Реакцията на Шик показва наличието или отсъствието на необходимото ниво на антитоксин в кръвта за защита на тялото от дифтерия. Понастоящем тази реакция се използва по-рядко поради въвеждането на практика на по-чувствителни методи (RPGA).

Реакцията на Шик се провежда при деца, ваксинирани срещу дифтерия, които са завършили ваксинация и поне една реваксинация. На възраст над 13 години реакцията може да бъде диагностицирана дори с неизвестна история на ваксинация. Състоянието на антидифтериен имунитет се проверява не по-рано от 6 месеца след последната реваксинация и не по-рано от два месеца след остро заболяване.

Реакцията на Шик се дава и на новопристигнали деца в групи в неравностойно положение от дифтерия, когато няма информация за ваксинации. Деца с отрицателна реакция на Шик не получават допълнителни ваксинации. Допълнителни ваксинации, независимо от имунния слой в екипа, се правят на деца с положителни и съмнителни реакции.

Резултатите от реакцията на Шик се въвеждат в счетоводната карта превантивни ваксинации(ф. 63) с посочване на датата на провеждане и изследване на реакцията, партидата токсин и института, който е произвел токсина.

За провеждане на реакцията на Шик се използва разреден активен (ненагрят) дифтериен токсин. 0,2 ml съдържа една доза Chic.

За провеждане на реакцията на Шик трябва да се използват еднограмови (туберкулинови) спринцовки, внимателно тествани с точни градуировки, които не позволяват преминаване на течност между стените на спринцовката и нейното бутало.

Строго е забранено провеждането на реакцията на Шик в помещенията, където е извършена реваксинация срещу туберкулоза в този ден, както и използването на спринцовки, игли и други инструменти, използвани за имунизация срещу туберкулоза.

Кожата на мястото на инжектиране се избърсва с памучна вата, навлажнена със 70% етилов алкохол. Токсинът (0,2 ml) се инжектира интрадермално в средна част палмарна повърхностобикновено лявата предмишница. Въвеждането се извършва бавно с известно напрежение, характерно за интрадермално инжектиране на течност. Инжектирането се извършва с много лек наклон на спринцовката към предмишницата, почти успоредно на повърхността на кожата. Разрезът на иглата трябва напълно да влезе в кожата и да се вижда през епидермиса. На мястото на инжектиране трябва да се образува белезникава, добре очертана везикула (папула) с диаметър около 1 cm, с вдлъбнатина на мястото на космените фоликули („лимонова кора“). Тази везикула (папула) се разтваря в рамките на 10 до 15 минути. Ако при инжектиране на токсин везикула (папула) не се образува или изчезва твърде бързо, това означава, че инжекцията е направена неправилно, дълбоко и токсинът, който е влязъл подкожно, може да не предизвика реакция. В резултат на това могат да се получат неправилни резултати.

Реакцията се взема предвид след 72 или 96 ч. Резултатите се оценяват, както следва:

а) реакцията на Шик е положителна, ако се появи зачервяване и инфилтрация на мястото на инжектиране на токсина. Степента на реакция е посочена: “+” - ако зачервяването е с диаметър 1 -1,5 cm, (+ + " - ако е 1,5 - 3 cm, "+ + + " - ако е повече от 3 cm;

б) реакцията на Шик е отрицателна, когато няма зачервяване или инфилтрат на мястото на инжектиране на токсина;

в) реакцията на Шик е под въпрос, ако зачервяването и инфилтратът при прилагане на токсина са или неясно изразени, или ако реакцията е изразена, диаметърът на зачервяването е приблизително 0,5 cm (обозначено с "±").

Противопоказания за реакцията на Шик: спазмофилия, епилепсия, гнойни заболявания, контакт с пациенти вирусен хепатит, бронхиална астма.

