ردود الفعل المناعية. تطبيق ردود الفعل المناعية في التشخيص أمراض معدية.

يخطط:

أنواع ردود الفعل المناعية.

شروط إجراء التفاعلات المصلية.

متطلبات المصل.

مفهوم النتائج الإيجابية والسلبية.

المحتويات الرئيسية:

أنواع ردود الفعل المناعية.

رد الفعل المناعي – هذا هو تفاعل المستضد مع الجسم المضاد، والذي يتم تحديده من خلال التفاعل المحدد للمراكز النشطة للجسم المضاد (المظلة) مع حواتم المستضدات.

التصنيف العام للتفاعلات المناعية:

ردود الفعل المصلية – التفاعلات بين المستضدات (Ag) والأجسام المضادة (Ig)

في المختبر ;

ردود الفعل الخلوية بمشاركة الخلايا المناعية.

اختبارات الحساسية – الكشف عن فرط الحساسية.

التفاعلات المصلية: 1) التعريف، 2) المراحل، 3) الأهداف، 4) التصنيف العام.

1) التعريف

الطرق المصليةبحث (من المصل اللاتيني – المصل والشعارات – تدريس) باستخدام تفاعل المستضد-الجسم المضاد.

2) المراحل

مرحلتان من التفاعل:

أنا. محدد (مرئي) - يحدث بسرعة، وتتحد الأجسام المضادة مع المستضدات المقابلة لها. خلال هذه المرحلة، تتفاعل المجموعات المحددة من المستضدات (AG) والمراكز النشطة للأجسام المضادة (AT).

القوى المشاركة في تشكيل مجمع AG + AT هي:

قلادة؛

فان دير فال

روابط هيدروجينية.

لا توجد تغييرات واضحة في هذه المرحلة. يُظهر المجهر الإلكتروني مجمع AG+AT على شكل شبكة.

ثانيا. غير محدد - يحدث ببطء، ويتفاعل مركب المستضد والجسم المضاد الناتج مع عامل بيئي إضافي غير محدد يحدث فيه التفاعل، وهذا مرئي للعين - الالتصاق، والانحلال، ورقائق الترسيب، وما إلى ذلك. وفي وجود المنحل بالكهرباء، تنخفض الشحنة ، تنخفض القابلية للذوبان، وتتشكل تكتلات مرئية، وتترسب (تراص).

3) تحديد الأهداف :

أ) للتعرف على المستضد (المصل التشخيصي المعروف للأجسام المضادة):

• في المواد المرضية (التشخيص السريع)؛

  في الثقافة النقية:

  1. تحديد الهوية المصلية (تحديد الأنواع)؛

     التنميط المصلي (تحديد المصل) – تحديد السلالة.

ب) للكشف عن الأجسام المضادة (Ig) (المستضد معروف للتشخيص):

• الحضور (ردود الفعل النوعية) ؛

  الكميات (زيادة العيار - طريقة "المصل المزدوج").

4) التصنيف العام ردود الفعل المصلية :

أ) بسيط (مكونان: Ag+Ig):

تفاعلات تراص RA (مع المستضد الجسيمي) ؛

تفاعلات هطول الأمطار (مع المستضد القابل للذوبان)؛

ب) مركب (3 مكونات: Ag+Ig+C)؛

ج) باستخدام العلامة.

المتغيرات من تفاعلات التراص وهطول الأمطار

رد فعل التراص :

تفاعل التراص (RA) - رد الفعل المناعيتفاعل تعليق المستضدات (كريات الدم الحمراء والبكتيريا) مع المستضدات محلول ملحي.

أثناء التراص، تلتصق جزيئات AT معًا لتشكل رواسب ندفية.

رد فعل التراص الدموي السلبي(RPGA) هو نوع من تفاعل التراص الذي يتم فيه استخدام جسم مضاد أو مستضد تشخيصي لكريات الدم الحمراء (كريات الدم الحمراء التي تحتوي على AT أو AG ممتزة على سطحها).

تعمل خلايا الدم الحمراء كحاملات سلبية في هذا التفاعل.

ويتم تقييم نتائج RPGA على النحو التالي:

- في رد فعل إيجابي تغطي خلايا الدم الحمراء الملتصقة بشكل سلبي الجزء السفلي من الثقب على شكل حرف U أو V في طبقة متساوية ذات حواف صدفية ("مظلة")؛

- في رد فعل سلبي (في حالة عدم التراص)، تتراكم خلايا الدم الحمراء في التجويف المركزي للثقب، لتشكل "زرًا" مضغوطًا ذو حواف محددة بشكل حاد.

يستخدم اختبار تثبيط التراص الدموي (HIT) في التشخيص اصابات فيروسية. تحتوي بعض الفيروسات على بروتين يسمى الهيماجلوتينين على سطحها، والذي يقوم بلصق خلايا الدم الحمراء معًا. إضافة أجسام مضادة محددة مضادة للفيروسات تمنع الراصة الدموية الفيروسية - لا يوجد التراص الدموي.

يتم استخدام تفاعل التراص الدموي غير المباشر (IRHA)، أو تفاعل كومبس، لتحديد الأجسام المضادة غير المكتملة. إضافة مصل مضاد الجلوبيولين (AT ضد Ig البشري) يعزز نتائج التفاعل. يتم استخدام RNGA لتحديد عامل Rh.

لإجراء تفاعل التراص (RA)، يلزم وجود ثلاثة مكونات:

1) مولد المضاد (راصة) AG؛

2) جسم مضاد(راصة) ال.

3) بالكهرباء (محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر).
Ag + AT + المنحل بالكهرباء = متراص

التراص (من اللاتينية agglutinatio - الإلتصاق) - لصق الكريات (البكتيريا، خلايا الدم الحمراء، الخ) بواسطة الأجسام المضادة في وجود الشوارد - كلوريد الصوديوم.

يتجلى التهاب المفاصل الروماتويدي في شكل رقائق أو رواسب تتكون من كريات (على سبيل المثال، البكتيريا وخلايا الدم الحمراء) "ملتصقة ببعضها البعض" بواسطة الأجسام المضادة.

يستخدم RA ل:

تفاعل التراص الميكروبي المباشر (RA).

في هذا التفاعل، تقوم الأجسام المضادة (الراصات) بتراص مباشرة مع المستضدات الجسيمية (الراصات).

وعادة ما يتم تمثيلها بتعليق الكائنات الحية الدقيقة المعطلة (تفاعل التراص الميكروبي).

لتحديد نوع الكائنات الحية الدقيقة، استخدمالتراص التشخيصي القياسي مصل (الشهيرة في ).

الأكثر شيوعًا هي الصفائحية (التقريبية) والموسعة RA.

يتم وضع لوحة RA على الزجاج. يتم استخدامه كوسيلة سريعة للكشف عن الأجسام المضادة أو تحديد الكائنات الحية الدقيقة.

عناصر:

1. الأمصال التشخيصية القياسية (AT)؛

2. زراعة نقية قيد الدراسة من المريض.

3. محلول ملحي.

في المزرعة النقية قيد الدراسة، تكون المستضدات (AG) على شكل جزيئات (خلايا ميكروبية وكريات الدم الحمراء ومستضدات كرياتية أخرى)، والتي يتم لصقها معًا بواسطة الأجسام المضادة وتترسب.

مثال:

التدريج إرشادية تفاعلات التراص (را ) على الزجاج لغرض التعرف على البكتيريا القولونية.

تطبيق قطرات على شريحة زجاجية:

1 الزحار ;
2 - القطرة الرابعة: - مصل ملتصق ضد مسببات الأمراضحمى التيفود ;

(1-2 الأمصال التشخيصية)
3 - القطرة الرابعة: - محلول ملحي (تحكم).
أضف الثقافة البكتيرية النقية المختبرة إلى كل قطرة. اثارة.

نتيجة : إيجابي - وجود رقائق متراصة،
سلبي - غياب الرقائق المتراصة
خاتمة:تعتبر البكتيريا المدروسة من العوامل المسببة لحمى التيفوئيد (تم تحديد المستضدات).

لتحديد AT في مصل المريض (التشخيص المصلي)، وهو معيار ميكروبيالتشخيص ، تحتوي على تعليقمشهور الميكروبات أو مستضداتهااي جي .

تحديد فصائل الدم ABO (تفاعل التراص الدموي (HRA)) – تراص خلايا الدم الحمراء.

مكونات التفاعل:

1. AG (خلايا الدم الحمراء) اختبار الدم

2. ال (كريات الدم الحمراء - الزوليكلونات)

مجموعة الزوليكلونات:

كاشف كوليكلون المضاد لـ A (وردي)

كاشف كوليكلون المضاد لـ B (الأزرق)

كاشف Tsoliklon المضاد للـ AV (عديم اللون)

3. المنحل بالكهرباء (محلول ملحي)

تقنية التحديد:

1 .

يتم تطبيق قطرة واحدة (0.1 مل) من مضاد A ومضاد B ومضاد AB على فتحات القرص (للتحكم).

2.

بجانب كل قطرة من الكاشف، يتم وضع قطرة صغيرة (0.05-0.01 مل) من الدم الذي يتم اختباره.

ثم يتم خلط قطرة من الزوليكلون مع قطرة دم باستخدام قضيب زجاجي نظيف فردي.

3.

يتطور تفاعل التراص خلال أول 3-5 ثواني مع تأرجح اللوحة بلطف.

تؤخذ نتائج التفاعل في الاعتبار بعد 2.5 - 3 دقائق من خلط القطرات. من اليسار إلى اليمين في الآبار توجد مضادات A، ومضادات B، ومضادات AB.

والنتيجة الإيجابية هي ظهور الرواسب الحبيبية (التراص).

