Metoda bojenja FISH (fluorescentna in situ hibridizacija) razvijena je u Livermore National Laboratory (SAD) 1986. Ovo je temeljno nova metoda za proučavanje kromosoma - metoda fluorescentne detekcije DNA in situ hibridizacijom sa specifičnim molekularnim sondama. Metoda se temelji na sposobnosti kromosomske DNA da se pod određenim uvjetima veže na fragmente DNA (DNA sonde), koji uključuju sekvence nukleotida komplementarne kromosomskoj DNA. DNA sonde unaprijed su označene posebnim tvarima (na primjer, biotin ili digoksigenin). Označene DNA sonde primjenjuju se na citogenetske preparate metafaznih kromosoma pripremljenih za hibridizaciju. Nakon što je došlo do hibridizacije, preparati se tretiraju posebnim fluorescentnim bojama konjugiranim sa tvarima koje se mogu selektivno vezati na biotin ili digoksigenin. Svaki kromosom ima određenu boju. Hibridizacija se također može provesti s radioaktivno obilježenim probama. Citogenetička analiza se provodi pod fluorescentnim mikroskopom u ultraljubičastom svjetlu.
FISH metoda se koristi za otkrivanje malih delecija i translokacija. Kromosomske izmjene (translokacije i dicentrike) između različito obojenih kromosoma lako se prepoznaju kao višebojne strukture.
Kraj posla -
Ova tema pripada:
Modul učenja. stanična biologija
Visoko stručno obrazovanje. Baškirsko državno medicinsko sveučilište.. Ministarstvo zdravstva i socijalnog razvoja..
Ako trebate dodatne materijale o ovoj temi ili niste pronašli ono što ste tražili, preporučamo pretraživanje naše baze radova:
Što ćemo učiniti s primljenim materijalom:
Ako se ovaj materijal pokazao korisnim za vas, možete ga spremiti na svoju stranicu na društvenim mrežama:
| cvrkut |
Sve teme u ovom odjeljku:
Modul učenja. Osnove opće i medicinske genetike
(upute za studente) Akademska disciplina Biologija Za smjer priprema General Medicine Co.
Pravila za prijavu laboratorijskog rada
Nužan element mikroskopske studije predmeta je njegova skica u albumu. Svrha skice je bolje razumjeti i popraviti u memoriji strukturu objekta, oblik pojedinih struktura.
Praktični rad
1. Priprema privremenog preparata "Stanice filma luka" Za pripremu privremenog preparata sa filmom luka uklonite
Građa citoplazmatskih membrana. Transportna funkcija membrana
2. Ciljevi učenja: Poznavati: - strukturu univerzalne biološke membrane - obrasce pasivnog transporta tvari kroz membrane.
Građa eukariotskih stanica. Citoplazma i njezine komponente
2. Ciljevi učenja: Znati: - obilježja organizacije eukariotske stanice- građa i funkcija organela citoplazme
Organele uključene u sintezu tvari
U svakoj stanici vrši se sinteza za nju svojstvenih tvari koje su ili građevni materijali za novonastale strukture umjesto istrošenih ili enzimi uključeni u biokemijske reakcije.
Organele sa zaštitnom i probavnom funkcijom
Lizosomi Ove organele poznate su od 1950-ih, kada je belgijski biokemičar de Duve u stanicama jetre otkrio male granule koje sadrže hidrolitičke
Organele uključene u opskrbu stanice energijom
Velika većina staničnih funkcija uključuje utrošak energije. Živa stanica ga formira kao rezultat redoks procesa koji se stalno odvijaju, konstituirajući
Organele uključene u diobu i kretanje stanica
To uključuje stanično središte i njegove derivate - cilije i flagele. Stanično središte Stanično središte nalazi se u životinjskim stanicama i u nekim
Praktični rad br.1
1. Mikroskopska analiza trajnog preparata „Golgijev kompleks u stanicama spinalni ganglion» Na pripravku, živčane stanice nazvane po
Ribosomi
Otkriveno pomoću elektronska mikroskopija u stanicama svih organizama pro- i eukariota, njihova veličina je 8-35 nm, oni su uz vanjsku membranu endoplazmatskog retikuluma. Provodi se na ribosomima
Granularni endoplazmatski retikulum
Ispitajte submikroskopsku strukturu hrapavog endoplazmatskog retikuluma na elektronskoj mikrografiji. Tri područja acinarnih stanica gušterače gladnih šišmiš. Prije
Citoplazmatski mikrotubuli
Citoplazmatski tubuli nalaze se u stanicama svih životinjskih i biljnih organizama. To su cilindrične, nitaste tvorevine duge 20-30 mikrona, 1
Mitotička aktivnost u tkivima i stanicama
Trenutno se proučavaju mitotski ciklusi i način mitotičke aktivnosti mnogih životinjskih i biljnih tkiva. Pokazalo se da svako tkivo ima određenu razinu mitotičke aktivnosti. Oko m
Mitoza (neizravna dioba) u stanicama korijena luka
S malim povećanjem mikroskopa pronađite zonu razmnožavanja vrha luka, stavite u središte vidnog polja područje s jasno vidljivim stanicama koje se aktivno dijele. Zatim postavite lijek na veliko povećanje
Amitoza (izravna dioba) u stanicama jetre miša
Pregledajte stanice jetre miša pod velikim povećanjem mikroskopa. Na preparatu stanice imaju višestruki oblik. U stanicama koje se ne dijele jezgra je zaobljena jezgricom. U stanicama koje se dijele koje su počele
Ascaris ovum synkaryon
S malim povećanjem mikroskopa pronađite dio maternice valjkastih crva ispunjen folikulima s jajima. Pogledajte uzorak pod velikim povećanjem. Citoplazma u jajetu se skuplja i ljušti
Struktura i funkcije DNA i RNA. Struktura gena i regulacija ekspresije gena u pro- i eukariota. Faze biosinteze proteina
2. Ciljevi učenja: Znati: - kemijski sastav i značajke organizacije nukleinskih kiselina; - razlike između DNA i RNA;
Obrasci nasljeđivanja svojstava kod monohibridnog križanja. Vrste interakcija alelnih gena
2. Ciljevi učenja: Poznavati: - obrasce monohibridnog križanja; - I i II Mendelov zakon; - vrste interakcija
Zakon nezavisnog nasljeđivanja svojstava. Tipovi interakcija nealelnih gena
2. Ciljevi učenja: Poznavati: - obrasce di- i polihibridnog križanja; - III Mendelov zakon; - vrste interakcija
Varijabilnost kao svojstvo živog, njegov oblik. Fenotipska (modifikacijska ili nenasljedna) varijabilnost. Genotipska varijabilnost
2. Ciljevi učenja: Poznavati: - glavne oblike varijabilnosti; - steći ideje o prodornosti i izražajnosti prepoznavanja
Samostalni rad učenika pod nadzorom nastavnika
Praktičan rad Utvrđivanje stupnja varijabilnosti svojstva i koeficijenta varijacije ovisno o okolišnim uvjetima.
