FISH krāsošanas metode (fluorescējošā in situ hibridizācija) tika izstrādāta Livermoras Nacionālajā laboratorijā (ASV) 1986. gadā. Šī ir principiāli jauna metode hromosomu pētīšanai – metode DNS fluorescējošai noteikšanai, hibridizējot in situ ar specifiskām molekulārām zondēm. Metode ir balstīta uz hromosomu DNS spēju noteiktos apstākļos saistīties ar DNS fragmentiem (DNS zondēm), kas ietver hromosomu DNS komplementāras nukleotīdu sekvences. DNS zondes ir iepriekš marķētas ar īpašām vielām (piemēram, biotīnu vai digoksigenīnu). Marķētās DNS zondes tiek izmantotas metafāzes hromosomu citoģenētiskajiem preparātiem, kas sagatavoti hibridizācijai. Pēc hibridizācijas preparātus apstrādā ar īpašām fluorescējošām krāsvielām, kas konjugētas ar vielām, kas var selektīvi pievienoties biotīnam vai digoksigenīnam. Katrai hromosomai ir noteikta krāsa. Hibridizāciju var veikt arī ar radioaktīvi iezīmētām zondēm. Citoģenētiskā analīze tiek veikta fluorescējošā mikroskopā ultravioletajā gaismā.

FISH metodi izmanto nelielu dzēšanu un translokāciju noteikšanai. Hromosomu apmaiņas (translokācijas un dicentrikas) starp dažādu krāsu hromosomām ir viegli definējamas kā daudzkrāsainas struktūras.

Darba beigas -

Šī tēma pieder sadaļai:

Apmācības modulis. Šūnu bioloģija

Augstākā profesionālā izglītība.. Baškīrijas Valsts medicīnas universitāte.. Veselības un sociālās attīstības ministrija..

Ja jums ir nepieciešams papildu materiāls par šo tēmu vai jūs neatradāt to, ko meklējāt, mēs iesakām izmantot meklēšanu mūsu darbu datubāzē:

Ko darīsim ar saņemto materiālu:

Ja šis materiāls jums bija noderīgs, varat to saglabāt savā lapā sociālajos tīklos:

Čivināt

Visas tēmas šajā sadaļā:

Apmācības modulis. Vispārējās un medicīniskās ģenētikas pamati
(metodiskie norādījumi studentiem) Akadēmiskā disciplīna Bioloģija Sagatavošanas virzienam General Medicine Co.

Laboratorijas darbu izpildes noteikumi
Nepieciešams objekta mikroskopiskās izpētes elements ir tā skicēšana albumā. Skices mērķis ir labāk izprast un nostiprināt atmiņā objekta struktūru, atsevišķu struktūru formu

Praktiskais darbs
1. Pagaidu preparāta “Sīpolu plēves šūnas” sagatavošana Lai pagatavotu pagaidu preparātu ar sīpolu plēvi, noņem

Citoplazmas membrānu struktūra. Membrānu transporta funkcija
2. Izglītības mērķi: Zināt: - universālas bioloģiskās membrānas uzbūvi; - vielu pasīvās transportēšanas modeļus caur membrānām.

Eikariotu šūnu struktūra. Citoplazma un tās sastāvdaļas
2. Mācību mērķi: Zināt: - organizācijas iezīmes eikariotu šūnas- citoplazmas organellu uzbūve un funkcija

Organelli, kas iesaistīti vielu sintēzē
Jebkurā šūnā notiek tai raksturīgo vielu sintēze, kas ir vai nu būvmateriāli jaunizveidotām struktūrām, lai aizstātu nolietotās, vai arī fermenti, kas iesaistīti bioķīmiskās reakcijās.

Organellas ar aizsargājošām un gremošanas funkcijām
Lizosomas Šīs organellas ir zināmas kopš 20. gadsimta 50. gadiem, kad beļģu bioķīmiķis de Djū aknu šūnās atklāja nelielas granulas, kas satur hidrolītiskas vielas.

Organelli, kas iesaistīti šūnas enerģijas apgādē
Lielākā daļa šūnu funkciju ir saistītas ar enerģijas patēriņu. Dzīva šūna to veido pastāvīgi notiekošu redoksprocesu rezultātā, kas veido

Organelli, kas iesaistīti šūnu dalīšanā un kustībā
Tie ietver šūnu centru un tā atvasinājumus - skropstas un flagellas. Šūnu centrs Šūnu centrs atrodas dzīvnieku šūnās un dažās

Praktiskais darbs Nr.1
1. Pastāvīgā preparāta “Golgi komplekss šūnās” mikroskopiskā analīze mugurkaula ganglijs» Uz preparāta, nervu šūnas nosauktas pēc

Ribosomas
Identificēts, izmantojot elektronu mikroskopija visu pro- un eikariotu organismu šūnās to izmērs ir 8-35 nm, tie atrodas blakus endoplazmatiskā tīkla ārējai membrānai. Uz ribosomām tas tiek veikts ar

Granulēts endoplazmatiskais tīkls
Apsveriet neapstrādātā endoplazmatiskā retikuluma submikroskopisko struktūru elektronu mikrogrāfijā. Tiek identificētas trīs izsalkušā aizkuņģa dziedzera acināro šūnu zonas sikspārnis. Pirms tam

Citoplazmas mikrotubulas
Citoplazmas caurules atrodas visu dzīvnieku un augu organismu šūnās. Tie ir cilindriski, pavedieniem līdzīgi veidojumi, kuru garums ir 20-30 mikroni, 1

Mitotiskā aktivitāte audos un šūnās
Pašlaik ir pētīti daudzu dzīvnieku un augu audu mitotiskie cikli un mitotiskās aktivitātes veids. Izrādījās, ka katram audam ir noteikts mitotiskās aktivitātes līmenis. Ak, m!

