Schickova reakcia indikuje prítomnosť alebo neprítomnosť potrebnej hladiny antitoxínu v krvi na ochranu tela pred záškrtom. V súčasnosti sa táto reakcia využíva menej často z dôvodu zavádzania citlivejších metód (RPHA).

Schickova reakcia sa vykonáva u detí očkovaných proti záškrtu s ukončeným očkovaním a aspoň jedným preočkovaním. Vo veku 13 rokov a viac môže byť reakcia nastavená aj s neznámou očkovacou anamnézou. Stav antidifterickej imunity sa kontroluje najskôr 6 mesiacov po poslednom preočkovaní a najskôr dva mesiace po akútnom ochorení.

Schickova reakcia je tiež zaradená do skupín, ktoré sú nepriaznivé pre záškrt, novo prichádzajúce deti, keď nie sú žiadne informácie o očkovaní. Deti s negatívnou Schickovou reakciou nedostávajú ďalšie očkovanie. Ďalšie očkovania, bez ohľadu na imunitnú vrstvu v tíme, sa vykonávajú pre deti s pozitívnymi a pochybnými reakciami.

Výsledky Shikovej reakcie sa zapisujú do záznamovej karty preventívne očkovania(f. 63) s uvedením dátumu nastavenia a testovania reakcie, série toxínu a inštitútu, ktorý toxín vyrobil.

Na nastavenie Shikovej reakcie sa používa zriedený aktívny (nezahriaty) difterický toxín. 0,2 ml obsahuje jednu dávku Shik.

Na nastavenie Schickovej reakcie by sa mali použiť jednogramové (tuberkulínové), starostlivo skontrolované injekčné striekačky s presnými dielikmi, ktoré neumožňujú tekutine prechádzať medzi stenami injekčnej striekačky a jej piestom.

Je prísne zakázané vykonávať Schickovu reakciu v priestoroch, kde sa v daný deň preočkovalo proti tuberkulóze, ako aj používať injekčné striekačky, ihly a iné pomôcky používané pri imunizácii proti tuberkulóze.

Koža v mieste vpichu sa utrie vatou navlhčenou 70% etylalkoholom. Toxín ​​(0,2 ml) sa vstrekuje intradermálne do stredná časť palmárny povrch zvyčajne na ľavom predlaktí. Zavedenie sa uskutočňuje pomaly so známym napätím, ktoré je charakteristické pre intradermálnu injekciu tekutiny. Injekcia sa podáva pod veľmi miernym sklonom injekčnej striekačky k predlaktiu, takmer rovnobežne s povrchom kože. Rez ihly by mal úplne vstúpiť do kože a presvitať cez epidermis. V mieste vpichu by sa mala vytvoriť belavá, dobre ohraničená vezikula (papula) s priemerom asi 1 cm, ktorá má na mieste vlasových folikulov vtlačok („citrónová kôra“). Táto bublina (papula) zmizne za 10-15 minút. Ak sa vezikula (papula) nevytvorí alebo zmizne príliš rýchlo, keď je toxín vstreknutý, znamená to, že injekcia bola vykonaná nesprávne, hlboko a toxín, ktorý sa dostal subkutánne, nemusí spôsobiť reakciu. V dôsledku toho sa môže získať nesprávny výsledok.

Reakcia sa zaznamená po 72 alebo 96 hodinách.Výsledky sa vyhodnotia takto:

a) Shikova reakcia je pozitívna, ak sa v mieste vpichu toxínu objaví začervenanie a infiltrácia. Stupeň reakcie je uvedený: "+" - ak má začervenanie priemer 1 - 1,5 cm, (+ +" - ak je 1,5 - 3 cm, "+ + +" - ak je viac ako 3 cm;

b) Shikova reakcia je negatívna, keď v mieste vpichu toxínu nie je žiadne začervenanie a infiltrácia;

c) Schickova reakcia je pochybná, ak začervenanie a infiltrát počas zavádzania toxínu nie sú jasne vyjadrené, alebo pri výraznej reakcii je priemer začervenania približne 0,5 cm (označené „±“).

Kontraindikácie pri formulácii Schickovej reakcie: spazmofília, epilepsia, pustulárne ochorenia, kontakt s pacientmi vírusová hepatitída, bronchiálna astma.

