Leta 2013 je med rolanjem utrpela zlom fibule. Ker nisem vedel, kaj naj, sem se obrnil na BSPM, kjer so mi dali gips. Teden dni kasneje sem ugotovil, da gre nekaj narobe, in prijatelji so mi svetovali, naj se obrnem na Olega Arkadijeviča Juhimčuka.
Čez nekaj dni sem prišla na pregled, kjer sem ugotovila, da se kosti ne zrastejo pravilno in sem potrebovala operacijo s ploščico.
Storitev in odnos do pacienta Olega Arkadijeviča in njegove ekipe je na vrhunskem nivoju! Vse je hitro, jasno, profesionalno in duhovito. Po operaciji - popolna "storitvena" podpora. Gleženj si je opomogel, deluje kot prej, brez bolečin in znakov zloma, razen najtanjše brazgotine. Leta 2018 je prišlo do poškodbe kolena in brez dvoma sem se spet obrnil na Olega Arkadijeviča. Ni treba posebej poudarjati, da so ga spet popravili, pomagali in me pomirili! Skratka super zdravnik in super človek! Iskreno priporočam!
Irina Životko
Pred letom dni sem se resno poškodoval.
Pred enim letom je dobila hudo poškodbo gležnja, sestavljen zlom 2 kosti s premikom, pretrganje vezi in delno poškodbo mišic.
Živim v Evropi. Obračala sem se na številne klinike… Po številnih posvetovanjih in diagnostikah žal nisem dobila enoznačnega mnenja zdravnikov. Ugotovitev, ki mi je bila izražena, je bila: "Malo verjetno je, da boste hodili tako kot prej."
Po priporočilu prijateljev se je obrnila po strokovno pomoč na ukrajinsko kliniko, k enemu najboljših kirurgov / travmatologov, natančneje k Yukhimchuku Olegu Arkadievichu.
rezultat:
1. Jasen, hiter strokovni pregled in odločila sem se za operacijo.
2. Operacija je potekala dobro. Implantati so bili nameščeni.
3. Prejel sem visoko raven pooperativne rehabilitacije.
4. POPOLNOMA okreva brez najmanjšega namiga o poškodbi!
BRAVO ZA NAŠE ZDRAVNIKE!!!
Zdravnika poznamo že dolgo, likuvav večkrat
Zdravnika poznava že dolgo, saj je večkrat uživala vse članice domovine, mama pa po nesreči 2006. z zlomi vseh mojih kosti (rame, gomilka, rebra) je bila operirana daleč stran, dolgo je delala, negovala onukiv, zrasla mesto na deželi. Zdravje vam, doktor, in moč vaše domovine! Zagotovo, veš, grdo je - de fors the slame!
Kvota
Vse že več kot 10 let
Več kot 10 let se je moja vsa domovina obrnila na Olega Arkadijoviča. Vedno bodite usposobljeni in učinkovito pomagajte. 21. 12. 2017 si je zlomila nogo, zlomila dve kosti spodnjega dela noge, ostale kosti so bile na sredini razdrobljene, zlom z »rožico«. Nekega dne smo šli k Olegu Arkadijoviču, pomembna operacija je bila prekinjena, vstavljeni sta bili dve plošči ... Že hodil sem brez milice, hkrati pa sem začel hoditi kot zlom. Zavoljo tega zdravnika.
Antonina
Več kot leto dni je trpel za vnetjem ahilovega križa,
Od časa do časa uporabljam storitve Olega Arkadijeviča in priporočam svojim prijateljem.
Več kot leto dni sem trpel za vnetjem Ahila, zjutraj sem že hodil kot Charlie Chaplin 🙁
Oleg Arkadijevič me je čez mesec dni postavil na parket. Ogromna izkušnja, zlate roke, bistra glava in samo dober človek. Najlepša hvala!!!
P.S. Tistim, ki se aktivno ukvarjajo s športom in se posledično poškodujejo, močno priporočam Olega Arkadijeviča.
Aleksander
Oleg Arkadijevič, najlepša hvala!!!
Oleg Arkadijevič, najlepša hvala!!! Leta 2015 je bil operiran moj oče, tudi sam je zdravnik, v službi preživi 99 % časa na nogah in po vaši zaslugi nadaljuje v istem duhu, a že na protezi kolčni sklep. Sam sem kirurg in spomnim se, kako je vse potekalo, lahko rečem, da je tako pred in pooperativno obdobje potekalo zelo "gladko". Po 1,5 mesecih je bil oče že v operacijski sobi (porodničar ginekolog), čeprav se spomnim, da ste to rekli zgodaj :)), vendar ni zdržal. Že letos sem tretjič osvojil Hoverlo) Spominjamo se te vsak 14. februar, na dan operacije. HVALA VAM!!!
Že 30 let se domneva, da bi angiogeneza – proces nastajanja novih krvnih žil – lahko postala pomembna tarča zdravljenja raka. In šele pred kratkim je bila ta priložnost realizirana. Klinični podatki so pokazali, da lahko humanizirano monoklonsko protitelo, bevacizumab, ki cilja na ključno proangiogeno molekulo, vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF), podaljša pričakovano življenjsko dobo pri bolnikih z metastatskim rakom debelega črevesa in danke, če ga dajemo kot zdravljenje prve izbire v kombinaciji s kemoterapijo. zdravila. Tukaj razpravljamo o funkcijah in pomenu VECF, da pokažemo, da je VEGF veljavna točka delovanja za zdravljenje raka.
Kaj je VEGF?
VEGF je eden od članov družine strukturno sorodnih proteinov, ki so ligandi za družino receptorjev VEGF. VEGF vpliva na razvoj novih krvnih žil (angiogeneza) in preživetje nezrelih krvnih žil (žilna podpora), tako da se veže na in aktivira dva tesno povezana membranska receptorja tirozin kinaze (VEGF receptor-1 in VEGF receptor-2). Te receptorje izražajo endotelijske celice stene krvnih žil (tabela 1). Vezava VEGF na te receptorje sproži signalno kaskado, ki na koncu stimulira rast vaskularnih endotelijskih celic, preživetje in proliferacijo. Endotelijske celice so vključene v tako raznolike procese, kot so vazokonstrikcija in vazodilatacija, predstavitev antigenov, služijo pa tudi kot zelo pomembni elementi vseh krvnih žil - tako kapilar kot ven ali arterij. Tako ima VEGF s stimulacijo endotelijskih celic osrednjo vlogo v procesu angiogeneze.
Zakaj je pomembno narediti vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF human)?
VEGF je izjemno pomemben za nastanek ustrezno delujočega žilnega sistema med embriogenezo in v zgodnjem poporodnem obdobju, vendar je njegova fiziološka aktivnost pri odraslih omejena. Poskusi na miših so pokazali naslednje:
- Ciljna poškodba enega ali dveh alelov gena VEGF povzroči smrt zarodka
- Inaktivacija VEGF med zgodnjim postnatalnim razvojem vodi tudi v smrt
- Poškodbe VEGF pri odraslih miših ne spremljajo očitne nepravilnosti, saj je njegova vloga omejena na razvoj foliklov, celjenje ran in reprodukcijski cikel pri samicah.
Omejena vrednost angiogeneze pri odraslih pomeni, da je supresija aktivnosti VEGF izvedljiv terapevtski cilj.
vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF; angleščina Vaskularni endotelijski rastni faktor) je signalni protein, ki ga proizvajajo celice za spodbujanje vaskulogeneze (nastanek embrionalnega žilnega sistema) in angiogeneze (rast novih žil v že obstoječem žilnem sistemu). Trenutno je znanih več različni dejavniki te družine (ki je danes podrazred precej obsežnega razreda rastnih faktorjev).
Beljakovine VEGF služijo kot del sistema, ki je odgovoren za ponovno vzpostavitev oskrbe tkiv s kisikom v razmerah, ko krvni obtok ni zadosten. Koncentracija VEGF v krvnem serumu se poveča pri bronhialni astmi in sladkorni bolezni. Glavne funkcije VEGF so ustvarjanje novih krvnih žil v embrionalnem razvoju ali po poškodbi, povečana rast mišic po vadbi in zagotavljanje kolateralne cirkulacije (ustvarjanje novih krvnih žil, ko so obstoječe zamašene).
Povečana aktivnost VEGF lahko povzroči različne bolezni. Tako trdni rakasti tumorji ne morejo zrasti več kot omejena velikost brez ustrezne oskrbe s krvjo; tumorji, ki lahko izražajo VEGF, lahko rastejo in metastazirajo. Prekomerna ekspresija VEGF lahko povzroči vaskularno bolezen v določenih delih telesa (zlasti v mrežnici). Nekatera zdravila, razvita v zadnjih letih (kot je bevacizumab), lahko nadzorujejo ali upočasnijo potek takih bolezni z zaviranjem VEGF.
Trenutne raziskave kažejo, da proteini VEGF niso edini aktivatorji angiogeneze. Še posebej, FGF2 in HGF so tudi močni angiogeni dejavniki.
Razvrstitev
Najpomembnejšo vlogo v človeškem telesu igra beljakovina iz družine VEGF, imenovana VEGF-A. Ta družina vključuje tudi placentni rastni faktor (PGF) in beljakovine VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D. Vsi so bili odkriti pozneje kot VEGF-A (pred njihovim odkritjem se je protein VEGF-A imenoval preprosto VEGF). Poleg zgoraj navedenega je protein VEGF, ki ga kodirajo virusi ( VEGF-E) in beljakovino VEGF, ki jo najdemo v strupu nekaterih kač ( VEGF-F).
| Vrsta | funkcija |
|---|---|
| VEGF-A |
|
| VEGF-B | Embrionalna angiogeneza (zlasti miokardnih tkiv) |
| VEGF-C | Angiogeneza limfnih žil |
| VEGF-D | Razvoj limfnih žil v pljučih |
| PIGF | Vaskulogeneza (kot tudi angiogeneza pri ishemiji, vnetju, celjenju ran in raku) |
Aktivnost proteina VEGF-A so raziskovali (kot pove že ime) predvsem v vaskularnih endotelijskih celicah, čeprav vpliva na delovanje drugih vrst celic (npr. stimulira migracijo monocitov/makrofagov, deluje na nevrone, rakave celice). , ledvične epitelijske celice). V raziskavah in vitro Pokazalo se je, da VEGF-A stimulira mitogenezo in migracijo endotelijskih celic. VEGF-A prav tako povečuje in krepi mikrovaskularno prepustnost in je bil prvotno imenovan "faktor vaskularne prepustnosti".
Alternativna klasifikacija
Koncept "proteinov VEGF" je širok koncept, ki zajema dve skupini proteinov, ki izhajajo iz alternativnega spajanja messenger RNA (mRNA) enega gena, ki vsebuje 8 eksonov. Ti dve skupini se razlikujeta po mestu spajanja končnega eksona 8: proteini s proksimalnim mestom so označeni kot VEGFxxx, tisti z distalnim mestom pa kot VEGFxxxb. Poleg tega alternativno spajanje eksonov 6 in 7 spremeni njihove lastnosti vezave na heparin in aminokislinsko sestavo (pri ljudeh: VEGF121, VEGF121b, VEGF145, VEGF165, VEGF165b, VEGF189, VEGF206; pri glodalcih ortologi teh proteinov vsebujejo eno aminokislino manj ). Te regije imajo pomembne funkcionalne posledice za različice VEGF, saj mesto spajanja končne regije (ekson 8) določa, ali bodo proteini proangiogeni (proksimalno mesto spajanja, uporabljeno med angiogenezo) ali antiangiogene (distalno mesto spajanja, uporabljeno v normalno tkivo). Poleg tega vključitev ali izključitev eksonov 6 in 7 zagotavlja interakcije s proteoglikani heparan sulfata in koreceptorji nevropilina na celični površini, kar poveča njihovo sposobnost vezave in aktiviranja receptorjev VEGF ( VEGFR). Pri miših se je nedavno pokazalo, da je protein VEGF-C pomemben induktor nevrogeneze v subventrikularnih conah brez angiogenih učinkov.
VEGF receptor
Vsi člani družine proteinov VEGF stimulirajo celični odziv z vezavo na receptorje z aktivnostjo tirozin kinaze na celični površini; do aktivacije teh proteinov pride z njihovo transfosforilacijo. Vsi receptorji VEGF imajo zunajcelični del, ki ga sestavlja 7 imunoglobulinom podobnih regij, ena transmembranska regija in intracelularni del, ki vsebuje domeno tirozin kinaze.
Poznamo tri vrste receptorjev, ki jih označujemo kot VEGFR-1, VEGFR-2 in VEGFR-3. Tudi glede na alternativno spajanje so receptorji vezani na membrano in prosti.
Protein VEGF-A se veže na receptorja VEGFR-1 (Flt-1) in VEGFR-2 (KDR/Flk-1); medtem ko receptor VEGFR-2 deluje kot mediator v skoraj vseh znanih celičnih reakcijah na VEGF. Funkcije receptorja VEGFR-1 so manj natančno opredeljene (čeprav se domneva, da modulira signale VEGFR-2). Druga funkcija VEGFR-1 je, da lahko deluje kot "prazen" receptor in izolira protein VEGF iz receptorja VEGFR-2 (kar se zdi še posebej pomembno pri angiogenezi med embrionalnim razvojem).
Proteina VEGF-C in VEGF-D (vendar ne VEGF-A) sta liganda za tretji receptor (VEGFR-3), ki posreduje limfangiogeneza.
Proizvodnja s celicami
Nastajanje proteinov VEGFxxx je mogoče inducirati v celicah, ki ne prejemajo dovolj kisika. Ko celici primanjkuje kisika, proizvede enega od transkripcijskih faktorjev, hipoksijo inducibilni faktor ( HIF). Ta dejavnik (poleg drugih funkcij - zlasti modulacije eritropoeze, tj. procesa nastajanja rdečih krvnih celic v kostnem mozgu) spodbuja sproščanje proteinov VEGFxxx. Krožeči protein VEGFxxx se nato veže na receptor VEGF na endotelijskih celicah in aktivira delovanje tirozin kinaze, kar sproži angiogenezo.
Pri bolnikih s pljučnim emfizemom so ugotovili znižanje ravni VEGF v pljučnih arterijah.
V ledvicah povečano izražanje VEGFxxx v glomerulih neposredno povzroči glomerularno hipertrofijo, povezano s proteinurijo.
Spremembe ravni VEGF lahko kažejo na zgodnje stopnje preeklampsije.
Terapija proti VEGF
Anti-VEGF terapije imajo pomembno vlogo pri zdravljenju nekaterih vrst raka (zlasti -
Kazalo
1. Regulacija neoangiogeneze
2. Tumorska angiogeneza
Vaskuloendotelijski rastni faktor
. Vaskuloendotelijski rastni faktor C
. Vaskuloendotelijski rastni faktor D
. receptorje VEGF
. Faktor rasti fibroblastov
. epidermalni rastni faktor
. Transformacijski rastni faktor α
. Transformacijski rastni faktor β
. faktor rasti trombocitov
. placentni rastni faktor
. Faktor rasti hepatocitov
. angiogenin
. Angiopoetini-1 in -2
. Pigmentni faktor epitelnega izvora
. Dušikov oksid
. Matrične metaloproteinaze
. Endostatin
. faktor izvornih celic
. Dejavnik, ki zavira levkemične celice
. možganski nevrotropni faktor
Okrajšave razdelkov
EGF - epidermalni rastni faktor
FGF - rastni faktor fibroblastov
HGF - faktor rasti hepatocitov
IGF - insulinu podobni rastni faktorji
MMRS - matrične metaloproteinaze
PDGF - faktor rasti trombocitov
PLGF - placentni rastni faktor
TGF - transformirajoči rastni faktorji
TIMP - inhibitorji
MMP SCF - faktor izvornih celic
VEGF - vaskuloendotelijski rastni faktor
Rastni faktorji – polipeptidi z molekularna teža 5-50 kDa, združeni v skupino trofičnih regulacijskih snovi. Tako kot hormoni imajo ti dejavniki širok spekter bioloških učinkov na številne celice – spodbujajo ali zavirajo mitogenezo, kemotakso in diferenciacijo. Za razliko od hormonov rastne faktorje običajno proizvajajo nespecializirane celice, ki jih najdemo v vseh tkivih in imajo endokrine, parakrine in avtokrine učinke. Endokrini faktorji se proizvajajo in prenašajo do oddaljenih ciljnih celic preko krvnega obtoka. Ko dosežejo svoj "tarč", sodelujejo s specializiranimi receptorji z visoko afiniteto ciljnih celic. Parakrini dejavniki se razlikujejo po tem, da se širijo z difuzijo. Receptorji ciljnih celic se običajno nahajajo v bližini celic proizvajalk. Avtokrini dejavniki vplivajo na celice, ki so neposredni vir teh dejavnikov. Večina polipeptidnih rastnih faktorjev deluje parakrino ali avtokrino. Vendar pa lahko nekateri dejavniki, kot je insulinu podoben rastni faktor (IGF), izvajajo endokrine učinke.
