04.03.2020

Alergēni un toksīni diagnostikas ādas testiem. Elegantais pretreakcijas toksīns Šiks pretdarbības mehānisms


Šika reakcija norāda uz nepieciešamā antitoksīna līmeņa klātbūtni vai neesamību, lai aizsargātu organismu no difterijas. Pašlaik šī reakcija tiek izmantota retāk, jo praksē tiek ieviestas jutīgākas metodes (RPGA).

Šika reakciju veic pret difteriju vakcinētiem bērniem, kuri ir pabeiguši vakcināciju un vismaz vienu revakcināciju. 13 gadu vecumā un vecākiem reakciju var diagnosticēt pat ar nezināmu vakcinācijas vēsturi. Pretdifterijas imunitātes stāvokli pārbauda ne agrāk kā 6 mēnešus pēc pēdējās revakcinācijas un ne agrāk kā divus mēnešus pēc akūtas saslimšanas.

Šika reakcija tiek veikta arī tikko ienākušiem bērniem difterijas nelabvēlīgajās grupās, kad nav informācijas par vakcināciju. Bērni ar negatīvu Šika reakciju nesaņem papildu vakcināciju. Papildu vakcinācijas neatkarīgi no imūnslāņa komandā tiek veiktas bērniem ar pozitīvām un apšaubāmām reakcijām.

Šika reakcijas rezultāti tiek ievadīti uzskaites kartē profilaktiskās vakcinācijas(f. 63), norādot datumu, kad reakcija tika veikta un pārbaudīta, toksīna partija un institūts, kas ražojis toksīnu.

Lai veiktu Šika reakciju, tiek izmantots atšķaidīts aktīvs (nekarsēts) difterijas toksīns. 0,2 ml satur vienu Chic devu.

Lai veiktu Šika reakciju, jāizmanto viena grama (tuberkulīna) šļirces, kuras rūpīgi jāpārbauda ar precīzām gradācijām, kas neļauj šķidrumam iziet starp šļirces sieniņām un tās virzuli.

Telpās, kurās tajā dienā tika veikta revakcinācija pret tuberkulozi, stingri aizliegts veikt Šika reakciju, kā arī izmantot šļirces, adatas un citus imunizācijai pret tuberkulozi izmantotos instrumentus.

Āda injekcijas vietā tiek noslaukta ar vate, kas samitrināta ar 70% etilspirtu. Toksīnu (0,2 ml) injicē intradermāli vidusdaļa plaukstu virsma parasti kreisais apakšdelms. Ievadīšana tiek veikta lēni ar zināmu spriegumu, kas raksturīgs šķidruma intradermālai injekcijai. Injekciju veic ar ļoti nelielu šļirces slīpumu apakšdelma virzienā, gandrīz paralēli ādas virsmai. Adatas griezumam pilnībā jāiekļūst ādā un jābūt redzamam caur epidermu. Injekcijas vietā jāveidojas bālganai, skaidri izteiktai pūslīšai (papulai) apmēram 1 cm diametrā ar iedobumu matu folikulu vietā (“citrona miza”). Šī pūslīša (papula) izzūd 10 līdz 15 minūšu laikā. Ja, injicējot toksīnu, vezikula (papula) neveidojas vai pazūd pārāk ātri, tas norāda, ka injekcija veikta nepareizi, dziļi un subkutāni iekļuvušais toksīns var neizraisīt reakciju. Tā rezultātā var iegūt nepareizus rezultātus.

Reakciju ņem vērā pēc 72 vai 96 stundām.Rezultātus novērtē šādi:

a) Šika reakcija ir pozitīva, ja toksīna injekcijas vietā parādās apsārtums un infiltrācija. Reakcijas pakāpi norāda: “+” - ja apsārtuma diametrs ir 1 -1,5 cm, (+ + " - ja 1,5 - 3 cm, "+ + + " - ja lielāks par 3 cm;

b) Šika reakcija ir negatīva, ja toksīna injekcijas vietā nav apsārtuma vai infiltrāta;

c) Šika reakcija ir apšaubāma, ja apsārtums un infiltrāts pēc toksīna ievadīšanas ir vai nu neskaidri izteikts, vai arī, ja reakcija ir izteikta, apsārtuma diametrs ir aptuveni 0,5 cm (apzīmēts ar “±”).

Kontrindikācijas Šika reakcijai: spazmofilija, epilepsija, pustulozas slimības, kontakts ar pacientiem vīrusu hepatīts, bronhiālā astma.

Alergēni un toksīni

Diagnostikas zāles

Cilvēka pretklepus imūnglobulīns, antitoksisks (Krievija)

Attīrīts koncentrēts šķidrs antidifterijas serums zirgiem (Krievija)

Serumi un imūnglobulīni

Sausā tuberkulozes vakcīna BCG-M (maigai primārajai imunizācijai, Krievija)

Sausa tuberkulozes vakcīna (BCG) intradermālai ievadīšanai (Krievija)

Akt-Hib (Hib-vac, Dienvidkoreja)

Garā klepus monovakcīna (Krievija)

Satur garā klepus baktērijas, konservantu – mertiolātu. Lietojiet tikai epidemioloģiskām indikācijām garā klepus infekcijas zonās.

