אבחון של זיהום ב-HIV חיוני לטיפול יעיל.כדי לאבחן איידס, הליך סטנדרטיבדיקה של המטופל. זה מורכב מ-2 שלבים:

• סְרִיקָה;
• סיכה חיסונית.

כדי לבצע אבחנה, PCR נקבע בנוסף, בדיקה אקספרס.

אליסה

האבחנה הראשונית של איידס מבוססת על שימוש בחלבוני HIV במעבדה הלוכדים נוגדנים ספציפיים. לאחר מגע שלהם עם האנזימים של מערכת הבדיקה, צבע המחוון משתנה. ואז ערכת הצבעים שהשתנתה מעובדת באמצעות ציוד מיוחד, הקובע את תוצאת הבדיקה.

אבחון מעבדה דומה של זיהום ב-HIV מראה תוצאה 21 ימים לאחר ההדבקה. בעזרת ELISA אי אפשר לקבוע את נוכחות הנגיף. השיטה הזאתאבחון עוזר לזהות ייצור של נוגדנים לנגיף. תהליך דומה ניתן לראות 2-6 שבועות לאחר ההדבקה.

מומחים מבחינים בין 4 דורות של מערכות ELISA עם רגישויות שונות. רופאים משתמשים לעתים קרובות בבדיקות דור שלישי ורביעי. מערכות אלו מבוססות על חלבונים רקומביננטיים או פפטידים מקור סינתטי, שיש להם דיוק וספציפיות משמעותיים. ELISA משמש לאיתור, ניטור התפשטות הנגיף, מה שמבטיח בטיחות בעת בדיקת דם שנתרם. הדיוק של מערכות כאלה נע בין 93-99%. בדיקות שפורסמו ב מערב אירופה. לביצוע אבחון, עוזר המעבדה לוקח דם ורידי (5 מ"ל). במשך 8 שעות לפני המחקר, מומלץ לסרב לאכול. המחקר מתבצע לעתים קרובות יותר בבוקר.

פענוח נתונים

ידרשו 10 ימים עד לקבלת תוצאות הבדיקה. אם התוצאה שלילית, אז החולה אינו נגוע. במקרה זה, טיפול אינו נקבע. זוהתה תוצאה שלילית כוזבת:

• עד 3 שבועות לאחר ההדבקה;
• עַל שלב אחרוןאיידס עם מערכת חיסונית נמוכה;
• עם הכנת דם לא נכונה.

אם התוצאה חיובית, אז החולה נגוע. במקרה זה, IB מתבצע. שֶׁקֶר תוצאה חיוביתמצביע על נוכחות של מחלות נלוות והכנת דם שבוצעה בצורה לא נכונה. אם הבדיקה מיועדת לנשים בהריון, אז בחומר שנאסף הרופא יכול לזהות נוגדנים לא ספציפיים, שייצורם אינו קשור לנגיף. החומר שנאסף נבדק במעבדת התייחסות או בוררות. אם תוצאת הבדיקה החוזרת שלילית, אז התוצאה הראשונה היא שקר. במקרה זה, IB לא מתבצע.

ביצוע כתם חיסוני

טיפול באיידס נקבע עם קבלת תוצאה חיובית סיכה חיסונית. שיטת אבחון זו מתבצעת באמצעות רצועת ניטרוצלולוזה עליה מורחים חלבונים ויראליים. עבור IB, דם ורידי משמש, אשר לאחר מכן מעובד. חלבוני סרום מחולקים לקבוצות על סמך המטען שלהם ו משקל מולקולרי. כדי לבצע תהליך זה, נעשה שימוש בציוד מיוחד.

אם יש נוגדנים לנגיף בחומר הבדיקה, הקווים המתאימים מופיעים על הרצועה. IB חיובי מצביע על כך שהחולה חיובי ל-HIV. תוצאה מפוקפקת מתגלה בשלבים הראשונים של ההדבקה, בשחפת ואונקולוגיה, בנשים בהריון. במקרים כאלה, מומלץ לחזור על ה-IB.