Analiza pedigrea
Nisu sve metode genetike primjenjive u analizi nasljeđivanja određenih osobina kod ljudi. Međutim, proučavajući fenotipove nekoliko generacija rođaka, moguće je utvrditi prirodu nasljeđa
Blizanačka metoda za proučavanje ljudske genetike
Metoda blizanaca procjenjuje relativnu ulogu genetskih i okolišnih čimbenika u razvoju određene osobine ili bolesti. Blizanci su jednojajčani (identični) i dvojajčani (puta
Dermatoglifska metoda za proučavanje ljudske genetike
Dermatoglifska analiza je proučavanje papilarnih uzoraka prstiju, dlanova i stopala. U tim dijelovima kože nalaze se velike dermalne papile, a epidermis koji ih prekriva tvori g
Citogenetička metoda u proučavanju ljudske genetike
Među brojnim metodama proučavanja nasljedne patologije čovjeka citogenetička metoda zauzima značajno mjesto. Uz pomoć citogenetske metode moguće je analizirati materijalne temelje nasljednog
Proučavanje skupa kromosoma
Može se provesti na dva načina: 1) izravnom metodom - proučavanje metafaznih kromosoma u stanicama koje se dijele, na primjer, koštana srž(je
Praktični rad
1. Pregled demonstracijskog preparata "Humani kariotip" u citogenetskom laboratoriju Uz X90 povećanje u vidnom polju vidljivi su leukociti.
Analiza kariotipa u bolesnika s kromosomskim bolestima (sa fotografija)
Broj 1. trisomija na kromosomu 13 (Patauov sindrom). Kariotip 47, +13. broj 2. trisomija na kromosomu 18 (Edwardsov sindrom). Kariotip 47, +18. broj 3. trisomija na kromosomu 21 (Downova bolest).
Provođenje analize otisaka prstiju
Za izradu vlastitih otisaka prstiju potrebna vam je sljedeća oprema: fotografski valjak, staklo 20x20 cm2, komad pjenaste gume, tiskarska boja (ili sl.
Citogenetička analiza kariotipa (na temelju mikrofotografija metafaznih ploča)
1. Skicirajte metafaznu ploču. 2. Izračunaj ukupno kromosoma. 3. Odredite kromosome skupina A (3 para velikih metacentričnih kromosoma), B (dva para velikih
Ekspresna metoda za proučavanje X-spolnog kromatina u jezgrama epitela oralne sluznice
Prije uzimanja struganja od pacijenta se traži da zubima zagrize sluznicu obraza i obriše unutarnju površinu obraza ubrusom od gaze. Ovaj postupak je neophodan za uklanjanje uništenih stanica, g
Populacijsko-statistička metoda
Populacija je skup jedinki iste vrste koje dugo vremena nastanjuju isti teritorij, relativno izolirane od drugih skupina jedinki te vrste, slobodno se međusobno križajući i dajući
Biokemijska metoda
Biokemijske metode temelje se na proučavanju aktivnosti enzimskih sustava (bilo aktivnošću samog enzima ili količinom krajnjih produkata reakcije katalizirane ovim enzimom). Biokemikalije
Molekularno genetička metoda
Sve molekularne genetičke metode temelje se na proučavanju strukture DNA. Faze analize DNA: 1. Izolacija DNA iz stanica koje sadrže jezgre (krv
Lančana reakcija polimerazom sinteze DNA
polimeraza lančana reakcija(PCR) - metoda amplifikacije (propagacije) DNA in vitro, uz pomoć koje je moguće unutar nekoliko sati identificirati i umnožiti fragment DNA od interesa od 80
br Puno ime Genotip Ivanov AA Petrov Aa
Promatrani genotip i frekvencije alela
Genotipovi, aleli Broj slučajeva Učestalost (u udjelima) AA 1/5 = 0,2 Aa
Uočene i očekivane učestalosti genotipova i alela
Opaženi broj slučajeva Opažena učestalost Očekivana učestalost AA (p2)
Promatrani genotip i frekvencije alela
№ p / p Sposobnost smotanja jezika u cjevčicu Genotipovi Mogu (da) A_
Rak dojke - opasna bolest, koja je prema statistikama na prvom mjestu među kancerogenim bolestima kod žena. Rizik od razvoja ove bolesti povećava se kod svih žena starijih od 40 godina, a može biti posljedica nekoliko drugih čimbenika. Među najvjerojatnijim uzrocima raka dojke su pretilost, genetska ili nasljedna predispozicija, rani početak menstruacija i njihov kasni završetak, hormonska terapija ili terapija zračenjem.
Osim toga, rizik od morbiditeta je povećan kod prvorotkinja i žena koje su već imale rak. Muškarci također mogu razviti rak dojke.
Vrste i metode dijagnoze
Prvi korak u dijagnosticiranju raka dojke je rutinski pregled kod mammologa. Žene starije od 40 godina trebale bi obaviti ove preglede najmanje jednom u dvije godine. Liječnik obavlja vizualni pregled, palpaciju i mamografiju mliječnih žlijezda. Vizualni znakovi razvoja bolesti mogu biti:
opće informacije
X-zraka dojke (mamografija) omogućuje određivanje prisutnosti, veličine i položaja tumora. Kako bi se poboljšala točnost dobivenih rezultata, koristi se tehnologija uvođenja kontrastnog sredstva. Ako je tumor već otkriven, tada se koristi metoda pneumocistografije - uklanjanje tumorske tekućine i uvođenje zraka u šupljinu. Ako prisutnost tumora nije navedena, tada se koristi duktografija - uvođenje kontrastnog sredstva u mliječne kanale.
Ove metode omogućuju vizualizaciju prisutnosti formacija u tkivima mliječne žlijezde.
Ako se mamografijom utvrdi i postojanje tumora, pacijentica se upućuje na niz dijagnostičkih mjera:
Na ultrazvuku liječnik može razlikovati tumor od ciste i razjasniti lokalizaciju formacije. Nakon toga se iz njega uzima uzorak tkiva za biopsiju. Biopsija vam omogućuje da saznate vrstu formacije: benigne ili maligne, kao i da utvrdite je li tumor hormonski ovisan. Ovi podaci omogućuju liječniku da odluči o strategiji liječenja, ali ne omogućuje uvijek određivanje stadija. Često ga je, čak i uz sve potrebne dijagnostičke mjere, moguće utvrditi tek nakon operacije.
