FISH-värjäysmenetelmä (fluoresoiva in situ -hybridisaatio) kehitettiin Livermore National Laboratoryssa (USA) vuonna 1986. Tämä on pohjimmiltaan uusi menetelmä kromosomien tutkimiseen - menetelmä fluoresoivan DNA:n havaitsemiseksi in situ -hybridisaatiolla erityisillä molekyylikoettimilla. Menetelmä perustuu kromosomaalisen DNA:n kykyyn sitoutua tietyissä olosuhteissa DNA-fragmentteihin (DNA-koettimiin), jotka sisältävät kromosomaaliselle DNA:lle komplementaarisia nukleotidisekvenssejä. DNA-koettimet on esileimattu erityisillä aineilla (esimerkiksi biotiinilla tai digoksigeniinillä). Leimattuja DNA-koettimia käytetään hybridisaatiota varten valmistettujen metafaasikromosomien sytogeneettisiin valmisteisiin. Kun hybridisaatio on tapahtunut, valmisteet käsitellään erityisillä fluoresoivilla väriaineilla, jotka on konjugoitu aineisiin, jotka voivat sitoutua selektiivisesti biotiiniin tai digoksigeniiniin. Jokaisella kromosomilla on tietty väri. Hybridisaatio voidaan suorittaa myös radioaktiivisesti leimatuilla koettimilla. Sytogeneettinen analyysi suoritetaan fluoresoivassa mikroskoopissa ultraviolettivalossa.

FISH-menetelmää käytetään pienten deleetioiden ja translokaatioiden havaitsemiseen. Kromosomivaihdot (translokaatiot ja disentriset) eriväristen kromosomien välillä tunnistetaan helposti monivärisiksi rakenteiksi.

Työ loppu -

Tämä aihe kuuluu:

Oppimismoduuli. solu biologia

Korkea-asteen ammatillinen koulutus.. Bashkir State Medical University.. Terveys- ja sosiaalinen kehitysministeriö..

Jos tarvitset lisämateriaalia tästä aiheesta tai et löytänyt etsimääsi, suosittelemme käyttämään hakua teostietokannassamme:

Mitä teemme saadulla materiaalilla:

Jos tämä materiaali osoittautui hyödylliseksi sinulle, voit tallentaa sen sivullesi sosiaalisissa verkostoissa:

twiittaa

Kaikki tämän osion aiheet:

Oppimismoduuli. Yleisen ja lääketieteellisen genetiikan perusteet
(ohjeet opiskelijoille) Akateeminen kurinalaisuus Biologia Valmistelusuuntaan General Medicine Co.

Laboratoriotöiden rekisteröintisäännöt
Välttämätön elementti esineen mikroskooppisessa tutkimuksessa on sen luonnos albumissa. Luonnoksen tarkoituksena on ymmärtää paremmin ja kiinnittää muistiin kohteen rakenne, yksittäisten rakenteiden muoto.

Käytännön työ
1. Väliaikaisen valmisteen "Sipulikalvosolut" valmistaminen Jotta voit valmistaa väliaikaisen valmisteen sipulikalvolla, poista

Sytoplasmisten kalvojen rakenne. Kalvojen kuljetustoiminto
2. Oppimistavoitteet: Tietää: - universaalin biologisen kalvon rakenteen - aineiden passiivisen kuljetuksen kalvojen läpi

Eukaryoottisolujen rakenne. Sytoplasma ja sen komponentit
2. Oppimistavoitteet: Tunne: - organisaation piirteet eukaryoottisolut- sytoplasman organellien rakenne ja toiminta

Organellit, jotka osallistuvat aineiden synteesiin
Missä tahansa solussa suoritetaan sille ominaisten aineiden synteesi, jotka ovat joko rakennusmateriaaleja uusille rakenteille kuluneiden sijasta tai entsyymejä, jotka osallistuvat biokemiallisiin reaktioihin.

Organellit, joilla on suojaava ja ruoansulatustoiminto
Lysosomit Nämä organellit ovat olleet tunnettuja 1950-luvulta lähtien, jolloin belgialainen biokemisti de Duve löysi maksasoluista pieniä rakeita, jotka sisälsivät hydrolyyttisiä aineita.

Solun energiahuoltoon osallistuvat organellit
Suurin osa solujen toiminnoista liittyy energian kulutukseen. Elävä solu muodostaa sen jatkuvasti tapahtuvien redox-prosessien seurauksena, muodostaen

Organellit osallistuvat solujen jakautumiseen ja liikkumiseen
Näitä ovat solukeskus ja sen johdannaiset - värekarvot ja flagella. Solukeskus Solukeskus löytyy eläinsoluista ja joistakin

Käytännön työ nro 1
1. Pysyvän valmisteen "Golgi-kompleksi soluissa" mikroskooppinen analyysi selkäydin ganglio» Valmisteessa nimetyt hermosolut

Ribosomit
Havaittu käyttämällä elektronimikroskopia pro- ja eukaryoottien kaikkien organismien soluissa niiden koko on 8-35 nm, ne ovat endoplasmisen retikulumin ulkokalvon vieressä. Toteutettu ribosomeilla

Rakeinen endoplasminen verkkokalvo
Tutki karkean endoplasmisen retikulumin submikroskooppista rakennetta elektronimikrokuvassa. Kolme aluetta haimasolujen haiman nälkää bat. Ennen

Sytoplasmiset mikrotubulukset
Sytoplasmiset tubulukset löytyvät kaikkien eläin- ja kasviorganismien soluista. Nämä ovat lieriömäisiä, rihmamaisia ​​muodostelmia, joiden pituus on 20-30 mikronia, 1

Mitoottinen aktiivisuus kudoksissa ja soluissa
Tällä hetkellä on tutkittu monien eläin- ja kasvikudosten mitoottisia syklejä ja mitoottisen aktiivisuuden muotoa. Kävi ilmi, että jokaisella kudoksella on tietty mitoottinen aktiivisuus. Tietoja m

Mitoosi (epäsuora jakautuminen) sipulin juurisoluissa
Etsi mikroskoopin pienellä suurennuksella sipulin kärjen lisääntymisvyöhyke, aseta näkökentän keskelle alue, jossa on selvästi näkyvissä aktiivisesti jakautuvia soluja. Aseta sitten lääke suureksi

Amitoosi (suora jakautuminen) hiiren maksasoluissa
Tutki hiiren maksasoluja suurella suurennuksella mikroskoopilla. Valmistuksessa soluilla on monitahoinen muoto. Jakautumattomissa soluissa tuma on pyöristetty ytimellä. Jakautuessaan soluissa, jotka ovat alkaneet

Ascaris ovum synkaryon
Etsi mikroskoopilla pienellä suurennuksella sukulamadon kohdun osa, joka on täynnä munarakkuloita. Katso näytettä suurella suurennuksella. Munan sytoplasma kutistuu ja hilseilee

DNA:n ja RNA:n rakenne ja toiminnot. Geenien rakenne ja geeniekspression säätely pro- ja eukaryooteissa. Proteiinin biosynteesin vaiheet
2. Oppimistavoitteet: Tiedä: - kemiallinen koostumus ja nukleiinihappojen järjestäytymisen piirteet; - erot DNA:n ja RNA:n välillä;

Ominaisuuksien periytymismallit monohybridiristeyksessä. Alleelisten geenien vuorovaikutuksen tyypit
2. Oppimistavoitteet: Tietää: - monohybridiristeytysmallit; - Mendelin I ja II lait; - vuorovaikutuksen tyypit

Ominaisuuksien itsenäisen periytymisen laki. Ei-alleelisten geenien vuorovaikutuksen tyypit
2. Oppimistavoitteet: Tuntea: - di- ja polyhybridiristeytysmallit; - III Mendelin laki; - vuorovaikutuksen tyypit

Muuttuvuus elävän ominaisuutena, sen muoto. Fenotyyppinen (muunnos tai ei-perinnöllinen) vaihtelu. Genotyyppinen vaihtelu
2. Oppimistavoitteet: Tietää: - vaihtelevuuden päämuodot; - saada ajatuksia tunnistuksen läpäisevyydestä ja ilmaisukyvystä

Opiskelijoiden itsenäinen työskentely opettajan johdolla
Käytännön työ Ominaisuuden vaihteluasteen ja vaihtelukertoimen määrittäminen ympäristöolosuhteiden mukaan.

