Norint paskirti veiksmingą gydymą, būtina diagnozuoti ŽIV infekciją. Siekiant diagnozuoti AIDS, jis atliekamas standartinė procedūra pacientų tyrimai. Jį sudaro 2 etapai:

• išlaikyti atranką;
• imunoblotingas.

Diagnozei nustatyti papildomai skiriamas PGR ir greitasis tyrimas.

ELISA atlikimas

Pradinė AIDS diagnozė grindžiama laboratorinių ŽIV baltymų, kuriuos užfiksuoja specifiniai antikūnai, naudojimu. Po jų sąlyčio su tiriamosios sistemos fermentais indikatoriaus spalva pasikeičia. Tada pasikeitusi spalvų gama apdorojama specialia įranga, kuri ir lemia tyrimo rezultatą.

Tokia laboratorinė ŽIV infekcijos diagnostika parodo rezultatus praėjus 21 dienai po užsikrėtimo. ELISA negali nustatyti viruso buvimo. Šis metodas diagnostika padeda nustatyti antikūnų prieš virusą gamybą. Panašus procesas gali būti stebimas praėjus 2-6 savaitėms po užsikrėtimo.

Ekspertai išskiria 4 skirtingo jautrumo ELISA sistemų kartas. Gydytojai dažniau taiko 3 ir 4 kartos testus. Šios sistemos yra pagrįstos rekombinantiniais baltymais arba peptidais sintetinės kilmės, kurios turi didelį tikslumą ir specifiškumą. Viruso plitimui nustatyti ir stebėti naudojama ELISA, kuri užtikrina saugumą tiriant paaukotą kraują. Tokių sistemų tikslumas svyruoja nuo 93-99%. Testai išleisti Vakarų Europa. Diagnostikai atlikti laborantas paima veninį kraują (5 ml). 8 valandas prieš tyrimą rekomenduojama susilaikyti nuo valgymo. Tyrimas dažnai atliekamas ryte.

Duomenų iššifravimas

Bandymo rezultatams gauti prireiks 10 dienų. Jei rezultatas yra neigiamas, pacientas nėra užsikrėtęs. Tokiu atveju gydymas neskiriamas. Aptiktas klaidingas neigiamas rezultatas:

• iki 3 savaičių po užsikrėtimo;
• įjungta paskutinis etapas AIDS su susilpnėjusia imunine sistema;
• dėl netinkamo kraujo paruošimo.

Jei rezultatas yra teigiamas, pacientas yra užsikrėtęs. Šiuo atveju vykdomas informacijos saugumas. Netiesa teigiamas rezultatas rodo gretutinių ligų buvimą ir netinkamą kraujo paruošimą. Jei tyrimas yra skirtas nėščioms moterims, tada surinktoje medžiagoje gydytojas gali nustatyti nespecifinius antikūnus, kurių gamyba nesusijusi su virusu. Surinkta medžiaga tiriama etaloninėje arba arbitražo laboratorijoje. Jei pakartotinio tyrimo rezultatas yra neigiamas, pirmasis rezultatas yra klaidingas. Šiuo atveju informacijos saugumas nėra vykdomas.

Imunoblotingo atlikimas

AIDS gydymas skiriamas gavus teigiamą rezultatą imunoblotingas. Šis diagnostikos metodas atliekamas naudojant nitroceliuliozės juostelę, ant kurios uždedami virusiniai baltymai. IB atveju naudojamas veninis kraujas, kuris vėliau apdorojamas. Išrūgose esantys baltymai skirstomi į grupes pagal jų krūvį ir molekulinė masė. Šiam procesui atlikti naudojama speciali įranga.

Jei tiriamojoje medžiagoje yra viruso antikūnų, juostelėje atsiranda atitinkamos linijos. Teigiamas IB rodo, kad pacientas yra užsikrėtęs ŽIV. Abejotinas rezultatas nustatomas pradinėse infekcijos stadijose, sergant tuberkulioze ir onkologija bei nėščioms moterims. Tokiais atvejais rekomenduojama kartoti IS.

