Dijagnoza HIV infekcije neophodna je za propisivanje učinkovitog liječenja. Za dijagnosticiranje AIDS-a provodi se standardni postupak pregledi pacijenata. Sastoji se od 2 faze:

• prolazak skrininga;
• imunobloting.

Za postavljanje dijagnoze dodatno se propisuje PCR i brzo testiranje.

Provođenje ELISA

Početna dijagnoza AIDS-a temelji se na korištenju laboratorijskih proteina HIV-a koje hvataju specifična antitijela. Nakon njihovog kontakta s enzimima testnog sustava, mijenja se boja indikatora. Zatim se promijenjena shema boja obrađuje pomoću posebne opreme, koja određuje rezultat ispitivanja.

Takva laboratorijska dijagnoza HIV infekcije pokazuje rezultate 21 dan nakon infekcije. ELISA ne može utvrditi prisutnost virusa. Ova metoda dijagnostika pomaže u otkrivanju proizvodnje antitijela na virus. Sličan proces može se promatrati 2-6 tjedana nakon infekcije.

Stručnjaci razlikuju 4 generacije ELISA sustava s različitim osjetljivostima. Liječnici češće koriste testove 3. i 4. generacije. Ti se sustavi temelje na rekombinantnim proteinima ili peptidima sintetskog porijekla, koji imaju značajnu točnost i specifičnost. ELISA se koristi za otkrivanje i praćenje širenja virusa, što osigurava sigurnost pri testiranju darovane krvi. Točnost takvih sustava kreće se od 93-99%. Testovi objavljeni u Zapadna Europa. Za provođenje dijagnostike laboratorijski tehničar vadi vensku krv (5 ml). Preporuča se suzdržati se od jela 8 sati prije testa. Studija se često provodi ujutro.

Dešifriranje podataka

Bit će potrebno 10 dana da se dobiju rezultati testa. Ako je rezultat negativan, tada pacijent nije zaražen. U ovom slučaju liječenje nije propisano. Otkriven je lažno negativan rezultat:

• do 3 tjedna nakon infekcije;
• na posljednja faza AIDS s niskim imunološkim sustavom;
• zbog nepravilne pripreme krvi.

Ako je rezultat pozitivan, tada je pacijent zaražen. U ovom slučaju provodi se informacijska sigurnost. lažno pozitivan rezultat ukazuje na prisutnost popratnih bolesti i nepravilnu pripremu krvi. Ako je testiranje indicirano za trudnice, tada u prikupljenom materijalu liječnik može identificirati nespecifična protutijela čija proizvodnja nije povezana s virusom. Prikupljeni materijal se ispituje u referentnom ili arbitražnom laboratoriju. Ako je rezultat ponovnog testa negativan, tada je prvi rezultat pogrešan. U tom se slučaju informacijska sigurnost ne provodi.

Provođenje imunoblotinga

Liječenje AIDS-a propisuje se kada se dobije pozitivan rezultat imunobloting. Ova dijagnostička metoda provodi se pomoću nitrocelulozne trake na koju se apliciraju virusni proteini. Za IB se koristi venska krv koja se zatim obrađuje. Proteini koji se nalaze u sirutki podijeljeni su u skupine na temelju njihove napunjenosti i Molekularna težina. Za izvođenje ovog postupka koristi se posebna oprema.

Ako u ispitivanom materijalu postoje protutijela na virus, na traci se pojavljuju odgovarajuće linije. Pozitivan IB ukazuje da je pacijent zaražen HIV-om. Upitan rezultat otkriva se u početnim fazama infekcije, s tuberkulozom i onkologijom, te kod trudnica. U takvim slučajevima preporučuje se ponavljanje IS.

Neodređeni IB rezultat ukazuje na prisutnost jednog ili više proteina virusa u imunoblotu. Slična se slika opaža s nedavnom infekcijom, kada postoji mala količina protutijela na infekciju u krvi. U tom će slučaju sigurnost informacija nakon nekog vremena biti pozitivna. Nesiguran rezultat ove studije mogao bi biti posljedica odsutnosti HIV infekcije kod hepatitisa, kroničnih metaboličkih bolesti i tijekom trudnoće. U tom će slučaju IB postati negativan ili će stručnjaci identificirati uzrok nesigurnog rezultata kod pacijenta.

PCR istraživanje

Obrambeni sustav je pogođen zbog unošenja virusa u ljudsko tijelo. Za trajanje inkubacije tipično razdoblje od 3 mjeseca. Stoga se nakon seksualnog kontakta s partnerom zaraženim HIV-om preporučuje proći PCR dijagnostiku. Omogućit će vam određivanje RNA virusa. Razdoblje tijekom kojeg se preporučuje proći takvu studiju je 8-24 mjeseca.