Mehanizam histoloških istraživanja
Biopsija tkiva se radi i prije i poslije operacije. Postupak se provodi nakon pojašnjenja lokalizacije obrazovanja.
Biopsija je postupak uklanjanja dijela tkiva, a njezina se studija naziva "histološki pregled" ili jednostavno "histologija".
Medicinski radnik posebnom iglom uzima malu količinu tkiva iz neoplazme ili se tumor koji je već uklonjen iz tijela pacijenta šalje na histološki pregled. Zatim se fragment tkiva boji i obrađuje na poseban način kako bi se povećao kontrast i olakšalo proučavanje. Rez pregledava mikroskopom od strane stručnjaka i daje zaključak o kvaliteti tumorske formacije. Mnogo toga u ovoj studiji ovisi o pažljivosti i kvalifikacijama laboratorijskog pomoćnika koji daje zaključak.
Srodna studija je imunohistokemija. Općenito, može se nazvati i "histologija", jer. metoda se temelji na proučavanju tkiva, no imunohistokemija je naprednija metoda analize. Tkivo u ovoj studiji također je obojeno posebnim reagensima, koji ne samo da pojačavaju vizualni kontrast, već se na poseban način kombiniraju („označuju“) s antitijelima, što omogućuje određivanje više karakteristika neoplazme. Reakcija se u ovom slučaju događa puno brže, što vam omogućuje brzo dobivanje rezultata analize.
Imunohistokemija omogućuje ne samo razjašnjavanje vrste neoplazme, već i planiranje strategije liječenja bolesnika na temelju otkrivanja osjetljivosti tumorskog tkiva na različite vrste terapijski učinak. Osim toga, provođenje ove studije je što je više moguće automatizirano, što smanjuje vjerojatnost dijagnostičke pogreške zbog ljudskog faktora.
Postoje i moderne dijagnostičke mjere koje omogućuju otkrivanje prisutnosti tumora u tijelu: ovo je spektralna analiza krvi, imunološka (biokemijska) analiza, FISH test tumorskog tkiva. Genetski test krvi omogućava svakoj ženi da provjeri prisutnost ili odsutnost preduvjeta za pojavu raka dojke. CT i MRI omogućuju vam točno određivanje lokalizacije tumora i praćenje dinamike njegovog razvoja, procjenu strukture neoplazme.
Kako otkriti rak analizom krvi?
Krvni test uglavnom propisuje liječnik nakon ultrazvučnog pregleda. Postoje situacije kada pacijentica samoinicijativno daruje krv za markere ili genetsku analizu kako bi se utvrdilo ima li predispoziciju za rak dojke. U nekim slučajevima opći test krvi može poslužiti kao razlog za kontaktiranje onkološkog dispanzera (zajedno s palpacijom pečata ili vizualnim znakovima raka).
Biokemijska analiza
Krv kao materijal za istraživanje omogućuje sljedeće dijagnostičke mjere:
Istodobno, samo prve dvije analize mogu se nazvati specijaliziranim metodama za određivanje raka, od kojih je druga više preventivna nego operativna mjera. Dva druga krvna testa provode se uglavnom prije operacije kako bi se utvrdilo stanje tijela i opseg procesa. Međutim, kao što je već spomenuto, ako se osjeti pečat u prsima, a istodobno opći test krvi pokazuje više od dva negativna dijagnostička koeficijenta, to je razlog da se obratite stručnjaku. Negativni koeficijenti su pokazatelji izvan norme u određenim parametrima sastava krvi.
Biokemijski test krvi otkriva prisutnost protutijela na tumorske stanice. Takva se tijela nazivaju tumorski markeri. Broj i vrsta tumorskih markera ovisi o specifičnosti (lokalizaciji) kancerogen tumor i faze njegovog razvoja. Tumorski markeri uključuju:
U slučaju raka dojke, liječnika će prije svega zanimati prisutnost tumorskog markera CA-15-3, budući da njegova prisutnost u krvi nedvosmisleno ukazuje na bolest raka dojke. Dešifriranje rezultata traje u prosjeku jedan dan. Biokemijska analiza provodi se nekoliko puta tijekom bolesti. Krv za njega uzima se iz vene ujutro natašte. Dva tjedna prije testa pacijent prestaje uzimati sve lijekovi(navodi liječnik). Dva dana prije davanja krvi ne možete uzimati alkohol, masnu i prženu hranu.
Sat vremena prije postupka ne možete pušiti i poželjno je smanjiti emocionalni stres. Krv na biokemijska analiza obično ne odustaju odmah nakon zračenja i fizioterapije.
Definicija genetskih čimbenika
Prije nego što govorimo o genetskom testu krvi, treba naglasiti razliku između pojmova "genetski" i "nasljedno". genetski faktor pojava raka je širi pojam koji ne podrazumijeva samo prisutnost srodnika s rakom dojke, već i specifičnu mutaciju gena, zbog koje se povećava rizik od ove bolesti.
Nasljedni faktor podrazumijeva potencijalni rizik od raka dojke na temelju obiteljske anamneze. U isto vrijeme, ne samo žene, već i muškarci mogu dobiti mutirani gen, ali njegov nositelj neće nužno oboljeti.
Svaka žena može proći genetsku analizu. Ovo se posebno preporučuje osobama čiji su rođaci u izravnoj vezi bolovali od raka dojke. Prije postupka davanja krvi za analizu, stručnjak iz područja genetike trebao bi razgovarati s pacijentom, koji će objasniti nijanse dešifriranja rezultata. Od pacijenta prije davanja krvi nije potrebna posebna priprema.
U slučaju primitka pozitivan rezultat mutacije u BRCA genima, ali u nedostatku drugih simptomi anksioznosti, nema mjesta panici. Ženama s mutacijom ovih gena mogu se preporučiti redoviti samopregledi i fizički pregledi kao preventivne mjere. Nakon 40 godina ima smisla razmišljati o uklanjanju jajnika i dojki, mlađim ženama koje u budućnosti ne planiraju imati djecu ponekad se preporučuje uzimanje kontracepcijskih sredstava. Odluka o ovim mjerama u potpunosti leži na ramenima same žene i zahtijeva promišljen pristup i konzultacije s liječnicima.
Najnovije dijagnostičke metode
Spektralna analiza krv otkriva prisutnost neoplazmi u tijelu s vjerojatnošću do 93%. Ovo je relativno jeftina dijagnostička metoda koja se temelji na infracrvenom zračenju krvnog seruma i analizi njegovog molekularnog sastava.
Zaključak o spektralnoj analizi krvi daje se na principu "prisutnosti-odsutnosti" i usmjeren je na identifikaciju većine vrsta malignih tumora. Također, ova studija može odrediti stupanj razvoja raka dojke. Tumačenje rezultata odvija se u laboratoriju i nije potrebno dodatno mišljenje liječnika.