Sukutaulu-analyysi
Kaikki geneettiset menetelmät eivät sovellu ihmisten tiettyjen ominaisuuksien periytymisen analysointiin. Tutkimalla useiden sukupolvien fenotyyppejä on kuitenkin mahdollista selvittää perinnön luonne

Kaksoismenetelmä ihmisen genetiikan tutkimiseen
Kaksoismenetelmällä arvioidaan geneettisten ja ympäristötekijöiden suhteellista roolia tietyn piirteen tai sairauden kehittymisessä. Kaksoset ovat monotsygoottisia (identtisiä) ja kaksitsygoottisia (kertaa

Dermatoglyfinen menetelmä ihmisen genetiikan tutkimiseen
Dermatoglyfianalyysi on sormien, kämmenten ja jalkojen papillaaristen kuvioiden tutkimus. Näillä ihoalueilla on suuria ihon papilleja ja niitä peittävä orvaskesi muodostaa g

Sytogeneettinen menetelmä ihmisen genetiikan tutkimuksessa
Monien ihmisen perinnöllisen patologian tutkimusmenetelmien joukossa sytogeneettisellä menetelmällä on tärkeä paikka. Sytogeneettisen menetelmän avulla on mahdollista analysoida perinnöllisyyden aineellisia perusteita

Kromosomisarjan tutkimus
Se voidaan suorittaa kahdella tavalla: 1) suoralla menetelmällä - metafaasikromosomien tutkimus jakautuvissa soluissa, esim. luuydintä(On

Käytännön työ
1. Esittelyvalmisteen "Ihmisen karyotyyppi" katsominen sytogeneettisessä laboratoriossa. X90 suurennuksella leukosyytit näkyvät näkökentässä

Karyotyyppianalyysi potilailla, joilla on kromosomisairauksia (valokuvista)
Nro 1. kromosomin 13 trisomia (Pataun oireyhtymä). Karyotyyppi 47, +13. Nro 2. trisomia kromosomissa 18 (Edwardsin oireyhtymä). Karyotyyppi 47, +18. Nro 3. kromosomin 21 trisomia (Downin tauti).

Sormenjälkianalyysin tekeminen
Omien sormenjälkien tekemiseen tarvitset seuraavat välineet: valokuvarulla, 20x20 cm2 lasi, vaahtokumipala, painomustetta (tai vastaavaa

Karyotyypin sytogeneettinen analyysi (perustuu metafaasilevyjen mikrovalokuviin)
1. Piirrä metafaasilevy. 2. Laske kaikki yhteensä kromosomit. 3. Tunnista ryhmien A (3 paria suuria metasentrisiä kromosomeja), B (kaksi paria suuria) kromosomit

Express-menetelmä X-sukupuolikromatiinin tutkimiseen suun limakalvon epiteelin ytimissä
Ennen raapimista potilasta pyydetään puremaan posken limakalvoa hampaillaan ja pyyhkimään posken sisäpinta sideharsolla. Tämä menettely on tarpeen tuhoutuneiden solujen poistamiseksi, esim

Väestötilastollinen menetelmä
Populaatio on joukko saman lajin yksilöitä, jotka asuvat samalla alueella pitkään, suhteellisen erillään muista tämän lajin yksilöryhmistä, risteytyvät vapaasti keskenään ja antavat

Biokemiallinen menetelmä
Biokemialliset menetelmät perustuvat entsyymijärjestelmien aktiivisuuden tutkimukseen (joko itse entsyymin aktiivisuuden tai tämän entsyymin katalysoimien reaktion lopputuotteiden määrän perusteella). Biokemikaalit

Molekyyligeneettinen menetelmä
Kaikki molekyyligeneettiset menetelmät perustuvat DNA:n rakenteen tutkimukseen. DNA-analyysin vaiheet: 1. DNA:n eristäminen soluista, jotka sisältävät tumia (veri

DNA-synteesin polymeraasiketjureaktio
Polymeraasi ketjureaktio(PCR) - menetelmä DNA:n monistamiseksi (lisätämiseksi) in vitro, jonka avulla voidaan muutaman tunnin sisällä tunnistaa ja monistaa kiinnostava DNA-fragmentti 80:stä

Nro Koko nimi Genotyyppi Ivanov AA Petrov Aa

Havaittu genotyyppi ja alleelifrekvenssit
Genotyypit, alleelit Tapausten lukumäärä Taajuus (osuuksina) АА 1/5 = 0,2 Аа

Havaitut ja odotetut genotyyppien ja alleelien esiintymistiheydet
Havaittu tapausten lukumäärä Havaittu taajuus AA:n odotettu taajuus (p2)

Havaittu genotyyppi ja alleelifrekvenssit
№ p / p Kyky rullata kieli putkeen Genotyypit Osaan (kyllä) A_

rintasyöpä - vaarallinen sairaus, joka on tilastojen mukaan ensimmäinen naisten syöpäsairauksien joukossa. Riski sairastua tähän sairauteen kasvaa kaikilla yli 40-vuotiailla naisilla, ja se voi johtua useista muista tekijöistä. Rintasyövän todennäköisimpiä syitä ovat liikalihavuus, geneettinen tai perinnöllinen taipumus, varhainen aloitus kuukautiset ja niiden myöhäinen päättyminen, hormoni- tai sädehoito.

Lisäksi sairastumisriski kasvaa synnyttämättömillä ja jo syöpää sairastaneilla naisilla. Myös miehille voi kehittyä rintasyöpä.

Diagnoosin tyypit ja menetelmät

Ensimmäinen askel rintasyövän diagnosoinnissa on rutiinitarkastus mammoloogin toimesta. Yli 40-vuotiaiden naisten tulee käydä nämä tarkastukset vähintään kerran kahdessa vuodessa. Lääkäri suorittaa rintarauhasten visuaalisen tutkimuksen, tunnustelun ja mammografian. Visuaaliset merkit taudin kehittymisestä voivat olla:

yleistä tietoa

Rintojen röntgenkuvaus (mammografia) mahdollistaa kasvaimen läsnäolon, koon ja sijainnin määrittämisen. Saatujen tulosten tarkkuuden parantamiseksi käytetään varjoaineen lisäämistekniikkaa. Jos kasvain on jo havaittu, käytetään pneumokystografiamenetelmää - kasvainnesteen poistamista ja ilman syöttämistä onteloon. Jos kasvaimen läsnäoloa ei ole määritelty, käytetään duktografiaa - varjoaineen lisäämistä maitokanaviin.

Näiden menetelmien avulla voit visualisoida muodostumien esiintymisen maitorauhasen kudoksissa.

Jos kasvain ilmenee myös mammografiassa, potilaalle lähetetään lähete diagnostisiin toimenpiteisiin:

Ultraäänellä lääkäri voi erottaa kasvaimen kystasta ja selvittää muodostelman sijainnin. Sen jälkeen siitä otetaan kudosnäyte biopsiaa varten. Biopsian avulla voit selvittää muodostumisen tyypin: hyvänlaatuinen vai pahanlaatuinen, ja myös määrittää, onko kasvain hormoniriippuvainen. Näiden tietojen avulla lääkäri voi päättää hoitostrategiasta, mutta niiden avulla ei aina ole mahdollista määrittää vaihetta. Usein jopa kaikilla tarvittavilla diagnostisilla toimenpiteillä se on mahdollista määrittää vasta leikkauksen jälkeen.