Regulacija neoangiogeneze
Normalno delovanje tkiv je odvisno od rednega dovajanja kisika po krvnih žilah. Razumevanje, kako nastanejo krvne žile, je bilo v središču večine raziskovalnih prizadevanj v zadnjem desetletju. Vaskulogeneza pri zarodkih je proces, pri katerem krvne žile nastanejo de novo iz prekurzorjev endotelijskih celic. Angiogeneza je proces tvorbe novih krvnih žil iz že obstoječega žilnega sistema. Ima pomembno vlogo pri razvoju, normalni rasti tkiva, celjenju ran, reproduktivnem ciklusu pri ženskah (razvoj posteljice in rumenega telesca, ovulacija) ter ima pomembno vlogo pri različnih boleznih. Posebno zanimiva je rast tumorjev. To je tvorba novega krvnega sistema, ki omogoča rast tumorja. Ta proces, opisan kot tumorska angiogeneza, je tudi sestavni del širjenja tumorskih celic in rasti metastaz. Proces neoangiogeneze je nujen za dolgotrajno prilagajanje tkiv na pogoje poškodbe. V tem primeru pride do delnega vstopa rastnih faktorjev v kri, kar ima diagnostično vrednost.
Razlikujemo naslednje stopnje neoangiogeneze:
1. povečanje prepustnosti endotelija in uničenje bazalne membrane;
2. migracija endotelijskih celic;
3. proliferacija endotelijskih celic;
4. »zorenje« endotelijskih celic in preoblikovanje žilja.
Glavni mehanizem regulacije procesov neoangiogeneze je sproščanje angiogenih dejavnikov, katerih viri so lahko endotelijske in mastocitne celice, makrofagi itd. Pod vplivom angiogenih dejavnikov se endoteliociti aktivirajo (predvsem v postkapilarnih venulah) in migrirajo izven bazalna membrana s tvorbo vej glavnih žil. Predpostavlja se, da je aktivacija ekspresije endotelijskih adhezijskih molekul, na primer E-selektina, velikega pomena v mehanizmu migracije endoteliocitov. V stabilnem stanju se endoteliociti ne razmnožujejo in le občasno (enkrat na 7-10 let) delijo. Pod delovanjem angiogenih rastnih faktorjev in citokinov se aktivira proliferacija endoteliocitov, ki se konča z remodeliranjem žile, po kateri novonastala žila pridobi stabilno stanje.
Rast novih žil je določena z ravnovesjem med njegovimi stimulansi in zaviralci. Pri nizki vrednosti razmerja med stimulansi in zaviralci tvorbe žil je neoangiogeneza blokirana ali nizke intenzivnosti, nasprotno, pri visokih vrednostih razmerja se neoangiogeneza aktivno sproži.
Stimulatorji neoangiogeneze: vaskuloendotelijski rastni faktor (VEGF), fibroblastni rastni faktor (FGF), angiogenin, epidermalni rastni faktor (EGF), trombocitni rastni faktor (PDGF), transformirajoči rastni faktorji α (TGF-α) in β (TGF-β). ), insulinu podoben rastni faktor 1 (IGF-1), NO, interlevkin-8 in nespecifični dejavniki, kot so matrične metaloproteinaze (MMP).
Zaviralci neoangiogeneze: endostatin, topni receptorji VEGF (sVEGFR), trombospondin, angiostatin (fragment plazminogena), vazostatin, restin, zaviralci MMP (TIMP-1, TIMP-2).
Tumorska angiogeneza
Za razliko od običajne, normalne vaskulature, ki hitro dozori in se stabilizira, imajo tumorske krvne žile strukturne in funkcionalne nepravilnosti. Ne vsebujejo pericitov, celic, ki so funkcionalno povezane z žilnim endotelijem in so izjemno pomembne za stabilizacijo in zorenje žilnih struktur. Poleg tega plovilo1. 2. 3. 4. Ta tumorska mreža ima kaotično organizacijo, z zavitostjo in povečano žilno prepustnostjo, njeno preživetje in proliferacija pa sta odvisna od rastnih faktorjev. Te vaskularne anomalije, ki so v veliki meri posledica prekomerne proizvodnje rastnih faktorjev, ustvarjajo pogoje, ugodne za rast tumorja.
Za rakave celice je značilno povečanje ravni stimulatorjev neoangiogeneze. V odsotnosti oskrbe s krvjo dobijo tumorji kisik in hranila z difuzijo in običajno ne zrastejo več kot 1–2 mm v premeru. Začetek angiogeneze povzroči nastanek nove krvne oskrbe in olajša hitro rast in metastazo tumorja, ki tako postane aktiven. Čeprav je veliko rastnih dejavnikov vključenih v tumorsko angiogenezo, je bilo ugotovljeno, da je VEGF najmočnejši in prevladujoči med njimi. Motnje oskrbe tumorja s krvjo lahko zavirajo njegovo kasnejšo rast. Predvideva se, da je blokiranje rasti tumorja možno z zaviranjem nastajanja in delovanja rastnih faktorjev angiogeneze ali z neposrednim delovanjem na novo nastale, nezrele krvne žile. Ta metoda vpliva na tumor ne povzroči njegovega izkoreninjenja, temveč le omejuje njegovo rast in bolezen spremeni v počasen kronični proces. Anti-VEGF terapija zavira rast novih tumorskih žil in povzroči regresijo novonastale žilne postelje.
Vaskuloendotelijski rastni faktor (VEGF, VEGF A)
VEGF je heterodimerni glikoproteinski rastni faktor, ki ga proizvajajo različne vrste celic. Ugotovljenih je bilo vsaj 5 različic VEGF-A: VEGF 121, VEGF 165, VEGF 183, VEGF 189, VEGF 206. Druge različice VEGF se imenujejo VEGF-B, -C, -D. V večini tkiv je prevladujoča oblika VEGF 165. Kaposijev sarkom izraža VEGF 121 in VEGF 165. VEGF 121 in VEGF 165 sta topni obliki, medtem ko sta VEGF 189 in VEGF 206 vezana na membranske proteoglikane, ki vsebujejo heparin. Za razliko od drugih mitogenov endotelijskih celic, kot sta bFGF (osnovna oblika) in PDGF, se VEGF sintetizira kot prekurzor iz 226 aminokislin.
VEGF je potencialni mitogen za vaskularne epitelne celice. Ima močan učinek na vaskularno prepustnost, je močan angiogeni protein v različnih eksperimentalnih sistemih in je vključen v procese neovaskularizacije v patoloških situacijah. Med VEGF in bFGF obstaja sinergistični učinek na indukcijo angiogeneze. Sposobnost VEGF, da vpliva na žilno prepustnost, pomeni možnost vpletenosti tega rastnega faktorja v spreminjanje funkcij krvno-možganske pregrade v subnormalnih in patoloških stanjih. VEGF-A povzroča tudi vazodilatacijo preko poti NO sintetaze v endotelijskih celicah in lahko aktivira migracijo monocitov.
VEGF-A je mogoče odkriti v plazmi in serumu bolnikov, vendar je njegova serumska raven veliko višja. Izjemno visoke ravni je mogoče najti v vsebini cist, ki nastanejo pri bolnikih z možganskimi tumorji, ali v ascitični tekočini. Trombociti sproščajo VEGFA ob agregaciji in so lahko še en pomemben vir tumorskih celic. Različne študije so pokazale, da je lahko povezava visokih serumskih ravni VEGF-A s slabo prognozo pri bolnikih z rakom povezana s povišanimi trombociti. Tumorji lahko izločajo citokine in rastne faktorje, ki spodbujajo nastajanje megakariocitov v kostnem mozgu in povečajo število trombocitov. To pa lahko vodi do drugega, posrednega povečanja dostave VEGF-A v tumor. Poleg tega je VEGF-A vključen v številne druge patološke procese, povezane s povečano angiogenezo ali povečano žilno prepustnostjo. Primeri, kjer ima VEGF-A pomembno vlogo, so psoriaza in revmatoidni artritis, pa tudi sindrom hiperstimulacije jajčnikov. Diabetična retinopatija je povezana tudi z visokimi intraokularnimi ravnmi VEGF-A, zaviranje delovanja VEGFA pa lahko povzroči neplodnost zaradi blokade delovanja rumenega telesca. Pomen VEGF-A za rast tumorja je bil jasno prikazan z uporabo receptorjev VEGF za blokiranje proliferacije in vivo, kot tudi z blokiranjem protiteles proti VEGF ali enemu od receptorjev VEGF. Posledično je motenje delovanja VEGF-A postalo velik interes za razvoj zdravil, katerih cilj je blokiranje angiogeneze in metastaz. Trenutno je več kot 110 farmacevtskih podjetij po vsem svetu vključenih v razvoj tovrstnih antagonistov. Njihovi pristopi vključujejo antagoniste VEGF-A ali njegovih receptorjev, selektivne zaviralce tirozin kinaz. Usmerjanje signalizacije VEGF ima lahko zelo pomembne terapevtske posledice za številne bolezni in služi kot osnova za razvoj prihodnjih (anti)angiogenih terapij.
Vaskuloendotelijski rastni faktor C (VEGF-C)
VEGF-C spada v družino VEGF. Dokazano je, da ima angiogene in limfangiogene lastnosti. Družina VEGF in njihovi receptorji so vključeni v razvoj in rast vaskularnega endotelija. Dva proteina iz te družine, VEGF-C in -D, imata regulatorni učinek na endotelijske celice limfnih žil preko receptorja VEGFR3, ki delujeta kot mitogeni.
Izražanje VEGF-C je povezano z onkohematološkimi boleznimi. Ekspresija VEGF-C skupaj z receptorji spodbuja preživetje in proliferacijo tumorskih celic. Povečana ekspresija VEGF-C je bila dokazana pri malignih tumorjih gastrointestinalnega trakta, kjer je povezana z invazijo, metastazami v bezgavkah in zmanjšanim preživetjem.
Vaskuloendotelijski rastni faktor D (VEGF-D)
VEGF-D (znan tudi kot c-fos-inducibilni faktor ali FIGF) je zelo blizu VEGF-C. Ima strukturno homologijo in specifičnost receptorja, podobno VEGF-C, zato se domneva, da lahko VEGF-D in VEGF-C ločimo v poddružino VEGF. VEGF-D se na začetku sintetizira kot prekurzorski protein, ki vsebuje edinstvene N- in C-terminalne propeptide poleg centralne homologne domene, ki veže receptor VEGF (VHD). N in C-terminalni propeptidi niso bili najdeni v drugih članih družine VEGF. Ti propeptidi se proteolitično cepijo med biosintezo, kar ima za posledico zrelo, izločeno obliko, sestavljeno iz monovalentnih VHD dimerjev.
Tako kot VEGF-C se tudi VEGF-D na celični površini veže na receptor 2 za tirozin kinazo VEGF (VEGF R2/Flk-1/KDR) in VEGFR3. Ti receptorji so lokalizirani na vaskularnih in limfnih endotelijskih celicah in so odgovorni za angiogenezo in limfogenezo. Zrela oblika VEGFD se na te receptorje veže z večjo afiniteto kot prvotna proforma VEGF-D. Ekspresija gena VEGF-D je bila dokazana pri razvijajočih se zarodkih, zlasti v mezenhimu pljuč. VEGF-D je lokaliziran tudi v tumorskih celicah. V tkivih odraslih se mRNA VEGF-D izraža v srcu, pljučih, skeletnih mišicah in tankem črevesu.
Receptorji VEGF (sVEGFR-1, sVEGFR-2)
Številni citokinski receptorji obstajajo v topni obliki po njihovi proteolitični cepitvi in ločitvi od celične površine. Ti topni receptorji lahko vežejo in nevtralizirajo citokine v obtoku. Obstajajo trije receptorji za VEGF-A: VEGFR-1 (Flt-1), -2 (KDR) in -3 (Flt-4). Vse vsebujejo sedem Ig podobnih ponovitev v svojih zunajceličnih domenah. VEGFR1-R3 se pretežno izraža v proliferirajočem endoteliju vaskularne obloge in/ali infiltrirajočih solidnih tumorjih. Vendar pa je VEGFR2 širše prisoten kot VEGFR1 in se izraža v vseh endotelijskih celicah vaskularnega izvora. VEGFR2 je prisoten tudi v endotelijskih in perivaskularnih kapilarnih celicah v tanki lamini seminifernih tubulov, Leydigovih celicah in Sertolijevih celicah. VEGFR2 veže VEGF-A, -C in -D. Za razliko od VEGFR1, ki veže tako PlGF kot VEGF z visoko afiniteto, VEGFR2 veže samo VEGF z visoko afiniteto, ne pa tudi PlGF.
Ti receptorji igrajo pomembno vlogo pri angiogenezi. sVEGFR-1 je zaviralec tega procesa. Z vezavo na VEGF preprečuje VEGF interakcijo s ciljnimi celicami. Funkcionalna inaktivacija VEGFR2 s protitelesi lahko moti angiogenezo in prepreči invazijo tumorskih celic. V vaskularnih endotelijskih celicah angiogenezo, inducirano s proteinom HIV-1 Tat, posreduje VEGFR2. Tat specifično veže in aktivira VEGFR2. Angiogenezo, ki jo povzroči tat, zavirajo sredstva, ki lahko blokirajo VEGFR2.
Fibroblastni rastni faktor (FGF)
Družina FGF trenutno vključuje 19 različnih proteinov. Sprva sta bili značilni dve obliki: kisla (aFGF) in bazična (bFGF).
a in bFGF sta produkta različnih genov in imata do 53 % homologijo. Molekulo aFGF predstavlja enostavna polipeptidna veriga z m.m. 16,8 kDa. Mm. različnih oblik bFGF sega od 16,8 do 25 kDa. Funkcionalne razlike med oblikami bFGF niso bile ugotovljene.
Biološka aktivnost FGF je raznolika. So mitogeni za različne celice nevroektodermalnega in mezenhimskega izvora, potencialni mitogeni in stimulatorji angiogeneze, podpirajo in spodbujajo diferenciacijo celic različnih tipov nevronov in vivo in in vitro. Poleg a in bFGF družina vključuje onkoproteine int-2 (FGF-3) in hst (FGF-4), FGF-5, keratinocitni rastni faktor in vaskularni endotelijski rastni faktor. FGF-3 in -4 sta tesno povezana z bFGF, ki je sam verjetno potencialni onkogen. Klinični podatki podpirajo vlogo bFGF pri tumorski neoangiogenezi. Tako je povečanje ravni tega faktorja povezano s stopnjo agresivnosti procesa pri številnih solidnih tumorjih, levkemijah in limfomih pri otrocih in odraslih in lahko služi kot napovedni dejavnik za agresivnost tumorskega procesa. bFGF je bistven za razvoj in vzdrževanje žilnega sistema med embriogenezo in je tudi glavni angiogeni dejavnik pri zgodnjem okrevanju in srčno-žilnih boleznih.
Epidermalni rastni faktor (EGF)
EGF - globularni protein z m.m. 6,4 kDa, sestavljen iz 53 aminokislinskih ostankov, ki deluje kot močan mitogen na različne celice endodermalnega, ektodermalnega in mezodermalnega izvora. EGF se nahaja v krvi, cerebrospinalni tekočini, mleku, slini, želodčnem in trebušnem soku. Urinski rastni faktor, znan kot urogastron, je prav tako identičen EGF. Glavno mesto sinteze EGF so žleze slinavke. EGF nadzoruje in spodbuja proliferacijo epidermalnih in epitelijskih celic, vključno s fibroblasti, ledvičnim epitelijem, glialnimi celicami, celicami granuloze jajčnikov in celicami ščitnice in vitro. EGF spodbuja tudi proliferacijo embrionalnih celic in poveča sproščanje kalcija iz kostnega tkiva. Spodbuja resorpcijo kosti in je močan kemoatraktant za fibroblaste in epitelne celice. EGF sam in v kombinaciji z drugimi citokini je kritičen dejavnik pri celjenju ran in angiogenezi. Deluje tudi kot zaviralec izločanja želodčne kisline. Nekatere telesne tekočine, kot so slina, urin, želodčni sok, semenska tekočina in mleko, vsebujejo visoke ravni EGF.
EGF igra pomembno vlogo pri rakotvornosti. Pod določenimi pogoji lahko povzroči malignost celic. EGF inducira protoonkogene c-fos in c-myc. Biološki učinki imunoreaktivnega EGF so podobni učinkom TGF-α. Pomembno je omeniti, da se oba faktorja vežeta na iste receptorje. Vendar je EGF 50 % bolj učinkovit kot TGF-α.
Transformacijski rastni faktor α (TGF-α)
Glavni vir TGF-α so karcinomi. Makrofagi in keratinociti (možno tudi druge epitelne celice) izločajo tudi TGF-α. TGF-α stimulira fibroblaste, razvoj endotelija. Je angiogeni dejavnik. Tako kot EGF je tudi TGF-α vključen v regulacijo celične proliferacije in tudi v regulacijo rasti tumorskih celic.
