תגובת שיק מצביעה על נוכחות או היעדר הרמה הדרושה של אנטי-טוקסין בדם כדי להגן על הגוף מפני דיפתריה. נכון להיום, משתמשים בתגובה זו בתדירות נמוכה יותר עקב הכנסת שיטות רגישות יותר (RPHA).

התגובה של שיק מתבצעת בילדים המחוסנים נגד דיפתריה עם חיסון מלא ולפחות חיסון מחדש אחד. בגיל 13 ומעלה ניתן לקבוע את התגובה גם עם היסטוריית חיסונים לא ידועה. מצב החסינות נגד דיפתריה נבדק לא לפני 6 חודשים לאחר החיסון מחדש ולא מוקדם יותר מחודשיים לאחר מחלה חריפה.

התגובה של שיק מוכנסת גם לקבוצות שאינן חיוביות לדיפתריה, ילדים שזה עתה הגיעו, כאשר אין מידע על חיסונים. ילדים עם תגובה שלילית של שיק אינם מקבלים חיסונים נוספים. חיסונים נוספים, ללא קשר לשכבה החיסונית בצוות, מתבצעים לילדים עם תגובות חיוביות ומפוקפקות.

תוצאות תגובת השי"ק מוזנות בכרטיס השיא חיסונים מונעים(ו' 63) תוך ציון מועד קביעת ובדיקת התגובה, סדרת הרעלן והמכון שיצר את הרעלן.

כדי להגדיר את תגובת Shik, נעשה שימוש רעלן דיפטריה פעיל (לא מחומם) מדולל. 0.2 מ"ל מכיל מנת Shik אחת.

כדי להגדיר את תגובת שיק, יש להשתמש במזרקים שנבדקו בקפידה עם דרגות מדויקות של גרם אחד (טוברקולין), שאינם מאפשרים לנוזל לעבור בין דפנות המזרק והבוכנה שלו.

חל איסור מוחלט לבצע את תגובת שיק במתחם שבו בוצע חיסון מחדש נגד שחפת באותו יום, וכן להשתמש במזרקים, מחטים וכלים אחרים המשמשים לחיסון נגד שחפת.

העור במקום ההזרקה מנוגב בצמר גפן המורטב ב-70% אלכוהול אתילי. רעלן (0.2 מ"ל) מוזרק לתוך העור חלק אמצעי משטח כף הידבדרך כלל על האמה השמאלית. ההחדרה מתבצעת באיטיות עם מתח ידוע, המאפיין הזרקת נוזלים תוך עורית. ההזרקה נעשית מתחת לשיפוע קל מאוד של המזרק לאמה, כמעט במקביל לפני השטח של העור. חתך המחט צריך להיכנס לחלוטין לעור ולהאיר דרך האפידרמיס. במקום ההזרקה אמורה להיווצר שלפוחית ​​לבנבנה (פאפולה) מצומצמת היטב בקוטר של כ-1 ס"מ, עם רושם במקום זקיקי השיער ("קליפת לימון"). הבועה הזו (פאפולה) נפתרת תוך 10-15 דקות. אם שלפוחית ​​(פאפולה) אינה נוצרת או נעלמת מהר מדי בעת הזרקת הרעלן, הדבר מצביע על כך שההזרקה נעשתה בצורה שגויה, עמוקה, והרעלן שהגיע תת עורי עלול לא לגרום לתגובה. כתוצאה מכך, עלולה להתקבל תוצאה לא נכונה.

התגובה נרשמת לאחר 72 או 96 שעות. התוצאות מוערכות באופן הבא:

א) התגובה של שיק חיובית אם מופיעים אדמומיות והסתננות במקום ההזרקה של הרעלן. מידת התגובה מצוינת: "+" - אם לאדמומיות יש קוטר של 1 -1.5 ס"מ, (+ +" - אם 1.5 - 3 ס"מ, "+ + +" - אם יותר מ-3 ס"מ;

ב) תגובתו של שיק היא שלילית, כאשר אין אדמומיות וחדירה למקום ההזרקה של הרעלן;

ג) התגובה של שיק מוטלת בספק אם האדמומיות וההסתננות במהלך החדרת הרעלן לא באים לידי ביטוי בבירור, או שעם תגובה בולטת, קוטר האדמומיות הוא כ-0.5 ס"מ (מסומן ב"±").

התוויות נגד לניסוח תגובת שיק: ספסמופיליה, אפילפסיה, מחלות פוסטוריות, מגע עם חולים דלקת כבד ויראלית, אסטמה של הסימפונות.

