אבחון הוא השלב החשוב ביותר בטיפול בכל מחלה. בהתאם לאבחנה הנכונה, יש לא רק טיפול מוצלח, אלא גם יכולת למנוע התפתחות של סיבוכים ו מחלות נלוות. מהי בדיקה סרולוגית? זוהי שיטת ניתוח אבחנתי של דגימה ביולוגית של מטופל עבור נוכחות של נוגדנים ואנטיגנים. הבדיקה מאפשרת לזהות עשרות מחלות, שלב המחלה וטיפול בקרה.

בשביל מה הלימודים?

סוג זה של מחקר רפואי נמצא בשימוש נרחב בתחומי רפואה שונים. תגובת קיבוע המשלים או RSK מכוונת לזיהוי תאים ספציפיים בסרום הדם, נוגדנים שהגוף מייצר כדי להילחם בזיהומים ווירוסים.

מחקר איזוזרולוגי מכוון לקביעת סוג הדם, גורם Rh ופרמטרים נוספים של הדם של המטופל.

• בדיקת דם סרולוגית משמשת בגינקולוגיה לאיתור מחלות מין. טיטרציה סרולוגית משמשת גם לבדיקה מקיפה של אמהות לעתיד (טוקסופלזמה, HIV, עגבת וכו'). ברישום נשים בהריון מדובר בבדיקת חובה.
• ברפואת ילדים משתמשים בבדיקות סרולוגיות לאישור אבחנה של מחלות "ילדים" (אבעבועות רוח, אדמת, חצבת ועוד), אם התסמינים אינם בולטים ואין דרך לקבוע את המחלה על פי התוויות קליניות.
• מחקרים סרולוגיים מאפשרים לווינרולוגים לבצע אבחנה מהירה ומדויקת. בְּ תסמינים דומיםותלונות, בדיקת דם מגלה נוגדנים לעגבת, ג'יארדאזיס, אורפלסמוזיס, כלמידיה, הרפס ומחלות נוספות.
• גסטרו אנרגיה, הפטולוגים ומומחים למחלות זיהומיות משתמשים בבדיקת דם סרולוגית כדי לאבחן דלקת כבד נגיפית.
• כל מחלה זיהומית או ויראלית עשויה להיות חשודה על ידי מטפל. לשם אישור, נעשה שימוש בבדיקות סרולוגיות לנוגדנים ספציפיים בגוף. מתבצעת ניתוח לדלקת המוח, ברוצלוזיס, שעלת, וירוס דנגי, וירוס כשל חיסוני, אלרגיות וכו'.
• לאבחון סרולוגי לאשפוז יש תפקיד חשוב. שיטת אבחון זו יכולה להראות באיזה שלב של התפתחות המחלה, והאם נדרשת כניסה מיידית לבית החולים או מספיקה טיפול חוץ.

כפי ש חומר ביולוגיניתן להשתמש בדגימה של רוק וצואה למחקר, אך לרוב נעשה שימוש בדם הוורידי של המטופל. יש לקחת ניתוח לתגובות סרולוגיות מהווריד הקוביטלי בתנאי מעבדה. לפני ביצוע הבדיקה יש להתייעץ עם הרופא ולהתכונן.

הכנה לניתוח

מחקר מסוג זה מתבצע במוסדות עירוניים ומסחריים כאחד. עדיף לבחור לטובת המעבדה שיש לה את הציוד המודרני ביותר ויש לה רק משוב חיובי על עבודתה. למטופלים עסוקים, המעבדה יכולה לספק שירותי דגימת דם ב-RSK בבית.

במקרה זה, החולה אינו צריך לבזבז זמן על הכביש, ותורים אינם נכללים.

הכנה לדגימת דם ורידי כוללת כמה חוקים כלליים. לפני הבדיקה, אתה לא יכול לאכול מזון, כלומר, הניתוח נלקח על בטן ריקה. בעת תרומת דם, אתה צריך להיות רגוע ולא לדאוג. לפני ההליך, אסור לעבור הליכים אחרים (רנטגן, אולטרסאונד וכו'). מספר שבועות לפני דגימת הדם, בהסכמה עם הרופא המטפל, הטיפול התרופתי מבוטל. חלק מההמלצות תלויות במחלה הנבדקת עבורה. לדוגמה, בעת בדיקת הפטיטיס יומיים לפני הניתוח, מזונות שומניים ואלכוהול אינם נכללים מהתזונה.

תגובה פלואורסצנטית

אחד מסוגי התגובות הסרולוגיות הוא פלואורסצנטי או RIF. שיטת מחקר זו מתבצעת באמצעות ריאגנט המדגיש את הנוגדנים הרצויים בסרום הדם. כדי להגדיר תגובה סרולוגית מסוג ישיר או PIF, נוגדנים ספציפיים מסומנים בחומר ניאון. זהו סוג המחקר המהיר ביותר, שמתבצע בשלב אחד.

שיטה נוספת, הנקראת עקיפה או RNIF, מתבצעת ב-2 שלבים. בראשון, לתאים (נוגדנים) ספציפיים אין תוויות פלואורסצנטיות, ובשני משתמשים בנוגדנים מסומנים מתאימים כדי לזהות את קומפלקס האנטיגן-נוגדנים. תגובת הזוהר מופיעה רק לאחר קשירה עם נוגדן ספציפי. התוצאה של המניפולציות מוערכת על ידי מכשיר מיוחד שמעריך את עוצמת הקרינה, וגם קובע את הצורה והגודל של העצמים הנבדקים. הגורם הזיהומי נקבע בוודאות של 90-95% בהתאם לסוג ושלב המחלה.

בדיקת אימונוסורבנט מקושר

למחקר של ELISA, תגובות סרולוגיות מתבצעות באמצעות ריאגנטים יציבים ייחודיים. חומרים מסומנים מחוברים לסוג ספציפי (רצוי) של נוגדן. כתוצאה מכך, הסרולוגיה מספקת הערכה איכותית או כמותית של דגימת הדם של המטופל. אם למצע אין סמנים מפורשים, התוצאה נחשבת שלילית. במקרה של מחקר איכותי, תוצאה חיובית פירושה רק נוכחות של נוגדנים בדגימה ביולוגית.

Serodiagnosis עם זיהוי כמותי של תאי נוגדנים נותן תמונה מלאה יותר. לפי סכום התאים שהתגלו, הרופא יכול לדעת האם המחלה נמצאת בשלב ראשוני, חריפה, או שמדובר בהחמרה של הצורה הכרונית של המחלה. בעת ביצוע האבחנה נלקחות בחשבון גם התמונה הקלינית ותלונותיו של המטופל.

תכונות מחקר

בעת בדיקת ברוצלוזיס, מנוטר סרום הדם לשמירה עצמית ללא אנטיגן. זה משפר את מהימנות הבדיקה. תוצאת הניתוח עבור ברוצלוזיס יכולה להיות חיובית, שלילית או בלתי מבוטאת, כלומר מפוקפקת. כאשר משיגים תוצאות מפוקפקות, מומלצת דגימת דם חוזרת. ברוצלוזיס מאובחנת גם על סמך תוצאות תרביות דם, בדיקות מח עצם ונוזל מוחי.

יתרונות וחסרונות של סרולוגיה

אבחון בשיטות סרולוגיות נמצא בשימוש נרחב ברפואה המודרנית. בדיקה זו רלוונטית במיוחד לאיתור מחלות ויראליות וזיהומיות. אותו סוג של ניתוח משמש במיון גיאוגרפי ובבדיקות רפואיות למניעת התפרצויות אפידמיולוגיות.

למבחנים סרולוגיים יש מספר יתרונות.

• בדיקה סרולוגית מכל סוג היא אמינה ביותר.
• בדיקות סרולוגיה מבוצעות די מהר. התוצאה של ה-RSC ידועה תוך יום, ותוכלו לקבל אותה דרך האינטרנט מבלי לצאת מהבית. IN אירועים מיוחדיםבְּ- טיפול באשפוזהבדיקה מתבצעת תוך מספר שעות.
• RSK מאפשרת לשלוט בהתפתחות המחלה, ולנטר את יעילות הטיפול.
• שיטות מחקר סרולוגיות הן זולות וזמינות למטופלים.

לבדיקות סרולוגיות יש גם כמה חסרונות. על מנת שהבדיקה תיתן את המידע המהימן ביותר, יש לבצע בדיקת דם תוך התחשבות בזמן תקופת הדגירה של המחלה.

הרפס סימפלקס סוגים 1 ו-2 ניתן לקבוע רק שבועיים לאחר ההדבקה, ובדיקת וירוס כשל חיסוני מתבצעת 1, 3 ו-6 חודשים לאחר המגע עם המטופל.

מהימנות המחקר יכולה להיות מושפעת מהגורם האנושי. אם המטופל יזניח את כללי ההכנה למחקר או שהעוזר במעבדה עשה טעות בעיבוד דגימת הדם, עלולה להתקבל תוצאה שקרית או מפוקפקת. מצב זה מתרחש בכ-5% מהמקרים. ככלל, הרופא המטפל, על בסיס אינדיקציות קליניות, מחשב בקלות את שגיאת ה-RSK.

בדיקת דם סרולוגית היא דרך מודרנית ואמינה לאיתור כאלה מחלות מסוכנותכמו HIV, הפטיטיס, ברוצלוזיס, מחלות מין וכו'. ענף זה של הרפואה נועד לחקור את פלזמת הדם האנושית ואת התכונות האימונולוגיות שלה. השיטה הסרולוגית נמצאת בשימוש נרחב, ועלות המחקר במעבדות פרטיות נמוכה יחסית. לצורך ניתוח, נעשה שימוש בציוד מודרני, אשר ממזער את השפעת הגורם האנושי על תוצאות המחקר.

בקשר עם

בדיקת וסרמן (RW) היא הבדיקה האימונולוגית הפופולרית ביותר המשמשת לאבחון עגבת מאז גילויה ב-1906. RW שייך לקבוצת תגובות קיבוע המשלים (RCC) ומבוסס על היכולת של סרום הדם של חולה עם עגבת ליצור קומפלקס עם האנטיגנים המתאימים. שיטות RSK מודרניות המשמשות לאבחון עגבת שונות באופן משמעותי באנטיגנים שלהן מתגובת וסרמן הקלאסית, אולם המונח "תגובת ווסרמן" נשמר באופן מסורתי עבורן.

בדם של אדם נגוע מופיעים נוגדנים המיוצרים על ידי מערכת החיסון. Treponema pallidum, הגורם הגורם למחלה, מכיל את אנטיגן הקרדיוליפין, הגורם לייצור נוגדנים הנקבעים על ידי RW. תגובה חיובית של וסרמן רק מצביעה על נוכחות של נוגדנים כאלה בדם אנושי, ועל בסיס זה, מסקנה לגבי נוכחות של מחלה.

אינדיקטור של תוצאת המחקר ב-RSC הוא תגובת המוליזה. שני מרכיבים מעורבים בתגובה: אריתרוציטים של כבשים וסרום המוליטי. סרום המוליטי מתקבל על ידי חיסון ארנב עם אריתרוציטים של ראם. הוא מושבת למשך 30 דקות ב-56 מעלות צלזיוס. התוצאות של RSC מוערכות בהתאם לנוכחות או היעדר המוליזה במבחנות. הנוכחות של המוליזה מוסברת על ידי העובדה שאם אין נוגדנים עגבתיים בסרום הבדיקה, הרי שתגובת האנטיגן-נוגדנים אינה מתרחשת, וכל המשלים עובר לתגובת תאי הדם האדומים של הכבשים-המוליזין. ואם יש נוגדנים ספציפיים, המשלים עובר לחלוטין לתגובת האנטיגן-נוגדן והמוליזה לא מתרחשת.

כל המרכיבים לתגובת וסרמן נלקחים באותו נפח - 0.5 או 0.25 מ"ל. לקיבוע חזק של משלים על קומפלקס ספציפי, תערובת של סרום הבדיקה, האנטיגן והקומפלמנט מונחת בתרמוסטט בטמפרטורה של 37° למשך 45-60 דקות. (שלב I של התגובה), שלאחריו מוכנסת מערכת המוליטית המורכבת מאריתרוציטים של כבשים וסרום המוליטי (שלב II של התגובה). לאחר מכן שוב מכניסים את הצינורות לתרמוסטט למשך 30-60 דקות עד לתחילת המוליזה בבקרה, בה האנטיגן מוחלף במי מלח, ובמקום סרום הבדיקה, מִלְחִית. אנטיגנים לתגובת וסרמן מיוצרים מוכנים, המציינים את הטיטר ושיטת הדילול.