Transformacijski rastni faktor β (TGF-β)
Družina TGF-β vključuje skupino homolognih heterodimernih proteinov TGFβ-1, -2, -3 in -4. Glavna izoforma, ki jo izločajo celice imunski sistem, je TGF-β1. Vsi TGF-β so sestavljeni iz 112 aminokislinskih ostankov. Struktura TGF-β2 ima 50 % homologijo s TGF-β1 pri prvih 20 aminokislinskih ostankih in 85 % pri fragmentu 21-36. Razlik v funkcionalni aktivnosti med TGF-β1 in -β2 niso našli. TGF-β proizvajajo številne vrste celic in tkiv: aktivirani T-limfociti in makrofagi, trombociti, ledvice, placenta.
Faktor se proizvaja v neaktivni obliki, ki poleg glavnega dimera vsebuje tudi fragmente dodatnih verig prekurzorske molekule. Aktivacija poteka v obliki cepitve teh fragmentov s pomočjo proteinaz (plazmin, katepsin itd.). Različne celice služijo tudi kot tarče za TGF-β, saj je izražanje njegovega receptorja z visoko afiniteto široko razširjeno. Ko TGFβ deluje na imunski sistem, prevladujejo zaviralni učinki. Faktor zavira hematopoezo, sintezo vnetnih citokinov, odziv limfocitov na IL-2, -4 in -7, tvorbo citotoksičnih NK in T celic. Hkrati krepi sintezo beljakovin v medceličnem matriksu, pospešuje celjenje ran in ima anabolični učinek.
Kar zadeva polimorfonuklearne levkocite, TGF-β deluje kot antagonist vnetnih citokinov. Izklop gena TGF-β vodi do razvoja usodne generalizirane vnetne patologije, ki temelji na avtoimunskem procesu. Je torej element inverzne regulacije imunskega odziva in predvsem vnetnega odgovora. Hkrati je TGF-β pomemben tudi za razvoj humoralnega odgovora: preklopi biosintezo imunoglobulinov na izotip IgA. Spodbuja angiogenezo. Raven TGF-β v krvni plazmi pozitivno korelira z vaskularizacijo tumorja.
Faktor rasti trombocitov (PDGF)
PDGF je eden od potencialnih mitogenih polipeptidov, ki jih najdemo v človeški krvi. Sestavljen je iz dveh verig: A in B, povezanih v AA-, BB- in AB-izoformah. Te tri izooblike se razlikujejo tako po funkcionalnih lastnostih kot po načinu izločanja. Medtem ko se obliki AA in AB hitro izločita iz celice proizvajalke, ostaja oblika BB v veliki meri povezana s celico proizvajalko. Samo dimerne oblike PDGF se lahko vežejo na receptorje. Ugotovljeni sta bili dve različni vrsti receptorjev. Receptor α veže polipeptid A ali B, medtem ko se receptor β veže samo na polipeptid B. Celoten spekter bioloških učinkov je posledica teh treh molekul PDGF in dveh receptorjev, njihove različne ekspresije in kompleksnih znotrajceličnih mehanizmov regulacije njihove aktivnosti. Vir PDGF v serumu so α-granule trombocitov, čeprav lahko ta faktor proizvajajo tudi makrofagi in endotelne celice. Na določenih stopnjah kot vir PDGF služijo tudi celice placente in gladke mišične celice aorte novorojenčka.
Izoformo AA prednostno izločajo fibroblasti, vaskularne gladke mišične celice, osteoblasti, astrociti, celične linije COLO (karcinom kolona) in WLM (Wilmov tumor). Sinteza BB je povezana z makrofagi, celicami Langerhansovih otočkov, neangiogenim epitelijem in celično linijo SW (tiroidnega karcinoma). Med celicami, ki proizvajajo obe verigi (A in B), so znani nevroni, mezangialne celice ledvic, celične linije glioma in mezotelioma ter trombociti. Začetni podatki so pokazali, da so človeške trombocite vsebovale približno 70 % PDGF-AB in 30 % -BB. Vendar pa so novejše študije pokazale, da je možnih do 70 % PDGF-AA, prejšnji podatki pa so artefakt. Vrsta izločenega dimera PDGF je odvisna od proizvedene mRNA, nanjo pa lahko vplivajo tudi učinkovitost prevajanja, izločanje in znotrajcelična razgradnja.
Strukturna identiteta verige B in protoonkogena c-sis nakazuje, da lahko PDGF igra vlogo pri maligni transformaciji okuženih celic, ki jo povzroča virus. PDGF sodeluje pri uravnavanju akutnega vnetja, celjenju ran in nastajanju brazgotin. PDGF, ki se sprosti iz alveolarnih makrofagov, je vpleten v razvoj pljučne fibroze. Ugotovljeno je bilo tudi, da je razvoj ateroskleroze, glomerulonefritisa, mielofibroze in nastanek keloidov povezan s PDGF. Tako kot EGF tudi PDGF inducira izražanje protoonkogenov, kot so fos, myc in jun. PDGF je prav tako vseprisoten v nevronih CNS, kjer naj bi imel pomembno vlogo pri preživetju in regeneraciji celic ter pri posredovanju proliferacije in diferenciacije glialnih celic.
Placentalni rastni faktor (PlGF)
PlGF - glikoprotein c m.m. 46-50 kDa, ki pripada družini VEGF (42 % homologija z VEGF). PlGF je tudi homologen, čeprav bolj oddaljen, družini rastnih faktorjev PDGF. Obstajata dve izoobliki PlGF: -1 in -2, ki se razlikujeta po prisotnosti domene, ki veže heparin, v PlGF-2. PlGF zagotavlja proliferacijo ekstraviloznega trofoblasta. Kot pove že ime, je bil PlGF prvič identificiran v normalnih pogojih v človeški placenti. Izražen je tudi v drugih tkivih, kot so kapilare in endotelij popkovnične vene, kostni mozeg, maternica, celice NK in keratinociti. PlGF je povišan tudi pri različnih patoloških stanjih, vključno s celjenjem ran in nastankom tumorjev. V primerjavi z VEGF je vloga PlGF pri neovaskularizaciji manj dobro razumljena. Lahko podaljša življenjsko dobo, rast in migracijo endotelijskih celic in vitro ter spodbuja vaskularizacijo v nekaterih modelih in vivo. Aktivnost PlGF se lahko kaže z neposredno interakcijo faktorja z VEGFR1. Predlagano je bilo, da VEGFR1 deluje kot rezervoar za VEGF in da PlGF z vezavo na receptor nadomesti VEGF in ga sprosti, da aktivira VEGFR2. PlGF lahko sinergistično poveča angiogenezo, ki jo povzroča VEGF, in vaskularno prepustnost. Koncentracija PlGF se poveča 4-krat od konca prvega do konca drugega trimesečja fiziološko potekajoče nosečnosti.
Hepatocitni rastni faktor (HGF)
HGF, imenovan tudi faktor sipanja (SF), je sestavljen iz dveh podenot, povezanih z disulfidno vezjo: α (69 kDa) in β (34 kDa). HGF je večnamenski citokin, ki deluje kot mitogen, kar je povezano z njegovo funkcijo pri organogenezi in obnavljanju tkiv. Ima sposobnost spodbujanja tvorbe krvnih žil in celične proliferacije, kar kaže na njegovo vpletenost v maligno rast in metastaze v pljučih, dojkah, trebušni slinavki, adenokarcinomu, multiplem mielomu in hepatocelularnem karcinomu. V tumorskih celicah raka dojke HGF močno inducira izražanje bcl-x in tako zavira apoptozo. HGF nenehno proizvajajo stromalne celice kostni mozeg in spodbuja hematopoezo.
Angiogenin (ANG)
ANG je enoverižni neglikoziliran polipeptid z m.m. 14 kDa, ki spada v družino ribonukleaz RISBASE (ribonukleaze s posebnimi biološkimi funkcijami). Molekule te družine ne izkazujejo samo ribonukleazne aktivnosti, ampak imajo tudi posebne biološke učinke. Zaporedje ANG je 35 % identično pankreasni ribonukleazi. Dokazano je, da je človeški angiogenin 75 % identičen mišjemu ANG na ravni aminokislin in »deluje« v mišjih sistemih. ANG izražajo endotelijske celice, celice gladkega mišičja, fibroblasti, stebrasti intestinalni epitelij, limfociti, celice primarnega adenokarcinoma in nekatere tumorske celične linije. Angiogeninski receptor ni znan. Menijo, da je aktin kot receptor ali vezavna molekula nujen za manifestacijo delovanja angiogenina.
Funkcionalno je ANG najpogosteje povezan s procesom angiogeneze. Menijo, da se sprva veže na aktin, nato pa pride do disociacije kompleksa aktin-ANG, čemur sledi aktivacija tkivnega aktivatorja plazminogena. Posledično se tvori plazmin, ki spodbuja razgradnjo komponent bazalne membrane, kot sta laminin in fibronektin. Uničenje bazalne membrane je predpogoj za migracijo endotelijskih celic med neovaskularizacijo. Čeprav se zdi, da ANG deluje pretežno ekstravaskularno ali perivaskularno, je bil krožeči ANG odkrit v normalnem serumu v koncentracijah reda ng/mL. Pri patoloških procesih so ugotovili povišane vrednosti ANG pri bolnikih z rakom trebušne slinavke in arterijsko okluzijo.
Angiopoetini-1 in -2 (Ang)
Ang-1 in -2 sta glikoproteina, ki spadata v družino rastnih faktorjev, ki uravnavajo razvoj žilnega tkiva. Ang-1 je sestavljen iz 498 aminokislinskih ostankov, Ang-2 - iz 467. AA sekvenci Ang-1 in -2 sta 60% enaki. Oba Angs interagirata z receptorjem tirozin kinaze-2 (Tie-2), ki je prisoten predvsem na endotelijskih celicah. Vendar pa obstajajo vsaj tri alternativne variante spajanja Ang-1, pri čemer dve alternativni obliki ne moreta aktivirati Tie-2. Tako delujejo kot endogeni zaviralci glavne aktivne oblike Ang-1. Poleg tega Ang-1 in -2 delujeta kot konkurenta v interakciji z receptorjem Tie-2, zato Ang-2, odvisno od tipa celice, deluje bodisi kot supresor ali aktivator receptorja Tie-2.
Ang-1 in -2 se aktivno izražata v zarodku s hitrim razvojem žilnega tkiva. Delecija gena Ang-1 vodi do smrtnih posledic pri zarodku zaradi resnih malformacij v razvoju srca in krvnih žil. Čeprav Ang-2 nima tako pomembne vloge kot Ang-1 pri nastanku žilnega sistema zarodka, je v njegovi odsotnosti oslabljena tudi vaskularizacija, kar povzroči zgodnjo smrt. V odraslem organizmu Ang-1 sintetizirajo predvsem endotelne celice, megakariociti in trombociti, medtem ko se Ang-2 izraža lokalno: v jajčnikih, maternici in placenti. Ang-1 uravnava razvoj in preoblikovanje krvnih žil, povečuje preživetje endotelijskih celic. Preživetje endotelijskih celic med interakcijo Ang-1 s Tie-2 vključuje mehanizem PI3K/AKT, celična migracija med isto interakcijo (ligand/receptor) pa poteka ob sodelovanju več kinaz (PI3K, PAK, FAK). Nasprotno, Ang-2, ki deluje sam, sproži smrt endotelijskih celic in regresijo žil, čeprav lahko sinergistično z VEGF spodbuja nastanek novih žil. Če Ang-1 deluje sinergistično z VEGF, njegova prekomerna proizvodnja povzroči povečano vaskularizacijo tkiva. Tako Ang-1 in -2 ponavadi delujeta kot antagonista, ki soregulirata vaskularno rast.
Delovanje angiopoetinov ni omejeno na vaskularni endotelij krvnega obtoka - lahko sodelujejo pri tvorbi žil limfoidnega sistema. Ang-1 ima druge biološke učinke, na primer poveča adhezijo in migracijo nevtrofilcev in eozinofilcev, uravnava prepustnost žilne stene. Prav tako lahko Ang-1 povzroči rast in preživetje živčnih celic, uravnava organizacijo dendritičnih celic. Povišane ravni Ang-1 in -2 povečajo angiogenezo raka. Visoke koncentracije Ang-1 v obtoku so povezane s hipertenzijo in rakom.
Pigmentni faktor epitelnega izvora (PEDF)
PEDF (50 kDa MW, spada v družino serpinov) je bil najprej identificiran kot faktor, ki ga izločajo epitelijske celice mrežnice in spodbuja preživetje nevronov in vitro in in vivo. Po drugi strani pa se je pokazalo, da ima PEDF lastnost induciranja apoptoze kapilarnih endotelijskih celic, s čimer ohranja avaskularno naravo mrežnice. Pri številnih oftalmoloških boleznih, za katere je značilna disregulacija inervacije in mikrovaskulature mrežnice, je PEDF pomemben regulator očesnih bolezni. Poleg tega se je pokazalo, da ima PEDF večnamensko protitumorsko aktivnost pri eksperimentalnem nevroblastomu, saj PEDF, ki ga proizvajajo Schwannove celice, inducira diferenciran, manj maligni fenotip v celicah nevroblastoma, spodbuja nadaljnjo rast in preživetje Schwannovih celic ter zavira angiogenezo.
Dušikov oksid (NO)
Biološki učinek NO je bil splošno priznan od njegove identifikacije kot od endotelija odvisnega sproščujočega faktorja (EDRF), odgovornega za močne vazodilatacijske lastnosti. Od takrat je bil NO opredeljen kot pleiotropni biološki mediator, ki uravnava različne funkcije: od živčnega delovanja do regulacije imunskega sistema. Je prosti radikal s kratkim razpolovnim časom in vivo približno nekaj sekund. V zvezi s tem se za posredno določanje NO v bioloških tekočinah uporablja raven stabilnejših metabolitov NO, nitrita (NO 2-) in nitrata (NO 3-). Primeri vključujejo spremenjene ravni, povezane s sepso, reprodukcijo, okužbami, hipertenzijo, telesna aktivnost, diabetes tipa 2, hipoksija in rak.
Med oksidacijo L-arginina s sodelovanjem NADPH nastane NO. Oksidacija poteka s sodelovanjem ene od treh izooblik encimov družine NO-sintaze (NOS) s tvorbo citrulina. Člani družine NOS vključujejo nevronske (nNOS/NOS1), endotelne (eNOS/NOS3) in inducibilne (iNOS/NOS2) sintaze NO. Kot že ime pove, je nNOS močno izražen v nevronih CNS in PNS, najdemo pa ga tudi v drugih tkivnih celicah, vključno z miociti skeletnih mišic, pljučnimi epitelnimi celicami in kožnimi mastociti; eNOS se izraža v endoteliju in ga je mogoče odkriti tudi v nevronih, kožnih fibroblastih, keratinocitih in folikularnih celicah. Ščitnica, hepatocitov in gladkih mišičnih celic. iNOS se izraža v različnih tkivih, vključno s hondrociti, epitelijskimi celicami, hepatociti, glialnim tkivom in v različnih vrstah celic imunskega sistema. Na splošno je izražanje eNOS in nNOS neprekinjeno in regulirano s Ca2+-odvisnim kalmodulinom, medtem ko je sinteza iNOS inducirana z endotoksinom in vnetnimi citokini in je relativno neobčutljiva na Ca2+ delovanje.
Ker je NO topen v lipidih, se ne skladišči, ampak sintetizira de novo in prosto difundira skozi membrane. Učinki NO v tarčnih celicah potekajo preko različnih mehanizmov. Na primer, z NO posredovana aktivacija encima gvanilil ciklaze (GC) katalizira tvorbo drugega posrednika 3',5'-cikličnega gvanozin monofosfata (cGMP). cGMP je vključen v številne biološke funkcije, kot so regulacija kontrakcije gladke mišice, življenjska doba celice, proliferacija, delovanje aksonov, sinaptična plastičnost, vnetje, angiogeneza in aktivnost kanalov, odvisnih od cikličnih nukleotidov. NO je tudi protitumorsko in protimikrobno sredstvo prek mehanizmov pretvorbe v peroksinitrit (ONOO-), tvorbe S-nitrozotiolov in izčrpavanja zalog arginina. Druga predlagana vloga NO je zaviranje mitohondrijevega dihanja z zaviranjem citokrom oksidaze. NO lahko tudi spremeni aktivnost proteina s post-translacijsko nitrozilacijo z njegovim dodatkom preko tiolne skupine cisteinskih ostankov.
Matrične metaloproteinaze (MMP)
Človeški MMP so družina encimov, ki razgrajujejo matriks. MMP imajo sposobnost razgradnje skoraj vseh komponent zunajceličnega matriksa v vezivnih tkivih (kolagen, fibronektin, laminin, proteoglikani itd.). Poleg podobnosti na ravni aminokislinskega zaporedja so vse MMP tvorjene iz neaktivnih prekurzorjev, ki se pod vplivom zunajceličnih dejavnikov pretvorijo v aktivne proteinaze, ki razgrajujejo substrat. Viri nastajanja MMP so fibroblasti, makrofagi, gladkomišične celice žilne stene in nevtrofilci. Vsak tumor je močan induktor nastajanja MMP v stromalnih celicah. Medtem ko spodbujajo invazijo tumorske rasti in metastaz, so MMP hkrati močni stimulatorji neoangiogeneze. Endogeni in sintetični zaviralci MMP se uporabljajo kot potencialna protitumorska sredstva, katerih glavni namen je zatiranje neoangiogeneze.