Vienā devā ir 10 mikrogrami polisaharīda Haemophilus influenzae b tips, konjugēts ar stingumkrampju toksoīdu, konservants – trometamols. Lieto bērnu vakcinācijai no 2 mēnešu vecuma pēc epidemioloģiskām indikācijām.

Mycobacterium bovis BCG-1. Vakcīnas celms iegūts, ilgstoši (13 gadus) kultivējot govju mikobaktēriju tuberculosis nelabvēlīgos apstākļos uz kartupeļu-glicerīna barotnes, pievienojot žulti. Izmanto specifiska profilakse tuberkuloze. Vakcināciju veic 5.-7. dzīves dienā, kad organisms ir brīvs no mikobaktēriju infekcijas. Visi veseli bērni, pusaudži un pieaugušie līdz 30 gadu vecumam, kuriem ir negatīva reakcija uz tuberkulīnu, tiek pakļauti revakcinācijai. Imunitātes mehānisms tuberkulozes gadījumā nav pilnībā atklāts. IN klīniskā prakse Vakcīnas imunitātes intensitātes galvenais kritērijs ir negatīvas ādas reakcijas uz tuberkulīnu pāreja uz pozitīvu.

Satur dzīvas vakcīnas celma baktērijas, kas liofilizētas 1,2% nātrija glutamāta šķīdumā Mycobacterium bovis BCG-1. Lieto saudzīgai specifiskai tuberkulozes profilaksei (primārā vakcinācija) jaundzimušajiem apgabalos ar tuberkulozei nelabvēlīgu situāciju.

Satur antivielas pret difterijas baciļu eksotoksīnu. Antitoksiskā aktivitāte ir izteikta starptautiskajās vienībās (10 000 un 20 000 SV/ml). Lieto, lai ārstētu pacientus ar difteriju. Papildus terapeitiskiem nolūkiem antidifterijas serumu izmanto, lai noteiktu difterijas baciļu kultūru toksicitāti gēla izgulsnēšanās reakcijā.

Satur imunoloģiski aktīvu donora asins plazmas frakciju ar antivielām pret garā klepus mikroba eksotoksīnu (vismaz 750 vienības antitoksisku pretgarā klepus antivielu). Lieto garā klepus ārstēšanai.

Satur attīrītu difterijas toksīnu uz 0,2 ml 1/40 DLM jūrascūciņu toksīna. Izmanto intradermāliem testiem imūndiagnostikas nolūkos. Indivīdiem injekcijas vietā attīstās iekaisuma reakcija. Ja asinīs ir vairāk nekā 0,03 SV antitoksīna, tests ir negatīvs. Iepriekš Šika tests bieži tika izmantots, lai identificētu personas, kuras ir uzņēmīgas pret difteriju. Pašlaik komplikāciju iespējamības dēļ tā lietošana ir ierobežota līdz stingrām epidēmijas indikācijām.