Histologisten tutkimusten mekanismi

Kudosbiopsia tehdään sekä ennen leikkausta että sen jälkeen. Toimenpide suoritetaan koulutuksen lokalisoinnin selvittämisen jälkeen.

Biopsia on kudospalan poistamisprosessi, ja sen tutkimusta kutsutaan "histologiseksi tutkimukseksi" tai yksinkertaisesti "histologiaksi".

Lääkäri ottaa erikoisneulalla pienen määrän kudosta kasvaimesta tai potilaan kehosta jo poistettu kasvain lähetetään histologiseen tutkimukseen. Sitten kudosfragmentti värjätään ja käsitellään erityisellä tavalla kontrastin lisäämiseksi ja sen tutkimisen helpottamiseksi. Asiantuntija tutkii viipaleen mikroskoopilla ja antaa johtopäätöksen kasvaimen muodostumisen laadusta. Paljon tässä tutkimuksessa riippuu päätelmän antavan laborantin tarkkaavaisuudesta ja pätevyydestä.

Tähän liittyvä tutkimus on immunohistokemia. Yleensä sitä voidaan kutsua myös "histologiaksi", koska. menetelmä perustuu kudosten tutkimukseen, mutta immunohistokemia on edistyneempi analyysimenetelmä. Tämän tutkimuksen kudos värjätään myös erityisillä reagensseilla, jotka eivät vain lisää visuaalista kontrastia, vaan myös yhdistyvät ("etiketti") vasta-aineisiin erityisellä tavalla, mikä mahdollistaa kasvaimen lisää ominaisuuksien määrittämisen. Reaktio tapahtuu tässä tapauksessa paljon nopeammin, minkä ansiosta voit saada nopeasti analyysin tulokset.

Immunohistokemian avulla ei voida ainoastaan ​​selvittää kasvaimen tyyppiä, vaan myös suunnitella potilaan hoitostrategia, joka perustuu kasvainkudoksen herkkyyden havaitsemiseen. erilaisia ​​tyyppejä terapeuttinen vaikutus. Lisäksi tämän tutkimuksen suorittaminen on mahdollisimman pitkälle automatisoitu, mikä minimoi inhimillisestä tekijästä johtuvan diagnostisen virheen todennäköisyyden.

On myös nykyaikaisia ​​diagnostisia toimenpiteitä, joiden avulla voidaan havaita kasvaimen esiintyminen kehossa: tämä on veren spektrianalyysi, immunologinen (biokemiallinen) analyysi, kasvainkudoksen FISH-testi. Geneettisen verikokeen avulla kuka tahansa nainen voi varmistaa rintasyövän esiintymisen edellytysten olemassaolon tai puuttumisen. CT:n ja MRI:n avulla voit määrittää tarkasti kasvaimen sijainnin ja seurata sen kehityksen dynamiikkaa, arvioida kasvaimen rakennetta.

Kuinka tunnistaa syöpä verikokeella?

Verikokeen määrää pääsääntöisesti lääkäri ultraäänitutkimuksen jälkeen. On tilanteita, joissa potilas luovuttaa omasta aloitteestaan ​​verta ikkunamarkkereihin tai geneettiseen analyysiin selvittääkseen, onko hänellä taipumusta rintasyöpään. Joissakin tapauksissa yleinen verikoe voi olla syynä ottaa yhteyttä onkologiaan (sekä sinetin tunnustelu tai syövän visuaaliset merkit).

Biokemiallinen analyysi

Veri tutkimusmateriaalina mahdollistaa seuraavat diagnostiset toimenpiteet:

Samanaikaisesti vain kahta ensimmäistä analyysiä voidaan kutsua erikoistuneiksi syövän määritysmenetelmiksi, joista toinen on enemmän ennaltaehkäisevä kuin operatiivinen toimenpide. Kaksi muuta verikoetta tehdään pääasiassa ennen leikkausta elimistön tilan ja prosessin laajuuden määrittämiseksi. Kuitenkin, kuten jo mainittiin, jos tiiviste tuntuu rinnassa ja samaan aikaan yleinen verikoe osoittaa enemmän kuin kaksi negatiivista diagnostista kerrointa, tämä on syy ottaa yhteyttä asiantuntijaan. Negatiiviset kertoimet ovat normin ulkopuolella olevia indikaattoreita tietyissä veren koostumuksen parametreissa.

Biokemiallinen verikoe paljastaa kasvainsolujen vasta-aineiden läsnäolon. Tällaisia ​​elimiä kutsutaan kasvainmarkkereiksi. Kasvainmerkkien määrä ja tyyppi riippuvat erityispiirteistä (lokalisaatio) syöpäkasvain ja sen kehitysvaiheet. Kasvainmarkkereita ovat:

Rintasyövän tapauksessa hoitavaa lääkäriä kiinnostaa ensisijaisesti CA-15-3 kasvainmarkkerin läsnäolo, koska sen esiintyminen veressä viittaa yksiselitteisesti rintasyöpäsairauteen. Tuloksen purkaminen kestää keskimäärin yhden päivän. Biokemiallinen analyysi suoritetaan useita kertoja taudin aikana. Hänelle otetaan veri suonesta aamulla tyhjään vatsaan. Kaksi viikkoa ennen testiä potilas lopettaa kaiken ottamisen lääkkeet(hoitajan määrittelee). Kaksi päivää ennen verenluovutusta et voi ottaa alkoholia, rasvaisia ​​ja paistettuja ruokia.

Tuntia ennen toimenpidettä et voi tupakoida, ja on toivottavaa vähentää henkistä stressiä. Veri päälle biokemiallinen analyysi eivät yleensä anna periksi heti säteilyn ja fysioterapian jälkeen.

Geneettisten tekijöiden määritelmä

Ennen kuin puhutaan geneettisestä verikokeesta, on korostettava eroa "geneettisen" ja "perinnöllisen" käsitteiden välillä. geneettinen tekijä syövän esiintyminen on laajempi käsite, joka ei tarkoita vain rintasyöpää sairastavien sukulaisten läsnäoloa, vaan myös spesifistä geenimutaatiota, jonka vuoksi tämän taudin riski kasvaa.

Perinnöllinen tekijä viittaa mahdolliseen rintasyövän riskiin, joka perustuu sukuhistoriaan. Samanaikaisesti eivät vain naiset, vaan myös miehet voivat saada mutanttigeenin, mutta sen kantaja ei välttämättä sairastu.

Jokainen nainen voi käydä läpi geneettisen analyysin. Tätä suositellaan erityisesti niille, joiden lähisukulaisilla on ollut rintasyöpä. Ennen verenluovutusta analysointia varten genetiikan asiantuntijan tulee keskustella potilaan kanssa, joka selittää tulosten tulkitsemisen vivahteet. Potilaalta ei vaadita erityistä valmistelua ennen verenluovutusta.

Vastaanoton tapauksessa positiivinen tulos mutaatioita BRCA-geeneissä, mutta muiden puuttuessa ahdistuneisuusoireita, ei ole syytä paniikkiin. Naisille, joilla on mutaatio näissä geeneissä, voidaan suositella säännöllisiä itsetarkastuksia ja fyysisiä tutkimuksia ennaltaehkäisevänä toimenpiteenä. 40 vuoden jälkeen on järkevää harkita munasarjojen ja rintojen poistamista, nuoremmille naisille, jotka eivät suunnittele lapsia tulevaisuudessa, suositellaan joskus ehkäisyä. Päätös näistä toimenpiteistä on täysin naisen harteilla ja vaatii harkittua lähestymistapaa ja lääkärien kuulemista.

Uusimmat diagnostiset menetelmät

Spektrianalyysi veri paljastaa kasvaimien esiintymisen kehossa jopa 93 prosentin todennäköisyydellä. Tämä on suhteellisen halpa diagnostinen menetelmä, joka perustuu veren seerumin infrapunasäteilytykseen ja sen molekyylikoostumuksen analysointiin.