Za davanje krvi za spektralnu analizu potrebno je dovršiti unos lijekova 2 mjeseca prije zahvata. Od trenutka rendgenskog ili drugog izlaganja, kao i kemoterapije, mora proći najmanje 3 mjeseca. Osim toga, žena ne smije biti trudna niti imati menstruaciju u vrijeme vađenja krvi. Vađenje krvi se provodi ujutro na prazan želudac. Spektralna analiza krvi u prosjeku traje 12 radnih dana.
Jedan od najnovije metode dijagnostika karcinoma je takozvani "fish test" (FISH, fluorescentna hibridizacija). Još uvijek se raspravlja o njegovoj učinkovitosti, a glavno pitanje njegove izvedivosti je skupa istraživačka procedura. Bit metode sastoji se u označavanju staničnih fragmenata fluorescentnim sastavom i daljnjem mikroskopskom ispitivanju stanica. Prema tome s kojim su dijelovima genetskog materijala označeni fragmenti bili u kontaktu, može se razumjeti ima li pacijent predispoziciju za rak i koje će metode liječenja biti relevantne u pojedinom slučaju.
FISH test ne zahtijeva potpuno zrele stanice, stoga je ova analiza puno brža od ostalih laboratorijskih pretraga. Osim toga, FISH metoda omogućuje jasnije promatranje genetskih oštećenja, što nije moguće s drugim vrstama analiza. FISH test se najčešće koristi upravo za otkrivanje raka dojke, ali djeluje i na otkrivanje nekih drugih vrsta raka.
Nedostaci FISH testa su, osim visoke cijene, nemogućnost rada na nekim dijelovima kromosoma zbog specifičnosti oznaka. Osim toga, FISH test zanemaruje određene vrste mutacija i kvarova. genetski kod, što može biti važan propust u dijagnostici. Usporedne studije FISH-a s jeftinijim IHC testom nisu otkrile značajne prednosti u određivanju osjetljivosti stanica raka na Herceptin. Ipak, FISH test trenutno je najbrži među visokopreciznim metodama za dijagnosticiranje raka.
Voditelj
"Onkogenetika"
Zhusina
Julija Gennadijevna
Diplomirao na Pedijatrijskom fakultetu Voronješke države medicinsko sveučilište ih. N.N. Burdenko 2014. godine.
2015 - pripravništvo u terapiji na temelju Odsjeka za fakultetsku terapiju Voronješkog državnog medicinskog sveučilišta. N.N. Burdenko.
2015 - certifikacijski tečaj u specijalnosti "Hematologija" na temelju Hematološkog istraživačkog centra u Moskvi.
2015-2016 – terapeut VGKBSMP br.1.
2016. - odobrena tema disertacije za stupanj kandidata medicinske znanosti"proučavanje klinički tijek bolest i prognoza u bolesnika s kroničnom opstruktivnom bolešću pluća s anemičnim sindromom. Koautor više od 10 publikacija. Sudionik znanstvenih i praktičnih skupova iz genetike i onkologije.
2017 - napredni tečaj na temu: "tumačenje rezultata genetskih studija kod pacijenata s nasljednim bolestima."
Od 2017. boravi u specijalnosti "Genetika" na temelju RMANPO.
Voditelj
"Genetika"
Kanivec
Ilja Vjačeslavovič
Kanivec Ilya Vyacheslavovich, genetičar, kandidat medicinskih znanosti, voditelj odjela za genetiku medicinskog genetskog centra Genomed. Asistent Odjela za medicinsku genetiku Ruske federacije medicinske akademije kontinuirano stručno obrazovanje.
Diplomirao je na Medicinskom fakultetu Moskovskog državnog sveučilišta za medicinu i stomatologiju 2009. godine, a 2011. godine - specijalizaciju u specijalnosti "Genetika" na Odsjeku za medicinsku genetiku istog sveučilišta. 2017. godine obranio je doktorski rad na temu: Molekularna dijagnostika varijacija broja kopija DNA (CNV) u djece s kongenitalnim malformacijama, fenotipom i/ili anomalijama. mentalna retardacija kada se koriste mikronizovi SNP oligonukleotida visoke gustoće"
Od 2011. do 2017. radio je kao genetičar u Klinici za dječje bolesti. N.F. Filatov, znanstveno-savjetodavni odjel Savezne državne proračunske znanstvene ustanove "Centar za medicinska genetička istraživanja". Od 2014. godine do danas vodi odjel genetike MHC Genomeda.
Glavne djelatnosti: dijagnostika i liječenje bolesnika s nasljednim bolestima i prirođenim malformacijama, epilepsija, medicinsko genetsko savjetovanje obitelji u kojima je rođeno dijete s nasljednom patologijom ili malformacijama, prenatalna dijagnostika. Tijekom konzultacija provodi se analiza kliničkih podataka i genealogija kako bi se utvrdila klinička hipoteza i potrebna količina genetskog testiranja. Na temelju rezultata ankete podaci se interpretiraju i dobivene informacije objašnjavaju konzultantima.
Jedan je od osnivača projekta Škola genetike. Redovito održava prezentacije na konferencijama. Drži predavanja za genetičare, neurologe i opstetričare-ginekologe, kao i za roditelje bolesnika s nasljednim bolestima. Autor je i koautor više od 20 članaka i recenzija u ruskim i stranim časopisima.
Područje stručnog interesa je uvođenje suvremenih genomskih studija u kliničku praksu, interpretacija njihovih rezultata.
Vrijeme prijema: srijeda, pet 16-19
Voditelj
"Neurologija"
Šarkov
Artem Aleksejevič
Šarkov Artjom Aleksejevič– neurolog, epileptolog
Godine 2012. studirao je u okviru međunarodnog programa “Orijentalna medicina” na Sveučilištu Daegu Haanu u Južnoj Koreji.
Od 2012. - sudjelovanje u organizaciji baze podataka i algoritma za interpretaciju xGenCloud genetskih testova (https://www.xgencloud.com/, voditelj projekta - Igor Ugarov)
Godine 2013. diplomirao je na Pedijatrijskom fakultetu Ruskog nacionalnog istraživačkog medicinskog sveučilišta nazvanog po N.I. Pirogov.
Od 2013. do 2015. studirao je na kliničkom stažu iz neurologije u Saveznoj državnoj proračunskoj znanstvenoj ustanovi "Znanstveni centar za neurologiju".
Od 2015. godine radi kao neurolog, istraživač na Znanstveno-istraživačkom kliničkom institutu za pedijatriju nazvan po akademiku Yu.E. Veltishchev GBOU VPO RNIMU im. N.I. Pirogov. Također radi kao neurolog i liječnik u laboratoriju za video-EEG praćenje u klinikama Centra za epileptologiju i neurologiju nazvanu po A.I. A.A. Ghazaryan” i “Centar za epilepsiju”.