RA إيجابي (+)

سلبي - لا توجد رواسب.

RA سلبي (-)

4.

تحليل النتائج.

يا(أنا) α β – لا تراص

أ(ثانيا) β – تراص مع مضاد A

ب(ثالثا) α - تراص مع مضاد B

أ.ب(رابعا)O - تراص مع مضاد A، مع مضاد B

التمثيل التخطيطي للتراص.

مستضدات Ag على كريات الدم الحمراء (قابلة للاكتشاف) + جسم مضادفي(زوليكلون) مصل التشخيص

المحاسبة عن التراص في الأجهزة اللوحية

معادلة الترسيب:

رد فعل الهطول هو رد فعل مناعي لتفاعل المستضد في حالة قابلة للذوبان مع المستضد في محلول فسيولوجي.

أثناء هطول الأمطار، يتم تشكيل مجمع المناعي الجزيئي، والذي يتجلى في انتقال محلول غرواني شفاف إلى تعليق غير شفاف، أو يعجل.

يجب أن تكون كمية كلا الكاشفين بنسب محددة بدقة، لأن زيادة أحدهما تقلل النتيجة.

يخرج طرق مختلفةتنظيم رد فعل هطول الأمطار.

1. يتم تنفيذ تفاعل الترسيب الحلقي في أنابيب ترسيب ذات قطر صغير. يُضاف المصل المناعي إلى أنبوب الاختبار ويُوضع المستضد القابل للذوبان في طبقات بعناية. يختلط AG وAT بسبب الحركة الحرارية للجزيئات، ويتفاعلان. في نتيجة ايجابيةتتشكل حلقة من الراسب المعتم عند حدود الحلين.

2. يتم تنفيذ تفاعل الانتشار المناعي المزدوج Ouchterlony في هلام أجار، حيث يتم إضافة محلول AG أو محلول AT إلى الآبار وفقًا للمخطط. ينتشر AG وAT في الجل تجاه بعضهما البعض، وإذا كان التفاعل إيجابيًا، يشكلان مجمعات مناعية مرئية كخطوط هطول.

معادلة الترسيب -هذا هو التكوينوترسيب مركب المستضد والأجسام المضادة الجزيئي القابل للذوبان على شكل سحابة تسمى الراسب. يتم تشكيله عن طريق خلط المستضدات والأجسام المضادة بكميات متساوية.

مكونات را:

مصل راسب (المعروف بـ AT-precipitin) ؛

مصل الاختبار (مستضد الترسيبيتينوجين غير المعروف)؛

بدني حل.

يتم إجراء تفاعل الترسيب إما في أنابيب اختبار ضيقة خاصة (تفاعل الترسيب الحلقي)، أو في أطباق بتري في المواد الهلامية، والوسائط المغذية، وما إلى ذلك.

رد فعل التساقط الدائري

بيان وتسجيل نتائج التفاعلهطول حلقةللكشف عن مسببات الأمراض الجمرة الخبيثة(رد فعل أسكولي).

التدريج .

1. يتم غلي المواد قيد الدراسة (الجلود، الصوف، اللباد، الشعيرات، القماش، اللحوم، التربة، براز الحيوانات، وغيرها) في محلول ملحي لمدة 5-45 دقيقة. للحصول على مستخلص متساوي التوتر (مستخلص). تمت تصفيته.

2. يتم سكب المصل المضاد للجمرة الخبيثة في أنبوب اختبار.

3. ضع طبقة مادة الاختبار (المستخلص) عليها بعناية.

محاسبة .

خلال الـ10 دقائق القادمة. في الحالات الإيجابية، تظهر حلقة من التعكر في السطح البيني بين المصل والمستخلص (الترسيب الحلقي). رد فعل أسكولي حساس ومحدد للغاية

وبمساعدتها، من الممكن التعرف بسرعة على المواد المصابة بالجمرة الخبيثة.

رد فعل هطول الأمطار في أجار

بيان وتسجيل النتائجردود الفعل هطول الأمطار في أجارلتحديد سمية البكتيريا الوتدية (العوامل المسببة للدفتيريا)

التدريج

توضع على أجار الببتون الفوسفاتي في طبق بيتري.

1. ضع شريطًا من ورق الترشيح المعقم المبلل على طول منتصف الكوب.مصل مضاد للسموم.

2. بعد التجفيف، على مسافة 1 سم من حافة الشريط، يتم زرع لويحات قطرها 10 ممالمحاصيل المختارة.

في كوب واحد يمكنك زرع من 3 إلى 10 محاصيل، واحدة منهايتحكم، يجب أن يكون معروفاسامة.

يتم وضع المحاصيل في منظم الحرارة.

محاسبة

يتم التحليل بعد 24-48-72 ساعة.

نتيجة إيجابية - (ثقافةسام) - تظهر على مسافة ما من شريط الورقخطوط راسب, « سهام المحلاق"، والتي تكون مرئية بوضوح في الضوء المنقول.

يوضح الشكل تفاعل الترسيب في الأجار لتحديد مدى سمية عصيات الخناق. لم تشكل المزارع المتوسطة "محاليق الأسهم"، فهي ليست مسببات الأمراض السامة.

سلالات العامل المسبب للدفتيريا يمكن أن تكون سامة (تنتج سموما خارجية) وغير سامة. يعتمد تكوين ذيفان خارجي على وجود بكتيريا نبائية تحمل جينًا سامًا يشفر تكوين ذيفان خارجي.

في حالة المرض، يتم اختبار جميع مسببات أمراض الخناق للتأكد من سميتها - إنتاج ذيفان الخناق الخارجي باستخدام تفاعل الترسيب في الأجار

التفاعلات المصلية المعقدة ( 3-المكونات: Ag+Ig+C):

تفاعل التثبيت المكمل (CFR).

يتم التفاعل على مرحلتين.

في المرحلة الأولى، يتفاعل AT مع المستضد والمكمل، وفي المرحلة الثانية، تتم إضافة مؤشر - النظام الانحلالي (خليط من كريات الدم الحمراء والمصل المضاد لكرات الدم الحمراء).

إذا كانت النتيجة إيجابية، في المرحلة الأولى، تشكل الأجسام المضادة مجمعًا مناعيًا مع المستضدات، والذي يربط مكمل خليط التفاعل.

في هذه الحالة، لا يتم تدمير خلايا الدم الحمراء للنظام الانحلالي المضافة في المرحلة الثانية.

وبخلاف ذلك، يؤدي المكمل غير المنضم إلى تحلل خلايا الدم الحمراء المؤشرة.

لتنفيذه، هناك حاجة إلى خمسة مكونات: AG، AT والمكمل (النظام الأول)، كريات الدم الحمراء في الأغنام والمصل الانحلالي (النظام الثاني) (الشكل 1).

يحدث التفاعل على مرحلتين (الشكل 3).

الطور الأول - تفاعل المستضد والأجسام المضادة مع المشاركة الإجبارية للمكمل.

ثانية - تحديد نتائج التفاعل باستخدام مؤشر النظام الانحلالي (خلايا الدم الحمراء في الأغنام والمصل الانحلالي). يحدث تدمير خلايا الدم الحمراء بواسطة المصل الانحلالي فقط إذا تمت إضافة المكمل إلى النظام الانحلالي. إذا تم امتزاز المكمل مسبقًا على مركب الأجسام المضادة للمستضد، فلن يحدث انحلال الدم في كريات الدم الحمراء (الشكل 1).

نتيجة التجربة تم تقييمه (الشكل 2)، مع ملاحظة وجود أو عدم وجود انحلال الدم في جميع الأنابيب. يعتبر التفاعل إيجابيًا عندما يتأخر انحلال الدم تمامًا، عندما يكون السائل في أنبوب الاختبار عديم اللون وتستقر خلايا الدم الحمراء في القاع، سلبيًا - عندما تتحلل خلايا الدم الحمراء تمامًا، عندما يكون السائل ملونًا بشكل مكثف (دم "ورنيش" ).

يتم تقييم درجة تأخير انحلال الدم اعتمادًا على شدة لون السائل وحجم رواسب خلايا الدم الحمراء في الأسفل (++++، +++، ++، +).

أرز. 4. بيان ونتائج RSC.

خاتمة:تم الكشف عن الأجسام المضادة في مصل الاختبار.

يسمح لك RSK باكتشاف الأجسام المضادة لأي سلالة من نفس النمط المصلي للفيروس.

القيمة التشخيصية لها:

زيادة أربعة أضعاف في عيار الأجسام المضادة في الأمصال المزدوجة (أثناء وباء الأنفلونزا)؛

زيادة مضاعفة في مصل الدم للمرضى الذين يعانون من صورة سريرية مميزة.

ردود الفعل باستخدام العلامة :

هذه الأساليب حساسة للغاية. تُستخدم الأصباغ والنظائر المشعة والإنزيمات وما إلى ذلك كتسميات للمستضدات أو الأجسام المضادة.

RIF - تفاعل التألق المناعي

يعتمد تفاعل التألق المناعي على إشارة ضوئية لمركب الأجسام المضادة للمستضد

مقايسة الممتز المناعي المرتبط.

حديث فحص مخبري، يتم خلالها إجراء بحث عن أجسام مضادة محددة في الدم أو مستضدات لأمراض معينة من أجل تحديد ليس فقط المسببات، ولكن أيضًا مرحلة المرض.

يمكن إعطاء نتائج ELISA نوعيا وكميا.

حاليا، يتم استخدام ELISA في الحالات التالية:

1) البحث عن أجسام مضادة محددة لأي مرض معدي؛

2) البحث عن مستضدات أي أمراض (معدية، تناسلية)؛

3) دراسة الحالة الهرمونية للمريض.

4) فحص علامات الورم.

