מבחן קומבס

בדיקת Coombs הישירה היא בדיקת אנטיגלובולינים (אגלוטינציה ג'ל, המאפשרת זיהוי של נוגדנים דו ערכיים מלאים), הקובעת נוגדנים מסוג IgG ואת מרכיב ה-C3 של המשלים על פני השטח של אריתרוציטים. בדרך כלל, לנוגדנים המתגלים בבדיקת Coombs ישירה יש ספציפיות רחבה שאינה קשורה לאנטיגן מבוסס היטב. בדיקה ישירה חיובית של Coombs מצביעה בבירור על כך שהמטופל עשה זאת אנמיה המוליטית, אם כי לא כל החולים עם בדיקת אנטיגלובולין ישירה חיובית סובלים ממצב זה. כ-10% מהחולים עם נוגדנים או רכיבים משלימים על קרום האריתרוציטים אינם ניתנים לזיהוי בבדיקת קומבס ישירה (בדיקה שלילית), אך עם זאת, הם סובלים מאנמיה המוליטית אוטואימונית. כדי להבהיר את הספציפיות של נוגדנים במקרים כאלה, נעשה שימוש בבדיקות עם elution שלהם. בדיקת Coombs הישירה, חיובית רק להשלמה, קשורה בדרך כלל לנוגדני IgM מסוג קר. במקרה הזה נוגדני IgMלא קיים על אריתרוציטים טמפרטורה בסיסיתגוּף. עם זאת, בשל העובדה שנוגדני IgM מקבעים באופן פעיל משלים, ומשלים נשאר על אריתרוציטים, בצורה זו של אנמיה המוליטית אוטואימונית (מחלת אגלוטינין קרה), בדיקת Coombs תהיה חיובית רק עבור משלים.

בדיקת Coombs הישירה היא חיובית באנמיה המוליטית אוטואימונית הנגרמת על ידי נוגדנים חמים, אנמיה של תרופות אוטואימוניות (בעת נטילת מתילדופה, עד 20% מהחולים מקבלים תגובה חיובית), סוג ספיחה של תרופות של אנמיה המוליטית, סוג אימונו-קומפלקס של אנמיה המוליטית (ה הבדיקה חיובית רק ל-C3), עם אנמיה המוליטית אוטואימונית הנגרמת מנוגדנים קרים - מחלת אגלוטינין קרה (הבדיקה חיובית רק ל-C3). עם המוגלובינוריה קר התקפי, בדיקת Coombs הישירה היא שלילית.
בתקופה החריפה של המחלה, עקב הרס של אריתרוציטים, שעליו מספר גדול שלנוגדנים, עם משבר המוליטי, כמו גם עם כמות לא מספקת של נוגדנים במהלך הכרוני של המחלה, עשויה להיות בדיקת Coombs שלילית ישירה.

:

• תנאי חשוב לאבטחת איכות מחקר מעבדהדם הוא לקיחת חומר על בטן ריקה, ב זמן בוקר(עד 12:00).
• 12 שעות לפני המחקר, עליך לא לכלול אלכוהול, עישון, אכילה, להגביל את הפעילות הגופנית.
• בבוקר ביום דגימת הדם למחקר, ניתן לשתות מים.
• לא לכלול תרופות; אם לא ניתן לבטל את התרופה, יש ליידע את המעבדה על כך.
• רצוי לקחת את החומר לפני כל מניפולציות אבחון רפואיות.
• כאשר מעריכים את רמת ההורמונים בנשים, חשוב לקחת בחשבון את היום מחזור חודשיכאשר עדיף לזהות הורמונים מסוימים. אתה יכול לקבל מידע זה מהרופא שלך.

אינדקס	מאפיין
מנתח ומערכת בדיקה	כרטיסי ג'ל; DiaMed AG (שוויץ)
ערכי התייחסות	תוצאה שלילית / תוצאה חיובית
גורמים מפריעים. תרופות
בדיקה חיובית אפשרית כאשר נוטלים את התרופות הבאות: פרצטמול, חומצה סליצילית, אמינופירין, אנטיהיסטמינים, carbromal, cephalosporins, chlorpromazine, chlorpropamide, cisplatin, clonidine, dipyrone, ethosuximide, fenfluramine, fuadine, hydralazine, hydrochlorothiazide, ibuprofen, אינסולין, isoniazid, levodopa, melphalanamic acid, mephlanamic acid, metyledongier, methylephenic acid, פניצילאמין, פניצילין אחרים , phenacetin, phenylbutazone, probenecid, procainamide, quinidine, quinine, rifampin, streptomycin, sulfonamides, sulfonylurea derivatives, tetracycline, triamterene, trimellitic anhydride
אינדיקציות לקביעת תורים
אבחון של אנמיה המוליטית חיסונית, מחלה המוליטיתיילודים, אנמיה המוליטית חיסונית הנגרמת על ידי תרופות, תגובות עירוי המוליטיות
פרשנות של תוצאות
בדרך כלל, מבחן Coombs הישיר הוא שלילי. בדיקת Coombs חיובית עבור: אנמיה המוליטית אוטואימונית; מחלה המוליטית של היילוד; אנמיה המוליטית חיסונית של תרופה; תגובות עירוי המוליטיות

העיקרון של אנטיגלובולין. נוגדנים אנטי-אריתרוציטים מסוג חלקי ומולקולות משלימות (C) הממוקמות על פני האריתרוציטים ניתנים לזיהוי - בדיקה ישירה - על ידי אגלוטינציה שלהם במגע עם סרום בעלי חיים המכיל נוגדנים לאנטיגלובולין אנושי (סרום אנטיגלובולין). נוגדנים לא שלמים חופשיים בנסיוב מתגלים - בדיקה עקיפה - על ידי קיבועם על תערובת של אריתרוציטים נורמליים מקבוצה 0, שכל האנטיגנים שלהם שייכים למערכת Rh ידועה, ואז נאגרים בהשפעת סרום אנטיגלובולינים.

חומרים, ריאגנטים לבדיקת אנטיגלובולין Coombs: צינורות 10/100 מ"ל; פיפטות מדורגות עבור 1.2 מ"ל; פיפטות פסטר; חצובות; נושא משקפיים לא מלוטשים; תמיסה של 8.5‰ NaCl; אריתרוציטים. אריתרוציטים של החולה, כמו גם אלה השייכים לקבוצה 0, יתקבלו מדם טרי שנלקח על חומר נוגד קרישה (תמיסת EDTA).