אלרגנים ורעלים

תרופות אבחנתיות

אימונוגלובולין אנטי-רעיל באדם (רוסיה)

סרום סוס נגד דיפתריה נוזל מרוכז מטוהר (רוסיה)

סרומים ואימונוגלובולינים

חיסון נגד שחפת BCG-M יבש (לחיסכון חיסון ראשוני, רוסיה)

חיסון נגד שחפת (BCG) יבש למתן תוך עורי (רוסיה)

Akt-Khib (Hib-wak, דרום קוריאה)

חיסון מונו-עלת (רוסיה)

מכיל חיידקי שעלת, חומר משמר - מרתיולט. השתמש רק על פי אינדיקציות אפידמיולוגיות במרכזי זיהום שעלת.

מכיל 10 מק"ג של פוליסכריד לכל מנה hemophilus influenzaeסוג b, מצומד עם טוקסואיד טטנוס, חומר משמר - trometamol. משמש לחיסון ילדים מגיל חודשיים על פי אינדיקציות אפידמיולוגיות.

Mycobacterium bovis BCG-1.זן החיסון התקבל על ידי גידול ארוך טווח (למשך 13 שנים) של מיקובקטריות בקר שחפת בתנאים לא נוחים על מצע תפוחי אדמה-גליצרין בתוספת מרה. להגיש בקשה ל מניעה ספציפיתשַׁחֶפֶת. החיסון מתבצע ביום ה-5-7 לחיים, כאשר הגוף נקי מזיהום מיקובקטריאלי. כל הילדים הבריאים, המתבגרים והמבוגרים מתחת לגיל 30 המגיבים לרעה לטוברקולין כפופים לחיסון מחדש. מנגנון החסינות בשחפת אינו מובן במלואו. IN פרקטיקה קליניתהקריטריון העיקרי לעוצמת חסינות החיסון הוא המעבר של תגובת עור שלילית לטוברקולין לחיובית.

מכיל מיובש בהקפאה בתמיסת נתרן גלוטמט 1.2% חיידקים חיים מזן החיסון Mycobacterium bovis BCG-1.הוא משמש לחיסכון במניעה ספציפית של שחפת (חיסון ראשוני) ביילודים באזורים עם מצב לא נוח לשחפת.

מכיל נוגדנים נגד אקזוטוקסין דיפטריה באצילוס. פעילות נוגדת רעילות מתבטאת ביחידות בינלאומיות (10,000 ו-20,000 IU/ml). משמש לטיפול בחולים עם דיפתריה. בנוסף למטרות טיפוליות, נעשה שימוש בסרום אנטי-דיפתריה לקביעת רעילותן של תרביות חיידקי דיפתריה בתגובת משקעי הג'ל.

מכיל חלק פעיל אימונולוגית של פלזמת דם של תורמים עם נוגדנים לאקסוטוקסין של חיידק השעלת (לפחות 750 IU של נוגדנים נגד שעלת רעילים). משמש לטיפול בשיעול.

מכיל רעלן דיפטריה מטוהר ב-0.2 מ"ל של 1/40 DLM רעלן חזיר ניסיונות. משמש לבדיקות תוך-עוריות לצורך אבחון חיסוני. אנשים מפתחים תגובה דלקתית באתר ההזרקה. אם הדם מכיל יותר מ-0.03 IU של אנטי-טוקסין, הבדיקה שלילית. בעבר, הבדיקה של שיק שימשה לעתים קרובות כדי לזהות אנשים הרגישים לדיפתריה. נכון לעכשיו, בשל האפשרות לסיבוכים, השימוש בו מוגבל להתוויות מגיפה קפדניות.