Alergény a toxíny

Diagnostické lieky

Imunoglobulínový antipertussis antitoxický pre ľudí (Rusko)

Konské sérum proti záškrtu purifikovaná koncentrovaná kvapalina (Rusko)

Séra a imunoglobulíny

Suchá vakcína proti tuberkulóze BCG-M (na šetrenie primárnej imunizácie, Rusko)

Suchá vakcína proti tuberkulóze (BCG) na intradermálne podanie (Rusko)

Akt-Khib (Hib-wak, Južná Kórea)

Monovakcína proti čiernemu kašľu (Rusko)

Obsahuje baktérie čierneho kašľa, konzervant - mertiolát. Používajte len podľa epidemiologických indikácií v centrách pertusovej infekcie.

Obsahuje 10 mcg polysacharidu v jednej dávke haemophilus influenzae typ b, konjugovaný s tetanovým toxoidom, konzervačná látka – trometamol. Používa sa na očkovanie detí od 2 mesiacov veku podľa epidemiologických indikácií.

Mycobacterium bovis BCG-1. Vakcinačný kmeň bol získaný dlhodobou (13 rokov) kultiváciou tuberkulóznych bovinných mykobaktérií za nepriaznivých podmienok na zemiakovo-glycerínovom médiu s prídavkom žlče. Podať si prihlášku špecifická prevencia tuberkulóza. Očkovanie sa vykonáva na 5. – 7. deň života, keď je telo bez mykobakteriálnej infekcie. Všetky zdravé deti, dospievajúci a dospelí do 30 rokov, ktorí negatívne reagujú na tuberkulín, podliehajú preočkovaniu. Mechanizmus imunity pri tuberkulóze nie je úplne objasnený. IN klinickej praxi Hlavným kritériom intenzity očkovacej imunity je prechod negatívnej kožnej reakcie na tuberkulín na pozitívnu.

Obsahuje lyofilizované v 1,2% roztoku glutamanu sodného živé baktérie vakcinačného kmeňa Mycobacterium bovis BCG-1. Používa sa na šetriacu špecifickú prevenciu tuberkulózy (primárna vakcinácia) u novorodencov v oblastiach s nepriaznivou situáciou pre tuberkulózu.

Obsahuje protilátky proti difterickému bacil exotoxínu. Antitoxická aktivita sa vyjadruje v medzinárodných jednotkách (10 000 a 20 000 IU/ml). Používa sa na liečbu pacientov so záškrtom. Okrem terapeutických účelov sa antidifterické sérum používa na stanovenie toxigenity kultúr difterických bacilov v reakcii zrážania gélom.

Obsahuje imunologicky aktívnu frakciu krvnej plazmy darcov s protilátkami proti exotoxínu mikróbu čierneho kašľa (najmenej 750 IU antitoxických protilátok proti čiernemu kašľu). Používa sa na liečbu čierneho kašľa.

Obsahuje purifikovaný difterický toxín v 0,2 ml 1/40 DLM toxínu morčiat. Používa sa na intradermálne testy na účely imunodiagnostiky. U jedincov sa v mieste vpichu vyvinie zápalová reakcia. Ak krv obsahuje viac ako 0,03 IU antitoxínu, test je negatívny. Predtým sa Schickov test často používal na identifikáciu jedincov náchylných na záškrt. V súčasnosti je jeho použitie pre možnosť komplikácií obmedzené na prísne epidemické indikácie.

