата е под хормонален контрол, но при злокачествена трансформация този контрол се губи.

В допълнение към най-известния и широко разпространен ангиогенен фактор VEGF-A, описан по-горе, има още няколко члена на семейството на VEGF - VEGF-B, C и D. Функцията на VEGF-C е най-ясно дефинирана към днешна дата: Смята се, че той стимулира лимфангиогенезата чрез взаимодействие с рецепторите VEGF тип 3 (flt-4), разположени върху ендотелните клетки на лимфните съдове. Експериментални проучвания върху голи мишки, използващи нов лимфен ендотелен маркер LYVE-1, показаха, че свръхекспресията на VEGF-C в клетките на рак на гърдата значително подобрява интратуморната лимфангиогенеза и стимулира образуването на метастази в регионалните лимфни възли и белите дробове. Преди това J. Kurebayashi et al. с помощта на PCR анализ показа, че за разлика от VEGF-A и B, които присъстват в тъканта на рака на гърдата, независимо от неговия стадий, VEGF-C се открива само в тумори, които са метастазирали в лимфните възли, а VEGF-D се открива само при възпалителни рак на гърдата. От друга страна, според R. Valtola et al. Експресията на VEGF-C рецептор наистина е повишена при инвазивни и интрадуктални карциноми на гърдата в сравнение с нормална гърда и фиброаденоми, но повишена експресия на тип 3 VEGF рецептори се наблюдава върху ендотелните клетки на кръвоносните съдове, а не върху лимфните съдове. В тази връзка авторите смятат, че VEGF-C, подобно на VEGF-A, е ангиогенен фактор предимно за кръвоносните съдове, въпреки че не изключват участието му в регулацията на лимфангиогенезата.

Като цяло се обръща внимание на ролята на лимфангиогенезата и регулиращите я лиганд-рецепторни системи в процесите на метастазиране на солидни тумори и по-специално на рак на гърдата. напоследъквсе повече и повече внимание.

По този начин VEGF играе важна и разнообразна роля при рак на гърдата, стимулирайки растежа и разпространението на тумора чрез сложни паракринни и автокринни ефекти както директно върху ендотела на кръвоносните съдове, така и върху туморните клетки и туморната строма, инфилтриращите тумора макрофаги и клетките на лимфните съдове. Всичко това ни позволява да разглеждаме VEGF като многообещаващ биологичен маркер за прогнозата на рака на гърдата и една от основните цели на антиангиогенната антитуморна терапия.

Клинично значение на определянето на VEGF при рак на гърдата. По-горе вече цитирахме редица произведения, в които, въз основа на клиничен материал, различни методи(имунохистохимичен, имуноензимен, хибридизация) демонстрира повишена експресия на VEGF в тъканта на рак на гърдата и връзката му с традиционните показатели, характеризиращи активността на неоангиогенезата в туморната тъкан. Като цяло, според резултатите от анализ на базата данни Medline, изследването на клиничното значение на тъканните нива на VEGF при рак на гърдата е извършено от 14 групи изследователи. Трябва да се отбележи отново, че почти всички изследователи, които са правили подобни сравнения, независимо от използваните методи, отбелязват повишаване на експресията на VEGF в тъканта на рак на гърдата в сравнение със заобикалящата хистологично непроменена тъкан на гърдата, както и с доброкачествени тумори. Също така няма спор по отношение на пряката корелация на нивото на експресия на VEGF с активността на неоангиогенезата в туморната тъкан.

За първи път неблагоприятната прогностична стойност на високата експресия на VEGF при рак на гърдата е отбелязана от M. Toi et al. . След ретроспективен анализ на резултатите от наблюдението на 328 пациенти, в чиито тумори VEGF експресията е оценена чрез имунохистохимичен метод, те показват, че при едномерен анализ прогнозата за преживяемост без рецидив при пациенти с VEGF-позитивни тумори е значително по-лоша, отколкото при пациенти с VEGF-отрицателни тумори. Значението на VEGF за предсказване на преживяемостта без заболяване също беше демонстрирано от M. Relf et al. , който определя експресията на съответната РНК в туморни тъкани на 64 пациенти с рак на гърдата. В същото време, според A. Obermair и др. , нивото на VEGF, измерено чрез ензимен имуноанализ, не е имало значителен ефект върху прогнозата за преживяемост без рецидив на 89 пациенти с рак на гърдата, които са изследвали.

Най-интересните проучвания трябва да бъдат тези, при които прогностичната стойност на VEGF е оценена в различни клинични групи пациенти с рак на гърдата, като се вземе предвид лечението. Резултатите от такъв подробен анализ бяха публикувани от две групи: G. Gasparini et al. и B. Linderholm et al. . В статия от 1997 г. G. Gasparini et al. представи резултатите от количествено ензимно-имуносорбентно определяне на концентрацията на VEGF в цитозолите на тумори на 260 пациенти с рак на гърдата без метастази в лимфните възли. Пациентите са проследявани средно 66 месеца. В същото време VEGF в широк диапазон

зона на концентрация (от 5 до 6523 pg/mg протеин) се открива в 95% от туморите. Нивото му не корелира с известните прогностични фактори: възраст и менопаузен статус на пациентите, хистологичен тип, размер и рецепторен статус на тумора, но се оказва статистически значим предиктор за безрецидивна и обща преживяемост според резултатите от както едновариантен, така и многовариантен анализ. По този начин цитозолното ниво на VEGF е индикатор за прогноза при пациенти с ранен стадий на рак на гърдата, което позволява формирането на група с повишен риск от рецидив и метастази.

В последваща публикация на тази група автори, сравнителна оценкапрогностично значение на VEGF и друг ангиогенен фактор тимидин фосфорилаза (TF - тромбоцитен ендотелен клетъчен растежен фактор) при пациенти с рак на гърдата с метастази в лимфните възли, които са получили химиотерапия съгласно режима на CMP (137 пациенти) или хормонална терапия с тамоксифен (164) пациенти). Цитозолните концентрации на VEGF са сходни и в двете групи. В групата пациенти, получаващи тамоксифен, нивото на VEGF корелира положително с възрастта на пациентите и беше обратно пропорционално на нивото на рецепторите на стероидните хормони. В тази група нивото на VEGF, заедно с броя на засегнатите лимфни възли и концентрациите на ER и RP, е значим независим прогностичен фактор в резултатите от едновариантния и мултивариантния анализ. Най-добри резултати от лечението с тамоксифен трябва да се очакват при пациенти с ниско ниво VEGF в тумора и засягане на по-малко от три лимфни възли в туморния процес. Ниското ниво на VEGF се оказа независим фактор за благоприятна прогноза в групата пациенти, получаващи химиотерапия. В тази група TF също е значим прогностичен фактор, като прогнозата е благоприятна при високи нива на този протеин.

В едно от последните изследвания на О. Оа8рагипии а1. Мултифакторният прогнозен модел за пациенти с ранен стадий на рак на гърдата също включва естествени инхибитори на ангиогенезата - тромбоспондини 1 и 2, но техният принос към прогнозата за безрецидивна и обща преживяемост не е статистически значим.