2015. usavršavao se u Italiji na školi "2nd International Residential Course on Drug Resistant Epilepsies, ILAE, 2015".
U 2015. napredno usavršavanje - "Klinička i molekularna genetika za liječnike", RCCH, RUSNANO.
2016. godine usavršavanje – „Osnove molekularne genetike“ pod vodstvom bioinformatičara dr. sc. Konovalova F.A.
Od 2016. - voditelj neurološkog smjera laboratorija "Genomed".
2016. usavršavao se u Italiji na školi „San Servolo international advanced course: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016“.
2016. godine usavršavanje - "Inovativne genetske tehnologije za liječnike", "Zavod za laboratorijsku medicinu".
2017. godine - škola "NGS u medicinskoj genetici 2017", Moskovski državni znanstveni centar
Trenutno provodi Znanstveno istraživanje iz područja genetike epilepsije pod vodstvom prof.dr.med. Belousova E.D. i profesor, d.m.s. Dadali E.L.
Odobrena je tema disertacije za stupanj kandidata medicinskih znanosti "Kliničke i genetske karakteristike monogenih varijanti ranih epileptičkih encefalopatija".
Glavna područja djelovanja su dijagnostika i liječenje epilepsije u djece i odraslih. Uska specijalizacija - kirurško liječenje epilepsije, genetika epilepsije. Neurogenetika.
Znanstvene publikacije
Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. "Optimizacija diferencijalna dijagnoza te interpretacija rezultata genetskog testiranja ekspertnog sustava XGenCloud kod pojedinih oblika epilepsije. Medicinska genetika, broj 4, 2015., str. 41.
*
Sharkov A.A., Vorobyov A.N., Troicki A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. "Kirurgija epilepsije kod multifokalnih lezija mozga u djece s tuberozom." Sažeci XIV ruskog kongresa "INOVATIVNE TEHNOLOGIJE U PEDIJATRIJI I DJEČJOJ KIRURGIJI". Ruski bilten perinatologije i pedijatrije, 4, 2015. - str.226-227.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. "Molekularno genetski pristupi dijagnostici monogene idiopatske i simptomatske epilepsije". Sažetak XIV ruskog kongresa "INOVATIVNE TEHNOLOGIJE U PEDIJATRIJI I DJEČJOJ KIRURGIJI". Ruski bilten perinatologije i pedijatrije, 4, 2015. - str.221.
*
Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. "Rijetka varijanta rane epileptičke encefalopatije tipa 2 uzrokovana mutacijama u genu CDKL5 kod muškog pacijenta." Konferencija "Epileptologija u sustavu neuroznanosti". Zbornik konferencijskih materijala: / Uredio: prof. Neznanova N.G., prof. Mikhailova V.A. Sankt Peterburg: 2015. - str. 210-212 (prikaz, ostalo).
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troitsky A.A., Golovteev A.L., Polyakov A.V. Nova alelna varijanta mioklonus epilepsije tipa 3 uzrokovana mutacijama u genu KCTD7 // Medicinska genetika.-2015.- v.14.-№9.- str.44-47
*
Dadali E.L., Sharkova I.V., Sharkov A.A., Akimova I.A. "Kliničke i genetske značajke i suvremene metode dijagnostike nasljedne epilepsije". Zbirka materijala "Molekularno biološke tehnologije u medicinskoj praksi" / Ed. dopisni član RANEN A.B. Maslennikova.- Br. 24.- Novosibirsk: Academizdat, 2016.- 262: str. 52-63 (prikaz, ostalo).
*
Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. Epilepsija kod tuberozne skleroze. U "Bolesti mozga, medicinski i društveni aspekti" uredili Gusev E.I., Gekht A.B., Moskva; 2016.; str.391-399
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Sharkova I.V., Kanivets I.V., Konovalov F.A., Akimova I.A. Nasljedne bolesti i sindromi praćeni febrilnim konvulzijama: kliničke i genetske karakteristike i dijagnostičke metode. //Ruski časopis dječje neurologije.- T. 11.- Br. 2, str. 33-41. doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
*
Sharkov A.A., Konovalov F.A., Sharkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. Molekularno genetski pristupi dijagnostici epileptičkih encefalopatija. Zbirka sažetaka "VI BALTIČKI KONGRES O DJEČJOJ NEUROLOGIJI" / Urednik prof. Guzeva V.I. Sankt Peterburg, 2016., str. 391
*
Hemisferotomija u epilepsiji otpornoj na lijekove u djece s bilateralnim oštećenjem mozga Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Zbirka sažetaka "VI BALTIČKI KONGRES O DJEČJOJ NEUROLOGIJI" / Urednik prof. Guzeva V.I. Sankt Peterburg, 2016., str. 157.
*
*
Članak: Genetika i diferencirano liječenje ranih epileptičkih encefalopatija. A.A. Šarkov*, I.V. Šarkova, E.D. Belousova, E.L. Dadali. Časopis za neurologiju i psihijatriju, 9, 2016.; Problem. 2doi:10.17116/jnevro20161169267-73
*
Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. "Kirurško liječenje epilepsije kod tuberozne skleroze" uredila Dorofeeva M.Yu., Moskva; 2017.; str.274
*
Novi međunarodne klasifikacije epilepsije i epileptičkih napadaja Međunarodne lige za epilepsiju. Časopis za neurologiju i psihijatriju. C.C. Korsakov. 2017. V. 117. broj 7. S. 99-106
Voditelj
"Prenatalna dijagnostika"
Kijev
Julija Kirilovna
Godine 2011. diplomirala je na Moskovskom državnom medicinskom i stomatološkom sveučilištu. A.I. Evdokimova s diplomom opće medicine Studirala na specijalizaciji na Odjelu za medicinsku genetiku istog sveučilišta s diplomom genetike
Godine 2015. završila je pripravnički staž iz ginekologije i porodništva na Medicinskom institutu za poslijediplomsko medicinsko obrazovanje Federalne državne proračunske obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja "MGUPP"
Od 2013. godine vodi konzultativni termin u Centru za planiranje obitelji i reprodukciju DZM.
Od 2017. godine voditelj je odjela „Prenatalna dijagnostika“ laboratorija Genomed.
Redovito izlaže na konferencijama i seminarima. Održava predavanja za liječnike različitih specijalnosti iz područja reprodukcije i prenatalne dijagnostike
Provodi medicinsko genetičko savjetovanje trudnica na prenatalnoj dijagnostici u cilju prevencije rađanja djece s urođene mane razvoj, kao i obitelji s vjerojatno nasljednom ili kongenitalnom patologijom. Provodi interpretaciju dobivenih rezultata DNA dijagnostike.