Endostatin
Biološko aktiven C-terminalni fragment kolagena VIII c m.m. 20 kDa. Spada v družino kolagenu podobnih beljakovin. Da bi preprečili prekomerno rast krvnih žil v normalnih pogojih, so procesi nastajanja novih in preoblikovanja prvotnih žil pod nadzorom ustreznih rastnih faktorjev. Med tumorsko angiogenezo opazimo prodiranje žil v rastočo tumorsko maso. Endostatin specifično zavira proliferacijo endotelijskih celic. Skladno s tem zavira angiogenezo in rast tumorja. Zdravljenje z endostatinom je trenutno v fazi I kliničnih preskušanj.
Drugi diagnostični rastni dejavniki
Faktor izvornih celic (SCF)
Proizvajalci SCF so stromalne celice kostnega mozga, fibroblasti, endotelne celice, Sertolijeve celice. Njegove glavne tarčne celice so hematopoetske matične celice, zgodnji predani predniki različnih hematopoetskih linij in mastociti. SCF aktivira diferenciacijo multipotentnih matičnih celic sinergistično z IL-3, GM-CSF in IL-7 ter eritropoetinom. Sodeluje pri vzdrževanju proliferacije najmlajših oblik prekurzorjev T-limfocitov v timusu. V primerjavi z mastociti je glavni rastni dejavnik in kemotaktično sredstvo.
SCF ima pomemben klinični pomen kot induktor diferenciacije matičnih celic limfocitov in eritrocitov. Opredelitev SCF je zelo pomembna pri zdravljenju mielodisplastičnega sindroma in po presaditvi kostnega mozga.
Inhibicijski faktor levkemičnih celic (LIF)
LIF poveča proliferacijo hematopoetskih potomcev. Dokazano je, da LIF povzroča sindrom kaheksije pri bolnikih z rakom. LIF receptorska komponenta gp130 (CD130) je del receptorjev za IL-6 in -11.
Nevrotropni faktor, pridobljen iz možganov (BDNF)
Skupaj s tem faktorjem družina vključuje živčni rastni faktor, nevrotropine-3 in -4. BDNF spodbuja rast živčnega tkiva, predvsem holinergičnih nevronov v možganih. Dokazano je, da BDNF vpliva na rast, metabolizem in notranjo strukturo teh celic. Glavni namen nevrotropnih faktorjev je zaščita nevronov pred apoptozo.UDK 616-006
VASKULARN ENDOTELIJSKI RASTNI FAKTOR JE KLINIČNO POMEMBEN INDIKATOR PRI MALIGNIH NEOPLAZMAH
© E.S. Gershtein, D.N. Kushlinsky, L.V. Adamyan, N.A. Ognerubov
Ključne besede: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumorji; napoved.
Predstavljeni so rezultati lastnih raziskav in najpomembnejši literaturni podatki, ki kažejo, da je ključni pozitivni regulator neoangiogeneze, vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF), klinično pomemben prognostični dejavnik pri različnih onkoloških boleznih, pa tudi tarča sodobnega časa. tarčna zdravila z različnimi mehanizmi delovanja. Njegova vloga serološkega označevalca za diagnozo in spremljanje zahteva nadaljnje študije.
Splošne predstave o regulaciji angiogeneze.
Angiogeneza je proces razvejanja novih kapilarnih procesov iz že obstoječih krvnih žil. Ta zapleten proces vključuje vsaj štiri stopnje: proteolitično uničenje bazalne membrane krvnih žil in zunajceličnega matriksa, migracijo in pritrditev endotelijskih celic, njihovo proliferacijo in končno tvorbo tubularnih struktur.
Trenutno se veliko pozornosti posveča problemu neoangiogeneze pri malignih tumorjih, saj ni dvoma, da se tumor ne more razvijati in rasti brez oblikovanja obsežne mreže žil v njem, ki celicam zagotavljajo kisik in hranila. Zanimanje za ta problem se je pojavilo pred več kot 30 leti, vendar je bila do relativno nedavnega glavna značilnost aktivnosti neoangiogeneze v tumorjih mikroskopska ocena gostote žil v tumorskem tkivu (mikrovaskularna gostota). In šele relativno nedavno, kot posledica študija molekularni mehanizmi angiogeneze, ki se intenzivno razvija v zadnjih 10-15 letih, je dokazana prisotnost številnih regulatornih angiogenih in antiangiogenih dejavnikov, katerih dinamično ravnovesje zagotavlja nastanek in širjenje novih žil znotraj tumorja.
Mnogi znani rastni faktorji in citokini so tako ali drugače vključeni v regulacijo angiogeneze, kot so bazični in kisli rastni faktorji fibroblastov (bFGF in cFGF), epidermalni rastni faktor (EGF), a- in P-transformacijski rastni faktorji (TGF). ), trombocitni endotelijski rastni faktor/timidin fosforilaza, faktor tumorske nekroze, interlevkini itd. Najpomembnejši pozitivni regulator angiogeneze pa je nedvomno vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF), imenovan tudi faktor vaskularne permeabilnosti. Edinstvenost tega proteina je v tem, da je za razliko od vseh drugih rastnih faktorjev mitogen le v odnosu do endotelijskih celic, čeprav zadnji podatki kažejo, da je možen tudi avtokrini.
učinek VEGF na tumorske celice, ki ga proizvajajo.
VEGF je homodimeren, visoko glikoziliran protein z mol. s težo 46-48 ^a, ki obstaja v vsaj petih izooblikah s podobno biološko aktivnostjo, vendar bistveno drugačno v biološki uporabnosti. Biološka uporabnost VEGF je v veliki meri določena z velikostjo molekule in je regulirana na genetski ravni med alternativnim spajanjem mRNA, pa tudi epigenomsko med proteolitičnim cepitvijo sintetiziranih molekul s sodelovanjem aktivacijskega sistema plazminogena. Ključni regulator rasti krvnih žil je VEGF A, medtem ko VEGF C uravnava predvsem limfangiogenezo. Glavne topne oblike VEGF A so molekule velikosti 121 in 165 aminokislinskih ostankov, ki so tudi glavne biološko aktivne oblike VEGF. Menijo, da je v tkivih glavna izooblika VEGF VEGF-165.
Na površini endotelijskih celic so 3 receptorji za VEGF, ki so značilne receptorske tirozin kinaze. Receptor VEGF tipa 1 (VEGFR1) je produkt gena flt-1, receptor tipa 2 (VEGFR2) se imenuje KDR in je človeški homolog produkta gena mišjega flk-1 in končno receptor tipa 3 (VEGFR3). ) je produkt gena flt-4. Za razliko od VEGFR1 in 2 ne interagira s klasičnim VEGF (VEGF A), temveč z njegovim homologom -VEGF C. Vsi receptorji so transmembranski glikoproteini z mol. masa 170235 ^a. Za učinkovito vezavo VEGF na receptorje je potrebna njegova interakcija s heparinu podobnimi komponentami zunajceličnega matriksa.
Poleg kaskade protein kinaze, aktivirane z mitogenom, ki je skupna večini receptorskih kinaz, ki uravnava izražanje genov, povezanih s proliferacijo, najpomembnejši geni, ki jih uravnava VEGF v endotelijskih celicah, vključujejo protoonkogen c-ets-1, ki kodira transkripcijski faktor Ets-1. Študije z uporabo in situ hibridizacije so pokazale, da se c-ets-1 izraža v endotelijskih celicah v zgodnjih fazah tvorbe krvi.
venske žile. Njegov produkt Ets-1 prispeva k manifestaciji angiogenega fenotipa teh celic, aktivira transkripcijo genov in kasnejšo sintezo proteinov najpomembnejših proteaz, ki cepijo zunajcelični matriks (ECM), kot je aktivator plazminogena tipa urokinaze, stromelizin, kolagenazo 1, MMP-1, 3 in 9, kot tudi p2-integrin. Ti učinki dosežejo največ 2 uri po dodatku VEGF (kot tudi drugih angiogenih faktorjev – cFGF, bFGF in EGF) in jih inhibirajo protismiselni oligonukleotidi za ets-1. Aktivacija proteaz ima tri pomembne posledice za stimulacijo angiogeneze: olajša razpad endotelijskih celic in njihovo invazijo v bazalno plast krvnih žil, ustvari produkte razgradnje ECM, ki spodbujajo kemotakso endotelijskih celic, ter aktivira in mobilizira rastne faktorje, ki se nahajajo v ECM.
Vloga VEGF pri uravnavanju angiogeneze pri raku dojke. Prvi dokaz o razmerju med ekspresijo VEGF in aktivnostjo angiogeneze pri tumorjih dojke je bil pridobljen na kliničnem materialu in objavljen v letih 1994-1995. skupina japonskih raziskovalcev. V prvi imunohistokemični študiji, ki je zajela 103 bolnice z rakom dojke, so pokazali, da je gostota mikrožil in njeno povečanje, ugotovljeno z imunokemijskim barvanjem za antigen faktorja VIII, značilno večja pri tumorjih z intenzivnim barvanjem na VEGF kot pri tumorjih s šibkim barvanjem. . VEGF je lokaliziran predvsem v citoplazmi tumorskih celic. Kasneje so pregledano skupino bolnikov razširili na 328 oseb in s potrditvijo zgornjih vzorcev tudi pokazali, da izražanje VEGF korelira z izražanjem drugega angiogenega faktorja, faktorja rasti endotelijskih celic trombocitov. Kasneje so ti avtorji izvedli kvantitativni encimski imunski test vsebnosti VEGF v tkivih primarnega raka dojke in pokazali, da je koncentracija VEGF v visoko vaskulariziranih tumorjih bistveno višja kot v slabo vaskulariziranih. Hkrati ni bila ugotovljena povezava med nivoji VEGF v tkivih in dvema drugima potencialno angiogenima faktorjema - bFGF in rastnim faktorjem hepatocitov. Koncentracija teh dveh dejavnikov tudi ni bila v korelaciji z gostoto mikrožil.
Prišli so tudi do zanimivih podatkov. Z imunohistokemično metodo so primerjali izražanje VEGF, njegovega receptorja flt-1, kot tudi bFGF ter a- in P-TGF pri raku dojke in okoliškem nepoškodovanem tkivu dojke. Izkazalo se je, da je bilo od vseh proučevanih parametrov samo izražanje VEGF v tumorskih celicah znatno povečano v primerjavi z normalnimi. Povečanje izražanja VEGF v tkivu raka dojke v primerjavi z netumorskim tkivom dojke je bilo dokazano tudi z metodami hibridizacije RNA. Vse te študije so zagotovile prve dokaze o pomembni vlogi VEGF pri neoangiogenezi pri raku dojke in njegovem pomenu za rast tumorja. Da bi bolj neposredno dokazali to hipotezo, so bile potrebne eksperimentalne študije za potrditev učinka VEGF, ki ga proizvajajo celice raka dojke, na angiogenezo. Eden prvih takšnih dokazov se lahko šteje za delo
H. Zhang et al. v kateri je bil gen VEGF-121 transfektiran v estrogen-
odvisna celična linija raka dojke MCF-7. Izražanje in izločanje VEGF s transfektiranimi celicami (V12) je bilo potrjeno s tremi neodvisnimi metodami: s kompetitivnim radioreceptorskim testom,
stimulacija rasti človeških endotelijskih celic in vitro in aktivacija angiogeneze v kunčji roženici. Po presaditvi v atimične miši so celice klona V12 povzročile bolj vaskularizirane tumorje z bolj heterogeno vaskularno porazdelitvijo kot prvotne celice MCF-7. Hitrost rasti tumorjev, ki izvirajo iz celic V12, je bila višja kot pri tumorjih iz originalne celične linije, ohranjena pa je hormonska odvisnost celic in njihova občutljivost na tamoksifen. Tako se je pokazalo, da imajo celice raka dojke, ki nenehno proizvajajo VEGF, določene prednosti pri rasti.
Drug dokaz o vplivu VEGF na rast in metastaze raka dojke so poskusi s protitelesi proti temu faktorju. Tako je bilo v poskusih na miših s spontanim rakom dojke, za katere je značilna visoka pogostost metastaz v pljučih, dokazano, da poliklonska protitelesa proti VEGF zavirajo rast tumorja za 44 % in zmanjšajo število in velikost pljučnih metastaz za 73 in 84 %. , oz.
Zanimiv model za testiranje angiogenega potenciala različnih tkiv dojk in vivo so razvili H. Lichtenbeld et al. . Postavili so koščke tumorja in normalnega tkiva dojke v komoro, ki jo tvori hrbtna kožna guba pri golih miših, in ocenili indukcijo angiogeneze. Ugotovljeno je bilo, da vsi vzorci raka dojke, pa tudi tkiva dojke s hiperplazijo in apokrino metaplazijo pomembno aktivirajo angiogenezo. Histološko nespremenjena področja tkiva dojke pri bolnicah z BC so stimulirala angiogenezo v 66 % primerov, medtem ko so zdrava tkiva žleze, pridobljena z kozmetična kirurgija ni vplivalo na angiogenezo. V vseh primerih je do indukcije angiogeneze prišlo vzporedno s proizvodnjo VEGF s tumorskimi ali mlečnimi celicami.
Klasični model regulacije angiogeneze pri raku dojke (tako kot pri vsakem drugem tumorju) predvideva prisotnost parakrinega sistema, v katerem rastni faktor (VEGF) proizvajajo tumorske celice, njegovi receptorji za zaznavanje signala pa se nahajajo na vaskularnih endotelijskih celicah. . Obstoj takega parakrinega sistema pri raku dojke dobro prikazujejo podatki L. Browna in sod. ki je preučeval vzorce tkiva 68 bolnic z rakom dojke s hibridizacijo RNK in situ in pokazal, da je v celicah invazivnega, metastatskega in intraduktalnega karcinoma dojke izrazita ekspresija VEGF, v celicah vaskularnega endotelija, ki prodira v te tumorje, pa izrazita ekspresija VEGFR1 in VEGFR2. Podobni podatki so bili pridobljeni in
A. Kranz idr. vendar so ti avtorji našli tudi VEGFR2 na duktalnih epitelijskih celicah mlečne žleze. Obstajajo še drugi dokazi, da se receptorji VEGF nahajajo na celicah raka dojke in da je stopnja izražanja VEGF in VEGFR2 v korelaciji z indeksom proliferacije tumorskih celic, ki ga določa izražanje antigena Ki-67. Dokazano je, da tako tumorske kot stromalne celice, izolirane iz primarnih karcinomov dojke pri človeku, in vitro proizvajajo VEGF in njegovo raven
proizvodnja je znatno višja kot pri ustreznih celicah, izoliranih iz normalne mlečne žleze. pri čemer PCR metoda Analiza je pokazala, da v tumorskih celicah prevladuje VEGFR2, v stromalnih celicah pa se izraža samo VEGFR1. Tako ima lahko VEGF poleg svoje neposredne funkcije spodbujanja neoangiogeneze pri raku dojke tudi vlogo avto/parakrinega regulatorja proliferacije tumorskih in/ali stromalnih celic.
Predvideva se, da ima lahko VEGF pri raku dojke še eno vlogo: prek receptorjev flt-1 spodbuja migracijo makrofagov v tumorsko tkivo, ki so posledično stimulatorji aniogeneze, saj sintetizirajo različne angiogene dejavnike, vključno z sam VEGF. Zlasti R. Leek et al. , ki je pregledal vzorce tkiva 96 bolnic z rakom dojke, je pokazal pozitivno korelacijo med indeksom infiltracije tumorskega tkiva z makrofagi in stopnjo izražanja VEGF.
Izločanje VEGF iz celic raka dojke povzročajo različni zunanji in notranji dejavniki. P. Scott et al. , ki je preučeval učinek hipoksije, hipoglikemije, kislosti, ženskih spolnih steroidnih hormonov in vitamina D na izražanje 4 glavnih izooblik VEGF s kultiviranimi celicami raka dojke z različnimi biološkimi fenotipi, je pokazal, da se te celice pomembno razlikujejo tako po bazalni ekspresiji mRNA VEGF in v njegovi občutljivosti na različne dražljaje. Hkrati se je izkazalo, da je hipoksija najmočnejši dražljaj, ki povzroča VEGF, za vse vrste celic, steroidni hormoni pa praktično niso vplivali na izražanje VEGF. R. Bos et al. je pokazalo, da ima HIF-1, transkripcijski faktor, induciran v pogojih hipoksije, pomembno vlogo pri stimulaciji neoangiogeneze pod delovanjem hipoksije, katere visoka raven v tkivu raka dojke je v korelaciji z visokim indeksom proliferacije, povečanim izražanjem VEGF in estrogenski receptorji (ER). Izražanje HIF-1 in VEGF v celicah raka dojke ni povezano s stopnjo izražanja induktorja apoptoze p53. Hkrati zaviralec apoptoze bcl-2 poveča stimulativni učinek hipoksije na sintezo VEGF v celicah raka dojke. Hibridizacijska analiza je pokazala, da imajo kloni celic MCF-7, ki prekomerno izražajo bcl-2 in imajo povečan metastatski potencial in odpornost na adriamicin, višjo stopnjo izražanja mRNA najbolj angiogenih izooblik VEGF - VEGF-121 in VEGF-165 - kot originalni klon MCF-7. V poskusih in vivo celice, transficirane z bcl-2, so tvorile tumorje z večjo stopnjo vaskularizacije in večjo ekspresijo VEGF kot prvotne celice.