По този начин, според данните на тази изследователска група, обобщени в няколко обзорни статии, VEGF е най-обещаващият прогностичен индикатор за активността на ангиогенезата при рак на гърдата. Високото му ниво показва

относно неблагоприятната прогноза както за ранен, така и за напреднал рак на гърдата. Сред другите регулатори на ангиогенезата, само TF има известен принос за прогнозата и неговата значимост се проявява само по време на химиотерапия за напреднал рак на гърдата.

Прогностичната стойност на VEGF при ненапреднал рак на гърдата също е изследвана и потвърдена от B. biliary et al. . Те определят чрез ензимен имуноанализ съдържанието на VEGF в цитозолите на тумори на 525 пациенти без метастази в лимфните възли (T1.2K0M0), 500 от които не са получавали следоперативно лечение. Средният период на проследяване е 46 месеца. За разлика от цитираните по-рано изследователи, те откриха пряка корелация между нивото на VEGF и размера на тумора, както и степента на неговата злокачественост и обратна корелация.

промяна на нивата на VEGF и RE. Степента на преживяемост на пациенти с цитозолни концентрации на VEGF под средното ниво (2,4 pg/µg ДНК) е значително по-висока, отколкото при пациенти с по-ниски нива на VEGF. При мултивариантния анализ нивото на VEGF е най-значимият независим прогностичен фактор, превъзхождащ други известни показатели. Значително намаляване на преживяемостта с високо ниво на VEGF в тумора също беше установено в прогностично благоприятната група от ER-позитивни пациенти.

Според същите автори високото ниво на VEGF също има неблагоприятна прогностична стойност, когато пациенти с ранен стадий на рак на гърдата получават локорегинална лъчева терапия. Изследвани са 302 пациенти с медиана на проследяване 56 месеца. VEGF беше единственият независим предиктор за общата преживяемост (относителен риск 3,6) в цялата група, както и преживяемостта без рецидив в най-прогностично благоприятните групи от пациенти с малки тумори (Т1) и ER-положителни тумори. Авторите предполагат, че високите интратуморни нива на VEGF могат да съответстват на радиорезистентен фенотип и да показват необходимостта от допълнително системно лечение.

Б. Линдерхолм и др. също изследва група от 362 пациенти с рак на гърдата с метастази в лимфните възли, 250 от които са получили адювантна хормонална терапия и 112 - адювантна химиотерапия. При едновариантен анализ VEGF се оказа важен предиктор за преживяемост без заболяване и обща преживяемост в цялата популация пациенти, както и в групата, получаваща ендокринна терапия. В групата пациенти, получаващи химиотерапия, нивото на VEGF има ефект само върху общата преживяемост. При мултивариантния анализ VEGF остава значим само за общата преживяемост.

По този начин тази група изследователи демонстрира и прогностичното значение на VEGF за различни клинични групи пациенти с рак на гърдата, което е обобщено в публикация от 2000 г., която включва данни за 83 пациенти с различни стадии на рак на гърдата. Тази работа също демонстрира прогностичната значимост на едновременното изследване на VEGF и мутантния р53. Относителният риск от смърт се увеличава с 2,7 пъти в групата с високо съдържание на VEGF и положителен p53 и само в

1.7 в групи с един от тези неблагоприятни фактори.

В съвместно проучване, включващо общо 495 пациенти от две различни клиники, на базата на данни от едновариантен и мултивариантен анализ, включващ, наред с традиционните показатели, ангиогенин, oFGF и плазминогенни активатори, беше показано, че VEGF е най-важният прогностичен фактор параметър за пациенти с рак на гърдата без метастази в лимфните възли. И наскоро друга група изследователи потвърдиха, че интратуморното ниво на VEGF има допълнителен принос към така наречения Нотингамски прогностичен индекс, използван за формиране на високорискови групи сред пациенти с ранен стадий на рак на гърдата.

Специално място заема изследването на J. Foekens и сътр. [b1], които определят концентрацията на VEGF в консервирани екстракти, използвайки метода на ензимен имуноанализ.

общо 845 пациенти с напреднал рак на гърдата, които са развили рецидив на заболяването. 618 от тези пациенти са получили адювантна постоперативна хормонална терапия с тамоксифен, а 227 пациенти са получили следоперативна химиотерапия. Оказа се, че цитозолната концентрация на VEGF в тумори на пациенти, при които е настъпил рецидив през първата година на наблюдение, е значително по-висока, отколкото при пациенти с по-дълъг безрецидивен период. Беше отбелязано също, че нивото на VEGF в първичния тумор е по-високо при пациенти с първични метастази във вътрешни органи, отколкото при пациенти с метастази в кости и меки тъкани. Високите нива на VEGF, според едновариантния и мултивариантния анализ, се оказват независим индикатор за ниска чувствителност както към тамоксифен, така и към химиотерапия.

Като цяло, 13 от 14 проучвания, публикувани от 8 независими групи изследователи, показват, че високото ниво на VEGF е независим фактор за лошата прогноза на рака на гърдата в ранните стадии и/или неговата ниска чувствителност към традиционните видове хормонална или химиотерапия в напреднал рак на гърдата. В тази връзка беше предложено да се разгледа възможността за включване на различни антиангиогенни лекарства в адювантни схеми на лечение за пациенти с високи интратуморни концентрации на VEGF. Трябва да се отбележи, че все още не са разработени унифицирани методологични подходи и критерии за идентифициране на пациенти с високи нива на VEGF и ще са необходими допълнителни кооперативни проучвания за създаването им.

Успоредно с изследването на клиничното значение на тъканното ниво на VEGF при рак на гърдата, въпросът дали повишената експресия на VEGF в тумора се отразява в нивото на този протеин в серума/плазмата и дали концентрацията на циркулиращия VEGF е изследва се адекватна характеристика на неговото съдържание и ангиогенезната активност в тумора. През 1996-1997г Публикувани са първите проучвания, които показват повишаване на нивото на VEGF в кръвта на пациенти с рак. Така Y. Yamamoto и др. [b2], след като изследва голяма група пациенти и донори, включително 137 пациенти с рак на гърдата, установи, че нивото на VEGF в кръвния серум на 8,8% от пациентите с рак на гърдата надвишава установеното им прагово ниво от 180 pg/ml. Серумното ниво на VEGF корелира със степента на процеса и с нивото на експресия на VEGF в туморната тъкан, а основната изоформа на VEGF в серума е VEGF-^5.

L. Dirix и др. [b3] изследва група от 132 пациенти с метастатичен рак с различни първични диагнози. Те считат, че нивото на VEGF е повишено, ако надвишава 95% доверителен интервал на контролната група и възлиза на 500 pg/ml. VEGF е повишен при 57% от пациентите с нелекуван метастатичен рак, независимо от мястото. По време на лечението нивата на VEGF се повишават при 2/3 пациенти с прогресия на заболяването и при по-малко от 10% от пациентите с положителна динамика.

