Schickin reaktio osoittaa, että veressä on tai ei ole tarvittavaa antitoksiinipitoisuutta kehon suojelemiseksi kurkkumätä vastaan. Tällä hetkellä tätä reaktiota käytetään harvemmin herkempien menetelmien (RPHA) käyttöönoton vuoksi.

Schickin reaktio suoritetaan kurkkumätä vastaan ​​rokotetuilla lapsilla, jotka on rokotettu loppuun ja vähintään yksi uusintarokotus. Yli 13-vuotiaana reaktion voi aiheuttaa myös tuntematon rokotushistoria. Antidifteriaimmuniteetin tila tarkistetaan aikaisintaan 6 kuukauden kuluttua viimeisestä uusintarokotuksesta ja aikaisintaan kaksi kuukautta akuutin sairauden jälkeen.

Schickin reaktio laitetaan myös kurkkumätästään epäedullisiin ryhmiin, vasta saapuneet lapset, kun rokotuksista ei ole tietoa. Lapset, joilla on negatiivinen Schick-reaktio, eivät saa lisärokotuksia. Lisärokotuksia, riippumatta joukkueen immuunikerroksesta, suoritetaan lapsille, joilla on positiivisia ja epäilyttäviä reaktioita.

Shik-reaktion tulokset kirjataan muistikortille ennaltaehkäisevät rokotukset(f. 63), josta käy ilmi reaktion asettamis- ja testauspäivämäärä, toksiinin sarja ja toksiinin tuottanut laitos.

Shik-reaktion aikaansaamiseksi käytetään laimennettua aktiivista (kuumentamatonta) difteriatoksiinia. 0,2 ml sisältää yhden Shik-annoksen.

Schickin reaktion aikaansaamiseksi tulee käyttää yhden gramman (tuberkuliini) tarkasti tarkastettuja ruiskuja, joissa on tarkat asteikot, jotka eivät päästä nestettä ruiskun seinämien ja männän väliin.

On ehdottomasti kiellettyä suorittaa Schick-reaktiota tiloissa, joissa tuberkuloosia vastaan ​​otettiin uusintarokotus kyseisenä päivänä, samoin kuin ruiskujen, neulojen ja muiden tuberkuloosi-immunisaatiossa käytettävien työkalujen käyttö.

Pistoskohdan iho pyyhitään 70-prosenttisella etyylialkoholilla kostutetulla puuvillavillalla. Toksiinia (0,2 ml) ruiskutetaan ihonsisäisesti keskiosa kämmenen pinta yleensä vasemmassa kyynärvarressa. Syöttö suoritetaan hitaasti tunnetulla jännitteellä, joka on ominaista intradermaaliselle nesteen injektiolle. Injektio tehdään erittäin kevyen ruiskun kaltevuuden alle kyynärvarteen nähden, lähes yhdensuuntaisesti ihon pinnan kanssa. Neulan leikkauksen tulee päästä kokonaan ihoon ja loistaa orvaskeden läpi. Pistoskohtaan tulee muodostua valkeahko, hyvin rajallinen rakkula (papuli), jonka halkaisija on noin 1 cm ja joka jättää jäljen karvatuppien kohtaan ("sitruunankuori"). Tämä kupla (papuli) häviää 10-15 minuutissa. Jos rakkula (papuli) ei muodostu tai katoaa liian nopeasti myrkkyä injektoitaessa, tämä tarkoittaa, että injektio on tehty väärin, syvälle, eikä ihonalaisesti päässyt toksiini välttämättä aiheuta reaktiota. Tämän seurauksena voidaan saada väärä tulos.

Reaktio kirjataan 72 tai 96 tunnin kuluttua. Tulokset arvioidaan seuraavasti:

a) Shikin reaktio on positiivinen, jos toksiinin injektiokohdassa ilmenee punoitusta ja infiltraatiota. Reaktioaste ilmoitetaan: "+" - jos punoituksen halkaisija on 1 -1,5 cm, (+ +" - jos 1,5 - 3 cm, "+ + +" - jos yli 3 cm;

b) Shikin reaktio on negatiivinen, kun toksiinin injektiokohdassa ei ole punoitusta ja infiltraatiota;

c) Schickin reaktio on kyseenalainen, jos punoitus ja infiltraatti toksiinin lisäämisen aikana eivät joko ilmene selvästi tai jos reaktio on selvä, punoituksen halkaisija on noin 0,5 cm (merkitty "±").

Vasta-aiheet Schickin reaktion muotoilulle: spasmofilia, epilepsia, märkärakkulataudit, kosketus potilaiden kanssa virushepatiitti, keuhkoastma.

Allergeenit ja myrkyt

Diagnostiset lääkkeet

Immunoglobuliini antipertussis antitoksinen ihminen (Venäjä)

Anti-difteria hevosen seerumi puhdistettu tiivistetty neste (Venäjä)

Seerumit ja immunoglobuliinit

Tuberkuloosirokote BCG-M kuiva (säästävää perusrokotusta, Venäjä)

Kuiva tuberkuloosirokote (BCG) ihonsisäiseen antoon (Venäjä)

Akt-Khib (Hib-wak, Etelä-Korea)

Hinkuyskä monorokote (Venäjä)

Sisältää hinkuyskäbakteeria, säilöntäainetta - mertiolaattia. Käytä vain epidemiologisten indikaatioiden mukaan hinkuyskäinfektiokeskuksissa.