Toxíny (z gréckeho toxikon - jed), látky bakteriálneho pôvodu, ktoré môžu brzdiť fyziologické funkcie, čo vedie k chorobám alebo smrti zvierat a ľudí. Chemickou povahou sú všetky toxíny proteíny alebo polypeptidy. Na rozdiel od iných organických a anorganických toxické látky Keď sa toxíny dostanú do tela, spôsobujú tvorbu protilátok.
Pri niektorých infekčných ochoreniach (záškrt, šarlach) sa deti používajú na určenie intenzity imunity a vnímavosti detí. intradermálne testy použitím vhodných zriedených toxínov. Pozitívna reakcia (lokálny zápal kože v oblasti vpichu toxínu) je spôsobená toxickým účinkom toxínu na kožné tkanivá. Negatívny výsledok reakcie sa vysvetľuje neutralizáciou toxínu vstreknutého do kože zodpovedajúcim antitoxínom. imunitný organizmus dosť na to.
Toxíny sa získavajú z toxigénnych kmeňov mikróbov (bacil difterický alebo šarlatínový streptokok) naočkovaním na tekuté živné médium (bujón v otvorenom ohnisku) s následnou filtráciou cez bakteriálne filtre. Zo získaných toxínov sa pripravujú diagnostické toxíny Shika (záškrt) a Dick (šarlach). Toxíny sa vstrekujú intradermálne v množstve 0,2 ml (Shika) a 0,1 ml (Dick) do strednej časti vnútorného povrchu predlaktia.
Anatoxíny sú filtráty bujónových kultúr toxigénnych mikroorganizmov, ktoré špeciálnou úpravou stratili svoju toxicitu, ale zachovali si do značnej miery antigénne a imunogénne vlastnosti pôvodných toxínov.
Po zavedení do ľudského alebo zvieracieho tela toxoidy spôsobujú tvorbu antitoxickej imunity, táto vlastnosť umožňuje ich použitie na prevenciu infekčné choroby, ktoré sú založené na pôsobení exotoxínov vylučovaných patogénmi, ako aj na hyperimunizáciu zvierat – producentov antitoxických sér.
Bez ohľadu na typ toxoidu je jeho imunogenicita a antigenicita určená zodpovedajúcimi vlastnosťami pôvodného toxínu. Preto sa v laboratóriách, ktoré tieto lieky vyrábajú, veľká pozornosť venuje vytváraniu optimálnych podmienok pre tvorbu toxínov.
Na získanie toxínov s vysokou silou sú potrebné kmene, ktoré sa vyznačujú obzvlášť výraznou schopnosťou vytvárať toxiny v umelých podmienkach. Nie všetky kmene toxigénnych baktérií majú tieto vlastnosti. Na výrobné účely sa používajú kmene, ktoré sú prispôsobené umelému prostrediu a trvalo si zachovávajú schopnosť tvoriť toxiny.
Kultúry látok tvoriacich toxíny sa uchovávajú buď v sušenom stave, alebo na médiách, ktoré sú optimálne pre tento typ baktérií. Pred použitím na inokuláciu hromadných dávok sa kmene pasivujú na médiu použitom na získanie toxínu.
Ak sú ostatné veci rovnaké, sila toxínov je určená kvalitou kultivačného média, takže laboratóriá venujú pozornosť príprave kultivačných médií. Suroviny, chemikálie a ďalšie zložky, ktoré tvoria médium, sú podrobované najdôkladnejšej kontrole v biochemických laboratóriách výrobných ústavov.
Na tvorbu toxínov sa používajú tekuté živné pôdy, ktoré zahŕňajú mäsovú vodu a produkty peptického (Martinov vývar, Ramonovo médium) alebo tryptického (Pápežovo médium) trávenia mäsa.
Proces hydrolýzy mäsa sa riadi stanovením celkového amínového dusíka a koeficientu štiepenia bielkovín, ktorý sa vypočíta z pomeru amínového dusíka k celkovému. Používajú sa aj bezmäsité kazeínové, polosyntetické médiá.
Do živného média určeného na tvorbu toxínov sa pridávajú sacharidy (glukóza, maltóza alebo ich zmes). Pri fermentácii sacharidov sa uvoľňuje veľké množstvo energie, ktorá je potrebná pre procesy syntézy, ktoré sa vyskytujú vo vyvíjajúcej sa kultúre. Pridanie sacharidov dramaticky zvyšuje silu toxínov produkovaných v prostredí.
Okrem uhľohydrátov sú na tvorbu toxínov potrebné určité kovy v minimálnych dávkach. Tvorba toxínov difterického bacilu je inhibovaná nadbytkom železa v prostredí v rovnakej miere ako jeho absenciou. V prítomnosti optimálneho množstva železa v prostredí sa tvorba toxínov výrazne zvyšuje.