Toksīni (no grieķu toxikon - inde), baktēriju izcelsmes vielas, kas var kavēt fizioloģiskās funkcijas, kas izraisa dzīvnieku un cilvēku slimības vai nāvi. Pēc ķīmiskās būtības visi toksīni ir proteīni vai polipeptīdi. Tas atšķiras no citiem organiskajiem un neorganiskajiem toksiskas vielas Toksīni, nonākot organismā, izraisa antivielu veidošanos.
Dažām infekcijas slimībām (difterija, skarlatīns), lai noteiktu imūnsistēmas stiprumu un bērnu uzņēmību, intradermālie testi izmantojot atbilstošus atšķaidītus toksīnus. Pozitīvu reakciju (lokālu ādas iekaisumu toksīna injekcijas vietā) izraisa toksīna toksiskā iedarbība uz ādas audiem. Reakcijas negatīvais rezultāts ir izskaidrojams ar toksīna neitralizāciju, ko ādā ievada attiecīgais antitoksīns imūnā organismā pietiekams daudzums šim nolūkam.
Toksīnus iegūst no toksikogēniem mikrobu celmiem (difterijas bacilis vai skarlatīnas streptokoks), inokulējot uz šķidras barotnes (atvērta pavarda buljona), kam seko filtrēšana caur baktēriju filtriem. No iegūtajiem toksīniem tiek sagatavoti diagnostiskie toksīni Šiks (difterija) un Dika (skarlatīna). Toksīnus ievada intradermāli 0,2 ml (Shika) un 0,1 ml (Dika) apjomā apakšdelma iekšējās virsmas vidusdaļā.
Anatoksīni ir toksisko mikroorganismu buljonu kultūru filtrāti, kas speciālās apstrādes rezultātā ir zaudējuši savu toksicitāti, bet ievērojamā mērā saglabājuši sākotnējo toksīnu antigēnās un imunogēnās īpašības.
Nokļūstot cilvēka vai dzīvnieka organismā, toksoīdi izraisa antitoksiskas imunitātes veidošanos, šī īpašība ļauj tos izmantot šo slimību profilaksei. infekcijas slimības, kuru pamatā ir patogēnu izdalīto eksotoksīnu darbība, kā arī to dzīvnieku hiperimunizācijai, kuri ražo antitoksiskus serumus.
Neatkarīgi no toksoīda veida tā imunogenitāti un antigenitāti nosaka sākotnējā toksīna atbilstošās īpašības. Tāpēc laboratorijas, kas ražo šīs zāles, pievērš lielu uzmanību optimālu apstākļu radīšanai toksīnu veidošanās procesam.
Lai iegūtu augstas stiprības toksīnus, ir nepieciešami celmi, kas izceļas ar īpaši izteiktu spēju mākslīgos apstākļos ražot toksīnus. Ne visiem toksikogēno baktēriju celmiem piemīt šīs īpašības. Ražošanas nolūkos tiek izmantoti celmi, kas ir pielāgoti mākslīgai videi un pastāvīgi saglabā spēju veidot toksīnus.
Toksīnu veidojošo vielu kultūras tiek uzglabātas vai nu žāvētā stāvoklī, vai barotnēs, kas ir optimālas noteiktam baktēriju veidam. Pirms izmantošanas sēšanas masas partijām celmus pārvieto uz barotnes, ko izmanto toksīna iegūšanai.
Ja viss pārējais ir vienāds, toksīnu stiprumu nosaka barotnes kvalitāte, tāpēc laboratorijas pievērš uzmanību barotņu sagatavošanai. Ražošanas institūtu bioķīmiskajās laboratorijās tiek pakļautas visrūpīgākajai kontrolei izejvielas, ķīmiskās vielas un citas vides sastāvā esošās sastāvdaļas.
Toksīnu veidošanai tiek izmantotas šķidras uzturvielu barotnes, kas ietver gaļas ūdeni un peptiskās (Mārtiņa buljona, Ramona barotnes) vai triptiskās (Pāvesta barotnes) gaļas gremošanas produktus.
Gaļas hidrolīzes procesu kontrolē, nosakot kopējo amīnu slāpekli un olbaltumvielu sadalīšanās koeficientu, ko aprēķina no amīna slāpekļa attiecības pret kopējo. Tiek izmantots arī kazeīns, kas nesatur gaļu, daļēji sintētiskās barotnes.
Toksīnu veidošanai paredzētajai uzturvielu barotnei pievieno ogļhidrātus (glikozi, maltozi vai to maisījumu). Raudzējot ogļhidrātus, izdalās liels enerģijas daudzums, kas nepieciešams attīstošajā kultūrā notiekošajiem sintēzes procesiem. Ogļhidrātu pievienošana ievērojami palielina vidē radīto toksīnu stiprumu.
Papildus ogļhidrātiem daži metāli ir nepieciešami minimālās devās toksīnu veidošanai. Difterijas nūjiņas toksīnu veidošanos kavē gan dzelzs pārpalikums vidē, gan tā trūkums. Optimāla dzelzs daudzuma klātbūtnē strauji palielinās toksīnu veidošanās.