רעלנים (מהיוונית טוקסיקון - רעל), חומרים ממקור חיידקי שיכולים לעכב תפקודים פיזיולוגיים, מה שמוביל למחלות או למוות של בעלי חיים ובני אדם. מטבעם הכימי, כל הרעלים הם חלבונים או פוליפפטידים. שלא כמו אורגני ואנאורגניים אחרים חומרים רעילים, רעלים, כאשר הם נבלעים בגוף, גורמים ליצירת נוגדנים.
בכמה מחלות זיהומיות (דיפתריה, קדחת ארגמן), משתמשים בילדים כדי לקבוע את עוצמת החסינות והרגישות של ילדים. בדיקות תוך עוריותשימוש ברעלים מדוללים מתאימים. תגובה חיובית (דלקת מקומית של העור באזור הזרקת רעלנים) נובעת מההשפעה הרעילה של הרעלן על רקמות העור. התוצאה השלילית של התגובה מוסברת על ידי נטרול הרעלן המוזרק לעור עם האנטי-טוקסין המתאים. אורגניזם חיסונימספיק בשביל זה.
רעלנים מתקבלים מזנים רעילים של חיידקים (דיפתריה בצילוס או סטרפטוקוקוס סקרלטינלי) על ידי חיסון על מצע הזנה נוזלי (מרק פתוח) ולאחר מכן סינון דרך מסנני חיידקים. מהרעלים שהתקבלו מכינים רעלנים אבחנתיים Shika (דיפתריה) ודיק (סקרלט). רעלים מוזרקים תוך עור, בכמות של 0.2 מ"ל (שיקה) ו-0.1 מ"ל (דיק), לחלק האמצעי של המשטח הפנימי של האמה.
אנטוקסינים הם פילטרטים של תרביות מרק של מיקרואורגניזמים רעילים שאיבדו את רעילותם עקב טיפול מיוחד, אך שמרו במידה רבה על התכונות האנטיגניות והאימונוגניות של הרעלים המקוריים.
כאשר מוחדרים לגוף האדם או החיה, טוקסואידים גורמים להיווצרות חסינות נוגדת רעלים, תכונה זו מאפשרת להשתמש בהם כדי למנוע את אלה מחלות מדבקות, המבוססים על פעולת אקזוטוקסינים המופרשים על ידי פתוגנים, וכן עבור חיסון יתר של בעלי חיים - יצרני סרה אנטי רעילים.
ללא קשר לסוג הטוקסואיד, האימונוגניות והאנטיגניות שלו נקבעות על ידי התכונות המתאימות של הרעלן המקורי. לכן, במעבדות המייצרות תרופות אלו מוקדשת תשומת לב רבה ליצירת תנאים מיטביים ליצירת רעלנים.
כדי להשיג רעלים בעלי חוזק גבוה, נדרשים זנים המובחנים ביכולת בולטת במיוחד ליצור קטוקסינים בתנאים מלאכותיים. לא לכל הזנים של חיידקים רעילים יש תכונות אלה. למטרות ייצור משתמשים בזנים המותאמים לסביבות מלאכותיות ושומרים באופן מתמשך על היכולת ליצור קטוקסינים.
תרבויות של יוצרים רעלנים מאוחסנות במצב מיובש או על מדיה האופטימלית עבור סוג זה של חיידקים. לפני השימוש לחיסון של קבוצות המוניות, הזנים עוברים פסיבציה על המדיום המשמש להשגת הרעלן.
שאר הדברים שווים, חוזקם של הרעלים נקבע על פי איכות מצע התרבית, ולכן מעבדות שמים לב להכנת מצע התרבות. חומרי גלם, כימיקלים ומרכיבים נוספים המרכיבים את המדיום נתונים לבקרה היסודית ביותר במעבדות הביוכימיות של מכוני הייצור.
להיווצרות רעל, משתמשים באמצעי תזונה נוזליים, הכוללים מי בשר ומוצרים של עיכול בשר פפטי (מרק מרטין, מדיום רמון) או טריפטי (בינוני של האפיפיור).
תהליך הידרוליזה של בשר נשלט על ידי קביעת סך החנקן האמין ומקדם ביקוע החלבון, אשר מחושב מהיחס בין חנקן אמין לסך הכל. נעשה שימוש גם בקזאין ללא בשר, מדיה חצי סינתטית.
פחמימות (גלוקוז, מלטוז או תערובת שלהם) מתווספות למדיום התזונתי המיועד להיווצרות רעלנים. בעת תסיסה של פחמימות, משתחררת כמות גדולה של אנרגיה, הנחוצה לתהליכי הסינתזה המתרחשים בתרבות מתפתחת. תוספת של פחמימות מגבירה באופן דרמטי את חוזק הרעלים המיוצרים בסביבה.
בנוסף לפחמימות, מתכות מסוימות נדרשות ליצירת רעלנים במינונים מינימליים. יצירת הרעלן של חיידק דיפתריה מעוכבת על ידי עודף ברזל בסביבה באותה מידה כמו על ידי היעדרו. בנוכחות כמויות אופטימליות של ברזל בסביבה, היווצרות רעלנים מוגברת בצורה חדה.