Sisältää 10 mcg polysakkaridia per annos haemophilus influenzae tyyppi b, konjugoitu tetanustoksoidin kanssa, säilöntäaine - trometamoli. Käytetään lasten rokottamiseen 2 kuukauden iästä alkaen epidemiologisten indikaatioiden mukaan.

Mycobacterium bovis BCG-1. Rokotekanta saatiin viljelemällä pitkään (13 vuoden ajan) tuberkuloosia naudan mykobakteereja epäsuotuisissa olosuhteissa peruna-glyseriinialustalla, johon oli lisätty sappi. Hae erityinen ehkäisy tuberkuloosi. Rokotus suoritetaan 5-7. elinpäivänä, jolloin elimistö on vapaa mykobakteeri-infektiosta. Kaikki terveet lapset, nuoret ja alle 30-vuotiaat aikuiset, jotka reagoivat negatiivisesti tuberkuliiniin, ovat uusintarokotuksen kohteena. Tuberkuloosin immuniteetin mekanismia ei täysin ymmärretä. SISÄÄN hoitokäytäntö Pääkriteeri rokoteimmuniteetin voimakkuudelle on tuberkuliinin aiheuttaman negatiivisen ihoreaktion siirtyminen positiiviseksi.

Sisältää pakastekuivattu 1,2 % natriumglutamaattiliuoksessa rokotekannan eläviä bakteereja Mycobacterium bovis BCG-1. Sitä käytetään vastasyntyneiden tuberkuloosin spesifisen ehkäisyn (ensirokotuksen) säästämiseen alueilla, joilla on epäsuotuisa tilanne tuberkuloosille.

Sisältää vasta-aineita difteriabacillus-eksotoksiinia vastaan. Antitoksinen aktiivisuus ilmaistaan ​​kansainvälisinä yksikköinä (10 000 ja 20 000 IU/ml). Käytetään kurkkumätäpotilaiden hoitoon. Hoitotarkoitusten lisäksi antidifteriaseerumia käytetään difteriabacillusviljelmien toksisuuden määrittämiseen geelin saostusreaktiossa.

Sisältää immunologisesti aktiivisen osan luovuttajien veriplasmasta, jossa on vasta-aineita hinkuyskämikrobin eksotoksiinille (vähintään 750 IU antitoksisia pertussis-vasta-aineita). Käytetään hinkuyskän hoitoon.

Sisältää puhdistettua difteriatoksiinia 0,2 ml:ssa 1/40 DLM marsutoksiinia. Käytetään intradermaalisissa testeissä immunodiagnostiikan tarkoituksiin. Yksilöille kehittyy tulehdusreaktio pistoskohtaan. Jos veri sisältää yli 0,03 IU antitoksiinia, testi on negatiivinen. Aikaisemmin Schickin testiä käytettiin usein kurkkumätälle alttiiden yksilöiden tunnistamiseen. Tällä hetkellä sen käyttö on rajoitettu komplikaatioiden mahdollisuudesta johtuen tiukoihin epidemia-aiheisiin.