Toksīnu veidošanās pilnībā notiek pie noteikta vides pH. Tikmēr kultūras augšanas laikā mainās pH vērtība un var sasniegt vērtības, kas kavēs toksīna veidošanos.
Lai to novērstu, tiek pievienotas bufervielas, lai uzturētu vēlamo pH vērtību. Viena no šīm vielām, kurai piemīt bufera īpašības, ir nātrija acetāts, ko pievieno buljonam 0,5-0,75% daudzumā.
Atkarībā no toksīnus ražojošā mikroba bioloģiskajām īpašībām, dažādi apstākļi tiek regulēta audzēšana un jo īpaši vides aerācija. Maksimālas aerācijas apstākļos difterijas bacilis veido toksīnu, gluži otrādi, stingumkrampju bacilis un citi toksikogēnie anaerobi skābeklis neprasa. Saskaņā ar šī ir pirmā reize Otrajā gadījumā kultūru audzē plānā barotnes slānī ar lielu saskares virsmu ar gaisu, otrajā gadījumā barotni ielej augstā slānī un tiek iegūti dažādi skābekļa adsorbenti (vate, sausie sarkanie asinsķermenīši). pievienots.
Kultivēšanas temperatūra un ilgums dažādiem mikrobiem atšķiras. Kopīgs toksīnu veidošanās process ir nepieciešamība pēc perfektas temperatūras kontroles termostatā. Temperatūras svārstības negatīvi ietekmē toksīna stiprumu. Tāpēc termostati, kuros notiek toksīnu veidošanās, ir aprīkoti ar precīziem termostatiem.
Katrā atsevišķā gadījumā kultūras audzēšanas ilgumu nosaka toksīnu veidošanās intensitāte noteiktā barotņu sērijā. Lai atrisinātu jautājumu par to, kad jāpārtrauc kultivēšana, barotnes toksīna pH stiprumu nosaka dažādos kultivēšanas laikos.
Kad toksīna stiprums sasniedz maksimumu, tas tiek atdalīts no mikrobu ķermeņiem, filtrējot caur īpašiem bakteriālajiem filtriem (anaerobajiem mikroorganismiem) vai parastajiem papīra filtriem (diphtheria bacillus).
Toksisko filtrātu pārnešana uz vanatoksīnu tiek veikta, ilgstoši pakļaujot formaldehīdu 39-40 C temperatūrā. Formalīns tiek apvienots ar brīvajām aminoskābju aminogrupām, polipeptīdiem un toksīnu proteīniem, un tāpēc tas zaudē toksiskās īpašības. Vanatoksīna toksīna pāreja notiek 3-4 nedēļu laikā. Pareizai toksoīdu veidošanai svarīgs ir toksīna pH līmenis. Vislabvēlīgākā ir neitrāla vai viegli sārmaina vides reakcija.
Anatoksīniem ir raksturīgs pilnīgs nekaitīgums dzīvniekiem. Tomēr, ja tie nav pilnībā neitralizēti, tajos var saglabāties toksīnu atliekas, kas izraisa novēlotus bojājumus jutīgajam ķermenim. Tāpēc, pārbaudot toksoīdu nekaitīgumu, dzīvnieki tiek ilgstoši uzraudzīti. Toksoīdu nekaitīgums ir neatgriezenisks. Nekāda ietekme neizraisa zaudētās toksicitātes atjaunošanos.
Toksoīdi tiek saglabāti gandrīz pilnībā antigēnas īpašības toksīni. To var pārbaudīt dažādas metodes in vitro (flokulācijas reakcija, toksoīdu saistīšanās reakcija) un eksperimentos ar dzīvniekiem, kuros toksoīda ievadīšana izraisa atbilstošu antitoksīnu veidošanos un antitoksiskas imunitātes veidošanos.
Toksoīdi ir noturīgi; tie pacieš atkārtotu sasaldēšanu un atkausēšanu, pretojas darbībai paaugstināta temperatūra un ir stabili ilgstošas ​​uzglabāšanas laikā.
Toksoīdos bez specifiskām olbaltumvielām ir arī balasta vielas, no kurām tos var atbrīvot ar dažādām metodēm. Tie ir balstīti uz toksoīdu spēju nogulsnēties, kad tie ir piesātināti ar neitrāliem sāļiem, sāļiem smagie metāli, skābes (sālsskābe, trihloretiķskābe, metafosforskābe), kā arī etilspirta un metilspirta klātbūtnē zemā temperatūrā. Šīs metodes pašlaik izmanto, lai iegūtu attīrītus, koncentrētus toksoīdus.
Toksoīdi tiek adsorbēti uz dažādām nešķīstošām vielām (fosfora sāļi, alumīnija hidroksīds), ar to tiek pagatavoti sorbēti toksoīdi, kuriem raksturīga lēna uzsūkšanās organismā, kā rezultātā var iegūt intensīvāku imūnsistēmu.
Pateicoties to nekaitīgumam, augstajai antigenitātei un imunogenitātei, toksoīdi ir visvērtīgākais vairāku slimību profilakses un terapijas līdzeklis.
Šobrīd ir iegūti toksoīdi: difterija, stingumkrampji, botulīns, stafilokoks, dizentērija, no toksīniem, ko ražo gāzu gangrēnas patogēni, kā arī no čūsku indes.