P. Salven и др. [b4] също показа, че при различни видове тумори (включително рак на гърдата), серумното ниво на VEGF при дисеминиран рак (171 711 pg/ml; медиана - 214 pg/ml) е значително по-високо, отколкото при здрави донори (1-177 pg /ml; медиана - 17 pg/ml) и при пациенти с локализиран процес (8-664 pg/ml; медиана - 158 pg/ml). При 74% от нелекуваните пациенти

При пациенти с дисеминиран рак нивото на VEGF в кръвния серум надвишава 200 pg/ml и при успешно лечение намалява. Подобни модели са отбелязани от A. Kraft et al. [b5]: според техните данни се наблюдава повишено ниво на VEGF в серума на 0-2G% от пациентите с локализиран туморен процес и 11-65% от пациентите с метастатичен процес. Все пак трябва да се отбележи, че в това проучване нивата на VEGF при здрави донори (30-1752 pg/ml; медиана - 294 pg/ml; горен 95% доверителен интервал - 883 pg/ml) са значително по-високи от докладваните от други автори. В това изследване, както и в работата на B. Zebrowski et al. [bb] е демонстрирано значително повишаване на концентрацията на VEGF в асцитни течности при пациенти с рак в сравнение с асцит от нетуморен произход.

В по-нова работа, P. Salven et al. [b7] представя резултатите от определяне на концентрацията на VEGF в кръвния серум на 105 пациенти с доброкачествени и злокачествени тумори на гърдата. Доказано е, че нивата на VEGF в кръвния серум на пациенти с метастатичен рак на гърдата (7-1347 pg/ml; медиана - 186 pg/ml) са значително повишени в сравнение с пациенти с доброкачествени тумори (2-328 pg/ml; медиана -57 pg/ml). Нивата на VEGF при пациенти с локално напреднал рак на гърдата (11-539 pg/ml; медиана - 104 pg/ml) също са по-високи, отколкото при пациенти с доброкачествени тумори, но разликата не е статистически значима. При пациенти с метастатичен рак, получаващи специфично лечение, нивото на VEGF е значително по-ниско, отколкото при пациенти, получаващи само симптоматично лечение. Интересно е също, че при локално напреднал процес нивото на VEGF в кръвния серум на пациенти с инвазивен дуктален рак (средно - 107 pg / ml) е значително по-високо, отколкото при пациенти с инвазивен лобуларен рак (средно - 44 pg / ml). ), като при последния е дори по-нисък, отколкото при доброкачествените тумори. Това наблюдение е в добро съответствие с данните на A. Lee et al. [b8], който показа, че в тъканта на дуктален рак на гърдата съдържанието на VEGF иРНК и протеин е значително по-високо, отколкото в тъканта на лобуларен рак. В същото време дукталния и лобуларния рак не се различават по плътност на микросъдовете и само при дуктален рак има пряка корелация между нивата на VEGF иРНК и протеина и показателите за съдова плътност. Може да се предположи, че VEGF е регулатор на ангиогенезата предимно при дуктален рак на гърдата.

Интерес представляват сравнителни изследвания, при които съдържанието/експресията на VEGF в туморна тъкан и кръвен серум се определя едновременно. G. Callagy и др. [b9], който определя тъканната експресия на VEGF с помощта на имунохистохимичен метод, стига до извода, че този показател, а не серумната концентрация на VEGF, корелира с плътността на микросъдовете и стадия на рака на гърдата и следователно е по-надежден прогностичен фактор от нивото на VEGF в кръвния серум. Те също не откриха връзка между серумните нива на VEGF и неговата експресия в тумора.

Най-представителното сравнително изследване е проведено от J. Adams et al. . Те определят съдържанието на VEGF в серума и плазмата и експресията на VEGF в тумори (имунохистохимично) на 201 пациенти с локализиран и напреднал рак на гърдата, доброкачествени тумори на гърдата

гори и здрави жени. При метастатичен рак на гърдата е отбелязано значително повишаване на нивото на VEGF както в плазмата, така и в серума в сравнение с нормалното. Съдържанието на VEGF в кръвната плазма при пациенти с метастатичен рак на гърдата също е значително повишено в сравнение с пациенти с доброкачествени тумори и локализиран рак на гърдата. При локализиран рак на гърдата се наблюдава само повишаване на нивото на VEGF в кръвната плазма в сравнение с контролата. Авторите смятат, че измерването на VEGF в кръвната плазма до голяма степен отразява производството му от тумора, тъй като серумният VEGF е предимно от тромбоцитен произход. Парадоксално е, че най-високите нива на VEGF в серума и плазмата са открити при пациенти с рак на гърдата, които са били в ремисия по време на лечение с тамоксифен. Нивата на циркулиращия VEGF не корелират с нито един от известните клинико-патологични фактори, включително микроваскуларна плътност и тъканна експресия на UROR.

По този начин, възможността за използване на нивата на VEGF в кръвта (както в серума, така и в плазмата) като адекватен заместител на тъканната експресия на този протеин при оценка на активността на ангиогенезата при рак на гърдата и прогнозиране на изхода от заболяването и ефективността на терапията има все още не е доказано.

ECEC-зависима ангиогенеза като цел за антитуморна терапия при рак на гърдата. Като се има предвид критичната роля на ангиогенезата за поддържане на растежа и разпространението на рака на гърдата и ключовата роля на VEGF в този процес, много автори отдавна са стигнали до заключението, че целенасоченото потискане на експресията на VEGF и/или неговите ефекти може да бъде обещаващ подход към развитието на нови режими на адювантно лечение на това заболяване. Предложено е да се използват вещества, които сравнително неспецифично блокират взаимодействието на различни растежни фактори с тирозин киназни рецептори, по-специално по-малко токсични аналози на сурамин, като антиангиогенни средства. Предполага се също, че антиангиогенните агенти могат да бъдат особено ефективни, когато се комбинират с лекарства, активирани при условия на хипоксия, тъй като потискането на ангиогенезата би създало условия, благоприятни за активирането на тези лекарства. Особено се акцентира върху факта, че чисто антиангиогенната терапия най-вероятно ще доведе не до регресия на тумора, а до спиране на по-нататъшния му растеж. В тази връзка беше посочена необходимостта от разработване на клинични и биохимични критерии за оценка на ефективността на антиангиогенните лекарства.

В момента само в Съединените щати повече от 20 лекарства, които влияят по един или друг начин на ангиогенезата, са подложени на клинични изпитвания, главно фаза I. Сред тях са такива доста специфични лекарства като моноклонални антитела в VEOP (Genereil) и неговите рецептори (IMC-1C11), инхибитори на вътрешната тирозин киназа на VEGF рецептора (например 7B6474), блокери на VEGF митогенно предаване на сигнал (SIII668 и SV416), естествени (Leova8-M) и синтетични (Magita8la1, Propita8a1, VMB-275291, COb-3) инхибитори на матрични протеинази, естествени (ангиостатин и ендостатин) и синтетични (TYP-470) инхибитори на пролиферация или индуктори на апоптоза ( Combre8la1m) на ендотелни клетки и

Съществуват и редица лекарства с различни или неясни механизми на действие.

I Roictap разделя антиангиогенните лекарства на директни и индиректни инхибитори на ангиогенезата. Той се отнася до директните инхибитори като вещества, които пряко засягат ендотелните клетки. Това са вече споменатите ангиостатин, ендостатин, TYP-470, Cotchain, както и такива естествени инхибитори на ангиогенезата като тромбоспондини, фактор пигментен епител. Характерна особеност на такива лекарства е, че те, като правило, не предизвикват резистентност в ендотелните клетки и следователно могат да се използват дълго време. Индиректните инхибитори включват лекарства, които влияят върху производството на ангиогенни фактори от туморни клетки или блокират действието на тези фактори на един или друг етап. Това са моноклонални антитела или антисенс нуклеотиди към VEGF и неговите рецептори. Тъй като действието на индиректните инхибитори е пряко свързано с туморната клетка и нейната способност да произвежда ангиогенни фактори, вероятността от поява на резистентност към тези лекарства е приблизително същата като при традиционните противотуморни средства.