Po drugi strani pa se je izkazalo, da VEGF, ki je dejavnik preživetja endotelijskih celic, ne le spodbuja njihovo proliferacijo, ampak tudi zavira apoptozo z indukcijo izražanja bcl-2. Zanimivo je, da je zagotovil VEGF podobno dejanje in na celice raka dojke, tj. bil je anti-apoptotični dejavnik ne samo za endotelne celice, ampak tudi za same tumorske celice.
Različni rastni faktorji in signalni sistemi so vključeni v regulacijo izražanja VEGF v celicah raka dojke. Zlasti več študij je pokazalo pomembno vlogo družine receptorskih tirozin kinaz erbB in nekaterih njihovih ligandov. Tako L. Yen et al. s pregledom plošče celičnih linij
Rak dojk s stabilno čezmerno ekspresijo "dispečerskega receptorja" erbB-2 brez liganda je pokazal, da heregulin-P1 v interakciji z receptorjema erbB-3 in erbB-4 inducira izločanje VEGF v večini proučevanih celičnih linij raka dojke, vendar ne v celicah normalnih mlečnih žlez. Bazalno izločanje VEGF je bilo povečano v celicah s povišanimi vrednostmi erbB-2, v celicah T47D s funkcionalno inaktiviranim erbB-2 pa ni bilo zmanjšano le bazalno izločanje VEGF, temveč tudi njegova indukcija pod delovanjem heregulina. Kasneje je bilo dokazano, da učinek heregulina na sintezo VEGF vključuje eno od klasičnih signalnih poti, ki vključuje fosfatidilinozitol 3-kinazo in protein kinazo B (Akt) s kasnejšo indukcijo transkripcijskega faktorja HIF-1, ki stimulira izražanje VEGF. gen.
Očitno nekateri rastni faktorji družine TGF-β delujejo tudi kot regulatorji izražanja VEGF v celicah raka dojke. Koncentracije TGF-P1 in VEGF v tumorjih in krvnem serumu bolnikov z BC so med seboj pozitivno korelirale, v poskusih in vitro pa je TGF-R1 povzročil proizvodnjo VEGF s kultiviranimi celicami MDA-MB-231. Druga študija je pokazala, da je hkratna visoka ekspresija TGF-β2 in njegovih receptorjev značilna za tumorje z visoko gostoto mikrožil.
Do sedaj je vprašanje hormonske regulacije sinteze VEGF v celicah raka dojke s spolnimi steroidi, zlasti estrogeni, še vedno sporno. Čeprav je estrogenska indukcija angiogeneze v endometriju, posredovane z VEGF, skoraj gotova, obstoj podobnega mehanizma pri raku dojke ni bil jasno dokazan. J. Rujhola idr. na celični kulturi MCF-7 je pokazala, da 17P-estradiol (E2) povzroči dvofazno povečanje sinteze mRNA VEGF, ki ga spremlja kopičenje ustreznega proteina v gojišču. Ta učinek je bil blokiran s čistim antiestrogenom ICI 182.780, kar nakazuje, da je RE sodeloval pri njegovem izvajanju. Hkrati pa klasični antiestrogeni, kot sta tamoksifen in toremifen, ki imata delni estrogeni učinek, ne samo, da nista zavirala učinka E2, ki inducira VEGF, ampak sta tudi sama inducirala sintezo VEGF. Sodelovanje ER pri regulaciji sinteze VEGF v celicah raka dojke potrjujejo tudi molekularno biološke študije S. Hyderja in sod. ki je dokazal, da gen VEGF vsebuje dve sekvenci, ki sta homologni klasičnim estrogensko občutljivim elementom in specifično vežeta obe obliki ER - ER-a in ER-r.
Vendar se zdi, da je narava delovanja estrogenov in antiestrogenov na sintezo VEGF odvisna od vrste celic raka dojke. Na primer, J. Kurebayashi et al. opisali celično linijo človeškega raka dojke KPL-1, katere rast je bila stimulirana z ICI 182.780 in zatrta z E2 in vivo. Istočasno je E2-propionat zaviral angiogenezo in spodbujal apoptozo v tumorjih, ki so jih tvorile celice KPL-1. V pogojih in vitro E2 ni vplival niti na sintezo VEGF niti na hitrost celične proliferacije. Zanimivo je, da je bila ekspresija VEGF v celicah KPL-1 inducirana z medroksiprogesteron acetatom.
Spodbujevalni učinek progestinov na sintezo VEGF v celicah raka dojke je opazil tudi S. Hyder et al. . Ob pregledu celične linije T47-D so ugotovili
je pokazalo, da je progesteron povečal raven VEGF v gojišču v odvisnosti od odmerka za 3-4 krat z največji učinek pri koncentraciji 10 nM. Hkrati drugi steroidni hormoni (estrogeni, androgeni in glukokortikoidi) niso vplivali na proizvodnjo VEGF, učinek progestinov pa se ni pokazal v drugih celičnih linijah BC - hormonsko odvisnih MCF-7, ZR-75 in hormonsko- neodvisen MDA-MB^L Učinek progesterona na T47-celice D je blokiral antiprogestin RU-486, kar kaže na vpletenost klasičnega receptorskega mehanizma. Zanimivo je, da po mnenju K. Heer et al. , je raven VEGF v krvnem serumu žensk znatno znižana v lutealni fazi menstrualnega cikla in je v inverzno razmerje na raven progesterona v serumu. Serum, pridobljen v tem obdobju, je stimuliral proizvodnjo VEGF s celicami MCF-7 v manjši meri kot serum, pridobljen v prvi fazi menstrualnega cikla.
Zanimive vzorce glede hormonske regulacije angiogeneze v mlečni žlezi so prikazali R. Greb in sod. . Po proučevanju izražanja glavnih izooblik VEGF-A v tumorjih in okoliških nepoškodovanih tkivih dojk pri 19 bolnicah z rakom dojke z analizo PCR so ugotovili, da so bile ravni izražanja VEGF v nespremenjeni žlezi znatno višje pri bolnicah v predmenopavzi kot pri bolnicah po menopavzi. , in se znatno zmanjša z naraščajočo starostjo bolnikov. Hkrati izražanje VEGF v tumorskem tkivu ni bilo odvisno od starosti in menopavznega statusa bolnic. Avtorji verjamejo, da je angiogeneza pod hormonskim nadzorom v normalni mlečni žlezi, medtem ko se ta nadzor izgubi pri maligni transformaciji.
Poleg zgoraj opisanega najbolj znanega in razširjenega angiogenega faktorja VEGF-A obstaja več drugih članov družine VEGF - VEGF-B, C in D. Delovanje VEGF-C je bilo najbolj jasno opredeljeno do danes. : domneva se, da stimulira limfangiogenezo z interakcijo z receptorji VEGF tipa 3 (flt-4), ki se nahajajo na limfnih endotelijskih celicah. V eksperimentalnih študijah na atimičnih miših z uporabo novega označevalca limfnega endotelija LYVE-1 je bilo dokazano, da čezmerna ekspresija VEGF-C v celicah raka dojke pomembno poveča intratumoralno limfangiogenezo in spodbudi nastanek metastaz v regionalnih bezgavkah in pljučih. Pred tem sta J. Kurebayashi et al. Analiza PCR je pokazala, da za razliko od VEGF-A in B, ki sta prisotna v tkivu raka dojke ne glede na stadij, VEGF-C odkrijemo le v tumorjih, ki so metastazirali v bezgavke, VEGF-D pa le v vnetnih dojkah. rak. Po drugi strani pa po R. Valtola et al. Ekspresija receptorja VEGF-C je res povečana pri invazivnih in intraduktalnih karcinomih dojke v primerjavi z normalnimi prsmi in fibroadenomi, vendar so povečano ekspresijo receptorjev VEGF tipa 3 opazili na endotelijskih celicah krvnih žil in ne limfnih. V zvezi s tem avtorji verjamejo, da je VEGF-C, tako kot VEGF-A, angiogeni dejavnik predvsem za krvne žile, čeprav ne izključujejo njegovega sodelovanja pri regulaciji limfangiogeneze.
Na splošno je vloga limfangiogeneze in ligand-receptorskih sistemov, ki jo uravnavajo v procesih metastaz solidnih tumorjev in zlasti raka dojke, podana v Zadnje čase vse več pozornosti.
Tako ima VEGF pomembno in raznoliko vlogo pri raku dojke, saj spodbuja rast in širjenje tumorja s kompleksnimi parakrinimi in avtokrinimi učinki tako neposredno na endotelij krvnih žil kot na tumorske celice in tumorsko stromo, makrofage, ki infiltrirajo tumor, in celice limfnih žil. . Vse to nam omogoča, da obravnavamo VEGF kot zelo obetaven biološki marker za prognozo raka dojke in eno glavnih tarč antiangiogene protitumorske terapije.
Klinični pomen določanja VEGF pri raku dojke. Zgoraj smo že navedli številna dela, v katerih je klinično gradivo različne metode(imunohistokemični, encimski imunski test, hibridizacija) so dokazali povečano izražanje VEGF v tkivu raka dojke in njegovo povezavo s tradicionalnimi indikatorji, ki označujejo aktivnost neoangiogeneze v tumorskem tkivu. Skupaj je glede na rezultate analize baze podatkov Medline raziskavo kliničnega pomena tkivne ravni VEGF pri raku dojke izvedlo 14 skupin raziskovalcev. Še enkrat je treba opozoriti, da so skoraj vsi raziskovalci, ki so izvajali takšne primerjave, ne glede na uporabljene metode, opazili povečanje izražanja VEGF v tkivu raka dojke v primerjavi z okoliškim histološko nespremenjenim tkivom dojke, pa tudi z benignimi tumorji. Pri vprašanju neposredne korelacije stopnje izražanja VEGF z aktivnostjo neoangiogeneze v tumorskem tkivu ni nobenih protislovij.
Prvič so neugodno prognostično vrednost visoke ekspresije VEGF pri raku dojke opazili M. Toi et al. . Po retrospektivni analizi rezultatov opazovanja 328 bolnikov, pri katerih so v tumorjih z imunohistokemijsko metodo ocenili ekspresijo VEGF, so pokazali, da je bila v univariatni analizi napoved preživetja brez relapsa pri bolnikih z VEGF pozitivnimi tumorji bistveno slabša kot pri bolnikih z VEGF negativnimi tumorji. Vrednost VEGF za prognozo preživetja brez bolezni so dokazali tudi M. Relf in sod. , ki je določil izražanje ustrezne RNA v tumorskih tkivih 64 bolnic z rakom dojke. Hkrati pa po A. Obermair et al. , raven VEGF, izmerjena z encimskim imunskim testom, ni pomembno vplivala na prognozo preživetja brez recidiva pri 89 bolnicah z rakom dojke, ki so jih pregledali.
Najbolj zanimive je treba priznati študije, v katerih so ocenili prognostično vrednost VEGF v različnih kliničnih skupinah bolnikov z rakom dojke, ob upoštevanju poteka zdravljenja. Rezultate tako podrobne analize objavljata dve skupini G. Gasparini et al. in B. Linderholm et al. . V članku iz leta 1997 so G. Gasparini et al. je predstavil rezultate kvantitativnega ELISA določanja koncentracije VEGF v citosolih tumorjev 260 bolnic z rakom dojke brez metastaz v bezgavkah. Bolnike so spremljali povprečno 66 mesecev. Hkrati VEGF v širokem razponu
cono koncentracije (od 5 do 6523 pg/mg beljakovin) smo našli pri 95 % tumorjev. Njegova raven ni bila v korelaciji z znanimi prognostičnimi dejavniki: starostjo in menopavznim statusom bolnic, histološkim tipom, velikostjo in receptorskim statusom tumorja, vendar se je po rezultatih izkazalo za statistično pomemben napovedovalec preživetja brez relapsa in celotnega preživetja. tako enofaktorske kot multivariatne analize. Tako je citosolna raven VEGF pokazatelj prognoze pri bolnicah z zgodnjimi stadiji raka dojke, kar omogoča oblikovanje skupine s povečanim tveganjem za ponovitev in metastaze.
V naslednji objavi te skupine avtorjev je primerjalno vrednotenje prognostična vrednost VEGF in drugega angiogenega dejavnika timidin fosforilaze (TF - platelet endothelial cell growth factor) pri bolnicah z rakom dojke z zasevki v bezgavkah, ki so prejemale kemoterapijo po shemi CMP (137 bolnic) ali hormonsko terapijo s tamoksifenom (164 bolnic). ). Citosolne koncentracije VEGF so bile v obeh skupinah podobne. V skupini bolnic, zdravljenih s tamoksifenom, je raven VEGF pozitivno korelirala s starostjo bolnic in bila obratno sorazmerna z ravnijo receptorjev za steroidne hormone. V tej skupini je bila raven VEGF, skupaj s številom prizadetih bezgavk in koncentracijami ER in RP, pomemben neodvisen prognostični dejavnik glede na rezultate univariatne in multivariatne analize. Najboljše rezultate zdravljenja s tamoksifenom je treba pričakovati pri bolnicah z nizka stopnja VEGF pri tumorjih in prizadetost manj kot treh bezgavk v tumorskem procesu. Nizka raven VEGF se je izkazala za neodvisen dejavnik ugodne prognoze v skupini bolnikov, ki so prejemali kemoterapijo. V tej skupini je TF tudi pomemben prognostični dejavnik, medtem ko je prognoza pri visoki ravni tega proteina ugodna.
V eni najnovejših raziskav O. Oa8ragipija in sod. Naravni zaviralci angiogeneze, trombospondini 1 in 2, so bili vključeni tudi v model multivariatne prognoze pri bolnicah z zgodnjimi stadiji raka dojke, vendar njihov prispevek k napovedi preživetja brez bolezni in celotnega preživetja ni bil statistično značilen.
Tako je po podatkih te raziskovalne skupine, povzetih v več preglednih člankih, VEGF najbolj obetaven napovedovalec aktivnosti angiogeneze pri raku dojke. Njegova visoka raven kaže
o slabi prognozi za zgodnji in napredovali rak dojke. Od ostalih regulatorjev angiogeneze ima le TF določen prispevek k prognozi, njegov pomen pa se kaže le med kemoterapijo napredovalega raka dojke.
Prognostično vrednost VEGF pri nenapredovalem raku dojke so preučevali in potrdili tudi B. buchiergoit et al. . Z encimskim imunskim testom so določili vsebnost VEGF v tumorskih citosolih 525 bolnic brez zasevkov v bezgavkah (T1.2K0M0), od katerih jih 500 ni bilo zdravljenih po operaciji. Mediana spremljanja je bila 46 mesecev. V nasprotju s prej citiranimi raziskovalci so ugotovili neposredno korelacijo med nivojem VEGF in velikostjo tumorja ter njegovo stopnjo malignosti ter inverzno korelacijo.
uravnavanje ravni VEGF in RE. Preživetje bolnikov s citosolnimi ravnmi VEGF pod mediano (2,4 pg/μg DNA) je bilo pomembno višje kot pri bolnikih z nižjimi ravnmi VEGF. Pri multivariatni analizi je bilo ugotovljeno, da so ravni VEGF najpomembnejši neodvisni prognostični dejavnik, ki presega druge znane meritve. Znatno zmanjšanje preživetja z visoko stopnjo VEGF v tumorju so ugotovili tudi v prognostično ugodni skupini EC-pozitivnih bolnikov.
Po mnenju istih avtorjev ima visoka raven VEGF tudi neugodno prognostično vrednost, kadar bolniki z zgodnjimi stadiji raka dojke prejemajo locoreginalno obsevanje. Pregledana sta bila 302 bolnika z medianim spremljanjem 56 mesecev. Izkazalo se je, da je VEGF edini neodvisni napovedovalec celokupnega preživetja (relativno tveganje 3,6) v celotni skupini, kot tudi preživetje brez bolezni v prognostično najugodnejših skupinah bolnikov z majhnimi tumorji (T1) in z EC-pozitivnimi tumorji. Avtorji menijo, da lahko visoka intratumorska raven VEGF ustreza radiorezistentnemu fenotipu in kaže na potrebo po dodatnem sistemskem zdravljenju.
B. Linderholm et al. pregledali tudi skupino 362 bolnic z rakom dojke z metastazami v bezgavkah, od katerih jih je 250 prejemalo adjuvantno hormonsko terapijo, 112 pa adjuvantno kemoterapijo. V univariatni analizi se je izkazalo, da je VEGF pomemben prognostični dejavnik za preživetje brez recidiva in celotno preživetje pri celotni populaciji bolnikov, pa tudi v skupini endokrinega zdravljenja. V skupini bolnikov, ki so prejemali kemoterapijo, je raven VEGF vplivala le na skupno preživetje. V multivariatni analizi je VEGF ohranil svoj pomen samo za celotno preživetje.