היווצרות רעלנים מתבצעת במלואה ב-pH מסוים של המדיום. בינתיים, במהלך הגידול של התרבית, ערך ה-pH משתנה ויכול להגיע לאינדיקטורים כאלה שיעכבו את היווצרות הרעלן.
כדי לחסל את הסביבה הזו, מוסיפים חומרי חיץ כדי לשמור על ערך ה-pH הרצוי. אחד מחומרים כאלה בעלי תכונות חציצה הוא נתרן אצטט, המוסף למרק בכמות של 0.5-0.75%.
בהתאם למאפיינים הביולוגיים של החיידק המייצר רעלנים, תנאים שוניםטיפוח, ובפרט, אוורור הסביבה מוסדר. Bacillus Diphtheria יוצר רעלן בתנאים של אוורור מקסימלי, להיפך, Bacillus טטנוס ואנאירובים רעילים אחרים אינם זקוקים לחמצן. לפי זאת הפעם הראשונהבמקרה השני, התרבית גדלה בשכבה דקה של המדיום עם משטח גדול של מגע עם אוויר; במקרה השני, המדיום נוצק בשכבה גבוהה וסופחי חמצן שונים (צמר גפן, אריתרוציטים יבשים) הוסיף.
טמפרטורת הגידול ומשך הזמן שלה משתנים עבור חיידקים שונים. המשותף לתהליך היווצרות הרעלנים הוא הצורך בבקרת טמפרטורה מושלמת באינקובטור. תנודות בטמפרטורה משפיעות לרעה על חוזק הרעלן. לכן, תרמוסטטים בהם מתרחשת היווצרות רעל מצוידים בתרמוסטטים מדויקים.
בכל מקרה בודד, משך גידול התרבית נקבע על פי עוצמת היווצרות רעלנים על סדרה נתונה של מדיום. כדי לפתור את סוגיית מועד סיום הגידול, עוצמת הרעלן iH במדיום נקבעת בתקופות טיפוח שונות.
כאשר עוצמתו של הרעלן מגיעה למקסימום, הוא מופרד מגופים מיקרוביאליים, זאת נעשה על ידי סינון באמצעות מסננים חיידקיים מיוחדים (מיקרואורגניזמים אנאירוביים) או נייר רגילים (דיפתריה באצילוס).
תרגום של פילטרים רעילים ונטוקסין מתבצע על ידי חשיפה ממושכת לפורמלין בטמפרטורה של 39-40 מעלות צלזיוס. פורמלין מתחבר עם קבוצות אמינו חופשיות של חומצות אמינו, פוליפפטידים וחלבונים של הרעלן, ולכן מאבד את תכונותיו הרעילות. המעבר של רעלן הוואנטוקסין מתרחש תוך 3-4 שבועות. ליצירת רעלנים תקינה, יש חשיבות ל-pH של הרעלן. הטוב ביותר הוא תגובה ניטרלית או מעט בסיסית של המדיום.
אנטוקסינים מאופיינים בחוסר מזיק מוחלט לבעלי חיים. אולם בנטרול חלקי עלולים להישאר בהם שאריות רעלנים הגורמות לנזק מאוחר באורגניזם רגיש. לכן, כאשר בודקים את הבטיחות של טוקסואידים, בעלי חיים מנוטרים במשך זמן רב. חוסר המזיק של טוקסואידים הוא בלתי הפיך. אין השפעות מובילות לשיקום הרעילות שאבדה.
אנטוקסינים נשמרים כמעט לחלוטין תכונות אנטיגניותרעלים. ניתן לאמת זאת שיטות שונותבמבחנה (תגובת פקקולציה, תגובת קשירת טוקסואיד) וניסויים בבעלי חיים, בהם החדרת טוקסואיד גורמת ליצירת נוגדי רעלנים מתאימים וליצירת חסינות נוגדת רעלים.
אנטוקסינים מתמשכים; הם סובלים הקפאה והפשרה חוזרים ונשנים, מתנגדים לפעולה טמפרטורה גבוההיציב במהלך אחסון לטווח ארוך.
אנטוקסינים מכילים, בנוסף לחלבונים ספציפיים, גם חומרים נטלים, מהם ניתן לשחרר אותם בשיטות שונות. הם מבוססים על היכולת של טוקסואידים לזרז כשהם רוויים במלחים ניטרליים, מלחים מתכות כבדות, חומצות (הידרוכלורי, טריכלורואצטי, מטפוספורי), וכן בנוכחות אתיל ומתיל אלכוהול בטמפרטורות נמוכות. שיטות אלו משמשות כיום להשגת טוקסואידים מרוכזים מטוהרים.
טוקסואידים נספגים על חומרים בלתי מסיסים שונים (מלחי זרחן, אלומיניום הידרוקסיד), זה משמש להכנת רעלנים נספגים, המתאפיינים בספיגה מאוחרת בגוף, וכתוצאה מכך ניתן לקבל חסינות חזקה יותר.
בשל חוסר המזיקות שלהם, האנטיגניות הגבוהה והאימונוגניות שלהם, טוקסואידים הם האמצעי היקר ביותר למניעה וטיפול במספר מחלות.
נכון להיום, טוקסואידים התקבלו: דיפתריה, טטנוס, בוטולינום, סטפילוקוק, דיזנטריה, מרעלנים המיוצרים על ידי פתוגנים של גז גנגרנה, וכן מארס נחשים.