Neapibrėžtas IB rezultatas rodo, kad imunoblote yra vienas ar keli viruso baltymai. Panašus vaizdas stebimas ir neseniai užsikrėtus, kai kraujyje yra nedidelis kiekis antikūnų prieš infekciją. Tokiu atveju informacijos saugumas po kurio laiko bus teigiamas. Neaiškus šio tyrimo rezultatas gali būti dėl ŽIV infekcijos nebuvimo sergant hepatitu, lėtinėmis medžiagų apykaitos ligomis ir nėštumo metu. Tokiu atveju IB taps neigiama arba specialistai nustatys neaiškaus paciento rezultato priežastį.

PGR tyrimas

Apsaugos sistema yra paveikta dėl viruso patekimo į Žmogaus kūnas. Dėl inkubacinis periodasįprastas 3 mėnesių laikotarpis. Todėl po lytinių santykių su ŽIV užsikrėtusiu partneriu rekomenduojama atlikti PGR diagnostiką. Tai leis jums nustatyti viruso RNR. Laikotarpis, per kurį rekomenduojama atlikti tokį tyrimą, yra 8-24 mėnesiai.

Dėl galutinė diagnozė Nurodyta reguliariai duoti kraujo ŽIV (kartą per 3 mėnesius). Dėl didelio jautrumo ši ekspertizė leidžia aptikti virusą praėjus 10 dienų po užsikrėtimo. Klaidingai teigiamas PGR rezultatas taip pat gali būti gautas, jei paciento kūne yra kita infekcija. PGR tyrimas Tai laikoma brangia procedūra, nes jai reikalinga speciali įranga.

PGR paskiriamas virusui aptikti šiems asmenims:

• naujagimis, gimęs iš ŽIV infekuotos motinos;
• pacientams, sergantiems abejotinu IB.

Šis metodas taip pat skirtas stebėti viruso koncentraciją kraujyje ir tirti donoro kraują.

Greiti tyrimo metodai

KAM šiuolaikiniai metodai Ekspertai remiasi greitaisiais AIDS diagnozavimo testais. Jas iššifruoti prireiks 10–15 minučių. Imunochromatografiniai tyrimai, pagrįsti kapiliarų srautu, suteikia tikslius rezultatus. Tokios tyrimo sistemos pateikiamos specialių juostelių pavidalu, ant kurių užtepamas kraujas arba seilės. Jei virusas yra, po 10 minučių ant testo atsiranda 2 juostelės:

• kontrolė;
• spalvotas.

Šiuo atveju testo rezultatas yra teigiamas charakteris. Neigiamas rezultatas rodomas vienos kontrolinės linijos atsiradimu. Gautam rezultatui patvirtinti atliekamas informacijos saugumas. Remdamasis bendrais duomenimis, gydytojas nustato diagnozę ir nurodo gydymą.

Virusą galite aptikti namuose. Tam naudojami specialūs greitieji rinkiniai. OraSure Technologies1 yra JAV sukurta sistema. Jei po tyrimo randamas teigiamas rezultatas, pacientui rekomenduojama atlikti tyrimą pilnas tyrimas medicinos centre.

Vaiko apžiūra

Naujagimiai, gimę iš užsikrėtusių motinų, yra skubiai apžiūrimi. Serologiniai metodai negali tiksliai nustatyti viruso 5–18 mėnesių vaikams. Tačiau tokios apklausos rezultatas yra svarbus vykdant informacijos saugumą.

Vaikų infekciją galima nustatyti naudojant PGR. Viruso DNR specialistas nustato vaikams pirmąjį gyvenimo mėnesį. Norėdami nustatyti patogeno RNR koncentraciją, specialistai nustato imunodeficito viruso provirusą. Tyrimui gydytojas naudoja visą kraują arba išdžiovintą kraujo dėmę. Medžiaga dedama į mėgintuvėlį su EDTA konservantu (proporcija 1:20). Mėginys turi būti laikomas ne aukštesnėje kaip 8°C temperatūroje (2 paras). Medžiagos užšalimas neleidžiamas.