Алергени и токсини

Диагностични лекарства

Антитоксичен човешки антикоклюшен имуноглобулин (Русия)

Пречистен концентриран течен антидифтериен серум за коне (Русия)

Серуми и имуноглобулини

Суха ваксина срещу туберкулоза BCG-M (за нежна първична имунизация, Русия)

Ваксина против туберкулоза (БЦЖ) суха за интрадермално приложение (Русия)

Akt-Hib (Hib-vac, Южна Кореа)

Моноваксина срещу коклюш (Русия)

Съдържа коклюшни бактерии, консервант – мертиолат. Да се ​​използва само при епидемиологични показания в зони на инфекция с коклюш.

Съдържа 10 mcg полизахарид на доза Хемофилус инфлуенцатип b, конюгиран с тетаничен токсоид, консервант – трометамол. Използва се за ваксиниране на деца от 2 месеца според епидемиологичните показания.

Mycobacterium bovis BCG-1.Щамът на ваксината е получен чрез продължително (13 години) култивиране на говежди mycobacterium tuberculosis при неблагоприятни условия върху картофено-глицеринова среда с добавяне на жлъчка. Използвани за специфична профилактикатуберкулоза. Ваксинацията се извършва на 5-7 дни от живота, когато тялото е свободно от микобактериална инфекция. Всички здрави деца, юноши и възрастни под 30 години, които реагират отрицателно на туберкулин, подлежат на реваксинация. Механизмът на имунитета при туберкулоза не е напълно разкрит. IN клинична практикаОсновният критерий за интензивността на ваксиналния имунитет е преходът на отрицателна кожна реакция към туберкулин към положителна.

Съдържа живи бактерии от ваксиналния щам, изсушени чрез замразяване в 1,2% разтвор на натриев глутамат Mycobacterium bovis BCG-1.Използва се за лека специфична профилактика на туберкулоза (първична ваксинация) при новородени в райони с неблагоприятна ситуация за туберкулоза.

Съдържа антитела срещу екзотоксина на дифтерийния бацил. Антитоксичната активност се изразява в международни единици (10 000 и 20 000 IU/ml). Използва се за лечение на пациенти с дифтерия. В допълнение към терапевтичните цели, антидифтерийният серум се използва за определяне на токсичността на културите от дифтериен бацил в реакцията на утаяване на гел.

Съдържа имунологично активна фракция от донорска кръвна плазма с антитела срещу екзотоксина на коклюшния микроб (най-малко 750 единици антитоксични антикоклюшни антитела). Използва се за лечение на магарешка кашлица.

Съдържа пречистен дифтериен токсин на 0,2 ml 1/40 DLM токсин от морско свинче. Използва се за интрадермални тестове с цел имунодиагностика. При индивиди се развива възпалителна реакция на мястото на инжектиране. Ако кръвта съдържа повече от 0,03 IU антитоксин, тестът е отрицателен. Преди това тестът на Шик често се използваше за идентифициране на лица, податливи на дифтерия. Понастоящем, поради възможността от усложнения, употребата му е ограничена до строги епидемични показания.