Johtopäätös veren spektrianalyysistä on annettu "läsnäolo-poissaolo" -periaatteella, ja sen tarkoituksena on tunnistaa useimmat pahanlaatuisten kasvainten tyypit. Tämä tutkimus pystyy myös määrittämään rintasyövän kehitysvaiheen. Tulosten tulkinta tapahtuu laboratoriossa, eikä se vaadi ylimääräistä lääkärin lausuntoa.

Veren luovuttamiseksi spektrianalyysiin on lääkitys suoritettava loppuun 2 kuukautta ennen toimenpidettä. Röntgen- tai muun altistuksen sekä kemoterapian hetkestä on kuluttava vähintään 3 kuukautta. Lisäksi nainen ei saa olla raskaana tai kuukautisilla verinäytteen ottohetkellä. Verinäytteet otetaan aamulla tyhjään vatsaan. Veren spektrianalyysi kestää keskimäärin 12 työpäivää.

Yksi uusimmat menetelmät syöpien diagnoosi on niin kutsuttu "kalatesti" (FISH, fluoresoiva hybridisaatio). Sen tehokkuudesta keskustellaan edelleen, pääkysymys sen toteutettavuudesta on kallis tutkimusmenettely. Menetelmän ydin koostuu solufragmenttien leimaamisesta fluoresoivalla koostumuksella ja solujen jatkotutkimuksesta mikroskooppisesti. Sen mukaan, mitkä geneettisen materiaalin osat leimatut fragmentit ovat koskettaneet, voidaan ymmärtää, onko potilaalla taipumusta syöpään ja mitkä hoitomenetelmät ovat merkityksellisiä tietyssä tapauksessa.

FISH-testi ei vaadi täysin kypsiä soluja, joten tämä analyysi on paljon nopeampi kuin muut laboratoriokokeet. Lisäksi FISH-menetelmän avulla voit tarkkailla geneettisiä vaurioita selvemmin, mikä ei ole mahdollista muilla analyyseillä. FISH-testiä käytetään useimmiten erityisesti rintasyövän havaitsemiseen, mutta se toimii myös joidenkin muiden syöpien havaitsemiseen.

FISH-testin haittoja ovat sen korkeiden kustannusten lisäksi, että se on mahdotonta työskennellä joidenkin kromosomien osien kanssa merkkien spesifisyyden vuoksi. Lisäksi FISH-testi jättää huomiotta tietyn tyyppiset mutaatiot ja hajoamiset. geneettinen koodi, mikä voi olla tärkeä puute diagnoosissa. Vertailevat FISH-tutkimukset halvemman IHC-testin kanssa eivät paljastaneet merkittäviä etuja määritettäessä syöpäsolujen herkkyyttä Herceptinille. FISH-testi on kuitenkin tällä hetkellä nopein korkean tarkkuuden syövän diagnosointimenetelmistä.

Johtaja
"Onkogenetiikka"

Zhusina
Julia Gennadievna

Valmistunut Voronežin osavaltion lastenlääkärin tiedekunnasta lääketieteen yliopisto niitä. N.N. Burdenko vuonna 2014.

2015 - harjoittelu terapiassa Voronežin osavaltion lääketieteellisen yliopiston tiedekuntaterapian osaston perusteella. N.N. Burdenko.

2015 - sertifiointikurssi erikoisuudella "Hematologia" Moskovan hematologisen tutkimuskeskuksen pohjalta.

2015-2016 – VGKBSMP:n nro 1 terapeutti.

2016 - hyväksyi väitöskirjan aiheen kandidaatin tutkintoon lääketiede"opiskelua kliininen kulku sairaus ja ennuste potilailla, joilla on krooninen obstruktiivinen keuhkosairaus ja aneeminen oireyhtymä. Yli 10 julkaisun toinen kirjoittaja. Osallistuja genetiikan ja onkologian tieteellisiin ja käytännön konferensseihin.

2017 - syventävä koulutuskurssi aiheesta: "Geneettisten tutkimusten tulosten tulkinta potilailla, joilla on perinnöllisiä sairauksia."

Vuodesta 2017 lähtien residenssi "Genetics" erikoisalalla RMANPO:n perusteella.

Johtaja
"Genetiikka"

Kanivets
Ilja Vjatšeslavovitš

Kanivets Ilya Vyacheslavovich, geneetikko, lääketieteen kandidaatti, lääketieteellisen geneettisen keskuksen Genomed genetiikan osaston johtaja. Venäjän lääketieteellisen genetiikan osaston assistentti lääketieteen akatemia ammatillista jatkokoulutusta.

Hän valmistui Moskovan osavaltion lääketieteellisen ja hammaslääketieteen yliopiston lääketieteellisestä tiedekunnasta vuonna 2009, ja vuonna 2011 hän suoritti residenssin "Genetics" erikoisalalla saman yliopiston lääketieteellisen genetiikan laitoksella. Vuonna 2017 hän puolusti väitöskirjaansa lääketieteen kandidaatin tutkintoon aiheesta: DNA-segmenttien (CNV) kopiolukuvariaatioiden molekyylidiagnoosi lapsilla, joilla on synnynnäisiä epämuodostumia, fenotyyppiä ja/tai poikkeavuuksia. kehitysvammaisuus kun käytetään suuritiheyksisiä SNP-oligonukleotidimikrosiruja"

Vuosina 2011-2017 hän työskenteli geneetikkona Lastenklinikalla. N.F. Filatov, liittovaltion budjettitieteellisen laitoksen "Lääketieteellinen geneettinen tutkimuskeskus" tieteellinen neuvoa-antava osasto. Vuodesta 2014 tähän päivään hän on vastannut MHC Genomedin genetiikkaosastosta.

Päätoimialat: perinnöllisten sairauksien ja synnynnäisten epämuodostumien, epilepsiapotilaiden diagnosointi ja hoito, lääketieteellinen geneettinen neuvonta perheille, joissa on syntynyt perinnöllinen sairaus tai epämuodostumia, synnytystä edeltävä diagnostiikka. Konsultoinnin aikana tehdään kliinisen tiedon ja sukututkimuksen analyysi kliinisen hypoteesin ja tarvittavan geneettisen testauksen määrän määrittämiseksi. Kyselyn tulosten perusteella aineisto tulkitaan ja saatu tieto selitetään konsulteille.

Hän on yksi Genetics School -projektin perustajista. Pitää säännöllisesti esitelmiä konferensseissa. Hän luennoi geneetikoille, neurologeille ja synnytyslääkäreille-gynekologeille sekä perinnöllisiä sairauksia sairastavien potilaiden vanhemmille. Hän on kirjoittanut ja kirjoittanut yli 20 artikkelia ja arvostelua venäläisissä ja ulkomaisissa aikakauslehdissä.

Ammatillinen kiinnostuksen kohde on nykyaikaisten genominlaajuisten tutkimusten tuominen kliiniseen käytäntöön, niiden tulosten tulkinta.

Vastaanottoaika: ke, pe 16-19

Johtaja
"Neurologia"

Sharkov
Artem Aleksejevitš

Sharkov Artjom Aleksejevitš- neurologi, epileptologi

Vuonna 2012 hän opiskeli Daegu Haanu -yliopistossa Etelä-Koreassa kansainvälisessä ohjelmassa ”Oriental medicine”.

Vuodesta 2012 lähtien - osallistuminen tietokannan ja algoritmin järjestämiseen xGenCloud-geenitestien tulkitsemiseksi (https://www.xgencloud.com/, projektipäällikkö - Igor Ugarov)

Vuonna 2013 hän valmistui N.I.:n mukaan nimetyn Venäjän kansallisen lääketieteellisen tutkimusyliopiston pediatrisesta tiedekunnasta. Pirogov.

Vuodesta 2013 vuoteen 2015 hän opiskeli neurologian kliinisessä residenssissä liittovaltion budjettitieteellisessä laitoksessa "Scientific Center of Neurology".