Toksiinit (kreikan sanasta toxikon - myrkky), bakteeriperäisiä aineita, jotka voivat estää fysiologisia toimintoja, mikä johtaa eläinten ja ihmisten sairauksiin tai kuolemaan. Kemiallisesti kaikki toksiinit ovat proteiineja tai polypeptidejä. Toisin kuin muut orgaaniset ja epäorgaaniset myrkylliset aineet Kun toksiinit joutuvat kehoon, ne aiheuttavat vasta-aineiden muodostumista.
Joissakin tartuntataudeissa (kurkkumätä, tulirokko) lapsia käytetään määrittämään lasten immuniteetin intensiteetti ja herkkyys. ihonsisäiset testit käyttämällä sopivia laimennettuja toksiineja. Positiivinen reaktio (paikallinen ihotulehdus toksiinin injektioalueella) johtuu toksiinin myrkyllisestä vaikutuksesta ihokudoksiin. Reaktion negatiivinen tulos selittyy ihoon injektoidun toksiinin neutraloitumisella vastaavalla antitoksiinilla. immuuniorganismi riittää tähän.
Toksiinit saadaan toksikogeenisistä mikrobikannoista (diphtheria bacillus tai scarlatinal streptococcus) siirrostamalla nestemäiseen ravintoalustaan ​​(avokeitin), jonka jälkeen suodatetaan bakteerisuodattimien läpi. Saaduista myrkkyistä valmistetaan diagnostisia myrkkyjä Shika (kurkkumätä) ja Dick (tulirokko). Toksiinit ruiskutetaan ihonsisäisesti 0,2 ml (Shika) ja 0,1 ml (Dick) kyynärvarren sisäpinnan keskiosaan.
Anatoksiinit ovat myrkyllisten mikro-organismien liemiviljelmien suodoksia, jotka ovat menettäneet myrkyllisyytensä erityiskäsittelyn seurauksena, mutta säilyttäneet suurelta osin alkuperäisten toksiinien antigeeniset ja immunogeeniset ominaisuudet.
Ihmisen tai eläimen kehoon joutuessaan toksoidit aiheuttavat antitoksisen immuniteetin muodostumista, mikä mahdollistaa niiden käytön estämään niitä. tarttuvat taudit, jotka perustuvat patogeenien erittämien eksotoksiinien toimintaan sekä eläinten hyperimmunisointiin - antitoksisten seerumien tuottajiin.
Toksoidin tyypistä riippumatta sen immunogeenisyys ja antigeenisyys määräytyvät alkuperäisen toksiinin vastaavien ominaisuuksien perusteella. Siksi näitä lääkkeitä valmistavissa laboratorioissa kiinnitetään paljon huomiota optimaalisten olosuhteiden luomiseen toksiinien muodostumiselle.
Voimakkaiden toksiinien saamiseksi tarvitaan kantoja, joille on ominaista erityisen selvä kyky muodostaa ctoksiineja keinotekoisissa olosuhteissa. Kaikilla myrkyllisillä bakteerikannoilla ei ole näitä ominaisuuksia. Tuotantotarkoituksiin käytetään kantoja, jotka ovat sopeutuneet keinotekoisiin ympäristöihin ja säilyttävät jatkuvasti kyvyn muodostaa ctoksiineja.
Toksiinia muodostavien aineiden viljelmät varastoidaan joko kuivatussa tilassa tai alustalle, joka on optimaalinen tämän tyyppisille bakteereille. Ennen kuin niitä käytetään massaerien ymppäämiseen, kannat passivoi- daan toksiinin saamiseksi käytetyllä alustalla.
Muiden asioiden ollessa samat, myrkkyjen vahvuus määräytyy viljelyalustan laadun mukaan, joten laboratoriot kiinnittävät huomiota viljelyalustan valmistukseen. Raaka-aineet, kemikaalit ja muut alustan muodostavat ainesosat ovat mitä perusteellisimmassa valvonnassa tuotantolaitosten biokemiallisissa laboratorioissa.
Toksiinin muodostukseen käytetään nestemäisiä ravintoalustoja, jotka sisältävät lihavettä ja lihan peptistä (Martinin liemi, Ramonin elatusaine) tai tryptistä (paavin elatusaine) sulamistuotteet.
Lihan hydrolyysiprosessia ohjataan määrittämällä amiinitypen kokonaismäärä ja proteiinin pilkkoutumiskerroin, joka lasketaan amiinitypen ja kokonaismäärän suhteesta. Myös lihatonta kaseiinia, puolisynteettisiä väliaineita käytetään.
Hiilihydraatteja (glukoosia, maltoosia tai niiden seosta) lisätään myrkyn muodostukseen tarkoitettuun ravintoalustaan. Hiilihydraatteja fermentoitaessa vapautuu suuri määrä energiaa, joka on välttämätöntä kehittyvässä viljelmässä tapahtuville synteesiprosesseille. Hiilihydraattien lisääminen lisää dramaattisesti ympäristössä tuotettujen toksiinien vahvuutta.
Hiilihydraattien lisäksi toksiinien muodostumiseen tarvitaan tiettyjä metalleja pieninä annoksina. Kurkkumätäbasillin toksiinien muodostumista estää ympäristön raudan ylimäärä yhtä paljon kuin sen puuttuminen. Kun ympäristössä on optimaalinen määrä rautaa, toksiinien muodostuminen tehostuu jyrkästi.