Интересът към антиангиогенната антитуморна терапия в момента е толкова голям, че броят на публикациите, посветени на предклинични и клинични проучвания в тази област, се измерва в стотици, така че в този преглед ще се съсредоточим само върху произведения, пряко свързани с рака на гърдата.

Най-напреднало клинично е лекарство с неизвестен механизъм на антиангиогенно действие - талидомид. През 1970г използван е като успокоително и е забранен поради тератогенните си странични ефекти, които се дължат на неговите антиангиогенни свойства. В момента се правят опити да се използва антиангиогенният потенциал на талидомид при лечението на злокачествени тумори и той вече преминава фаза II на клинични изпитвания. Сред 66 пациенти, включени в това проучване, които са получавали 100 mg талидомид всяка вечер, има 12 пациенти с рак на гърдата. Няма обективен отговор към лекарството при пациенти с рак на гърдата, въпреки че частичен отговор или стабилизиране се наблюдава при 6 от 18 пациенти с рак на бъбреците, включени в същото проучване.

В същото време, по-ранни експерименти за индуциране на ангиогенеза в роговицата на заек под въздействието на VEOP-продуциращия клон на MCP-7 клетки показаха, че талидомидният аналог линомид в доза от 100 mg/kg телесно тегло ефективно инхибира този процес .

M. A8apo e1 a1. , показаха, че анти-VEGF моноклоналното антитяло MY833 потиска растежа на човешки ксенотрансплантати на рак на гърдата в голи мишки. Въпреки това, инхибиторният ефект на MY833 не корелира нито с количеството VEGF, секретиран от тумора, нито с експресията на VEGF рецептора. В други експерименти, при трансплантиране на сфероиди, образувани от клетки на рак на гърдата от линиите MCP-7, 7YA-75 и BK-VYA-3, в подкожната дорзална камера на атимусни мишки, беше показано, че моноклоналното антитяло срещу VEGF A.4.6. 1 при дневна доза от 200 μg значително потиска ангиогенната активност на тези клетъчни линии и повишава антитуморната активност на доксорубицин в тези модели.

Значителна антитуморна активност върху ксенотрансплантатите на рак на гърдата се наблюдава и при нискомолекулния специфичен инхибитор на vEGF рецепторна тирозин киназа (двата типа 1 и 2) - 7B4190. Еднократното перорално приложение на това лекарство в дози, които нямат директен антипролиферативен ефект върху туморните клетки, значително потиска растежа на установени тумори с размери около 0,5 cm3. Друг инхибитор на тирозин киназата има антиангиогенна активност срещу ксенотрансплантатите на рак на гърдата - добре познатото лекарство 7B1839 (Ige88a), което е селективен инхибитор на EGF рецепторната тирозин киназа и вече е в клинични изпитвания. Предполага се, че това лекарство не действа директно върху VEGF рецепторите, но потиска индукцията на VEGF синтеза под въздействието на EGF рецепторните лиганди. Очевидно друг блокер на EGF-зависимия път на предаване на митогенен сигнал, Herceptin, хуманизирано моноклонално антитяло срещу Herb2/neu, има подобен индиректен ефект върху ангиогенезата.

Лекарства, които нарушават функцията на микротубулите, също са ефективни инхибитори на ангиогенезата. И така, през 1997 г. Klauber N. eii a1. показват, че 2-метоксиестрадиол и таксол, които имат подобни свойства, инхибират VEGF-индуцираната ангиогенеза съответно с 54 и 37%. В същото време 2-метоксиестрадиолът потиска растежа на човешкия рак на гърдата, имплантиран в атимусни мишки с 60%. Антиангиогенните свойства на таксола също са демонстрирани от B. bau e1 a1. върху мишки с добре васкуларизиран трансгенен тумор на гърдата MeH. Ефектът се наблюдава при нецитотоксични дози таксол (3-6 mg/kg/ден) и се свързва с потискане на секрецията на VEGF.

Това свойство на таксола беше предложено да се използва за оценка на ефективността на лечението на пациенти с метастатичен рак на гърдата. Тяхното проучване включва 14 пациенти, които са получавали монотерапия с таксол в доза от 175 mg/m2 IV за три курса от по 21 дни всеки. При всички пациенти серумното ниво на VEGF се определя с помощта на ензимно-свързан имуносорбентен метод преди началото на лечението и след всеки от 21-дневните курсове. При 3 пациенти има частичен отговор на лечението, при 6 - стабилизиране и при 5 - прогресия на заболяването. Серумните нива на VEGF преди лечението са значително повишени при 8 от 14 пациенти. Средното ниво на VEGF намалява след лечение при пациенти с частичен ефект и стабилизиране и не се променя значително при пациенти с прогресия. Освен това, процентът на нормализиране на нивата на VEGF или неговото намаляване с повече от 50% е значително по-висок при пациенти с частичен отговор (5/9), отколкото при пациенти с прогресия (0/5). Авторите смятат, че стабилизиращият ефект на таксола при пациенти с напреднал рак на гърдата може да бъде свързан с потискане на секрецията на VEGF и, съответно, инхибиране на ангиогенезата.

Публикуваните експерименти върху имунодефицитни мишки демонстрират възможността за използване на генна терапия за потискане на ангиогенезата и инхибиране на растежа на рак на гърдата. Мишки със зрели Mca-4 тумори се инжектират два пъти с интервал от 7 дни в тумора с плазмид, съдържащ гена за естествения инхибитор на ангиогенезата ендостатин. 14 дни след първото приложение се открива

намаляване на теглото на туморите при опитни мишки с 51% в сравнение с контролната група. В същото време се наблюдава увеличаване на разстоянието между туморните клетки и най-близките съдове, намаляване на общата плътност на съдовете и увеличаване на апоптозата при тумори, съдържащи и експресиращи ендостатиновия ген.

Друг подход на генното инженерство към антиангиогенната терапия за рак на гърдата е използването на анти-сенс cDNA към VEGF. S.A. Им и др. трансфектирани човешки ракови клетки на гърдата от линията MDA231-MB с аденовирусен вектор, съдържащ същата cDNA за VEGF-165 (Ad5CMV-alphaVEGF). В in vitro система, тази трансфекция води до намалена секреция на VEGF, без да повлиява значително клетъчния растеж. Инжектирането на Ad5CMV-alphaVEGF in vivo в тумори, образувани от MDA231-MB клетки в голи мишки, води до потискане на туморния растеж, намалена експресия на VEGF протеин в туморната тъкан и намалена микроваскуларна плътност в сравнение с групата, инжектирана с вектор, несъдържащ анти- VEGF cDNA.

По този начин е експериментално доказана възможността за използване на различни видове директна и индиректна антиангиогенна терапия при лечението на пациенти с рак на гърдата. За съжаление нито един от тези методи все още не е доказал своята ефективност в клиниката. Освен това повечето автори са склонни да вярват, че антиангиогенната терапия (особено директната), която е предимно цитостатична, а не цитотоксична за големи тумори, не трябва да се използва като независим метод на лечение, а като важно допълнение към стандартните терапевтични режими.