Tvorba toxínov sa v plnom rozsahu uskutočňuje pri určitom pH média. Medzitým sa počas rastu kultúry mení hodnota pH a môže dosiahnuť také ukazovatele, ktoré inhibujú tvorbu toxínu.
Aby sa toto prostredie eliminovalo, pridávajú sa pufrovacie látky na udržanie požadovanej hodnoty pH. Jednou z takýchto látok s tlmivými vlastnosťami je octan sodný, ktorý sa pridáva do bujónu v množstve 0,5-0,75%.
V závislosti od biologických charakteristík mikróbov produkujúcich toxíny, rozdielne podmienky reguluje sa pestovanie a najmä prevzdušňovanie prostredia. Difterický bacil tvorí toxín za podmienok maximálneho prevzdušnenia, naopak tetanový bacil a iné toxigénne anaeróby kyslík nepotrebujú. Podľa toto je prvý krát V druhom prípade sa kultúra pestuje v tenkej vrstve média s veľkým povrchom kontaktu so vzduchom, v druhom prípade sa médium naleje do vysokej vrstvy a pridajú sa rôzne adsorbenty kyslíka (vata, suché erytrocyty). pridané.
Rastová teplota a jej trvanie sa líšia pre rôzne mikróby. Spoločným procesom tvorby toxínov je potreba dokonalej kontroly teploty v inkubátore. Kolísanie teploty nepriaznivo ovplyvňuje silu toxínu. Preto sú termostaty, v ktorých dochádza k tvorbe toxínov, vybavené presnými termostatmi.
V každom jednotlivom prípade je trvanie kultivácie určené intenzitou tvorby toxínov na danej sérii médií. Na vyriešenie otázky času ukončenia kultivácie sa určuje sila toxínu v médiu v rôznych obdobiach kultivácie.
Keď sila toxínu dosiahne maximum, oddelí sa od mikrobiálnych tiel, a to prefiltrovaním cez špeciálne bakteriálne filtre (anaeróbne mikroorganizmy) alebo obyčajné papierové (bacil diftérie).
Translácia toxických filtrátov vanatoxínu sa uskutočňuje dlhodobým vystavením formalínu pri teplote 39-40 °C. Formalín sa spája s voľnými aminoskupinami aminokyselín, polypeptidov a proteínov toxínu, a preto stráca svoje toxické vlastnosti. Prechod toxínu vanatoxínu nastáva v priebehu 3-4 týždňov. Pre správnu tvorbu toxoidu je dôležité pH toxínu. Najpriaznivejšia je neutrálna alebo mierne zásaditá reakcia média.
Anatoxíny sa vyznačujú úplnou neškodnosťou pre zvieratá. Pri neúplnej neutralizácii v nich však môžu zostať zvyšky toxínov, ktoré v citlivom organizme spôsobujú neskoré škody. Pri kontrole bezpečnosti toxoidov sa preto zvieratá dlhodobo sledujú. Neškodnosť toxoidov je nezvratná. Žiadne účinky nevedú k obnoveniu stratenej toxicity.
Anatoxíny sa takmer úplne zachovajú antigénne vlastnosti toxíny. Dá sa to overiť rôzne metódy in vitro (flokulačná reakcia, väzbová reakcia toxoidu) a pokusy na zvieratách, pri ktorých zavedenie toxoidu spôsobí tvorbu zodpovedajúcich antitoxínov a vytvorenie antitoxickej imunity.
Anatoxíny sú perzistentné; znášajú opakované mrazenie a rozmrazovanie, odolávajú pôsobeniu vysoká teplota stabilný pri dlhodobom skladovaní.
Anatoxíny obsahujú okrem špecifických bielkovín aj balastné látky, z ktorých sa môžu rôznymi spôsobmi uvoľňovať. Sú založené na schopnosti toxoidov zrážať sa pri nasýtení neutrálnymi soľami, soľami ťažké kovy kyseliny (chlorovodíková, trichlóroctová, metafosforečná), ako aj v prítomnosti etylalkoholu a metylalkoholu pri nízkych teplotách. Tieto metódy sa v súčasnosti používajú na získanie purifikovaných koncentrovaných toxoidu.
Toxoidy sa adsorbujú na rôzne nerozpustné látky (soli fosforu, hydroxid hlinitý), z toho sa pripravujú sorbované toxoidy, ktoré sa vyznačujú oneskoreným vstrebávaním v organizme, v dôsledku čoho je možné získať intenzívnejšiu imunitu.
Pre svoju neškodnosť, vysokú antigenicitu a imunogenicitu sú toxoidy najcennejším prostriedkom prevencie a terapie celého radu ochorení.
V súčasnosti sa získavajú toxoidy: záškrt, tetanus, botulín, stafylokoky, úplavica, z toxínov produkovaných patogénmi plynovej gangrény, ako aj z hadieho jedu.