5) فحص وجود أمراض المناعة الذاتية.

في الشكل، يُظهر اختبار ELISA ذو الطور الصلب المستضدات المعروفة (على اليسار) الممتزة على بئر الصفيحة، (على اليمين) على فتحات الصفيحة مستضدات معروفة

مزايا طريقة ELISA:

1) خصوصية وحساسية عالية لطريقة ELISA (أكثر من 90%).

2) القدرة على تحديد المرض وتتبع ديناميكيات العملية، أي مقارنة عدد الأجسام المضادة في فترات زمنية مختلفة.

3) توفر تشخيص ELISA في أي مؤسسة طبية.

العيب النسبي: الكشف عن الاستجابة المناعية (الأجسام المضادة)، ولكن ليس العامل الممرض نفسه، المرتبط بالإنزيم الوسم.

اختبار ELISA (الآلية العامة):

أساس المقايسة المناعية الإنزيمية هو التفاعل المناعي للمستضد والجسم المضاد مع تكوين مركب مناعي: جسم مضاد للمستضد، ونتيجة لذلك يحدث تغيير النشاط الأنزيميعلامات محددة على سطح الأجسام المضادة.

مكونات التفاعل:

1. AG(AT) معروف - على بئر الجهاز اللوحي.

2. AT (AG) قيد الدراسة.

3. AT مع إنزيم خاص بمركب AT(AG)-AG(AT).

4. الركيزة اللونية التي تتفاعل مع الانزيم

5. توقف عن الحل

المراحل الرئيسية للELISA

1. يوجد على سطح آبار اللوحة مستضد منقى لمسبب مرض محدد. ويضيفون مادة بيولوجيةعند المريض، يحدث تفاعل محدد بين هذا المستضد والجسم المضاد المطلوب (الجلوبيولين المناعي). يتم تشكيل المجمع.

2. يتم إضافة المرافق – AT مع الإنزيم. المرافق خاص بمجمع AT-AG في المرحلة الأولى. يتم تنشيط الانزيم.

3. تتم إضافة الركيزة ويتفاعل معها الإنزيم النشط، مما يغير لون المحلول عديم اللون.

4. تتم إضافة محلول التوقف لوقف التفاعل بين الإنزيم والركيزة.

محاسبة.

والنتيجة الإيجابية هي تغير اللون الأصفر في الصورة.

التحليل المناعي

طريقة التحليل المناعي (ICA، الاختبارات السريعة) هي طريقة فحص أولية عالية الجودة تسمح لك بإجراء التحليل بسرعة، في غضون بضع دقائق، تحت أي ظروف، بما في ذلك. "مجال".

تشمل مزايا ICA ما يلي:

السرعة وسهولة الاستخدام؛

صغر حجم العينات، وعدم إعداد العينة؛

الرخص بالنسبة للمصنع والمستهلك؛

إمكانية إنتاج الاختبارات بكميات كبيرة.

سهولة القراءة وتفسير النتيجة.

حساسية عالية وإمكانية تكرار نتائج؛

إمكانية التحديد الكمي.

إمكانية استخدام أجهزة القراءة المحمولة المتوافقة مع الكمبيوتر؛

إمكانية التحليل المتعدد.

المكونات (المطبقة على شريط الاختبار):

1. إن الاتحاد ذو العلامة الذهبية الغروية خاص بالمستضد المكتشف.

2. خط اختبار AT – خاص بمجمع AT-AG

3. القيمة المطلقة لخط التحكم خاصة بالمرافقة.

إعداد ICA:

1. قم بتطبيق العينة على منطقة البداية المحددة للشريط.

2. الحصول على النتيجة على شكل ظهور خطوط ملونة مكان خطوط الاختبار والتحكم.

محاسبة

إيجابي - عندما يكون خط الاختبار ملطخًا.

سلبي - إذا لم يكن هناك تلطيخ لخط الاختبار.

غير صالح - إذا لم يكن خط التحكم ملطخًا.

آلية عامة I هكتار:

1. يتم إدخال العينة في حقل البداية (لوحة العينة) وترتبط بالاقتران (جسم محدد بملصق ملون)، الموجود على اللوحة المرافقة. ونتيجة لذلك، يتم تشكيل مجمع ملون.

2. يتحرك المجمع المناعي الملون الناتج تحت تأثير القوى الشعرية على طول غشاء النيتروسليلوزو يتفاعلمع خط الاختبار.والنتيجة هي شريط أحمر وردي اللون واحد.

3. AT (مترافق) غير مرتبط بالنطاق الذي تم اختبارهيتحرك أبعد ويصل إلى خط التحكم، ويتواصل مع AT الخاص بخط التحكم.ونتيجة لذلك، يظهر شريط ملون ثان.إذا تم إجراء التحليل بشكل صحيح، فيجب أن يظهر خط التحكم دائمًا، بغض النظر عن وجود مستضد الاختبار (الجسم المضاد) في عينة السائل البيولوجي.

2. شروط إجراء التفاعلات المصلية.

1. وجود متماثل - يقابل كل من المستضد والجسم المضاد.

2. أطباق نظيفة وجافة.

3. نسبة معينة من الأدوية (متساوية في أغلب الأحيان).

4. الوجود الإلزامي للكهارل (محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر).

5. درجة الحموضة محايدة أو قريبة من القلوية قليلاً.

6. درجة الحرارة +37 درجة مئوية أو درجة حرارة الغرفة (إيجابية بالضرورة).

7. يتم إجراء التحكم في المستضد والتحكم في المصل (الجسم المضاد).

3 متطلبات المصل

يجب أن يكون المصل شفافًا تمامًا دون أي خليط من الخلايا.

وعادة ما يحصلون عليه في الأسبوع الثاني من المرض، عندما تكون الأجسام المضادة متاحة بالفعل.

يتم أخذ الدم بكمية 3-5 مل على معدة فارغة أو بعد 6 ساعات من الوجبة الغذائية.

للحصول على المصل، يتم ترك الدم لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة أو بالطرد المركزي. يتم امتصاص المصل بعناية شديدة حتى لا يتم التقاط العناصر المشكلة.

يتم الحصول على الأمصال المناعية من دماء الأشخاص أو الحيوانات (عادةً الأرانب والخيول)، ويتم تحصينها وفقًا لنظام معين مع المستضد المقابل (اللقاح). عادة ما يتم تحضير الأمصال في الإنتاج.

4. مفهوم النتائج الإيجابية والسلبية.

را.

مع رد فعل إيجابي، تغطي خلايا الدم الحمراء الملتصقة بشكل سلبي الجزء السفلي من الحفرة بطبقة متساوية ذات حواف صدفية ("المظلة")؛ في غياب التراص، تتراكم خلايا الدم الحمراء في التجويف المركزي للثقب، لتشكل "زرًا" مدمجًا ذو حواف محددة بشكل حاد (انظر الصور أعلاه).

ر.ب.

إذا كانت النتيجة إيجابية، تتشكل حلقة حليبية عند واجهة المحلولين (انظر الصور أعلاه).

إليسا.

يحدث تغيير في لون المحلول مع رد فعل إيجابي.

RSK.

تأخر انحلال الدم - رد الفعل إيجابي. إذا كان المكمل مجانيا، لوحظ انحلال الدم - رد الفعل سلبي(انظر الصور أعلاه).

نتائج رد فعل واسرمان:

أ - تأخير كامل لانحلال الدم (+ + ++)؛

ب - تأخير واضح في انحلال الدم (+ ++)؛

ج - تأخير جزئي لانحلال الدم (++)؛

د - تأخير طفيف في انحلال الدم (+)؛

د - انحلال الدم الكامل (-).

يكون التفاعل إيجابيًا مع تأخير جزئي واضح وكامل لانحلال الدم، يتم تحديده من خلال درجة تلطيخ محتويات الأنابيب من اللون الوردي الفاتح إلى الأحمر الفاتح؛ وتشكل كريات الدم الحمراء غير المتحللة بعد ذلك راسبًا أحمر.

العمل في المنزل:

1. دراسة المادة

قم بتدوين 3 ملاحظات على الفيديو

رقم 29 رد فعل التراص. المكونات والآلية وطرق التثبيت. طلب.
رد فعل التراص- تفاعل بسيط تقوم فيه الأجسام المضادة بربط المستضدات الجسيمية (البكتيريا أو كريات الدم الحمراء أو الخلايا الأخرى، والجزيئات غير القابلة للذوبان مع المستضدات الممتصة عليها، وكذلك المجاميع الجزيئية). ويحدث ذلك في وجود الشوارد، على سبيل المثال، عند إضافة محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر.
يتم استخدام أشكال مختلفة من تفاعل التراص: واسعة النطاق، إرشادية، غير مباشرة، وما إلى ذلك. يتجلى تفاعل التراص من خلال تكوين رقائق أو رواسب (خلايا "ملتصقة" بأجسام مضادة تحتوي على مركزين أو أكثر من مراكز ربط المستضد - الشكل 13.1). يستخدم RA ل:
1) قرارات الأجسام المضادةفي مصل الدم لدى المرضى، على سبيل المثال، المصابين بداء البروسيلات (تفاعلات رايت وهيدلسون)، حمى التيفودوالحمى نظيرة التيفية (رد فعل فيدال) وغيرها من الأمراض المعدية.
2) تحديد العامل الممرض‎معزولة عن المريض؛
3) تحديد فصائل الدمباستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ضد مستضدات كريات الدم الحمراء.
لتحديد الأجسام المضادة لدى المريض إجراء رد فعل تراص مفصل:يتم إضافة التشخيص (معلق الميكروبات المقتولة) إلى تخفيفات مصل دم المريض، وبعد عدة ساعات من الحضانة عند 37 درجة مئوية، تتم ملاحظة أعلى تخفيف في المصل (عيار المصل)، حيث حدث التراص، أي كان الراسب شكلت.
تعتمد طبيعة وسرعة التراص على نوع المستضد والأجسام المضادة. ومن الأمثلة على ذلك خصوصيات تفاعل التشخيص (مستضدات O- وH) مع أجسام مضادة محددة. يحدث تفاعل التراص مع O-diagnosticum (البكتيريا التي تم قتلها بالحرارة، مع الاحتفاظ بمستضد O الثابت بالحرارة) في شكل تراص دقيق الحبيبات. يكون تفاعل التراص مع H-diagnosticum (البكتيريا التي يتم قتلها بواسطة الفورمالديهايد، مع الاحتفاظ بمستضد H السوطي القابل للحرارة) خشنًا ويستمر بشكل أسرع. إذا كان من الضروري تحديد العامل الممرض المعزول من المريض، ضع رد فعل التراص الإرشادي،باستخدام الأجسام المضادة التشخيصية (المصل المتراص)، أي يتم إجراء التنميط المصلي للعامل الممرض. يتم إجراء رد فعل إرشادي على شريحة زجاجية. تتم إضافة مزرعة نقية من العامل الممرض المعزول من المريض إلى قطرة من المصل المتراص التشخيصي عند تخفيف بنسبة 1:10 أو 1:20. يتم وضع عنصر التحكم في مكان قريب: بدلا من المصل، يتم تطبيق قطرة من محلول كلوريد الصوديوم. عندما تظهر الرواسب الندفية في قطرة من المصل والميكروبات، يتم إجراء تفاعل تراص مفصل في أنابيب الاختبار مع زيادة التخفيفات من المصل التراص، والتي تضاف إليها 2-3 قطرات من معلق العامل الممرض. ويؤخذ التراص بعين الاعتبار بكمية الرواسب ودرجة نقاء السائل. يعتبر التفاعل إيجابيًا إذا لوحظ التراص في تخفيف قريب من عيار المصل التشخيصي. في الوقت نفسه، يتم أخذ الضوابط في الاعتبار: يجب أن يكون المصل المخفف بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر شفافًا، ويجب أن يكون تعليق الميكروبات في نفس المحلول غائمًا بشكل موحد، بدون رواسب.
يمكن أن يتم تراص البكتيريا المختلفة ذات الصلة بواسطة نفس مصل التلصيق التشخيصي، والذي
يجعل من الصعب التعرف عليهم. لذلك، يستخدمون الأمصال المتراصة الممتزة التي منها
الأجسام المضادة المتفاعلة عن طريق الامتزاز للبكتيريا ذات الصلة. ويتم الحفاظ على الأجسام المضادة في مثل هذه الأمصال،
محددة فقط لبكتيريا معينة.

التراص هو لصق البكتيريا نتيجة تفاعل ATs معينة معها. لتنفيذ التهاب المفاصل الروماتويدي، هناك حاجة إلى ثلاثة مكونات: 1) AG (الراصات)؛ 2) ال (راصة) ؛ 3) محلول الإلكتروليت (محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر). فقط المستضدات الجسيمية (البكتيريا، وخلايا الدم الحمراء، وجزيئات اللاتكس المحملة بالمستضد) تشارك في تفاعل التراص.

رد فعل التراص على الزجاج. يتم وضع قطرة من المصل التشخيصي على شريحة زجاجية خالية من الدهون باستخدام ماصة (تخفيف المصل 1:10 - 1:20). باستخدام الحلقة البكتريولوجية، يتم أخذ مزرعة نقية للكائن الدقيق قيد الدراسة من سطح الأجار المائل، ونقلها إلى قطرة من المصل وخلطها. تؤخذ نتيجة التفاعل بعين الاعتبار بالعين المجردة بعد 3-5 دقائق. إذا كان التفاعل إيجابيا، يتم ملاحظة ظهور رقائق (كبيرة أو صغيرة) في قطرة من المصل، ويمكن رؤيتها بوضوح على خلفية داكنة عند رج الشريحة. في حالة حدوث تفاعل سلبي، يظل السائل غائما بشكل موحد.

رد فعل التراص في أنابيب الاختبار. يضاف 1 مل من المحلول الفسيولوجي إلى صف من أنابيب الاختبار. تتم إضافة كمية متساوية من مصل الدم الذي يتم اختباره إلى أنبوب الاختبار الأول. يتم تحضير التخفيفات التسلسلية ذات الشقين من المصل (معايرة المصل)، وبعد ذلك يتم إضافة قطرتين من معلق البكتيريا المعطلة (التشخيص) إلى كل أنبوب اختبار. يتم وضع الأنابيب في منظم الحرارة عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين. يستمر التفاعل بتكوين رقائق صغيرة غير مرئية للعين المجردة، لذلك يتم تسجيل النتائج تحت تكبير طفيف في جهاز خاص - منظار الراصات. يتم أخذ شدة التراص في الاعتبار وفقًا لنظام "أربعة زائد": تراص كامل - 4+، تراص جزئي - 3+ أو 2+، نتيجة مشكوك فيها - +. يتم أخذ التخفيف الأخير الذي يتم فيه ملاحظة تراص 2+ على أنه عيار الجسم المضاد في مصل الاختبار.

يتم إجراء تفاعل تراص في أنابيب الاختبار (تفاعل تراص واسع النطاق) لتحديد عيار الأجسام المضادة للعوامل المسببة لحمى التيفوئيد وحمى نظيرة التيفية (تفاعل فيدال)، وداء البروسيلات (تفاعل رايت)، والتيفوس (تفاعل ويجل).

التلصيق (من اللاتينية agglutinatio - الإلتصاق) هو لصق (اتصال) الجسيمات الجسيمية الحاملة للمستضد (الخلايا الكاملة، جزيئات اللاتكس، وما إلى ذلك) مع جزيئات من أجسام مضادة محددة في وجود إلكتروليتات، والتي تنتهي بتكوين رقائق أو رواسب (تراص) يمكن رؤيته بالعين المجردة. تعتمد طبيعة الرواسب على طبيعة المستضد: تنتج البكتيريا السوطية رواسب خشنة، والبكتيريا السوطية وغير المحفظة تنتج رواسب دقيقة الحبيبات، وتنتج البكتيريا المحفظة رواسب خيطية. يتم التمييز بين التراص المباشر، حيث تشارك المستضدات الخاصة بالخلية البكتيرية أو أي خلية أخرى، مثل كريات الدم الحمراء، بشكل مباشر في التفاعل مع أجسام مضادة محددة؛ وغير المباشرة، أو السلبية، حيث تكون الخلايا البكتيرية أو كريات الدم الحمراء، أو جزيئات اللاتكس حاملة ليست خاصة بها، ولكن لمستضدات أجنبية (أو أجسام مضادة) ممتصة عليها لتحديد الأجسام المضادة (أو المستضدات) الخاصة بها. يتضمن تفاعل التراص بشكل أساسي أجسامًا مضادة تنتمي إلى فئتي IgG وIgM. ويحدث على مرحلتين: أولاً، يحدث تفاعل محدد بين المركز النشط للأجسام المضادة ومحدد المستضد، ويمكن أن تحدث هذه المرحلة في غياب الإلكتروليتات ولا تكون مصحوبة بتغيرات مرئية في نظام التفاعل. بالنسبة للمرحلة الثانية - تكوين الراصات - من الضروري وجود الشوارد، مما يقلل الشحنة الكهربائيةمجمعات المستضد + الأجسام المضادة وتسريع عملية لصقها. تنتهي هذه المرحلة بتكوين مادة تراصية.

يتم إجراء تفاعلات التراص إما على ألواح زجاجية أو من الورق المقوى الملساء، أو في أنابيب تراص معقمة. عادة ما تستخدم تفاعلات التراص (المباشرة والسلبية) على الزجاج طريقة معجلةالكشف عن أجسام مضادة محددة في مصل المريض (على سبيل المثال، داء البروسيلات) أو للتعرف المصلي على العامل الممرض. في الحالة الأخيرة، عادة ما يتم استخدام الأمصال التشخيصية النقية (الممتصة) التي تحتوي فقط على الأجسام المضادة أحادية المستقبل أو مجموعة منها لمستضدات مختلفة. إن الميزة التي لا شك فيها لتفاعل التراص على الزجاج هي بساطة تنفيذه وحقيقة أنه يستغرق عدة دقائق أو حتى ثواني، حيث يتم استخدام كلا المكونين في شكل مركز. ومع ذلك، فهو ذو قيمة نوعية فقط وأقل حساسية من أنبوب الاختبار. يعطي تفاعل التراص الشامل في أنابيب الاختبار نتائج أكثر دقة، لأنه يسمح لك بتحديد المحتوى الكمي للأجسام المضادة في المصل (تحديد عيارها)، وإذا لزم الأمر، تسجيل حقيقة الزيادة في عيار الأجسام المضادة، والتي لها قيمة تشخيصية . لإعداد التفاعل، تتم إضافة محلول مخفف بنسبة 0.85% إلى أنابيب التراص بطريقة معينة. محلول كلوريد الصوديوممصل وحجم متساو (عادة 0.5 مل) من معلق تشخيصي قياسي (أو مزرعة اختبار) يحتوي على مليار بكتيريا في 1 مل. يتم تسجيل نتائج تفاعل التراص أولاً بعد ساعتين من حضانة الأنابيب عند 37 درجة مئوية وأخيراً بعد 20-24 ساعة وفقاً لمعيارين: وجود وحجم الراسب ودرجة شفافية السائل الطافي. يتم التقييم وفق النظام الرباعي. يصاحب التفاعل بالضرورة التحكم في المصل والمستضد. في الحالات التي يتم فيها إجراء تفاعل التراص التفصيلي في أنبوب اختبار للتعرف المصلي على العامل الممرض، يكون له قيمة تشخيصية إذا تم تقييم التفاعل على أنه إيجابي عندما يتم تخفيف المصل التشخيصي إلى نصف عياره على الأقل.