החיוביות המקסימלית של תגובת וסרמן מסומנת בדרך כלל על ידי מספר הצלבים: ++++ (חדות תגובה חיובית) - מצביע על עיכוב מוחלט בהמוליזה; +++ (תגובה חיובית) - מתאימה לעיכוב משמעותי בהמוליזה, ++ (תגובה חיובית חלשה) - עדות לעיכוב חלקי בהמוליזה, + (תגובה מפוקפקת) - מקבילה לעיכוב קל בהמוליזה. RW שלילי מאופיין בהמוליזה מלאה בכל המבחנות.

עם זאת, לפעמים אפשריות גם תוצאות חיוביות כוזבות - זאת בשל העובדה שקרדיוליפין כלול גם בכמות מסוימת בתאי גוף האדם. מערכת החיסון האנושית אינה יוצרת נוגדנים כנגד הקרדיוליפין "שלה", אך ישנם חריגים לכלל זה, שבגללם מתרחשת תגובה חיובית של וסרמן באדם בריא לחלוטין. זה נצפה לעתים קרובות במיוחד לאחר מחלות ויראליות קשות ואחרות - דלקת ריאות, מלריה, מחלות כבד ודם, במהלך ההריון, כלומר. ברגעים של היחלשות חמורה של מערכת החיסון.

אם הרופא חושד שלמטופל יש תוצאה חיובית כוזבת לתגובת וסרמן, אזי הוא עשוי לרשום מספר מחקרים נוספים המשמשים בדרך כלל באבחון של מחלות מין.

מחלות ומקרים בהם הרופא עשוי לרשום בדיקת דם ל-RW

ביצוע הליך נטילת בדיקת דם ל-RW

דם על RW ניתן רק על קיבה ריקה. הארוחה האחרונה צריכה להיות לא יאוחר מ-6 שעות לפני הבדיקה. העובד הרפואי מושיב את המטופל או משכיב אותו על הספה ולוקח 8-10 מ"ל דם מהוריד הקוביטלי.

אם הניתוח צריך להיעשות על תינוק, אזי הדגימה מתבצעת מהווריד הגולגולתי או הצוואר.

הכנה לבדיקת דם ל-RW

במשך 1-2 ימים לפני הבדיקה, עליך להפסיק לשתות אלכוהול. כמו כן לא מומלץ לאכול מאכלים שומניים - זה יכול לעוות את התוצאה. במהלך ההכנה לניתוח יש להימנע מנטילת תכשירי דיגיטליס.

התוויות נגד

תוצאת הניתוח תהיה שקרית אם:

• אדם חולה במחלה זיהומית או שזה עתה החלים ממנה,
• אִשָׁה תקופת הווסת,
• בהריון בשבועות האחרונים לפני הלידה,
• 10 הימים הראשונים לאחר הלידה,
• 10 הימים הראשונים לחייו של תינוק.

בעגבת ראשונית, תגובת וסרמן הופכת חיובית לאחר 6-8 שבועות של מהלך המחלה (ב-90% מהמקרים), בעוד שהדינמיקה הבאה מצוינת:

• ב-15-17 הימים הראשונים לאחר ההדבקה, התגובה ברוב החולים היא בדרך כלל שלילית;
• בשבוע ה-5-6 למחלה, בכ-1/4 מהחולים, התגובה הופכת לחיובית;
• לאחר 7-8 שבועות של מחלה, RW הופך חיובי ברובם.

עם עגבת משנית, RW תמיד חיובי. יחד עם תגובות סרולוגיות אחרות (RPHA, ELISA, RIF), זה מאפשר לא רק לזהות את נוכחות הפתוגן, אלא גם לגלות את זמן ההדבקה המשוער.

עם התפתחות זיהום עגבת בשבוע הרביעי של המחלה, לאחר הופעת עגבת ראשונית, תגובת וסרמן משתנה משלילי לחיובית, נשארת כך בתקופה הטרייה המשנית ובתקופה החוזרת המשנית של עגבת. בתקופה המשנית הסמויה וללא טיפול, RW יכול להפוך לשלילי כך שכאשר מתרחשת הישנות קלינית של עגבת, היא חוזרת להיות חיובית. לכן, בתקופה הסמויה של עגבת, תגובה שלילית של וסרמן אינה מעידה על היעדרה או ריפוי, אלא רק משמשת כתסמין פרוגנוסטי חיובי.

עם נגעים פעילים של התקופה השלישונית של עגבת, RW חיובי מתרחש בכ-3/4 מהמקרים של המחלה. כאשר הביטויים הפעילים של התקופה השלישונית של עגבת נעלמים, זה הופך לעתים קרובות לשלילה. במקרה זה, תגובה שלילית של וסרמן בחולים אינה מצביעה על כך שאין להם זיהום עגבת.

עם עגבת מולדת מוקדמת, RW חיובי כמעט בכל המקרים ומהווה שיטה חשובה לאימות המחלה. עם עגבת מולדת מאוחרת, התוצאות שלה מתאימות לאלו שהתקבלו בתקופה השלישונית של עגבת נרכשת.

חשיבות מעשית רבה היא חקר תגובת וסרמן בדמם של חולי עגבת העוברים טיפול. בחלק מהחולים, למרות טיפול אנטי-עגבת נמרץ, התגובה של וסרמן אינה הופכת לשלילית - זוהי מה שנקרא עגבת עמידה בפני מחלת המחלה. במקרה זה, אין זה הגיוני לבצע טיפול אנטי-ספיליטי אינסופי, ולהשיג את המעבר של RW חיובי לשלילי.

מהאמור לעיל עולה שתגובת וסרמן שלילית אינה תמיד סימן להיעדר זיהום עגבת בגוף.

תגובה חיובית של וסרמן אפשרית אצל אנשים עם מספר מחלות ומצבים אחרים שאינם קשורים לעגבת:

כל האמור לעיל מצביע על כך שתוצאה חיובית של תגובת וסרמן אינה עדיין עדות בלתי מותנית לנוכחות של זיהום עגבת.

התאוששות לאחר העברת הניתוח

לאחר נטילת בדיקת דם, הרופאים ממליצים על הנכונים ו דיאטה מאוזנתוגם כמה שיותר נוזלים. אתה יכול להרשות לעצמך תה חם ושוקולד. זה יהיה שימושי להימנע מפעילות גופנית ובשום מקרה לא לקחת אלכוהול.

נורמות

בדרך כלל יש להקפיד על המוליזה בדם - זה נחשב לתגובה שלילית לעגבת (תגובת וסרמן שלילית). אם אין המוליזה, מידת התגובה מוערכת, התלויה בשלב המחלה (מסומן בסימני "+"). במקרה זה, עליך להיות מודע לכך שאצל 3-5% מהאנשים הבריאים לחלוטין, התגובה עשויה להיות חיובית שגויה. יחד עם זאת, ב-15-17 הימים הראשונים לאחר ההדבקה, התגובה אצל אנשים חולים יכולה להיות שלילית כוזבת.

על מנת לקבוע אבחנה מדויקת, המטופל נבדק באופן מקיף. ניתוח כללידם אינו אינפורמטיבי במיוחד, הוא אינו משמש לאבחון של זיהום מין.

סוגי מחקרים וחומרים ביולוגיים לניתוח

נעשה שימוש בשיטות וביו-חומרים שונים כדי לזהות את המחלה. בשלבים הראשונים, עגבת נקבעת באמצעות בדיקה בקטריוסקופית. דגימות נבדקות תחת מיקרוסקופ. המכשיר מאפשר לך לזהות זנים של הפתוגן. בהמשך מתבצעות בדיקות סרולוגיות. בזכותם מתגלים בדגימות אנטיגנים ונוגדנים למחלה.

שיטות לקביעת זיהום מיני מחולקות ל-2 קטגוריות:

• ישיר, חושפני מְחוֹלֵל מַחֲלָה. אלה כוללים: מיקרוסקופיה בשדה אפל, ניתוח RIT (הדבקה של ארנבות בחומר ביולוגי למחקר), שיטת PCR - תגובת שרשרת פולימראז (בעזרתה מוצאים את היסודות הגנטיים של הפתוגן).
• זיהוי עקיף (סרולוגי) של נוגדנים לפתוגן. הם מיוצרים על ידי מערכת החיסון בתגובה לזיהום.

שיטות סרולוגיות מחולקות ל-2 קטגוריות: טרפונמל ולא טרפונמל.

Non-treponemal, כולל: בדיקה עם טולואידין אדום, ניתוח RSK, בדיקת RPR, בדיקת דם בשיטת RMP express.

טרפונמל, משלב: אימונובלוטינג, בדיקת RSK, ניתוח RIT, מחקר RIF, בדיקת RPGA, ניתוח ELISA.

אינפורמטיביות של בדיקות לזיהום שונה. לעתים קרובות יותר לעשות את הסוגים העיקריים של בדיקות עבור עגבת, הכוללות שיטות סרולוגיות. למטופלים הזקוקים לבדיקה, הרופא רושם בדיקות בנפרד.

חומר ביולוגי למחקר

כדי לזהות טרפונמה חיוורת, פתוגן שנראה כמו ספירלה וגורם לעגבת, נלקחות דגימות:

• דם ורידי;
• משקאות חריפים (הפרשה מתעלת עמוד השדרה);
• התוכן של בלוטות הלימפה;
• רקמת כיב.

אם יש צורך לבצע בדיקות לגילוי עגבת, דם נלקח לא רק מהווריד הקוביטלי, אלא גם מהאצבע. בחירת החומר הביולוגי ושיטת המחקר מושפעת מחומרת הזיהום ומציוד מרכז האבחון.

מחקר ישיר

עדות משכנעת לעגבת היא זיהוי של גורמים זיהומיים תחת מיקרוסקופ. באופן זה, הפתוגן נמצא ב-8 מתוך 10 חולים שנבדקו, תוצאה שלילית ב-2 החולים הנותרים אינה אומרת שהם אינם נגועים.

המחקר נעשה בשלבים הראשוניים והמשניים (שלבים) של המחלה, המתאפיינים בהופעת פריחות על העור ועגבת (כיבים) על רקמות אפיתלאו ריריות. בהפרשה מהנגעים מוצאים פתוגנים הגורמים למחלת מין.

ליתר דיוק, בדיקה מורכבת, המכונה RIF, תגובה אימונופלואורסצנטית, מתמודדת עם קביעת טרפונמה. הדגימה למחקר מטופלת מראש בנוגדנים ניאון. תרכובות המסוגלות לזוהר נצמדות יחד עם חיידקים. בדיקת דגימות במיקרוסקופ, במקרה של זיהום, עוזר המעבדה רואה פתוגנים נוצצים.

הבדיקה משמשת לאבחון מוקדם של המחלה. ככל שהמחלה נמשכת זמן רב יותר, כך הרגישות של שיטות המחקר נמוכה יותר. בנוסף, הוא נופל לאחר טיפול בפריחות וכיבים בחומרי חיטוי ובמטופלים שעברו טיפול. מדי פעם, המחקר נותן תוצאות שגויות-שליליות וחיוביות שגויות.

ניתוח RIT הוא דרך מדויקת ביותר לזהות עגבת. במהלך הבדיקה, לתוצאות לוקח זמן רב להמתין. עד שהארנב הנגוע מראה סימני זיהום. הבדיקה משמשת לעתים רחוקות מאוד, למרות העובדה שהיא מדויקת ביותר.

באמצעות תגובת שרשרת הפולימראז לעגבת, נקבעים האלמנטים הגנטיים של פתוגנים. החיסרון היחיד של PCR הוא העלות הגבוהה.

בדיקות לא טרפונמאליות

בדיקות דם כאלה עוזרות לזהות נוגדנים המופיעים בתגובה לקרדיוליפין, תרכובת הקשורה למבנה הכללי של קרומי הפתוגן.

תגובת וסרמן (РВ או RW)

הבדיקה המפורסמת ביותר לעגבת היא תגובת וסרמן. RS נכלל בקטגוריה של תגובות קיבוע משלים (CFR). לשיטות ה-RSC החדשות יש הבדלים משמעותיים מה-RW המסורתי. אבל הם מיועדים, כמו קודם, במושג "תגובת וסרמן".

מערכת החיסון מסנתזת נוגדנים (סמנים) בתגובה לפלישת טרפונמה. הם מתגלים בבדיקת דם לאיתור עגבת בשיטת התגובה וסרמן. תוצאת RW חיובית מאשרת את ההדבקה של הנבדק.