Токсини (от гръцки toxikon - отрова), вещества от бактериален произход, които могат да инхибират физиологичните функции, което води до заболяване или смърт при животни и хора. По химическа природа всички токсини са протеини или полипептиди. Това е различно от другите органични и неорганични токсични веществаКогато токсините попаднат в тялото, те предизвикват образуването на антитела.
За някои инфекциозни заболявания (дифтерия, скарлатина) за определяне на силата на имунната система и чувствителността на децата, интрадермални тестовеизползване на подходящи разредени токсини. Положителната реакция (локално възпаление на кожата в областта на инжектиране на токсин) се причинява от токсичния ефект на токсина върху кожната тъкан. Отрицателният резултат от реакцията се обяснява с неутрализирането на внесения в кожата токсин от съответния антитоксин, съдържащ се в имунния организъмдостатъчно количество за тази цел.
Токсините се получават от токсигенни щамове на микроби (дифтериен бацил или стрептокок от скарлатина) чрез инокулация върху течна хранителна среда (бульон на открито), последвано от филтриране през бактериални филтри. От получените токсини се приготвят диагностичните токсини Шик (дифтериен) и Дика (скарлатина). Токсините се прилагат интрадермално в количество от 0,2 ml (Shika) и 0,1 ml (Dika) в средната част на вътрешната повърхност на предмишницата.
Анатоксините са филтрати от бульонни култури на токсигенни микроорганизми, които са загубили своята токсичност поради специална обработка, но са запазили в значителна степен антигенните и имуногенни свойства на оригиналните токсини.
Когато се въвеждат в тялото на човек или животно, токсоидите предизвикват образуването на антитоксичен имунитет, което им позволява да се използват за профилактика на тези инфекциозни заболявания, които се основават на действието на екзотоксини, секретирани от патогени, както и за хиперимунизация на животни, които произвеждат антитоксични серуми.
Независимо от вида на токсоида, неговата имуногенност и антигенност се определят от съответните свойства на оригиналния токсин. Ето защо лабораториите, произвеждащи тези лекарства, обръщат голямо внимание на създаването на оптимални условия за образуване на токсини.
За получаване на токсини с висока якост са необходими щамове, които се отличават с особено изразена способност да образуват токсини при изкуствени условия. Не всички щамове токсигенни бактерии имат тези свойства. За производствени цели се използват щамове, които са адаптирани към изкуствена среда и трайно запазват способността си да образуват токсини.
Културите от токсинообразуващи агенти се съхраняват или в изсушено състояние, или върху среда, оптимална за даден вид бактерии. Преди използване за посяване на масови партиди, щамовете се пасират върху средата, използвана за получаване на токсина.
При равни други условия силата на токсините се определя от качеството на културалната среда, така че лабораториите обръщат внимание на подготовката на хранителната среда. Суровините, химикалите и другите съставки, включени в околната среда, подлежат на най-внимателен контрол в биохимичните лаборатории на производствените институти.
За образуване на токсини се използват течни хранителни среди, които включват месна вода и продукти от пептично (бульон на Мартин, среда на Рамон) или триптично (среда на Поуп) смилане на месо.
Процесът на хидролиза на месото се контролира чрез определяне на общия аминен азот и коефициента на разграждане на протеина, който се изчислява от отношението на аминовия азот към общия. Използват се и безмесен казеин, полусинтетични среди.
Към хранителната среда, предназначена за образуване на токсини, се добавят въглехидрати (глюкоза, малтоза или смес от тях). Когато въглехидратите ферментират, се освобождава голямо количество енергия, което е необходимо за процесите на синтез, протичащи в развиващата се култура. Добавянето на въглехидрати драстично увеличава силата на токсините, произведени в околната среда.
В допълнение към въглехидратите, някои метали са необходими в минимални дози за образуването на токсини. Образуването на токсини от дифтерийния бацил се инхибира както от излишъка на желязо в околната среда, така и от липсата му. При наличие на оптимални количества желязо образуването на токсини рязко се увеличава.