Tako je ta skupina raziskovalcev dokazala tudi napovedno vrednost VEGF za različne klinične skupine bolnic z rakom dojke, ki je bila povzeta v publikaciji iz leta 2000, ki je vsebovala podatke o 833 bolnicah z različnimi stadiji raka dojke. To delo je pokazalo tudi prognostično vrednost sočasne študije VEGF in mutantnega p53. Relativno tveganje smrti se je v skupini z visoko vsebnostjo VEGF in p53 pozitivnim povečalo za 2,7-krat in le pri
1,7 v skupinah z enim od teh neugodnih dejavnikov.
V kolaborativni študiji, ki je zajela skupno 495 bolnikov iz dveh različnih klinik, je na podlagi podatkov univariatne in multivariatne analize, ki je poleg tradicionalnih indikatorjev vključevala tudi angiogenin, bFGF in aktivatorje plazminogena, dokazano, da je VEGF najpomembnejši prognostični parameter za bolnice z rakom dojke brez metastaz v bezgavkah. In nedavno je druga skupina raziskovalcev potrdila, da intratumoralna raven VEGF dodatno prispeva k tako imenovanemu Nottinghamskemu prognostičnemu indeksu, ki se uporablja za oblikovanje skupin z visokim tveganjem med bolnicami z zgodnjimi stadiji raka dojke.
Posebno mesto zavzema študija J. Foekens et al. [b1], ki je z encimskim imunskim testom določil koncentracijo VEGF v konzerviranih izvlečkih.
največ 845 bolnic z napredovalim rakom dojke z razvitim ponovitvijo bolezni. Od teh bolnic jih je 618 prejemalo adjuvantno pooperativno hormonsko terapijo s tamoksifenom, 227 bolnic pa je prejemalo pooperativno kemoterapijo. Izkazalo se je, da je bila citosolna koncentracija VEGF v tumorjih bolnikov, pri katerih se je bolezen ponovila v prvem letu opazovanja, pomembno višja kot pri bolnikih z daljšim obdobjem brez ponovitve. Ugotovljeno je bilo tudi, da je raven VEGF v primarnem tumorju višja pri bolnikih s primarnimi metastazami v notranjih organih kot pri bolnikih z metastazami v kosteh in mehkih tkivih. Visoka raven VEGF je bila glede na enojno in multivariatno analizo neodvisen pokazatelj nizke občutljivosti tako na tamoksifen kot na kemoterapijo.
Na splošno je 13 od 14 študij, ki jih je objavilo 8 neodvisnih skupin raziskovalcev, pokazalo, da je visoka raven VEGF neodvisen dejavnik pri slabi prognozi raka dojke v zgodnjih fazah in/ali njegovi nizki občutljivosti na tradicionalne vrste hormonske ali kemoterapije. v napredovalem procesu. V zvezi s tem je bilo predlagano, da se razmisli o možnosti vključitve različnih antiangiogenih zdravil v režime adjuvantne terapije za bolnike z visokimi intratumorskimi koncentracijami VEGF. Opozoriti je treba, da enotni metodološki pristopi in merila za identifikacijo bolnikov z visokimi ravnmi VEGF še niso bili razviti, zato bodo za njihovo ustvarjanje potrebne nadaljnje skupne študije.
Vzporedno s preučevanjem kliničnega pomena tkivne ravni VEGF pri raku dojke se postavlja vprašanje, ali se povečano izražanje VEGF v tumorju odraža v ravni tega proteina v serumu/plazmi krvi in ali koncentracija krožečega VEGF je ustrezna značilnost njegove vsebnosti in proučuje se aktivnost angiogeneze v tumorju. V letih 1996-1997 Objavljene so bile prve študije, v katerih so dokazali zvišanje ravni VEGF v krvi bolnikov z rakom. Tako Y. Yamamoto et al. [b2], ki je pregledal veliko skupino bolnic in darovalcev, vključno s 137 bolnicami z rakom dojke, je ugotovil, da raven VEGF v krvnem serumu 8,8% bolnic z rakom dojke presega mejno vrednost, ki so jo določili 180 pg/. ml V tem primeru je serumska raven VEGF korelirala s prevalenco procesa in s stopnjo izražanja VEGF v tumorskem tkivu, glavna izooblika VEGF v serumu pa je bila VEGF-γ5.
L. Dirix et al. [b3] so pregledali skupino 132 bolnikov z metastatskim rakom z različnimi primarnimi diagnozami. Menili so, da je raven VEGF povišana, saj presega 95-odstotni interval zaupanja kontrolne skupine in znaša 500 pg/ml. VEGF je bil povišan pri 57 % bolnikov z nezdravljenim metastatskim rakom, ne glede na njegovo lokacijo. Med zdravljenjem se je raven VEGF povečala pri 2/3 bolnikov z napredovanjem bolezni in pri manj kot 10% bolnikov s pozitivno dinamiko.
P. Salven et al. [64] je tudi pokazalo, da je pri različnih vrstah tumorjev (vključno z rakom dojke) serumska raven VEGF pri diseminiranem raku (171711 pg/ml; mediana - 214 pg/ml) znatno višja kot pri zdravih darovalcih (1-177 pg). / ml; mediana - 17 pg / ml) in pri bolnikih z lokaliziranim procesom (8-664 pg / ml; mediana - 158 pg / ml). Pri 74 % nezdravljenih bolnikov
pri diseminiranem raku je raven VEGF v krvnem serumu presegla 200 pg/ml in se je po uspešnem zdravljenju znižala. Podobne vzorce so opazili A. Kraft et al. [b5]: po njihovih podatkih opazimo povišano raven VEGF v serumu 0-2G% bolnikov z lokaliziranim tumorskim procesom in 11-65% bolnikov z metastatskim procesom. Vendar je treba opozoriti, da so bile v tej študiji ravni VEGF pri zdravih darovalcih (30–1752 pg/mL; mediana 294 pg/mL; zgornji 95-odstotni interval zaupanja 883 pg/mL) znatno višje od tistih, o katerih so poročali drugi avtorji. V tej študiji, kot tudi v delu B. Zebrowski et al. [bb], so pokazali znatno povečanje koncentracije VEGF v ascitnih tekočinah pri bolnikih z rakom v primerjavi z ascitesom netumorskega izvora.
V kasnejšem delu so P. Salven et al. [b7] prikazuje rezultate določanja koncentracije VEGF v krvnem serumu 105 bolnic z benignimi in malignimi tumorji dojke. Pokazalo se je, da so ravni VEGF v krvnem serumu bolnikov z metastatskim rakom dojke (7-1347 pg/ml; mediana - 186 pg/ml) znatno povečane v primerjavi z bolniki z benignimi tumorji (2-328 pg/ml; mediana -57 pg/ml). Ravni VEGF pri bolnicah z lokalno napredovalim rakom dojke (11-539 pg/ml; mediana - 104 pg/ml) so tudi višje kot pri bolnicah z benignimi tumorji, vendar razlika ni statistično pomembna. Pri bolnikih z metastatskim rakom, ki so prejemali specifično zdravljenje, je bila raven VEGF znatno nižja kot pri bolnikih, ki so prejemali samo simptomatsko zdravljenje. Zanimivo je tudi, da je bila pri lokalno napredovalem procesu raven VEGF v krvnem serumu bolnikov z invazivnim duktalnim karcinomom (mediana - 107 pg / ml) bistveno višja kot pri bolnikih z invazivnim lobularnim rakom (mediana - 44 pg / ml). ), pri slednjih pa je bila celo nižja kot pri benignih tumorjih. Ta ugotovitev se dobro ujema s podatki A. Lee et al. [b8], ki je pokazal, da je vsebnost VEGF mRNA in proteina v tkivu duktalnega raka dojke značilno večja kot v tkivu lobularnega raka. Hkrati se duktalni in lobularni karcinom nista razlikovala v gostoti mikrožil in samo pri duktalnem karcinomu je bila neposredna korelacija med nivojem mRNA VEGF in indeksi proteinske in vaskularne gostote. Domnevamo lahko, da je VEGF regulator angiogeneze predvsem pri duktalnem raku dojke.
Zanimive so primerjalne študije, v katerih so vsebnost/izraženost VEGF hkrati določali v tumorskem tkivu in krvnem serumu. G. Callagy et al. [b9], ki je določal tkivno ekspresijo VEGF z imunohistokemijsko metodo, je ugotovil, da ta parameter, ne pa serumska koncentracija VEGF, korelira z gostoto mikrožil in stadijem raka dojke in je zato zanesljivejši prognostični dejavnik kot raven VEGF v krvnem serumu. Prav tako niso našli povezave med serumskimi nivoji VEGF in njegovo ekspresijo v tumorju.
Najbolj reprezentativno primerjalno študijo so opravili J. Adams in sod. . Določili so vsebnost VEGF v serumu in krvni plazmi ter izraženost VEGF v tumorju (imunohistokemično) 201 bolnici z lokaliziranim in napredovalim rakom dojke, benignimi tumorji dojke.
Leza in zdrave ženske. Pri metastatskem raku dojke so opazili znatno povečanje ravni VEGF tako v plazmi kot v krvnem serumu v primerjavi z normo. Tudi vsebnost VEGF v krvni plazmi pri bolnicah z metastatskim rakom dojke je bila pomembno povečana v primerjavi z bolnicami z benignimi tumorji in lokaliziranim rakom dojke. Pri lokaliziranem raku dojke so opazili le povečanje ravni VEGF v krvni plazmi v primerjavi s kontrolo. Avtorji verjamejo, da meritev VEGF v krvni plazmi v večji meri odraža njegovo proizvodnjo s strani tumorja, saj je serumski VEGF pretežno trombocitnega izvora. Paradoksalno je, da so bile najvišje ravni VEGF v serumu in plazmi ugotovljene pri bolnicah z rakom dojke v remisiji na zdravljenju s tamoksifenom. Raven krožečega VEGF ni bila v korelaciji z nobenim od znanih klinično-patoloških dejavnikov, vključno z mikrovaskularno gostoto in tkivno ekspresijo VRPP.
Tako se odpira možnost uporabe indikatorjev ravni VEGF v krvi (tako v serumu kot v plazmi) kot ustreznega nadomestka tkivne ekspresije tega proteina pri ocenjevanju aktivnosti angiogeneze pri raku dojke ter napovedovanju izida bolezni in učinkovitosti terapija še ni dokazana.
Od UECE odvisna angiogeneza kot tarča zdravljenja raka dojke pri raku dojke. Glede na ključno vlogo angiogeneze pri ohranjanju rasti in širjenja raka dojke ter ključno vlogo VEGF v tem procesu so številni avtorji že dolgo ugotovili, da je ciljno zaviranje izražanja VEGF in/ali njegovih učinkov lahko obetaven pristop k razvoju nove sheme za adjuvantno zdravljenje te bolezni. Predlagano je bilo, da se kot antiangiogena sredstva uporabljajo snovi, ki relativno nespecifično blokirajo interakcijo različnih rastnih faktorjev z receptorji tirozin kinaze, zlasti manj strupenih analogov suramina. Predpostavljalo se je tudi, da bi lahko bila antiangiogena sredstva še posebej učinkovita v kombinaciji z zdravili, aktiviranimi v hipoksičnih pogojih, saj bi zatiranje angiogeneze ustvarilo pogoje, ugodne za aktivacijo teh zdravil. Posebej je bilo poudarjeno dejstvo, da zgolj antiangiogena terapija najverjetneje ne vodi do regresije tumorja, temveč do ustavitve njegove nadaljnje rasti. V zvezi s tem je bila izpostavljena potreba po razvoju kliničnih in biokemičnih kriterijev za oceno učinkovitosti antiangiogenih zdravil.
Trenutno samo v ZDA poteka klinično preizkušanje več kot 20 zdravil, predvsem faze I, ki tako ali drugače vplivajo na angiogenezo. Med njimi so tako precej specifična zdravila, kot so monoklonska protitelesa v VEOP (GeneIeeI) in njegovih receptorjih (IMC-1C11), zaviralci notranje tirozin kinaze receptorja VEGF (na primer 7B6474), zaviralci prenosa mitogenega signala VEGF (SIII668 in 8III416), naravni (Neoya8-M ) in sintetični (Magita8Ia1;, Prinita8Ia1;, BMB-275291, COb-3) zaviralci matričnih proteinaz, naravni (angiostatin in endostatin) in sintetični (TYP-470) zaviralci proliferacije ali induktorji apoptozo (Combre8Ia1m) endotelijskih celic in
številna zdravila z drugačnim ali nejasnim mehanizmom delovanja.
I Royctap deli anti-angiogena zdravila na neposredne in posredne zaviralce angiogeneze. Nanaša se na neposredne inhibitorje snovi, ki neposredno vplivajo na endotelne celice. To so že omenjeni angiostatin, endostatin, TYP-470, Cob-NxaNn, pa tudi naravni zaviralci angiogeneze, kot so trombospondini, faktor pigmentni epitelij. Značilnost takšnih zdravil je, da praviloma ne povzročajo rezistence endotelijskih celic in se zato lahko uporabljajo dolgo časa. Med posredne zaviralce spadajo zdravila, ki vplivajo na tvorbo angiogenih faktorjev v tumorskih celicah ali blokirajo delovanje teh faktorjev v eni ali drugi fazi. To so monoklonska protitelesa ali protismiselni nukleotidi proti VEGF in njegovim receptorjem. Ker je delovanje posrednih zaviralcev neposredno povezano s tumorsko celico in njeno sposobnostjo proizvajanja angiogenih faktorjev, je verjetnost odpornosti na ta zdravila približno enaka kot pri tradicionalnih protitumorskih sredstvih.
Zanimanje za antiangiogeno zdravljenje raka je trenutno tako veliko, da se število objav, posvečenih predkliničnim in kliničnim študijam na tem področju, meri v stotinah, zato se bomo v tem pregledu osredotočili le na dela, ki so neposredno povezana z rakom dojke.
Klinično najnaprednejše je zdravilo z neznanim mehanizmom antiangiogenega delovanja - talidomid. V sedemdesetih letih prejšnjega stoletja uporabljali so ga kot pomirjevalo in je bilo prepovedano zaradi teratogenega stranskega učinka, ki je bil posledica njegovih antiangiogenih lastnosti. Trenutno potekajo poskusi uporabe antiangiogenega potenciala talidomida pri zdravljenju malignih tumorjev in je že v fazi II kliničnih preskušanj. Med 66 bolniki, vključenimi v to študijo, ki so vsak večer prejeli 100 mg talidomida, je bilo 12 bolnikov z rakom dojke. Pri bolnicah z rakom dojke ni bilo objektivnega odziva na zdravilo, čeprav so delni odziv ali stabilizacijo opazili pri 6 od 18 bolnic z rakom ledvic, vključenih v isto študijo.
Hkrati je bilo prej v poskusih indukcije angiogeneze v roženici zajca pod delovanjem klona celic MCP-7, ki proizvaja UEOP, dokazano, da je analog talidomida linomid v odmerku 100 mg /kg telesne teže ta proces učinkovito zavira.
M. A8apo e1 a1. je pokazalo, da je monoklonsko protitelo anti-VEGF MU833 zaviralo rast ksenograftov človeškega raka dojke pri golih miših. Vendar zaviralni učinek MU833 ni bil v korelaciji niti s količino VEGF, ki jo izloča tumor, niti z izražanjem receptorja VEGF. V drugih poskusih je presaditev sferoidov, ki jih tvorijo celice raka dojke linij MCP-7, 7R-75 in BK-VR-3, v podkožno hrbtno komoro atimičnih miši pokazala, da je monoklonsko protitelo proti VEGF A.4.6.1 pri dnevni odmerek 200 µg znatno zavira angiogeno aktivnost teh celičnih linij in poveča protitumorsko aktivnost doksorubicina v teh modelih.
Pomembna protitumorska aktivnost na ksenotransplantatih raka dojke je bila opažena tudi pri nizkomolekularnem specifičnem inhibitorju tirozin kinaze receptorja vEGF (oba tipa 1 in 2) - 7B4190. Enkratna peroralna uporaba tega zdravila v odmerkih, ki niso imeli neposrednega antiproliferativnega učinka na tumorske celice, je značilno zavirala rast nastalih tumorjev v velikosti okoli 0,5 cm3. Antiangiogeno delovanje proti ksenograftom raka dojke ima še en zaviralec tirozin-kinaze - dokaj dobro znano in že v kliničnih preskušanjih zdravilo 7B1839 (Ire88a), ki je selektivni zaviralec tirozin-kinaze receptorja EGF. Predpostavlja se, da to zdravilo ne deluje neposredno na receptorje VEGF, ampak zavira indukcijo sinteze VEGF pod delovanjem ligandov receptorja EGF. Očitno ima še en zaviralec EGF-odvisne mitogene signalne transdukcijske poti, Herceptin, humanizirano monoklonsko protitelo proti ErbB2/neu, očitno podoben posreden učinek na angiogenezo.
Učinkoviti zaviralci angiogeneze so tudi zdravila, ki motijo delovanje mikrotubulov. Tako je že leta 1997 Klauber N. ei a1. je pokazalo, da 2-metoksiestradiol in taksol, ki imata podobne lastnosti, zavirata angiogenezo, ki jo povzroča VEGF, za 54 % oziroma 37 %. Istočasno je 2-metoksiestradiol za 60 % zavrl rast raka dojke pri človeku, implantiranega v golih miših. Antiangiogene lastnosti taksola so dokazali tudi B. bau et al. pri miših z dobro vaskulariziranim transgenim tumorjem dojke MeL. Učinek se je pojavil pri necitotoksičnih odmerkih taksola (3-6 mg/kg/dan) in je bil povezan z zaviranjem izločanja VEGF.