תוצאת IB בלתי מוגדרת מצביעה על נוכחות של חלבון אחד או יותר לנגיף באימונובלוט. תמונה דומה נצפית עם זיהום לאחרונה, כאשר יש כמות קטנה של נוגדנים לזיהום בדם. במקרה זה, ה-IB יהיה חיובי לאחר זמן מה. ייתכן שהתוצאה הלא ודאית של מחקר זה נובעת מהיעדר זיהום ב-HIV בהפטיטיס, מחלות מטבוליות כרוניות, במהלך ההריון. במקרה זה, ה-IB יהפוך לשלילי או שמומחים יזהו את הסיבה לתוצאה הלא ודאית אצל המטופל.

מחקר PCR

מערכת ההגנה מושפעת על רקע החדרת הנגיף ל גוף האדם. ל תקופת דגירהתקופה אופיינית של 3 חודשים. לכן, לאחר מגע מיני עם בן זוג נגוע ב-HIV, מומלץ לעבור אבחון PCR. זה יאפשר לך לקבוע את ה-RNA של הנגיף. התקופה שבה מומלץ לעבור מחקר כזה היא 8-24 חודשים.

ל אבחנה סופיתתרומת דם קבועה עבור HIV מסומנת (פעם אחת ב-3 חודשים). בשל הרגישות הגבוהה הסקר הזהמאפשר לך לזהות את הנגיף 10 ימים לאחר ההדבקה. תוצאת PCR חיובית כוזבת יכולה להתקבל גם אם קיים זיהום נוסף בגוף המטופל. מחקר PCRנחשב להליך יקר, שכן הוא דורש ציוד מיוחד.

PCR נקבע כדי לזהות את הנגיף באנשים הבאים:

• יילוד שנולד מאם נגועה ב-HIV;
• חולים עם IB מפוקפק.

כמו כן, טכניקה זו הוכחה לשלוט בריכוז הנגיף בדם ובמחקר של דם התורם.

שיטות מחקר מהירות

ל שיטות מודרניותמומחי אבחון איידס מפנים בדיקות מהירות. זה ייקח 10-15 דקות כדי לפענח אותם. בדיקות אימונוכרומטוגרפיות המבוססות על זרימה נימית מספקות תוצאות מדויקות. מערכות בדיקה כאלה מוצגות בצורה של רצועות מיוחדות שעליהן מורחים דם או רוק. בנוכחות וירוס, 2 רצועות מופיעות בבדיקה לאחר 10 דקות:

• לִשְׁלוֹט;
• צֶבַע.

במקרה זה, תוצאת הבדיקה היא אופי חיובי. תוצאה שלילית מסומנת על ידי הופעת רצועת בקרה אחת. כדי לאשר את התוצאה שהושגה, מתבצע IB. בהתבסס על הנתונים הכלליים, הרופא עושה אבחנה ורושם טיפול.

אתה יכול לזהות את הנגיף בבית. לשם כך, נעשה שימוש בערכות אקספרס מיוחדות. OraSure Technologies1 היא מערכת שפותחה בארה"ב. אם נמצאה תוצאה חיובית לאחר הבדיקה, מומלץ למטופל לעבור בחינה מלאהבמרכז הרפואי.

בדיקה של הילד

תינוקות שזה עתה נולדו שנולדו מאמהות נגועות נבדקים בדחיפות. בעזרת שיטות סרולוגיות, אי אפשר לזהות במדויק את הנגיף בילדים בגילאי 5-18 חודשים. אבל התוצאה של סקר כזה חשובה בעת עריכת IB.

ניתן לזהות זיהום בילדים באמצעות PCR. ה-DNA של הנגיף מתגלה על ידי מומחה בילדים מהחודש הראשון לחיים. כדי לקבוע את ריכוז ה-RNA הפתוגן, מומחים קובעים את פרו-וירוס הכשל החיסוני. לצורך מחקר, הרופא משתמש בדם מלא או בכתם המיובש שלו. החומר מונח במבחנה עם חומר משמר EDTA (פרופורציה 1:20). יש לאחסן את הדגימה בטמפרטורה שאינה עולה על 8°C (למשך יומיים). אסור להקפיא חומרים.

כדי לקבל דגימת דם יבשה, כל הנוזל מוחל על נייר מיוחד. ניתן לאחסן את הדגימה מתחת ל-8 מעלות צלזיוס. הכרטיסים משמשים 8 חודשים. יש לבדוק ילד שזה עתה נולד, תוך נטילת חומר למחקר, בתוך התקופות הבאות:

• 48 שעות לאחר הלידה;
• בגיל חודשיים לאחר הלידה;
• 3-6 חודשים לאחר הלידה.