يجب أن يؤخذ في الاعتبار أنه عند خلط محاليل المستضدات والأجسام المضادة المتماثلة، لا يتم دائمًا ملاحظة المظاهر المرئية لتفاعل التراص. يتشكل الراسب فقط عند نسب مثالية معينة لكلا مكونات التفاعل. خارج هذه الحدود، مع وجود فائض كبير في المستضد أو الأجسام المضادة، لا يلاحظ أي تفاعل. وتسمى هذه الظاهرة "ظاهرة البروزون". ويلاحظ في كل من تفاعل التراص وفي تفاعل الهطول. يتم تفسير ظهور البروزون في التفاعلات المناعية من خلال حقيقة أن المستضدات المشاركة فيها، كقاعدة عامة، تكون متعددة المحددات، والجزيئات الأجسام المضادة IgGلديها مركزين نشطين. مع وجود فائض من الأجسام المضادة، يتم تغطية سطح كل جسيم مستضد بجزيئات الجسم المضاد بحيث لا تبقى مجموعات محددة حرة، وبالتالي لا يمكن للمركز النشط الثاني غير المنضم للأجسام المضادة أن يتفاعل مع جسيم مستضد آخر ويربطها ببعضها البعض. يتم أيضًا قمع تكوين تراص أو راسب مرئي عندما يكون هناك فائض من المستضد، عندما لا يبقى مركز نشط حر واحد للأجسام المضادة، وبالتالي لم يعد من الممكن تكبير مستضد + جسم مضاد + مجمعات مستضد.

خيارات لتفاعلات التراص المتسارعة. رد فعل تراص الدم السلبي ومتغيراته

يتضمن تفاعل التراص الكلاسيكي استخدام المستضدات الجسيمية. ومع ذلك، قد تشارك أيضًا المستضدات القابلة للذوبان. ولجعل ذلك ممكنًا، يتم امتصاص هذه المستضدات على جزيئات خاملة مناعيًا. يمكن استخدام جزيئات اللاتكس أو البنتونيت كحامل، ولكن حاليًا يتم استخدام كريات الدم الحمراء الحيوانية أو البشرية في أغلب الأحيان، مما يحسن خصائصها الممتصة عن طريق معالجتها بمحلول التانين أو الفورمالين أو البنزيدين. تسمى خلايا الدم الحمراء التي امتصت مستضدًا على نفسها بأنها حساسة لهذا المستضد، ويسمى رد الفعل المناعي الذي تشارك فيه تفاعل التراص الدموي غير المباشر أو السلبي (IRHA، أو RPHA)، نظرًا لأن خلايا الدم الحمراء تشارك فيه بشكل سلبي.

يتم وضع RPGA في ألواح خاصة من البوليسترين مع فتحات ذات قاع نصف كروي. عند استخدامه للتشخيص المصلي، يتم تحضير تخفيفات مزدوجة من مصل الاختبار في هذه الآبار في محلول فسيولوجي، ثم يضاف إليه تعليق كريات الدم الحمراء المتحسسة كعامل تشخيصي. يتم تسجيل النتائج بعد ساعتين من الحضانة عند 37 درجة مئوية باستخدام النظام الرباعي. مع رد فعل إيجابي، تستقر خلايا الدم الحمراء المتراصة في قاع الحفرة وتغطيها بالتساوي على شكل مظلة مقلوبة. وإذا كان رد الفعل سلبيا، تستقر خلايا الدم الحمراء أيضا، ويصبح السائل صافيا، وتبدو الرواسب وكأنها "قرص" صغير في وسط البئر. يعتبر عيار المصل في RPHA هو التخفيف الأخير، والذي لا يزال يعطي تراصًا دمويًا واضحًا دون علامات هامةوجود "القرص".

يمكن أيضًا استخدام RPGA كوسيلة سريعة للتشخيص البكتريولوجي للكشف مباشرة في مادة الاختبار عن البكتيريا والفيروسات والسموم غير المعروفة، على سبيل المثال، مسببات أمراض الطاعون والسموم المعوية للمكورات العنقودية، وما إلى ذلك. مع هذا الإصدار من RPGA، تُعرف كريات الدم الحمراء الممتصة بخصائصها. يتم استخدام الخصوصية كعنصر معروف في الأجسام المضادة للتفاعل - الأجسام المضادة لتشخيص كريات الدم الحمراء. إذا كانت مادة الاختبار تحتوي على كمية كافية من مستضد معروف، فستكون مادة RPGA إيجابية.

خيارات استخدام RPHA هي: تفاعل تحييد المستضد (RNAg)، تفاعل تحييد الأجسام المضادة (RNAb)، تفاعل تثبيط التراص الدموي السلبي (PHA). لهذه التفاعلات، يتم استخدام تشخيص كريات الدم الحمراء المستضد والأجسام المضادة. يمكن استخدام تفاعلين أحادي الاتجاه يتم التحكم فيهما بشكل متبادل في وقت واحد، على سبيل المثال، RPHA مع تشخيص المستضد وRNAg مع تشخيص كريات الدم الحمراء المضاد.

يتكون تفاعل تحييد الأجسام المضادة (RNAb) من خلط معلق يحتوي على المستضد المطلوب مع مصل مناعي محدد يحتوي على أجسام مضادة معروفة بأحجام مناسبة وحضانة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة ساعتين. بعد ذلك، يتم إضافة تشخيص كريات الدم الحمراء المستضدية. يرج الخليط ويترك في درجة حرارة الغرفة. تؤخذ النتائج في الاعتبار بعد 3-4 ساعات وأخيراً بعد 18-24 ساعة، فإذا كانت مادة الاختبار تحتوي على مستضد فإنها سترتبط بالأجسام المضادة (تحييدها)، وبالتالي لن يحدث التراص الدموي.

يتم إجراء تفاعل تحييد المستضد (RNAg) باستخدام نفس المبدأ. فقط في هذه الحالة يتم اكتشاف الأجسام المضادة في مادة الاختبار. سوف يرتبط مستضد محدد يضاف إلى مادة الاختبار هذه بالأجسام المضادة الموجودة فيها، أي أنه سيتم تحييد المستضد بواسطة الأجسام المضادة، وبالتالي لن يحدث التراص الدموي عند إضافة جسم مضاد لتشخيص كريات الدم الحمراء.

رد فعل التخثر. إنه أحد الخيارات لتفاعل التراص السلبي، أي المتسارع على الزجاج بوساطة الخلايا الحاملة للأجسام المضادة. يعتمد رد الفعل هذا على خاصية فريدة من نوعها المكورات العنقودية الذهبية، الذي يحتوي على البروتين A في جداره الخلوي، يرتبط بأجزاء Fc من IgG وIgM. في هذه الحالة، تبقى المراكز النشطة للأجسام المضادة حرة ويمكن أن تتفاعل مع محددات محددة للمستضدات. يتم وضع قطرة من معلق 2% من المكورات العنقودية، المحسسة بالأجسام المضادة المناسبة، على شريحة زجاجية، وتضاف قطرة من معلق البكتيريا قيد الدراسة. إذا تطابق المستضد مع الأجسام المضادة، يحدث تراص واضح للمكورات العنقودية المحملة بالأجسام المضادة خلال 30-60 ثانية.

تفاعل تراص اللاتكس (LAR). حامل الأجسام المضادة في هذا النظام التشخيصي عبارة عن جزيئات لاتكس قياسية صغيرة. يتم إجراء التفاعل باستخدام الطريقة الدقيقة في الآبار الموجودة على الزجاج. الشرط الرئيسي للتدريج الناجح للـ PAH هو الالتزام الصارم بالنسب الكمية لمكونات النظام: تتم إضافة 10 ميكرولتر من مستحضر اللاتكس الحساس بالأجسام المضادة إلى 50 ميكرولتر من مادة الاختبار. يتم التحكم في خصوصية PAH باستخدام ثلاثة اختبارات تحكم موجودة في أنظمة الاختبار التجارية: معروفة رد فعل إيجابي، بوضوح رد فعل سلبيومراقبة جودة معلق اللاتكس باستخدام مادة اللاتكس غير الحساسة للـ PAH (التي لا تحمل أجسامًا مضادة) مع مادة الاختبار. في بلدنا، يتم استخدام اللاتكس أحادي التشتت من البوليسترين بأقطار جسيمات مختلفة (0.3؛ 0.66؛ 0.75؛ 0.8 ميكرومتر) كحاملات لأجسام مضادة محددة. يستخدم LAG للكشف السريع عن الكائنات الحية الدقيقة أو مستضداتها في مادة الاختبار.

الكشف المناعي المغناطيسي للمستضدات. يرتبط أحد خيارات تفاعل التراص المتسارع على الزجاج باستخدام جزيئات البوليمر فائقة المغناطيسية المطلية بأجسام مضادة محددة. يرتبط أحد هذه الجسيمات بما يصل إلى 107-108 خلية من الكائنات الحية الدقيقة، بسبب الحساسية هذه الطريقةيصل إلى 5 CFU/ml. يمكن استخدام الكشف المناعي المغناطيسي للكائنات الحية الدقيقة مع الإنعاش القلبي الرئوي.