בחר אריתרוציטים מקבוצה 0 בצורה כזו שהם מגיעים מאנשים נורמליים ומכילים את כולם אנטיגנים של מערכת Rh. ניתן לאחסן אותם עד 7 ימים בפלזמה עצמית ב-+4°C. בהיעדר אריתרוציטים מקבוצה 0, פסיפס אנטיגני ידוע, ניתן להשתמש בתערובת של אריתרוציטים מקבוצה 0, אריתרוציטים Rh חיוביים ו-Rh שליליים.

נַסיוֹבהמטופל צריך להיבחר טרי.

סרום אנטיגלובוליןמיוצר על ידי המכון. Dr. I. Cantacuzino, זמין בצורה ליאופילית באמפולות המכילות 1 מ"ל. לאחר פירוק, יש לאחסן את הסרום ב-20 מעלות צלזיוס.

טכניקת בדיקת אנטיגלובולין של Coombs:
א) בדיקת קומבס ישירה: לשטוף את אריתרוציטים של המטופל 3 פעמים 8.5‰ תמיסת NaCl.
יש למרוח טיפה גדולה של דילול סרום אנטיגלובולין על מספר שקופיות, ולצדה טיפה קטנה של משקעי אריתרוציטים של המטופל; מערבבים טיפות אחר פינת זכוכית. השאר את החומר המוכן על השולחן למשך 5 דקות, ולאחר מכן בדוק את נוכחותם של agglutinates. אם חיובי, קבע את הטיטר המצטבר המרבי.

ב) מבחן Coombs עקיף: אריתרוציטים מקבוצה 0, Rh-חיוביים ו-Rh-שליליים, שטפו 3 פעמים בתמיסת 8.5‰ NaCl וחשפו לסרום המטופל בקצב של 2 טיפות אריתרוציטים לכל 8-10 טיפות סרום, לאחר מכן, למשך 60 דקות, דגירה בטמפרטורה של 37 מעלות עם. לאחר מכן יש לשטוף את האריתרוציטים שוב שלוש פעמים ולפעול עליהם בסרום אנטיגלובולין, בהתאם להוראות עבור מבחן ישירקומבס.

מתי אנחנו מדברים על נוגדנים פעילים קריםרגישות של אריתרוציטים של קבוצה 0 לבלות 60 דקות. בטמפרטורה של +4 מעלות צלזיוס.

הערה: 1) אין לבצע בדיקת Coombs ישירה לאריתרוציטים המאוחסנים במשך יום אחד או יותר בטמפרטורה של + 4 מעלות צלזיוס או בטמפרטורת החדר, מכיוון שהתוצאות עלולות להיות חיוביות כוזבות עקב קיבוע של נוגדנים לא מלאים, פעילים בקור. סרום רגיל. 2) במקרים של היפרפרוטינמיה חמורה יש לשטוף את האריתרוציטים 4-5 פעמים ולבדוק את היעדר חלבוני סרום בנוזל הכביסה האחרון באמצעות חומצה סולפוסיצילית.

שארית אפשרית של 2 מיקרוגרם IgG/mL במשקע האריתרוציטים עשויה לנטרל סרום אנטיגלובולין. ניתן לבצע את בדיקת Coombs גם באמצעות סרה מונוספציפית אנטי-IgG, -IgM, -IgA -C3 ו-C4 על מנת להבהיר את סוג הגלובולין על פני אריתרוציטים, למשל, אצל הסובלים מאנמיה המוליטית אוטואימונית.

מבחן קומבס- אנליזה לאיתור נוגדנים המחוברים למשטח או מומסים בפלזמה. בעזרתו מתגלים חיסון ונוגדנים לתאי דם אדומים. השם השני הוא בדיקת האנטיגלובולין. זה קורה ישיר ועקיף.

בְּ בדיקת אנטיגלובולין ישירהמזהה נוגדנים קבועים על פני השטח של אריתרוציטים. זה מתבצע עם חשד של, עם מחלות אוטואימוניות אחרות, לאחר נטילת תרופות (מתילדופה, פניצילין, כינין) ו.

האריתרוציטים עברו רגישות in vivo - נוגדנים כבר מחוברים אליהם בחוזקה, ותוספת של סרום אנטיגלובולין (אנטי-IgG) גורמת להיצמדות התאים הרגישים זה לזה, הנראית לעין בלתי מזוינת.

מבחן Coombs עקיףמזהה נוגדנים אנטי-אריתרוציטים בפלסמת הדם, הוא מבוצע לפני עירוי דם ובמהלכו.

נוגדנים נגד אריתרוציטים - סוג של נוגדנים עצמיים, כלומר. נוגדנים נגד הרקמות שלהם. נוגדן עצמי מתרחש בתגובתיות פתולוגית מערכת החיסוןתרופות מסוימות, כגון מינונים גבוהים של פניצילין.

אריתרוציטים על פני השטח שלהם מכילים שונים מבנים כימיים(גליקוליפידים, סכרידים, גליקופרוטאינים וחלבונים), ברפואה המכונה אנטיגנים. אדם יורש מהוריו מפה מסוימת של אנטיגנים על כל כדורית דם אדומה.

אנטיגנים משולבים לקבוצות ולצד זה מתחלק הדם למספר קבוצות - לפי מערכת AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. המפורסמים והמשמעותיים ביותר בעבודתו של רופא הם AB0 ו-Rh factor (Rh).

מערכת AB0

השתייכות Rh של אדם נקבעת על ידי נוכחותם של אנטיגנים אלה. אנטיגן אריתרוציטים חשוב במיוחד הוא אנטיגן D. אם הוא קיים, אז הם מדברים על דם Rh חיובי RhD, ואם לא - בערך Rh שלילי Rhd.

אם הנוגדן המתאים מצטרף לאנטיגנים של אריתרוציטים, אז האריתרוציט נהרס - יהיו המוליזה.

אינדיקציות

האינדיקציה העיקרית עבור ישירבדיקת אנטיגלובולין- חשד לאנמיה המוליטית. לרוב זה מתבצע עם אנמיה המוליטית אוטואימונית ראשונית, המוליזה עם ראומטי, גידול, מחלות מדבקותהמוליזה הנגרמת על ידי תרופות.

אם מופיעה אנמיה מספר ימים או חודשים לאחר עירוי דם או עם צהבת ממושכת ביילוד, נעשית גם בדיקת קומבס ישירה.