אם הרופא זיהה את הגן פרו-וירוס HIV כמה שעות לאחר לידת התינוק, אז התינוק נדבק תוך רחמי. הנגיף יכול להידבק גם במהלך הלידה או במהלך הנקה. התוצאות, המעידות על נוכחות DNA של וירוס ב-2 דגימות, מצביעות על התפתחות איידס אצל הילד. תצפית מרפאהלא נדרש אם תוצאות PCR שליליות 4 חודשים לאחר לידת התינוק.

אם תוצאת הבדיקה שלילית, אך קיימים תסמיני איידס, אז מומלץ להתייעץ עם רופא. מרפאה כזו יכולה להיות מופעלת על ידי מחלות אחרות. הבדיקה נחשבת לשיטה היחידה ו-100% לאבחון וירוס. אפילו אנשי מקצוע מוסמכים ומנוסים אינם יכולים לזהות את הנגיף לפי הסימפטומים שהוא מציג.

אם לאחר זמן מה התוצאות של המטופל שליליות, אז אין HIV בגוף.

זה לא לוקח בחשבון סימפטומים. אבל כזה תמונה קליניתעשוי להיות קשור לפוביה מאיידס. במקרה זה נדרשת עזרה של פסיכולוג. במידת הצורך, לילד או למבוגר נקבע טיפול מתאים.

התפקיד המכריע באבחון של זיהום ב-HIV ממלא על ידי אבחון מעבדה, המורכב בזיהוי נוגדנים ל-HIV בדם על ידי ELISA, ולאחר מכן אישור של תוצאות חיוביות על ידי IB. שיטה זו לאבחון הידבקות ב-HIV מאפשרת לזהות אנשים נגועים ב-HIV ביעילות של 99%.

אינדיקציות לשימוש בבדיקות מעבדה שונות ותכונות של פרשנות התוצאות

נכון לעכשיו, לשלב ההקרנה של אבחון זיהום HIV, נעשה שימוש בערכות ריאגנטים מהדור השלישי והרביעי המבוססות על שיטת ELISA. תכונה ייחודיתבדיקות של הדור הרביעי הן היכולת לזהות בו-זמנית יתר לחץ דם (p24) ו-AT כולל, בעוד שבדיקות של הדור השלישי מאפשרות לקבוע רק AT. במידת האפשר, יש להעדיף מבחני דור רביעי בגלל הגבוהים שלהם רגישות אבחנתיתוהאפשרות לגלות זיהום ביחידים במהלך החלון הסרולוגי.

תוצאה שלילית בזיהוי AT ל שיטת HIV ELISA לא תמיד מעיד על היעדר זיהום. בעיה רציניתמייצגים את אותם מקרים שבהם הבדיקה בוצעה במהלך החלון הסרולוגי, כלומר. בשבועות הראשונים לאחר ההדבקה, כאשר עדיין לא פותחו נוגדנים ל-HIV בכמות מספקת. בחלק מהאנשים, החלון הסרולוגי עשוי להתארך למספר חודשים, כך שאם יש עדות לחשיפה לאנשים נגועים ב-HIV, בדיקות חוזרות מבוצעות בדרך כלל לאחר 2-3 חודשים. ניתן להשיג תוצאות שליליות כוזבות של זיהוי נוגדנים ל-HIV באמצעות ELISA ב שלב מסוףמחלה המאופיינת בחומרה מערכת החיסוןעם הפרה עמוקהתהליך היווצרות AT.

תוצאה חיובית של זיהוי נוגדנים על ידי ELISA מצביעה על הסבירות להידבק בזיהום HIV, אך לפעמים תוצאה זו יכולה להיות חיובית שגויה, למשל, אם לאדם יש גידולים, מחלות אלרגיותבמהלך ההריון, במהלך מחלות אוטואימוניות, שינויים משמעותיים באינדיקטורים מחקר ביוכימידם, חלק מחלות כרוניות. במקרים כאלה נדרש מחקר נוסף במעבדת מומחה.