SHIKA REAKCIA(Schick) navrhol v roku 1913 určiť stupeň náchylnosti na záškrt. Sh. r. vykonaná striktne intradermálnou injekciou difterického toxínu v objeme 0,2 cm 3, na záver 1/40 Dim (pozri záškrt). Toxín ​​sa vstrekuje do kože ľavej ruky; do kože pravá ruka rovnaké množstvo toxínu zahriate na 100 °C počas 10 minút sa zavedie na kontrolu. Výsledky injekcie sa zaznamenajú po 24 a 96 hodinách a možno pozorovať nasledujúce javy: 1. Pri absencii reaktívnych javov v mieste vpichu „kontrolného“ (zahriateho) toxínu sa v mieste vpichu objaví začervenanie a infiltrácia miesto aktívneho toxínu, sprevádzané miernym pocitom pálenia a svrbenia. Tieto javy sa vyvinú v prvý deň, dosiahnu maximum na štvrtý deň, potom zmiznú a na určitý čas zanechajú pigmentáciu kože. Podľa veľkosti začervenania a infiltrácie je možné posúdiť stupeň reakcie, ktorý je označený takto: + („pochybná“ reakcia - s nejasnou infiltráciou a miernym začervenaním), + (so začervenaním v priemere nie väčším ako 1,5 cm), ++(ak má začervenanie priemer 1,5 až 3 cm) a + + + (ak je začervenanie väčšie ako 3 cm); tento typ reakcie sa nazýva "pozitívny" Sh. 2. Pri absencii akýchkoľvek reaktívnych javov v mieste injekcie zahriateho aj aktívneho toxínu sa hovorí o „negatívnom“ Shch. 3. Ak sú reaktívne javy zaznamenané na oboch rukách v rovnakej miere, potom sa takýto jav označuje ako „falošný“ Sh. Stupeň falošnej (so zahriatym toxínom) reakcie je označený (ako pozitívna) jedným, dvoma, tromi znakmi. Reakcia na zahriaty toxín má určité kvalitatívne rozdiely od reakcie na aktívny toxín: rýchly výskyt a vymiznutie (zvyčajne do 36-48 hodín) a prevaha exsudatívnych javov nad infiltračnými. 4. Ak sú reaktívne javy zaznamenané na oboch rukách, ale ich stupeň je odlišný, hovoríme o „kombinovanom“ toxíne Sh. Spoločné predstavy o podstate Sh. sa znížia na nasledovné: ak v krvi testovaného subjektu nie je žiadny antitoxín alebo je obsiahnutý v množstve menšom ako / zo -A-E v 1,0 sére, potom toxín podaný intradermálne spôsobuje reaktívne javy, označované ako "pozitívne" III Ak je však v krvi testovaného subjektu dostatočné množstvo antitoxínu (podľa Shik 1/30, podľa Beringa 1/hoo a viac ako AE v 1,0 sére), potom tento vnesený toxín neutralizuje a „negatívny“ Sh. Tieto tvrdenia sú potvrdené nasledujúcim pozorovaním: ak sa neutrálna zmes toxínu a antitoxínu vstrekne subjektu citlivému na difterický toxín, potom sa spravidla nepozoruje žiadna reakcia v mieste vpichu tejto zmesi .Okrem toho sa vykonalo množstvo simultánnych priamych stanovení množstva antitoxínu v krvi.podľa Remerovej metódy paralelne so S. R. (Shik, Ramon, Veksel atď.) Tieto experimenty vo väčšine prípadov odhaľujú výraznú závislosť výsledok S. R. o množstve antitoxínu v krvi. Niekedy pozorované nezrovnalosti medzi týmito javmi nemôžu otriasť všeobecným pravidlom, pretože sú dosť zriedkavé: napríklad Jensen. zaznamenali prítomnosť negatívneho Sh. s nevýznamným obsahom antitoxínu „I /i 00 AE v 1,0 sére) v 9 % prípadov. Pri hodnotení výsledkov Sh. je potrebné vziať do úvahy, že v ranom detstve sa negatívne Sh. v neprítomnosti antitoxínu v krvi. Je to kvôli inherentnému skorému detstva kožná anergia. Čo sa týka tzv. falošné Sh. a jeho varianty (kombinovaný, zvrátený Sh. r.), teda reakcia kože na zahriaty toxín, potom sa vysvetľuje citlivosťou organizmu na termostabilné produkty metabolizmu difterického bacila a živiny vo vývare. Táto citlivosť má alergickú povahu. Ako ukázal Siegl, skladá sa z dvoch zložiek – špecifickej a nešpecifickej vo vzťahu k záškrtu. Zellerove pozorovania (Zoller) ukázali úplnú identitu falošnej reakcie s intradermálnou reakciou na toxoid (0,2 toxoid, zriedený v pomere 1:100) – ide o takzvanú Zellerovu reakciu. V závislosti od výsledku reakcií na toxín a na toxoid rozdeľuje Zeller všetkých ľudí do 4 skupín (pozri tabuľku). Zeller si proces imunizácie proti záškrtu predstavuje takto: osoby náchylné na záškrt (I skupina s Charakteristika skupiny Reakcia | Zeller Schlckova reakcia f 1 Citlivá na II f dlftéria III 1 Imunitná voči DVF- IV / éria + + + 1 Štádium + ) alergický pozitívny Sh. R.) pri stretnutí s bacilom záškrtu (b-n alebo nosič) alebo pri umelej imunizácii sú senzibilizované vo vzťahu k mikróbu a jeho produktom. Ich koža dáva alergickú reakciu; ale keďže zároveň ešte nie je vyvinuté dostatočné množstvo antitoxínu, koža reaguje aj na aktívny toxín (skupina II s falošným alebo kombinovaným Sh. p.). V budúcnosti sa množstvo antitoxínu v krvi zvýši natoľko, že reakcia na aktívny toxín sa stane negatívnou, ale alergia stále zostáva (skupina III s perverzným Sh. p.); nakoniec posledný zmizne a prichádza silná imunita charakteristická pre osoby IV skupiny (s negatívnym Sh. rieky). Hodnota Sh. ako sú imunoreakcie určené prevládajúcimi názormi na povahu imunity pri záškrte. Autor: moderné nápady druhý je založený na prítomnosti dostatočného množstva antitoxínu v krvi. Tieto myšlienky, ako je známe, určujú modernú prax imunizačnej prevencie záškrtu (toxín-antitoxínové zmesi, toxoid). Z tohto pohľadu je Sh. R., ktorý pohodlne nahrádza ťažkopádne priama definícia antitoxínu v krvi podľa Re-merovej metódy, možno považovať za ideálny spôsob stanovenia stavu imunity, resp. citlivosť, človek na záškrt. Otázka minimálneho množstva antitoxínu v krvi potrebného na zavedenie trvalej imunity voči záškrtu je kontroverzná; v každom prípade je potrebné poznamenať relatívnu zriedkavosť záškrtu u osôb s negatívnym Sh. okrem toho možno poukázať na priame experimentálne potvrdenie tohto problému: Getri, Marshal a Moss (Gu-tnrie, Marshall a Moss) infikovali osem dobrovoľníkov potretím hrdla virulentnou kultúrou záškrtu, z ktorých štyria mali pozitívny Sh. p., a štyri negatívne. Výsledkom bolo, že 4 osoby z prvej skupiny prešli typickým ochorením, zo 4 osôb s negatívnym Sh. 3 mali dočasný nosič difterického bacila bez akýchkoľvek známok ochorenia. K epidemiologickej hodnote Sh. venovaný obrovskému množstvu diel. Z nich je zrejmé, že GL. R. predstavuje spoľahlivú metódu na určenie stupňa imunitnej vrstvy kolektívu vo vzťahu k záškrtu. Ukázalo sa, že ak distribuujeme pozitívny Sh. podľa veku sa potom získa krivka (Zingher) vekovej citlivosti na záškrt, ktorá sa celkom presne zhoduje s vekovým rozložením výskytu záškrtu. Relatívne vysokú imunitu malých dojčiat (do šiestich mesiacov) možno vysvetliť pasívnym prenosom imunitných teliesok cez materské mlieko. Čo sa týka znižovania citlivosti na záškrt s vekom (od jedného roka), sprevádzaného hromadením antitoxínu v krvi, niektorí autori (Friedberger et al.) považujú tento jav za prejav „fyziologickej sérogenézy“, t.j. akumulácia antitoxínu sa vyskytuje vo fyziologickom poriadku, ktorý ich sprevádza. dozrievanie naraz Ľudské telo a ďalší autori (Zinger, Dedley, Ramon a ďalší) sa domnievajú, že ľudia akumulujú antitoxín v krvi v dôsledku zjavnej a častejšie „tichej infekcie> záškrtu (pozri obrázok). Epidemiologická hodnota Sh. spočíva aj v tom, že je vhodné ho použiť na výber subjektov (v príp pozitívny výsledok) aktívna imunizácia proti záškrtu. Zvyčajne sa používa u detí