ČIKA REAKCIJA(Schick) tika ierosināts 1913. gadā, lai noteiktu uzņēmības pakāpi pret difteriju. Sh.r. tiek veikta, stingri intradermāli ievadot difterijas toksīnu 0,2 tilpumā cm3, satur 1/40 Dim (sk Difterija). Toksīnu injicē kreisās rokas ādā; ādā labā roka Kontrolei ievada tādu pašu toksīna daudzumu, karsējot 100° temperatūrā 10 minūtes. Injekcijas rezultāti tiek atzīmēti pēc 24 un 96 stundām, un var novērot šādas parādības: 1. Ja "kontroles" (uzkarsētā) toksīna injekcijas vietā nav reaktīvu parādību, injekcijas vietā parādās apsārtums un infiltrācija. aktīvā toksīna injekcijas vietā, ko pavada neliela dedzinoša sajūta un nieze. Šīs parādības attīstās pirmajā dienā, sasniedz maksimumu ceturtajā dienā, tad izzūd, atstājot ādas pigmentāciju uz kādu laiku. Pēc apsārtuma un infiltrāta lieluma var spriest par reakcijas pakāpi, kas apzīmēta šādi: + (“šaubīga” reakcija - ar neskaidri izteiktu infiltrātu un nelielu apsārtumu), + (ar apsārtumu diametrā ne vairāk kā 1.5 cm), + +(ja apsārtuma diametrs ir no 1,5 līdz 3 cm) un + + + (ja apsārtums ir lielāks par 3 cm);šāda veida reakcija tiek saukta par "pozitīvo" Sh. 2. Ja nav nekādu reaktīvu parādību gan uzkarsēta, gan aktīvā toksīna injekcijas vietā, viņi runā par “negatīvu” Shch. 3. Ja reaktīvās parādības tiek atzīmētas uz abām rokām vienādā mērā, tad šāda parādība tiek apzīmēta kā "viltus" Sh. r. Nepatiesas (ar uzkarsētu toksīnu) reakcijas pakāpe ir atzīmēta (tāpat kā pozitīva) ar vienu, divām, trim zīmēm. Reakcijai uz sakarsētu toksīnu ir noteiktas kvalitatīvas atšķirības no reakcijas uz aktīvo toksīnu: ātra parādīšanās un izzušana (parasti 36-48 stundu laikā) un eksudatīvo parādību pārsvars pār infiltratīvajām. 4. Ja reaktīvas parādības ir atzīmētas uz abām rokām, bet to pakāpe ir atšķirīga, tad tiek runāts par “kombinēto” Š.r.- ar parādību pārsvaru aktīvā toksīna pusē un par “perverso” Š.r. - ar parādību pārsvaru uzkarsētā toksīna pusē. Vispārpieņemtas idejas par Sh.r būtību. beidzas šādi: ja testa subjekta asinīs nav antitoksīna vai tas ir mazāks par /zo -A-E 1,0 serumā, tad ievadītais intradermālais toksīns izraisa reaktīvas parādības, kas apzīmētas kā “pozitīvas” III Ja testa subjekta asinīs ir pietiekams daudzums antitoksīna (pēc Šika 1/30, pēc Bēringa 1/xoo un vairāk AE 1,0 serumā), tad pēdējais neitralizē ievadīto toksīnu un “negatīvs” Iegūts Sh.r Šos nosacījumus apstiprina sekojošs novērojums: ja pret difterijas toksīnu jutīgam subjektam tiek ievadīts neitrāls toksīna-antitoksīna maisījums, tad šī maisījuma injekcijas vietā reakcija parasti netiek novērota. Turklāt pēc Rēmera metodes paralēli Sh ir veiktas vairākas vienlaikus tiešas antitoksīna daudzuma noteikšanas asinīs. Dažkārt novērotās neatbilstības starp šīm parādībām nevar satricināt vispārējo noteikumu, jo tās notiek diezgan reti: piemēram, Jensens. atzīmēja negatīvo Sh. r. klātbūtni. ar nenozīmīgu antitoksīna “I /i 00 AE 1,0 serumā” saturu) 9% gadījumu. Novērtējot rezultātus Sh. jāņem vērā, ka agrīnā zīdaiņa vecumā bieži tiek novērots negatīvs Sh. ja asinīs nav antitoksīna. Tas izskaidrojams ar raksturīgo agrīno bērnībaādas anerģija. Kas attiecas uz tā saukto viltus Sh. r. un tā varianti (kombinētie, perversie Sh. r.), t.i., ādas reakcija uz sakarsētu toksīnu, tas skaidrojams ar organisma jutīgumu pret difterijas nūjiņas termostabils vielmaiņas produktiem un barības buljonā esošajām vielām. Šī jutība ir alerģiska rakstura. Kā parādīja Siegl, tas sastāv no diviem komponentiem - specifiskiem un nespecifiskiem attiecībā uz difteriju. Zollera novērojumi parādīja pilnīgu viltus reakcijas identitāti ar intradermālo reakciju uz toksoīdu (0,2 toksoīds, atšķaidīts attiecībā 1:100) - tā ir tā sauktā Zellera reakcija. Atkarībā no reakcijas rezultāta uz toksīnu un toksoīdu Zellers visus cilvēkus iedala 4 grupās (skatīt tabulu). Zellers imunizācijas procesu pret difteriju iztēlojas šādi: indivīdi, kas ir jutīgi pret difteriju (I grupa ar grupas raksturojumu Reakcija | Zellera Schlk reakcija f 1 Jutīgs pret II f dlfterchi III 1 Imūns pret df-IV / teriju + + + 1 stadija + ) alerģijas pozitīvas Sh.r.), sastopoties ar difterijas bacili (b-n vai karieti) vai mākslīgās imunizācijas laikā, kļūst jutīgi pret mikrobu un tā produktiem. Viņu āda izraisa alerģisku reakciju; bet tā kā vēl nav saražots pietiekams daudzums antitoksīna, āda reaģē arī uz aktīvo toksīnu (II grupa ar viltus vai kombinētu Sh. r.). Pēc tam antitoksīna daudzums asinīs palielinās tik daudz, ka reakcija uz aktīvo toksīnu kļūst negatīva, bet alerģija joprojām saglabājas (III grupa ar perversu Š. r.); beidzot pēdējais pazūd, un iestājas ilgstoša imunitāte, kas raksturīga IV grupas personām (ar negatīvu Sh. r.). Sh.r. vērtība kā imūnreakciju nosaka dominējošie uzskati par imunitātes būtību difterijas gadījumā. Autors modernas idejas Pēdējā pamatā ir pietiekama antitoksīna daudzuma klātbūtne asinīs. Šīs idejas, kā zināms, nosaka mūsdienu difterijas (toksīnu-antitoksīnu maisījumu, toksoīda) imunizācijas profilakses praksi. No šī viedokļa Sh r., ērti aizstājot lielgabarīta tieša definīcija antitoksīnu asinīs, izmantojot Remera metodi, var uzskatīt par ideālu imunitātes stāvokļa noteikšanas veidu, resp. personas jutība pret difteriju. Jautājums par minimālo antitoksīna daudzumu asinīs, kas nepieciešams, lai panāktu ilgstošu imunitāti pret difteriju, ir pretrunīgs; jebkurā gadījumā jāatzīmē difterijas slimības salīdzinošais retums personām ar negatīvu Sh.r.; turklāt mēs varam norādīt uz tiešu eksperimentālu apstiprinājumu šim jautājumam: Guetrie, Marshall un Moss inficēja astoņus brīvprātīgos, iesmērējot rīkli ar virulentu difterijas kultūru, no kuriem četriem bija pozitīvs Sh. Rezultātā 4 cilvēki pirmajā grupā pārcieta tipisku slimību, no 4 cilvēkiem ar negatīvu Sh. 3 bija pagaidu difterijas baciļu nēsāšana bez jebkādām slimības pazīmēm. Epidemioloģiskā nozīme Sh. r. tam ir veltīts milzīgs darbs. No tiem ir skaidrs, ka GL. R. piedāvā uzticamu metodi kopienas imūnslāņa pakāpes noteikšanai saistībā ar difteriju. Izrādījās, ka, ja jūs izplatāt pozitīvo Sh. pēc vecuma, tad tiek iegūta ar vecumu saistītā difteriju jutības līkne (Zin-gher), kas diezgan precīzi sakrīt ar saslimstības ar difteriju vecuma sadalījumu. Salīdzinoši augstā imunitāte agrīniem zīdaiņiem (līdz sešiem mēnešiem) ir izskaidrojama ar imūno ķermeņu pasīvo pārnesi caur mātes pienu. Kas attiecas uz jutīguma pret difteriju samazināšanos ar vecumu (sākot no viena gada), ko pavada antitoksīna uzkrāšanās asinīs, daži autori (Frīdbergers un citi) uzskata, ka šī parādība ir “fizioloģiskās seroģenēzes” izpausme, t.i. antitoksīna uzkrāšanās notiek fizioloģiskā secībā, ko pavada tādi no. nobriešana uzreiz cilvēka ķermenis, un citi autori (Zingers, Dedlijs, Ramons u.c.) uzskata, ka cilvēkiem antitoksīns asinīs uzkrājas acīmredzamas un biežāk “klusās infekcijas” ar difteriju rezultātā (sk. attēlu). Epidemioloģiskā vērtība Sh. r. slēpjas arī apstāklī, ka to ir ērti izmantot personu atlasei, uz kurām attiecas (gadījumā pozitīvs rezultāts) aktīva imunizācija pret difteriju. To parasti lieto bērniem