אם מתקבלת תוצאה חיובית של זיהוי נוגדנים ל-HIV על ידי ELISA, נדרש אישורה. בשלב הראשון של האישור, הניתוח חוזר על עצמו באותה מערכת בדיקה בשתי בארות - זה מבטל טעויות טכניות. אם התוצאה מאושרת, חוזרים על קביעת הנוגדנים על ידי ELISA בסרום של המטופל באמצעות שתי ערכות ייחוס של ריאגנטים. אם מתקבלת תוצאה חיובית לפחות באחד מהמחקרים הללו, מתבצע השלב השלישי של האישור: מחקר בשיטת IB, המאפשר זיהוי של נוגדנים לחלבוני אנטיגן HIV בודדים.

התוצאות המתקבלות בשיטת IB מתפרשות כחיוביות, מפוקפקות ושליליות. התוצאות נחשבות שליליות (שליליות) אם לא נמצא נוגדנים לאף אחד מאנטיגנים של HIV בסרום הבדיקה או שיש תגובה חלשה עם חלבון p17. הסיבה הכי משכנעת לכך תגובה חיוביתהוא זיהוי של נוגדנים לחלבוני מעטפת HIV (גליקופרוטאינים gp41, gp120, gp160). התוצאה נחשבת חיובית אם מתגלים נוגדנים לכל שני גליקופרוטאין של HIV. אם יש תגובה רק עם אחד מחלבוני המעטפת, בשילוב עם תגובה עם חלבונים אחרים או בלעדיו, התוצאה נחשבת בספק, במקרה זה מומלץ לבצע בדיקות לאיתור אנטיגן p24 או HIV DNA/RNA. אם מתגלה יתר לחץ דם p24 או HIV DNA/RNA, בדיקה חוזרת באמצעות IB מתבצעת שבועיים לאחר התוצאה הבלתי מוגדרת הראשונה וכל שבועיים לאחר מכן עד לקבלת תוצאה חיובית בבדיקה המאששת. אם, 6 חודשים לאחר הבדיקה הראשונה, שוב מתקבלות תוצאות בלתי מוגדרות, ולמטופל אין גורמי סיכון לזיהום תסמינים קלינייםזיהום ב-HIV, התוצאה נחשבת כחיובית שגויה.

לעתים קרובות, לאחר 1-3-6 חודשים מרגע קבלת התוצאה המפוקפקת, נוגדנים לכל אנטיגנים של HIV מופיעים בזה אחר זה בסרום הדם. במקרה זה, תוצאה מפוקפקת היא ראיה שלב ראשוניזיהומי HIV. במקרים מסוימים, תוצאות מפוקפקות של IB נצפו אצל אנשים לא נגועים שיש להם נוגדנים בגופם הדומים לנוגדנים אמיתיים ל-HIV.

אחד מהסימנים העקיפים להדבקה ב-HIV הוא ירידה סלקטיבית בתאי CD4+ T-helper בשל העובדה של-HIV יש טרופיזם לקולטן תאי CD4. עם זאת, שינויים אלו עשויים להיעדר בשלבים מסוימים של הדבקה ב-HIV, להשתנות מחולה לחולה ולהתרחש במחלות אחרות. אז, בחולים מבוגרים שנמצאים בשלב הסמוי של המחלה, מספר הלימפוציטים CD4+ עולה בדרך כלל על 0.5. 109/l, התואם את הערכים אצל אנשים בריאים.

ל אבחון מוקדםנעשה שימוש בבדיקות לזיהום ב-HIV. שיטות לאבחון זיהום משתפרות ללא הרף, מכיוון שהתסמינים העיקריים של המחלה אינם מופיעים מיד, ומתחפשים לפתולוגיות אחרות. יתר על כן, ב מחקר מעבדההאחוז של תוצאות חיוביות שגויות ושליליות כוזבות גבוה.

מערכות הבדיקה משתמשות בדם כדי לקבוע HIV, לעתים רחוקות יותר הן משתמשות בשתן ובגרידה מרירית הפה.

שלבי אבחון זיהום ב-HIV במבוגרים:

ראשוני - מיון שבוחר מועמדים בסיכון (כנראה נגועים);

התייחסות

אישור - שלב מומחה.

משלב לשלב, המורכבות, עוצמת העבודה והעלות של שיטות המחקר גדלות.

מונחים המשמשים במהלך אבחון HIV:

אנטיגן - HIV או חלקיו (קפסולה, אנזימים, שומנים, חלבונים).