SHIKA REACTION(שיק) הציע ב-1913 לקבוע את מידת הרגישות לדיפתריה. ש.ר. מבוצע על ידי הזרקה תוך-עורית לחלוטין של רעלן דיפטריה בנפח של 0.2 ס"מ 3,מסכם 1/40 עמום (ראה דִיפטֶרִיָה).הרעלן מוזרק לעור יד שמאל; לתוך העור יד ימיןאותה כמות של רעלן, מחוממת ב-100 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות, מוכנסת לשליטה. תוצאות ההזרקה מצוינות לאחר 24 ו-96 שעות, וניתן להבחין בתופעות הבאות: 1. בהיעדר תופעות תגובתיות במקום ההזרקה של רעלן ה"בקרה" (המחומם), מופיעות אדמומיות והסתננות בזריקה. אתר הרעלן הפעיל, מלווה בתחושת צריבה קלה וגרד. תופעות אלו מתפתחות ביום הראשון, מגיעות למקסימום ביום הרביעי, ואז נעלמות ומשאירות פיגמנטציה של העור למשך זמן מה. לפי גודל האדמומיות והחדירה, ניתן לשפוט את מידת התגובה, המצוינת כך: + ("תגובה "מפוקפקת" - עם הסתננות לא ברורה ואדמומיות קלה), + (עם אדמומיות בקוטר לא יותר מ-1.5 ס"מ), + +(אם לאדמומיות יש קוטר של 1.5 עד 3 ס"מ)ו+++ (אם האדמומיות גדולה מ-3 ס"מ);סוג זה של תגובה נקרא "חיובי" ש. 2. בהיעדר תופעות תגובתיות כלשהן באתר ההזרקה של רעלן מחומם ופעיל, מדברים על שצ "שלילי". 3. אם מציינים תופעות תגובתיות בשתי הידיים באותה מידה, אזי תופעה כזו מוגדרת כ"שקר" ש. מידת התגובה הכוזבת (עם רעלן מחומם) מסומנת (כמו חיובית) בסימן אחד, שניים, שלושה. לתגובה לרעלן מחומם יש כמה הבדלים איכותיים מהתגובה לרעלן פעיל: הופעה והיעלמות מהירה (בדרך כלל תוך 36-48 שעות) ודומיננטיות של תופעות אקסודטיביות על פני חדירות. 4. אם מציינים תופעות תגובתיות בשתי הידיים, אבל מידתן שונה, אז מדברים על רעלן ש' "משולב". רעיונות נפוצים לגבי המהות של ש. מצטמצמים לערכים הבאים: אם אין אנטי-טוקסין בדם של הנבדק או שהוא כלול בכמות נמוכה מ-/zo -A-E בסרום 1.0, אזי הרעלן המוזרק תוך עורי גורם לתופעות תגובתיות, המכונה "חיוביות" III אם, לעומת זאת, יש כמות מספקת של אנטי-טוקסין בדם של הנבדק הנבדק (לפי Shik 1/30, לפי Bering 1/hoo ויותר מ-AE בסרום 1.0), אז האחרון מנטרל את הרעלן המוכנס. , ו"שלילי" ש'. הצהרות אלו מאושרות על ידי התצפית הבאה: אם מוזרקת תערובת רעלן-אנטי-טוקסין ניטראלית לנבדק הרגיש לרעלן דיפתריה, אז ככלל, לא נצפית תגובה באתר ההזרקה של תערובת זו. .בנוסף, בוצעו מספר קביעות ישירות בו-זמנית של כמות האנטי-טוקסין בדם.לפי שיטת רמר במקביל לש.ר. (שיק, רמון, וקסל ועוד) ניסויים אלו חושפים ברוב המקרים תלות ניכרת של התוצאה של S.R על כמות האנטי-טוקסין בדם. חוסר העקביות הנצפות לעיתים בין תופעות אלו אינן יכולות לזעזע את הכלל, שכן הן נדירות למדי: ג'נסן, למשל. ציין את נוכחותו של ש. עם תוכן לא משמעותי של נוגד רעלן "I /i 00 AE בסרום 1.0) ב-9% מהמקרים. כאשר מעריכים את התוצאות של ש. יש לקחת בחשבון שבגיל הרך, שלילי ש. בהיעדר אנטי-טוקסין בדם. זה נובע מהמוקדמות הטבועה יַלדוּתאנרגיית עור. לגבי מה שנקרא. שקר ש. והגרסאות שלו (משולבות, מעוות ש. ר.), כלומר, התגובה של העור לרעלן מחומם, אז זה מוסבר על ידי רגישות הגוף למוצרים מטבוליים עמידים בחום של חיידק דיפתריה וחומרי מזון במרק. רגישות זו היא אלרגית במהותה. כפי שהראתה סיגל, הוא מורכב משני מרכיבים – ספציפי ולא ספציפי ביחס לדיפתריה. תצפיותיו של זלר (Zoller) הראו את הזהות המלאה של התגובה הכוזבת עם התגובה התוך עורית לטוקסואיד (0.2 טוקסואיד, מדולל ביחס של 1:100) היא מה שנקרא תגובת Zeller. בהתאם לתוצאה של תגובות לרעלן ולטוקסואיד, זלר מחלק את כל האנשים ל-4 קבוצות (ראה טבלה). זלר מדמיין את תהליך החיסון נגד דיפתריה באופן הבא: אנשים הרגישים לדיפתריה (קבוצת I עם מאפייני הקבוצה תגובה | תגובת זלר שלק f 1 רגיש ל-II f dlphtheria III 1 חסין ל-DVF- IV / theria + + + 1 Stage + ) אלרגיה חיובית ש.ר.) כאשר נפגשים עם חיידק דיפתריה (ב-נ או כרכרה) או במהלך חיסון מלאכותי, הם רגישים ביחס לחיידק ומוצריו. העור שלהם נותן תגובה אלרגית; אך מכיוון שבמקביל טרם פותחה כמות מספקת של אנטי-טוקסין, העור מגיב גם לרעלן הפעיל (קבוצה II עם Sh.p. מזויף או משולב). בעתיד, כמות האנטי-טוקסין בדם עולה עד כדי כך שהתגובה לרעלן הפעיל הופכת לשלילית, אך האלרגיה עדיין נשארת (קבוצה III עם Sh. p. סוטה); סוף סוף האחרון נעלם, ומגיעה החסינות החזקה האופיינית לאנשים מקבוצת IV (עם Sh. שלילי של נהר). ערכו של ש. כיצד תגובות אימונו נקבעות על ידי הדעות הרווחות על אופי החסינות בדיפתריה. על ידי רעיונות מודרנייםהאחרון מבוסס על נוכחות של כמות מספקת של אנטי-טוקסין בדם. רעיונות אלה, כידוע, קובעים את הפרקטיקה המודרנית של מניעת חיסונים של דיפתריה (תערובות רעלן-אנטי-טוקסין, טוקסואיד). מנקודת מבט זו, הש' ר' שמחליף בנוחות את המסורבל הגדרה ישירהאנטי-טוקסין בדם לפי שיטת Re-mer, יכול להיחשב כדרך אידיאלית לקביעת מצב החסינות, resp. רגישות, אנושי לדיפתריה. השאלה לגבי הכמות המינימלית של אנטי-טוקסין בדם הנדרשת ליישום חסינות עמידה לדיפתריה שנויה במחלוקת; בכל מקרה, יש לציין את הנדירות היחסית של דיפתריה אצל אנשים עם ש' שלילי. בנוסף, ניתן להצביע על אישור ניסוי ישיר לסוגיה זו: Getri, Marshal and Moss (Gu-tnrie, Marshall and Moss) הדביקו שמונה מתנדבים על ידי מריחת הגרון בתרבית ארסית של דיפתריה, מתוכם לארבעה היה מדד ש-ח חיובי. עמ', וארבע שליליות. כתוצאה מכך, 4 אנשים מהקבוצה הראשונה עברו מחלה טיפוסית, מתוך 4 אנשים עם ש. 3 סבלו מנשא זמני של חיידק דיפתריה ללא כל סימני המחלה. לערך אפידמיולוגי ש. מוקדש למספר עצום של יצירות. מהם ברור ש-GL. ר. מייצג שיטה אמינה לקביעת מידת השכבה החיסונית של הקולקטיב ביחס לדיפתריה. התברר שאם נחלק ש' חיובית. לפי גיל, אז מתקבלת עקומה (זינגר) של רגישות גיל לדיפתריה, החופפת דיוק עם התפלגות הגילאים של שכיחות הדיפתריה. ניתן להסביר את החסינות הגבוהה יחסית של תינוקות צעירים (עד חצי שנה) על ידי העברה פסיבית של גופי חיסון דרך חלב האם. באשר לירידה ברגישות לדיפתריה עם הגיל (החל משנה), המלווה בהצטברות של אנטי-טוקסין בדם, חלק מהכותבים (פרידברגר וחב') רואים בתופעה זו ביטוי של "סרוגנזה פיזיולוגית", כלומר, כי הצטברות של אנטי-טוקסין מתרחשת בסדר פיזיולוגי, מלווה כזה של. מבשיל בבת אחת גוף האדם, ומחברים אחרים (זינגר, דדלי, רמון ואחרים) מאמינים שאנשים צוברים אנטי-טוקסין בדם כתוצאה מדיפתריה ברורה, ולעתים קרובות יותר "שקטה> (ראה איור). ערך אפידמיולוגי ש. מורכב גם מהעובדה שנוח להשתמש בו לבחירת הנושאים של אנשים (במקרה של תוצאה חיובית) חיסון פעיל נגד דיפטריה. זה משמש בדרך כלל בילדים