Norint gauti išdžiovinto kraujo mėginį, visas skystis užpilamas ant specialaus popieriaus. Mėginį galima laikyti žemesnėje nei 8°C temperatūroje. Kortelės naudojamos 8 mėnesius. Naujagimis turi būti ištirtas, paimant medžiagą tyrimui, per šiuos laikotarpius:

• 48 valandos po gimimo;
• sulaukus 2 mėnesių po gimimo;
• 3-6 mėn po gimdymo.

Jei gydytojas nustatė ŽIV proviruso geną praėjus kelioms valandoms po kūdikio gimimo, tada kūdikis buvo užsikrėtęs gimdoje. Virusu galite užsikrėsti gimdymo metu arba žindymas. Rezultatai, rodantys viruso DNR buvimą 2 mėginiuose, rodo, kad vaikui išsivystė AIDS. Ambulatorinis stebėjimas Nereikalaujama, jei PGR rezultatai neigiami praėjus 4 mėnesiams po kūdikio gimimo.

Jei tyrimo rezultatas neigiamas, tačiau yra AIDS simptomų, rekomenduojama kreiptis į gydytoją. Tokią kliniką gali išprovokuoti ir kitos ligos. Tyrimas laikomas vieninteliu ir 100% viruso diagnozavimo metodu. Net kvalifikuoti ir patyrę specialistai negali atpažinti viruso pagal jo simptomus.

Jei po kurio laiko paciento rezultatai yra neigiami, tai reiškia, kad ŽIV organizme nėra.

Tai neatsižvelgia į simptomus. Bet panašiai klinikinis vaizdas gali būti susijęs su AIDS fobija. Tokiu atveju reikalinga psichologo pagalba. Jei reikia, vaikui ar suaugusiajam skiriamas tinkamas gydymas.

Diagnozuojant ŽIV infekciją lemiamą vaidmenį atlieka laboratorinė diagnostika, kurią sudaro antikūnų prieš ŽIV nustatymas kraujyje ELISA metodu, o po to teigiamų rezultatų patvirtinimas IB metodu. Šis ŽIV infekcijos diagnozavimo metodas leidžia 99% efektyvumu nustatyti ŽIV užsikrėtusius asmenis.

Įvairių laboratorinių tyrimų naudojimo indikacijos ir rezultatų interpretavimo ypatybės

Šiuo metu ŽIV infekcijos diagnostikos atrankos etape naudojami trečios ir ketvirtos kartos reagentų rinkiniai, pagrįsti ELISA metodu. Išskirtinis bruožas Ketvirtosios kartos testai gali vienu metu aptikti hipertenziją (p24) ir bendrą antikūnų kiekį, o trečios kartos testai leidžia nustatyti tik antikūnus. Jei įmanoma, pirmenybė turėtų būti teikiama ketvirtos kartos bandymams, nes jie yra aukštesni diagnostinis jautrumas ir galimybė aptikti asmenų infekciją serologinio lango metu.

Neigiamas rezultatas aptikus antikūnus prieš ŽIV metodas ELISA ne visada rodo infekcijos nebuvimą. Rimta problema reprezentuoti tuos atvejus, kai tyrimas buvo atliktas serologinio lango metu, t.y. pirmosiomis savaitėmis po užsikrėtimo, kai dar nėra sukurta pakankamai antikūnų prieš ŽIV. Kai kuriems asmenims serologinis langas gali pailgėti kelis mėnesius, todėl, jei yra požymių, kad buvo užsikrėtę ŽIV, pakartotinis tyrimas paprastai atliekamas po 2–3 mėnesių. Klaidingai neigiamus antikūnų prieš ŽIV rezultatus, naudojant ELISA, galima gauti terminalo stadija liga, kuriai būdingi dideli pažeidimai Imuninė sistema Su gilus pažeidimas AT formavimo procesas.