נוגדן הוא תא של מערכת החיסון המיוצר על ידי הגוף נגד החדרה של זיהום ויראלי.

Seroconversion היא תגובה חיסונית של מערכת ההגנה מפני רבייה פעילה של הנגיף. מיד לאחר הכניסה לגוף, תאי HIV מתחילים להתחלק באופן פעיל. בתגובה, ריכוז הנוגדנים עולה במשך מספר שבועות. כאשר הם מגיעים לרמה מסוימת (המרת סירו), מערכות בדיקה זמינות לאבחון. ככל שריכוז הנגיף יורד, רמת הנוגדנים יורדת.

"תקופת החלון" - מרווח הזמן מרגע ההדבקה ועד להופעת המרת סרוק, לוקח בין 1.5 ל-3 חודשים. אדם נגועבתקופה זו הוא מסוכן במיוחד כנשא של זיהום, שכן בדיקת HIV מציגה תוצאה שלילית שגויה, אם כי הסיכון להעברת המחלה גבוה ביותר.

במהלך ההקרנה מתבצעת בדיקת אנזים אימונו (ELISA) כדי לקבוע את סך הנוגדנים ל-HIV-1 ול-HIV-2. הוא מציג תוצאות מדויקות לא לפני 3-6 חודשים לאחר ההדבקה, אם כי יש יוצאים מן הכלל: הוא יכול לזהות נוגדנים ל-HIV 3-5 שבועות לאחר מגע מסוכן.

מערכות הבדיקה מהדור הרביעי הן המדויקות ביותר. בנוסף לנוגדנים לנגיף, הם מסוגלים לקבוע גם את האנטיגן ל-HIV (p-24-capsid), מה שמאפשר לזהות את הנגיף גם ב"תקופת החלון", לפני הופעת הנוגדנים.

העלות הגבוהה של מערכות בדיקה כאלה מאלצת במדינות רבות להשתמש במערכות מהדור השלישי ואפילו השני, הקובעות רק את נוכחותם של נוגדנים.

מערכות כאלה נותנות תוצאות חיוביות שגויות כאשר המדינות הבאות:

זיהום במהלך ההריון;

עם תוצאה חיובית של אנזים immunoassay, הם ממשיכים לשלב הבא של האבחון.

שלב התייחסות באבחון HIV

אבחון כפול משמש עם מערכות בדיקה רגישות יותר. שתי תוצאות חיוביות מהוות סיבה לעבור לשלב הבא של אבחון.

שלב המומחה - אימונובלוטינג

בשלב זה נקבעים נוגדנים לחלבונים בודדים של נגיף הכשל החיסוני האנושי.

שלבי שלב המומחה:

הרס הנגיף לאנטיגנים בודדים על ידי אלקטרופורזה.

העברת אנטיגנים בשיטת הסופג על גבי רצועות מיוחדות עם חלבונים ספציפיים ל-HIV מיושמים מראש.

תיקון התגובה המתרחשת אם דמו של המטופל מכיל נוגדנים לאנטיגנים.

קיים סיכון קטן לטעות - תוצאה שלילית כוזבת. זה אפשרי אם המחקר מתרחש בשלב הסופני של המחלה או ב"תקופת החלון".

משמש בשילוב עם בדיקות אחרות שיטת PCR(תגובת שרשרת פולימראז). הוא שונה רגישות יתרלנגיף, מה שעלול להוביל לשיעור גבוה של תוצאות חיוביות כוזבות.

אבחון בילדים שאמהותיהם נגועות ב-HIV

לבדיקה של ילדים כאלה יש מאפיינים משלה - נוגדנים של האם ל-HIV עשויים להיות נוכחים בדם של הילד, שחצה את השליה במהלך הלידה. הם יכולים להימשך עד 15-18 חודשים מיום לידת התינוק. אם אין נוגדנים כאלה, זו לא הוכחה של מאה אחוז שהילד אינו נגוע בנגיף.

ניתן לקבוע את האבחנה של זיהום ב-HIV במעבדה על ידי זיהוי נוגדנים ספציפיים לנגיף. עם רבים אחרים מחלות ויראליותנוכחות של נוגדנים מעידה על זיהום בעבר. עם זאת, מאז זיהום HIV מתפתח זיהום כרוני, אנשים סרו-חיוביים לא רק נגועים באופן פעיל, אלא גם מדבקים.