Образуването на токсини става напълно при определено рН на околната среда. Междувременно, по време на растежа на културата, стойността на pH се променя и може да достигне стойности, които ще инхибират образуването на токсина.
За да се елиминира това, се добавят буферни вещества, за да се поддържа желаната стойност на pH. Едно от тези вещества, което има буферни свойства, е натриевият ацетат, който се добавя към бульона в количество от 0,5-0,75 %.
В зависимост от биологичните характеристики на микроба, произвеждащ токсини, различни условиярегулира се отглеждането и по-специално аерирането на околната среда. Дифтерийният бацил образува токсин при условия на максимална аерация; напротив, тетаничният бацил и други токсигенни анаероби не се нуждаят от кислород. Според това е първият пътВъв втория случай културата се отглежда в тънък слой среда с голяма контактна повърхност с въздуха; във втория случай средата се излива във висок слой и се поставят различни кислородни адсорбенти (памучна вата, сухи червени кръвни клетки). добавен.
Температурата и продължителността на култивиране варират за различните микроби. Общото в процеса на образуване на токсини е необходимостта от перфектен контрол на температурата в термостата. Температурните колебания влияят негативно на силата на токсина. Следователно термостатите, в които се образува токсин, са оборудвани с прецизни термостати.
Във всеки отделен случай продължителността на отглеждане на една култура се определя от интензивността на образуване на токсини в дадена серия от среди. За да се разреши въпросът кога да се спре култивирането, силата на pH на токсина на средата се определя в различни моменти на култивиране.
Когато силата на токсина достигне своя максимум, той се отделя от микробните тела, като това става чрез филтриране през специални бактериални филтри (анаеробни микроорганизми) или обикновени хартиени филтри (дифтериен бацил).
Прехвърлянето на токсични филтрати към ванатоксин се осъществява чрез продължително излагане на формалдехид при температура 39-40 °C. Формалинът се комбинира със свободни аминогрупи на аминокиселини, полипептиди и токсинови протеини, поради което губи своите токсични свойства. Преходът на ванатоксин токсин става в рамките на 3-4 седмици. За правилното образуване на токсоид рН на токсина е важно. Най-благоприятна е неутрална или леко алкална реакция на околната среда.
Анатоксините се характеризират с пълна безвредност за животните. Въпреки това, ако не бъдат напълно неутрализирани, те могат да задържат остатъци от токсини, които причиняват късно увреждане на чувствителния организъм. Ето защо, когато се проверява безвредността на токсоидите, животните се наблюдават за дълъг период от време. Безвредността на токсоидите е необратима. Никакво въздействие не води до възстановяване на загубената токсичност.
Токсоидите се запазват почти напълно антигенни свойстватоксини. Това може да се провери различни методи in vitro (реакция на флокулация, реакция на свързване на токсоид) и при експерименти с животни, при които прилагането на токсоид предизвиква образуване на съответните антитоксини и създаване на антитоксичен имунитет.
Токсоидите са устойчиви; те понасят многократно замразяване и размразяване, устояват на действието висока температураи са стабилни при дългосрочно съхранение.
Освен специфични протеини, токсоидите съдържат и баластни вещества, от които могат да бъдат освободени по различни методи. Те се основават на способността на токсоидите да се утаяват при насищане с неутрални соли, соли тежки метали, киселини (солна, трихлороцетна, метафосфорна), както и в присъствието на етилов и метилов алкохол при ниски температури. Тези методи в момента се използват за получаване на пречистени, концентрирани токсоиди.
Токсоидите се адсорбират върху различни неразтворими вещества (фосфорни соли, алуминиев хидроксид), това се използва за получаване на сорбирани токсоиди, които се характеризират с бавна абсорбция в тялото, в резултат на което може да се получи по-интензивна имунна система.
Поради своята безвредност, висока антигенност и имуногенност, токсоидите са най-ценното средство за профилактика и лечение на редица заболявания.
В момента са получени токсоиди: дифтериен, тетаничен, ботулинов, стафилококов, дизентериен, от токсини, произведени от патогени на газова гангрена, както и от змийска отрова.