ЛИТЕРАТУРА

1. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Ангиогенезата и фибринолитичната система // Semin. Thromb. Хемост. 1996. Т. 22. № 6. С. 517-524.

2. Ferrara N. Ролята на съдовия ендотелен растежен фактор в патологичната ангиогенеза // Breast Cancer Res. лечение. 1995. Т. 36. № 2. С. 127137.

3. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Участва ли транскрипционният фактор c-ets1 в регулирането на ангиогенезата и туморната инвазия? // Folia Biol. (Прага). 1994. Т. 40. № 5. С. 301-313.

4. Sato Y. Транскрипционен фактор ETS-1 като молекулярна цел за инхибиране на ангиогенезата // Hum. клетка. 1998. Т. 11. № 4. С. 207-214.

5. Iwasaka C., Tanaka K., Abe M., Sato Y. Ets-1 регулира ангиогенезата чрез индуциране на експресията на урокиназен тип плазминогенен активатор и матрична металопротеиназа-1 и миграцията на васкуларни ендотелни клетки // J. Cell Physiol . 1996. В. 169. № 3. С. 522-531.

6. Мигнати П., Рифкин Д.Б. Плазминогенни активатори и матрични металопротеинази в ангиогенезата // Ензимен протеин. 1996. Т. 49. С. 117-137.

7. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Асоциация на експресията на васкуларен ендотелен растежен фактор с туморна ангиогенеза и с ранен рецидив при първичен рак на гърдата // Jpn. J. Cancer Res. 1994. Т. 85. № 10. С. 1045-1049.

8. Toi M., Inada K., Hoshina S., Suzuki H., Kondo S., Tominaga T. Васкуларен ендотелен растежен фактор и тромбоцитен ендотелен клетъчен растежен фактор често се коекспресират при силно васкуларизиран човешки рак на гърдата. Cancer Res. 1995. Т. 1. № 9. С. 961-964.

9. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Туморна ангиогенеза при рак на гърдата: нейното значение като прогностичен индикатор и връзката с експресията на васкуларен ендотелен растежен фактор Breast Cancer Res. лечение. 1995. Т. 36. № 2. С. 193-204.

10. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Количествен анализ на васкуларен ендотелен растежен фактор при първичен рак на гърдата Рак. 1996. Т. 77. № 6. С. 1101-1106.

11. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Регулиране на експресията на ендотелен растежен фактор при рак на гърдата // Gan To Kagaku Ryoho. 1996. Т. 23. Доп. 1. С. 75-79.

12. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Експресия на васкуларен ендотелен растежен фактор, неговия рецептор и други ангиогенни

фактори при човешки рак на гърдата // Cancer Res. 1996. Т. 56. № 9. С. 2013-2016.

13. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Kitsuki H., Uchiyama A., Kuroki S., Tanaka M., Torisu M. Васкуларен ендотелен растежен фактор и тромбоцитен растежен фактор са потенциални ангиогенни и метастатични фактори при рак на гърдата при хора // Хирургия. 1996. Т. 119. № 3.

14. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Tsukahara Y., Kojima M., Uchiyama A., Kuroki S., Torisu M., Tanaka M. Оценка на c-erbB2 и съдовия ендотелен растеж експресия на мРНК на фактор в тънкоиглени аспирати от ранни карциноми на гърдата: предоперативно определяне на злокачествен потенциал // Eur. J. Surg. Oncol. 1998. Т. 24. № 1. С. 28-33.

15. Guidi A.J., Schnitt S.J., Fischer L., Tognazzi K., Harris J.R., Dvorak H.F., Brown L.F. Фактор на съдова пропускливост (съдов ендотелен растежен фактор) експресия и ангиогенеза при пациенти с дуктален карцином in situ на гърдата // Рак. 1997. Т. 80. № 10. С. 1945-1953.

16. Zhang H.T., Craft P., Scott P.A., Ziche M., Weich HA, Harris A.L., Bicknell R. Повишаване на туморния растеж и васкуларната плътност чрез трансфекция на васкуларен ендотелен клетъчен растежен фактор в MCF-7 човешки карциномни клетки на гърдата. Natl. Cancer Inst. 1995. Т. 87. № 3. С. 213-219.

17. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., Wang N., Liu T. Ефектът на антитялото срещу васкуларен ендотелен растежен фактор върху растежа на тумора и метастазите J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1998. Т. 124. № 11. С. 615-620.

18. Wang G., Yang Z., Shou C. // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1997. Т. 19. № 6. С. 407-409.

19. Lichtenbeld H.C., Barendsz-Janson A.F., van Essen H., Struijker Boudier H., Grifioen A.W., Hillen H.F. Ангиогенен потенциал на злокачествени и незлокачествени тъкани на човешката гърда в in vivo модел на ангиогенеза // Int. J. Рак. 1998. Т. 77. № 3. С. 455-459.

20. Браун Л. Ф., Гуиди А. Дж., Шнит С. Дж., Ван Де Уотър Л., Ируела-Ариспе М. Л., Йео Т. К., Тоняци К., Дворжак Х. Ф. Образуване на съдова строма при карцином in situ, инвазивен карцином и метастатичен карцином на гърдата // Clin. Cancer Res. 1999. Т. 5. № 5. С. 1041-1056.

21. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Молекулярни медиатори на туморна ангиогенеза: повишена експресия и активиране на рецептора на васкуларен ендотелен растежен фактор KDR при първичен рак на гърдата // Int. J. Рак. 1999. Т. 84. № 3. С. 293-298.

22. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Ко-експресия на васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) и неговите рецептори (flk-1 и flt-1) при хормонално индуциран рак на млечната жлеза при благороден плъх // Br. J. Рак.

1999. Т. 81. № 8. С. 1335-1343.

23. Speirs V., Atkin S.L. Производство на VEGF и експресия на VEGF рецепторите Flt-1 и KDR в първични култури от епителни и стромални клетки, получени от тумори на гърдата // Br. J. Рак. 1999. Т. 80. № 5-6. С. 898-903.

24. Лийк Р.Д., Хънт Н.К., Ландърс Р.Дж., Луис С.Е., Ройдс Дж.А., Харис А.Л. Макрофагалната инфилтрация е свързана с експресията на VEGF и EGFR при рак на гърдата // J. Pathol. 2000. Т. 190. № 4. С. 430-436.

25. Скот П.А., Глидъл Дж.М., Бикнел Р., Харис А.Л. Роля на чувствителната система за хипоксия, киселинността и репродуктивните хормони в променливостта на индуцирането на васкуларен ендотелен растежен фактор в клетъчни линии на човешки карцином на гърдата // Int. J. Рак. 1998. Т. 75. № 5. С. 706-712.

26. Bos R., Zhong H., Hanrahan C.F., Mommers E.C., Semenza G.L., Pinedo H.M., Abeloff M.D., Simons J.W., van Diest P.J., van der Wall

E. Нива на хипоксия-индуцируем фактор-1 алфа по време на карциногенеза на гърдата // J. Natl. Cancer Inst. 2001. Т. 93. № 4. С. 309-314.