תגובת המוליזה - מדד ניתוח PB. עם זה, 2 חומרים מקיימים אינטראקציה: סרום המוליטי ואריתרוציטים של כבשים. הסרום נעשה על ידי חיסון ארנב עם אריתרוציטים של כבש. פעילות הנוזל הביולוגי מופחתת על ידי חימום.

אינדיקטורים ל-RV תלויים בשאלה אם ההמוליזה חלפה או לא. בדגימה נטולת סמנים מתרחשת המוליזה. במקרה זה, התגובה לאנטיגנים היא בלתי אפשרית. השלמה מושקעת באינטראקציה עם אריתרוציטים של כבשים. כאשר יש סמנים בדגימה, המחמאה מגיבה עם האנטיגנים. במקרה זה, המוליזה אינה מתרחשת.

רכיבים עבור RW נמדדים בכמויות שוות. הדגימה המכילה סרום, אנטיגן ומחמאה מתחממת. אריתרוציטים וסרום של כבשים מתווספים לדגימה. שומרים בטמפרטורה של 37 מעלות עד להופעת המוליזה בדגימת הביקורת, שבמקום האנטיגן מכילה תמיסת מלח.

להובלת קרוואנים משתמשים באנטיגנים מוכנים. הטיטרים וטכנולוגיית הדילול שלהם מצוינים על האריזות. תוצאת RW חיובית מסומנת על ידי הצלבות. תוצאות מוגמרותהמבחנים מיועדים כדלקמן:

• ++++ - חיובי מקסימלי (המוליזה מתעכבת);
• +++ - חיובי (המוליזה מתעכבת משמעותית);
• ++ - חיובי חלש (המוליזה מתעכבת חלקית);
• + - ספק (המוליזה הייתה מעט מאוחרת).

עם RV שלילי, המוליזה התממשה לחלוטין בכל הדגימות. אבל במקרים מסוימים, מתקבלים נתונים חיוביים כוזבים. זה קורה כאשר קרדיוליפין הוא חלק מהתאים. מנגנוני הגנהלא מייצרים סמנים לקרדיוליפין "מקורי".

עם זאת, ישנם חריגים נדירים. RW חיובי מזוהה באנשים לא נגועים. זה אפשרי אם המטופל סבל מחלה רציניתהנגרמת על ידי וירוסים (דלקת ריאות, מלריה, שחפת, פתולוגיות כבד ודם). RV חיובי מתרחש אצל נשים בהריון. זאת בשל העובדה שמערכת החיסון נחלשת יתר על המידה.

אם קיים חשד שתוצאת הבדיקה לעגבת היא חיובית שגויה, נבדק המטופל בנוסף. הבעיה היא שלא ניתן לזהות זיהום זה בבדיקת מעבדה קלינית אחת. חלק מהמחקרים נותנים אינדיקטורים כוזבים, שהם שליליים וחיוביים כאחד.

ניתוח מפורט של עגבת עוזר להשיג נתונים מהימנים. בזכותו הם מקימים אבחנה אמיתית: להוכיח זיהום או לשלול אותו. בנוסף, בדיקה מורחבת מאפשרת לעצור את התפתחות הזיהום, כדי למנוע טיפול מיותר.

RSK ו-RMP

בעת ביצוע סקר עבור עגבת, נעשה שימוש בתגובת וסרמן המסורתית לעתים רחוקות ביותר. במקום זאת, נעשה שימוש בשיטת RSC. הבדיקה נותנת תוצאה חיובית חודשיים לאחר ההדבקה. בצורה המשנית של המחלה היא חיובית בכמעט 100% מהמקרים.

שיטת המיקרו-משקעים (RMP) היא מחקר עם מנגנון דומה לתגובת וסרמן. הטכניקה פשוטה לביצוע. זה מתבצע במהירות. לצורך מחקר, דם עבור עגבת במקרה זה נלקח מאצבע. הטכניקה נותנת תוצאה חיובית 30 יום לאחר הופעת העגבת. שגיאות במחקר אינן שוללות. נתונים חיוביים כוזבים מתקבלים על רקע: זיהומים מוגברים, דלקת ריאות, התקף לב, שבץ, שיכרון.

מוביל לבדיקות שגויות:

לאחר שמצא ניתוח מפוקפק עבור עגבת, מחקרים טרפונמל נעשים. הם עוזרים להבהיר את האבחנה.

בדיקת RPR וטולואידין אדום

שיטת הפלזמה מחדש (RPR) היא אנלוגי נוסף לתגובת וסרמן. הוא משמש בעת הצורך:

• מסך אנשים אסימפטומטיים;
• לאשר עגבת;
• לבדוק דם שנתרם.

בדיקת טולואידין אדום, כמו RPR, נעשית כדי להעריך את ההתקדמות טיפול תרופתי. האינדיקטורים שלהם נופלים כאשר המחלה נסוגה, ועוברים כאשר הפתולוגיה חוזרת.

בדיקות שאינן טרפונמאליות מראות עד כמה החולה החלים. השגת תוצאות שליליות עבור עגבת מצביעה על כך שהמחלה נסוגה לחלוטין. הבדיקה הראשונה נעשית 3 חודשים לאחר הטיפול בקורס.

לימודי טרפונמל

מבחני ביצועים גבוהים מבוצעים באמצעות אנטיגנים טרפונמאליים. הם מיוצרים כאשר:

• התקבלה תוצאה חיובית בשיטת RMP;
• יש צורך להכיר בנתונים שגויים הנובעים מבדיקות מיון;
• לחשוד בהתפתחות של עגבת;
• יש צורך לאבחן זיהום סמוי;
• יש לבצע אבחנה בדיעבד.

מבחני RIF ו-RIT

בחולים מטופלים רבים, בדיקת טרפונמל של דגימות נותנת תוצאות חיוביות לאורך זמן. הם לא יכולים לשפוט את מידת היעילות של הטיפול. RIT ו-RIF הן בדיקות רגישות-על. הודות להם מתקבלים נתונים אמינים. ניתוחים אלו גוזלים זמן, הם דורשים פרק זמן הגון, זמינות של ציוד מתקדם. הם יכולים להתבצע על ידי צוות רפואי מוסמך.

ביצוע ניתוח RIF עבור עגבת, נתונים חיוביים מתקבלים חודשיים לאחר ההדבקה. פרמטרים שליליים מאשרים שהנבדק בריא. חיובי - מציע שהאדם נדבק.

RIT מתבצע כאשר תגובת המיקרו-משקעים חיובית. בדיקת דם כזו לעגבת עוזרת להפריך או לאשר נוכחות של זיהום. הבדיקה רגישה במיוחד, היא מציינת במדויק אם מטופל נגוע או בריא. אבל המחקר מספק נתונים אמינים רק 3 חודשים לאחר חדירת הטרפונמה לגוף.

שיטת סופג מערבית

בדיקות אולטרה מדויקות כוללות אימונובלוטינג. בדיקת דם כזו לעגבת נעשית לעתים רחוקות. הוא משמש בבדיקת יילודים. זה לא מתאים לבדיקה אקספרס. תוצאות חיוביות מתקבלות באיחור. הם ניתנים הרבה יותר מוקדם על ידי שיטת המיקרו-משקעים.

אליסה ו-RPHA

שיטות מחקר אינפורמטיביות במיוחד כוללות בדיקות ELISA ו- RPHA. הם משמשים לאבחון מהיר. עוזרי מעבדה עושים מספר עצום של ניתוחים כאלה. בזכותם אפשר להקים אבחנה מדויקת.

ניתוח RPHA עבור עגבת חיובי 30 יום לאחר שהפתוגן נכנס לגוף. בעזרתו, זיהום ראשוני מאובחן כאשר מופיעים כיבים ופריחה.

הודות לו, ניתן לזהות צורות מוזנחות, עכשוויות בסתר, כמו גם צורות מולדות של פתולוגיה. אבל זה מבוצע בשילוב עם בדיקות לא טרפונמאליות וטרפונמאליות. אבחון מקיף מבטיח את מהימנות התוצאות. בדיקה משולשת מוכיחה במדויק את נוכחותו או היעדרו של זיהום מין.

התגובה החיובית נמשכת עבור קטע גדולזְמַן. מסיבה זו, המחקר אינו משמש להערכת יעילות הטיפול.

ניתוח ELISA חיובי 21 ימים לאחר ההדבקה. הבדיקה נותנת לפעמים תוצאות שגויות. הם מופיעים עם פתולוגיות מערכתיות, תהליכים מטבוליים לקויים. יעילותם מוטלת בספק אצל ילד שנולד לאם נגועה.

השגיאות שהושגו בשיטות מחקר סרולוגיות הפכו לסיבה לגילוי שיטות אבחון מתקדמות. כרומטוגרפיית גז וספקטרומטריית מסה לא נותנים תוצאות כוזבות. המכשול היחיד לשימוש המוני שלהם הוא העלות הגבוהה.

אלגוריתם אבחון

• כאשר העגבת נמצאת בשלב הראשוני (עד 60 יום מרגע ההדבקה), מחפשים את הפתוגן על רקע כהה או משתמשים בנוגדנים פלורסנטים לאיתורם.
• אם הפתולוגיה היא בצורה הראשונית, המשנית או הסמויה, משתמשים ב- RMP ו- ELISA. בדיקת דם RPGA לאיתור עגבת עוזרת לאשר את התוצאות.
• במקרה של הישנות של זיהום משני, הפרשות של כיבים ופריחה מנותחת. פתוגנים מוסרים מהדגימות, הם נלמדים באמצעות מיקרוסקופיה.
• כאשר המחלה נכנסת לשלב השלישוני, ל-1/3 מהחולים יש סרטן שלילי שלפוחית ​​השתן. יחד עם זאת, התוצאות של ELISA ו-RPHA חיוביות. עם זאת, הם לא תמיד מציינים את התקופה השלישונית, אלא מאשרים שהאדם עבר זיהום מוקדם יותר. בדיקה חיובית חלשה היא עדות לריפוי מלא, ולא להתפתחות של שלב שלישוני.
• אישור עגבת מולדת, נלקחת בדיקת דם מהאם והתינוק. השווה את הנתונים של בדיקות RMP. קח בחשבון שה-ELISA וה-RPHA של התינוק חיוביים. אשר את האבחנה באמצעות טכניקת אימונובלוטינג.

עגבת, כמו כל פתולוגיה מערכתית, משפיעה על הגוף כולו. לכן, בדיקות עבורו מתבצעות במהלך ההריון, לפני הפלה. מטופלים עושים RMP, ELISA, RPHA.

כיצד לבצע ניתוח

רופא מין שולח חולים לניתוח. מעבדות פרטיות עושות מחקר אנונימי על עגבת לבקשת הלקוח. הם אינם דורשים הפניה של רופא כדי לבצע את הבדיקה.

כללי מחקר:

• דם במעבדה נלקח בבוקר על קיבה ריקה (לאכול לאחר ההליך). לפני הניתוח מותר לשתות רק מים.
• יומיים לפני הבדיקה אסור לאכול מזון שומני ולשתות אלכוהול.
• דם נלקח מאצבע או וריד.
• כמה זמן אורך הלימודים? בדרך כלל לא יותר מיממה. תמלול בדיקות לעגבת מתקבל מעוזרי מעבדה או מהרופא המטפל.
• כמה זמן הבדיקה תקפה? לאחר 3 חודשים, תוצאות הבדיקה אינן חוקיות. הם נמכרים שוב.

אם הפרשנות של הניתוח מראה שהבדיקה חיובית, יש צורך לבקר רופא ונראולוג, אשר ירשום בדיקה נוספת כדי לאשר במדויק את האבחנה ולבחור את משטר הטיפול הדרוש.

בדיקת תוכן עמוד השדרה

האבחנה של נוירוסיפיליס נעשית לאחר בדיקת נוזל המוח השדרתי. ניתוח זה נעשה:

• אנשים עם צורה סמויה של זיהום;
• עם תסמינים של מחלות של מערכת העצבים;
• נוירוסיפיליס אסימפטומטי ומתקדם;
• חולים שהחלימו עם בדיקות סרולוגיות חיוביות.

הכיוון למחקר של נוזל מוחי ניתן על ידי הרופא. מתעלת השדרה יש לנקב ב-2 מבחנות. הנקב נמרח ביוד, מכוסה במפית סטרילית. לאחר ההליך, המטופל נמצא במנוחה במיטה למשך יומיים.

בדגימה אחת נקבעת כמות החלבון, התאים, עקבות דלקת קרום המוח. בדגימה השנייה מחושבים נוגדנים לגורם הסיבתי של עגבת. לשם כך נעשות בדיקות: RV, RMP, RIF ו-RIBT.