ШИК РЕАКЦИЯ(Schick) е предложен през 1913 г. за определяне на степента на чувствителност към дифтерия. Ш.р. се извършва чрез стриктно интрадермално инжектиране на дифтериен токсин в обем от 0,2 cm 3,съдържащ 1/40 Dim (вж дифтерия).Токсинът се инжектира в кожата на лявата ръка; в кожата дясна ръкаЗа контрол се внася същото количество токсин, загрят при 100° за 10 минути. Резултатите от инжектирането се отбелязват след 24 и 96 часа и могат да се наблюдават следните явления: 1. При пълна липса на реактивни явления на мястото на инжектиране на „контролния“ (нагрят) токсин, се появяват зачервяване и инфилтрация на мястото на инжектиране. мястото на инжектиране на активния токсин, придружено от леко усещане за парене и сърбеж. Тези явления се развиват на първия ден, достигат максимум на четвъртия ден, след което изчезват, оставяйки пигментацията на кожата за известно време. По размера на зачервяването и инфилтрата може да се прецени степента на реакцията, която се обозначава, както следва: + („съмнителна“ реакция - с неясно изразен инфилтрат и леко зачервяване), + (със зачервяване в диаметър не повече от 1.5 cm), + +(ако зачервяването е с диаметър от 1,5 до 3 см)и + + + (ако зачервяването е повече от 3 см);този тип реакция се нарича "положителна" Sh. 2. При липса на каквито и да било реактивни явления на мястото на инжектиране както на нагрят, така и на активен токсин, те говорят за "отрицателни" Shch. 3. Ако реактивните явления се отбелязват и на двете ръце в еднаква степен, тогава такова явление се обозначава като „фалшиво“ Ш. р. Степента на фалшива (с нагрят токсин) реакция се отбелязва (като положителна) с един, два, три знака. Реакцията към нагрят токсин има определени качествени разлики от реакцията към активен токсин: бърза поява и изчезване (обикновено в рамките на 36-48 часа) и преобладаване на ексудативни явления над инфилтративни. 4. Ако реактивните явления се отбелязват и на двете ръце, но степента им е различна, тогава се говори за „комбиниран“ Ш. р. - с преобладаване на явления от страна на активния токсин и за „извратен“ Ш. р. , - с преобладаване на явления от страна на нагрятия токсин. Общоприетите представи за същността на Ш. р. се свеждат до следното: ако няма антитоксин в кръвта на тестовия субект или се съдържа в количество по-малко от /zo -A-E в 1.0 серум, тогава инжектираният интрадермален токсин причинява реактивни явления, обозначени като "положителни" III Ако има достатъчно количество антитоксин в кръвта на тествания субект (според Schick 1/30, според Behring 1/xoo и повече AE в 1.0 серум), тогава последният неутрализира инжектирания токсин и "отрицателен" Получава се Sh.r Тези разпоредби се потвърждават от следното наблюдение: ако неутрална смес от токсини и антитоксини се инжектира в субект, чувствителен към дифтериен токсин, тогава по правило не се наблюдава реакция на мястото на инжектиране на тази смес. Освен това са направени редица едновременни директни определяния на количеството антитоксин в кръвта по метода на Roemer успоредно с Sh. Понякога наблюдаваните несъответствия между тези явления не могат да разклатят общото правило, тъй като се случват доста рядко: Дженсън, например. отбелязва наличието на отрицателни Ш. р. с незначително съдържание на антитоксин “I /i 00 AE в 1.0 серум) в 9% от случаите. При оценка на резултатите от Sh. трябва да се има предвид, че в ранна детска възраст често се наблюдава отрицателен Sh.r. при липса на антитоксин в кръвта. Това се обяснява с присъщата ранна детствокожна анергия. Що се отнася до т.нар невярно Ш. р. и неговите варианти (комбиниран, извратен Sh. r.), т.