Za konačna dijagnoza Indicirano je redovito davanje krvi za HIV (jednom svaka 3 mjeseca). Zbog visoke osjetljivosti ovaj pregled omogućuje otkrivanje virusa 10 dana nakon infekcije. Lažno pozitivan rezultat s PCR-om također se može dobiti ako postoji druga infekcija u tijelu pacijenta. PCR istraživanje Smatra se skupim zahvatom jer zahtijeva posebnu opremu.

PCR je propisan za otkrivanje virusa kod sljedećih osoba:

• novorođenče rođeno od majke zaražene HIV-om;
• bolesnika sa sumnjivim IB-om.

Ova tehnika također je indicirana za praćenje koncentracije virusa u krvi i testiranje krvi davatelja.

Brze metode istraživanja

DO modernim metodama Stručnjaci se pozivaju na brze testove za dijagnosticiranje AIDS-a. Za njihovo dešifriranje trebat će 10-15 minuta. Imunokromatografski testovi temeljeni na kapilarnom protoku daju točne rezultate. Takvi sustavi za testiranje predstavljeni su u obliku posebnih traka na koje se nanosi krv ili slina. Ako je virus prisutan, nakon 10 minuta na testu se pojavljuju 2 trake:

• kontrolirati;
• obojen.

U ovom slučaju, rezultat testa je pozitivan karakter. Negativan rezultat označava pojava jedne kontrolne linije. Za potvrdu dobivenog rezultata provodi se zaštita informacija. Na temelju općih podataka, liječnik postavlja dijagnozu i propisuje liječenje.

Virus možete otkriti kod kuće. U tu svrhu koriste se posebni ekspresni setovi. OraSure Technologies1 je sustav razvijen u SAD-u. Ako se nakon testiranja utvrdi pozitivan rezultat, pacijentu se savjetuje da se podvrgne puni pregled u medicinskom centru.

Pregled djeteta

Novorođenčad rođena od zaraženih majki hitno se pregledava. Serološkim tehnikama nije moguće točno otkriti virus kod djece u dobi od 5-18 mjeseci. Ali rezultat takve ankete važan je pri provođenju informacijske sigurnosti.

Infekcija kod djece može se otkriti pomoću PCR-a. DNK virusa otkriva specijalist kod djece u prvom mjesecu života. Da bi se odredila koncentracija RNA patogena, stručnjaci određuju provirus virusa imunodeficijencije. Za studiju liječnik koristi punu krv ili mrlju osušene krvi. Materijal se stavlja u epruvetu s EDTA konzervansom (omjer 1:20). Uzorak se mora čuvati na temperaturi ne višoj od 8°C (2 dana). Zamrzavanje materijala nije dopušteno.

Da bi se dobio uzorak osušene krvi, cijela tekućina se nanosi na poseban papir. Uzorak se može čuvati na temperaturama ispod 8°C. Kartice se koriste 8 mjeseci. Novorođenče se mora pregledati uz uzimanje materijala za pregled u sljedećim rokovima:

• 48 sati nakon rođenja;
• u dobi od 2 mjeseca nakon rođenja;
• 3-6 mjeseci nakon rođenja.

Ako je liječnik identificirao gen provirusa HIV-a nekoliko sati nakon rođenja djeteta, tada je beba zaražena in utero. Virusom se možete zaraziti tijekom poroda ili dojenje. Rezultati koji ukazuju na prisutnost virusne DNA u 2 uzorka ukazuju na razvoj AIDS-a kod djeteta. Dispanzersko promatranje nije potrebno ako su PCR rezultati negativni 4 mjeseca nakon rođenja djeteta.

Ako je rezultat testa negativan, ali su prisutni simptomi AIDS-a, preporuča se konzultirati liječnika. Takvu kliniku mogu izazvati i druge bolesti. Testiranje se smatra jedinom i stopostotnom metodom dijagnosticiranja virusa. Čak ni kvalificirani i iskusni stručnjaci ne mogu prepoznati virus prema njegovim simptomima.

Ako nakon nekog vremena rezultati pacijenta budu negativni, tada u tijelu nema HIV-a.

Ovo ne uzima u obzir simptome. Ali slično klinička slika može biti povezano s fobijom od AIDS-a. U ovom slučaju potrebna je pomoć psihologa. Ako je potrebno, djetetu ili odrasloj osobi propisano je odgovarajuće liječenje.