בהתאם למספר הפרות שזוהו, 4 סוגים של משקאות חריפים נבדלים. כל אחד מהם מצביע על נזק מסוים למערכת העצבים. הרופא מאבחן:

בנוסף, תוצאות הבדיקות שופטות את החלמתו של המטופל.

פירוש הבדיקות הוא משימתו של הרופא. רק הוא מסוגל להסיק את המסקנות הנכונות, במידת הצורך, לקבוע בדיקה נוספת ולבצע אבחנה מדויקת. אין צורך לבצע אבחנה עצמאית במקרה של פתולוגיה מערכתית מסוכנת. לאבחון שגוי יש השלכות חמורות.

תגובת קיבוע משלים (CFR)

תגובת קיבוע המשלים (RCC) מתבצעת בשני שלבים: בשלב הראשון משלבים את האנטיגן עם סרום הבדיקה, בו מניחים נוכחות של נוגדנים ומוסיפים משלים, דגירה בתרמוסטט למשך 30 דקות.

שלב שני: הוספת המערכת המוליטית (אריתרוציטים של כבשים + סרום המוליטי). לאחר דגירה בתרמוסטט למשך 30 דקות, התוצאה נלקחת בחשבון.

עם RSK חיובי, נוגדנים בסרום, בשילוב עם האנטיגן, יוצרים קומפלקס חיסוני שמתחבר משלים לעצמו, והמוליזה לא תתרחש. אם התגובה שלילית (אין נוגדנים בסרום הבדיקה), המשלים יישאר חופשי ותתרחש המוליזה.

RSK משמש לאבחון סרולוגי של עגבת, זיבה, טיפוס ומחלות אחרות.

תגובות חסינות באמצעות אנטיגנים ונוגדנים מסומנים מבוססות על העובדה שאחד המרכיבים המעורבים בתגובה (אנטיגנים או נוגדנים) משולב עם תווית כלשהי שניתן לזהות בקלות. פלואורכרומים (RIF), אנזימים (ELISA), רדיואיזוטופים (RIA), תרכובות צפופות באלקטרונים (IEM) משמשים כתוויות.

Assay Immunosorbent-Enzyme-linked (ELISA), כמו תגובות חיסוניות אחרות, משמש: 1) לזיהוי אנטיגן לא ידוע באמצעות נוגדנים ידועים, או 2) לזיהוי נוגדנים בסרום הדם באמצעות אנטיגן ידוע. הייחודיות של התגובה היא שהמרכיב הידוע של התגובה משולב עם אנזים (לדוגמה, פרוקסידאז). נוכחות האנזים נקבעת על ידי המצע, אשר נצבע על ידי פעולת האנזים. ELISA שלב מוצק בשימוש הנפוץ ביותר.

1) זיהוי אנטיגן. השלב הראשון הוא ספיחה של נוגדנים ספציפיים על השלב המוצק, המשמש כמשטחי פוליסטירן או פוליוויניל כלוריד של בארות לוחות פלסטיק. השלב השני הוא הוספת חומר הבדיקה, אשר מניח נוכחות של אנטיגן. אנטיגן נקשר לנוגדנים. לאחר מכן שוטפים את הבארות. השלב השלישי הוא הוספת סרום ספציפי המכיל נוגדנים נגד אנטיגן נתון המסומן באנזים. נוגדנים מסומנים מחוברים לאנטיגנים, והעודף שלהם מוסר בכביסה. כך, אם יש אנטיגנים בחומר הבדיקה, נוצר קומפלקס נוגדן-אנטיגן-נוגדן, המסומן באנזים, על פני הפאזה המוצקה. מוסיפים מצע לזיהוי האנזים. עבור peroxidase, המצע הוא orthophenylenediamine מעורבב עם H 2 O 2 בתמיסת חיץ. תחת פעולת האנזים נוצרים מוצרים בעלי צבע חום.

2) איתור נוגדנים. השלב הראשון הוא ספיחה של אנטיגנים ספציפיים על דפנות הבארות. בדרך כלל, במערכות בדיקה מסחריות, אנטיגנים כבר נספגים על פני השטח של הבארות. השלב השני הוא הוספת הסרום הנלמד. בנוכחות נוגדנים נוצר קומפלקס אנטיגן-נוגדנים. השלב השלישי - לאחר הכביסה מוסיפים לבארות נוגדנים אנטיגלובולינים (נוגדנים נגד גלובולינים אנושיים) המסומנים באנזים. תוצאות התגובה מוערכות כמתואר לעיל.

דגימות חיוביות וידועות שליליות, הזמינות במערכות מסחריות, משמשות כבקרות.

ELISA משמש לאבחון מחלות זיהומיות רבות, בפרט, זיהום HIV, דלקת כבד נגיפית.

אימונובלוטינג הוא סוג של ELISA (שילוב של אלקטרופורזה ו-ELISA). ביופולימרים, כגון אנטיגנים של וירוס כשל חיסוני אנושי, מופרדים על ידי אלקטרופורזה של ג'ל. לאחר מכן, המולקולות המופרדות מועברות אל פני השטח של הניטרוצלולוזה באותו סדר כפי שהיו בג'ל. תהליך ההעברה נקרא blotting, וההדפס המתקבל נקרא כתם (באנגלית כתם - נקודה). חותם זה מושפע מהנסיוב הנחקר. לאחר מכן מוסיפים סרום אנטי-אנושי גלובולין שסומן פרוקסידאז, ואחריו המצע, שהופך חום בפעולת האנזים. פסים חומים נוצרים כאשר נוגדנים התחברו עם אנטיגנים. השיטה מאפשרת לזהות נוגדנים לאנטיגנים בודדים של הנגיף.

בדיקת רדיואימונית (RIA). השיטה מאפשרת לקבוע את כמות האנטיגן בדגימת הבדיקה. ראשית, חומר המכיל ככל הנראה אנטיגן מחובר לסרום החיסון, לאחר מכן אנטיגן ידוע המסומן ברדיואיזוטופ, למשל, I 125. כתוצאה מכך, האנטיגן הניתן לזיהוי (לא מסומן) והידוע המסומן נקשר למספר מוגבל של נוגדנים. מכיוון שהאנטיגן המסומן מתווסף במינון מסוים, ניתן לקבוע איזה חלק ממנו נקשר לנוגדנים, ואיזה נשאר חופשי עקב תחרות עם האנטיגן הלא מסומן והוסר. כמות האנטיגן המסומן הקשור לנוגדנים נקבעת באמצעות מונה. זה ביחס הפוך לכמות האנטיגן שנקבעת.

מיקרוסקופיה אימונואלקטרון (IEM). אנטיגן, למשל, וירוס שפעת, מחובר לאנטי-סרום ספציפי המסומן בחומר צפוף אלקטרונים. חלבונים המכילים מתכת (פריטין, המוציאנין) או זהב קולואידי משמשים כתווית. כאשר מבצעים מיקרוסקופ במיקרוסקופ אלקטרונים, מצלמים תצלומים המציגים ויריון שפעת עם נקודות כהות מחוברות אליהם - מולקולות של נוגדנים מסומנים.

חסינות נרכשת, ההבדל שלה מתורשתי (מין, מולד). סוגי חסינות נרכשת.

מְשִׁימָה.במשפחה, הילד ולרי, בן שלוש, חלה בדיפתריה. בני משפחה אחרים לא חלו, והאם הייתה חולה בדיפתריה בילדות, והאב חוסן בדיפתריה טוקסואיד. אחות גדולהנטשה, בת חמש, לא חוסנה בטוקסואיד דיפתריה עקב התוויות נגד רפואיות, ולכן נאלצה לתת לה טיפול מונע חירום עם סרום אנטי רעיל נגד דיפטריה. האח הצעיר, ויטלי, לא חלה במשך שלושה חודשים, למרות שלא התחסן בכלום. יש חתול וכלב בבית, הם לא חלו. ציינו לכל אחד מבני המשפחה ולבעלי חיים את סוג החסינות שבגינה לא חלו.

מהו אנטיגן? אילו חומרים יכולים להיות אנטיגנים? אנטיגנים והפטנים שלמים, במה הם שונים זה מזה? מבנה האנטיגן. מהו שם החלק של מולקולת אנטיגן שקובע את הספציפיות שלה? תן שם לאנטיגנים המוכרים לך. מהם אוטואנטיגנים? מבנה אנטיגני של תא מיקרוביאלי. פלאגלה ואנטיגנים סומטיים; לוקליזציה, ייעוד אותיות, אופי כימי, יחס לטמפרטורה, שיטת הכנה, שימוש מעשי. אנטוקסין, תכונותיו, היישום, ייצורו. איזו רקמה מרכיבה את מערכת החיסון של הגוף? ציין את האיברים המרכזיים וההיקפיים של מערכת החיסון האנושית. תאר את תהליך היווצרות תגובה חיסונית הומורלית ותאית. ציין את התאים הלוכדים ומעכלים את האנטיגן; תאים המקיימים אינטראקציה ביצירת חסינות הומורלית, חסינות תאית; תאים המתמירים והופכים לתאי פלזמה מייצרים נוגדנים; תאים הממריצים תהליך זה; תאים המדכאים את התגובה החיסונית; תאים שהורגים תאי גידול ותאים נגועים בנגיף. מהם נוגדנים? איך משיגים סרום חיסוני? איך להשיג סרום שינטרל רעלן טטנוס? נגד אילו אנטיגנים נוצרים נוגדי רעלים, אגלוטינינים, המוליזינים? אילו נוגדנים נוצרים כאשר מזריקים דיפטריה טוקסואיד לגוף? חיידקי דיפתריה? אופי ומבנה כימיים של נוגדנים. מהו האתר הפעיל של אימונוגלובולין? רשום את מחלקות האימונוגלובולינים, תכונותיהם. ציין את סוג האימונוגלובולינים שיכולים לחצות את השליה. לאיזה מחלקה שייכים אימונוגלובולינים מפרישים? דינמיקה של הצטברות נוגדנים. במה שונה תגובה חיסונית משנית מראשונית? כיצד משתמשים בידע על הדינמיקה של התגובה החיסונית ברפואה המעשית? מהן תגובות חסינות, מה המנגנון שלהן, שלבי תגובה. באילו 2 כיוונים משתמשים בתגובות חיסוניות? רשום את התגובות של מערכת החיסון.

מְשִׁימָה.החלף את המילים החסרות ב"טוקסואיד" או "אנטי-טוקסין": ________ הוא אנטיגן, _________ הוא נוגדן, __________ יוצר חסינות פעילה בכניסה לגוף, __________ יוצר חסינות פסיבית בכניסה לגוף, __________ מתקבל על ידי חיסון של בעלי חיים , __________ מתקבל מרעלן בחשיפה לפורמלין וחום, __________ מנטרל רעלים, __________ גורם להיווצרות נוגדנים בגוף.

תגובת אגלוטינציה: מהי אגלוטינציה, מהו אנטיגן, מהו נוגדן; שיטות הגדרה, אילו בקרות מוגדרות ולמה; איך הפקדים צריכים להיראות. סרה אצילה, מה הם מכילים, איך הם מתקבלים, למה הם משמשים; מהו הטיטר של סרום צפיפות? התגובה של המאגלוטינציה עקיפה (פאסיבית): מה משמש אנטיגן בתגובה זו, איך הוא מתקבל, מנגנון התגובה. מהו אבחון אריתרוציטים? מהו אבחון אריתרוציטים נוגדנים? תגובות משקעים: מה זה משקעים, מה משמש אנטיגן; איך להשיג סרום משקעים? מהו טיטר הסרום המשקע? שיטות הצהרה, יישום מעשי.

תגובת קיבוע משלים (RCC): עקרון CFR; מה נוצר כאשר הסרום החיסוני יוצר אינטראקציה עם אנטיגן ספציפי; מה קורה להשלים אם הוא נוכח באינטראקציה הזו? מה גורלו של המשלים אם אין זיקה ספציפית בין אנטיגן לנוגדנים? אם התוצאה הסופית של RSK היא המוליזה, האם זה אומר תוצאה חיובית או שלילית? טכניקת הגדרת RSC. מדוע יש להשבית את סרום הבדיקה? סרום המוליטי: מה הוא מכיל, איך הוא מתקבל, מהו טיטר וכיצד הוא נקבע? משלים: טבע כימי, קשר ל טמפרטורה גבוההאיפה כלול? איך אפשר להרוס משלים? מה משמש באופן מעשי כהשלמה?