"-~-" $ osoby s antitoxínom v krvi (podľa Greera)

°--«>% osôb o pozitívnych, reakciách. Shika (podľa Park a Zknger) bary - výskyt záškrtu Rozdelenie podľa veku: osoby s antitoxínom v krvi (v %); osoby s pozitívnou Schickovou reakciou (v %); výskyt záškrtu (°/ooo každého veku). nad 5 rokov, berúc do úvahy relatívnu vzácnosť negatívneho Sh. vo veku do 5 rokov. Nakoniec III. R. Používa sa aj ako objektívna kontrola účinnosti ochranných očkovaní proti záškrtu. Túto účinnosť dokazuje prechod pozitívneho (pred očkovaním) Sh. negatívny po očkovaní (zvyčajne 6 týždňov po poslednom očkovaní). Technika výroby Sh.R.: 1. Aby ste pripravili potrebné riedenie toxínu v požadovanom objeme, postupujte z Dim toxínu. Povedzme, že toxín Dim = 0,0032. Na prípravu toxínu obsahujúceho 1/4 l) Dim v 0,2 objeme postupujte nasledovne: vezmite 1OODlm, v tomto prípade = 0,32, a pridajte fyziologický roztok na 10,0, t.j. 9,68. Vezmite 1,0 z tohto riedenia (t.j. 10 Dim) a pridajte k 79,0 fiziolu. Riešenie. Potom v 80,0 druhého riedenia je 10.Dim; v 1 cm 3 teda -V" Dim a v 0,2-Vio Dim. Pri každom riedení je potrebné odobrať čerstvú suchú pipetu a premyť ju najmenej 10-krát. Vyžaduje si to zvláštnu presnosť merania a presnosť pipiet (polovica takto pripraveného riedenia toxínu sa naleje do samostatnej banky a umiestni sa na 10 minút do vriaceho vodného kúpeľa, čím sa získa zahriaty toxín na „kontrolu“). . Vzhľadom na to, že toxín, zriedený fiziol. riešenie, rýchlo stráca aktivitu, je pohodlnejšie brať t. borátový tlmivý roztok (pozri Dikova reakcia) v ktorom si zriedený toxín zachováva svoju silu niekoľko mesiacov. 2. Injekcia sa vykonáva striktne intradermálne, najvýhodnejšie pomocou tuberkulínovej striekačky s veľmi tenkou platinovou ihlou (č. 18, 19). Ihla by mala mať krátku bradu. Počas injekcie musí byť brada držaná smerom von. Zavedenie toxínu sa robí pomaly so známym napätím, charakteristickým pre intradermálnu injekciu tekutiny, a v dôsledku toho sa v mieste vpichu vytvorí dobre ohraničená vezikula (Quaddel), ktorá má v mieste chĺpku priehlbiny. folikulov. 3. Aktívny toxín sa vstrekuje do kože predlaktia ľavej ruky, zahriaty toxín sa vstrekuje do kože predlaktia pravej ruky. V sériovej výrobe III. R. odporúča sa mať dvoch lekárov súčasne – jeden vstrekuje aktívny, druhý zahrievaný toxín. 4. Počítanie Sh. robí sa dvakrát: za 24 hodín kvôli falošným reakciám a za 96 hodín, keď je pravý Sh. dosiahne vrchol. Lit.: Zdrodovsky P., Moderné problémy špecifickej profylaxie záškrtu, Arkh. biol. Sciences, zväzok XXXV, s. Ach, zv. 2, 1934; Doull J., Faktory ovplyvňujúce selektívnu distribúciu tn záškrtu, Journ. ol zabrániť, med., v. IV, 1930; Frost W., Infekcia, imunita a choroby v epidemiológii záškrtu, Tamže, v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphterie chez les vyhovuje reakcii de Schick negatívne, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxíno-antitoxínová imunizácia proti záškrtu, Journ. amer. med. Ass., v. LXXIX, s. 1584, 1922; Rosling E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick B., Die Diphtherietoxin- Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des profylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, č. 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hungerektionder Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., ​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo-reakcia al "anatoxine diphterique alebo anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Pozri tiež lit. k čl. Šarlátová horúčka. G. Orlov.