עקיףבוצעה בדיקת אנטיגלובוליןלפני עירוי דם ובמהלך הריון של אישה שלילית Rh.

אנמיה המוליטית אוטואימונית

אנמיה המוליטית אוטואימונית (ראשונית)היא מחלה אוטואימונית קלאסית עם סיבות לא ידועות. האינטראקציה בתוך מערכת החיסון מופרעת, מה שמוביל לתפיסה של אריתרוציטים של עצמו כזרים. בבלוטות הלימפה מסונתזים נוגדנים מקבוצת IgG (מגיבים ב-37 מעלות צלזיוס t) ו/או IgM (ב-40 מעלות צלזיוס t), אשר, כאשר הם מחוברים לפני השטח של האריתרוציט, מתחילים מספר אנזימים (ה מערכת משלים) ו"לחורר" את דופן האריתרוציטים, מה שמוביל להרס שלו - המוליזה.

התסמינים הראשונים נובעים הן מהרס של כדוריות הדם האדומות והן מירידה בהמוגלובין. ביניהם:

• עייפות, חולשה כללית, עצבנות
• קוֹצֶר נְשִׁימָה
• כאבי בטן וחזה, בחילות
• צבע שתן כהה
• כאב גב
• צבע איקטרי של העור והריריות
• ירידה במספר אריתרוציטים ו

תוצאה ישירה חיובית מבחן קומבס 100% מאשר את האבחנה של אנמיה המוליטית אוטואימונית, מה שמוכיח את המקור האוטואימוני שלה. יחד עם זאת, תוצאה שלילית אינה מאפשרת להסיר את האבחנה.

אנמיה המוליטית משנית

אנמיה המוליטית אוטואימונית משנית ובדיקת Coombs חיובית יכולות להיות עם המחלות הבאות:

• תסמונת אוונס
• זיהום בדלקת ריאות

בדיקת אנטיגלובולין חיובית במחלות אלו היא אחד התסמינים, לא קריטריון אבחנתי.

מחלה המוליטית של היילוד

גורם מחלה המוליטית של היילודאי התאמה של קבוצת הדם באם ובעובר, ברוב המקרים לפי מערכת Rh, במקרים בודדים - לפי מערכת AB0, באופן מזדמן - לפי אנטיגנים אחרים.

קונפליקט Rh מתפתח אם אצל אישה שלילית Rh העובר ירש דם Rh חיובי מאביה.

המחלה ביילוד מתפתחת רק אם האם כבר פיתחה נוגדנים לאנטיגנים המתאימים, מה שקורה לאחר הריונות קודמים, הפלות, עירויים של דם לא תואם. רוב סיבה נפוצההשקת סינתזה של נוגדנים לאנטיגנים של קרום אריתרוציטים - לידה (דימום עוברי-אם). הלידות הראשונות עוברות בדרך כלל ללא סיבוכים, אך הלידות הבאות רצופות במחלה המוליטית של היילוד בימים הראשונים לאחר הלידה.

תסמינים של מחלה המוליטית של היילוד:

• צהבהב של העור
• , ורירית
• הגדלה של הכבד והטחול
• הפרעות בדרכי הנשימה
• נפיחות של כל הגוף
• עירור ודיכאון הדרגתי של מערכת העצבים המרכזית

אנמיה לאחר עירוי דם

מבחן Coombs עקיףמבוצעת לפני עירוי דם להערכת תאימות, ובדיקת קומבס ישירה - לאחריה אם יש חשד להמוליזה לאחר עירוי, כלומר. אם יש לך תסמינים כגון חום, השקיה (קרא להלן). מטרת הבדיקה היא לזהות נוגדנים ל-RBC שעבר עירוי אשר נקשרו ל-RBCs של הנמען ומהווים את הגורם להמוליזה לאחר עירוי, וכן הסרה מוקדמת של RBCs התורמים ממחזור הדם של הנמען (המקבל).

תסמינים:

• עלייה בטמפרטורת הגוף
• פריחה על העור
• כאב גב
• אָדוֹם
• בחילה
• סְחַרחוֹרֶת

פענוח

ראוי לזכור כי הכללים הבסיסיים לפענוח בדיקות אנטיגלובולין ישירות ועקיפות זהים. ההבדל היחיד הוא מיקומם של הנוגדנים - בדם או כבר על אריתרוציט.

• אם בדיקת Coombs ישירה היא שלילית- זה אומר שהנוגדן לא "יושב" על האריתרוציטים ויש לחפש עוד את הגורם לתסמינים ולבצע מדגם עקיףקומבס
• אם תוצאה חיוביתבדיקת Coombs זוהתה לאחר עירוי דם, זיהומים, תרופות - חיוביות נמשכת עד 3 חודשים (משך חיים של אריתרוציטים 120 יום - 3 חודשים)
• תוצאה חיובית של בדיקת אנטיגלובולין מחלת כשל חיסונינמשך חודשים ואפילו שנים

נוֹרמָה

• בדיקת קומבס ישירה - שלילית
• בדיקת Coombs עקיפה - שלילית

מבחינה איכותית, תוצאה חיובית נמדדת במספר הפלוסים מאחד עד ארבע (+, ++, +++, ++++), ומבחינה כמותית בצורה דיגיטלית - 1:16, 1:256 וכו'.

כן. העובדה שקיבלת עירוי דם חייבת להיות ידועה לרופא שלך, שכן היא משפיעה על הפרשנות הנכונה של תוצאות הבדיקה כעת. כאשר מקבלים דם של מישהו אחר (אם כי פעמים רבות שנבדקו), תמיד קיימת האפשרות שהגוף שלך יפתח נוגדנים נגד הדם שעבר עירוי. הנוגדנים האלה הם שיעשו זאת השפעה רעהעל מצב הבריאות. עם עירויי דם לאחר מכן, הרופא צריך לדעת שכבר קיבלת עירויים, מה שאומר שהיה זמן לסינתזה של נוגדנים. עבור נשים בהריון, מידע זה רלוונטי אפילו יותר.

3. אם יש אי התאמה בגורם Rh בין האם לילד, האם כל הילדים יהיו חולים?

תלוי אם הילד Rh חיובי או שלילי (RhD). נשאים של סוגי דם I, II, III ו-IV יכולים להיות חיוביים ל-Rh ושליליים. במצב בו האם Rh-שלילית והילד Rh-חיובי, ייווצרו נוגדנים כבר בהריון הראשון, אך רק לאחר הלידה הראשונה (או הפסקת ההריון) יהיה מגע ישיר בין הדם של האם והילד. יישום ההשפעה ההמוליטית של הנוגדנים תהיה רק ​​בלידות השנייה ובעקבותיהן, מה שיוביל למחלה המוליטית ביילוד.