מְשִׁימָה.על בגדיו של אדם הנאשם ברצח נמצא כתם דם. באיזו תגובה ניתן להשתמש כדי לקבוע אם מדובר בדם אנושי; מה יהיה האנטיגן בתגובה זו, ומה יהיו הנוגדנים; איזו תרופה אבחנתית צריכה להיות במעבדה לתגובה זו, איך מכינים אותה?

מְשִׁימָה.כיצד להשתמש בתגובת המשקעים כדי לקבוע אם דגימת בשר שנמסרה לניתוח היא גדולה בקראו בשר סוס; אילו הכנות לאבחון נדרשות?

תגובת משקעים ב אגר ג'ל, שיטות הגדרה, יישום מעשי.

מה מראה בדיקת דם סרולוגית?

מה מראה בדיקת דם סרולוגית? אמצעי אבחון הם השלב החשוב ביותר בטיפול בכל מחלה. הצלחת הטיפול תלויה לא רק בתרופות שנקבעו, אלא גם במידה רבה במידת האבחנה הנכונה.

בנוסף, אבחון יכול למנוע סיבוכים ומחלות נלוות. בעזרת ניתוח סרולוגי של הדם של המטופל, מתגלה נוכחות של נוגדנים ואנטיגנים. המחקר עוזר למצוא מחלות רבות, לקבוע את השלב שלהן ולשלוט על מהלך הטיפול.

מהי סרולוגיה?

סרולוגיה היא ענף האימונולוגיה החוקר את התגובות של אנטיגנים לנוגדנים. ענף זה של הרפואה עוסק בחקר פלזמת הדם ומאפייניה האימונולוגיים.

כיום, בדיקת דם סרולוגית לאיתור נוגדנים היא דרך אמינה לאיתור וירוס כשל חיסוני אנושי, הפטיטיס, ברוצלוזיס, מחלות מין ומחלות מסכנות חיים אחרות. בואו להבין באילו מקרים זה נקבע.

אינדיקציות לקביעת תור

יש צורך בבדיקת דם סרולוגית כדי לזהות את הגורם הגורם למחלה במקרה של קושי בביצוע אבחנה.

כדי לבצע תגובה זו, מוזרקים אנטיגנים של פתוגנים לפלסמה, ולאחר מכן עוזר המעבדה בוחן את התהליך המתמשך. או לבצע תְגוּבָה חֲרִיפָה:V דם נגוענוגדנים מוזרקים כדי לקבוע את השיוך הספציפי של הפתוגן.

היקף היישום

מחקר זה משמש ב תעשיות שונותתרופה. בעזרת תגובה זו מתגלים תאים ונוגדנים ספציפיים המיוצרים על ידי הגוף על מנת להילחם בזיהומים ובנגיפים.

בנוסף, בשיטה הסרולוגית נקבע סוג הדם של האדם.

בדיקת דם סרולוגית דומה משמשת בגינקולוגיה לאבחון מחלות מין. שיטה זו נהוגה גם לבדיקות מקיפות של נשים בהריון (זיהוי טוקסופלזמה, HIV, עגבת וכו'). עמידה במבחן זה חובה להרשמה מרפאה לפני לידה.

בילדים נעשה שימוש בבדיקה סרולוגית על מנת לאשר את האבחנה של מה שמכונה מחלות "ילדים" (אבעבועות רוח, חצבת, אדמת ועוד) במקרה שלתסמינים אין ביטויים בולטים ואי אפשר לזהות את המחלה על ידי ניתוח אינדיקציות קליניות.

איתור מחלות מין

עבור רופאי מין, בדיקה זו היא באמת הכרחית ומאפשרת לך לבצע אבחנה מדויקת מאוד.

עם תמונה קלינית מטושטשת, בדיקת דם סרולוגית עבור עגבת, ג'יארדאזיס, ureaplasmosis, כלמידיה, הרפס ומחלות אחרות מאפשרת לך לזהות במהירות את נוכחותם של נוגדנים.

מחלות ויראליות וזיהומיות

ניתוח סרולוגי משמש באופן פעיל על ידי גסטרואנטרולוגים, הפטולוגים ומומחים למחלות זיהומיות כדי לאבחן דלקת כבד ויראלית.

פענוח בדיקת דם סרולוגית מאפשר לקבוע את שלב מהלך המחלה ולענות על השאלה כמה אשפוז נדרש כרגע. איך להכין נכון?

הכנה למסירת הניתוח

בדיקות דם סרולוגיות נעשות במרפאות ציבוריות ומסחריות כאחד. יש לתת עדיפות למעבדה עם ציוד חדיש וכוח אדם מוסמך.

דגימות ביולוגיות למחקר יכולות להיות רוק וצואה, אך ברוב המקרים נעשה שימוש בדם הוורידי של החולה. דם לבדיקה סרולוגית נלקח מהווריד הקוביטלי במעבדה. לפני ביצוע הבדיקה, עליך להתייעץ עם הרופא שלך לגבי הכנה להליך זה.

כדי להתכונן למסירה של ניתוח למחקר סרולוגי, אתה צריך לעקוב אחר כמה כללים פשוטים.

דם נלקח במצב רגוע לפני הארוחות, כלומר, על בטן ריקה. לפני כן, אין לעבור מחקרים אחרים, כגון צילומי רנטגן, אולטרסאונד וכו'.

יש צורך לא לכלול את השימוש בתרופות אנטיבקטריאליות ותרופות אחרות כמה שבועות לפני תרומת דם. המלצות מסוימות במקרה זה תלויות במחלה שעבורה מתבצעת הבדיקה. לדוגמה, בדיקת הפטיטיס כוללת הימנעות ממזון שומני ואלכוהול 48 שעות לפני ההליך.

תגובה פלואורסצנטית

בין זני התגובות הסרולוגיות ישנה תגובת פלואורסצנציה. טכניקה זו משתמשת בריאגנט המדגיש נוגדנים בסרום הדם.

הגדרת תגובה סרולוגית מסוג ישיר כוללת תיוג של נוגדנים ספציפיים בחומר ניאון. תגובה זו היא המהירה ביותר ומתבצעת בשלב אחד.

אפשרות נוספת לביצוע ניתוח כזה נקראת עקיפה, או RNIF. זה מתבצע בשני שלבים. בשלב הראשון, נוגדנים אינם מסומנים בתוויות פלואורסצנטיות, ובשלב השני משתמשים בנוגדנים המסומנים כראוי לאיתור אנטיגנים ונוגדנים. הארה מתרחשת רק לאחר שמתרחשת קישור לנוגדן ספציפי.

מה מראה בדיקת דם סרולוגית? התוצאה של ההליך כולו מוערכת על ידי מכשיר מיוחד המנתח את עוצמת הקרינה, חושף את הצורה והגודל של האובייקט הנחקר. הגורמים הגורמים למחלות זיהומיות מתגלים כתוצאה מכך, שאמינותם היא%, תלוי בסוג ובשלב הפתולוגיה.

בדיקת אימונוסורבנט מקושר

סוגים אלה של סרולוגיה משתמשים בריאגנטים ייחודיים ויציבים. נראה כי חומרים מסומנים נדבקים לנוגדנים הרצויים. כתוצאה מכך, אנו מקבלים תוצאה איכותית או כמותית.

אם לא נמצאו סמנים מפורשים, התוצאה תיחשב שלילית. אם מתגלה נוכחות של נוגדנים בדגימות ביולוגיות במהלך מחקר איכותי, תוצאת הניתוח נחשבת חיובית. בעת כימות תאים, הניתוח נותן תוצאה מדויקת יותר.

בניתוח האינדיקטורים של הניתוח (לדוגמה, כמות התאים שזוהו), המומחה קובע אם המחלה נמצאת בשלב הראשוני, בשלב החריף, או אם הצורה הכרונית של הפתולוגיה החמירה. על מנת לבצע אבחנה, הרופא לוקח בחשבון לא רק את הנתונים של המחקר הסרולוגי, אלא גם את התמונה הקלינית של המחלה.

תכונות של מבחן זה

ביצוע ניתוח זה לא תמיד מסוגל לתת וודאות של 100% שמחלה מסוימת זוהתה. זה קורה שהתוצאות יכולות להיות מעורפלות ונדרשים נהלים אחרים.

לדוגמה, במהלך בדיקת ברוצלוזיס, נבדק סרום לשמירה עצמית ללא אנטיגן. זה מגביר משמעותית את מהימנות הבדיקה. ניתוח עבור ברוצלוזיס יכול להיות חיובי או שלילי, וגם לגרום לספק.

אם אתה מקבל תוצאות מפוקפקות שאין להן פרשנות חד משמעית, מומלץ לחזור על הניתוח. בנוסף ניתן לזהות ברוצלוזיס כתוצאה מתרביות דם על ידי בדיקה מח עצםונוזל מוחי.

יתרונות בדיקת דם סרולוגית

טכניקות אבחון באמצעות בדיקות סרולוגיות נמצאות בשימוש נרחב בפרקטיקה הרפואית המודרנית. זה נעשה לעתים קרובות במיוחד בעת קביעת פתולוגיות ויראליות וזיהומיות.

אותן בדיקות משמשות בסריקה גיאוגרפית ובבדיקה רפואית למניעת התפשטות אפידמיולוגית של זיהום.

יתרונות השיטה כוללים:

• רמת ביטחון גבוהה.
• תגובה מהירה ותוצאות. התוצאות של RSC ידועות תוך 24 שעות. במצב מיוחד, במסגרת בית חולים, הניתוח יהיה מוכן תוך מספר שעות.
• מעקב אחר התפתחות המחלה ויעילות הטיפול.
• עלות נמוכה וזמינות למטופלים.

חסרונות השיטה

עם זאת, למחקרים סרולוגיים יש גם חסרונות.

אלה כוללים את העובדה שהניתוח צריך לקחת בחשבון תקופת דגירהמחלות על מנת לקבל תמונה אמינה יותר.

למשל, ההגדרה הרפס סימפלקסהסוג הראשון או השני אפשרי רק לאחר 14 ימים מרגע ההדבקה. ניתוח לנוכחות נגיף הכשל החיסוני מתבצע לאחר 30 יום, לאחר 90 ימים ושישה חודשים לאחר מגע עם אדם נגוע.

כמובן שאמינות התוצאות יכולה להיות מושפעת גם מהגורם האנושי: הזנחת כללי ההכנה לדגימת דם או טעות שנעשתה על ידי עוזר המעבדה במהלך התגובה.

על פי הסטטיסטיקה, ניתן לקבל תוצאה שגויה ב-5% מהמקרים. רופא מנוסה, בעת בדיקת מטופל, לאחר שלמד את התמונה הקלינית, ברוב המקרים יכול לחשב את הטעות שנעשתה.

אילו בדיקות דם ניתנות לעגבת: RW, RPHA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, פענוח תוצאות הבדיקה

עגבת היא מחלה זיהומית הנגרמת על ידי ה-Spirochete Treponema pallidum, הנוטה למהלך כרוני מתקדם, עם מחזוריות ברורה של תסמינים קליניים.

הדומיננטיות של העברה מינית על פני מגע ומעבר שליה מציבה מחלה זו במספר מחלות המועברות במגע מיני (STDs, STIs). בנוסף לשיטות אלה של העברת זיהום, המסלול המלאכותי (מהלטינית "artificio" - שנוצר באופן מלאכותי) משחק תפקיד מיוחד.

זה אופייני ל מוסדות רפואיים, מיושם בעיקר במסגרת בית חולים. זיהום מתרחש במהלך עירויי דם, שונים פעולות כירורגיות, שיטות אבחון פולשניות.

למרות ההסגר של דם שנתרם, הבעיה של גילוי עגבת אצל תורמים היא שלבים שוניםהמחלה עדיין קיימת.

לכן, אמצעי אבחון עבור עגבת דורשים סטנדרטיזציה, הכנסת שיטות זיהוי רגישות ואינפורמטיביות חדשות, כמו גם מזעור טעויות ופרשנות שגויה של תוצאות הבדיקה.

סיווג שיטות אבחון מעבדה

לאבחון של עגבת יש כמה תכונות ושונה מהאבחנה של אחרים. זיהומים חיידקיים. המבנה המורכב והתכונות האנטיגניות של טרפונמה חיוורת גורמים לשגיאות בפרשנות התוצאות של בדיקות סרולוגיות.