Cytochemické metódy usilovať sa o identifikáciu chemických a enzymatických látok v bunkách pomocou farebných reakcií. Cytochemikálie uchovávajú bunkovej štruktúry, ktorý umožňuje identifikáciu buniek a intracelulárnu lokalizáciu skúmanej zlúčeniny. Preto sa v hematológii uprednostňujú nie biochemické, namáhavé, ničiace bunkovú štruktúru veľmi heterogénnej bunkovej populácie, ale cytochemické metódy.

Cytochémia dokázali, že medzi morfologicky identickými bunkami existujú významné chemické a enzymatické rozdiely.

Glykogén (CHIC reakcia) (PAS) - Hotchkiss - Mac Minus metóda

Schickov princíp. Polysacharidy sa detegujú reakciou, ktorá oxiduje alkoholové skupiny, ktoré sa premieňajú na aldehydové skupiny, a tie sa identifikujú farebnou reakciou so Schiffovým činidlom.

Činidlá pre PAS reakciu: 1. Alkohol-formalínová fixačná zmes: 9 dielov absolútne etylalkohol+1 diel 40% formalínu; udržujte pri +4°.

2. kyselina jodistá, 1% vodný roztok. Roztok je bezfarebný. Skladujte v hnedej sklenenej fľaši v tme pri laboratórnej teplote. Zažltnutý roztok nie je použiteľný.