е. реакция на кожата към нагрят токсин, се обяснява с чувствителността на тялото към термостабилни метаболитни продукти на дифтериен бацил и вещества в хранителния бульон. Тази чувствителност е алергична по природа. Както Siegl показа, той се състои от два компонента - специфичен и неспецифичен по отношение на дифтерията. Наблюденията на Zoller показват пълна идентичност на фалшивата реакция с интрадермалната реакция към токсоид (0,2 токсоид, разреден в съотношение 1: 100) - това е така наречената реакция на Zeller. В зависимост от резултата от реакциите към токсина и токсоида, Zeller разделя всички хора на 4 групи (виж таблицата). Zeller си представя процеса на имунизация срещу дифтерия, както следва: индивиди, чувствителни към дифтерия (група I с Характеристики на групата Реакция | Zeller Schlk реакция f 1 Чувствителен към II f dlfterchi III 1 Имунитет към df-IV / териа + + + 1 Етапи + ) алергии положителни Sh.r.) при среща с дифтериен бацил (b-n или носител) или по време на изкуствена имунизация, те стават чувствителни към микроба и неговите продукти. Кожата им дава алергична реакция; но тъй като все още не е произведено достатъчно количество антитоксин, кожата също реагира на активния токсин (група II с фалшив или комбиниран Sh. r.). Впоследствие количеството антитоксин в кръвта се увеличава толкова много, че реакцията към активния токсин става отрицателна, но алергията все още остава (група III с перверзен Sh. r.); накрая последният изчезва и се установява траен имунитет, характерен за лицата от IV група (с отрицателен Ш. р.). Стойност на Ш.р как имунната реакция се определя от преобладаващите възгледи за природата на имунитета при дифтерия. от модерни идеиПоследното се основава на наличието на достатъчно количество антитоксин в кръвта. Тези идеи, както е известно, определят съвременната практика на имунизационна профилактика на дифтерия (токсин-антитоксинови смеси, токсоид). От тази гледна точка, Ш. р., удобно заменяйки обемистите пряка дефиницияантитоксин в кръвта по метода на Remer може да се счита за идеален начин за определяне на състоянието на имунитета, респ. чувствителност на човек към дифтерия. Въпросът за минималното количество антитоксин в кръвта, необходимо за постигане на траен имунитет срещу дифтерия, е спорен; във всеки случай е необходимо да се отбележи сравнителната рядкост на заболяването от дифтерия при хора с отрицателен Ш. р.; в допълнение, можем да посочим директно експериментално потвърждение на този въпрос: Guetrie, Marshall и Moss заразиха осем доброволци чрез намазване на фаринкса с вирулентна култура на дифтерия, от които четирима имаха положителен Sh. отрицателен. В резултат на това 4 души от първата група са претърпели типично заболяване, от 4 души с отрицателен Sh. 3 са с временно носителство на дифтериен бацил без признаци на заболяване. Епидемиологично значение на Sh. r. на това е посветен огромен труд. От тях става ясно, че Г.Л. Р. представя надежден метод за определяне на степента на имунния слой на дадена общност по отношение на дифтерията. Оказа се, че ако разпределите положителни Sh. по възраст, тогава се получава крива (Zin-gher) на възрастовата чувствителност към дифтерия, която доста точно съвпада с възрастовото разпределение на заболеваемостта от дифтерия. Относително високият имунитет на ранните бебета (до шест месеца) може да се обясни с пасивното предаване на имунни тела чрез майчиното мляко. Що се отнася до намаляването на чувствителността към дифтерия с възрастта (започвайки от една година), придружено от натрупване на антитоксин в кръвта, някои автори (Friedberger и други) смятат това явление за израз на "физиологична серогенеза", т.е. натрупването на антитоксин става във физиологичен ред, придружено от такива на. съзряване наведнъж човешкото тяло, и други автори (Zinger, Dedley, Ramon и др.) Вярват, че хората натрупват антитоксин в кръвта в резултат на очевидна и по-често „тиха инфекция“ с дифтерия (вижте фигурата). Епидемиологично значение на Sh. r. се крие и във факта, че е удобно да се използва за избор на лица, подлежащи на (в случай на положителен резултат) активна имунизация срещу дифтерия. Обикновено се използва при деца