To lastnost taksola naj bi uporabili za oceno učinkovitosti zdravljenja bolnic z metastatskim rakom dojke. Njihova študija je vključevala 14 bolnikov, ki so prejemali monoterapijo s taksolom v odmerku 175 mg/m2 IV v treh ciklusih po 21 dni. Pri vseh bolnikih je bila serumska raven VEGF določena z encimskim imunotestom pred začetkom zdravljenja in po vsakem od 21-dnevnih ciklusov. Pri 3 bolnikih so opazili delni odziv na zdravljenje, pri 6 - stabilizacijo in pri 5 - napredovanje bolezni. Serumske ravni VEGF pred zdravljenjem so bile znatno povišane pri 8 od 14 bolnikov. Povprečna raven VEGF se je po zdravljenju zmanjšala pri bolnikih z delnim odzivom in stabilizacijo in se ni bistveno spremenila pri bolnikih z napredovanjem. Poleg tega je bil odstotek normalizacije ravni VEGF ali njegovega zmanjšanja za več kot 50% bistveno višji pri bolnikih z delnim učinkom (5/9) kot pri bolnikih z napredovanjem (0/5). Avtorji verjamejo, da je stabilizacijski učinek taksola pri bolnicah z napredovalim rakom dojke lahko povezan z zaviranjem izločanja VEGF in posledično z zaviranjem angiogeneze.
Objavljeni poskusi na miših z imunsko pomanjkljivostjo so pokazali možnost uporabe genske terapije za zatiranje angiogeneze in zaviranje rasti raka dojke. Miši z zrelimi tumorji Mca-4 smo dvakrat v razmaku 7 dni v tumor vbrizgali plazmid, ki vsebuje gen endostatina, naravnega zaviralca angiogeneze. 14 dni po prvi injekciji,
zmanjšanje teže tumorjev pri poskusnih miših za 51 % v primerjavi s kontrolno skupino. Hkrati so opazili povečanje razdalje med tumorskimi celicami in najbližjimi žilami, zmanjšanje skupne gostote žil in povečanje apoptoze v tumorjih, ki vsebujejo in izražajo endostatinski gen.
Drug pristop genskega inženiringa k anti-angiogenemu zdravljenju raka dojke je uporaba anti-sense cDNA za VEGF. S.A. Im et al. celice človeškega raka dojke linije MDA231-MB smo transficirali z adenovirusnim vektorjem, ki je vseboval takšno cDNA, v VEGF-165 (Ad5CMV-alphaVEGF). V sistemu in vitro je ta transfekcija povzročila zmanjšanje izločanja VEGF brez pomembnega vpliva na rast celic. In vivo injiciranje Ad5CMV-alphaVEGF v tumorje, ki jih tvorijo celice MDA231-MB pri golih miših, je povzročilo zatiranje njihove rasti, zmanjšanje izražanja proteina VEGF v tumorskem tkivu in zmanjšanje mikrovaskularne gostote v primerjavi s skupino, ki je bila injicirana z vektor, ki ni vseboval anti-VEGF cDNA.
Tako je bila eksperimentalno dokazana možnost uporabe različnih vrst neposredne in posredne antiangiogene terapije pri zdravljenju bolnic z rakom dojke. Na žalost nobena od teh metod v kliniki še ni dokazano učinkovita. Poleg tega je večina avtorjev nagnjena k prepričanju, da antiangiogeno terapijo (zlasti neposredno), ki je pri velikih tumorjih pretežno citostatična in ne citotoksična, ne bi smeli uporabljati kot samostojno metodo zdravljenja, temveč kot pomemben dodatek standardnim terapevtskim režimom.
LITERATURA
1. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angiogeneza in fibrinolitični sistem // Semin. Thromb. hemost. 1996. V. 22. št. 6. Str. 517-524.
2. Ferrara N. Vloga vaskularnega endotelnega rastnega faktorja pri patološki angiogenezi // Breast Cancer Res. zdravljenje. 1995. V. 36. št. 2. Str. 127137.
3. Vandenbunder B., Wernert N., Queva C., Desbiens X., Stehelin D. Ali transkripcijski faktor c-ets1 sodeluje pri regulaciji angiogeneze in tumorske invazije? // Folia Biol. (Praha). 1994. V. 40. št. 5. Str. 301-313.
4. Sato Y. Transkripcijski faktor ETS-1 kot molekularna tarča za inhibicijo angiogeneze // Hum. celica. 1998. V. 11. št. 4. Str. 207-214.
5. Iwasaka C., Tanaka K., Abe M., Sato Y. Ets-1 uravnava angiogenezo z indukcijo izražanja aktivatorja plazminogena tipa urokinaze in matrične metaloproteinaze-1 ter migracijo vaskularnih endotelijskih celic // J. Cell Physiol . 1996. V. 169. št. 3. Str. 522-531.
6. Mignatti P., Rifkin D.B. Aktivatorji plazminogena in matrične metaloproteinaze v angiogenezi // Enzimski protein. 1996. V. 49. P. 117-137.
7. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Povezava ekspresije vaskularnega endotelnega rastnega faktorja z angiogenezo tumorja in z zgodnjo ponovitvijo primarnega raka dojke // Jpn. J. Cancer Res. 1994. V. 85. št. 10. Str. 1045-1049.
8. Toi M., Inada K., Hoshina S., Suzuki H., Kondo S., Tominaga T. Vaskularni endotelijski rastni faktor in rastni faktor endotelijskih celic, pridobljen iz trombocitov, sta pogosto sočasno izražena pri visoko vaskulariziranem raku dojke pri človeku // Clin. Cancer Res. 1995. V. 1. št. 9. Str. 961-964.
9. Toi M., Inada K., Suzuki H., Tominaga T. Tumorska angiogeneza pri raku dojke: njen pomen kot prognostični indikator in povezava z izražanjem vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja // Breast Cancer Res. zdravljenje. 1995. V. 36. št. 2. Str. 193-204.
10. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Kvantitativna analiza vaskularnega endotelnega rastnega faktorja pri primarnem raku dojke // Rak. 1996. V. 77. št. 6. Str. 1101-1106.
11. Toi M., Yamamoto Y., Taniguchi T., Saji S., Hayashi K., Tominaga T. Regulacija ekspresije endotelnega rastnega faktorja pri raku dojke // Gan To Kagaku Ryoho. 1996. V. 23. Suppl. 1. Str. 75-79.
12. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Izražanje vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja, njegovega receptorja in drugih angiogenih dejavnikov
dejavniki raka dojke pri človeku // Cancer Res. 1996. V. 56. št. 9. Str. 2013-2016.
13. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Kitsuki H., Uchiyama A., Kuroki S., Tanaka M., Torisu M. Vaskularni endotelijski rastni faktor in trombocitni rastni faktor sta potencialna angiogena in metastatski dejavniki pri raku dojke pri človeku // Surgery. 1996. V. 119. št. 3.
14. Anan K., Morisaki T., Katano M., Ikubo A., Tsukahara Y., Kojima M., Uchiyama A., Kuroki S., Torisu M., Tanaka M. Ocena c-erbB2 in rasti vaskularnega endotelija ekspresija faktorske mRNA v aspiratih s tanko iglo iz zgodnjih karcinomov dojke: predoperativno določanje malignega potenciala // Eur. J. Surg. onkol. 1998. V. 24. št. 1. Str. 28-33.
15. Guidi A.J., Schnitt S.J., Fischer L., Tognazzi K., Harris J.R., Dvorak H.F., Brown L.F. Faktor vaskularne prepustnosti (vaskularni endotelijski rastni faktor) in angiogeneza pri bolnikih z duktalnim karcinomom in situ dojke // Rak. 1997. V. 80. št. 10. P. 1945-1953.
16. Zhang H.T., Craft P., Scott P.A., Ziche M., Weich H.A., Harris A.L., Bicknell R. Povečanje rasti tumorja in vaskularne gostote s transfekcijo rastnega faktorja vaskularnih endotelijskih celic v celice karcinoma človeške dojke MCF-7 // J. Natl. Cancer Inst. 1995. V. 87. št. 3. Str. 213-219.
17. Wang G., Dong Z., Xu G., Yang Z., Shou C., WangN., Liu T. Učinek protiteles proti vaskularnemu endotelijskemu rastnemu faktorju na rast tumorja in metastaze // J. Cancer Res. Clin. onkol. 1998. V. 124. št. 11. Str. 615-620.
18. Wang G., Yang Z., Shou C. // Chung Hua Chung Liu Tsa Chih. 1997. V. 19. št. 6. Str. 407-409.
19. Lichtenbeld H.C., Barendsz-Janson A.F., van Essen H., Struijker Boudier H., Grifioen A.W., Hillen H.F. Angiogenski potencial malignih in nemalignih tkiv človeških dojk v modelu angiogeneze in vivo // Int. J. Rak. 1998. V. 77. št. 3. Str. 455-459.
20. Brown L.F., Guidi A.J., Schnitt S.J., Van De Water L., Iruela-Arispe M.L., Yeo T.K., Tognazzi K., Dvorak H.F. Tvorba vaskularne strome pri karcinomu in situ, invazivnem karcinomu in metastatskem karcinomu dojke // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. št. 5. Str. 1041-1056.
21. Kranz A., Mattfeldt T., Waltenberger J. Molekularni mediatorji tumorske angiogeneze: povečana ekspresija in aktivacija receptorja vaskularnega endotelnega rastnega faktorja KDR pri primarnem raku dojke // Int. J. Rak. 1999. V. 84. št. 3. Str. 293-298.
22. Xie B., Tam N.N., Tsao S.W., Wong Y.C. Sočasno izražanje vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja (VEGF) in njegovih receptorjev (flk-1 in flt-1) pri hormonsko povzročenem raku dojke pri žlahtni podgani // Br. J. Rak.
1999. V. 81. št. 8. Str. 1335-1343.
23. Speirs V., Atkin S.L. Proizvodnja VEGF in izražanje receptorjev VEGF Flt-1 in KDR v primarnih kulturah epitelijskih in stromalnih celic, pridobljenih iz tumorjev dojke // Br. J. Rak. 1999. V. 80. št. 5-6. Str. 898-903.
24. Leek R.D., Hunt N.C., Landers R.J., Lewis C.E., Royds J.A., Harris A.L. Infiltracija makrofagov je povezana z izražanjem VEGF in EGFR pri raku dojke // J. Pathol. 2000. V. 190. št. 4. Str. 430-436.
25. Scott P.A., Gleadle J.M., Bicknell R., Harris A.L. Vloga sistema za zaznavanje hipoksije, kislosti in reproduktivnih hormonov pri variabilnosti indukcije vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v celičnih linijah človeškega karcinoma dojke // Int. J. Rak. 1998. V. 75. št. 5. Str. 706-712.
26. Bos R., Zhong H., Hanrahan C.F., Mommers E.C., Semenza G.L., Pinedo H.M., Abeloff M.D., Simons J.W., van Diest P.J., van der Wall
E. Ravni faktorja-1 alfa, inducibilnega s hipoksijo, med karcinogenezo dojke // J. Natl. Cancer Inst. 2001. V. 93. št. 4. Str. 309-314.
27. Biroccio A., Candiloro A., Mottolese M., Sapora O., Albini A., Zupi G., Del Bufalo D. Prekomerna ekspresija Bcl-2 in hipoksija delujeta sinergistično na modulacijo izražanja vaskularnega endotelnega rastnega faktorja in in vivo an- giogeneza v liniji karcinoma dojke // FASEB J. 2000. V. 14. št. 5. P. 652-660.
28. Pidgeon G.P., Barr M.P., Harmey J.H., Foley D.A., Bouchier Hayes D.J. Vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF) uravnava BCL-2 in zavira apoptozo v človeških in mišjih celicah adenokarcinoma dojke // Br. J. Rak. 2001. V. 85. št. 2. Str. 273-278.
29. Yen L., You X.L., Al Moustafa A.E., Batist G., Hynes N.E., Mader S., Meloche S., Alaoui-Jamali M.A. Heregulin selektivno uravnava izločanje vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v rakavih celicah in stimulira angiogenezo // Oncogene. 2000. V. 19. št. 31. P. 3460-3469.
30. Laughner E., Taghavi P., Chiles K., Mahon P.C., Semenza G.L. Signalizacija HER2 (neu) poveča hitrost sinteze faktorja 1alfa, ki ga povzroči hipoksija (HIF-1alfa): nov mehanizem za izražanje vaskularnega endotelnega rastnega faktorja, ki ga posreduje HIF-1 // Mol. Cell biol. 2001. V. 21. št. 12. Str. 3995-4004.
31. Blancher C., Moore J. W., Robertson N., Harris A.L. Učinki genskih mutacij ras in von Hippel-Lindau (VHL) na ekspresijo faktorja, inducibilnega s hipoksijo (HIF)-1alfa, HIF-2alfa in vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja ter njihova regulacija s fosfatidilinozitolom 3"-
Signalna pot kinaze/Akt // Cancer Res. 2001. V. 61. št. 19. P. 7349-7355.
32. Donovan D., Harmey J.H., Toomey D., Osborne D.H., Redmond H.P., Bouchier-Hayes D.J. TGF beta-1 regulacija proizvodnje VEGF s celicami raka dojke // Ann. Surg. onkol. 1997. V. 4. št. 8. Str. 621-627.
33. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Izražanje rastnih faktorjev, faktorjev zaviranja rasti in njihovih receptorjev pri invazivnem raku dojke. I: Popis v iskanju avtokrinih in parakrinih zank // J. Pathol. 1998. V. 184. št. 1. Str. 44-52.
34. de Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk, P., Baak, J.P. Izražanje rastnih faktorjev, faktorjev zaviranja rasti in njihovih receptorjev pri invazivnem raku dojke. II: Korelacije s proliferacijo in angiogenezo // J. Pathol. 1998. V. 184. št. 1. Str. 53-57.
35. De Jong J.S., van Diest P.J., van der Valk P., Baak J.P. Izražanje rastnih faktorjev, receptorjev rastnega faktorja in beljakovin, povezanih z apoptozo, pri invazivnem raku dojke: povezava s stopnjo apoptoze // Breast Cancer Res. zdravljenje. 2001. V. 66. št. 3. Str. 201-208.
36. Hyder S.M., Stancel G.M. Regulacija VEGF v reproduktivnem traktu s spolnimi steroidnimi hormoni // Histol. histopatol. 2000. V. 15. št. 1. Str. 325-234.
37. Ruohola J.K., Valve E.M., Karkkainen M.J., Joukov V., Alitalo K., Harkonen P.L. Vaskularni endotelijski rastni faktorji so različno regulirani s steroidnimi hormoni in antiestrogeni v celicah raka dojke // Mol. Cell Endocrinol. 1999. V. 149. št. 1-2. Str. 29-40.
38. Hyder S.M., Nawaz Z., Chiappetta C., Stancel G.M. Identifikacija funkcionalnih elementov odziva na estrogen v genu, ki kodira močan angiogeni faktor vaskularnega endotelnega rastnega faktorja // Cancer Res. 2000. V. 60. št. 12. P. 3183-3190.
39. Kurebayashi J., Kunisue H., Yamamoto S., Kurosumi M., Otsuki T., Sonoo H. Paradoksalni hormonski odzivi celic raka dojke KPL-1 in vivo: pomembna vloga angiogeneze pri rasti tumorja // Onkologija. 2000. V. 59. št. 2. Str. 158-165.
40. Hyder S.M., Murthy L., Stancel G.M. Regulacija progestinov vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v celicah raka dojke pri človeku // Cancer Res.
1998. V. 58. št. 3. Str. 392-395.
41. Hyder S.M., Chiappetta C., Stancel G.M. Farmakološki in endogeni progestini inducirajo izražanje vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v celicah raka dojke pri človeku // Int. J. Rak. 2001. V. 92. št. 4. Str. 469473.
42. Heer K., Kumar H., Speirs V., Greenman J., Drew P.J., Fox J.N., Carleton P.J., Monson J.R., Kerin M.J. Vaskularni endotelijski rastni faktor pri ženskah pred menopavzo – pokazatelj najboljšega časa za operacijo raka dojke? // Br. J. Rak. 1998. V. 78. št. 9. Str. 1203-1207.
43. Greb R.R., Maier I., Wallwiener D., Kiesel L. Stopnje ekspresije mRNA vaskularnega endotelnega rastnega faktorja A (VEGF-A) se po menopavzi zmanjšajo v normalnem tkivu dojke, ne pa tudi pri lezijah raka dojke // Br. J. Rak. 1999. V. 81. št. 2. Str. 225-231.
44. Skobe M., Hawighorst T., Jackson D.G., Prevo R., Janes L., Velasco P., Riccardi L., Alitalo K., Claffey K., DetmarM. Indukcija tumorske limfangiogeneze z VEGF-C spodbuja metastaze raka dojke // Nat. med. 2001. V. 7. št. 2. Str. 192-198.