בדיקת דם לעגבת מוצעת ל-3 קבוצות עיקריות של חולים:

1. 1 סינון ובדיקה רפואית מניעתית של קבוצות אוכלוסייה (כולל הריון, רישום במרפאה לפני לידה, העסקה ורישום ספר רפואי וכדומה).
2. 2 סקר בקבוצות סיכון (מין לא מוגן עם אדם שנדבק בעגבת, אנשים לאחר מגע מיני כפוי, נגועים ב-HIV וכן הלאה).
3. 3 אנשים עם תסמינים או חשודים בזיהום עגבת.

את כל שיטות מעבדהמחולק על תנאי לישיר ולעקיף.

שיטות ישירות

1. 1 זיהוי של Treponema pallidum בשדה האפל (מיקרוסקופיה של שדה אפל).
2. 2 הדבקה של חיות ניסוי (גידול בחיות מעבדה).
3. 3 PCR (תגובת שרשרת פולימראז).
4. 4 בדיקה של DNA או הכלאה של חומצת גרעין.

שיטות עקיפות

תגובות סרולוגיות הן שיטות אבחון מעבדתיות המבוססות על זיהוי של נוגדנים (בקיצור AT) לאנטיגנים של טרפונמה חיוורת (בקיצור AG). הם חיוניים לאישור האבחנה.

1. 1 בדיקות לא טרפונמאליות:
   • תגובת וסרמן (RSK);
   • תגובת מיקרו-משקעים (MR, RMP) והאנלוגים שלה, המפורטים להלן;
   • בדיקת פלזמה מהירה מחדש (RPR, RPR);
   • בדיקה עם טולואידין אדום וסרום (TRUST);
   • מבחן לא טרפונמלי של המעבדה לחקר מחלות מין - VDRL.
2. 2 בדיקות טרפונמל:
   • R-tion של immobilization של Treponema pallidum - RIBT / RIT;
   • R-tion של immunofluorescence - RIF, FTA (דילול של sera RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
   • R-tion של hemagglutination פסיבי (RPHA, TRPGA, TPHA);
   • ELISA (ELISA, EIA);
   • אימונובלוטינג.

איור 1 - אלגוריתם סרודיאגנוזיס של עגבת

שיטות היסטומורפולוגיות

שיטות אלה מצטמצמות לזיהוי התכונות של ההיסטומורפולוגיה של גילויי עגבת. תשומת לב מוקדשת לדקויות של מבנה הצ'אנקר הקשה. עם זאת, אבחנה מבדלת של זיהום באמצעות היסטולוגיה קשה מאוד. היסטומורפולוגיה משמשת עם בדיקות מעבדה וקליניות אחרות.

מיקרוסקופ שדה כהה של Treponema pallidum

שיטה זו מבוססת על זיהוי ישיר של טרפונמה חיוורת בחומר הבדיקה באמצעות מיקרוסקופ ומכשירים מיוחדים (לרוב הפרשות של שחיקות וכיבים, לעתים רחוקות יותר נוזל מוחיומצעים אחרים).

בעזרת צלקת, גרידה, סחיטה משחיקות ומפגמים כיבים, מתקבל exudate, ואז התכשיר המוכן נבדק במיקרוסקופ.

בדרך כלל, טרפונמות חיוורות מתגלות בתכשיר המתקבל מהצ'נקר, ממוקדי עגבת רעננה משנית, חוזרת משנית, כמו גם נקודתיות של בלוטות הלימפה, השליה.

בהתבסס על תופעת הזוהר של חלקיקים קטנים בשדה חשוך כאשר פוגעים בקרן אור (תופעת Tyndall), השיטה מאפשרת להבדיל באופן מושלם את הגורם הסיבתי של עגבת מטרפונמות אחרות על סמך הבדלים מורפולוגיים והבדלים בדרכים החיידק זז.

למיקרוסקופיה, נעשה שימוש במעבה מיוחד של שדה כהה ברזולוציה האופטית המתאימה. התרופה מתקבלת בשיטת טיפה מרוסקת (טיפת חומר מונחת על שקף זכוכית נקי ללא שומן ומכוסה בכיסוי דק מאוד).

שמן טבילה ירד על כיסוי הכיסוי. על ידי סיבוב הצינור וסיבוב עדשת ההגדלה, מותאמת התאורה הרצויה.

בשדה האפל של המיקרוסקופ מתגלים תאי דם, תאי אפיתל והגורם הגורם לעגבת. טרפונמה חיוורת נראית כמו ספירלה, דקה מאוד, מקרינה צבע כסוף, עם תנועות חלקות.

איור 2 - מיקרוסקופ שדה כהה כדרך לדמיין טרפונמה חיוורת בחומר הנחקר. מקור תמונה - CDC

יש להבחין בין Treponema pallidum לבין טרפונמות אחרות, כולל Tr. refringens, אשר ניתן למצוא באורופרינקס וברירית איברי המין. חיידק זה עושה תנועות כאוטיות, בעל תלתלים רחבים וא-סימטריים, גסים למדי. בנוסף, Treponema pallidum מובחן מ-Tr. Microdentium, Tr. בוקאליס וטר. וינסנטי.

הדמיה של חיידקים בשדה חשוך מתווספת לפעמים על ידי תגובת פלואורסצנציה. לשם כך מוסיפים לחומר המקומי נוגדנים אנטי-טרפונמאליים המסומנים בצבע ניאון. זה יוצר קומפלקס שנקרא אנטיגן-נוגדן (בקיצור AG-AT), שהוא מושא המחקר באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

שיטת תגובת שרשרת פולימראז (PCR).

PCR, שפותח בשנת 1991 כדי לזהות את מולקולת החומצה הדאוקסיריבונוקלאית (DNA) של treponema pallidum, הוא רגיש וספציפי ביותר, המאפשר זיהוי של שברי DNA של הפתוגן.

ניתוח זה מבוסס על העתקת קטעים קצרים של DNA spirochete pallidum, אשר עונה על הפרמטרים שצוינו וקיים בדגימה. כל זה נעשה בתנאים מלאכותיים (במבחנה). התגובה מתבצעת במכשיר - מגבר, המספק מחזוריות של מחזורי טמפרטורה. מתרחש קירור, ואחריו חימום המבחנות עם שגיאה של 0.1˚С.

תבנית ה-DNA מחוממת למשך 2 דקות בטמפרטורה של 92-98˚С ( טמפרטורה מקסימליתמשמש אם הפולימראז יציב תרמי). בחימום, גדילי ה-DNA מתפצלים עקב פירוק קשרי מימן ביניהם. בשלב החישול, טמפרטורת התגובה יורדת כדי לקשור את הפריימר לתבנית הגדילה הבודדת.

החישול נמשך כ-30 שניות, במהלכן מסונתזים מאות נוקלאוטידים. המולקולות החדשות שסונתזו מועתקות על ידי הפולימראז, וכתוצאה מכך, שברים ספציפיים של חומצה דאוקסיריבונוקלאית גדלים פי כמה. הגילוי הבא של שברים מתבצע באמצעות אלקטרופורזה של ג'ל אגר.

אבחון PCR של עגבת הוא עדיין ניסיוני באופיו, אך מוצדק כאשר מתגלה זיהום מולד, במקרים אבחוניים קשים, או עם תכולה מינימלית של טרפונמה חיוורת בחומר הבדיקה.

הכלאה של DNA

הכלאת DNA מתבצעת במבחנה ומתבססת על חיבור מלא או חלקי של שתי מולקולות DNA חד-גדיליות למולקולה אחת. במקרה של התאמה מלאה של שברים משלימים, האיחוד קל. אם ההתאמה המשלימה היא חלקית, אז האסוציאציה של שרשראות DNA מתרחשת לאט. בהתבסס על זמן היתוך השרשרת, ניתן להעריך את מידת ההשלמה.

כאשר DNA מחומם בתמיסת חיץ, קשרי מימן נשברים על ידי בסיסים חנקניים המשלימים, כתוצאה מכך, שרשראות DNA מתפצלות. לאחר מכן, תכשיר מתקבל משתי חומצות דאוקסיריבונוקלאיות דנטוריות. עם התקררות, האזורים החד-גדיליים מתחדשים. נוצר מה שנקרא היברידית DNA.

השיטה מאפשרת להעריך ולנתח את קצב החישול, תוך התחשבות בתכונות (דמיון והבדלים) של DNA בין מינים או בתוך מין.

השימוש בבדיקת DNA מורכב מהכלאה של קטע DNA מסומן עם אזור DNA ספציפי כדי לזהות רצפי נוקלאוטידים משלימים. קבוצה של אטומים בלתי רוויים (כרומופורים) או איזוטופים רדיואקטיביים משמשת לתיוג הבדיקה.

בדיקת ה-DNA משמשת לזיהוי הטרוגני והומוגני של חומצות גרעין. תפקיד הבדיקה הוא לקבוע את האזורים שבהם התרחש היתוך בדיקה של מטרה. לזיהוי במערכת הומוגנית יש יתרון ביכולת לעקוב אחר הכלאה של מולקולות DNA בזמן אמת.

מהות השיטה מצטמצמת לדנטורציה ורנטורציה של DNA (איחוד מחדש של שרשראות DNA). תהליך הרנטורציה של חומצת גרעין ובדיקת DNA מסתיים ביצירת "היברידית".

רצפים ספציפיים של חומצות גרעין מתכלאים עם בדיקת DNA וכך מתגלים ומאפשרים להעריך את כמות ה-DNA בחומר הבדיקה.

זיהום של חיות מעבדה

הרגישות הגבוהה של ארנבות ל-Treponema pallidum (כ-99.9%) מאפשרת להשתמש בהם באבחון של זיהום עגבת.

הדבקה של ארנבות מתבצעת במרכזי מחקר ומהווה "תקן הזהב" להערכת רגישותן של שיטות אחרות.

נחזור למבחנים טרפונמלים ולא טרפונמלים, שכן משתמשים בהם לרוב. שקול את היתרונות והחסרונות שלהם, כמו גם שגיאות בפרשנות התוצאות.

בדיקות לא טרפונמאליות

אלו הן בדיקות לקביעת נוגדני IgG ו-IgM לאנטיגן קרדיוליפין מתוקנן. החיסרון המשמעותי שלהם הוא הספציפיות הנמוכה יחסית שלהם.

עלות נמוכה וקלות ביצוע מאפשרים לסווג בדיקות אלו כבדיקות אבחון מיון הנחוצות לקביעת אבחנה מוקדמת ומיון בקרב האוכלוסייה.

מבחנים לא טרפונמליים הם שניתנים בעת רישום ספר רפואי, הגשת מועמדות לעבודה, רישום במרפאה ללידה.

1. 1 רגישות מינימלית בשלב של עגבת ראשונית - 70%;
2. 2 רגישות מינימלית בשלב של עגבת מאוחרת - 30%;
3. 3 אפשרות לתוצאות שגויות-שליליות וחיוביות שגויות;
4. 4 המורכבות של יישום ה-RSC.

1. 1 עלות נמוכה יחסית של ייצור מבחן;
2. 2 קבל תגובה מהירה;
3. 3 אפשרות ליישום שלהם להקרנה.

השגת דגימות חיוביות שגויות או חיוביות חלשות אפשרית במקרים הבאים:

1. 1 הפרה של טכנולוגיית הביצוע, בעת חסימת מתחם AG-AT.
2. 2 לחולה יש מחלות אוטואימוניות (דלקת מפרקים שגרונית, שיגרון, סקלרודרמה, זאבת אדמנתית מערכתית, סרקואידוזיס וכו').
3. 3 ניאופלזמות ממאירות.
4. 4 זיהומים ויראליים וחיידקיים.
5. 5 מחלות אנדוקריניות ( דלקת בלוטת התריס אוטואימונית, סוכרת).
6. 6 הריון.
7. 7 שתיית אלכוהול.
8. 8 אכילת מזון שומני.
9. גיל 9.

כפי שניתן לראות מהרשימה, יש מספיק סיבות לתוצאה לא נכונה. לכן, יש להתייחס לזה בזהירות רבה. הבה נבחן עוד שתי דוגמאות יחד עם RSC. זוהי תגובת מיקרו-משקעים ו-VDLR (השינוי שלה).

תגובת קיבוע משלים (RSK, Wasserman, RW)

זוהי בדיקה המבוססת על יכולתו של המשלים להיקשר למתחמי AG-AT. הקומפלקס המתקבל מזוהה באמצעות מערכת המוליטית. אנטיגן קרדיוליפין מגביר באופן משמעותי את הרגישות של הדגימה.