Toksiinin muodostuminen tapahtuu täysimääräisesti väliaineen tietyssä pH:ssa. Samaan aikaan viljelmän kasvun aikana pH-arvo muuttuu ja voi saavuttaa sellaiset indikaattorit, jotka estävät toksiinin muodostumisen.
Tämän ympäristön poistamiseksi lisätään puskuriaineita halutun pH-arvon ylläpitämiseksi. Yksi sellaisista puskuriominaisuuksista aineista on natriumasetaatti, jota lisätään liemeen 0,5-0,75 %.
Riippuen toksiinia tuottavan mikrobin biologisista ominaisuuksista, erilaisia ​​ehtoja viljelyä ja erityisesti ympäristön ilmastusta säännellään. Diphtheria bacillus muodostaa toksiinin maksimaalisissa ilmastusolosuhteissa, päinvastoin, tetanusbasilli ja muut myrkylliset anaerobit eivät tarvitse happea. mukaan Tämä on ensimmäinen kerta Toisessa tapauksessa viljelmää kasvatetaan ohuella kerroksella alustaa, jossa on suuri kosketuspinta ilman kanssa; toisessa tapauksessa elatusaine kaadetaan korkeaan kerrokseen ja erilaisia ​​happiadsorbentteja (vanu, kuivat punasolut) lisätään. lisätty.
Kasvulämpötila ja sen kesto vaihtelevat eri mikrobeilla. Yhteistä toksiinien muodostumisprosessille on tarve täydelliseen lämpötilan hallintaan inkubaattorissa. Lämpötilan vaihtelut vaikuttavat haitallisesti toksiinin vahvuuteen. Siksi termostaatit, joissa toksiinien muodostuminen tapahtuu, on varustettu tarkoilla termostaateilla.
Kussakin yksittäistapauksessa viljelmän viljelyn kesto määräytyy toksiinin muodostumisen intensiteetin perusteella tietyssä elatusainesarjassa. Viljelyn päättymisajankohdan kysymyksen ratkaisemiseksi toksiinin iH vahvuus alustassa määritetään eri viljelyjaksoilla.
Kun toksiinin voimakkuus saavuttaa maksiminsa, se erotetaan mikrobikappaleista, mikä tehdään suodattamalla erityisten bakteerisuodattimien (anaerobiset mikro-organismit) tai tavallisten paperisuodattimien (diphtheria bacillus) läpi.
Vanatoksiinin myrkyllisten suodosten translaatio suoritetaan pitempään altistamalla formaliinille lämpötilassa 39-40 C. Formaliini yhdistyy toksiinin aminohappojen, polypeptidien ja proteiinien vapaiden aminoryhmien kanssa ja menettää siksi myrkylliset ominaisuutensa. Vanatoksiinitoksiinin siirtymä tapahtuu 3-4 viikossa. Toksoidin oikealle muodostukselle toksiinin pH on tärkeä. Edullisin on väliaineen neutraali tai lievästi emäksinen reaktio.
Anatoksiineille on ominaista täydellinen vaarattomuus eläimille. Epätäydellisessä neutraloinnissa niihin voi kuitenkin jäädä toksiinijäämiä, jotka aiheuttavat myöhäisiä vaurioita herkässä organismissa. Siksi toksoidien turvallisuutta tarkistettaessa eläimiä seurataan pitkään. Toksoidien vaarattomuus on peruuttamaton. Mikään vaikutus ei johda kadonneen myrkyllisyyden palautumiseen.
Anatoksiinit säilyvät lähes kokonaan antigeeniset ominaisuudet toksiineja. Tämä voidaan varmistaa erilaisia ​​menetelmiä in vitro (flokkulaatioreaktio, toksoidin sitoutumisreaktio) ja eläinkokeet, joissa toksoidin tuominen saa aikaan sopivien antitoksiinien muodostumisen ja antitoksisen immuniteetin muodostumisen.
Anatoksiinit ovat pysyviä; ne sietävät toistuvaa jäätymistä ja sulattamista, vastustavat toimintaa korkea lämpötila vakaa pitkäaikaisen varastoinnin aikana.
Anatoksiinit sisältävät tiettyjen proteiinien lisäksi painolastiaineita, joista niitä voidaan vapauttaa eri menetelmin. Ne perustuvat toksoidien kykyyn saostua, kun ne on kyllästetty neutraaleilla suoloilla, suoloilla raskasmetallit, hapot (kloorivetyhappo, trikloorietikkahappo, metafosfori), sekä etyyli- ja metyylialkoholin läsnä ollessa alhaisissa lämpötiloissa. Näitä menetelmiä käytetään tällä hetkellä puhdistettujen konsentroitujen toksoidien saamiseksi.
Toksoidit adsorboituvat erilaisiin liukenemattomiin aineisiin (fosforisuolat, alumiinihydroksidi), tätä käytetään sorboitujen toksoidien valmistukseen, joille on ominaista viivästynyt imeytyminen kehossa, minkä seurauksena voidaan saada intensiivisempi immuniteetti.
Toksoidit ovat vaarattomuutensa, korkean antigeenisyytensä ja immunogeenisyytensä vuoksi arvokkain keino ehkäistä ja hoitaa useita sairauksia.
Tällä hetkellä toksoideja on saatu: kurkkumätä, tetanus, botuliini, stafylokokki, punatauti, kaasukuoliopatogeenien tuottamista toksiineista sekä käärmemyrkystä.