تفاعل التراص الدموي الكلي (AHA). يسمح لك بالكشف السريع في دم المرضى عن المستضدات المتداولة بحرية (مستضدات الدم) والمستضدات المرتبطة بالأجسام المضادة - المجمعات المناعية المنتشرة (CIC). بالنسبة لـ RAHA، يتم استخدام خلايا الدم الحمراء المحسسة بالأجسام المضادة المناسبة. تؤدي إضافة مصل دم المريض، الذي يحتوي على مستضدات، إلى كريات الدم الحمراء الحساسة التي يتم تثبيت الأجسام المضادة عليها، إلى التصاق (تراص) كريات الدم الحمراء والمجمعات المناعية.

اختبار كومبس المضاد للجلوبيولين (رد فعل كومبس). يتم تحديد الأجسام المضادة الكاملة (ثنائية التكافؤ) باستخدام تفاعلات التراص المباشرة والسلبية. لا يتم الكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة (أحادية التكافؤ، المعيقة) بهذه الطرق، لأنها عندما تتحد مع المستضد، فإنها تحجبه، ولكن لا يمكنها التسبب في تجميع المستضد في تكتلات كبيرة. الأجسام المضادة غير الكاملة (المانعة) هي تلك التي يعمل فيها مركز نشط واحد فقط؛ المركز النشط الثاني لا يعمل لسبب غير معروف. للكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة، يتم استخدام تفاعل كومبس خاص (الشكل 72). يتضمن التفاعل: مصل المريض الذي يوجد فيه أجسام مضادة غير كاملة، تشخيص المستضد الجسيمي، مصل مضاد الجلوبيولين الذي يحتوي على أجسام مضادة للجلوبيولين البشري. يحدث التفاعل على مرحلتين:

تفاعل المستضد مع الأجسام المضادة غير الكاملة. لا توجد مظاهر مرئية. تنتهي المرحلة الأولى بغسل المستضد من المصل المتبقي للمريض.

تفاعل مصل مضاد الجلوبيولين الذي تم الحصول عليه نتيجة تحصين حيوان بالجلوبيولين البشري مع أجسام مضادة غير كاملة ممتصة على المستضد. نظرًا لحقيقة أن الأجسام المضادة للجلوبيولين ثنائية التكافؤ، فإنها تربط اثنين من الأجسام المضادة أحادية التكافؤ من مجمعات منفصلة من المستضد + الأجسام المضادة غير المكتملة، مما يؤدي إلى التصاقها وظهور راسب مرئي.

13.1. تفاعلات المستضد والأجسام المضادة وتطبيقاتها

عندما يتم إدخال مستضد، يتم تشكيل الأجسام المضادة في الجسم. الأجسام المضادة مكملة للمستضد الذي تسبب في تخليقها وتكون قادرة على الارتباط به. يتكون ربط المستضدات بالأجسام المضادة من مرحلتين. المرحلة الأولى محددة، حيث يحدث الارتباط السريع لمحدد المستضد بالمركز النشط لجزء Fab من الأجسام المضادة. تجدر الإشارة إلى أن الارتباط يرجع إلى قوى فان دير فالس وتفاعلات الهيدروجين والكارهة للماء. يتم تحديد قوة الرابطة من خلال درجة المراسلات المكانية بين الموقع النشط للجسم المضاد وحاتمة المستضد. بعد المرحلة المحددة، تبدأ مرحلة أبطأ - غير محددة، والتي تتجلى في ظاهرة فيزيائية مرئية (على سبيل المثال، تكوين رقائق أثناء التراص، وما إلى ذلك).

التفاعلات المناعية هي تفاعلات بين الأجسام المضادة والمستضدات، وتكون هذه التفاعلات محددة وشديدة الحساسية. وهي تستخدم على نطاق واسع في الممارسة الطبية. بمساعدة ردود الفعل المناعية، يمكن حل المشاكل التالية:

تحديد الأجسام المضادة غير المعروفة بواسطة المستضدات المعروفة (تشخيص المستضدات). تحدث هذه المهمة عندما يكون من الضروري تحديد الأجسام المضادة لمسببات الأمراض في مصل دم المريض (التشخيص المصلي). يتيح لك العثور على الأجسام المضادة تأكيد التشخيص؛

تحديد المستضدات غير المعروفة باستخدام الأجسام المضادة المعروفة (المصل التشخيصي). يتم إجراء هذه الدراسة عند تحديد ثقافة العامل الممرض المعزولة من مادة المريض (التنميط المصلي)، وكذلك عند اكتشاف

المستضدات الميكروبية وسمومها في الدم والسوائل البيولوجية الأخرى. هناك أنواع عديدة من ردود الفعل المناعية، تختلف في تقنية التدريج والتأثير المسجل. هذه هي تفاعلات التراص (RA)، وتفاعلات الترسيب (RP)، والتفاعلات التي تتضمن المتممة (RSC)، والتفاعلات باستخدام المكونات المسمى (RIF، ELISA، RIA).

13.2. رد فعل التراص

تفاعل التراص (RA) هو رد فعل مناعي لتفاعل المستضد مع الأجسام المضادة في وجود إلكتروليتات، ويكون المستضد في حالة جسيمية (كريات الدم الحمراء، والبكتيريا، وجزيئات اللاتكس مع المستضدات الممتزة). أثناء التراص، يتم لصق المستضدات الجسيمية معًا بواسطة الأجسام المضادة، وهو ما يتجلى في تكوين راسب ندف. يحدث تكوين الرقائق بسبب حقيقة أن الأجسام المضادة لها مركزان نشطان، والمستضدات متعددة التكافؤ، أي. لديها العديد من المحددات المستضدية. يستخدم RA للتعرف على العامل الممرض المعزول من مادة المريض، وكذلك للكشف عن الأجسام المضادة للعامل الممرض في مصل دم المريض (على سبيل المثال، تفاعل رايت وهيدلسون لداء البروسيلات، تفاعل فيدال لحمى التيفوئيد والحمى نظيرة التيفية).

إن أبسط طريقة لتشخيص التهاب المفاصل الروماتويدي هي التفاعل على الزجاج، وهو مرض تقريبي يستخدم لتحديد العامل الممرض المعزول من المريض. عندما يتم تحديد التفاعل، يتم تطبيق المصل التشخيصي المتراص على شريحة زجاجية (عند تخفيف بنسبة 1:10 أو 1:20)، ثم تتم إضافة مزرعة من المريض. يكون رد الفعل إيجابيًا إذا ظهرت رواسب ندفية في القطرة. يتم وضع عنصر التحكم في مكان قريب: بدلا من المصل، يتم تطبيق قطرة من محلول كلوريد الصوديوم. إذا لم يتم امتصاص مصل التراص التشخيصي 1، فسيتم تخفيفه (إلى العيار - التخفيف الذي يجب أن يحدث التراص فيه)، أي. وضع RA الموسع في أنابيب الاختبار مع الزيادة

1 يمكن للمصل المتراص غير الممتز أن يراص البكتيريا ذات الصلة التي لها مستضدات مشتركة (متفاعلة). ولذلك يستخدمونالأمصال المتراصة الممتزة, والتي تمت إزالة الأجسام المضادة المتفاعلة منها عن طريق الامتزاز بالبكتيريا ذات الصلة. تحتفظ هذه الأمصال بأجسام مضادة خاصة ببكتيريا معينة فقط.

تخفيفات المصل المتراص، والتي تضاف إليها 2-3 قطرات من معلق العامل الممرض المعزول من المريض. يؤخذ التراص في الاعتبار بكمية الرواسب ودرجة تصفية السائل في أنابيب الاختبار. يعتبر التفاعل إيجابيًا إذا لوحظ التراص في تخفيف قريب من عيار المصل التشخيصي. يصاحب التفاعل ضوابط: يجب أن يكون المصل المخفف بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر شفافًا، ويجب أن يكون تعليق الميكروبات في نفس المحلول غائمًا بشكل موحد، بدون رواسب.

لتحديد الأجسام المضادة للعامل الممرض في مصل دم المريض، يتم استخدام RA واسع النطاق. عند إعداده، يتم تخفيف مصل دم المريض في أنابيب الاختبار وتضاف كمية مساوية من المعلق التشخيصي (معلق الميكروبات المقتولة) إلى أنابيب الاختبار. بعد الحضانة، يتم تحديد أعلى تخفيف للمصل حدث عنده التراص، أي. تشكل راسب (عيار المصل). في هذه الحالة، يحدث تفاعل التراص مع O-diagnosticum (البكتيريا التي تم قتلها بالحرارة، مع الاحتفاظ بمستضد O القابل للحرارة) في شكل تراص دقيق الحبيبات. يكون تفاعل التراص مع H-diagnosticum (البكتيريا التي يتم قتلها بواسطة الفورمالديهايد، مع الاحتفاظ بمستضد H السوطي القابل للحرارة) خشنًا ويستمر بشكل أسرع.

تفاعل التراص الدموي غير المباشر (السلبي).(RNGA أو RPGA) هو نوع من RA. هذه الطريقة حساسة للغاية. بمساعدة RNGA، يمكن حل مشكلتين: تحديد الأجسام المضادة في مصل دم المريض، والتي يضاف إليها تشخيص كريات الدم الحمراء المستضدية، وهي كريات الدم الحمراء التي يتم امتصاص المستضدات المعروفة فيها؛ تحديد وجود المستضدات في مادة الاختبار. في هذه الحالة، يسمى التفاعل أحيانًا تفاعل التراص الدموي العكسي غير المباشر (RONHA). أثناء الإجراء، تتم إضافة تشخيص كريات الدم الحمراء (كريات الدم الحمراء ذات الأجسام المضادة الممتزة على سطحها) إلى مادة الاختبار. في هذا التفاعل، تعمل خلايا الدم الحمراء كحاملات وتشارك بشكل سلبي في تكوين المجاميع المناعية. مع رد فعل إيجابي، تغطي خلايا الدم الحمراء الملتصقة بشكل سلبي الجزء السفلي من الحفرة بطبقة متساوية ذات حواف صدفية ("المظلة")؛ وفي غياب التراص، تتراكم خلايا الدم الحمراء في التجويف المركزي للثقب، لتشكل "زرًا" مدمجًا ذو حواف محددة بشكل حاد.