"-~-" $personas ar antitoksīnu asinīs (saskaņā ar Grīru)

°--«> % cilvēku par pozitīvu reakciju. Šika (pēc Parka un Tskngera) bāri - saslimstība ar difteriju Sadalījums pēc vecuma: personas ar antitoksīnu asinīs (%); personas ar pozitīvu Šika reakciju (%); saslimstība ar difteriju (°/ooo katrā vecumā). vecumā virs 5 gadiem, paturot prātā negatīvo Sh relatīvo retumu. jaunāki par 5 gadiem. Visbeidzot III. R. To izmanto arī kā objektīvu profilaktiskās vakcinācijas pret difteriju efektivitātes kontroli. Šo efektivitāti pierāda pozitīva (pirms vakcinācijas) Sh pāreja. negatīvs pēc vakcinācijas (parasti 6 nedēļas pēc pēdējās vakcinācijas). Sh.r. ražošanas tehnika: 1. Lai sagatavotu nepieciešamo toksīna atšķaidījumu vajadzīgajā tilpumā, sāciet no Dim toksīna. Pieņemsim, ka toksīna dim = 0,0032. Lai pagatavotu toksīnu, kas satur I/4l) Dim 0,2 tilpumā, rīkojieties šādi: ņem lOODlm, šajā gadījumā = 0,32, un pievieno fizioloģisko šķīdumu līdz 10,0, t.i., 9,68. Paņemiet 1,0 no šī atšķaidījuma (t.i., 10 Dim) un pievienojiet to 79,0 fiziolam. risinājums. Tad otrā atšķaidījuma 80,0 ir 10.Dim; 1 cm 3 tāpēc - V" Dim, un 0.2 - Vio Dim. Katram atšķaidījumam ir jāņem svaiga, sausa pipete, mazgājot to vismaz 10 reizes. Šajā gadījumā nepieciešama īpaša mērīšanas precizitāte un pipešu precizitāte (pusi no sagatavotā toksīnu atšķaidījuma ielej atsevišķā kolbā un ievieto verdoša ūdens vannā uz 10 minūtēm, tādējādi tiek iegūts uzkarsēts toksīns "kontrolei") . Ņemot vērā to, ka toksīns, atšķaidīts fiziols. šķīdums, ātri zaudē aktivitāti, atšķaidīšanai ērtāk ņemt utt. borāta buferšķīdums (sk. Dika reakcija) kurā atšķaidītais toksīns saglabā savu potenciālu vairākus mēnešus. 2. Injekciju veic stingri intradermāli, visērtāk izmantojot tuberkulīna šļirci ar ļoti plānu platīna adatu (Nr. 18, 19). Adatai jābūt ar īsu stiebru. Injicējot, bārda jātur uz āru. Toksīns tiek ievadīts lēni ar noteiktu spriegumu, kas raksturīgs intradermālai šķidruma injekcijai, un rezultātā injekcijas vietā veidojas labi norobežots burbulis (Quaddel) ar ieplakām matu folikulu vietā. 3. Kreisās rokas apakšdelma ādā ievada aktīvo toksīnu, labās rokas apakšdelma ādā sakarsēto toksīnu. Masveida ražošanas laikā III. R. To ieteicams veikt diviem ārstiem vienlaikus - viens injicē aktīvo, otrs sakarsēto toksīnu. 4. Countdown Sh.r. tiek veikta divas reizes: pēc 24 stundām, lai ņemtu vērā viltus reakcijas un pēc 96 stundām, kad patiesais Sh. sasniedz kulmināciju. Lit.: Zdrodovskis P., Difterijas specifiskās profilakses mūsdienu problēmas, Arch. biol. Zinātnes, XXXV sēj., ser. A, jautājums. 2, 1934; Doull J., Faktori, kas ietekmē difterijas selektīvo izplatību, Journ. ol novērst, med., v. IV, 1930; Frost W., Infekcija, imunitāte un slimības difterijas epidemioloģijā, turpat, v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets a response de Schick negative, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toksīnu-antitoksīnu imunizācija pret difteriju, Journ. Amer. med. Ass., v. LXXIX, lpp. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick V., Die Diphtherietoxin-Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des profhylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, Nr. 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hung der P beise der Entste-hung der Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., ​​​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo-reaction al"anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Skatīt arī Art. Skarlatīna. G. Orlovs.