Vuodesta 2015 lähtien hän on työskennellyt neurologina, tutkijana akateemikko Yu.E. Veltishchev GBOU VPO RNIMU niitä. N.I. Pirogov. Hän työskentelee myös neurologina ja lääkärinä video-EEG-monitoroinnin laboratoriossa A.I.:n nimen Epileptologian ja Neurologian keskuksen klinikoilla. A.A. Ghazaryan" ja "Epilepsiakeskus".

Vuonna 2015 hän opiskeli Italiassa koulussa "2nd International Residential Course on Drug Resistant Epilepsies, ILAE, 2015".

Vuonna 2015 jatkokoulutus - "Kliininen ja molekyyligenetiikka harjoittaville lääkäreille", RCCH, RUSNANO.

Vuonna 2016 jatkokoulutus - "Molekylaarigenetiikan perusteet" bioinformatiikan ohjauksessa, Ph.D. Konovalova F.A.

Vuodesta 2016 - laboratorion "Genomed" neurologisen suunnan johtaja.

Vuonna 2016 hän opiskeli Italiassa koulussa "San Servolon kansainvälinen jatkokurssi: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016".

Vuonna 2016 jatkokoulutus - "Innovatiiviset geenitekniikat lääkäreille", "Laboratoriolääketieteen instituutti".

Vuonna 2017 - koulu "NGS in Medical Genetics 2017", Moskovan valtion tieteellinen keskus

Tällä hetkellä johtaa Tieteellinen tutkimus epilepsiagenetiikan alalla prof. Dr. med. Belousova E.D. ja professori, d.m.s. Dadali E.L.

Lääketieteen kandidaatin tutkinnon väitöskirjan aihe "Varhaisten epileptisten enkefalopatioiden monogeenisten varianttien kliiniset ja geneettiset ominaisuudet" hyväksyttiin.

Päätoimialat ovat lasten ja aikuisten epilepsian diagnostiikka ja hoito. Kapea erikoistuminen - epilepsian kirurginen hoito, epilepsian genetiikka. Neurogenetiikka.

Tieteelliset julkaisut

Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. "Optimointi erotusdiagnoosi ja XGenCloud-asiantuntijajärjestelmän suorittaman geneettisen testauksen tulosten tulkinta tietyissä epilepsian muodoissa. Medical Genetics, nro 4, 2015, s. 41.
*
Sharkov A.A., Vorobjov A.N., Troitski A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. "Epilepsian leikkaus multifokaalisissa aivovaurioissa lapsilla, joilla on tuberkuloosiskleroosi." Tiivistelmät XIV Venäjän kongressista "INNOVATIIVISET TEKNOLOGIAT PEDIATRIASSA JA LASTENKIURGIASSA". Russian Bulletin of Perinatology and Pediatrics, 4, 2015. - s. 226-227.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. "Molekulaariset geneettiset lähestymistavat monogeenisen idiopaattisen ja oireisen epilepsian diagnosointiin". Tiivistelmä XIV Venäjän kongressista "INNOVATIIVISET TEKNOLOGIAT PEDIATRIASSA JA LASTENKIURGIASSA". Russian Bulletin of Perinatology and Pediatrics, 4, 2015. - s. 221.
*
Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. "Harvinainen variantti tyypin 2 varhaisesta epileptisesta enkefalopatiasta, joka johtuu CDKL5-geenin mutaatioista miespotilaalla." Konferenssi "Epileptologia neurotieteiden järjestelmässä". Kokoelma konferenssimateriaalia: / Toimittanut: prof. Neznanova N.G., prof. Mikhailova V.A. Pietari: 2015. - s. 210-212.
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troitski A.A., Golovteev A.L., Poljakov A.V. KCTD7-geenin mutaatioiden aiheuttama tyypin 3 myoklonusepilepsian uusi alleelinen variantti // Lääketieteellinen genetiikka.-2015.- v.14.-№9.- s.44-47
*
Dadali E.L., Sharkova I.V., Sharkov A.A., Akimova I.A. "Kliiniset ja geneettiset piirteet ja nykyaikaiset menetelmät perinnöllisen epilepsian diagnosoimiseksi". Materiaalikokoelma "Molekyylibiologiset tekniikat lääketieteellisessä käytännössä" / Toim. vastaava jäsen RANEN A.B. Maslennikova. - Ongelma. 24.- Novosibirsk: Academizdat, 2016.- 262: s. 52-63
*
Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. Epilepsia tuberkuloosiskleroosissa. Teoksessa "Brain Diseases, Medical and Social Aspects", toimittanut Gusev E.I., Gekht A.B., Moskova; 2016; s. 391-399
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Sharkova I.V., Kanivets I.V., Konovalov F.A., Akimova I.A. Perinnölliset sairaudet ja oireyhtymät, joihin liittyy kuumekouristuksia: kliiniset ja geneettiset ominaisuudet ja diagnostiset menetelmät. //Russian Journal of Children's Neurology.- T. 11.- No. 2, s. 33-41. doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
*
Sharkov A.A., Konovalov F.A., Sharkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. Molekyyligeneettiset lähestymistavat epileptisten enkefalopatioiden diagnosointiin. Kokoelma abstrakteja "VI BALTIC CONGRESS ON LASTEN NEUROLOGIA" / Toimittanut professori Guzeva V.I. Pietari, 2016, s. 391
*
Hemisferotomia lääkeresistentissä epilepsiassa lapsilla, joilla on kahdenvälinen aivovaurio Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Kokoelma abstrakteja "VI BALTIC CONGRESS ON LASTEN NEUROLOGIA" / Toimittanut professori Guzeva V.I. Pietari, 2016, s. 157.
*
*
Artikkeli: Varhaisten epileptisten enkefalopatioiden genetiikka ja eriytetty hoito. A.A. Sharkov*, I.V. Sharkova, E.D. Belousova, E.L. Dadali. Journal of Neurology and Psychiatry, 9, 2016; Ongelma. 2doi:10.17116/jnevro20161169267-73
*
Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. "Epilepsian kirurginen hoito tuberkuloosiskleroosissa", toimittanut Dorofeeva M.Yu., Moskova; 2017; s. 274
*
Uusi kansainväliset luokitukset Kansainvälisen epilepsialiiton epilepsia ja epileptiset kohtaukset. Journal of Neurology and Psychiatry. C.C. Korsakov. 2017. V. 117. Nro 7. S. 99-106

Johtaja
"Prenataalinen diagnoosi"

Kiova
Julia Kirillovna

Vuonna 2011 hän valmistui Moskovan valtion lääketieteen ja hammaslääketieteen yliopistosta. A.I. Evdokimova yleislääketieteen tutkinnon Opiskeli residenssissä saman yliopiston lääketieteellisen genetiikan laitoksella genetiikan tutkinnolla

Vuonna 2015 hän suoritti työharjoittelun synnytys- ja gynekologiassa MGUPP:n liittovaltion budjetin korkea-asteen koulutuslaitoksen lääketieteellisen jatkokoulutuksen lääketieteellisessä instituutissa.

Vuodesta 2013 lähtien hän on ollut neuvonantajana DZM:n perhesuunnittelu- ja lisääntymiskeskuksessa.

Vuodesta 2017 hän on toiminut Genomed-laboratorion synnytysdiagnostiikan osaston päällikkönä.

Pitää säännöllisesti esitelmiä konferensseissa ja seminaareissa. Lukee luentoja eri erikoisalojen lääkäreille lisääntymis- ja synnytysdiagnostiikan alalta

Antaa lääketieteellistä geneettistä neuvontaa raskaana oleville naisille synnytysdiagnoosissa estääkseen lasten syntymän syntymävikoja sekä perheet, joilla oletettavasti perinnöllinen tai synnynnäinen patologia. Suorittaa DNA-diagnostiikan saatujen tulosten tulkinnan.

ERIKOISTAJAT

Latypov
Artur Shamilevich

Latypov Artur Shamilevich – korkeimman pätevyysluokan lääkäri geneetikko.