"-~-" $ אנשים עם אנטי-טוקסין בדם (לפי גריר)

°--«>% אנשים על תגובה חיובית. שיקה (לפי Park ו-Zknger) ברים - שכיחות דיפטריה התפלגות לפי גיל: אנשים עם נוגד רעלן בדם (ב-%); אנשים עם תגובת שיק חיובית (ב-%); שכיחות של דיפתריה (°/ooo של כל גיל). מעל גיל 5 שנים, בהתחשב בנדירות היחסית של הש. השלילי. מתחת לגיל 5 שנים. לבסוף III. ר. הוא משמש גם כבקרה אובייקטיבית על יעילות חיסוני ההגנה נגד דיפטריה. יעילות זו מוכחת על ידי המעבר של החיובי (לפני החיסון) Sh. שלילי לאחר החיסון (בדרך כלל 6 שבועות לאחר החיסון האחרון). טכניקה לייצור ש.ר.: 1. על מנת להכין את הדילול הדרוש של הרעלן בנפח הנדרש יש להמשיך מרעלן Dim. נניח רעלן Dim = 0.0032. כדי להכין רעלן המכיל I / 4l) עמעם בנפח 0.2, המשך באופן הבא: קח lOODlm, במקרה זה = 0.32, והוסף מי מלח ל-10.0, כלומר 9.68. קח 1.0 מהדילול הזה (כלומר 10 Dim) והוסף ל-79.0 fiziol. פִּתָרוֹן. ואז ב-80.0 מהדילול השני יש 10.Dim; ב-1 ס"מ 3מכאן -V" Dim, וב-0.2-Vio Dim. בכל דילול יש צורך לקחת פיפטה יבשה טרי, לשטוף אותה לפחות 10 פעמים. זה דורש דיוק מיוחד במדידה ובדיוק של פיפטות (מחצית מהדילול שהוכן כך של הרעלן מוזגים לבקבוק נפרד ומניחים באמבט מים רותחים למשך 10 דקות; כך מתקבל רעלן מחומם ל"שליטה"). . לאור העובדה כי הרעלן, פיציול מדולל. פתרון, מאבד במהירות את פעילותו, זה יותר נוח לקחת t. תמיסת חיץ בוראט (ראה תגובת דיק)שבו הרעלן המדולל שומר על כוחו למשך מספר חודשים. 2. ההזרקה מתבצעת אך ורק תוך-עורית, הכי נוח באמצעות מזרק טוברקולין עם מחט פלטינה דקה מאוד (מס' 18, 19). המחט צריכה להיות בעלת זקן קצר. יש להחזיק את הזקן כלפי חוץ במהלך ההזרקה. החדרת הרעלן נעשית באיטיות במתח ידוע, האופייני להזרקת נוזלים תוך עורית, וכתוצאה מכך נוצרת במקום ההזרקה שלפוחית ​​(Quaddel) מתוחמת היטב, שיש בה שקעים במקום השערה. זקיקים. 3. רעלן פעיל מוזרק לעור האמה של יד שמאל, רעלן מחומם מוזרק לעור האמה של יד ימין. בייצור המוני III. ר. מומלץ להחזיק שני רופאים בו-זמנית - אחד מזריק את הפעיל, השני רעלן מחומם. 4. ספירת ש. הוא נעשה פעמיים: תוך 24 שעות לחשבון תגובות שווא וב-96 שעות כאשר ש. מגיע לשיא. מוּאָר.: Zdrodovsky P., בעיות מודרניות של מניעת דיפתריה ספציפית, Arkh. ביול. Sciences, כרך XXXV, ser. אה, כרך. 2, 1934; Doull J., גורמים המשפיעים על הפצה סלקטיבית tn diphtheria, Journ. ol prevent, med., v. IV, 1930; Frost W., Infection, Immunity and disease in epidemiology of diphtheria, Ibid., v. ב', 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphterie chez les suits a reaction de Schick negative, Compt. רנד, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxin-antitoxin immunization against diphtheria, Journ. אמר. med. אס., v. LXXIX, עמ'. 1584, 1922; Rosling E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick B., Die Diphtherietoxin- Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, No. 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hung der Pseudore-hung der Pseudore-aktion der Pseudoreaktion. Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., ​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L "intradermo-reaction al "anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. See also light. to Art. קדחת השנית. ג' אורלוב.