SHIKA-REAKTIO(Schick) ehdotti vuonna 1913 kurkkumätäalttiusasteen määrittämistä. Sh. r. suoritetaan kurkkumätätoksiinin tiukasti intradermaalisella injektiolla tilavuudessa 0,2 cm 3, päättyy 1/40 Dim (katso Kurkkumätä). Toksiini ruiskutetaan vasemman käden ihoon; ihoon oikea käsi sama määrä toksiinia, kuumennettuna 100 °C:ssa 10 minuuttia, lisätään kontrolliksi. Injektion tulokset merkitään muistiin 24 ja 96 tunnin kuluttua, ja seuraavat ilmiöt voidaan havaita: 1. Jos "kontrolli" (lämmitetyn) toksiinin injektiokohdassa ei ole reaktiivisia ilmiöitä, injektiossa ilmaantuu punoitusta ja infiltraatiota. aktiivisen toksiinin paikassa, johon liittyy lievä polttava tunne ja kutina. Nämä ilmiöt kehittyvät ensimmäisenä päivänä, saavuttavat huippunsa neljäntenä päivänä, sitten häviävät jättäen ihon pigmentoitumisen joksikin aikaa. Punoituksen ja tunkeutumisen suuruuden perusteella voidaan arvioida reaktioastetta, joka ilmaistaan ​​seuraavasti: + ("epäilyttävä" reaktio - epäselvä tunkeutuminen ja lievä punoitus), + (halkaisijaltaan enintään 1,5 punoitusta) cm), ++(jos punoituksen halkaisija on 1,5-3 cm) ja + + + (jos punoitus on suurempi kuin 3 cm); tämän tyyppistä reaktiota kutsutaan "positiiviseksi" Sh. 2. Jos sekä kuumennetun että aktiivisen toksiinin injektiokohdassa ei ole reaktiivisia ilmiöitä, puhutaan "negatiivisesta" Shch:stä. 3. Jos reaktiivisia ilmiöitä havaitaan molemmissa käsissä yhtä suuressa määrin, niin tällaista ilmiötä kutsutaan "vääräksi" Sh. Väärän (kuumennetun toksiinin) reaktion aste on merkitty (kuten positiivinen) yhdellä, kahdella, kolmella merkillä. Reaktiolla kuumennetulle toksiinille on joitain laadullisia eroja reaktiosta aktiiviseen toksiiniin: nopea ilmaantuminen ja häviäminen (yleensä 36-48 tunnin sisällä) ja eksudatiivisten ilmiöiden vallitsevuus infiltratiivisiin verrattuna. 4. Jos molemmissa käsissä havaitaan reaktiivisia ilmiöitä, mutta niiden aste on erilainen, puhutaan "yhdistetystä" Sh.-toksiinista. Yleisiä ajatuksia Sh:n olemuksesta. rajoittuvat seuraavasti: jos koehenkilön veressä ei ole antitoksiinia tai sitä on vähemmän kuin /zo -A-E 1,0 seerumissa, niin ihonsisäisesti ruiskutettu toksiini aiheuttaa reaktiivisia ilmiöitä, joita kutsutaan "positiivisiksi" III Jos tutkittavan veressä on kuitenkin riittävä määrä antitoksiinia (Shikin mukaan 1/30, Beringin mukaan 1/hoo ja enemmän kuin AE 1,0 seerumissa), niin jälkimmäinen neutraloi tuodun toksiinin , ja "negatiivinen" Sh. Nämä väitteet vahvistaa seuraava havainto: jos kurkkumätätoksiinille herkälle kohteelle annetaan neutraalia toksiini-antitoksiini-seosta, tämän seoksen injektiokohdassa ei yleensä havaita reaktiota .Lisäksi on tehty useita samanaikaisia ​​suoria määrityksiä antitoksiinin määrästä veressä Remerin menetelmällä rinnakkain S. R.:n kanssa (Shik, Ramon, Veksel jne.) Nämä kokeet paljastavat useimmissa tapauksissa huomattavan riippuvuuden S. R.:n tulos antitoksiinin määrästä veressä. Joskus havaitut epäjohdonmukaisuudet näiden ilmiöiden välillä eivät horjuta yleistä sääntöä, koska ne ovat melko harvinaisia: esimerkiksi Jensen. havaitsi negatiivisen Sh:n läsnäolon. joilla on merkityksetön antitoksiinipitoisuus "I /i 00 AE 1,0 seerumissa) 9% tapauksista. Arvioidessaan tuloksia Sh. on tarpeen ottaa huomioon, että varhaislapsuudessa negatiivinen Sh. jos veressä ei ole antitoksiinia. Tämä johtuu luontaisesta aikaisesta lapsuus ihon anergia. Mitä tulee ns. väärä Sh. ja sen muunnelmat (yhdistetty, perverssi Sh. r.), eli ihon reaktio kuumennettuun toksiiniin, sitten se selittyy kehon herkkyydellä kurkkumätäbasillin lämpöstabiileille aineenvaihduntatuotteille ja liemessä oleville ravintoaineille. Tämä herkkyys on luonteeltaan allerginen. Kuten Siegl osoitti, se koostuu kahdesta komponentista - spesifisestä ja epäspesifisestä difterian suhteen. Zellerin havainnot (Zoller) osoittivat