رد فعل التخثريستخدم لتحديد الخلايا المسببة للأمراض (المستضدات) باستخدام الأجسام المضادة الممتصة المكورات العنقودية الذهبية،يحتوي على البروتين A. البروتين A له صلة بجزء Fc من الغلوبولين المناعي. بفضل هذا، ترتبط الأجسام المضادة بالمكورات العنقودية بشكل غير مباشر من خلال جزء Fc، ويتم توجيه أجزاء Fab نحو الخارج وتكون قادرة على التفاعل مع الميكروبات المقابلة المعزولة من المرضى. في هذه الحالة، يتم تشكيل رقائق.

تفاعل تثبيط التراص الدموي (HAI)يستخدم في تشخيص الالتهابات الفيروسية، وفقط الالتهابات الناجمة عن الفيروسات المتخثرة للدم. تحتوي هذه الفيروسات على بروتين على سطحها - الهيماجلوتينين، وهو المسؤول عن تفاعل التراص الدموي (HRA) عند إضافة خلايا الدم الحمراء إلى الفيروسات. يتضمن RTGA حجب المستضدات الفيروسية بالأجسام المضادة، ونتيجة لذلك تفقد الفيروسات قدرتها على تراص خلايا الدم الحمراء.

رد فعل كومز - RA لتحديد الأجسام المضادة غير المكتملة. في بعض الأمراض المعدية، مثل داء البروسيلات، تنتشر الأجسام المضادة غير الكاملة للعامل الممرض في مصل دم المريض. تسمى الأجسام المضادة غير المكتملة بالأجسام المضادة الحاصرة لأنها تحتوي على موقع ربط واحد للمستضد، وليس موقعين، مثل الأجسام المضادة الكاملة. لذلك، عند إضافة تشخيص مستضدي، ترتبط الأجسام المضادة غير المكتملة بالمستضدات، ولكنها لا تلصقها معًا. لإظهار التفاعل، يتم إضافة مصل مضاد الجلوبيولين (الأجسام المضادة للجلوبيولين المناعي البشري)، مما سيؤدي إلى تراص المجمعات المناعية (التشخيص المستضدي + الأجسام المضادة غير المكتملة) التي تكونت في المرحلة الأولى من التفاعل.

يتم استخدام تفاعل كومبس غير المباشر في المرضى الذين يعانون من انحلال الدم داخل الأوعية الدموية. في بعض هؤلاء المرضى، تم اكتشاف أجسام مضادة أحادية التكافؤ غير مكتملة للريسوس. وهي تتفاعل على وجه التحديد مع كريات الدم الحمراء الموجبة لعامل Rh، ولكنها لا تسبب تراصها. لذلك، يتم إضافة مصل مضاد الجلوبيولين إلى نظام الأجسام المضادة لـ Rh + كريات الدم الحمراء الموجبة لـ Rh، مما يسبب تراص كريات الدم الحمراء. يستخدم اختبار كومبس للتشخيص الحالات المرضية، يرتبط بالتحلل داخل الأوعية الدموية لخلايا الدم الحمراء ذات الأصل المناعي، على سبيل المثال، مرض الانحلالي عند الأطفال حديثي الولادة الناجم عن صراع العامل الريصي.

RA لتحديد فصائل الدميعتمد على تراص كريات الدم الحمراء بواسطة الأجسام المضادة في المصل المناعي لمستضدات فصيلة الدم A(II)، B(III). عنصر التحكم هو المصل الذي لا يحتوي على أجسام مضادة، أي. فصيلة الدم AB (IV) ومستضدات كريات الدم الحمراء من المجموعتين A (P) و B (III). تُستخدم خلايا الدم الحمراء من المجموعة 0 (I) كعنصر تحكم سلبي لأنها لا تحتوي على مستضدات.

لتحديد عامل Rh، يتم استخدام الأمصال المضادة لـ Rh (سلسلتان مختلفتان على الأقل). إذا كان هناك مستضد Rh على غشاء كريات الدم الحمراء قيد الدراسة، يحدث تراص هذه الخلايا.

13.3. معادلة الترسيب

RP هو رد فعل مناعي لتفاعل الأجسام المضادة مع المستضدات في وجود الشوارد، ويكون المستضد في حالة قابلة للذوبان. أثناء هطول الأمطار، يتم ترسيب المستضدات القابلة للذوبان بواسطة الأجسام المضادة، والتي تتجلى في الغيوم في شكل نطاقات هطول الأمطار. ويلاحظ تكوين راسب مرئي عند خلط كلا الكواشف بنسب متساوية. فائض واحد منهم يقلل من عدد المجمعات المناعية المترسبة. هناك طرق مختلفة لأداء رد فعل هطول الأمطار.

رد فعل هطول الأمطار الدائريتوضع في أنابيب ترسيب ذات قطر صغير. يُضاف المصل المناعي إلى أنبوب الاختبار ويُوضع المستضد القابل للذوبان في طبقات بعناية. إذا كانت النتيجة إيجابية، تتشكل حلقة حليبية عند واجهة المحلولين. يُطلق على تفاعل الترسيب الحلقي، الذي يستخدم لتحديد وجود المستضدات في الأعضاء والأنسجة، والتي يتم غلي خلاصاتها وتصفيتها، اسم تفاعل الترسيب الحراري (تفاعل أسكولي لتحديد مستضد الجمرة الخبيثة المستقر بالحرارة).

رد فعل الانتشار المناعي المزدوج لـ Ouchterlony.يتم تنفيذ هذا التفاعل في هلام أجار. في طبقة هلامية ذات سماكة موحدة، يتم قطع الآبار على مسافة معينة من بعضها البعض ومليئة بالمستضد والمصل المناعي، على التوالي. بعد ذلك، تنتشر المستضدات والأجسام المضادة في الهلام، وتلتقي ببعضها البعض وتشكل مجمعات مناعية، تترسب في الهلام وتصبح مرئية كخطوط دقيقة.

تَغذِيَة. يمكن استخدام هذا التفاعل لتحديد المستضدات أو الأجسام المضادة غير المعروفة، وأيضًا لاختبار التشابه بين المستضدات المختلفة: إذا كانت المستضدات متطابقة، تندمج خطوط الهطول، إذا كانت المستضدات غير متطابقة، تتقاطع خطوط الهطول، إذا كانت المستضدات جزئيًا متطابقة، يتم تشكيل حافز.

تفاعل الانتشار المناعي الشعاعي.في المنصهر هلام أجارتتم إضافة الأجسام المضادة ويتم تطبيق الجل في طبقة متساوية على الزجاج. يتم قطع الآبار في الجل ويضاف إليها حجم قياسي من محاليل المستضد بتركيزات مختلفة. أثناء الحضانة، تنتشر المستضدات شعاعيًا من البئر، وتلتقي بالأجسام المضادة، وتشكل حلقة هطول. وطالما بقي المستضد الزائد في البئر، تحدث زيادة تدريجية في قطر حلقة الهطول. تستخدم هذه الطريقة لتحديد المستضدات أو الأجسام المضادة في محلول الاختبار (على سبيل المثال، لتحديد تركيز الغلوبولين المناعي من فئات مختلفة في مصل الدم).

الرحلان الكهربائي المناعي.يتم أولاً فصل خليط المستضد بالرحلان الكهربي، ثم تتم إضافة المصل المضاد المترسب إلى الأخدود الذي يمتد على طول اتجاه حركة البروتين. تنتشر المستضدات والأجسام المضادة في الجل باتجاه بعضها البعض؛ تتفاعل، فإنها تشكل خطوط هطول الأمطار المقوسة.

رد فعل التلبد(بحسب رامون) - نوع من تفاعل الترسيب يستخدم لتحديد نشاط المصل المضاد للسموم أو التوكسويد. ويتم التفاعل في أنابيب الاختبار. في أنبوب اختبار حيث تكون نسبة التوكسين ومضاد السموم متساوية، لوحظ التعكر.

13.4. رد فعل التثبيت المكمل

الأجسام المضادة، التي تتفاعل مع المستضد المقابل، ترتبط بالمكمل الإضافي (النظام الأول). مؤشر التثبيت التكميلي هو تحسس كريات الدم الحمراء بالمصل الانحلالي، أي. الأجسام المضادة لخلايا الدم الحمراء (النظام الثاني). إذا لم يتم إصلاح المكمل في النظام الأول، أي. إذا لم يحدث تفاعل بين المستضد والجسم المضاد، فإن خلايا الدم الحمراء الحساسة يتم التخلص منها بالكامل (رد فعل سلبي). عندما يتم تثبيت المكمل بواسطة المجمعات المناعية للنظام الأول بعد إضافة كريات الدم الحمراء الحساسة، يتم انحلال الدم من

غائب (رد فعل إيجابي). يستخدم تفاعل التثبيت التكميلي لتشخيص الأمراض المعدية (السيلان، الزهري، الأنفلونزا، إلخ).