"-~-" $лица с антитоксин в кръвта (по Гриър)

°--«> % от хората за положителна реакция. Шик (по Park и Tsknger) барове - заболеваемост от дифтерия Разпределение по възраст: лица с антитоксин в кръвта (в%); лица с положителна реакция на Шик (в%); заболеваемост от дифтерия (°/ooo всяка възраст). на възраст над 5 години, като се има предвид относителната рядкост на отрицателни Sh. под 5 години. Накрая III. Р. Използва се и като обективен контрол на ефективността на превантивните ваксинации срещу дифтерия. Тази ефективност се доказва от преминаването на положителен (преди ваксинация) Sh. отрицателен след ваксинация (обикновено 6 седмици след последната ваксинация). Техника за производство на Ш. р.: 1. За да приготвите необходимото разреждане на токсина в необходимия обем, започнете от Дим токсин. Да кажем Dim на токсин = 0,0032. За да приготвите токсин, съдържащ I/4l) Dim в 0,2 обема, процедирайте както следва: вземете 1OODlm, в този случай = 0,32, и добавете физиологичен разтвор до 10,0, т.е. 9,68. Вземете 1,0 от това разреждане (т.е. 10 Dim) и го добавете към 79,0 физиол. решение. Тогава в 80.0 от второто разреждане има 10.Dim; в 1 cm 3следователно - V" Dim, а в 0,2 - Vio Dim. За всяко разреждане е необходимо да вземете свежа, суха пипета, като я измиете поне 10 пъти. В този случай е необходима специална прецизност при измерването и прецизност на пипетите (половината от приготвения разтвор на токсина се излива в отделна колба и се поставя във вряща водна баня за 10 минути; така се получава загрят токсин за „контрол“) . С оглед на това, че токсинът, разреден физиол. разтвор, бързо губи активността си, по-удобно е да се вземат т.н. за разреждане. боратен буферен разтвор (вж. реакцията на Дик)при което разреденият токсин запазва силата си в продължение на няколко месеца. 2. Инжектирането се извършва строго интрадермално, най-удобно с помощта на туберкулинова спринцовка с много тънка платинена игла (№ 18, 19). Иглата трябва да има къс шип. При инжектиране брадата трябва да се държи навън. Токсинът се прилага бавно с известно напрежение, характерно за интрадермално инжектиране на течност, и в резултат на това на мястото на инжектиране се образува добре демаркиран мехур (Quaddel) с вдлъбнатини на мястото на космените фоликули. 3. Активният токсин се инжектира в кожата на предмишницата на лявата ръка, загрятият токсин се инжектира в кожата на предмишницата на дясната ръка. По време на масовото производство III. Р. Препоръчително е двама лекари да го извършват едновременно – единият инжектира активния, другият загрят токсин. 4. Обратно броене Ш.р. се извършва два пъти: след 24 часа за отчитане на фалшивите реакции и след 96 часа, когато се появи истинската Sh. достига своята кулминация. Лит.:Здродовски П., Съвременни проблеми на специфичната профилактика на дифтерия, Арх. биол. Науки, том XXXV, сер. А, проблем. 2, 1934; Doull J., Фактори, влияещи върху селективното разпространение на tn дифтерия, Journ. ol предотвратявам, med., v. IV, 1930; Фрост У., Инфекция, имунитет и заболяване в епидемиологията на дифтерията, Пак там, v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets a response de Schick negative, Compt. ренд, де ла соц. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Токсино-антитоксинова имунизация срещу дифтерия, Journ. амер. мед. Ass., v. LXXIX, стр. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick V., Die Diphtherietoxin-Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, No. 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hung der Pseudoreaktion bei der Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., ​​​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo-reaction al" anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Вижте също буква към чл. Скарлатина. Г. Орлов.