Valmistuttuaan Kazanin osavaltion lääketieteellisen instituutin lääketieteellisestä tiedekunnasta vuonna 1976 hän työskenteli useiden vuosien ajan ensin lääkärinä lääketieteellisen genetiikan toimistossa, sitten Tatarstanin tasavallan sairaalan lääketieteellisen geneettisen keskuksen johtajana, sairaalan pääasiantuntijana. Tatarstanin tasavallan terveysministeriö, Kazanin lääketieteellisen yliopiston osastojen opettaja.

Yli 20:n kirjoittaja tieteellisiä töitä lisääntymis- ja biokemiallisen genetiikan ongelmista, osallistunut useisiin kotimaisiin ja kansainvälisiin lääketieteellisen genetiikan ongelmia käsitteleviin kongresseihin ja konferensseihin. Hän toi keskuksen käytännön työhön raskaana olevien ja vastasyntyneiden massaseulonnan menetelmiä perinnöllisten sairauksien varalta, teki tuhansia invasiivisia toimenpiteitä epäiltyihin sikiön perinnöllisiin sairauksiin raskauden eri vaiheissa.

Vuodesta 2012 lähtien hän on työskennellyt lääketieteellisen genetiikan laitoksella raskausdiagnostiikan kurssilla Venäjän jatkokoulutusakatemiassa.

Tutkimusintressit – lasten aineenvaihduntasairaudet, synnytystä edeltävä diagnostiikka.

Vastaanottoaika: ke 12-15, la 10-14

Lääkärit otetaan vastaan ​​ajanvarauksella.

Geneetikko

Gabelko
Denis Igorevitš

Vuonna 2009 hän valmistui KSMU:n mukaan nimetystä lääketieteellisestä tiedekunnasta. S. V. Kurashova (erikoisuus "lääketiede").

Työharjoittelu liittovaltion terveys- ja sosiaalisen kehityksen viraston Pietarin lääketieteellisessä jatkokoulutuksessa (erikoisuus "Genetiikka").

Harjoittelu terapiassa. Ensisijainen uudelleenkoulutus erikoisalalla " Ultraäänidiagnostiikka". Vuodesta 2016 lähtien hän on työskennellyt perussäätiöiden osaston työntekijänä kliininen lääke Lääketieteen ja biologian perusinstituutti.

Ammatillinen kiinnostuksen kohde: synnytystä edeltävä diagnoosi, nykyaikaisten seulonta- ja diagnostisten menetelmien käyttö sikiön geneettisen patologian tunnistamiseksi. Perinnöllisten sairauksien uusiutumisriskin määrittäminen perheessä.

Osallistuja tieteellisiin ja käytännön konferensseihin genetiikan ja synnytystaudin ja gynekologian alalta.

Työkokemusta 5 vuotta.

Neuvonta ajanvarauksella

Lääkärit otetaan vastaan ​​ajanvarauksella.

Geneetikko

Grishina
Christina Aleksandrovna

Vuonna 2015 hän valmistui Moskovan valtion lääketieteellisestä ja hammaslääketieteen yliopistosta yleislääketieteen tutkinnon. Samana vuonna hän aloitti residenssin erikoisalalla 30.08.30 "Genetiikka" liittovaltion budjettitieteellisessä laitoksessa "Medical Genetic Research Center".
Hänet palkattiin monimutkaisten perinnöllisten sairauksien molekyyligenetiikan laboratorioon (päällikkö - biologisten tieteiden tohtori Karpukhin A.V.) maaliskuussa 2015. Syyskuusta 2015 lähtien hänet on siirretty tutkijan tehtävään. Hän on kirjoittanut ja mukana kirjoittamassa yli 10 kliinistä genetiikkaa, onkogenetiikkaa ja molekyylionkologiaa käsittelevää artikkelia ja tiivistelmää venäläisissä ja ulkomaisissa aikakauslehdissä. Säännöllinen osallistuja lääketieteellistä genetiikkaa käsitteleviin konferensseihin.

Tieteelliset ja käytännön kiinnostuksen kohteet: geneettinen lääketieteellinen neuvonta potilaille, joilla on perinnöllinen oireyhtymä ja monitekijäinen patologia.

Geneetikon konsultaatio antaa sinulle vastauksen seuraaviin kysymyksiin:

Ovatko lapsen oireet merkkejä perinnöllinen sairaus mitä tutkimusta tarvitaan syyn tunnistamiseen tarkan ennusteen määrittäminen suosituksia synnytystä edeltävän diagnoosin suorittamiseksi ja tulosten arvioimiseksi kaikki mitä sinun tulee tietää perhesuunnittelusta IVF-suunnitteluneuvonta kenttä- ja verkkokonsultaatiot

osallistui tieteellis-käytännölliseen kouluun "Innovatiiviset geenitekniikat lääkäreille: sovellus hoitokäytäntö", Euroopan ihmisgenetiikkayhdistyksen (ESHG) konferenssit ja muut ihmisgenetiikalle omistetut konferenssit.

Tarjoaa lääketieteellistä geneettistä neuvontaa perheille, joilla epäillään perinnöllistä tai synnynnäistä patologiaa, mukaan lukien monogeeniset sairaudet ja kromosomipoikkeavuuksia, määrittää laboratoriogeneettisten tutkimusten käyttöaiheet, tulkitsee DNA-diagnostiikan tuloksia. Neuvoo raskaana olevia naisia ​​synnytystä edeltävässä diagnostiikassa synnynnäisten epämuodostumien lasten syntymän estämiseksi.

Geneetikko, synnytyslääkäri-gynekologi, lääketieteen kandidaatti

Kudrjavtseva
Elena Vladimirovna

Geneetikko, synnytyslääkäri-gynekologi, lääketieteen kandidaatti.

Lisääntymisneuvonnan ja perinnöllisen patologian asiantuntija.

Valmistunut Ural State Medical Academysta vuonna 2005.

Synnytys- ja gynekologian residenssi

Harjoittelu erikoisalalla "Genetiikka"

Ammattimainen uudelleenkoulutus erikoisalalla "Ultraäänidiagnostiikka"

Aktiviteetit:

• Lapsettomuus ja keskenmeno
Vasilisa Jurievna



Hän on valmistunut Nižni Novgorodin osavaltion lääketieteellisestä akatemiasta, lääketieteellisestä tiedekunnasta (erikoisuus "lääketiede"). Hän valmistui FBGNU "MGNTS":n kliinisestä työharjoittelusta tutkinnon "Genetiikassa". Vuonna 2014 hän suoritti harjoittelun äitiyden ja lapsuuden klinikalla (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, Trieste, Italia).

Vuodesta 2016 lähtien hän on työskennellyt neuvonantajana Genomed LLC:ssä.

Osallistuu säännöllisesti genetiikan tieteellisiin ja käytännön konferensseihin.

Päätoimiala: Geneettisten sairauksien kliinisen ja laboratoriodiagnostiikan konsultointi ja tulosten tulkinta. Potilaiden ja heidän perheidensä hoito, joilla epäillään perinnöllistä patologiaa. Konsultointi raskautta suunniteltaessa sekä raskauden aikana synnytystä edeltävässä diagnostiikassa synnynnäisen patologian lasten syntymän estämiseksi.

Koska FISH-testi havaitsee syöpää aiheuttavia geneettisiä poikkeavuuksia, se on sitä tehokas menetelmä tiettyjen syöpien diagnosointi. Testiä käytetään myös diagnoosin vahvistamiseen ja sen avulla voit saada Lisäinformaatio O mahdollinen lopputulos sairaus ja kemoterapian käyttökelpoisuus.

Esimerkiksi rintasyöpäpotilailla biopsian aikana otettu FISH-testi auttaa määrittämään HER2-geenin kopioiden esiintymisen soluissa.