väärän reaktion täydellisen identiteetin intradermaalisen toksoidireaktion kanssa (0,2 toksoidi, laimennettu suhteessa 1:100) - tämä on niin kutsuttu Zeller-reaktio. Riippuen toksiinin ja toksoidin aiheuttamista reaktioista Zeller jakaa kaikki ihmiset 4 ryhmään (katso taulukko). Zeller kuvittelee kurkkumätä vastaan ​​immunisaatioprosessin seuraavasti: kurkkumätälle alttiit henkilöt (I ryhmä, ryhmän ominaisuudet Reaktio | Zeller Schlck -reaktio f 1 herkkä II f dlfterialle III 1 immuuni DVF- IV / therialle + + + 1 vaihe + ) allergiapositiivinen Sh. R.), kun ne kohtaavat kurkkumätäbasillin (b-n tai kuljetus) tai keinotekoisen immunisoinnin aikana, ne herkistyvät suhteessa mikrobiin ja sen tuotteisiin. Niiden iho aiheuttaa allergisen reaktion; mutta koska samaan aikaan ei ole vielä kehitetty riittävää määrää antitoksiinia, iho reagoi myös aktiiviseen toksiiniin (ryhmä II väärällä tai yhdistetty Sh. p.). Jatkossa antitoksiinin määrä veressä kasvaa niin paljon, että reaktio aktiiviseen toksiiniin muuttuu negatiiviseksi, mutta allergia säilyy silti (ryhmä III, jossa perverssi Sh. p.); viimein viimeinen katoaa, ja tulee IV-ryhmän henkilöille tyypillinen vahva immuniteetti (joen negatiivinen Sh.). Sh:n arvo. kuinka immunoreaktiot määräytyvät vallitsevien näkemysten mukaan immuniteetin luonteesta kurkkumätäpotilaissa. Tekijä: moderneja ideoita jälkimmäinen perustuu siihen, että veressä on riittävä määrä antitoksiinia. Nämä ajatukset, kuten tiedetään, määrittävät kurkkumätäten (toksiini-antitoksiini-seokset, toksoidi) immunisoinnin ehkäisyn nykyaikaisen käytännön. Tästä näkökulmasta Sh. R., joka korvaa kätevästi hankalan suora määritelmä antitoksiini veressä Re-mer-menetelmän mukaan, voidaan pitää ihanteellisena tapana määrittää immuniteetin tila, ts. herkkyys, ihmisen kurkkumätä. Kysymys antitoksiinin vähimmäismäärästä veressä, joka tarvitaan kestävän kurkkumätä vastaan ​​​​immuniteetin toteuttamiseen, on kiistanalainen; joka tapauksessa on tarpeen huomata kurkkumätäen suhteellinen harvinaisuus henkilöillä, joilla on negatiivinen Sh. Lisäksi voidaan osoittaa suora kokeellinen vahvistus tälle ongelmalle: Getri, Marshal ja Moss (Gu-tnrie, Marshall ja Moss) tartuttavat kahdeksan vapaaehtoista levittämällä kurkkuun virulentilla kurkkumätäviljelmällä, joista neljällä oli positiivinen Sh. s. ja neljä negatiivista. Tämän seurauksena 4 henkilöä ensimmäisestä ryhmästä kävi läpi tyypillisen sairauden, neljästä negatiivisen Sh:n omaavasta henkilöstä. 3:lla oli tilapäinen difteriabasillin kantaminen ilman taudin merkkejä. Epidemiologiseen arvoon Sh. omistettu suurelle määrälle töitä. Niistä on selvää, että GL. R. edustaa luotettavaa menetelmää kollektiivin immuunikerroksen määrittämiseksi suhteessa difteriaan. Kävi ilmi, että jos jaamme positiivista Sh. iän mukaan saadaan kurkkumätäherkkyyden käyrä (Zingher), joka osuu melko tarkasti difterian esiintyvyyden ikäjakauman kanssa. Nuorten imeväisten (enintään kuusi kuukautta) suhteellisen korkea immuniteetti voidaan selittää immuunielimien passiivisella siirtymisellä äidinmaidon kautta. Mitä tulee kurkkumätäherkkyyden vähenemiseen iän myötä (alkaen yhdestä vuodesta), johon liittyy antitoksiinin kerääntyminen vereen, jotkut kirjoittajat (Friedberger et al.) pitävät tätä ilmiötä "fysiologisen serogeneesin" ilmaisuna, ts. että antitoksiinin kerääntyminen tapahtuu fysiologisessa järjestyksessä, joka liittyy sellaiseen. kypsymässä kerralla ihmiskehon, ja muut kirjoittajat (Zinger, Dedley, Ramon ja muut) uskovat, että ihmiset kerääntyvät vereen antitoksiinia ilmeisen ja useammin "hiljaisen infektion> difterian seurauksena (katso kuva). Epidemiologinen arvo Sh. koostuu myös siitä, että sitä on kätevä käyttää henkilöiden valintaan (jos kyseessä on positiivinen tulos) aktiivinen immunisaatio kurkkumätä vastaan. Sitä käytetään yleensä lapsilla