Teigiamas AT nustatymo rezultatas naudojant ELISA rodo tikimybę užsikrėsti ŽIV infekcija, tačiau kartais šis rezultatas gali būti klaidingai teigiamas, pavyzdžiui, jei žmogus turi navikų, alerginės ligos, nėštumo metu, per autoimuninės ligos, reikšmingi rodiklių pokyčiai biocheminiai tyrimai kraujas, skaičius lėtinės ligos. Tokiais atvejais reikalingi papildomi tyrimai ekspertinėje laboratorijoje.

Gavus teigiamą antikūnų prieš ŽIV aptikimo ELISA metodu rezultatą, būtina jį patvirtinti. Pirmajame patvirtinimo etape analizė pakartojama toje pačioje bandymo sistemoje dviejuose gręžiniuose – tai pašalina technines klaidas. Jei rezultatas pasitvirtina, AT nustatymas ELISA metodu paciento serume kartojamas naudojant du etaloninius reagentų rinkinius. Jei bent viename iš šių tyrimų gaunamas teigiamas rezultatas, imamasi trečiojo patvirtinimo etapo: IB tyrimas, leidžiantis aptikti antikūnus prieš atskirus ŽIV antigeno baltymus.

Informacijos saugumo metodu gauti rezultatai interpretuojami kaip teigiami, abejotini ir neigiami. Rezultatai laikomi neigiamais, jei tiriamajame serume nėra antikūnų prieš bet kurį ŽIV antigeną arba yra silpna reakcija su p17 baltymu. Įtikinamiausia priežastis teigiama reakcija yra antikūnų prieš ŽIV apvalkalo baltymus (glikoproteinai gp41, gp120, gp160) aptikimas. Rezultatas laikomas teigiamu, jei aptinkami antikūnai prieš bet kuriuos du ŽIV glikoproteinus. Jei yra reakcija tik su vienu apvalkalo baltymu, kartu su reakcija su kitais baltymais arba be jo, rezultatas laikomas abejotinu, tokiu atveju rekomenduojama atlikti tyrimus, siekiant nustatyti p24 antigeną arba ŽIV DNR/RNR. Jei aptinkamas p24 antigenas arba ŽIV DNR/RNR, pakartotinis tyrimas naudojant IB atliekamas praėjus 2 savaitėms nuo pirmojo neapibrėžto rezultato gavimo ir vėliau kas 2 savaites, kol bus gautas teigiamas patvirtinamojo tyrimo rezultatas. Jei praėjus 6 mėnesiams po pirmojo tyrimo vėl gaunami neapibrėžti rezultatai, o pacientas nenustato infekcijos rizikos veiksnių ir klinikiniai simptomaiŽIV infekcija, rezultatas laikomas klaidingai teigiamu.

Dažnai po 1–3–6 mėnesių nuo abejotino rezultato gavimo, vienas po kito kraujo serume atsiranda antikūnų prieš visus ŽIV Ag. Šiuo atveju abejotinas rezultatas yra įrodymas Pradinis etapasŽIV infekcijos. Kai kuriais atvejais abejotini IB rezultatai stebimi neužkrėstiems asmenims, kurių organizme yra antikūnų, panašių į tikrus antikūnus prieš ŽIV.

Vienas iš netiesioginių ŽIV infekcijos požymių yra selektyvus CD4+ T pagalbinių ląstelių sumažėjimas dėl to, kad ŽIV turi tropizmą CD4 ląstelių receptoriams. Tačiau šių pokyčių gali nebūti tam tikrose ŽIV infekcijos stadijose, gali būti individualių skirtumų skirtingiems pacientams, taip pat gali atsirasti sergant kitomis ligomis. Taigi suaugusiems pacientams latentinėje ligos stadijoje CD4+ limfocitų skaičius dažniausiai viršija 0,5. 109/l, o tai atitinka sveikų žmonių reikšmes.

ŽIV infekcijos diagnozę galima atlikti laboratorijoje, aptikus specifinius viruso antikūnus. Su daugeliu kitų virusinės ligos antikūnų buvimas rodo praeitą infekciją. Tačiau kadangi ŽIV infekcija išsivysto lėtinė infekcija, seropozityvūs asmenys yra ne tik aktyviai užsikrėtę, bet ir užkrečiami.