SPECIJALISTI
Latypov
Artur Šamilevič
Latypov Artur Shamilevich - doktor genetičar najviše kvalifikacijske kategorije.
Nakon što je 1976. diplomirao na medicinskom fakultetu Državnog medicinskog instituta u Kazanu, godinama je radio kao liječnik u uredu za medicinsku genetiku, zatim kao voditelj medicinsko-genetičkog centra Republičke bolnice Tatarstana, glavni specijalist Ministarstvo zdravstva Republike Tatarstan, nastavnik na katedrama Medicinskog sveučilišta u Kazanu.
Autor preko 20 znanstveni radovi o problemima reprodukcijske i biokemijske genetike, sudionik mnogih domaćih i međunarodnih kongresa i savjetovanja o problemima medicinske genetike. U praktičan rad centra uveo je metode masovnog probira trudnica i novorođenčadi na nasljedne bolesti, obavio tisuće invazivnih zahvata kod sumnje na nasljedne bolesti ploda u različitim fazama trudnoće.
Od 2012. godine radi na Odjelu za medicinsku genetiku s tečajem prenatalne dijagnostike na Ruskoj akademiji za poslijediplomsko obrazovanje.
Znanstveni interesi – metaboličke bolesti u djece, prenatalna dijagnostika.
Vrijeme prijema: srijeda 12-15, sub 10-14Liječnici se primaju po dogovoru.
Genetičar
Gabelko
Denis Igorevič
Godine 2009. diplomirao je na medicinskom fakultetu KSMU nazvan. S. V. Kurashova (specijalnost "medicina").
Stažiranje na Medicinskoj akademiji za poslijediplomsko obrazovanje u Sankt Peterburgu Savezne agencije za zdravstveni i socijalni razvoj (specijalnost "Genetika").
Pripravnički staž u terapiji. Primarna prekvalifikacija u specijalnosti " Ultrazvučna dijagnostika". Od 2016. godine djelatnik je Katedre Katedre za temeljno fundiranje klinička medicina Institut za fundamentalnu medicinu i biologiju.
Područje profesionalnog interesa: prenatalna dijagnostika, korištenje suvremenih metoda probira i dijagnostike za prepoznavanje genetske patologije fetusa. Utvrđivanje rizika od recidiva nasljednih bolesti u obitelji.
Sudionik znanstvenih i praktičnih skupova iz genetike i ginekologije i opstetricije.
Radno iskustvo 5 godina.
Konzultacije po dogovoruLiječnici se primaju po dogovoru.
Genetičar
Grishina
Kristina Aleksandrovna
Godine 2015. diplomirala je opću medicinu na Moskovskom državnom medicinskom i stomatološkom sveučilištu. Iste godine upisala je specijalizaciju u specijalnosti 30.08.30 "Genetika" u Saveznoj državnoj proračunskoj znanstvenoj ustanovi "Centar za medicinska genetička istraživanja".
U Laboratoriju za molekularnu genetiku složeno nasljednih bolesti (voditelj - doktor bioloških znanosti Karpukhin A.V.) zaposlena je u ožujku 2015. godine kao znanstveno-laborant. Od rujna 2015. godine premještena je u zvanje istraživača. Autor je i koautor više od 10 članaka i sažetaka iz kliničke genetike, onkogenetike i molekularne onkologije u ruskim i stranim časopisima. Redoviti sudionik konferencija o medicinskoj genetici.
Područje znanstvenog i praktičnog interesa: medicinsko genetsko savjetovanje bolesnika s nasljednom sindromskom i multifaktorijalnom patologijom.
Konzultacija s genetičarom omogućuje vam da odgovorite na sljedeća pitanja:
Jesu li simptomi djeteta znakovi nasljedna bolest
koja su istraživanja potrebna da se utvrdi uzrok
određivanje točne prognoze
preporuke za provođenje i evaluaciju rezultata prenatalne dijagnostike
sve što trebate znati o planiranju obitelji
Savjetovanje o planiranju IVF-a
terenske i online konzultacije
sudjelovali na znanstveno-praktičnoj školi „Inovativne genetske tehnologije za liječnike: primjena u klinička praksa“, konferencije Europskog društva za humanu genetiku (ESHG) i druge konferencije posvećene humanoj genetici.
Pruža medicinsko genetsko savjetovanje obiteljima sa sumnjom na nasljednu ili kongenitalnu patologiju, uključujući monogene bolesti i kromosomskih abnormalnosti, utvrđuje indikacije za laboratorijske genetske studije, interpretira rezultate DNA dijagnostike. Savjetuje trudnice o prenatalnoj dijagnostici u cilju prevencije rađanja djece s prirođenim malformacijama.
Genetičar, opstetričar-ginekolog, kandidat medicinskih znanosti
Kudrjavceva
Elena Vladimirovna
Genetičar, opstetričar-ginekolog, kandidat medicinskih znanosti.
Specijalist iz područja reproduktivnog savjetovanja i nasljedne patologije.
Diplomirao na Uralskoj državnoj medicinskoj akademiji 2005.
Specijalizacija iz porodništva i ginekologije
Stažiranje u specijalnosti "Genetika"
Stručna prekvalifikacija u specijalnosti "Ultrazvučna dijagnostika"
Aktivnosti:
- Neplodnost i pobačaj Vasilisa Jurijevna
Diplomirala je na Medicinskom fakultetu Nižnjenovgorodske državne medicinske akademije (specijalnost "medicina"). Diplomirala je na kliničkom stažu FBGNU "MGNTS" sa diplomom "Genetika". 2014. godine obavila pripravnički staž na klinici za majčinstvo i djetinjstvo (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, Trst, Italija).
Od 2016. godine radi kao liječnica konzultant u Genomed doo.
Redovito sudjeluje na znanstvenim i praktičnim skupovima iz genetike.
Glavne djelatnosti: Savjetovanje o kliničkoj i laboratorijskoj dijagnostici genetskih bolesti i interpretacija rezultata. Liječenje bolesnika i njihovih obitelji sa sumnjom na nasljednu patologiju. Savjetovanje pri planiranju trudnoće, kao i tijekom trudnoće o prenatalnoj dijagnostici u cilju prevencije rađanja djece s kongenitalnom patologijom.
Budući da FISH test otkriva genetske abnormalnosti koje uzrokuju rak, jest učinkovita metoda dijagnoza određenih vrsta raka. Test se također koristi za potvrdu dijagnoze i omogućuje vam da dobijete Dodatne informacije O mogući ishod bolesti i uputnosti primjene kemoterapije.