27. Biroccio A., Candiloro A., Mottolese M., Sapora O., Albini A., Zupi G., Del Bufalo D. Свръхекспресията на Bcl-2 и хипоксията действат синергично за модулиране на експресията на васкуларен ендотелен растежен фактор и in vivo ан- гиогенеза в линия на карцином на гърдата // FASEB J. 2000. V. 14. No. 5. P. 652-660.

28. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., Bouchier Hayes D.J. Васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) регулира BCL-2 и инхибира апоптозата в човешки и миши аденокарциномни клетки на млечната жлеза // Br. J. Рак. 2001. Т. 85. № 2. С. 273-278.

29. Yen L., You X.L., Al Moustafa A.E., Batist G., Hynes N.E., Mader S., Meloche S., Alaoui-Jamali M.A. Heregulin селективно регулира секрецията на васкуларен ендотелен растежен фактор в раковите клетки и стимулира ангиогенезата // Oncogene. 2000. Т. 19. № 31. С. 3460-3469.

30. Laughner E., Taghavi P., Chiles K., Mahon P.C., Semenza G.L. HER2 (neu) сигнализирането повишава скоростта на синтеза на индуцируем от хипоксия фактор 1алфа (HIF-1алфа): нов механизъм за HIF-1-медиирана експресия на съдов ендотелен растежен фактор // Mol. Cell Biol. 2001. Т. 21. № 12. С. 3995-4004.

31. Blancher C., Moore J.W., Robertson N., Harris A.L. Ефекти от ras и von Hippel-Lindau (VHL) генни мутации върху хипоксия-индуцируем фактор (HIF)-1алфа, HIF-2алфа и експресия на съдов ендотелен растежен фактор и тяхното регулиране от фосфатидилинозитола 3"-

Киназа/Akt сигнализиращ път // Cancer Res. 2001. V. 61. No. 19. P. 7349-7355.

32. Донован Д., Харми Дж. Х., Туми Д., Осбърн Д. Х., Редмънд Х. П., Бучие-Хейс Д. Дж. TGF бета-1 регулиране на производството на VEGF от ракови клетки на гърдата // Ann. Surg. Oncol. 1997. Т. 4. № 8. С. 621-627.

33. de Jong JS, van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Експресия на растежни фактори, инхибиращи растежа фактори и техните рецептори при инвазивен рак на гърдата. I: Опис в търсене на автокринни и паракринни бримки // J. Pathol. 1998. Т. 184. № 1. С. 44-52.

34. de Jong JS, van Diest P.J., van der Valk, P., Baak, J.P. Експресия на растежни фактори, инхибиращи растежа фактори и техните рецептори при инвазивен рак на гърдата. II: Корелации с пролиферация и ангиогенеза // J. Pathol. 1998. Т. 184. № 1. С. 53-57.

35. De Jong JS, van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Експресия на растежни фактори, рецептори на растежен фактор и свързани с апоптоза протеини при инвазивен рак на гърдата: връзка с апоптотичната скорост // Breast Cancer Res. лечение. 2001. Т. 66. № 3. С. 201-208.

36. Hyder S.M., Stancel G.M. Регулиране на VEGF в репродуктивния тракт чрез полови стероидни хормони // Histol. Хистопатол. 2000. Т. 15. № 1. С. 325-234.

37. Ruohola J.K., Valve E.M., Karkkainen M.J., Joukov V., Alitalo K., Harkonen P.L. Васкуларните ендотелни растежни фактори се регулират различно от стероидни хормони и антиестрогени в клетките на рак на гърдата // Mol. Клетъчен ендокринол. 1999. Т. 149. № 1-2. С. 29-40.

38. Hyder S.M., Nawaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Идентифициране на функционални елементи на отговор на естроген в гена, кодиращ мощния ангиогенен фактор съдов ендотелен растежен фактор // Cancer Res. 2000. Т. 60. № 12. С. 3183-3190.

39. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Парадоксални хормонални реакции на KPL-1 ракови клетки на гърдата in vivo: значителна роля на ангиогенезата в туморния растеж // Онкология. 2000. Т. 59. № 2. С. 158-165.

40. Hyder S.M., Murthy L., Stancel G.M. Прогестинова регулация на васкуларен ендотелен растежен фактор в човешки ракови клетки на гърдата // Cancer Res.

1998. Т. 58. № 3. С. 392-395.

41. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Фармакологични и ендогенни прогестини индуцират експресия на васкуларен ендотелен растежен фактор в човешки ракови клетки на гърдата // Int. J. Рак. 2001. Т. 92. № 4. С. 469473.

42. Хиър К., Кумар Х., Спиърс В., Грийнман Дж., Дрю П. Дж., Фокс Дж. Н., Карлтън П. Дж., Монсън Дж. Р., Керин М. Дж. Васкуларен ендотелен растежен фактор при жени в пременопауза - индикатор за най-доброто време за операция на рак на гърдата? // Br. J. Рак. 1998. Т. 78. № 9. С. 1203-1207.

43. Greb RR, Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Нивата на експресия на иРНК на съдов ендотелен растежен фактор A (VEGF-A) намаляват след менопаузата в нормалната тъкан на гърдата, но не и в лезиите от рак на гърдата // Br. J. Рак. 1999. Т. 81. № 2. С. 225-231.

44. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., Claffey K., DetmarM. Индуцирането на туморна лимфангиогенеза от VEGF-C насърчава метастази на рак на гърдата // Nat. Med. 2001. Т. 7. № 2. С. 192-198.

45. Kurebayashi J., Otsuki T., Kunisue H., Mikami Y., Tanaka K., Yamamoto S., Sonoo H. Експресия на васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) членове на семейството при рак на гърдата // Jpn. J. Cancer Res. 1999. Т. 90. № 9. С. 977-981.

46. ​​​​Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 и неговият лиганд VEGF -C са свързани с ангиогенезата при рак на гърдата // Am. J. Pathol. 1999. V. 154. No. 5. P. 1381-1390.

47. Ohhashi T. // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 2001. Т. 102. № 6. С. 435-439.

48. Obermair A., ​​​​Kucera E., Mayerhofer K., Speiser P., Seifert M., Czer-wenka K., Kaider A., ​​​​Leodolter S., Kainz C., Zeillinger R. Съдов ендотелен растеж фактор (VEGF) при рак на гърдата при хора: корелация с преживяемост без заболяване // Int. J. Рак. 1997. Т. 74. № 4. С. 455458.

49. Relf M., LeJeune S., Scott P.A., Fox S., Smith K., Leek R., Moghaddam A., Whitehouse R., Bicknell R., Harris A.L. Експресия на ангиогенните фактори съдов ендотелен клетъчен растежен фактор, киселинен и основен фибробластен растежен фактор, туморен растежен фактор бета-1, тромбоцитен растежен фактор на ендотелни клетки, плацентарен растежен фактор и плейотрофин при първичен рак на гърдата при хора и връзката му с ангиогенеза // Cancer Res. 1997. Т. 57. № 5. С. 963-969.

50. Гаспарини Г., Той М., Гион М., Вердерио П., Дитади Р., Ханатани М., Мацубара И., Винанте О., Бонолди Е., Борачи П., Гати К., Сузуки Х., Tominaga T. Прогностично значение на протеина на съдовия ендотелен растежен фактор при възел-отрицателен карцином на гърдата // J. Natl. Cancer Inst.