Serologinis tyrimas, skirtas nustatyti ŽIV antikūnų buvimą, tapo plačiai prieinamas 1985 m. Dažniausiai naudojamas metodas yra su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA), tačiau kuriami ir kitų tipų antikūnų tyrimai, pavyzdžiui, tyrimai, pagrįsti dalelių agliutinacija ir "taškinė" ELISA. Bandymus galima atlikti greitai ir paprastai, jiems nereikia sudėtingos įrangos.

Nors pirmiau minėti testai aukštas laipsnis jautrūs, jie taip pat gali duoti klaidingus rezultatus, o teigiamą rezultatą reikia toliau patvirtinti naudojant papildomą testą, pvz., imunoblotavimą (Western blot) arba netiesioginę imunofluorescenciją.

Taip pat galima tiesiogiai aptikti ŽIV antigenus (virusą ar viruso baltymą) spermoje; pramonė gamina reikalingi rinkiniai reagentai. Šie testai iš pradžių buvo sukurti kaip bandymas pateikti laboratorinį infekcijos buvimo rodiklį per laikotarpį nuo infekcijos iki antikūnų gamybos, kuris paprastai trunka nuo 4 iki 16 savaičių. Dabar rezultatams stebėti plačiau naudojami antigenų aptikimo tyrimai antivirusinis gydymas AIDS sergančių pacientų.

ŽIV infekcijos patikros programos (t. y. visos populiacijos patikra arba atskiros grupės populiacija, siekiant nustatyti infekciją ar ligos buvimą), gali padėti:

• užkirsti kelią viruso perdavimui per kraują ir kraujo produktus, spermą, audinius ar organus;
• gauti epidemiologinės informacijos apie ŽIV paplitimą ir sergamumą.

Aptariant atrankos programą, visos problemos, nurodytos PSO pareiškime (4 priedas), turi būti aiškiai išdėstytos ir į jas atsakyta. Prastai parengtos ir prastai įgyvendintos programos gali pakenkti visuomenės sveikatai ir eikvoti išteklius. Visuomenės sveikatos poreikių tenkinimas ir žmogaus teisių gerbimas geriausiai užtikrinamas atidžiai apsvarstant įvairius technologinius, logistinius, socialinius, teisinius ir etinius klausimus, prieš priimant sprendimą tęsti patikros programą.

Privalomas ŽIV patikros vaidmuo AIDS prevencijos ir kontrolės programose yra labai ribotas.

Įprasta donorų patikra padeda išvengti ŽIV perdavimo per kraują, spermą ar kitas ląsteles, audinius ir organus. Dalis tokio patikrinimo apima informuotą asmens sutikimą ir konsultacijas, kurių metu turi būti užtikrintas konfidencialumas.

Nustačius seropozityvius asmenis atliekant patikrą, galima nustatyti epidemiologinį ŽIV tipą, o tai būtina norint įvertinti sritis ir populiacijas, kurioms reikia specialių ugdymo programų ar kitų prevencinių paslaugų. Šios apklausos turėtų būti atliekamos taikant metodus, kurie nepažeidžia žmogaus teisių. Jie turėtų būti atliekami konsultacijos metu arba gavus informuoto asmens sutikimą, išlaikant konfidencialumą, arba anonimiškai, laisvai (neįrašant kitos asmenį identifikuojančios informacijos).

Savanoriškas AIDS patikrinimas gali būti sveikatos priežiūros, įtariamo su ŽIV susijusiomis ligomis, dalis ir gali būti vykdomas kartu su informavimo, švietimo, konsultavimo ir kitomis pagalbinėmis paslaugomis, skatinančiomis tvarų elgesio pasikeitimą. Savanoriško ŽIV testavimo metu labai svarbu gauti informuoto asmens sutikimą ir konsultuotis išlaikant konfidencialumą. Kaip AIDS prevencijos ir kontrolės programų dalis turėtų būti plačiai prieinamos savanoriškos ŽIV testavimo paslaugos, o prieiga prie tokių paslaugų turėtų būti palengvinta.