Na primjer, kod pacijenata s rakom dojke, FISH test tkiva uzetog tijekom biopsije pomaže u određivanju prisutnosti kopija gena HER2 u stanicama.
Stanice s kopijama HER2 gena imaju više HER2 receptora, koji primaju signale koji potiču rast stanica raka u dojci. Stoga je za pacijente s kopijama HER2 gena preporučljivo koristiti Herceptin (trastuzumab), lijek koji inhibira sposobnost HER2 receptora da primaju signale.
Zbog skupoće i relativne nedostupnosti FISH testa, češće se koristi drugi test za otkrivanje raka dojke, imunohistokemijski (IHC).
U medicinskim krugovima postoje polemike oko toga visoka efikasnost FISH test u odnosu na standardne testove. Međutim, zbog tehnološkog napretka, FISH test postaje sve jeftiniji i dostupniji u različitim kliničkim okruženjima.
Kako radi FISH test
Prilikom izvođenja FISH testa na uzorku tkiva pacijenta koriste se fluorescentne oznake koje se vežu samo na određena područja kromosoma. Zatim se pomoću fluorescentnog mikroskopa određuju regije kromosoma na koje su se vezale fluorescentne sonde i prisutnost moguća odstupanja izazivanje razvoja raka.
U stanice raka mogu se naći sljedeća odstupanja:
- translokacija - prijenos dijela kromosoma na novi položaj na istom ili drugom kromosomu;
- inverzija - zaokret dijela kromosoma za 180 stupnjeva uz zadržavanje veze sa samim kromosomom;
- delecija - gubitak dijela kromosoma;
- duplikacija - udvostručenje dijela kromosoma, što dovodi do viška sadržaja kopija gena u stanici.
Translokacije pomažu u dijagnosticiranju nekih vrsta leukemije, limfoma i sarkoma. Prisutnost duplikacije u stanicama raka dojke pomaže liječniku u odabiru najboljeg liječenja.
Prednost FISH testa u odnosu na standardne citogenetske testove (koji ispituju genetski sastav stanica) je u tome što može otkriti i najmanje genetske promjene koje se ne mogu vidjeti klasičnim mikroskopom.
Druga važna značajka FISH testa je da se može provesti na stanicama koje se još nisu počele aktivno razvijati. Ostali testovi se izvode na stanicama tek nakon što su urasle laboratorijskim uvjetima u roku od dva tjedna, pa cijeli proces može trajati i do tri tjedna, a rezultati FISH testa dostupni su za nekoliko dana.
Primjeri FISH testa za dijagnozu raka
Iako se FISH test najčešće koristi za analizu genetskih abnormalnosti kod raka dojke, on također pruža važne informacije o drugim vrstama raka.
Na primjer, kod dijagnosticiranja raka Mjehur FISH test za stanice u mokraći točniji je od testova atipičnih stanica. Osim toga, omogućuje vam određivanje recidiva raka mokraćnog mjehura 3-6 mjeseci ranije.
FISH test također pomaže u otkrivanju kromosomskih abnormalnosti kod leukemije, uključujući stanice koje ukazuju na agresivni oblik. kronična limfocitna leukemija(HLL). Bolesnici s agresivnom KLL-om mogu zahtijevati hitno liječenje, dok kod manje agresivnih oblika može biti dovoljno promatranje.
Kontroverza oko FISH testa
Ne slažu se svi stručnjaci da je FISH test najtočniji test za dijagnosticiranje karcinoma osjetljivih na Herceptin.
Godine 2010. znanstvenici s Instituta Mayo (Irska) izjavili su da je jeftiniji IHC test gotovo jednako učinkovit u određivanju osjetljivosti na Herceptin kao i FISH test.
Drugi su stručnjaci kritizirali FISH test zbog neuspjeha u otkrivanju malih mutacija poput malih delecija, umetanja i točkastih mutacija te zbog ignoriranja nekih inverzija.
Poboljšanje FISH testa
Unatoč činjenici da tehnologija FISH testa još uvijek ne omogućuje analizu svih dijelova kromosoma, ona se stalno razvija u tom smjeru.
Na primjer, 2007. godine kanadski znanstvenici najavili su razvoj čipa veličine mikroskopske stakalce koji bi omogućio izvođenje FISH testa pomoću uređaja koji stane u vaš dlan.
Nazvan FISH test na čipu, ovaj poboljšani test dat će rezultate za jedan dan i koštat će manje od ostalih testova.
Kratak odgovor: Metoda fluorescentne in situ hibridizacije (FISH - fluorescence in situ hybridization) uključuje korištenje jedinstvenih sekvenci nukleotida DNA kao sonde za traženje željenih sekvenci DNA u materijalu dobivenom od pacijenta. Metoda se temelji na komplementarnom vezanju DNA sonde na DNA metafaznih kromosoma ili interfaznih stanica. DNK sonda i testna DNK su denaturirane da bi se formirala jednolančana DNK. DNA sonda se dodaje kromosomskom pripravku, inkubira Određeno vrijeme. Prisutnost ili odsutnost sonde obilježene fluorokromom u DNK nakon hibridizacije utvrđuje se ispitivanjem kromosoma pomoću fluorescentne mikroskopije.
Detaljan odgovor:
Metoda fluorescentne hibridizacije in situ omogućuje vam identifikaciju pojedinačnih kromosoma ili njihovih pojedinačnih regija na preparatima metafaznih kromosoma ili interfaznih jezgri na temelju komplementarne interakcije DNA sonde konjugirane s fluorescentnom oznakom i željene regije na kromosomu. Za vizualizaciju peptidno-nukleinskih spojeva na kromosomu, PNA sonde temeljene na proteinski proizvod.
Metoda se temelji na komplementarnom vezanju DNA sonde na DNA metafaznih kromosoma ili interfaznih stanica i uključuje sljedeće korake:
1. Denaturacija dvolančane sonde DNA i ciljane DNA u jednolančane pod utjecajem visoke temperature ili kemijskih agenasa.
2. Hibridizacija DNA sonda s DNA metom po principu komplementarnosti sa stvaranjem dvolančane hibridne molekule
3. Pranje nakon hibridizacije za uklanjanje nehibridizirane DNA sonde
4. Analiza hibridizacijskih signala fluorescentnim mikroskopom
Prednosti Metode molekularne genetske dijagnostike FISH uključuju brzu analizu veliki broj stanica, visoka osjetljivost i specifičnost, sposobnost proučavanja stanica koje se ne kultiviraju i koje se ne dijele.
Mane metoda su nemogućnost dobivanja informacija o fizičko stanje DNK ili regija kromosoma koja se proučava.