רגישה היא תגובת קולמר, המורכבת מביצוע בתנאי טמפרטורה שונים. לפיכך, השלב הראשון של תגובת קולמר ממשיך בטמפרטורה של 20˚С למשך חצי שעה, השלב השני בטמפרטורה של 4-8˚С למשך 20 שעות. במהלך זמן זה, מתרחשת כריכת משלים.

בעת ביצוע RSK, ניתן להשיג תוצאות חיוביות בחדות. הסיבה היא כנראה טיטר נוגדנים גדול בסרום לא מדולל. במקרה זה, הדגימות ממוקמות במינונים יורדים.

כדי להבדיל בין שלבי העגבת ולהעריך את יעילות הטיפול האנטי עגבת, נקבעת כמות הנוגדנים בסרום.

החיוביות של המדגם מוערכת באמצעות הצלבות; כמו כן, בתגובות Wasserman, Colmer ו-Cann, דילול סרום מצוין.

תגובת מיקרו-משקעים

מכיוון שהמורכבות של ביצוע הבדיקות הנ"ל היא גבוהה, אז לרוחב הכיסוי של הבדיקה הקלינית קבוצות שונותשל האוכלוסייה, פותחה שיטה מואצת לסרודיאגנוזיס של עגבת, מה שנקרא שיטת אקספרס - תגובת המיקרו-משקעים (בקיצור MR, RMP).

זה מבוצע עם אנטיגן קרדיוליפין וחומרי עזר. היתרון שלו הוא איסוף דם היקפי למחקר. זה מאיץ באופן משמעותי הן את הטכניקה עצמה והן את עבודתם של עוזרי מעבדה.

איור 2 - תגובת מיקרו-משקעים (סכימה)

MR דורש פלזמה או סרום מומת של המטופל (הם מכילים נוגדנים). לאחר מכן, הפלזמה ממוקמת בבארות המסומנות. לאחר מכן, מוסיפים טיפת אנטיגן קרדיוליפין לחומר הבדיקה, מערבבים ומנערים. כתוצאה מכך מופיעים פתיתים אופייניים בסרום של האדם הנגוע, בעוצמתם משתנים.

זוהי בדיקת איכות. הכימות משתמש ב-10 דילולים של סרום הממוקמים ב-10 בארות שסומנו כראוי. ב-MR איכותי, התגובה מצוינת בצורה של הצלבות (פלוסים) או מינוס, ב-MR כמותי מצוין כיטר הנוגדנים (1:2, 1:4 וכן הלאה).

נוכחותם של פתיתים נחשבת כתגובה חיובית או חיובית חלשה. הופעת פלקולטה אפשרית גם בהיעדר מחלה, לכן ההערכה הסופית של התוצאה המתקבלת מתבצעת לאחר מחקר בקרה או תגובות אחרות (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).

השיטה המומלצת על ידי ארגון הבריאות העולמי ליצירת תגובה עם אנטיגן בעל אופי ליפואידי (AH) נחשבת בצדק לטובה בין שאר הבדיקות הלא-טרפונמאליות הסטנדרטיות. פותח בארה"ב, ג'ורג'יה במעבדה למחלות מין (Veneral Diseases Research Laboratories).

קיצור המוסד שימש כשם המדגם - VDRL. VDRL הוא שינוי של MP. סרום של חולה עם עגבת מושבת ומונח על שקף זכוכית. האנטיגן המשמש מורכב מקרדיוליפין, כולסטרול ולציטין באחוזים שונים. התשובה נרשמת כמעט מיד.

קצף מובהק מתרחש בנוכחות נוגדנים בסרום. הסרום הופך לתגובתי 4 שבועות לאחר ההדבקה. כדי להעריך את כמות הנוגדנים, הסרום מדולל מראש באופן אקספוננציאלי.

1. 1 רגישות גבוהה יחסית;
2. 2 ספציפיות גבוהה יחסית;
3. 3 קלות היישום;
4. 4 עלות נמוכה של ריאגנטים;
5. 5 קבל תגובה מהירה.

החיסרון של VDRL הוא שיעור חיובי שווא גבוה יחסית.

הסיבות שלהם הן כולן אותן מחלות המפורטות לעיל.

בדיקות טרפונמל מבוצעות עם אנטיגנים ספציפיים של Treponema pallidum. הם נחוצים וחובה לביסוס האבחנה הסופית. זוהי תגובה אימונופלואורסצנטית (RIF), תגובת המאגלוטינציה עקיפה (IPHA), בדיקת אנזים חיסונית (ELISA) וכו'.

לאחר תוצאה חיוביתבדיקה לא טרפונמלית (RPR, MP, VDRL), יש לבצע תמיד בדיקות טרפונמל (לעתים קרובות יותר שילוב - RPHA, ELISA, RIF).

בדיקות טרפונמל קשות יותר לביצוע מבדיקות מהירות ועולות יותר כסף.

תגובה זו (בקיצור RIF) משמשת לאבחון עגבת, כולל צורות סמויות, ולבדיקה חוזרת של דגימות חיוביות ושגויות.

RIF מבוסס על זוהר של נוגדנים מסומנים בשילוב עם קומפלקס אנטיגן-נוגדנים מתחת למנורת קוורץ. השיטה החלה להיות בשימוש בשנות ה-60 והיא התבלטה בקלות היישום שלה ובסגוליות גבוהה (שנחותה מעט מ-RIBT).

יש לו מספר שינויים: RIF-10, RIF-200 ו-RIF-abs.

ה-RIF הרגיש ביותר בדילול הוא פי 10, והשאר ספציפיים יותר. RIF מתבצע בשני שלבים. סרום הדם של המטופל מתווסף ל-AG. נוצר מתחם AG-AT, אשר נחקר בשלב הבא. הקומפלקס המסומן עם פלואורכרום מזוהה לאחר מכן במיקרוסקופיה. אם לא נצפה זוהר, זה מצביע על היעדר נוגדנים ספציפיים בסרום הדם.

RIF-200 הוא היקר ביותר מבין כל הדילולים. השיטה מיועדת לאבחון של צורות שונות של עגבת, במיוחד עגבת סמויהובדיקה חוזרת של דגימות חיוביות.

Treponema pallidum immobilization reaction (בקיצור RIBT, RIT) היא אחת הבדיקות הסרולוגיות המורכבות הדורשות מאמץ משמעותי ועלויות כספיות. משתמשים ב-RIBT פחות ופחות, אבל הרלוונטיות שלו נשארת באבחון של עגבת סמויה.

יש לה חשיבות רבה בזיהוי תוצאות חיוביות כוזבות בנשים בהריון והוא מבוסס על אימוביליזציה של חיידקים בנוכחות אימוביליזינים - נוגדנים מאוחרים.

התוצאה מוערכת על האחוז (%) של טרפונמה מקובעת באמצעות טבלה מיוחדת:

1. 1 מ-0 עד 20 - בדיקה שלילית.
2. 2 מ-21 עד 50 - בדיקה חיובית חלשה.
3. 3 מ-50 תגובה מקדימה.

תוצאות חיוביות כוזבות אפשריות גם עם RIBT. אז, תשובה לא נכונה אפשרית כאשר נגוע בטרפנמטוזיס טרופית, כמו גם בשחפת, שחמת הכבד, סרקואידוזיס וחולים סניליים.

בדיקת דם זו לעגבת נקראת בדיקת המגלוטינציה פסיבית (בקיצור דם ל-TPHA, TPHA).

אנטיגן ל-TPHA מוכן מאריתרוציטים של ראם המצופים בשברי טרפונמות חיוורות (שמתקבלות מארנבות נגועים (ראה איור 4)). לצורך ניתוח, נעשה שימוש בדם ורידי (פלזמה או סרום מומת) של המטופל.

כאשר האנטיגן מתווסף לסרום של חולה עם עגבת, נוצר קומפלקס AG-AT שמוביל לאגלוטינציה של כדוריות דם אדומות. אגלוטינציה נקבעת באופן סובייקטיבי על ידי עוזר מעבדה.

איור 3 - סכימה של RPHA (תגובת המוגלוטינציה פסיבית)

המדגם מוערך כחיובי כאשר מופיעים אגלוטינים בעלי צבע ורוד אחיד. צבע המשקע באדום מעיד על שקיעת אריתרוציטים. RPHA הוא רגיש מאוד ומאוד ספציפי.

תגובת מיקרו-המגלוטינציה

זוהי גרסה פשוטה של ​​RPGA. שונה מהדגימה שתוארה לעיל בכך שיש פחות אנטיגן, מדלל וסרום דם לביצוע התגובה. ניתן להעריך את הדגימה 4 שעות לאחר הדגירה בסרום. הוא משמש בהקרנה ובבדיקות המוניות לעגבת.

בדיקת אימונוסורבנט מקושר

בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (בקיצור ELISA) מבוססת על תגובה ספציפית של אנטיגן-נוגדנים. חומר ביולוגי (סרום הדם של המטופל, נוזל מוחי) מוכנס לתוך הבארות, שעל פני השטח המוצקים שלהן קבועים אנטיגנים של טרפונמה חיוורת. חומר הבדיקה עובר דגירה, ואז נוגדנים שלא נקשרו לאנטיגנים נשטפים (ראה איור 5).

זיהוי הקומפלקס המתקבל מתבצע בשלב התסיסה באמצעות סרום חיסוני המסומן באנזים. בְּ תגובה כימיתהאנזים צובע את הקומפלקסים שנוצרו. עוצמת הצביעה תלויה בכמות הנוגדנים הספציפיים בדם המטופל ונרשמת על ידי ספקטרופוטומטר.

איור 4 - סכימה של ELISA (בדיקת אימונו אנזימטית)

רגישות ELISA היא יותר מ-95%. השיטה משמשת באופן אוטומטי לחקר קבוצות אוכלוסייה שנקבעו: תורמים, נשים הרות ואחרות, כדי להבהיר את האבחנה במקרה של בדיקות חיוביות ושגויות שאינן טרפונמאליות.

אימונובלוטינג

אימונובלוטינג היא שיטה רגישה ביותר, שינוי של ELISA פשוט. התגובה מבוססת על אלקטרופורזה עם הפרדה של אנטיגנים טרפונמה חיוורים.

חומרים חיסוניים מופרדים מועברים לנייר ניטרוצלולוזה ומוצגים ב-ELISA. לאחר מכן מדגרים את הסרום ונוגדנים לא קשורים נשטפים. החומר המתקבל מטופל באימונוגלובולינים המסומנים באנזים (IgM או IgG).

הערכה קלינית של תוצאות אבחון מעבדה של עגבת

בטבלה 1 להלן, הבאנו את התוצאות האפשריות של הניתוחים ואת פרשנותם. כפי שניתן לראות בטבלה, הערך העיקרי בפענוח הוא הערכה מקיפה של מבחנים.

טבלה 1 - פענוח תוצאות תגובות סרולוגיות (בדיקות דם לעגבת). לחץ על הטבלה לצפייה

תגובתיות הבדיקות מוערכת גם על ידי "צלבים":

1. 1 התגובה המקסימלית (בדיקה חיובית מאוד) מסומנת על ידי 4 הצלבות.
2. 2 דגימה חיובית מסומנת על ידי 3 הצלבות.
3. 3 תגובה חיובית חלשה מסומנת על ידי שני הצלבים.
4. 4 הצלב אחד מצביע על תוצאה מפוקפקת ושליליה.
5. 5 תשובה שלילית מסומנת בסימן מינוס.

הבעיה של אופטימיזציה של האבחון המעבדתי של עגבת לא איבדה את הרלוונטיות שלה עד היום. שיטות אבחון מודרניות, למרות רצונם של מדענים להביא את האבחון לרגישות ולספציפיות הגבוהות ביותר האפשריות, דורשות בדיקת בקרה וגישה פרטנית.

תכונה של זיהום עגבת היא תופעת seroresistance, אשר לא קיבלה הסבר מדעי. האבחנה נעשית לאחר בדיקה מלאה של החולה בשיטות אפידמיולוגיות, קליניות, מעבדתיות.

על רקע ההתפתחות הכלכלית והטכנית של הרפואה, חלה התקדמות גם בפיתוח קריטריונים חדשים לאבחון עגבת. כל זה יאפשר לכם לטפל במהירות, בהצלחה ובדייקנות בחולים.

מחלות זיהומיות יוזמות ייצור של נוגדנים תואמים בדמו של אדם חולה. ככה זה עובד הגנה חיסוניתאורגניזם.

קביעת הימצאות נוגדנים לנגיף או חיידק ספציפי מאפשרת ללמוד על הופעת המחלה לפני הופעת הסימפטומים העיקריים שלה. היום סרולוגי ולתת את התמונה השלמה ביותר. לכן, נדבר במאמר זה על הניתוח למחקר סרולוגי.