בדיקה סרולוגית לאיתור נוכחות של נוגדנים ל-HIV הפכה לזמינה נרחבת בשנת 1985. השיטה הנפוצה ביותר היא אנזימים מקושרים immunosorbent assay (ELISA), אך כיום מפותחים סוגים אחרים של בדיקות לנוכחות נוגדנים, כגון בדיקות צמיחת חלקיקים ו-"נקודה" ELISA. ניתן לבצע בדיקות במהירות ובקלות ואינן דורשות ציוד מורכב.

למרות שהבדיקות לעיל ב מעלות גבוהותרגישים, הם יכולים לתת תוצאות שגויות, ויש לאשר תוצאה חיובית נוספת על ידי בדיקה נוספת, כגון Western blotting (Western blot) או אימונופלואורסצנטי עקיף.

כמו כן, ניתן לקבוע ישירות אנטיגנים של HIV (וירוס או חלבון ויראלי) בזרע; התעשייה מייצרת ערכות נחוצותריאגנטים. מבחני אלו תוכננו במקור כניסיון לספק אינדיקציה מעבדתית לנוכחות זיהום במהלך החלון שבין זיהום לייצור נוגדנים, הנמשך בדרך כלל 4 עד 16 שבועות. בדיקות גילוי אנטיגן משמשות כיום באופן נרחב יותר לניטור תוצאות טיפול אנטי ויראליחולי איידס.

תוכניות סקר להידבקות ב-HIV (כלומר, בדיקת כל האוכלוסייה, או קבוצות בודדותאוכלוסיה כדי לקבוע זיהום או מחלה) יכולה לעזור:

• למנוע העברת הנגיף דרך דם ומוצרי דם, זרע, רקמות או איברים להשתלה;
• להשיג מידע אפידמיולוגי על השכיחות והשכיחות של HIV.

בכל פעם שנדון בתוכנית מיון, יש לציין בבירור את כל השאלות המצוינות בהצהרת ארגון הבריאות העולמי (נספח 4). תוכניות מעוצבות בצורה גרועה ומיושמות בצורה גרועה עלולות לפגוע בבריאות הציבור ולבזבוז משאבים. צורכי בריאות הציבור וזכויות האדם משרתים בצורה הטובה ביותר על ידי בחינה מדוקדקת של מגוון נושאים טכנולוגיים, לוגיסטיים ונושאים חברתיים, משפטיים ואתיים לפני קבלת החלטה להמשיך בתוכנית מיון.

לבדיקות חובה ל-HIV יש תפקיד מוגבל מאוד בתכניות מניעה ובקרה של איידס.

בדיקה שגרתית של תורמים מסייעת במניעת העברת HIV דרך דם, זרע או תאים, רקמות ואיברים אחרים. חלק ממיון כזה הוא הסכמה מדעת של הפרט והתייעצויות, שיש לשמור עליהן בסודיות.

זיהוי של אנשים סרו-חיוביים באמצעות סקר מאפשר לקבוע את הסוג האפידמיולוגי של HIV, הדרוש להערכת אזורים ואוכלוסיות הזקוקות לתוכניות חינוכיות מיוחדות או לשירותי מניעה אחרים. סקרים אלו צריכים להתבצע תוך שימוש בשיטות שאינן מאיימות על כיבוד זכויות האדם. הם צריכים להתבצע במהלך הייעוץ, בין אם בהסכמת אדם מיודע, תוך כיבוד סודיות, או באופן אנונימי וחופשי (ללא רישום נתונים אישיים מזהים אחרים).

בדיקת איידס מרצון יכולה להיות חלק מטיפולי בריאות עבור חשד למחלות הקשורות ל-HIV, ויכולות להשתלב עם מידע, חינוך, ייעוץ ושירותי תמיכה אחרים כדי לקדם שינוי התנהגות בר-קיימא. בבדיקת HIV מרצון, קבלת הסכמה מאדם מושכל והיכולת לקבל ייעוץ תוך שמירה על סודיות חשובים מאוד. שירותי בדיקת HIV מרצון צריכים להיות זמינים באופן נרחב כחלק מתכניות מניעה ובקרה של איידס ויש להקל על הגישה לשירותים כאלה.