FISH se koristi u prenatalnoj molekularno-genetičkoj dijagnostici i za karakterizaciju tumora; u pedijatrijskoj praksi, u pravilu se koristi za identifikaciju submikroskopskih delecija povezanih s određenim malformacijama. Sindromi temeljeni na mikrodelecijama prije su se smatrali bolestima nepoznate etiologije, budući da su kromosomske delecije i preraspodjele, izazivajući razvoj ovih bolesti obično se ne mogu vizualizirati tradicionalnim metodama kromosomske analize. Takve male delecije u određenim regijama kromosoma mogu se detektirati s velikom točnošću. FISH metoda. Bolesti uzrokovane submikroskopskim delecijama uključuju Prader-Willijev, Angelmanov, Williamsov, Miller-Diekerov, Smith-Magenisov sindrom i velokardiofacijalni sindrom. FISH olakšava dijagnosticiranje ovih sindroma u atipičnim slučajevima, osobito u dojenačkoj dobi, kada još nedostaju mnogi dijagnostički alati. značajne karakteristike bolesti. Primjena ove metode molekularne genetske dijagnostike također se savjetuje u adolescenciji i odrasloj dobi, kada je tipično Klinički znakovi bolesti karakteristične za djetinjstvo prolaze kroz promjene.
121. DNK sonde. Njihova upotreba u determinaciji nasljednih bolesti.
Kratki osvrt
DNK sonda je kratki fragment DNA konjugiran s fluoresceinom, enzimom ili radioaktivnim izotopom, koji se koristi za hibridizaciju s komplementarnom regijom ciljne molekule DNA.
Glavni dio
DNA dijagnostički sustavi
Podaci o čitavoj raznolikosti svojstava organizma sadržani su u njegovom genetskom materijalu. Dakle, patogenost bakterija određena je prisutnošću određenog gena ili skupa gena u njima, a nasljedna genetska bolest nastaje kao posljedica oštećenja određenog gena. Segment DNK koji određuje dat biološka osobina, ima strogo definiran slijed nukleotida i može poslužiti kao dijagnostički marker.
Mnoge brze i pouzdane dijagnostičke metode temelje se na hibridizaciji nukleinskih kiselina – sparivanju dvaju komplementarnih segmenata različitih molekula DNA. Postupak u u općim crtama sastoji se od sljedećeg.
1. Fiksacija jednolančane DNA mete na membranski filter.
2. Primjena obilježene jednolančane DNA probe, koja se pod određenim uvjetima (temperatura i ionska jakost) spaja s ciljnom DNA.
3. Pranje filtra kako bi se uklonio višak nevezane označene DNA sonde.
4. Detekcija hibridnih molekula sonda/cilja.
U dijagnostičkim testovima koji se temelje na hibridizaciji nukleinskih kiselina, tri su komponente ključne: DNA sonda, DNA meta i metoda detekcije hibridizacijskog signala. Sustav detekcije mora biti visoko specifičan i visoko osjetljiv.
* Fluorescein (dioksifluoran, uranin A) - organski spoj, fluorescentna boja. U analitičkoj kemiji fluorescein se koristi kao luminiscentni acidobazni indikator. u biokemiji i molekularna biologija izotiocijanatni derivati fluoresceina kao biološke boje za određivanje antigena i antitijela.
* Detekcija je otkrivanje, identifikacija, pronalazak nečega.
*konjugacija=konjugacija
*Ako se mješavina DNK, na primjer, ljudske i mišje, rastali i žari u jednoj "epruveti", tada će se neki dijelovi lanaca mišje DNK rekombinirati s komplementarnim dijelovima lanaca ljudske DNK kako bi formirali hibride. Broj takvih nalazišta ovisi o stupnju srodnosti vrste. Što su vrste bliže jedna drugoj, to je više regija komplementarnih DNA lanaca. Ova pojava se zove DNA-DNA hibridizacija.
122. Metode i uvjeti za primjenu izravne DNA dijagnostike.
Kratka recenzija:
Izravnim metodama otkrivaju se poremećaji u primarnom slijedu nukleotida DNA (mutacije i njihove vrste). Izravne metode karakteriziraju točnost koja doseže gotovo 100%.
Svrha izravne dijagnostike je identificirati mutirane alele (abnormalnosti u primarnom slijedu nukleotida DNA, mutacije i njihove vrste).
Nedostatak izravne DNA dijagnostike je potreba da se zna točna lokacija gena i spektar njegovih mutacija. Metode izravne DNA dijagnostike indicirane su za bolesti kao što su fenilketonurija (mutacija R408W), cistična fibroza - (najčešća mutacija delF508), Huntingtonova koreja (ekspanzija trinukleotidnih ponavljanja-CTG ponavljanja) itd.
Potpuni odgovor:
Izravnim metodama otkrivaju se poremećaji u primarnom slijedu nukleotida DNA (mutacije i njihove vrste). Izravne metode karakteriziraju točnost koja doseže gotovo 100%. Međutim, u praksi se ove metode mogu primijeniti pod određenim uvjetima:
1) poznata citogenetička lokalizacija gena odgovornog za nastanak nasljedne bolesti,
2) gen bolesti mora biti kloniran i njegova nukleotidna sekvenca poznata.
Svrha izravne dijagnostike je identificirati mutirane alele (abnormalnosti u primarnom slijedu nukleotida DNA, mutacije i njihove vrste). Visoka točnost izravne DNA dijagnostičke metode u većini slučajeva ne zahtijeva analizu DNA svih članova obitelji, budući da otkrivanje mutacije u odgovarajućem genu omogućuje potvrdu dijagnoze s gotovo 100%-tnom točnošću i određivanje genotipa svi članovi obitelji bolesnog djeteta, uključujući heterozigotne nositelje.
Nedostatak izravne DNA dijagnostike je potreba da se zna točna lokacija gena i spektar njegovih mutacija.
Metode izravne DNA dijagnostike indicirane su za bolesti kao što su fenilketonurija (mutacija R408W), cistična fibroza - (najčešća mutacija delF508), Huntingtonova koreja (ekspanzija trinukleotidnih ponavljanja-CTG ponavljanja) itd.
Međutim, do danas geni mnogih bolesti nisu mapirani, njihova egzon-intron organizacija je nepoznata, a mnoge nasljedne bolesti karakterizira izražena genetska heterogenost, koja ne dopušta potpunu upotrebu izravnih metoda dijagnostike DNK. Stoga informativni sadržaj metode izravne DNK dijagnostike jako varira. Dakle, u dijagnozi Huntingtonove koreje, ahondroplazije, to je 100%, s fenilketonurijom, cističnom acidozom, adrenogenitalnim sindromom - od 70 do 80%, a s Wilson-Konovalovom bolešću i Duchenne / Becker miopatijom - 45-60%. U tom smislu koriste se neizravne metode molekularne genetske dijagnostike nasljednih bolesti.