מהי בדיקה סרולוגית

שיטות לחקר חומרים ביולוגיים של בני אדם ובעלי חיים שיכולים לזהות בהם נוגדנים או אנטיגנים שהגוף מייצר בצורה של תגובה הגנה במלחמה בזיהומים נקראות מחקרים סרולוגיים. שיטות כאלה משמשות לקביעת הגורם הסיבתי לזיהום, כמו גם לצורך:

• קביעת קבוצת הדם,
• לימוד חסינות באמצעות קביעת רמת הקשר ההומוראלי שלה,
• קביעת אנטיגנים של רקמות.

למי זה מוקצה

למה לעשות את זה

השיטה מוערכת על ידי מומחים כדרך לאבחון איכותי של המחלה.

• אם החולה נמצא בשלב המחלה, מומלץ לבצע מחקרים חוזרים במרווחים של כשבוע למעקב אחר יעילות הטיפול בו נעשה שימוש.
• לעתים קרובות, נעשה שימוש במחקרים סרולוגיים כדי לקבוע איזה פתוגן גרם למחלה לאחר שהחולה לקה בה.

סוגי הליך

שיטות מחקר סרולוגיות מבוססות על תגובות שונות:

• תגובת נטרולמסתמך על התכונה של נוגדני סרום חיסוני לפעול כגורם מנטרל עבור רעלים או מיקרואורגניזמים עצמם, ולמנוע את השפעתם המזיקה.
• תגובת צבירה, אשר, בתורו, מחולק לתת-המינים הבאים:
  • תגובות ישירות - הם משמשים במחקר של סרום דם עבור נוכחות של נוגדנים. חיידקים מומתים נזרקים להרכב הנבדק, ואם נוצר משקעים בצורת פתיתים, זה אומר שהתגובה לסוג זה של חיידקים חיובית;
  • התגובה של hemagglutination עקיפה נוצרת על ידי החדרת אריתרוציטים לסרום הדם, שעליו נספגים אנטיגנים; חומרים אלה מקיימים אינטראקציה עם אותו סוג של אנטיגנים הנמצאים בסרום הדם, וכתוצאה מכך משקע מסולסל.
• תגובת משליםמשמש לאיתור מחלות זיהומיות. השיטה מיושמת באמצעות הפעלת משלים ותצפית על תגובות מתמשכות במדיום הנחקר.
• תגובת משקעיםמתבצע על ידי שכבת תמיסת האנטיגן על מצע נוזלי - סרום חיסון. האנטיגן המשמש לשיטה זו מסיס. התגובה היא שקומפלקס האנטיגן-נוגדנים עובר משקעים; המשקע שנוצר נקרא משקע.
• תגובה באמצעות אנטיגנים ונוגדנים מסומניםזה מבוסס על העובדה שמיקרובים או אנטיגנים של רקמות, המעובדים בצורה מסוימת, רוכשים את היכולת לפלוט אור תחת פעולת קרניים אולטרה סגולות. השיטה משמשת לא רק לאבחון אנטיגנים, אלא גם לקביעה חומרים רפואיים, אנזימים, הורמונים.

התוויות נגד להחזקה

בשל העובדה שהשיטה מורכבת מלימוד החומר הביולוגי של המטופל, היא לא יכולה להשפיע לרעה על אדם. לכן, אין התוויות נגד לשימוש.

המחקר בטוח לחלוטין.

כיצד מתבצע מחקר סרולוגי, נתאר להלן.

אינדיקציות להחזקה

השיטה משמשת לקביעת הגורם הסיבתי לזיהום, כולל במחלות כאלה:

• זיהום HIV,
• טוקסופלזמה,
• מחלות המועברות במגע מיני;
• דִיפטֶרִיָה,
• זמינות ;
• ברוצלוזיס,
• זיהומים סטפילוקוקליים,
• דַלֶקֶת הַכָּבֵד.

השיטה משמשת גם לאיתור מחלות כאלה:

• אופיסטורכיאזיס,
• אמוביאזיס,
• cysticercosis,
• ג'יארדאזיס,
• דלקת ריאות.

הכנה להליך

אין צורך בהכנות מיוחדות להליך. יש להקפיד על תנאי אחד: דגימת דם נעשית על בטן ריקה.

האלגוריתם ללקיחת (נטילת) דם (חומר) לבדיקה סרולוגית מתואר להלן.

ביצוע ניתוח

דגימת דם נעשית מהווריד הקוביטלי. כדי שהמחקר יעבוד, דם נמשך לא עם מזרק, אלא על ידי כוח הכבידה. מחט ללא מזרק מוחדרת לווריד ועד 5 מ"ל דם נאסף במבחנה.

במהלך ההליך, המטופל חווה אי נוחות קלה במהלך החדרת המחט לווריד. הצעדים הבאים אינם מה לדאוג.

הפרשנות של תוצאות בדיקת דם סרולוגית מתוארת להלן.

פענוח התוצאות

יש לשקול את התוצאות המתקבלות בשילוב עם התמונה הקלינית של המחלה, אימות האבחנה המוצעת באמצעות מספר בדיקות. זאת בשל העובדה שהמחקרים הם ספציפיים ולעיתים אין להם רגישות מוחלטת למחלות זיהומיות.

המחיר לבדיקת דם סרולוגית מקיפה מתואר להלן.

עלות ממוצעת של ההליך

מה המחיר של ההליך יהיה תלוי בסוג הלימוד. זה מורכב מהעלות של ביצוע ניתוח ומהעלות של נוגדנים לפתוגן ספציפי. העלות הממוצעת של ההליך היא בתוך 700 רובל.

תגובות סרולוגיות מתוארות בסרטון הבא:

שיטה סרולוגיתהוא אוסף של תגובות המבוסס על אינטראקציה של אנטיגן-נוגדנים (Ag-Ab)ומטרת זיהוי בסרום דם ובנוזלי גוף אחרים של נוגדנים לאנטיגנים של פתוגנים של מחלות זיהומיות, או בעצם אנטיגנים מיקרוביאליים. השיטה הסרולוגית מאופיינת ברגישות ובספציפיות גבוהות. רוב התגובות של שיטה זו קלות לביצוע והסבר, זמינות למגוון רחב של מעבדות, ככלל, בטוחות, חסכוניות וניתנות לסטנדרטיזציה. ל חסרונותניתן לייחס את השיטה הסרולוגית ל: 1) האופי העקיף של התוצאה, כאשר האטיולוגיה של המחלה נשפטת לא לפי בידוד הפתוגן, אלא לפי התגובה (החיסונית) של האורגניזם לפתוגן; 2) הצורך בהתערבות פרנטרלית בגופו של המטופל; 3) ברוב המקרים, אבחון מאוחר, אשר מוסבר על ידי הדינמיקה הטבעית של התגובה החיסונית ההומורלית; 4) היכולת לקחת Abs אנמנסטי (כתוצאה ממחלה קודמת או חיסון) עבור Abs לזיהום הנוכחי. בעת קביעת אנטיגנים מיקרוביאליים, החסרונות ה-3 וה-4 נעדרים, אך יש צורך לקחת בחשבון את המוזרויות של מחזור האנטיגנים של חיידקים שונים ולתאם תכונות אלה עם האפשרות לקחת חומר למחקר.

שלבי השיטה הסרולוגית:

1) לוקח חומרי מחקר. ברוב המקרים, החומר הוא סרום דם. הוא מתקבל לאחר היווצרות קריש דם, יש ליטול את הדם בתנאים אספטיים לחלוטין לפי השיטה הסטנדרטית,

2) הבחירה בבדיקה סרולוגית למקרה נתון תלויה במטרת המחקר, במחלה החשודה, בשלב המחלה, בחומר למחקר, ברגישות התגובה וביכולות של מעבדה מסוימת. תגובות אגלוטינציה משמשות לזיהוי Abs ו-Ags ( RA), המאגלוטינציה פסיבית ( RPGA)), אימונופלואורסצנטי (שׁוּנִית), עיכוב ההמגלוטינציה ( RTGA), מִשׁקָע, הַפתָתָה, תגובת קיבוע משלים (RCC) וכו'.

3) הקמת תגובה סרולוגית,

4) רישום תגובה סרולוגית על מנת לקבוע נוכחות של סמנים סרולוגיים של זיהום.

מגוון תגובות סרולוגיות מאופיינות במספר מאפיינים כלליים:

1) מכיוון שכל תגובות סרולוגיות הן תגובות של אינטראקציה של Ab ו-Ag, בכל המקרים, כדי לבסס את נוכחותו של Ab במצע הבדיקה, קבוצה של Ag corpuscular סטנדרטי או מסיס ידוע, הנקראת אבחון. בתורו, כדי לבסס את נוכחותו של Ag, סט סרת אבחון חיסונית,

2) האינטראקציה של Ag ו-Ab מתבצעת רק בנוכחות אלקטרוליט, המשמש בדרך כלל כתמיסה איזוטונית של נתרן כלורי או תערובות חיץ, ה-pH של המערכת צריך להיות בערך 7,

3) להיווצרות קומפלקס Ag-At, נדרשת תקופת דגירה בתנאי טמפרטורה מיוחדים (מ +4 מעלות צלזיוס עד 37 מעלות צלזיוס). היווצרות של קומפלקס חיסוני ספציפי מתרחשת במהירות; תופעה הנראית לעין בלתי מזוינת (אגלוטינציה, תמוגה וכו') - לאט, לאחר מספר שעות או אפילו ימים,

4) שני מרכיבי התגובה הסרולוגית (אנטיגן ונוגדנים) חייבים להיות נוכחים ביחס שווה ערך. עודף של כל אחד מהרכיבים חוסם את היווצרות הקומפלקס Ag-Ab ותורם לתוצאות שליליות שגויות.

התחשבות בתגובות סרולוגיות מתבצעת באופן ויזואלי, לפעמים עם זכוכית מגדלת. המהות של התחשבות בתגובה הסרולוגית מצטמצמת לקביעת תופעת הקישור של Ag ו-Ab על ידי היווצרות קומפלקס Ag-Ab. מבחינה ויזואלית, היווצרות קומפלקס Ag-At מלווה בשתי תופעות עיקריות - צבירה ומשקעים. ההבדלים ביניהם נקבעים על פי מאפיינים של אנטיגנים ונוגדנים ספציפיים להם. יחד עם זאת, בין האנטיגנים המיקרוביאליים יש גם כאלה המעוררים סינתזה של אלה שאינם משקעים, היווצרות קומפלקס Ag-Ab במקרה זה אינה מלווה בתופעת הצבירה או תופעת המשקעים, והגילוי. העובדה של היווצרות קומפלקס Ag-Ab מחייבת סימון המרכיב האבחוני של התגובה עם תוויות מיוחדות. או העברה של האנטיגן האבחנתי למצב צבירה אחר.

בעת הערכת התגובה, נעשה שימוש ב-3 קריטריונים עיקריים: 1) נוכחות ועוצמת התגובה (בפלוסים וכו'); 2) טיטר אבחנתי, 3) עלייה בטיטר הנוגדנים במהלך המחלה פי 4 או יותר. הנוכחות של תגובה נקבעת על ידי תופעות חזותיות או על ידי קשירה של סמן אימונוכימי. להעריך את עוצמת התגובה הסרולוגית באמצעות העיקרון של 4 "+" (טבלה 7).

טבלה 7

המערכת להערכת תגובות סרולוגיות ב-4 "+" עבור תגובות אגלוטינציה ומשקעים

כדי לכמת את התוצאות של תגובה סרולוגית, נעשה שימוש במושג נוגדן או כיטר אנטיגן. כדי לקבוע את טיטר At (או טיטר Ag), יש צורך לשים תגובה סרולוגית על ידי הכנת סדרה של דילולים של סרום דם או חומר אחר (טיטר). בעת הכנת דילולים של סרום דם, משתמשים בתמיסת אלקטרוליט (לרוב תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית). שלב הדילול (טיטרציה) נקבע לפי היחס בין נפח תמיסת האלקטרוליט לנפח סרום הדם. לדוגמה, בדילול סדרתי בצעד פי 2 מערבבים במבחנה 1 נפחים שווים של תמיסת אלקטרוליט וסרום דם, בשלב של פי 5 מוסיפים נפח 1 של סרום ל-4 חלקי נפח של תמיסת האלקטרוליט. , בשלב של פי 10 - עד 9 נפחים של תמיסת אלקטרוליט הוסף נפח אחד של סרום דם (טבלה 8).