Цитохимични методипреследват идентифицирането на химични и ензимни вещества в клетките, като използват цветни реакции за това. Цитохимични лекарства консервират клетъчна структура, което позволява идентифицирането на клетките и вътреклетъчното локализиране на изследваното съединение. Ето защо в хематологията се предпочитат не биохимичните, трудоемки, деструктивни клетъчни структури и свързани с много разнородна клетъчна популация, а цитохимичните методи.

Цитохимиядоказа, че сред морфологично идентичните клетки има значителни химични и ензимни разлики.

Гликоген (CHIK реакция) (PAS) - метод на Hotchkiss - Mac Minus

Принципът на реакцията CHIC. Полизахаридите се идентифицират чрез реакция, която окислява алкохолните групи, които се превръщат в алдехидни групи, и идентифицирането на последните чрез цветна реакция с реагента на Шиф.

Реактиви за CHIC реакцията: 1. Фиксираща спиртно-формалинова смес: 9 части абсолют етилов алкохол+1 част 40% формалдехид; съхранявайте при температура +4°.

2. Периодна киселина, 1% воден разтвор. Разтворът е безцветен. Съхранява се в бутилка от кафяво стъкло, на тъмно, при лабораторна температура. Пожълтял разтвор е неизползваем.

3. Реактив на Шиф. 1 g основен фуксин се разрежда в 200 ml дестилирана вода при температура на кипене. Разбърква се 5 минути, охлажда се до 50°, филтрира се и се добавят 20 ml нормална солна киселина. Охлажда се до 25°, добавят се 2 g натриев или калиев метабисулфит, който напълно осигурява разтвора. Разтворът трябва да престои един ден на тъмно и студено (+4°). След това добавете 2гр активен въглен, чатете за 1 мин. и филтър.
Полученият филтрат е прозрачен и безцветен. Допуска се леко жълтеникав оттенък; ако разтворът стане розов, той става неизползваем. Съхранявайте при температура +4° в херметически затворена бутилка от кафяво стъкло.

4. Зелена светлина -1% воден разтвор.

5. Диастаза: невтечнена човешка слюнка или 0,1% разтвор на амилолитично-диастатичен ензим във физиологичен разтвор.

Техника за изпълнение на ШИК реакцията

1) 10-минутно фиксиране на петна със смес от алкохол и формалин; изплакване с дестилирана вода;
2) окисляване с 1% разтвор на периодна киселина, 10 минути; изплакване с дестилирана вода;
3) оцветяване с реактив на Шиф в захлупен съд на тъмно и студено за 2 часа; изплакване с течаща вода;
4) контрастно оцветяване с 1% зелена светлина за 1 минута; изплакване с течаща вода.

Присвоен контрол намазкаподложени на инкубиране с диастаза, 60 минути. при стайна температура за селективно отстраняване на гликогена. След измиване с дестилирана вода се обработва по обичайния метод.

Оценка на резултатите от CHIC реакцията

Гликоген, боядисани в червено червен цвят, се появява под формата на зърна или разпръснати. За проследяване на реакцията се използват зрели цитонамазка гранулоцити. В допълнение към гликоген CHIC положителна реакцияТе произвеждат и други въглехидратни вещества, като муцин, мукопротеини, цереброзиди и фибрин. Диференцирането на гликогена от тези компоненти се извършва чрез предварителна обработка с диастаза, след което гликогенът вече не се оцветява.

IN гранулоцитигликогенът е в диспергирана форма още на етапа на промиелоцитите и започва да се увеличава, когато узрее. При нормални условия лимфоцитите са отрицателни или 20% от тях могат да съдържат няколко малки зрънца гликоген. Моноцитите са отрицателни или фино гранулирани.

Интензивност оцветяванеопределени полуколичествено. В реакцията PAS се отразява под формата на индикатор за гликоген или среден индикатор за реакция (Astaldi). Нормален индикаторгликогенът варира от 0,10 до 0,30. Обикновено само патологичните лимфоцити показват степен на натоварване над 3.

Показано е чрез метода на CHIC реакцията:
а) При настройка диференциална диагнозанякои цитологични видове остра левкемия:
- Миелобластите и промиелоидите са PHIK-отрицателни или придобиват слаб дифузен цвят. Телата на Auer дават положителна реакция, която отслабва след храносмилане със слюнка.
- Лимфобластите при остра левкемия и лимфосаркома дават остра CHIC-положителна реакция под формата на зърна или големи блокове гликоген.
- Еритробластите при еритремия и остра еритролевкемия дават рязко положителна разпръсната или гранулирана реакция, за разлика от нормалните еритробласти, които са PAS-отрицателни;
- Моноцитоидните бласти са непостоянно слабо положителни, с фина грануларност.

б) За целите на поставяне на диагноза и проследяване на ефективността на лечението на хронична лимфна левкемия: повишеният показател на гликоген показва тежка форма на заболяването и тежка прогноза.
Растеж на гликогенв патологични лимфоцити, явление, което не е характерно за левкемия, се обяснява с повишаване на метаболитната активност с всякакъв вид лимфоидна пролиферация.

в) За разграничаване на клетките на Гоше от други макрофаги с натрупване.