"-~-" $ henkilöitä, joiden veressä on antitoksiinia (Greerin mukaan)

°--«>% henkilöistä positiivista, reaktiota. Shika (Parkin ja Zkngerin mukaan) - kurkkumätäten ilmaantuvuus Jakauma iän mukaan: henkilöt, joiden veressä on antitoksiinia (%); henkilöt, joilla on positiivinen Schick-reaktio (%); difterian ilmaantuvuus (°/ooo kussakin iässä). yli 5-vuotiaat, ottaen huomioon negatiivisen Sh:n suhteellinen harvinaisuus. alle 5-vuotiaat. Lopulta III. R. Sitä käytetään myös kurkkumätä vastaan ​​annettujen suojarokotusten tehokkuuden objektiivisena kontrollina. Tämän tehokkuuden todistaa positiivisen (ennen rokotusta) Sh:n siirtymä. negatiivinen rokotuksen jälkeen (yleensä 6 viikkoa viimeisen rokotuksen jälkeen). Tekniikka Sh. R.:n tuottamiseksi: 1. Jotta toksiinin laimennus voidaan valmistaa vaadittuun tilavuuteen, siirry Dim-toksiinista. Oletetaan, että toksiini Dim = 0,0032. Valmistaaksesi toksiinin, joka sisältää I / 4l) Dim 0,2 tilavuudessa, toimi seuraavasti: ota lOODlm, tässä tapauksessa = 0,32, ja lisää suolaliuosta 10,0:aan, eli 9,68:aan. Ota 1,0 tästä laimennuksesta (eli 10 Dim) ja lisää 79,0 fizioliin. ratkaisu. Sitten toisen laimennoksen 80,0:ssa on 10.Dim; kohdassa 1 cm 3 tästä syystä -V" Dim, ja 0.2-Vio Dim. Jokaisella laimennuksella on otettava uusi kuiva pipetti, joka pestään vähintään 10 kertaa. Tämä vaatii erityistä mittaustarkkuutta ja pipettien tarkkuutta (puolet näin valmistetusta toksiinin laimennoksesta kaadetaan erilliseen pulloon ja laitetaan kiehuvaan vesihauteeseen 10 minuutiksi; näin saadaan "kontrolliksi" kuumennettu toksiini) . Ottaen huomioon se tosiasia, että toksiini, laimennettu fiziol. ratkaisu, menettää nopeasti aktiivisuutensa, on helpompi ottaa t. boraattipuskuriliuos (katso Dickin reaktio) jossa laimennettu toksiini säilyttää vahvuutensa useita kuukausia. 2. Injektio suoritetaan tiukasti ihonsisäisesti, kätevimmin käyttämällä tuberkuliiniruiskua, jossa on erittäin ohut platinaneula (nro 18, 19). Neulalla tulee olla lyhyt parta. Parta on pidettävä ulospäin injektion aikana. Toksiinin lisääminen tapahtuu hitaasti tunnetulla jännityksellä, joka on ominaista intradermaaliselle nesteen injektiolle, ja sen seurauksena injektiokohtaan muodostuu hyvin rajattu rakkula (Quaddel), jossa on painaumia karvan kohdalla. follikkelia. 3. Aktiivinen toksiini ruiskutetaan vasemman käden kyynärvarren ihoon, lämmitetty toksiini ruiskutetaan oikean käden kyynärvarren ihoon. Massatuotannossa III. R. on suositeltavaa olla kaksi lääkäriä samanaikaisesti - toinen pistää aktiivisen, toinen kuumennetun toksiinin. 4. Sh. se tehdään kahdesti: 24 tunnissa väärien reaktioiden vuoksi ja 96 tunnissa, kun todellinen Sh. saavuttaa huippunsa. Lit.: Zdrodovsky P., spesifisen kurkkumätäen ehkäisyn nykyaikaiset ongelmat, Arkh. biol. Sciences, osa XXXV, ser. Ah, vol. 2, 1934; Doull J., Factors Influenting valikoivaan leviämiseen tn kurkkumätä, Journ. ol estää, lääketiede, v. IV, 1930; Frost W., Infektio, immuniteetti ja sairaudet difterian epidemiologiassa, Ibid., v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphterie chez les suits a response de Schick negatiivi, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toksiini-antitoksiini-immunisaatio difteriaa vastaan, Journ. amer. med. Ass., v. LXXIX, s. 1584, 1922; Rosling E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick B., Die Diphtherietoxin- Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des profhylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, nro 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hung der P beise der Entste-hung der Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., ​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo- reaktio al "anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Katso myös Art. Tulirokko. G. Orlov.