כל אישה עם גורם Rh שלילי צריכה להיבדק בקפידה במהלך ההריון, ולאחר הלידה, טיפול מונעכדי למנוע הופעת נוגדנים וסיבוכים נוספים.

4. האם במהלך ההריון יש צורך לדעת את סוג הדם של הבעל לפני ביצוע בדיקת קומבס?

יש צורך לא רק לדעת, אלא גם לבדוק את סוג הדם של האב הביולוגי של הילד במהלך ההריון.

נתונים

• הוצע לראשונה בקיימברידג' ב-1945
• סף רגישות - לפחות 300 מולקולות נוגדנים קבועות על אריתרוציט אחד
• מספר הנוגדנים המעוררים המוליזה - בנפרד עבור כל אדם (מ-16-30 עד 300)
• הדינמיקה של אינדיקטורים מעבדתיים אחרים של אנמיה המוליטית (המוגלובין, בילירובין, רטיקולוציטים) עשויה להתנרמל, ובדיקת Coombs תישאר באותה רמה

מבחן Coombs שונה לאחרונה: 16 במרץ 2018 על ידי מריה בודיאן

בדיקת אנטיגלובולין שנועדה לזהות נוגדנים אנטי-אריתרוציטים לא שלמים הוצעה על ידי Coombs, Morant, Reis בשנת 1945 ולימים נקראה מבחן Coombs. מַהוּת השיטה הזאתהוא שסרום אנטיגלובולינים המכיל נוגדנים לאימונוגלובולינים אנושיים, כאשר מגיבים עם אריתרוציטים שעברו רגישות נוגדנים לא שלמים, מוביל לאגלוטינציה שלהם.

תלוי אם הנוגדנים מקובעים על פני השטח של תאי דם אדומים או שהם חופשיים בפלסמת הדם, נעשה שימוש בבדיקת Coombs ישירה או עקיפה.

בדיקת קומבס ישירה מתבצעת במקרים בהם יש סיבה להאמין שתאי הדם האדומים הנבדקים כבר נמצאים in vivoעברו רגישות עם נוגדנים מתאימים, כלומר. השלב הראשון של התגובה - קיבוע של נוגדנים על פני השטח של אריתרוציטים - התרחש בגוף והתוספת שלאחר מכן של סרום אנטיגלובולין גורמת לאגלוטינציה של תאים רגישים.

באמצעות בדיקת Coombs העקיפה, מתגלים נוגדנים לא שלמים הנמצאים בסרום הבדיקה. במקרה זה, התגובה ממשיכה בשני שלבים. השלב הראשון הוא דגירה של אריתרוציטים בבדיקה עם סרום הבדיקה, במהלכו מתקבעים הנוגדנים הכלולים בדגימת הסרום הנבדקת על פני האריתרוציטים. השלב השני הוא הוספת סרום אנטיגלובולין.

עד כה, בדיקת Coombs הייתה בשימוש נרחב בפרקטיקה מעבדתית לאבחון מצבים אימונופתולוגיים, בפרט באנמיה המוליטית אוטואימונית, המאופיינת בהרס של אריתרוציטים עקב קשירה. קרום תאעם נוגדנים ו(או) רכיבים של מערכת המשלים. בעזרתו מתגלה נוכחות של Ig G (בדרך כלל Ig G1 ו-Ig G3) על קרום האריתרוציטים, שיכול להפעיל משלים, ולעיתים משלים (C3d). עם זאת, בתקופה החריפה של המחלה, עקב הרס של אריתרוציטים, שעליהם נקבעו מספר רב של נוגדנים, במהלך משבר המוליטי, כמו גם עם כמות לא מספקת של נוגדנים במהלך הכרוני של המחלה, ניתן לציין בדיקת Coombs ישירה שלילית.

יש להדגיש כי מבחן קומבס העקיף נותר בעינו השיטה הטובה ביותרבחירה אישית של אמצעי עירוי, שכן היא מאפשרת לך לקבוע בצורה המדויקת ביותר את התאימות האישית של התורם והמקבל לאנטיגנים של אריתרוציטים.

בדיקת אנטיגלובולין ישירה נוספת לנוכחות נוגדנים עצמיים מומלצת בבדיקת כל מקבלי האיברים והרקמות בתקופה שלפני ההשתלה ומקבלי תאי גזע המטופואטיים גם לאחר ההשתלה.

בנוסף לאימונוהמטולוגיה וטרנספוזיולוגיה, בדיקות אנטיגלובולין נמצאות בשימוש נרחב באבחון של מספר מצבים פתולוגיים: במחלות המטולוגיות, כולל לימפופרוליפרטיביות, ב מחלות מערכתיות רקמת חיבור, מחלת סיוגרן, דלקת כבד פעילה כרונית וכו'.

בדיקות של Coombs משמשות באופן פעיל בגנטיקה רפואית ו רפואה משפטיתלקביעת אנטיגנים אריתרוציטים על פני השטח.

מבחן Coombs היא שיטת מחקר די גוזלת זמן הדורשת טיפול מיוחד ביישום שלה. בעת השימוש בו, ישנם כמה קשיים הקשורים, במיוחד, לפרשנות של תגובות חיוביות חלשות. זה ידוע ששווא חיובי חלש או תגובות שליליותבעת ביצוע בדיקות Coombs, הן עשויות להיות תוצאה של שטיפה לא יעילה מספיק של אריתרוציטים, נטרול מגיב האנטיגלובולין עם עקבות של סרום ומגע עם משטח נטול שומן שעליו ניתן לקבע אנטיגלובולין, תוך איבוד פעילותו. חיסרון נוסף של בדיקת Coombs הוא חוסר היציבות של מגיב האנטיגלובולין, להכנתו ולאחסונו יש תכונות מסוימות, מה שמקשה גם על כימת תגובת ההמגלוטינציה עם סרום אנטיגלובולין.

בנוסף, מחקרים שנעשו על ידי A. Holburn, D. Voak et al. , הראה כי רעד מוגזם במהלך ההשעיה מחדש של תרחיף תאים אדומים עלול להיות הגורם לתוצאות שליליות שגויות. תוצאות שגויות בעת ביצוע בדיקות אנטיגלובולין יכולות לנבוע גם מנוכחות של תערובת של נוגדנים אנטי משלימים במגיב האנטיגלובולין, בפרט לרכיבים המשלימים C3d, C3c, C4c ו-C4d, הנספגים על פני אריתרוציטים הנבדקים במהלך הדגירה ויוצרים הופעת תוצאה חיובית.