Citoķīmiskās metodes veikt ķīmisko un fermentatīvo vielu identificēšanu šūnās, izmantojot krāsu reakcijas. Citoķīmiskās zāles konservē šūnu struktūra, kas ļauj identificēt šūnas un pētāmā savienojuma intracelulāro lokalizāciju. Tāpēc hematoloģijā priekšroka tiek dota nevis bioķīmiskai, darbietilpīgai, destruktīvai šūnu struktūrai un saistītai ar ļoti neviendabīgu šūnu populāciju, bet gan citoķīmiskām metodēm.

Citoķīmija pierādīja, ka starp morfoloģiski identiskām šūnām pastāv būtiskas ķīmiskās un fermentatīvās atšķirības.

Glikogēns (CHIK reakcija) (PAS) - Hotchkiss metode - Mac Minus

CHIC reakcijas princips. Polisaharīdus identificē pēc reakcijas, kas oksidē spirta grupas, kuras pārvēršas par aldehīdu grupām, un identificē pēdējās pēc krāsas reakcijas ar Šifa reaģentu.

Reaģenti CHIC reakcijai: 1. Fiksējošs spirta-formalīna maisījums: 9 daļas absolūtā etilspirts+1 daļa 40% formaldehīda; uzglabāt +4° temperatūrā.

2. Periodiskā skābe, 1% ūdens šķīdums. Šķīdums ir bezkrāsains. Uzglabāt brūnā stikla pudelē, tumsā, laboratorijas temperatūrā. Dzeltens šķīdums nav lietojams.