3. Schiffovo činidlo. 1 g zásaditého fuchsínu rozrieďte pri teplote varu v 200 ml destilovanej vody. Pretrepávajte 5 minút, ochlaďte na teplotu 50 °C, prefiltrujte a pridajte 20 ml normálnej kyseliny chlorovodíkovej. Ochlaďte na 25 °C, pridajte 2 g disiričitanu sodného alebo draselného, ​​čím sa úplne získa roztok. Roztok by mal stáť jeden deň v tme a chlade (+4 °). Potom pridajte 2 g aktívne uhlie, chat 1 min. a filtrovať.
Výsledný filtrát je číry a bezfarebný. Je povolený mierne žltkastý odtieň; ak roztok zružovie, stane sa nepoužiteľným. Skladujte pri +4°C v hermeticky uzavretej fľaši z hnedého skla.

4. Zelené svetlo -1% vodný roztok.

5. Diastáza: neskvapalnené ľudské sliny alebo 0,1 % roztok amylolyticko-diastatického enzýmu vo fyziologickom roztoku.

Technika Schickovej reakcie

1) 10-minútová fixácia náterov zmesou alkohol-formalín; umývanie destilovanou vodou;
2) oxidácia 1% roztokom kyseliny jodistej, 10 min.; umývanie destilovanou vodou;
3) farbenie Schiffovým činidlom v zakrytej miske, v tme a chlade, počas 2 hodín; umývanie tečúcou vodou;
4) kontrastné farbenie 1% zeleného svetla počas 1 minúty; opláchnutie tečúcou vodou.

Ovládanie je pripnuté namazať podrobená inkubácii diastázy, 60 min. pri izbovej teplote, aby sa selektívne odstránil glykogén. Po premytí destilovanou vodou sa spracuje bežným spôsobom.

Vyhodnotenie výsledkov PAS reakcie

Glykogén zafarbené do karmínovej farby červená farba, javí sa ako zrnká alebo rozptýlené. Na kontrolu reakcie sa používajú zrelé granulocyty náteru. Beyond Glycogen CHIC pozitívna reakcia podávať ďalšie látky sacharidovej povahy, ako je mucín, mukoproteíny, cerebrozidy, fibrín. Glykogén sa od týchto zložiek odlíši predbežnou úpravou diastázou, po ktorej sa už glykogén nezafarbí.

IN granulocyty glykogén je dispergovaný už v štádiu promyelocytov a začína sa zvyšovať, keď dozrieva. Za normálnych podmienok sú lymfocyty negatívne, alebo 20 % z nich môže obsahovať niekoľko malých zŕn glykogénu. Monocyty sú negatívne alebo majú jemnú zrnitosť.

Intenzita sfarbenie stanovené semikvantitatívne. V reakcii sa CHIC prejaví vo forme glykogénového indexu alebo priemerného reakčného indexu (Astaldi). Normálne glykogén sa pohybuje od 0,10 do 0,30. Stupeň zaťaženia vyšší ako 3 majú zvyčajne iba patologické lymfocyty.

Bola uvedená ako metóda Schickovej reakcie:
a) Pri nastavovaní odlišná diagnóza jednotlivé cytologické typy akútnej leukémie:
- Myeloblasty a promyelouitída sú PAS-negatívne alebo získajú slabú difúznu farbu. Auerove telieska dávajú pozitívnu reakciu, ktorá sa po trávení slinami oslabuje.
- Lymfoblasty pri akútnej leukémii a lymfosarkóme poskytujú ostrú PAS-pozitívnu reakciu vo forme zŕn alebo veľkých blokov glykogénu.
- Erytroblasty pri erytrémii a akútnej erytroleukémii dávajú ostro pozitívnu rozptýlenú alebo granulárnu reakciu, na rozdiel od normálnych erytroblastov, ktoré sú PAS-negatívne;
- Monocytoidné blasty sú nekonzistentne slabo pozitívne, s jemnou zrnitosťou.

b) Na účely diagnostiky a sledovania účinnosti liečby pri chronickej lymfatickej leukémii: zvýšená hladina glykogénu indikuje ťažkú ​​formu ochorenia a zlú prognózu.
Rast glykogénu v patologických lymfocytoch, jav, ktorý nie je charakteristický pre leukémiu, sa vysvetľuje zvýšením metabolickej aktivity pri akomkoľvek type lymfoidnej proliferácie.

c) Na odlíšenie Gaucherových buniek od iných makrofágov s akumuláciou.