שיטות ציטוכימיותלרדוף אחר זיהוי חומרים כימיים ואנזימטיים בתאים, תוך שימוש בתגובות צבע לשם כך. ציטוכימיקלים לשמור מבנה התא, המאפשר זיהוי תאים ולוקליזציה תוך תאית של התרכובת הנחקרת. לכן בהמטולוגיה העדפה לא לביוכימית, עמלנית, להרס המבנה התאי של אוכלוסיית תאים הטרוגנית מאוד, אלא לשיטות ציטוכימיות.

ציטוכימיההוכיח שבין תאים זהים מבחינה מורפולוגית ישנם הבדלים כימיים ואנזימטיים משמעותיים.

גליקוגן (תגובת CHIC) (PAS) - הוצ'קיס - שיטת מק מינוס

עקרון שיק. פוליסכרידים מתגלים על ידי תגובה שמחמצנת קבוצות אלכוהול, המומרות לקבוצות אלדהיד, והאחרונות מזוהות על ידי תגובת צבע עם ריאגנט שיף.

ריאגנטים לתגובת PAS: 1. תערובת קיבוע אלכוהול-פורמלין: 9 חלקים מוחלטים אלכוהול אתילי+1 חלק 40% פורמלין; לשמור על +4°.

2. חומצה מחזורית, 1% פתרון מים. הפתרון חסר צבע. אחסן בבקבוק זכוכית חום בחושך בטמפרטורת מעבדה. התמיסה המוצהבת אינה ישימה.