Sytokemialliset menetelmät pyrkiä kemiallisten ja entsymaattisten aineiden tunnistamiseen soluissa käyttämällä tähän värireaktioita. Sytokemikaalit pitävät solun rakenne, joka mahdollistaa solujen tunnistamisen ja tutkitun yhdisteen solunsisäisen lokalisoinnin. Siksi hematologiassa ei suosita biokemiallisia, työläitä, hyvin heterogeenisen solupopulaation solurakennetta tuhoavia, vaan sytokemiallisia menetelmiä.

Sytokemia osoitti, että morfologisesti identtisten solujen joukossa on merkittäviä kemiallisia ja entsymaattisia eroja.

Glykogeeni (CHIC-reaktio) (PAS) - Hotchkiss - Mac Minus -menetelmä

Schickin periaate. Polysakkaridit havaitaan reaktiolla, joka hapettaa alkoholiryhmiä, jotka muuttuvat aldehydiryhmiksi, ja viimeksi mainitut tunnistetaan värireaktiolla Schiff-reagenssin kanssa.

Reagenssit PAS-reaktioon: 1. Alkoholi-formaliini kiinnitysseos: 9 osaa absoluuttista etyylialkoholi+1 osa 40 % formaliinia; pidä +4°:ssa.

2. Periodihappo, 1 % vesiliuosta. Liuos on väritöntä. Säilytä ruskeassa lasipullossa pimeässä laboratoriolämpötilassa. Kellastunut liuos ei sovellu.

3. Schiffin reagenssi. Laimennetaan 1 g emäksistä fuksiinia 200 ml:aan tislattua vettä kiehumispisteessä. Ravista 5 minuuttia, jäähdytä 50 °C:n lämpötilaan, suodata ja lisää 20 ml normaalia suolahappoa. Jäähdytä 25°:een, lisää 2 g natrium- tai kaliummetabisulfiittia, jotka muodostavat täydellisen liuoksen. Liuoksen tulee seistä päivä pimeässä ja kylmässä (+4 °). Lisää sitten 2 g aktiivihiili, chat 1 min. ja suodatin.
Saatu suodos on kirkas ja väritön. Hieman kellertävä sävy on sallittu; jos liuos muuttuu vaaleanpunaiseksi, siitä tulee käyttökelvoton. Säilytä +4°C hermeettisesti suljetussa ruskeassa lasipullossa.

4. Vihreä valo -1 % vesiliuos.

5. Diastaasi: nesteytetty ihmisen sylki tai 0,1 % amylolyyttis-diastaattinen entsyymiliuos fysiologisessa suolaliuoksessa.

Schick-reaktiotekniikka

1) 10 minuutin sivelyn kiinnitys alkoholi-formaliini-seoksella; pesu tislatulla vedellä;
2) hapetus 1 % perjodihappoliuoksella, 10 min.; pesu tislatulla vedellä;
3) värjäys Schiffin reagenssilla kannetussa astiassa pimeässä ja kylmissä olosuhteissa 2 tunnin ajan; pesu juoksevalla vedellä;
4) vastavärjätä 1 % vihreää valoa 1 minuutin ajan; huuhtele juoksevalla vedellä.

Ohjaus kiinnitetty tahraa altistettiin diastaasi-inkubaatiolle, 60 min. huoneenlämmössä glykogeenin selektiiviseksi poistamiseksi. Tislatulla vedellä pesun jälkeen se käsitellään tavanomaisella menetelmällä.

PAS-reaktion tulosten arviointi

Glykogeeni värjätty karmiininpunaiseksi punainen väri, näkyy rakeina tai hajallaan. Reaktion kontrolloimiseksi käytetään kypsiä sivelygranulosyyttejä. Beyond Glycogen CHIC positiivinen reaktio antaa muita hiilihydraattiluonteisia aineita, kuten musiinia, mukoproteiineja, serebrosideja, fibriiniä. Glykogeeni erottuu näistä aineosista esikäsittelyllä diastaasilla, minkä jälkeen glykogeeni ei enää värjäydy.

SISÄÄN granulosyytit glykogeeni on jo dispergoitunut promyelosyyttivaiheessa ja alkaa lisääntyä kypsyessään. Normaaliolosuhteissa lymfosyytit ovat negatiivisia tai 20 % niistä voi sisältää useita pieniä glykogeenijyviä. Monosyytit ovat negatiivisia tai niillä on hienojakoisuus.

Intensiteetti väritys määritetään puolikvantitatiivisesti. Reaktiossa CHIC näkyy glykogeeniindeksinä tai keskimääräisenä reaktioindeksinä (Astaldi). Normaali glykogeeni vaihtelee välillä 0,10 - 0,30. Yleensä vain patologisten lymfosyyttien kuormitusaste on yli 3.

Se listattiin Schickin reaktiomenetelmäksi:
a) Asetettaessa erotusdiagnoosi yksittäiset akuutin leukemian sytologiset tyypit:
- Myeloblastit ja promyelouiitti ovat PAS-negatiivisia tai ne saavat heikon hajavärin. Auer-kehot antavat positiivisen reaktion, joka heikkenee syljensulatuksen jälkeen.
- Lymfoblastit akuutissa leukemiassa ja lymfosarkoomassa antavat terävän PAS-positiivisen reaktion jyvien tai suurten glykogeenilohkojen muodossa.
- Erytroblastit erytremiassa ja akuutissa erytroleukemiassa antavat jyrkästi positiivisen hajaantuneen tai rakeisen reaktion, toisin kuin normaalit erytroblastit, jotka ovat PAS-negatiivisia;
- Monosytoidiset blastit ovat epäjohdonmukaisesti heikosti positiivisia ja hienojakoisia.

b) Kroonisen lymfaattisen leukemian diagnosointia ja hoidon tehokkuuden seurantaa varten: kohonnut glykogeenitaso viittaa taudin vakavaan muotoon ja huonoon ennusteeseen.
Glykogeenin kasvu patologisissa lymfosyyteissä, ilmiö, joka ei ole tyypillistä leukemialle, se selittyy metabolisen aktiivisuuden lisääntymisellä minkä tahansa tyyppisessä lymfoidiproliferaatiossa.

c) Erottaa Gaucherin solut muista makrofageista kerääntymällä.