ניתן לבטל בקלות חסרונות אלה על ידי שטיפה יסודית של דגימות הבדיקה ושליטה בתנאי התגובה.

בעשור האחרון, נעשה שימוש במלח איזוטוני בעל חוזק יוני נמוך (LISS) כדי להפחית את הזמן והרגישות של מבחן Coombs העקיף.

היתרון הבלתי מעורער של בדיקות אנטיגלובולין, על פי מספר מחברים, הוא הרגישות הגבוהה שלהן, שעולה משמעותית על הרזולוציה שיטות חלופיותבדיקות המשמשות לאיתור נוגדנים שאינם מצמידים.

השווינו את הרזולוציה של שיטות לחקר סרום דם עבור נוכחות של נוגדנים לא שלמים באמצעות סרום פוליגלוקין, ג'לטין ואנטיגלובולין. במהלך המחקר, נוטרו טיטרים של נוגדנים לא שלמים נגד D ב-140 דגימות סרום דם של תורמי איזואימונית באמצעות בדיקות ג'לטין, פוליגלוקין ואנטיגלובולין עקיפות. הצהרה על שיטות אלו בוצעה בהתאם לשיטות המקובלות.

נמצא שמבחינת הרזולוציה שלהן, השיטות לזיהוי רגישות אריתרוציטים על ידי נוגדנים נגד D מסודרות באופן הבא: הרגישה ביותר היא בדיקת Coombs העקיפה, לאחר מכן בדיקת ג'לטין, והפחות אינפורמטיבית היא בדיקת הפוליגלוצין. התוצאות שהתקבלו בסדרת ניסויים זו תואמות במלואן את נתוני הספרות, מה שמאפשר לנו להסיק זאת רמה גבוההרגישות של בדיקות Coombs, המאפשרת לזהות ברמת ודאות גבוהה את הימצאות בגוף של נוגדנים אנטי אריתרוציטים שאינם גורמים לאגלוטינציה של כדוריות דם אדומות.

עם זאת, בתרגול הבדיקות של קומבס, ישנם מקרים בהם לא מתגלים נוגדנים לא שלמים, אם כי התמונה הקלינית של המחלה או חיסון קודם מעידה על הימצאותם האפשרית. במקרים כאלה, ניתן להניח שכמות הנוגדנים אינה מספיקה כדי שיגרמו להם נוגדנים בסרום אנטיגלובולינים.

מסקנה זו אוששה על ידי ניסוי משלנו, שבו, באמצעות שיטת המיקרו-אלקטרופורזה אנליטית של תאים, נקבעה נוכחות של נוגדנים אנטי-D על אריתרוציטים בבדיקה, שלא זוהו בבדיקת Coombs העקיפה. בסדרת ניסויים זו, הוסיפו סרום אנטיגלובולין לאריתרוציטים, שהודגרו בעבר עם סרה המתקבלת מדם של תורמים מחוסנים, במהלך תקופת יצירת הנוגדנים בדרכים, כלומר. בתקופה שבה שיטות מוכרות, כולל בדיקת Coombs, לא איתרו בהן נוגדנים.

במחקרים שנערכו, העדויות לנוכחות של נוגדנים לא שלמים על פני השטח של אריתרוציטים היו סטטיסטית שינוי משמעותיערכי ניידות אלקטרופורטית של תאי דם אדומים שעברו רגישות לאחר הוספת סרום אנטיגלובולין. יצוין כי לאחר מכן התגלו נוגדנים אנטי-D בסרום הדם של כל התורמים המחוסנים בבדיקת Coombs העקיפה.

גילרנד וחב'. הראו גם שבדיקות אנטיגלובולין מאופיינות בסף מסוים של רגישות: תוצאה חיובית מצוינת רק כאשר לפחות 500 מולקולות Ig G מקובעות על פני השטח של אריתרוציט אחד.

בנוסף, קיימות עדויות בספרות לכך שתוצאת Coombs שלילית עשויה לנבוע מזיקה נמוכה של נוגדנים המרגישים אריתרוציטים, וכתוצאה מכך הם נפלטים בקלות מפני השטח של כדוריות הדם האדומות במהלך הכביסה.

לאור האמור לעיל, ניתן להסיק שבמקרים מסוימים תוצאה שלילית של בדיקת Coombs אינה עדיין הוכחה להיעדר נוגדנים קבועים על פני אריתרוציטים.

ידוע שהתגובות של קומבס הן מאוד ספציפיות ומאפשרות זיהוי של רוב סוגי הנוגדנים הלא שלמים. עם זאת, כפי שמספר נתונים ניסיוניים מראים, בדיקות אנטיגלובולין יכולות להיות חיוביות גם במצבים לא אימונולוגיים. E. Muirhead et al. ביום השני לאחר מתן פנילהידראזין, נצפו כלבים מדגם חיוביקומבס. הופעה מהירה כזו של תגובה חיובית מעידה על אופיה האימונולוגי, וליתר דיוק, קשורה לספיחה לא ספציפית של החלבון על פני האריתרוציטים.

M. Williams et al. מצא כי חומצה קלבולנית יכולה גם לגרום לתגובה חיובית, אשר, על פי המחברים, קשורה לספיחה לא ספציפית של חלבוני פלזמה על פני האריתרוציטים. השפעה דומה נצפתה בטיפול באנטיביוטיקה של צפלוספורין.

מחברי המחקרים הנ"ל מדגישים את האופי הלא-אימונולוגי של התוצאות החיוביות שהתקבלו בבדיקות של קומבס ומתעקשים כי חומרים אלו מסוגלים לגרום לשינוי של ממברנות תאי הדם האדומות, וכתוצאה מכך אריתרוציטים יכולים לספוג חלבונים (בפרט, אלבומין), הנמצאים בדרך כלל בפלסמה בדם ואינם בעלי תכונות של נוגדנים. בנוסף, ייתכן שהקסנוביוטיקה, הנספגת על פני התא, היא זו שמשמשת כמקשר בין קרום התא לחלבוני הפלזמה.