Soluilla, joissa on kopioita HER2-geenistä, on enemmän HER2-reseptoreita, jotka vastaanottavat signaaleja, jotka stimuloivat syöpäsolujen kasvua rinnassa. Siksi potilaille, joilla on kopioita HER2-geenistä, on suositeltavaa käyttää Herceptinia (trastutsumabia), lääkettä, joka estää HER2-reseptorien kykyä vastaanottaa signaaleja.

FISH-testin korkeiden kustannusten ja suhteellisen saavutettavuuden vuoksi käytetään yleisemmin toista rintasyövän havaitsemiseen tarkoitettua testiä, immunohistokemiaa (IHC).

Lääketieteellisissä piireissä on kiistaa korkea hyötysuhde FISH-testi verrattuna standarditesteihin. Teknologisen kehityksen ansiosta FISH-testi on kuitenkin tulossa halvemmaksi ja helpommaksi saatavilla useissa kliinisissä olosuhteissa.

Kuinka FISH-testi toimii

Kun FISH-testi suoritetaan potilaan kudosnäytteelle, käytetään fluoresoivia leimoja, jotka vain sitoutuvat tietyillä alueilla kromosomit. Sitten fluoresoivalla mikroskoopilla määritetään kromosomien alueet, joihin fluoresoivat koettimet ovat sitoutuneet, ja määritetään mahdollisia poikkeamia provosoi syövän kehittymistä.

SISÄÄN syöpäsoluja seuraavia poikkeamia voi löytyä:

• translokaatio - kromosomin osan siirto uuteen paikkaan samassa tai toisessa kromosomissa;
• inversio - kromosomin osan käännös 180 astetta säilyttäen samalla yhteys itse kromosomiin;
• deleetio - kromosomin osan menetys;
• kaksinkertaistuminen - kromosomin osan kaksinkertaistuminen, mikä johtaa geenikopioiden ylimäärään solussa.

Translokaatiot auttavat diagnosoimaan tietyntyyppisiä leukemiaa, lymfoomaa ja sarkoomaa. Rintasyöpäsolujen päällekkäisyyden esiintyminen auttaa lääkäriä valitsemaan parhaan hoidon.

FISH-testin etuna tavallisiin sytogeneettisiin testeihin (jotka tutkivat solujen geneettistä koostumusta) on, että se pystyy havaitsemaan pienimmätkin geneettiset muutokset, joita ei voida nähdä tavanomaisella mikroskoopilla.

Toinen tärkeä FISH-testin ominaisuus on, että se voidaan suorittaa soluille, jotka eivät ole vielä alkaneet aktiivisesti kehittyä. Muut testit suoritetaan soluille vasta sen jälkeen, kun ne ovat kasvaneet sisään laboratorioolosuhteet kahden viikon sisällä, joten koko prosessi voi kestää jopa kolme viikkoa ja FISH-testin tulokset ovat saatavilla muutamassa päivässä.

Esimerkkejä FISH-testistä syövän diagnosoimiseksi

Vaikka FISH-testiä käytetään yleisimmin rintasyövän geneettisten poikkeavuuksien analysointiin, se tarjoaa myös tärkeää tietoa muista syövistä.

Esimerkiksi syöpää diagnosoitaessa Virtsarakko FISH-testi virtsan soluille on tarkempi kuin epätyypilliset solutestit. Lisäksi sen avulla voit määrittää virtsarakon syövän uusiutumisen 3-6 kuukautta aikaisemmin.

FISH-testi auttaa myös havaitsemaan leukemian kromosomipoikkeavuuksia, mukaan lukien solut, jotka viittaavat aggressiiviseen muotoon. krooninen lymfaattinen leukemia(HLL). Potilaat, joilla on aggressiivinen CLL, saattavat tarvita kiireellistä hoitoa, kun taas vähemmän aggressiivisissa muodoissa havainto saattaa riittää.

FISH-testin kiista

Kaikki asiantuntijat eivät ole samaa mieltä siitä, että FISH-testi on tarkin testi Herceptinille herkkien syöpien diagnosoimiseksi.

Vuonna 2010 Mayo Instituten (Irlanti) tutkijat totesivat, että halvempi IHC-testi on melkein yhtä tehokas herceptin-herkkyyden määrittämisessä kuin FISH-testi.

Muut asiantuntijat ovat kritisoineet FISH-testiä siitä, että se ei pysty havaitsemaan pieniä mutaatioita, kuten pieniä deleetioita, insertioita ja pistemutaatioita, ja siitä, että jotkut inversiot on jätetty huomiotta.

FISH-testin parantaminen

Huolimatta siitä, että FISH-testitekniikka ei vielä mahdollista kromosomien kaikkien osien analysointia, se kehittyy jatkuvasti tähän suuntaan.

Esimerkiksi vuonna 2007 kanadalaiset tutkijat ilmoittivat kehittävänsä mikroskoopin diakokoisen sirun, jonka avulla FISH-testi voidaan suorittaa kämmenelle sopivalla laitteella.

Tämä paranneltu testi, jota kutsutaan FISH-testiksi sirulla, tuottaa tuloksia yhdessä päivässä ja maksaa vähemmän kuin muut testit.

Lyhyt vastaus: Fluoresenssi-in situ -hybridisaatiomenetelmä (FISH - fluoresenssi in situ -hybridisaatio) sisältää ainutlaatuisten DNA-nukleotidisekvenssien käytön koettimena haluttujen DNA-sekvenssien etsimiseksi potilaalta saadusta materiaalista. Menetelmä perustuu DNA-koettimen komplementaariseen sitoutumiseen metafaasikromosomien tai interfaasisolujen DNA:han. DNA-koetin ja testi-DNA denaturoidaan yksijuosteisen DNA:n muodostamiseksi. DNA-koetin lisätään kromosomivalmisteeseen, inkuboidaan tietty aika. Fluorokromilla leimatun koettimen läsnäolo tai puuttuminen DNA:ssa hybridisaation jälkeen määritetään tutkimalla kromosomeja fluoresoivalla mikroskopialla.

Yksityiskohtainen vastaus: Fluoresoiva hybridisaatiomenetelmä paikan päällä mahdollistaa yksittäisten kromosomien tai niiden yksittäisten alueiden tunnistamisen metafaasikromosomien tai interfaasisten ytimien valmisteista fluoresoivaan leimaan konjugoidun DNA-koettimen ja kromosomin halutun alueen komplementaarisen vuorovaikutuksen perusteella. Peptidinukleiiniyhdisteiden visualisoimiseksi kromosomissa PNA-koettimet perustuvat proteiinituote.
Menetelmä perustuu DNA-koettimen komplementaariseen sitoutumiseen metafaasikromosomien tai interfaasisolujen DNA:han ja sisältää seuraavat vaiheet:
1. Denaturaatio kaksijuosteinen koetin-DNA ja kohde-DNA yksijuosteiseksi korkean lämpötilan tai kemiallisten tekijöiden vaikutuksesta.
2. Hybridisaatio DNA-koetin, jossa on DNA-kohde komplementaarisuuden periaatteen mukaisesti kaksijuosteisen hybridimolekyylin muodostumisen kanssa
3. Hybridisaation jälkeinen pesu hybridisoimattoman DNA-koettimen poistamiseksi
4. Analyysi hybridisaatiosignaalit fluoresoivalla mikroskoopilla