Odlučujuću ulogu u dijagnosticiranju HIV infekcije ima laboratorijska dijagnostika koja se sastoji od otkrivanja antitijela na HIV u krvi ELISA metodom, nakon čega slijedi potvrda pozitivnih rezultata IB metodom. Ova metoda dijagnosticiranja HIV infekcije omogućuje identifikaciju osoba zaraženih HIV-om s 99% učinkovitosti.

Indikacije za korištenje različitih laboratorijskih testova i značajke tumačenja rezultata

Trenutno se treća i četvrta generacija kompleta reagensa koji se temelje na ELISA metodi koriste za fazu probira dijagnoze HIV infekcije. Posebnost Testovi četvrte generacije mogu istovremeno detektirati hipertenziju (p24) i ukupna antitijela, dok testovi treće generacije omogućuju određivanje samo antitijela. Gdje je to moguće, prednost treba dati ispitivanjima četvrte generacije zbog njihove veće vrijednosti dijagnostička osjetljivost i sposobnost otkrivanja infekcije kod pojedinaca tijekom serološkog prozora.

Negativan rezultat pri otkrivanju antitijela na HIV metoda ELISA ne pokazuje uvijek odsutnost infekcije. Ozbiljan problem predstavljaju one slučajeve kada je test proveden tijekom serološkog prozora, tj. u prvim tjednima nakon infekcije, kada još nisu razvijene dovoljne količine antitijela na HIV. Za neke se osobe serološki prozor može produžiti na nekoliko mjeseci, pa ako postoje dokazi o izloženosti nekome zaraženom HIV-om, ponovno testiranje obično se provodi nakon 2-3 mjeseca. Lažno negativni rezultati otkrivanja antitijela na HIV pomoću ELISA-e mogu se dobiti u terminalni stadij bolest koju karakteriziraju teška oštećenja imunološki sustav S duboko kršenje Proces formiranja AT.

Pozitivan rezultat otkrivanja AT pomoću ELISA-e ukazuje na vjerojatnost zaraze HIV-om, ali ponekad ovaj rezultat može biti lažno pozitivan, na primjer, ako osoba ima tumore, alergijske bolesti, tijekom trudnoće, tijekom autoimune bolesti, značajne promjene u pokazateljima biokemijska istraživanja krv, broj kronična bolest. U takvim slučajevima potrebna su dodatna istraživanja u stručnom laboratoriju.

U slučaju dobivanja pozitivnog rezultata otkrivanja protutijela na HIV ELISA-om, potrebna je njegova potvrda. U prvoj fazi potvrde, analiza se ponavlja u istom ispitnom sustavu u dvije bušotine - time se eliminiraju tehničke pogreške. Ako je rezultat potvrđen, ponavlja se određivanje AT ELISA testom u serumu pacijenta uz korištenje dva referentna seta reagensa. Ako se barem jednom od ovih studija dobije pozitivan rezultat, pristupa se trećoj fazi potvrde: IB studiji, koja omogućuje otkrivanje protutijela na pojedinačne proteine ​​HIV antigena.

Rezultati dobiveni metodom informacijske sigurnosti tumače se kao pozitivni, dvojbeni i negativni. Rezultati se smatraju negativnima ako testni serum ne sadrži antitijela na bilo koji od antigena HIV-a ili postoji slaba reakcija s proteinom p17. Najuvjerljiviji razlog za pozitivna reakcija je dokazivanje antitijela na proteine ​​ovojnice HIV-a (glikoproteini gp41, gp120, gp160). Rezultat se smatra pozitivnim ako se otkriju protutijela na bilo koja dva HIV glikoproteina. Ako postoji reakcija samo s jednim od proteina ovojnice, u kombinaciji s ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra sumnjivim, u kojem slučaju se preporuča provesti testove za otkrivanje p24 antigena ili HIV DNA/RNA. Ako se otkrije antigen p24 ili DNA/RNA HIV-a, ponovni pregled pomoću IB-a provodi se 2 tjedna nakon primitka prvog neodređenog rezultata, a zatim svaka 2 tjedna dok se ne dobije pozitivan rezultat potvrdnog testa. Ako se nakon 6 mjeseci od prvog pregleda ponovno dobiju neodređeni rezultati, a pacijent nema identificirane čimbenike rizika za infekciju i klinički simptomi HIV infekcija, rezultat se smatra lažno pozitivnim.

Često se nakon 1-3-6 mjeseci od trenutka dobivanja upitnog rezultata u krvnom serumu pojavljuju protutijela na sve HIV Age jedno za drugim. U ovom slučaju, dvojbeni rezultat je dokaz početno stanje HIV infekcije. U nekim slučajevima, upitni rezultati IB-a opaženi su kod neinficiranih osoba čija tijela sadrže antitijela slična pravim antitijelima na HIV.