1997. Т. 89. № 2. С. 139-147.

51. Гаспарини Г., Той М., Мичели Р., Вермюлен П.Б., Дитади Р., Биган-золи Е., Морабито А., Фанели М., Гати К., Сузуки Х., Томинага Т., Ди-рикс L.Y., Gion M. Клинично значение на васкуларен ендотелен растежен фактор и тимидин фосфорилаза при пациенти с положителни възли на гърдата

рак, лекуван или с адювантна химиотерапия, или с хормонална терапия // Cancer J. Sci. Am. 1999. Т. 5. № 2. С. 101-111.

52. Gasparini G. Прогностична стойност на васкуларен ендотелен растежен фактор при рак на гърдата // Онколог. 2000. Т. 5. Доп. 1. С. 37-44.

53. Gasparini G. Клинично значение на определянето на сурогатни маркери на ангиогенезата при рак на гърдата // Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2001. Т. 37. № 2. С. 97-114.

54. Gasparini G., ToiM., Biganzoli E., Dittadi R., Fanelli M., Morabito A., Boracchi P., Gion M. Thrombospondin-1 и -2 при рак на гърдата с отрицателен възел: корелация с ангиогенни фактори, p53, катепсин D, хормонални рецептори и прогноза // Онкология. 2001. Т. 60. № 1. С. 72-

55. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Предсказва ли съдовият ендотелен растежен фактор (VEGF) локален рецидив и преживяемост при лекуван с лъчетерапия рак на гърдата с негативен възел? // Br. J. Рак.

1999. Т. 81. № 4. С. 727-732.

56. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. р53 и експресията на васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) предсказва изход при 833 пациенти с първичен карцином на гърдата. J. Рак.

2000. Т. 89. № 1. С. 51 -62.

57. Linderholm B., Grankvist K., Wilking N., Johansson M., Tavelin B., Henriksson R. Корелация на съдържанието на васкуларен ендотелен растежен фактор с рецидиви, преживяемост и първо място на рецидив при карцином на гърдата с положителен първичен възел след адювант лечение // J. Clin. Oncol.

2000. Т. 18. № 7. С. 1423-1431.

58. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Клинично значение на ангиогенните фактори при рак на гърдата // Breast Cancer Res. лечение. 1998. Т. 52. № 1-3. С. 159-173.

59. Eppenberger U., Kueng W., Schlaeppi J.M., Roesel J.L., Benz C., Mueller H., Matter A., ​​​​Zuber M., Luescher K., Litschgi M., SchmittM., Foekens J.A., Eppenberger- Castori S. Маркерите на туморна ангиогенеза и протеолиза независимо дефинират подгрупи с висок и нисък риск на пациенти с рак на гърдата с отрицателен възел // J. Clin. Oncol. 1998. Т. 16. № 9. С. 3129-3136.

60. Coradini D., Boracchi P., Daidone M.G., Pellizzaro C., Miodini P., Ammatuna M., Tomasic G., Biganzoli E. Принос на васкуларен ендотелен растежен фактор към Нотингамския прогностичен индекс при рак на гърдата с отрицателни възли / / Br . J. Рак. 2001. Т. 85. № 6. С. 795-797.

61. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., LookM.P., Meijer van Gelder M.E., Geurts Moespot A., van der Kwast T.H., Sweep C.G., Klijn J.G. Високите туморни нива на васкуларен ендотелен растежен фактор предсказват лош отговор на системна терапия при напреднал рак на гърдата // Cancer Res. 2001. V. 61. No. 14. P. 5407-5414.

62. Ямамото Й., Той М., Кондо С., Мацумото Т., Сузуки Х., Китаму-раМ., Цурута К., Танигучи Т., Окамото А., Мори Т., ЙошидаМ., Ике-да Т. , , Tominaga T. Концентрации на съдов ендотелен растежен фактор в серума на нормални контроли и пациенти с рак // Clin. Cancer Res. 1996. Т. 2. № 5. С. 821-826.

63. Dirix L.Y., Vermeulen P.B., Pawinski A., Prove A., Benoy I., De Pooter C., Martin M., Van Oosterom A.T. Повишени нива на ангиогенните цитокини основен фибробластен растежен фактор и съдов ендотелен растежен фактор в серуми на пациенти с рак // Br. J. Рак. 1997. Т. 76. № 2. С. 238-243.

64. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Серумният съдов ендотелен растежен фактор често е повишен при дисеминиран рак // Clin. Cancer Res. 1997. Т. 3. № 5. С. 647-651.

65. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Васкуларен ендотелен растежен фактор в серума и изливи на пациенти със злокачествени и незлокачествено заболяване // Рак. 1999. Т. 85. № 1. С. 178-187.

66. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. младши, Елис Л.М. Нива на васкуларен ендотелен растежен фактор и индуциране на пропускливост при злокачествени плеврални изливи // Clin. Cancer Res. 1999. Т. 5. № 11. С. 3364-3368.

67. Salven P., Perhoniemi V., Tykka H., Maenpaa H., Joensuu H. Серумни нива на VEGF при жени с доброкачествен тумор на гърдата или рак на гърдата // Breast Cancer Res. лечение. 1999. Т. 53. № 2. С. 161-166.

68. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Инвазивен лобуларен и инвазивен дуктален карцином на гърдата показва различни модели на експресия на васкуларен ендотелен растежен фактор и ангиогенеза // J. Pathol.

1998. В. 185. № 4. С. 394-401.

69. Callagy G., Dimitriadis E., Harmey J., Bouchier-Hayes D., Leader M., Kay E. Имунохистохимично измерване на туморен съдов ендотелен растежен фактор при рак на гърдата. По-надежден предиктор на стадия на тумора, отколкото плътността на микросъдовете или серумен съдов ендотелен растежен фактор // Appl. Имунохистохимия. Molecul. Morphol. 2000. Т. 8. № 2. С. 104-109.

70. Адамс Дж., Кардър П. Дж., Дауни С., Форбс М. А., Макленън К., Алгар В., Кауфман С., Халам С., Бикнел Р., Уокър Дж. Дж., Кейрндъф

F., Selby P.J., Perren T.J., Lansdown M., Banks R.E. Васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) при рак на гърдата: сравнение на плазма, серум и тъкан VEGF и микросъдова плътност и ефекти на тамоксифен // Cancer Res. 2000. Т. 60. № 11. С. 2898-2905.

71. Харис А.Л. Антиангиогенезна терапия и стратегии за интегрирането й с адювантна терапия // Recent Results Cancer Res. 1998. Т. 152. С. 341-352.

72. Harris A.L., Zhang H., Moghaddam A., Fox S., Scott P., Pattison A., Gatter K., Stratford I., Bicknell R. Ангиогенеза при рак на гърдата – нови подходи към терапията чрез антиангиогенеза, хипоксично активирани лекарства и съдово насочване // Breast Cancer Res. лечение. 1996. Т. 38. № 1. С. 97108.

73. Kerbel R.S., Viloria Petit A., Klement G., Rak J. "Случайни" антиангиогенни лекарства. антионкогенно насочени инхибитори на сигнална трансдукция и конвенционални химиотерапевтични средства като примери // Eur. J. Рак. 2000. Т. 36. № 10. С. 1248-1257.