13.5. تفاعل التعادل

للميكروبات وسمومها تأثير ضار على أعضاء وأنسجة جسم الإنسان. الأجسام المضادة قادرة على الارتباط بهذه العوامل الضارة وحظرها، أي. إبطال مفعول. بناءً على هذه الميزة للأجسام المضادة الاستجابة التشخيصيةتحييد. ويتم ذلك عن طريق إدخال خليط من المستضد والجسم المضاد في الحيوانات أو في كائنات الاختبار الحساسة (ثقافة الخلية، الأجنة). على سبيل المثال، للكشف عن السموم في مواد المريض، يتم حقن حيوانات المجموعة الأولى بمواد من المريض. يتم حقن حيوانات المجموعة الثانية بمادة مماثلة، ويتم معالجتها مسبقًا بالمصل المضاد المناسب. تموت حيوانات المجموعة 1 إذا كان هناك مادة سامة في المادة. تبقى المجموعة الثانية من الحيوانات على قيد الحياة، ولا يظهر التأثير الضار للسم، حيث يتم تحييده.

13.6. ردود الفعل باستخدام الأجسام المضادة المسمى أو المستضدات

13.6.1. تفاعل التألق المناعي (RIF، طريقة كونز)

يتم استخدام هذه الطريقة للتشخيص السريع. يمكن استخدامه للكشف عن المستضدات الميكروبية والأجسام المضادة.

طريقة RIF المباشرة- رد فعل مناعي لتفاعل الأجسام المضادة مع المستضدات، ويتم تمييز الأجسام المضادة بمادة فلوروكروم - وهي مادة قادرة على انبعاث كميات ضوئية ذات طول موجي معين عند تعرضها للضوء بطول موجي معين. خصوصية هذه الطريقة هي الحاجة إلى إزالة المكونات غير المتفاعلة من أجل استبعاد اكتشاف التلألؤ غير المحدد. للقيام بذلك، اغسل الأجسام المضادة غير المتفاعلة. ويتم تقييم النتائج باستخدام المجهر الفلوري. تتوهج البكتيريا الموجودة في اللطاخة المعالجة بهذا المصل المضيء على خلفية داكنة على طول محيط الخلية.

طريقة RIF غير المباشرةيتم استخدامه في كثير من الأحيان أكثر من السابق. يتم تنفيذ هذا التفاعل على مرحلتين. في المرحلة الأولى، المستضدات بشكل متبادل

تتفاعل مع الأجسام المضادة المقابلة، وتشكل المجمعات المناعية. يجب إزالة جميع المكونات التي لم تتفاعل (أي ليست جزءًا من المجمعات المناعية) عن طريق الغسيل. في المرحلة الثانية، يتم الكشف عن مجمع المستضد والجسم المضاد الناتج باستخدام مصل مضاد الجلوبيولين المفلور. ونتيجة لذلك، يتم تشكيل مجمع من الميكروب + الأجسام المضادة للأرنب المضادة للميكروبات + الأجسام المضادة للجلوبيولين المناعي للأرانب، المسمى بالفلوروكروم. ويتم تقييم النتائج باستخدام المجهر الفلوري.

13.6.2. طريقة أو مقايسة الممتز المناعي الإنزيمي

إليسا - الأكثر شيوعا الطريقة الحديثةيستخدم لتشخيص الالتهابات الفيروسية والبكتيرية والأوالي، وخاصة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، التهاب الكبد الفيروسيوإلخ.

هناك الكثير من تعديلات ELISA. يتم استخدام ELISA غير التنافسي في المرحلة الصلبة على نطاق واسع. يتم تنفيذها في ألواح البوليسترين ذات 96 بئرًا (المرحلة الصلبة). عند إجراء رد فعل، من الضروري غسل المكونات غير المتفاعلة في كل مرحلة. عند تحديد الأجسام المضادة، يتم إضافة مصل الدم الاختباري إلى الآبار التي يتم امتصاص المستضدات فيها، ثم يتم تمييز مصل مضاد الجلوبيولين بالإنزيم. يتم التفاعل عن طريق إضافة ركيزة للإنزيم. في وجود الإنزيم، تتغير الركيزة، ويتم اختيار مركب الإنزيم-الركيزة بحيث يكون المنتج المتكون في التفاعل ملونًا. وهكذا، مع رد فعل إيجابي، لوحظ تغير في لون الحل. لتحديد المستضدات، يتم توعية حامل الطور الصلب بالأجسام المضادة، ثم تتم إضافة مادة الاختبار (المستضدات) والمصل المسمى بالإنزيم إلى المستضدات بشكل تسلسلي. ولكي يحدث التفاعل، تتم إضافة ركيزة للإنزيم. يحدث تغيير في لون المحلول مع رد فعل إيجابي.

13.6.3. اللطخة المناعية

تعتمد هذه الطريقة على مزيج من الرحلان الكهربائي وELISA. عند إجراء النشاف المناعي (النشاف من الإنجليزية. لطخة- بقعة) يتم أولاً إخضاع خليط معقد من المستضدات للرحلان الكهربائي في هلام بولي أكريلاميد. المضادة المجزأة الناتجة

يتم نقل الببتيدات الجينية إلى غشاء النيتروسليلوز. يتم بعد ذلك معالجة البقع باستخدام الأجسام المضادة الموسومة بالإنزيم لمستضد محدد، أي. تنفيذ لطخة ELISA. يستخدم التطعيم المناعي في تشخيص العدوى مثل فيروس نقص المناعة البشرية.

13.6.4. المجهر الإلكتروني المناعي

تتضمن الطريقة الفحص المجهري للفيروسات (الميكروبات الأخرى بشكل أقل شيوعًا) في المجهر الإلكتروني، ومعالجتها مسبقًا بالمصل المناعي المناسب الموسوم بمستحضرات كثيفة بصريًا إلكترونيًا، على سبيل المثال الفيريتين، وهو بروتين يحتوي على الحديد.

13.7. التدفق الخلوي

يتم التمييز بين خلايا الدم على أساس قياس التألق الخلوي بالليزر. للقيام بذلك، يتم ملطخة الخلايا المطلوبة مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الفلورية لمستضدات القرص المضغوط. يتم تمرير عينة الدم، بعد معالجتها بالأجسام المضادة الموسومة، من خلال أنبوب رفيع ويتم تمرير شعاع الليزر من خلاله، مما يؤدي إلى توهج الفلوروكروم. ترتبط كثافة الإسفار بكثافة المستضدات على سطح الخلية ويمكن قياسها كميًا باستخدام أنبوب المضاعف الضوئي. يتم تحويل النتائج التي تم الحصول عليها إلى الرسم البياني.

يتم استخدام قياس التدفق الخلوي لتحديد الحالة المناعية(محتوى المجموعات الرئيسية للخلايا الليمفاوية، ومحتوى السيتوكينات داخل الخلايا وخارجها، والنشاط الوظيفي للخلايا القاتلة الطبيعية، ونشاط البلعمة، وما إلى ذلك).

جدول محتويات موضوع "المعدلات المناعية. التشخيص المناعي للأمراض المعدية.":

رد فعل تراص مفصل (را). لتحديد AT في مصل دم المريض، أ تفاعل تراص واسع النطاق (RA). للقيام بذلك، يتم إضافة التشخيص إلى سلسلة من التخفيفات من مصل الدم - تعليق الكائنات الحية الدقيقة المقتولة أو الجزيئات مع Ag الممتص. الحد الأقصى لإعطاء التخفيف التلصيق Ag يسمى عيار المصل.

أنواع تفاعل التراص (را) للكشف عن AT - اختبار قطرة الدم لمرض التولاريميا (مع تشخيص مطبق على قطرة دم وظهور تراصات بيضاء مرئية) واختبار هادلسون لداء البروسيلات (مع تشخيص ملطخ بالبنفسج الجنطياني مطبق على قطرة دم المصل).

تفاعل التراص التقريبي (RA)

للتعرف على الكائنات الحية الدقيقة المعزولة، يتم وضع RA تقريبي على شرائح زجاجية. وللقيام بذلك، تتم إضافة ثقافة العامل الممرض إلى قطرة من المصل المضاد التشخيصي القياسي (المخفف 1:10، 1:20). إذا كانت النتيجة إيجابية، يتم إجراء تفاعل مفصل مع زيادة التخفيفات من المصل المضاد.

رد فعليعتبر إيجابيا إذا لوحظ التراص في التخفيفات القريبة من عيار المصل التشخيصي.

منظمة الدول الأمريكية. الجسدية O- Agsتتميز بأنها مستقرة للحرارة ويمكنها تحمل الغليان لمدة ساعتين، وعند تفاعلها مع AT، فإنها تشكل كتلًا دقيقة الحبيبات.

تذمر. N-Ag (السوطيات)وهي قابلة للحرارة وتتحلل بسرعة عند 100 درجة مئوية، وكذلك تحت تأثير الإيثانول. في التفاعلات مع المصل المضاد H، بعد ساعتين من الحضانة، تتشكل رقائق كبيرة فضفاضة (تتكون من البكتيريا الملتصقة مع الأسواط).

السادس آربكتيريا التيفوئيد مستقرة نسبيًا للحرارة (تتحمل درجات حرارة تتراوح بين 60-62 درجة مئوية لمدة ساعتين)؛ عندما يتم احتضانها مع مصل Vi المضاد، يتم تشكيل تراص ذو حبيبات دقيقة.

تفاعلات التراص الدموي المباشر

أبسط هذه تفاعلات - التلصيقخلايا الدم الحمراء، أو التراص الدموي، تستخدم لتحديد فصائل الدم في نظام ABO. لتحديد التلصيق(أو عدم وجودها) استخدم الأمصال المضادة القياسية مع الراصات المضادة لـ A وB. يسمى التفاعل مباشرا، حيث أن العناصر التي تتم دراستها هي مكونات طبيعية لخلايا الدم الحمراء.

مشترك مع التراص الدموي المباشرالتراص الفيروسي له آليات. العديد من الفيروسات قادرة على التصاق كريات الدم الحمراء في الطيور والثدييات تلقائيًا، وإضافتها إلى معلق كريات الدم الحمراء تؤدي إلى تكوين مجاميع منها.