Jedan od neizravnih znakova HIV infekcije je selektivno smanjenje CD4+ T pomoćnih stanica zbog činjenice da HIV ima tropizam za CD4 stanični receptor. Međutim, te promjene mogu izostati u određenim stadijima HIV infekcije, imati individualne varijacije u različitih pacijenata, a također se mogu pojaviti i kod drugih bolesti. Tako kod odraslih bolesnika u latentnom stadiju bolesti broj CD4+ limfocita obično prelazi 0,5. 109/l, što odgovara vrijednostima kod zdravih ljudi.

Dijagnoza HIV infekcije može se postaviti u laboratoriju otkrivanjem specifičnih antitijela na virus. S mnogim drugima virusne bolesti prisutnost protutijela ukazuje na infekciju u prošlosti. Međutim, budući da se HIV infekcija razvija kronična infekcija, seropozitivne osobe nisu samo aktivno zaražene, već su i zarazne.

Serološki test za utvrđivanje prisutnosti protutijela na HIV postao je široko dostupan 1985. Najčešće korištena metoda je enzimski imunoanaliza (ELISA), ali razvijaju se i druge vrste testova na antitijela, kao što su testovi temeljeni na aglutinaciji čestica i "točkasta" ELISA. Testovi se mogu izvesti brzo i jednostavno i ne zahtijevaju složenu opremu.

Iako su gornji testovi u visok stupanj osjetljivi, mogu dati i lažne rezultate, a pozitivan rezultat potrebno je dodatno potvrditi dodatnim testom poput imunoblotinga (Western blot) ili neizravne imunofluorescencije.

Također je moguće izravno detektirati HIV antigene (virus ili virusni protein) u sjemenu; industrija proizvodi potrebne setove reagensi. Ovi su testovi izvorno razvijeni kao pokušaj pružanja laboratorijskog pokazatelja prisutnosti infekcije tijekom razdoblja između infekcije i proizvodnje protutijela, koje obično traje od 4 do 16 tjedana. Testovi za otkrivanje antigena sada se sve više koriste za praćenje rezultata antivirusno liječenje oboljelih od AIDS-a.

Programi probira za HIV infekciju (tj. probir za cijelu populaciju, ili odvojene skupine populacije kako bi se utvrdila infekcija ili prisutnost bolesti) može pomoći:

• spriječiti prijenos virusa krvlju i krvnim pripravcima, sjemenom, tkivom ili transplantacijom organa;
• dobiti epidemiološke podatke o prevalenciji i učestalosti HIV-a.

Kad god se raspravlja o programu probira, sva pitanja identificirana u izjavi SZO (Dodatak 4) trebaju biti jasno navedena i obrađena. Loše osmišljeni i loše provedeni programi mogu naštetiti javnom zdravlju i rasipati resurse. Ispunjavanje potreba javnog zdravlja i poštivanje ljudskih prava najbolje se osigurava pomnim razmatranjem niza tehnoloških, logističkih, društvenih, pravnih i etičkih pitanja prije donošenja odluke o nastavku programa probira.

Obavezni probir na HIV ima vrlo ograničenu ulogu u programima prevencije i kontrole AIDS-a.

Rutinski probir davatelja pomaže u sprječavanju prijenosa HIV-a putem krvi, sjemena ili drugih stanica, tkiva i organa. Dio takvog pregleda uključuje informirani pristanak pojedinca i konzultacije u kojima se mora osigurati povjerljivost.

Identifikacija seropozitivnih osoba putem probira može odrediti epidemiološki tip HIV-a, što je neophodno za procjenu područja i populacije kojima su potrebni posebni obrazovni programi ili druge preventivne usluge. Ta se istraživanja trebaju provoditi metodama koje ne ugrožavaju ljudska prava. Trebaju se provesti tijekom konzultacija, bilo uz pristanak informirane osobe, uz očuvanje povjerljivosti, ili na anoniman, besplatan način (bez bilježenja drugih osobnih podataka).

Dobrovoljno testiranje na AIDS može biti dio zdravstvene skrbi za sumnju na bolesti povezane s HIV-om i može se provoditi zajedno s informacijama, obrazovanjem, savjetovanjem i drugim uslugama podrške za promicanje održive promjene ponašanja. Kod dobrovoljnog testiranja na HIV vrlo je važan pristanak informirane osobe i mogućnost savjetovanja uz očuvanje povjerljivosti. Usluge dobrovoljnog testiranja na HIV trebale bi biti široko dostupne kao dio programa prevencije i kontrole AIDS-a, a pristup takvim uslugama trebao bi biti olakšan.