ל פרשנות נכונההתוצאות של קביעת בדיקות אנטיגלובולין צריכות לקחת בחשבון גם את היחס הכמותי בין אריתרוציטים צעירים ובוגרים בדם היקפי. נמצא כי רטיקולוציטים מבודדים מהגוף במהלך תקופת התחדשות אריתרונים מוגברת יכולים להיות צבועים על ידי סרום אנטיגלובולינים.

תוצאה חיובית של בדיקת אנטיגלובולין ישירה מתרחשת גם עם שונים מצבים פתולוגייםמלווה בהפרעות של המערכת החיסונית, תהליכים דלקתיים המובילים לספיחה לא ספציפית של נוגדנים בעלי ספציפיות שונה על ממברנות אריתרוציטים. זה מצביע על כך שמולקולות Ig G אינן מקיימות אינטראקציה עם אנטיגנים אריתרוציטים ספציפיים, אלא מקובעות רק על פני התאים הנבדקים.

יש לזכור כי בעת קביעת מבחן Coombs במקרים של מחלות המאופיינות בהתפתחות של דיספרוטאינמיה או הופעת פארפרוטאינים, תוצאה חיובית נובעת מהימצאות על פני השטח של אריתרוציטים של חלבונים שאינם בעלי תכונות של נוגדנים, מה שמעיד גם על סגוליות לא מספקת של בדיקות אנטיגלובולין לגבי אופי החלבון שזוהה בעזרתם.

לפיכך, כפי שהוכח על ידי מחקרים רבים, תוצאות חיוביות של בדיקות אנטיגלובולין ישירות ועקיפות אינן עדות מוחלטת לנוכחות נוגדנים, שכן תגובות חיוביותניתן להבחין גם במצבים פתולוגיים שונים שאינם קשורים לאיזוסנסיטיזציה או אוטומטית של הגוף. לכן, רק השוואה של התוצאות של מספר שיטות אימונוסרולוגיות עם תמונה קליניתמחלה מאפשרת לך לשפוט באופן מלא את התהליך הפתולוגי המתפתח.

בדיקת אנטיגלובולין עקיפה חיובית עם בדיקה ישירה שלילית מעידה בדרך כלל על נוכחות של נוגדנים אלונו חופשיים בסרום הבדיקה, הקשורים לעירויי דם או להריונות קודמים.

בדיקת Coombs חיובית לעתים קרובות במהלך החמרה של המוגלובינוריה לילית התקפית; בדיקת Coombs חיובית עם אנטי-C3 ואנטי-C3dg היא סמן למחלת אגלוטינין קרה.

במקרים בהם קיים סיכון גבוה לפתח מחלה המוליטית של היילוד, חשיבות רבהלאבחון (לרוב במהלך ההריון) ובמידת הצורך ניטור דינמי של הופעת ושינוי בטיטר הנוגדנים, יש תוצאות של בדיקות אנטיגלובולין ישירות ועקיפות. לרוב, מחלה המוליטית של היילוד קשורה בחוסר התאמה בין האם לעובר לאנטיגן D, לעתים רחוקות יותר לאנטיגנים של מערכת AB0, ואף פחות לאנטיגנים אחרים (C, c, K וכו'). הנוגדנים שנוצרו la, בהיותם, ככלל, נוגדנים לא שלמים ממחלקת Ig G, מתגלים בבירור בבדיקת אנטיגלובולין עקיפה. במחלה זו יש חשיבות רבה לטיטר שנקבע נכון ולספציפיות של נוגדנים שזוהו, שכן יש מתאם מסוים בין רמת הנוגדנים האנטי-אריתרוציטים בדם של אישה בהריון תחזית אפשריתחומרת המחלה המוליטית.

יש צורך גם בבדיקת Coombs עקיפה פרקטיקה קליניתעל מנת להבטיח טיפול בעירוי בטוח. יישומו הוא מרכיב חובה במחקרים אימונוהמטולוגיים של תורמים וקטגוריות שונות של נמענים, וכן בדיקות שגרתיות של כל חולי המוסדות הרפואיים העשויים להזדקק לעירוי דם ומרכיביו.

בדיקת אנטיגלובולין עקיפה משמשת במקרים הבאים:

לקביעה מדויקת יותר של השתייכות Rh (אנטיגן D) עם תוצאות מטושטשות של קביעת גורם Rh בשיטות אחרות (פוליגלוצין, ג'לטין וכו');

לאיתור אנטיגנים חלשים של אריתרוציטים (מערכות קל, דאפי, קיד, לואיס וכו') ונוגדנים לאנטיגנים הללו;

לזיהוי וזיהוי של נוגדנים אנטי-אריתרוציטים אלואימוניים, לרבות נוגדנים הגורמים לתגובות המוליטיות לאחר עירוי;

כדי לקבוע את נוכחותם של נוגדנים חיסוניים של מערכת AB0 בסיבוכים המוליטיים של עירוי;

כבדיקת תאימות לבחירה אישית של דם שעבר עירוי ומרכיביו.

לפיכך, מבחן Coombs הוא מבחן אבחוני חשוב המשמש בתחומי הרפואה השונים (המטולוגיה, מיילדות, ראומטולוגיה, טרנספוזיולוגיה, אבחון קליני ומעבדתי ועוד). הכרת המאפיינים של מבחן Coombs יסייע להגביר את מהימנות התוצאות ויתרום לפרשנות נכונה של נתוני המעבדה.

סִפְרוּת

1. נוגדנים. שיטות / עורך. ד. קאתי. - מ': מיר, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Rahimov A.A., Gadzhiev A.B.. // טיפול בעירוי באנמיה: ספר לימוד. מדריך לרופאים. - מ .: פרקט. רפואה, 2005. - ס' 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Levchenko L.B.// טרנספוזיולוגיה. - 2006. - מס' 2. - ס' 39-62.

4. דונסקוב ש.י.// קבוצות דם של מערכת Rhesus: תיאוריה ופרקטיקה. - מ.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.אימונוסרולוגיה (מסמכים נורמטיביים) / comp. א.ג. Bashlay, S.I. דונסקוב. - מ.: VINITI RAN, 1998.

6.מחקר של מערכת הדם בפרקטיקה הקלינית / עורך. G.I. קוזינטסה, V.A. מקרוב. - מ.: Triada-X, 1997.

7. לוין V.I. למנגנון של erythrodieresis ו erythropoiesis במהלך חריף אנמיה פוסט-דמורגית: autoref. דיס. ...קנד. דבש. מדעים. - מינסק, 1968.