74. Folkman J. Ангиогенеза // Harrison's Textbook of Internal Medicine, 15th ed. /ред. от E. Braunwald, A.S. Фаучи, Д. Л. Kasper, S.L. Хаузър, Д. Л. Лонго, J.L. Джеймсън. N. Y.: McGraw-Hill, 2001. P. 517-530.

75. Eisen T., Boshoff C., Mak I., Sapunar F., Vaughan M.M., Pyle L., Johnston S.R., Ahern R., Smith I.E., Gore M.E. Продължителна ниска доза талидомид: проучване фаза II при напреднал меланом, рак на бъбречните клетки, рак на яйчниците и гърдата // Br. J. Рак. 2000. Т. 82. № 4. С. 812-817.

76. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomide блокира ангиогенезата чрез трансфектанти на васкуларен ендотелен растежен фактор на карцином на гърдата // Br. J. Рак. 1998. Т. 77. № 7. С. 11231129.

77. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Широк спектър от антитуморна активност на неутрализиращо моноклонално антитяло към човешки съдов ендотелен растежен фактор // Jpn. J. Cancer Res. 1999. Т. 90. № 1. С. 93-100.

78. Borgstrom P., Gold D.P., Hillan K.J., Ferrara N. Значение на VEGF за ангиогенезата на рака на гърдата in vivo: последици от интравитална микроскопия на комбинирани лечения с анти-VEGF неутрализиращо моноклонално антитяло и доксорубицин // Anticancer Res. 1999. Т. 19. № 5Б. P. 4203-4214.

79. Wedge S.R., Ogilvie D.J., DukesM., Kendrew J., Curwen J.O., Hennequin L.F., Thomas A.P., Stokes E.S., Curry B., Richmond G.H., Wadsworth P.F. ZD4190: орално активен инхибитор на сигнализиране на васкуларен ендотелен растежен фактор с широкоспектърна антитуморна ефикасност // Cancer Res. 2000. Т. 60. № 4. С. 970-975.

80. Ciardiello F., Caputo R., Bianco R. Damiano V., Fontanini G., Cuccato S., De Placido S., Bianco AR, Tortora G. Инхибиране на производството на растежен фактор и ангиогенезата в човешки ракови клетки от ZD1839 ( Iressa), селективен инхибитор на тирозин киназата на рецептора на епидермалния растежен фактор // Clin. Cancer Res. 2001. Т. 7. № 5. С. 1459-1465.

81. Кербел Р.С. Придобита резистентност към антитуморния ефект на антитела, блокиращи рецептора на епидермалния растежен фактор in vivo: роля за променена туморна ангиогенеза Cancer Res. 2001. Т. 61. № 13. С. 5090-5101.

82. Klauber N., Parangi S., Flynn E., Hamel E., D'Amato RJ Инхибиране на ангиогенезата и рак на гърдата при мишки от инхибиторите на микротубулите 2-метоксиестрадиол и таксол // Cancer Res. 1997. V. 57. № 1. С. 81-86.

83. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Паклитаксел (Таксол): инхибитор на ангиогенезата при силно васкуларизиран трансгенен рак на гърдата // Cancer Biother. Radiopharm. 1999. Т. 14. № 1. С. 31-36.

84. Lissoni P., Fugamalli E., Malugani F., Ardizzoia A., Secondino S., Tancini G., Gardani G.S. Химиотерапия и ангиогенеза при напреднал рак: намаляване на васкуларния ендотелен растежен фактор (VEGF) като предиктор за контрол на заболяването по време на терапия с таксол при метастатичен рак на гърдата // Int. J Biol. Маркери. 2000. Т. 15. № 4. С. 308-311.

85. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Интратуморното приложение на ендостатинов плазмид инхибира съдовия растеж и перфузията в MCa-4 миши карциноми на млечната жлеза Cancer Res. 2001. Т. 61. № 2. С. 526-531.

86. Jm S.A., Kim JS, Gomez Manzano C., Fueyo J., Liu T.J., Cho M.S., Seong C.M., Lee S.N., Hong Y.K., Yung W.K. Инхибиране на растежа на рак на гърдата in vivo чрез антиангиогенезна генна терапия с аденовирус-медииран антисенс-VEGF // Br. J. Рак. 2001. Т. 84. № 9. С. 12521257.

nocTynma b pegaKunro 16 Hoa6pa 2013 r.

Gershtein E.S., Kushlinskiy D.N., Adamyan L.V., Ognerubov N.A. ВАСУЛАРЕН ЕНДОТЕЛЕН РАСТЕЖЕН ФАКТОР-КЛИНИЧНО ЦЕНЕН МАРКЕР ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕНИ НЕОПЛАЗМИ

Резултати от изследванията на авторите и най-представителните литературни данни, показващи, че ключовият положителен регулатор на неоангиогенезата - васкуларен ендотелен растежен фактор (VEGF) - е

клинично значим прогностичен фактор при различни онкологични заболявания и са демонстрирани молекулярни мишени за няколко съвременни лекарства с различни механизми на действие. Ролята му като серологичен фактор за диагностика и мониторинг се нуждае от допълнително изследване.

Ключови думи: VEGF; VEGF-R; ангиогенеза; тумори; прогноза.

Герщейн Елена Сергеевна, Руски онкологичен изследователски център на името на. Н.Н. Блохин RAMS, Москва, Руска федерация, доктор на биологичните науки, професор, водещ научен сътрудник в Лабораторията по клинична биохимия на Научноизследователския институт клинична онкология, електронна поща: [имейл защитен]

Герщайн Елена Сергеевна, Н.Н. Блохин Руски онкологичен научен център RAMS, Москва, Руска федерация, доктор по биология, професор, водещ научен сътрудник по клинична биохимия на SRI на клиничната онкологична лаборатория, e-mail: [имейл защитен]

Кушлински Дмитрий Николаевич, Руски научен център по акушерство, гинекология и перинатология на име. В И. Кулакова, Москва, Руска федерация, гинеколог онколог, e-mail: [имейл защитен]

Кушлински Дмитрий Николаевич, Изследователски център по акушерство, гинекология и перинатология на името на V.I. Кулаков, Москва, Руска федерация, гинеколог онколог, e-mail: [имейл защитен]

Адамян Лейла Владимировна, Руски научен център по акушерство, гинекология и перинатология на име.

В И. Кулакова, Москва, Руска федерация, доктор на медицинските науки, професор, академик на Руската академия на медицинските науки, зам. директор, e-mail: [имейл защитен]

Адамян Лейла Владимировна, Изследователски център по акушерство, гинекология и перинатология на името на V.I. Кулаков, Москва, Руска федерация, доктор по медицина, професор, академик на RAMS, заместник-директор, e-mail: [имейл защитен]

Огнерубов Николай Алексеевич, Тамбовски държавен университет. Г.Р. Державина, Тамбов, Руска федерация, доктор на медицинските науки, професор, ръководител. Отделение по онкология, оперативна хирургия и топографска анатомия, електронна поща: [имейл защитен]

Огнерубов Николай Алексеевич, Тамбовски държавен университет на името на G.R. Державин, Тамбов, Руска федерация, доктор по медицина, професор, ръководител на отделение по онкология, оперативна хирургия и топографска анатомия, e-mail: [имейл защитен]