Edut FISH-molekyyligeneettisiin diagnostisiin menetelmiin kuuluu nopea analyysi suuri numero solut, korkea herkkyys ja spesifisyys, kyky tutkia ei-viljeltäviä ja jakautumattomia soluja.
Vikoja menetelmät ovat kyvyttömyys saada tietoa fyysinen kunto Tutkittava DNA tai kromosomialue.
FISH:ia käytetään prenataalisessa molekyyligeneettisessä diagnoosissa ja kasvainten karakterisoinnissa; pediatrisessa käytännössä sitä käytetään pääsääntöisesti tiettyihin epämuodostumisiin liittyvien submikroskooppisten deleetioiden tunnistamiseen. Mikrodeleetioihin perustuvia oireyhtymiä pidettiin aiemmin tuntemattoman etiologian sairauksina, koska kromosomaaliset deleetiot ja uudelleenjärjestelyt, aiheuttaa kehitystä Näitä sairauksia ei yleensä visualisoida perinteisillä kromosomianalyysimenetelmillä. Tällaiset pienet deleetiot tietyillä kromosomien alueilla voidaan havaita suurella tarkkuudella. FISH menetelmä. Submikroskooppisten deleetioiden aiheuttamia sairauksia ovat mm Prader-Willin, Angelmanin, Williamsin, Miller-Diekerin, Smith-Magenisin oireyhtymät ja velokardiofasiaalinen oireyhtymä. FISH helpottaa näiden oireyhtymien diagnosointia epätyypillisissä tapauksissa, erityisesti vauvaiässä, jolloin monet diagnostiset työkalut puuttuvat vielä. merkittäviä ominaisuuksia sairaudet. Tämän molekyyligeneettisen diagnoosimenetelmän käyttö on suositeltavaa myös murrosiässä ja aikuisiässä, kun se on tyypillistä Kliiniset oireet lapsuudelle tyypilliset sairaudet muuttuvat.

121. DNA-koettimet. Niiden käyttö perinnöllisten sairauksien määrittämisessä.

Lyhyt arvostelu

DNA-koetin on lyhyt DNA-fragmentti, joka on konjugoitu fluoreseiiniin, entsyymiin tai radioaktiiviseen isotooppiin, jota käytetään hybridisoitumaan kohde-DNA-molekyylin komplementaariseen alueeseen.

Pääosa

DNA-diagnostiikkajärjestelmät

Tietoa organismin kaikista ominaisuuksista sisältyy sen geneettiseen materiaaliin. Siten bakteerien patogeenisyyden määrää tietyn geenin tai geenisarjan läsnäolo niissä, ja tietyn geenin vaurioitumisen seurauksena esiintyy perinnöllinen geneettinen sairaus. DNA-segmentti, joka määrittää tietyn biologinen ominaisuus, jolla on tiukasti määritelty nukleotidisekvenssi ja se voi toimia diagnostisena markkerina.

Monet nopeat ja luotettavat diagnostiset menetelmät perustuvat nukleiinihappohybridisaatioon - eri DNA-molekyylien kahden komplementaarisen segmentin pariutumisen pariin. Menettely sisään yleisesti ottaen koostuu seuraavista.

1. Yksijuosteisen DNA-kohteen kiinnitys kalvosuodattimelle.

2. Leimatun yksijuosteisen DNA-koettimen käyttö, joka tietyissä olosuhteissa (lämpötila ja ionivahvuus) pariutuu kohde-DNA:n kanssa.

3. Suodattimen pesu ylimääräisen sitoutumattoman leimatun DNA-koettimen poistamiseksi.

4. Koetin/kohdehybridimolekyylien havaitseminen.

Nukleiinihappohybridisaatioon perustuvissa diagnostisissa testeissä kolme komponenttia ovat avainasemassa: DNA-koetin, DNA-kohde ja hybridisaatiosignaalin havaitsemismenetelmä. Havaitsemisjärjestelmän on oltava erittäin spesifinen ja erittäin herkkä.

* Fluoreseiini (dioksifluoraani, uraniini A) - orgaaninen yhdiste, fluoresoiva väriaine. Analyyttisessä kemiassa fluoreseiinia käytetään luminoivana happo-emäs-indikaattorina. biokemiassa ja molekyylibiologia fluoreseiinin isotiosyanaattijohdannaiset biologisina väriaineina antigeenien ja vasta-aineiden määrittämiseen.

* Havaitseminen on jonkin havaitsemista, tunnistamista, löytämistä.

*konjugaatio=konjugaatio

*Jos DNA-seos, esimerkiksi ihmisen ja hiiren, sulatetaan ja paritetaan yhdessä "koeputkessa", jotkin hiiren DNA-ketjujen osat yhdistyvät uudelleen komplementaaristen ihmisen DNA-ketjujen osien kanssa muodostaen hybridejä. Tällaisten paikkojen lukumäärä riippuu lajien sukulaisuusasteesta. Mitä lähempänä lajit ovat toisiaan, sitä enemmän DNA-säikeiden komplementaarisia alueita on. Tätä ilmiötä kutsutaan DNA-DNA-hybridisaatio.

122. Suoran DNA-diagnostiikan käytön menetelmät ja edellytykset.

Lyhyt arvostelu:

Suorien menetelmien avulla havaitaan häiriöt DNA:n primaarisessa nukleotidisekvenssissä (mutaatiot ja niiden tyypit). Suorille menetelmille on ominaista lähes 100 %:n tarkkuus.

Suoran diagnostiikan tarkoituksena on tunnistaa mutanttialleelit (poikkeavuudet primaarisessa DNA:n nukleotidisekvenssissä, mutaatiot ja niiden tyypit).

Suoran DNA-diagnostiikan haittana on tarve tietää geenin tarkka sijainti ja sen mutaatioiden spektri. Suoran DNA-diagnostiikan menetelmiä suositellaan sellaisille sairauksille kuin fenyyliketonuria (mutaatio R408W), kystinen fibroosi - (yleisin delF508-mutaatio), Huntingtonin korea (trinukleotiditoistojen laajeneminen-CTG-toistot) jne.

Koko vastaus:

Suorien menetelmien avulla havaitaan häiriöt DNA:n primaarisessa nukleotidisekvenssissä (mutaatiot ja niiden tyypit). Suorille menetelmille on ominaista lähes 100 %:n tarkkuus. Käytännössä näitä menetelmiä voidaan kuitenkin soveltaa tietyissä olosuhteissa:

1) perinnöllisen sairauden kehittymisestä vastuussa olevan geenin tunnettu sytogeneettinen sijainti,

2) sairausgeeni on kloonattava ja sen nukleotidisekvenssi tunnettava.

Suoran diagnostiikan tarkoituksena on tunnistaa mutanttialleelit (poikkeavuudet primaarisessa DNA:n nukleotidisekvenssissä, mutaatiot ja niiden tyypit). Suoran DNA-diagnostiikkamenetelmän korkea tarkkuus ei useimmissa tapauksissa vaadi kaikkien perheenjäsenten DNA-analyysiä, koska mutaation havaitseminen vastaavassa geenissä mahdollistaa diagnoosin vahvistamisen lähes 100% tarkkuudella ja genotyypin määrittämisen. kaikki sairaan lapsen perheenjäsenet, mukaan lukien heterotsygoottiset kantajat.

Suoran DNA-diagnostiikan haittana on tarve tietää geenin tarkka sijainti ja sen mutaatioiden spektri.

Suoran DNA-diagnostiikan menetelmiä suositellaan sellaisille sairauksille kuin fenyyliketonuria (mutaatio R408W), kystinen fibroosi - (yleisin delF508-mutaatio), Huntingtonin korea (trinukleotiditoistojen laajeneminen-CTG-toistot) jne.

Tähän mennessä monien sairauksien geenejä ei kuitenkaan ole kartoitettu, niiden eksoni-introniorganisaatiota ei tunneta, ja monet perinnölliset sairaudet jolle on ominaista selvä geneettinen heterogeenisyys, mikä ei salli suorien DNA-diagnostiikan menetelmien täyttä käyttöä. Siksi suoran DNA-diagnostiikan menetelmän tietosisältö vaihtelee suuresti. Joten Huntingtonin korean, achondroplasian diagnoosissa se on 100%, fenyyliketonurian, kystisen asidoosin, adrenogenitaalisen oireyhtymän - 70 - 80% ja Wilson-Konovalovin taudin ja Duchenne / Beckerin myopatian - 45-60%. Tässä suhteessa käytetään epäsuoria menetelmiä perinnöllisten sairauksien molekyyligeneettiseen diagnoosiin.