8. Rahimov A.A., Bairamalibeyli I.E.. // יסודות אבחון, מניעה וטיפול באנמיה. - M .: GOU VUNMTs של משרד הבריאות של הפדרציה הרוסית, 2002. - S. 204-209.

9. צ'ומקובה E.D.. // בעיות בפועלהמטולוגיה וטרנספוזיולוגיה: חומרים של הקונגרס השישי של המטולוגים וטרנספוזיולוגים של הרפובליקה של בלארוס, מינסק, 24-25 במאי, 2007 / עורך. א.י. סבירנובסקי, מ.פ. Potapnev. - מינסק: המרכז הרפובליקני המדעי והמעשי להמטולוגיה וטרנספוזיולוגיה, 2007. - עמ' 50.

10. Coombs R., Mourant A., Race R. // לנצט. - 1945. - כרך. 2. - עמ' 15.

11. פרידמן ג'יי. // J. Clin. פאתול. - 1979. - כרך. 32. - עמ' 1014-1018.

12. הולברן א.מ. בקרת איכות. שיטות בהמטולוגיה / ed.אני. קאוויל. - אדינבורג: צ'רצ'יל ליווינגסטון, 1982. - כרך. 4. - עמ' 34-50.

13. חאן ס.// CMAJ. - 2006. - כרך. 175, מס' 8. - עמ' 919.

14. Komatsu F.// ניפון רינשו. - 2005. - כרך. 63 (מוסף 7). - עמ' 719-721.

15. Komatsu F.// ניפון רינשו. - 2005. - כרך. 63 (מוסף 7). - עמ' 716-718.

16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F.// New Engl. J. Med. -1976. - כרך. 277. - עמ' 123-125.

17. Muirhead E.E., חורשותמ., בריאן ס. // J. Lab. קלינ. Med. -1954. - כרך. 44. - עמ' 902-903.

18. רוס ו.פ.//Hosp. פרק. - 1995. - N 105.

19. Voak D., Downie D., מורב. et al. //בדיקות ביולוגיות בול. - 1986. - כרך. 1. - עמ' 41-52.

20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. מכונות כביסה לתאים לבדיקות אנטיגלובולין. בדיקות שכפול - שיטה חדשה המדגימה את חוסר היעילות של מכונה אחת בשימוש נרחב - Sorvall CW1-AF2: דיווח ל-DHSS Technical Branch, פברואר 1991.

21. Williams M.E., Thomas D., Harman C.P. et al. //תרופות אנטי-מיקרוביאליות וכימותרפיה. -1985. - עמ' 125-127.

22. Zarandona J.M., Yazer M.H. // CMAJ. - 2006. - כרך. 174, מס' 3. - עמ' 305-307.

חדשות רפואיות. - 2008. - מס' 3. - ס' 33-36.

תשומת הלב! המאמר מופנה לרופאים מומחים. הדפסה מחדש של מאמר זה או קטעיו באינטרנט ללא היפר-קישור למקור המקורי נחשבת להפרת זכויות יוצרים.

או מומס בפלזמה.

מילים נרדפות: בדיקת אנטיגלובולין, בדיקת Coombs, AGT, בדיקת אנטיגלובולין עקיפה/ישירה, IAT, NAT, DAT, בדיקת Coombs עקיפה/ישירה

מבחן קומבס הוא

ניתוח שמזהה חיסון ונוגדנים לתאי דם אדומים.

סוגי בדיקות Coombs

• מבחן קומבס ישיר- מזהה נוגדנים קבועים על פני השטח של אריתרוציטים. הוא מתבצע בחשד לאנמיה המוליטית אוטואימונית, המוליזה במחלות אוטואימוניות, לאחר נטילת תרופות (מתילדופה, פניצילין, כינין), לאחר עירוי דם ומחלה המוליטית של היילוד.

האריתרוציטים עברו רגישות in vivo - נוגדנים כבר מחוברים אליהם בחוזקה, ותוספת של סרום אנטיגלובולין (אנטי-IgG) גורמת להיצמדות התאים הרגישים זה לזה, הנראית לעין בלתי מזוינת.

• מבחן Coombs עקיף- מזהה נוגדנים אנטי-אריתרוציטים בפלסמת הדם, המבוצעים לפני עירוי דם ובמהלך ההריון.

נוגדנים נגד אריתרוציטים הם סוג של נוגדנים עצמיים, כלומר. נוגדנים נגד הרקמות שלהם. נוגדן עצמי מתרחש כאשר מערכת החיסון מגיבה בצורה חריגה לתרופות מסוימות, כגון מינונים גבוהים של פניצילין.

אריתרוציטים על פני השטח שלהם מכילים מבנים כימיים שונים (גליקוליפידים, סכרידים, גליקופרוטאין וחלבונים), המכונה ברפואה אנטיגנים. אדם יורש מהוריו מפה מסוימת של אנטיגנים על כל כדורית דם אדומה.

אנטיגנים משולבים לקבוצות ולצד זה מתחלק הדם למספר קבוצות – לפי מערכת AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. המפורסמים והמשמעותיים ביותר בעבודתו של רופא הם AB0 ו-Rh factor (Rh).

מערכת AB0

השתייכות רזוסאדם נקבע על ידי נוכחותם של אנטיגנים אלה. אנטיגן אריתרוציטים חשוב במיוחד הוא אנטיגן D. אם הוא קיים, אז מדברים על RhD דם חיובי ל-Rh, ואם הוא לא קיים, Rh-negative Rhd.

אם הנוגדן המתאים מצטרף לאנטיגנים של אריתרוציטים, אז האריתרוציט נהרס - המוליזה.

אינדיקציות לביצוע בדיקת אנטיגלובולין ישירה

• אנמיה המוליטית אוטואימונית ראשונית
• אנמיה המוליטית במחלות אוטואימוניות, ניאופלסטיות, זיהומיות
• אנמיה המוליטית אוטואימונית הנגרמת על ידי תרופות
• אנמיה המוליטית לאחר עירוי (ימים - חודשים)
• מחלה המוליטית של היילוד (אי התאמה באחת מקבוצות הדם)

אינדיקציות לביצוע בדיקת אנטיגלובולין עקיפה

• לפני עירוי דם
• במהלך הריון של אישה שלילית Rh

אנמיה המוליטית אוטואימונית

אנמיה המוליטית אוטואימונית (ראשונית)היא מחלה אוטואימונית קלאסית עם סיבות לא ידועות. נניח הפרה בתהליך האינטראקציה ברמת המערכת החיסונית, מה שמוביל לתפיסה של אריתרוציטים של עצמו כזרים. תאים מייצרים נוגדנים מקבוצת ה-IgG (מגיבים ב-37°C t) ו/או IgM (ב-40°C), נצמדים לפני השטח של האריתרוציט, הם מתחילים מספר אנזימים (מערכת משלימה) ו"מחוררים" את קיר אריתרוציטים, שמוביל להרס שלו - המוליזה.