3. Šifa reaģents. Atšķaida 1 g bāzes fuksīna 200 ml destilēta ūdens līdz vārīšanās temperatūrai. Maisa 5 minūtes, atdzesē līdz 50°, filtrē un pievieno 20 ml parastās sālsskābes. Atdzesē līdz 25°, pievieno 2 g nātrija vai kālija metabisulfīta, kas pilnībā nodrošina šķīdumu. Šķīdumam vajadzētu nostāvēties vienu dienu tumšā un aukstā laikā (+4°). Tad pievieno 2 g aktivētā ogle, tērzējiet 1 min. un filtrē.
Iegūtais filtrāts ir caurspīdīgs un bezkrāsains. Ir atļauta nedaudz dzeltenīga nokrāsa; ja šķīdums kļūst rozā krāsā, tas kļūst nederīgs. Uzglabāt +4° temperatūrā hermētiski noslēgtā brūnā stikla pudelē.

4. Zaļā gaisma -1% ūdens šķīdums.

5. Diastāze: nesašķidrinātas cilvēka siekalas vai 0,1% amilolītiskā-diastatiskā enzīma šķīdums fizioloģiskā šķīdumā.

CHIC reakcijas veikšanas tehnika

1) 10 minūšu ilga uztriepes fiksācija ar spirta un formalīna maisījumu; skalošana ar destilētu ūdeni;
2) oksidēšana ar 1% periodskābes šķīdumu, 10 minūtes; skalošana ar destilētu ūdeni;
3) krāsošana ar Šifa reaģentu slēgtā traukā, tumsā un aukstumā, 2 stundas; skalošana ar tekošu ūdeni;
4) kontrastkrāsošana ar 1% zaļo gaismu 1 minūti; skalošana ar tekošu ūdeni.

Piešķirta vadība smērēt pakļauts inkubācijai ar diastāzi, 60 min. istabas temperatūrā, lai selektīvi noņemtu glikogēnu. Pēc mazgāšanas ar destilētu ūdeni to apstrādā saskaņā ar parasto metodi.

CHIC reakcijas rezultātu novērtējums

Glikogēns, krāsota sārtinātā krāsā sarkanā krāsa, parādās graudu veidā vai izkaisīti. Reakcijas uzraudzībai tiek izmantoti nobrieduši uztriepes granulocīti. Papildus glikogēnam CHIC pozitīva reakcija Tie ražo arī citas ogļhidrātu vielas, piemēram, mucīnu, mukoproteīnus, cerebrozīdus un fibrīnu. Glikogēna diferenciāciju no šiem komponentiem veic, iepriekš apstrādājot ar diastāzi, pēc kuras glikogēns vairs netiek iekrāsots.

IN granulocīti glikogēns ir izkliedētā veidā jau promielocītu stadijā un, nobriestot, sāk palielināties. Normālos apstākļos limfocīti ir negatīvi vai 20% no tiem var saturēt vairākus mazus glikogēna graudiņus. Monocīti ir negatīvi vai smalki granulēti.

Intensitāte krāsošana nosaka daļēji kvantitatīvi. Reakcijā PAS atspoguļojas glikogēna indikatora vai vidējā reakcijas indikatora (Astaldi) veidā. Normāls indikators glikogēns svārstās no 0,10 līdz 0,30. Parasti tikai patoloģiskiem limfocītiem slodzes pakāpe ir lielāka par 3.

To norādīja CHIC reakcijas metode:
a) Iestatot diferenciāldiagnoze daži akūtas leikēmijas citoloģiskie veidi:
- Mieloblasti un promieloīdi ir PHIK negatīvi vai iegūst vāju difūzu krāsu. Auera ķermeņi dod pozitīvu reakciju, kas pēc gremošanas ar siekalām vājina.
- Limfoblasti akūtas leikēmijas un limfosarkomas gadījumā rada asu CHIC pozitīvu reakciju graudu vai lielu glikogēna bloku veidā.
- Eritroblasti eritrēmijas un akūtas eritroleikēmijas gadījumā rada krasi pozitīvu izkliedētu vai granulētu reakciju, atšķirībā no parastajiem eritroblastiem, kas ir PAS negatīvi;
- Monocitoīdie blasti ir nekonsekventi vāji pozitīvi, ar smalku granularitāti.

b) Lai noteiktu diagnozi un uzraudzītu hroniskas limfātiskās leikēmijas ārstēšanas efektivitāti: paaugstināts glikogēna indikators norāda uz smagu slimības formu un bēdīgu prognozi.
Glikogēna augšana patoloģiskajos limfocītos - parādība, kas nav raksturīga leikēmijai, to izskaidro vielmaiņas aktivitātes palielināšanās ar jebkāda veida limfoīdo proliferāciju.

c) Atšķirt Gošē šūnas no citiem makrofāgiem ar uzkrāšanos.