45. Kurebayashi J., Otsuki T., Kunisue H., Mikami Y., Tanaka K., Yamamoto S., Sonoo H. Izražanje članov družine vaskularnega endotelnega rastnega faktorja (VEGF) pri raku dojke // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. št. 9. Str. 977-981.
46. Valtola R., Salven P., Heikkila P., Taipale J., Joensuu H., Rehn M., Pihlajaniemi T., Weich H., deWaal R., Alitalo K. VEGFR-3 in njegov ligand VEGF -C so povezani z angiogenezo pri raku dojke // Am. J. Pathol. 1999. V. 154. št. 5. Str. 1381-1390.
47. Ohhashi T. // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 2001. V. 102. št. 6. Str. 435-439.
48. Obermair A., Kucera E., Mayerhofer K., Speiser P., Seifert M., Czerwenka K., Kaider A., Leodolter S., Kainz C., Zeillinger R. Vaskularni endotelijski rastni faktor ( VEGF) pri raku dojke pri ljudeh: korelacija s preživetjem brez bolezni // Int. J. Rak. 1997. V. 74. št. 4. Str. 455458.
49. Relf M., LeJeune S., Scott P.A., Fox S., Smith K., Leek R., Moghaddam A., Whitehouse R., Bicknell R., Harris A.L. Izražanje angiogenih dejavnikov vaskularnega endotelnega celičnega rastnega faktorja, kislega in bazičnega fibroblastnega rastnega faktorja, tumorskega rastnega faktorja beta-1, rastnega faktorja endotelijskih celic, pridobljenega iz trombocitov, rastnega faktorja placente in pleiotrofina pri primarnem raku dojke pri človeku in njegova povezava z angiogeneza // Cancer Res. 1997. V. 57. št. 5. Str. 963-969.
50. Gasparini G., Toi M., Gion M., Verderio P., Dittadi R., Hanatani M., Matsubara I., Vinante O., Bonoldi E., Boracchi P., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T. Prognostični pomen proteina vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja pri karcinomu dojke z negativnimi vozlišči // J. Natl. Cancer Inst.
1997. V. 89. št. 2. Str. 139-147.
51. Gasparini G., Toi M., Miceli R., Vermeulen P.B., Dittadi R., Bigan-zoli E., Morabito A., Fanelli M., Gatti C., Suzuki H., Tominaga T., Di-rix L.Y., Gion M. Klinični pomen vaskularnega endotelnega rastnega faktorja in timidin fosforilaze pri bolnicah s pozitivnimi dojkami
rak, zdravljen z adjuvantno kemoterapijo ali hormonsko terapijo // Cancer J. Sci. Am. 1999. V. 5. št. 2. Str. 101-111.
52. Gasparini G. Prognostična vrednost vaskularnega endotelnega rastnega faktorja pri raku dojke // Onkolog. 2000. V. 5. Suppl. 1. Str. 37-44.
53. Gasparini G. Klinični pomen določanja nadomestnih markerjev angiogeneze pri raku dojke, Crit. Rev. onkol. Hematol. 2001. V. 37. št. 2. Str. 97-114.
54. Gasparini G., ToiM., Biganzoli E., Dittadi R., Fanelli M., Morabito A., Boracchi P., Gion M. Trombospondin-1 in -2 pri raku dojke z negativnimi vozlišči: korelacija z angiogenimi dejavniki, p53, katepsin D, hormonski receptorji in prognoza // Onkologija. 2001. V. 60. št. 1. str. 72-
55. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Ali vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF) napoveduje lokalno ponovitev in preživetje pri z radioterapijo zdravljenem raku dojke z negativnimi vozlišči? // Br. J. Rak.
1999. V. 81. št. 4. Str. 727-732.
56. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. p53 in izražanje vaskularno-endotelijskega rastnega faktorja (VEGF) napovedujejo izid pri 833 bolnikih s primarnim karcinomom dojke // Int. J. Rak.
2000. V. 89. št. 1. Str. 51-62.
57. Linderholm B., Grankvist K., Wilking N., Johansson M., Tavelin B., Henriksson R. Korelacija vsebnosti vaskularnega endotelnega rastnega faktorja s ponovitvami, preživetjem in prvim mestom ponovitve pri primarnem nodepozitivnem karcinomu dojke po adjuvantnem zdravljenju. / J.Clin. onkol.
2000. V. 18. št. 7. Str. 1423-1431.
58. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Klinični pomen angiogenih dejavnikov pri raku dojke // Breast Cancer Res. zdravljenje. 1998. V. 52. št. 1-3. Str. 159-173.
59. Eppenberger U., Kueng W., Schlaeppi J.M., Roesel J.L., Benz C., Mueller H., Matter A., Zuber M., Luescher K., Litschgi M., SchmittM., Foekens J.A., Eppenberger- Castori S Markerji tumorske angiogeneze in proteolize neodvisno opredeljujejo podskupine z visokim in nizkim tveganjem pri bolnicah z rakom dojke z negativnimi vozlišči // J. Clin. onkol. 1998. V. 16. št. 9. P. 3129-3136.
60. Coradini D., Boracchi P., Daidone MG, Pellizzaro C., Miodini P., Ammatuna M., Tomasic G., Biganzoli E. Prispevek vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja k Nottinghamskemu prognostičnemu indeksu pri nodenegativnem raku dojke // Br . J. Rak. 2001. V. 85. št. 6. Str. 795-797.
61. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., LookM.P., Meijer van Gelder M.E., Geurts Moespot A., van der Kwast T.H., Sweep C.G., Klijn J.G. Visoke tumorske ravni vaskularnega endotelnega rastnega faktorja napovedujejo slab odziv na sistemsko terapijo pri napredovalem raku dojke // Cancer Res. 2001. V. 61. št. 14. P. 5407-5414.
62. Yamamoto Y., Toi M., Kondo S., Matsumoto T., Suzuki H., Kitamu-raM., Tsuruta K., Taniguchi T., Okamoto A., Mori T., Yoshida M., Ike-da T., Tominaga T. Koncentracije vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v serumih normalnih kontrol in bolnikov z rakom // Clin. Cancer Res. 1996. V. 2. št. 5. Str. 821-826.
63. Dirix L.Y., Vermeulen P.B., Pawinski A., Prove A., Benoy I., De Pooter C., Martin M., Van Oosterom A.T. Povišane ravni angiogenih citokinov osnovnega rastnega faktorja fibroblastov in vaskularnega endotelnega rastnega faktorja v serumih bolnikov z rakom // Br. J. Rak. 1997. V. 76. št. 2. Str. 238-243.
64. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Serumski vaskularni endotelijski rastni faktor je pogosto povišan pri diseminiranem raku // Clin. Cancer Res. 1997. V. 3. št. 5. Str. 647-651.
65. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth C., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Vaskularni endotelijski rastni faktor v serumih in izlivih bolnikov z malignimi in nemaligna bolezen // Rak. 1999. V. 85. št. 1. Str. 178-187.
66. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. Jr., Ellis L.M. Ravni vaskularnega endotelnega rastnega faktorja in indukcija prepustnosti pri malignih plevralnih izlivih // Clin. Cancer Res. 1999. V. 5. št. 11. P. 3364-3368.
67. Salven P., Perhoniemi V., Tykka H., Maenpaa H., Joensuu H. Serumske ravni VEGF pri ženskah z benignim tumorjem dojke ali rakom dojke // Breast Cancer Res. zdravljenje. 1999. V. 53. št. 2. Str. 161-166.
68. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Invazivni lobularni in invazivni duktalni karcinom dojke kažeta različne vzorce izražanja vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja in angiogeneze // J. Pathol.
1998. V. 185. št. 4. Str. 394-401.
69. Callagy G., Dimitriadis E., Harmey J., Bouchier-Hayes D., Leader M., Kay E. Imunohistokemijsko merjenje tumorskega vaskularnega endotelnega rastnega faktorja pri raku dojke. Bolj zanesljiv napovedovalec stopnje tumorja kot gostota mikrožil ali serumski vaskularni endotelijski rastni faktor // Appl. Imunohistokemija. Molecul. morfol. 2000. V. 8. št. 2. Str. 104-109.
70. Adams J., Carder P.J., Downey S., Forbes M.A., MacLennan K., Allgar V., Kaufman S., Hallam S., Bicknell R., Walker J.J., Cairnduff
F., Selby P.J., Perren T.J., Lansdown M., Banks R.E. Vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF) pri raku dojke: primerjava plazme, seruma in tkiva VEGF ter gostote mikrožil in učinkov tamoksifena // Cancer Res. 2000. V. 60. št. 11. P. 2898-2905.
71. Harris A.L. Terapija proti angiogenezi in strategije za njeno vključitev v adjuvantno terapijo // Recent Results Cancer Res. 1998. V. 152. P. 341-352.
72. Harris A.L., Zhang H., Moghaddam A., Fox S., Scott P., Pattison A., Gatter K., Stratford I., Bicknell R. Angiogeneza raka dojke – novi pristopi k terapiji s pomočjo antiangiogeneze, hipoksično aktivirane zdravila in ciljanje na žile // Breast Cancer Res. zdravljenje. 1996. V. 38. št. 1. Str. 97108.
73. Kerbel R.S., Viloria Petit A., Klement G., Rak J. "Naključna" antiangiogena zdravila. anti-onkogeno usmerjeni inhibitorji signalne transdukcije in običajna kemoterapevtska sredstva kot primeri // Eur. J. Rak. 2000. V. 36. št. 10. Str. 1248-1257.
74. Folkman J. Angiogeneza // Harrisonov učbenik interne medicine, 15. izdaja. / ur. od E. Braunwald, A.S. Fauci, D.L. Kasper, S.L. Hauser, D.L. Longo, J.L. Jameson. N.Y.: McGraw-Hill, 2001. Str. 517-530.
75. Eisen T., Boshoff C., Mak I., Sapunar F., Vaughan M.M., Pyle L., Johnston S.R., Ahern R., Smith I.E., Gore M.E. Kontinuirani nizki odmerki talidomida: študija faze II pri napredovalem melanomu, raku ledvičnih celic, jajčnikov in dojke // Br. J. Rak. 2000. V. 82. št. 4. Str. 812-817.
76. Ziche M., Donnini S., Morbidelli L., Parenti A., Gasparini G., Ledda F. Linomid blokira angiogenezo s transfektanti vaskularnega endotelnega rastnega faktorja karcinoma dojke // Br. J. Rak. 1998. V. 77. št. 7. Str. 11231129.
77. Asano M., Yukita A., Suzuki H. Širok spekter protitumorske aktivnosti nevtralizirajočega monoklonskega protitelesa proti človeškemu vaskularnemu endotelijskemu rastnemu faktorju // Jpn. J. Cancer Res. 1999. V. 90. št. 1. Str. 93-100.
78. Borgstrom P., Gold D.P., Hillan K.J., Ferrara N. Pomen VEGF za angiogenezo raka dojke in vivo: posledice intravitalne mikroskopije kombiniranega zdravljenja z anti-VEGF nevtralizirajočim monoklonskim protitelesom in doksorubicinom // Anticancer Res. 1999. V. 19. št. 5B. P. 4203-4214.
79. Wedge S.R., Ogilvie D.J., DukesM., Kendrew J., Curwen J.O., Hennequin L.F., Thomas A.P., Stokes E.S., Curry B., Richmond G.H., Wadsworth P.F. ZD4190: peroralno aktiven zaviralec signalizacije vaskularnega endotelnega rastnega faktorja s širokim spektrom protitumorske učinkovitosti // Cancer Res. 2000. V. 60. št. 4. Str. 970-975.
80. Ciardiello F., Caputo R., Bianco R. Damiano V., Fontanini G., Cuccato S., De Placido S., Bianco AR, Tortora G. Zaviranje proizvodnje rastnega faktorja in angiogeneze v človeških rakavih celicah z ZD1839 ( Iressa), selektivni inhibitor tirozin kinaze receptorja epidermalnega rastnega faktorja, Clin. Cancer Res. 2001. V. 7. št. 5. Str. 1459-1465.
81. Kerbel R.S. Pridobljena odpornost na protitumorski učinek protiteles, ki blokirajo receptorje epidermalnega rastnega faktorja in vivo: vloga za spremenjeno tumorsko angiogenezo // Cancer Res. 2001. V. 61. št. 13. P. 5090-5101.
82. KlauberN., Parangi S., Flynn E., Hamel E., D "Amato R.J. Inhibicija angiogeneze in raka dojke pri miših z zaviralci mikrotubulov 2-metoksiestradiol in taksol // Cancer Res. 1997. V. 57. Št. 1. Str. 81-86.
83. Lau D.H., Xue L., Young L.J., Burke P.A., Cheung A.T. Paklitaksel (taksol): zaviralec angiogeneze pri visoko vaskulariziranem transgenem raku dojke // Cancer Biother. Radiopharm. 1999. V. 14. št. 1. Str. 31-36.
84. Lissoni P., Fugamalli E., Malugani F., Ardizzoia A., Secondino S., Tancini G., Gardani G.S. Kemoterapija in angiogeneza pri napredovalem raku: upad vaskularnega endotelijskega rastnega faktorja (VEGF) kot napovedovalec nadzora bolezni med zdravljenjem s taksolom pri metastatskem raku dojke // Int. J Biol. markerji. 2000. V. 15. št. 4. Str. 308-311.
85. Ding I., Sun J.Z., Fenton B., Liu W.M., Kimsely P., Okunieff P., Min W. Intratumorsko dajanje endostatinskega plazmida zavira vaskularno rast in perfuzijo pri MCa-4 mišjih karcinomih dojke // Cancer Res. 2001. V. 61. št. 2. Str. 526-531.
86. Jm S.A., Kim J.S., Gomez Manzano C., Fueyo J., Liu T.J., Cho M.S., Seong C.M., Lee S.N., Hong Y.K., Yung W.K. Inhibicija rasti raka dojke in vivo z antiangiogenezno gensko terapijo z adenovirusno posredovanim antisense-VEGF // Br. J. Rak. 2001. V. 84. št. 9. Str. 12521257.
nocTynma b pegaKunro 16. Hoa6pa 2013 r.
Gershtein E.S., Kushlinskiy D.N., Adamyan L.V., Ognerubov N.A. VASKULARNI ENDOTELIJSKI RASTNI FAKTOR - KLINIČNO VREDEN MARKER PRI MALIGNIH NEOPLAZMAH
Rezultati avtorjevih raziskav in najbolj reprezentativni literaturni podatki kažejo, da je ključni pozitivni regulator neoangiogeneze - vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF)
klinično pomemben prognostični dejavnik pri različnih onkoloških boleznih in molekularna tarča za več sodobnih zdravil z različnimi mehanizmi delovanja. Njegovo vlogo kot serološkega dejavnika za diagnostiko in spremljanje je treba nadalje raziskati.
Ključne besede: VEGF; VEGF-R; angiogeneza; tumorji; napoved.
Gershtein Elena Sergeevna, Ruski center za raziskave raka. N.N. Blokhin RAMS, Moskva, Ruska federacija, doktor bioloških znanosti, profesor, vodilni raziskovalec, Laboratorij raziskovalnega inštituta za klinično biokemijo klinična onkologija, E-naslov: [e-pošta zaščitena]
Gerstein Elena Sergejevna, N.N. Blokhin Ruski onkološki znanstveni center RAMS, Moskva, Ruska federacija, doktor biologije, profesor, vodilni raziskovalec klinične biokemije SRI Kliničnega onkološkega laboratorija, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
Kushlinsky Dmitry Nikolaevich, Ruski znanstveni center za porodništvo, ginekologijo in perinatologijo po imenu A.I. V IN. Kulakova, Moskva, Ruska federacija, onkoginekolog, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
Kushlinskiy Dmitriy Nikolayevich, Raziskovalni center za porodništvo, ginekologijo in perinatologijo po imenu V.I. Kulakov, Moskva, Ruska federacija, ginekološki onkolog, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
Adamyan Leyla Vladimirovna, Ruski znanstveni center za porodništvo, ginekologijo in perinatologijo po imenu A.I.
V IN. Kulakov, Moskva, Ruska federacija, doktor medicinskih znanosti, profesor, akademik Ruske akademije medicinskih znanosti, namestnik. direktor, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
Adamyan Leyla Vladimirovna, Raziskovalni center za porodništvo, ginekologijo in perinatologijo po imenu V.I. Kulakov, Moskva, Ruska federacija, doktor medicine, profesor, akademik RAMS, podpredsednik, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
Ognerubov Nikolaj Aleksejevič, Tambovska državna univerza. G.R. Derzhavin, Tambov, Ruska federacija, doktor medicinskih znanosti, profesor, vodja. Oddelek za onkologijo, operativno kirurgijo in topografska anatomija, E-naslov: [e-pošta zaščitena]
Ognerubov Nikolaj Aleksejevič, Tambovska državna univerza po imenu G.R. Deržavin, Tambov, Ruska federacija, doktor medicine, profesor, vodja oddelka za onkologijo, operativno kirurgijo in topografsko anatomijo, e-pošta: [e-pošta zaščitena]