תסמינים של אנמיה המוליטית

• עייפות, חולשה כללית, עצבנות
• קוֹצֶר נְשִׁימָה
• כאבי בטן, בחילות
• צבע שתן כהה
• כאב גב
• צבע איקטרי של העור והריריות
• הגדלה של הכבד, הטחול
• ירידה במספר תאי הדם האדומים וההמוגלובין בבדיקת הדם הכללית

תוצאה חיובית יָשָׁר מבחן קומבס 100% מאשר את האבחנה של אנמיה המוליטית אוטואימונית, מה שמוכיח את המקור האוטואימוני שלה. יחד עם זאת, תוצאה שלילית אינה מאפשרת לבצע אבחנה.

אנמיה המוליטית אוטואימונית משנית ובדיקת Coombs חיובית יכולות להיות עם המחלות הבאות:

• זאבת אדמנתית מערכתית
• תסמונת אוונס
• מקרוגלובלינמיה של ולדנסטרום
• המוגלובינוריה קרה התקפית
• לוקמיה לימפוציטית כרונית
• לימפומות
• מחלת הנשיקה מדבקת
• זיהום mycoplasma pneumoniae
• עַגֶבֶת

החיוביות של בדיקת האנטיגלובולין במחלות אלו אינה משרתת קריטריון אבחון, אבל הוא אחד התסמינים של המחלה.

מחלה המוליטית של היילוד

גורם מחלה המוליטית של היילודחוסר התאמה של קבוצות דם באם ובעובר, ברוב המקרים לפי מערכת Rhesus, במקרים בודדים - לפי מערכת AB0, באופן מזדמן - לפי אנטיגנים אחרים.

קונפליקט Rh מתפתח אם אצל אישה שלילית Rh העובר ירש דם Rh חיובי מאביה.

המחלה ביילוד מתפתחת רק אם האם כבר פיתחה נוגדנים לאנטיגנים המתאימים, מה שקורה לאחר הריונות קודמים, לידה, הפלות, עירויים של דם לא תואם. הסיבה השכיחה ביותר להפעלת סינתזה של נוגדנים לאנטיגנים של ממברנה אריתרוציטים היא לידה (דימום עוברי-אם). הלידות הראשונות חולפות לרוב ללא סיבוכים, אך הבאות רצופות במחלה המוליטית של היילוד בימים הראשונים לאחר הלידה.

תסמינים של מחלה המוליטית של היילוד

• צהבהב של העור
• אֲנֶמִיָה
• עור חיוור וקרום רירי
• הגדלה של הכבד והטחול
• הפרעות בדרכי הנשימה
• נפיחות של כל הגוף
• עירור ודיכאון הדרגתי של מערכת העצבים המרכזית

אנמיה לאחר עירוי דם

מבחן Coombs עקיףמבוצע לפני עירוי דם כדי להעריך תאימות, וכן מבחן קומבס ישיר- לאחריו, אם יש חשד להמוליזה לאחר עירוי, כלומר. אם יש לך תסמינים כגון חום, צמרמורות, השקיה (קרא להלן). מטרת הבדיקה היא לזהות נוגדנים ל-RBC שעבר עירוי אשר נקשרו ל-RBCs של הנמען ומהווים את הגורם להמוליזה לאחר עירוי, וכן הסרה מוקדמת של RBCs התורמים ממחזור הדם של הנמען (המקבל).

תסמינים של תגובה המוליטית לאחר עירוי דם

• עלייה בטמפרטורת הגוף
• פריחה על העור
• כאב גב
• צבע אדום של שתן
• בחילה
• סְחַרחוֹרֶת

פענוח מבחן קומבס

ראוי לזכור כי הכללים הבסיסיים לפענוח בדיקות אנטיגלובולין ישירות ועקיפות זהים. ההבדל היחיד הוא מיקום הנוגדנים - בדם או כבר על כדורית דם אדומה - על אריתרוציט.

• אם בדיקת Coombs ישירה היא שליליתזה אומר שהנוגדן לא "יושב" על האריתרוציטים ויש לחפש עוד את הסיבה לתסמינים ולבצע בדיקת קומבס עקיפה
• אם מתגלה תוצאה חיובית של בדיקת Coombs לאחר עירוי דם, זיהומים, תרופות - חיוביות יכולה להימשך עד 3 חודשים (משך חיים של אריתרוציטים 120 יום - 3 חודשים)
• תוצאה חיובית של בדיקת אנטיגלובולין במחלה אוטואימונית יכולה להימשך חודשים ואף שנים

קומבס בודק נורמות

• מבחן קומבס ישיר- שלילי
• מבחן Coombs עקיף- שלילי

מבחינה איכותית, תוצאה חיובית נמדדת במספר הפלוסים מאחד עד ארבע (+, ++, +++, ++++), ומבחינה כמותית בצורה דיגיטלית - 1:16, 1:256 וכו'.

4 עובדות על מבחן Coombs

• הוצע לראשונה בקיימברידג' ב-1945
• סף רגישות - לפחות 300 מולקולות נוגדנים קבועות על אריתרוציט אחד
• מספר הנוגדנים המעוררים המוליזה - בנפרד עבור כל אדם (מ-16-30 עד 300)
• הדינמיקה של אינדיקטורים מעבדתיים אחרים של אנמיה המוליטית (המוגלובין, בילירובין, רטיקולוציטים) עשויה להתנרמל, ובדיקת Coombs תישאר באותה רמה

חסרונות בדיקת האנטיגלובולין

• לא יכול לקבוע את חוזק הקישור של אנטיגן לנוגדן
• מספר לא ידוע של נוגדנים קשורים
• אינו קובע את סוג הנוגדן
• בדיקת Coombs חיובית לא תעזור לקבוע את הסיבה לה
• 0,5% אנשים בריאיםיש בדיקת Coombs חיובית ללא כל עדות לאנמיה המוליטית
• אינו מתאים לניטור הצלחת הטיפול, מכיוון שאינו מעיד על פעילות המוליזה של אריתרוציטים