3. ריאגנט של שיף. מדללים 1 גרם פוקסין בסיסי ב-200 מ"ל מים מזוקקים בנקודת רתיחה. לנער במשך 5 דקות, לצנן לטמפרטורה של 50 מעלות, לסנן ולהוסיף 20 מ"ל של חומצה הידרוכלורית רגילה. מצננים ל-25°, מוסיפים 2 גרם נתרן או אשלגן מטביסולפיט, המספקים לחלוטין את הפתרון. התמיסה צריכה לעמוד במשך יום בחושך וקור (+4 מעלות). לאחר מכן הוסף 2 גרם פחמן פעיל, צ'אט 1 דקה. ולסנן.
התסנין המתקבל צלול וחסר צבע. מותר גוון צהבהב מעט; אם התמיסה הופכת לוורודה, היא הופכת לבלתי ישימה. אחסן ב-+4 מעלות צלזיוס בבקבוק זכוכית חום סגור הרמטית.

4. אור ירוק -1% תמיסה מימית.

5. דיסטזיס: רוק אנושי לא נוזלי או תמיסה של 0.1% של אנזים עמילוליטי-דיאסטטי בתמיסת מלח פיזיולוגית.

טכניקת תגובת שיק

1) 10 דקות קיבוע של מריחות עם תערובת של אלכוהול-פורמלין; שטיפה במים מזוקקים;
2) חמצון עם תמיסת חומצה מחזורית 1%, 10 דקות; שטיפה במים מזוקקים;
3) צביעה עם ריאגנט של שיף בכלי מכוסה, בתנאי חושך וקרים, למשך שעתיים; כביסה במים זורמים;
4) צבע נגד 1% אור ירוק למשך דקה אחת; שטיפה במים זורמים.

הפקד הוצמד מריחהנתון לדגירת דיסטזיס, 60 דקות. בטמפרטורת החדר להסרה סלקטיבית של גליקוגן. לאחר שטיפה במים מזוקקים, הוא מעובד על פי השיטה הרגילה.

הערכת תוצאות תגובת PAS

גליקוגןצבוע בארגמן צבע אדום, מופיע כגרגרים או מפוזרים. כדי לשלוט על התגובה, משתמשים בגרנולוציטים בוגרים של מריחה. מעבר לגליקוגן CHIC תגובה חיוביתלתת חומרים אחרים בעלי אופי פחמימתי, כגון מוצין, מוקופרוטאינים, מוחין, פיברין. הגליקוגן מובחן ממרכיבים אלו על ידי טיפול מקדים בדיאסטז, שלאחריו הגליקוגן אינו מוכתם עוד.

IN גרנולוציטיםהגליקוגן כבר מתפזר בשלב הפרומיאלוציטים ומתחיל לעלות עם התבגרותו. בתנאים רגילים, לימפוציטים הם שליליים, או ש-20% מהם עשויים להכיל כמה גרגירים קטנים של גליקוגן. מונוציטים שליליים או בעלי גרנולריות עדינה.

עָצמָה גִוּוּןנקבע באופן חצי כמותי. בתגובה, CHIC משתקף בצורה של אינדקס גליקוגן, או אינדקס התגובה הממוצע (אסטלדי). נוֹרמָלִיהגליקוגן נע בין 0.10 ל-0.30. בדרך כלל, רק לימפוציטים פתולוגיים יש דרגת עומס של יותר מ-3.

זה היה רשום כשיטת התגובה של שיק:
א) בעת הגדרה אבחנה מבדלתסוגים ציטולוגיים בודדים של לוקמיה חריפה:
- מיאלובלסטים ופרומיאלואיטיס הם PAS שליליים או מקבלים צבע מפוזר חלש. גופי אור נותנים תגובה חיובית, אשר נחלשת לאחר עיכול עם רוק.
- לימפובלסטים בלוקמיה חריפה ולימפוסרקומה נותנים תגובה חדה ל-PAS חיובית בצורת גרגרים או בלוקים גדולים של גליקוגן.
- אריתרובלסטים באריתרמיה ואריתרולוקמיה חריפה נותנים תגובה חיובית מפוזרת או גרגירית, בניגוד לאריתרובלסטים רגילים, שהם PAS שליליים;
- תקיעות מונוציטואידיות חיוביות באופן לא עקבי חלש, עם גרנולריות עדינה.

ב) לצורך אבחון ומעקב אחר יעילות הטיפול בלוקמיה לימפטית כרונית: רמת גליקוגן מוגברת מצביעה על צורה חמורה של המחלה ועל פרוגנוזה לקויה.
צמיחת גליקוגןבלימפוציטים פתולוגיים, תופעה שאינה אופיינית ללוקמיה, היא מוסברת על ידי עלייה בפעילות המטבולית בכל סוג של ריבוי לימפואידי.

ג) להבדיל בין תאי גושה למקרופאגים אחרים עם הצטברות.