Mitoze (netieša dalīšanās) sīpolu sakņu šūnās
Izmantojot maza palielinājuma mikroskopu, atrodiet sīpola galotnes reprodukcijas zonu, novietojiet redzes lauka centrā laukumu ar skaidri redzamām aktīvi dalošajām šūnām. Pēc tam iestatiet sagatavošanu uz lielu jaudu

Amitoze (tieša dalīšanās) peles aknu šūnās
Mikroskopā pārbaudiet peles aknu šūnas ar lielu palielinājumu. Preparātā šūnām ir daudzšķautņaina forma. Nedalāmās šūnās kodols ir apaļš ar kodolu. Daloties šūnās, kuras ir sākušas

Apaļtārpu sinkaryon olu šūna
Izmantojot maza palielinājuma mikroskopu, atrodiet apaļtārpu dzemdes daļu, kas piepildīta ar folikuliem, kas satur olas. Pārbaudiet paraugu lielā palielinājumā. Citoplazma olās saraujas un nolobās

DNS un RNS struktūra un funkcijas. Gēnu struktūra un gēnu ekspresijas regulēšana pro- un eikariotos. Olbaltumvielu biosintēzes stadijas
2. Mācību mērķi: Zināt: - ķīmiskais sastāvs un nukleīnskābju organizācijas iezīmes; - atšķirības starp DNS un RNS;

Pazīmju pārmantošanas modeļi monohibrīda krustojumos. Alēlisko gēnu mijiedarbības veidi
2. Izglītības mērķi: Zināt: - monohibrīda krustošanās modeļus; - I un II Mendeļa likumi; - mijiedarbības veidi

Pazīmju neatkarīgas pārmantošanas likums. Nealēlisko gēnu mijiedarbības veidi
2. Izglītības mērķi: Zināt: - div- un polihibrīda krustošanās modeļus; - Mendeļa III likums; - mijiedarbības veidi

Mainīgums kā dzīvo būtņu īpašība, tās forma. Fenotipiskā (modificējošā vai nepārmantotā) mainība. Genotipiskā mainīgums
2. Mācību mērķi: Zināt: - galvenās mainīguma formas; - gūt priekšstatus par atpazīstamības caurlaidību un izteiksmīgumu

Studentu patstāvīgais darbs skolotāja vadībā
Praktiskais darbs Pazīmes mainīguma pakāpes un variācijas koeficienta noteikšana atkarībā no vides apstākļiem.

Ciltsrakstu analīze
Ne visas ģenētiskās metodes ir piemērojamas, lai analizētu noteiktu cilvēku pazīmju pārmantošanu. Tomēr, pētot vairāku radinieku paaudžu fenotipus, ir iespējams noskaidrot mantojuma raksturu

Dvīņu metode cilvēka ģenētikas pētīšanai
Dvīņu metode ļauj novērtēt ģenētisko un vides faktoru relatīvo lomu konkrētas pazīmes vai slimības attīstībā. Dvīņi var būt monozigotiski (identiski) vai dizigotiski (vienādi

Dermatoglifiskā metode cilvēka ģenētikas pētīšanai
Dermatoglifiskā analīze ir pirkstu, plaukstu un pēdu papilāru modeļu izpēte. Šiem ādas laukumiem ir lielas dermas papillas, un tos pārklājošā epiderma veido g

Citoģenētiskā metode cilvēka ģenētikas izpētē
Starp daudzajām cilvēka iedzimtās patoloģijas izpētes metodēm citoģenētiskā metode ieņem nozīmīgu vietu. Izmantojot citoģenētisko metodi, ir iespējams analizēt iedzimtības materiālo bāzi

Hromosomu komplekta izpēte
Var veikt divos veidos: 1) tiešā metode - metafāzes hromosomu izpēte dalīšanās šūnās, piemēram, kaulu smadzenes(no

Praktiskais darbs
1. Demonstrācijas preparāta “Cilvēka kariotips” apskate citoģenētiskajā laboratorijā Pie X90 palielinājuma redzamības laukā ir redzami leikocīti.

Kariotipa analīze pacientiem ar hromosomu slimībām (no fotogrāfijām)
Nr.1. trisomija 13. hromosomā (Patau sindroms). Kariotips 47, +13. Nr.2. trisomija 18. hromosomā (Edvarda sindroms). Kariotips 47, +18. Nr.3. 21. trisomija (Dauna slimība).

Pirkstu nospiedumu analīzes veikšana
Lai izgatavotu pirkstu nospiedumus, jums ir nepieciešams šāds aprīkojums: fotorullītis, stikls ar laukumu 20x20 cm2, putuplasta gumijas gabals, drukas tinte (vai līdzīga

Kariotipa citoģenētiskā analīze (pamatojoties uz metafāzes plākšņu mikrofotogrāfijām)
1. Uzzīmējiet metafāzes plāksni. 2. Aprēķināt Kopā hromosomas. 3. Identificējiet A grupas hromosomas (3 pāri lielu metacentrisku hromosomu), B (divi pāri lielu

Ekspress metode X-dzimuma hromatīna izpētei mutes gļotādas epitēlija kodolos
Pirms nokasīšanas pacientam tiek lūgts ar zobiem iekost vaiga gļotādu un noslaucīt vaiga iekšējo virsmu ar marles salveti. Šī procedūra ir nepieciešama, lai noņemtu iznīcinātās šūnas, g

Iedzīvotāju statistikas metode
Populācija ir vienas sugas īpatņu kopums, kas ilgstoši apdzīvo vienā teritorijā, relatīvi izolēts no citām šīs sugas īpatņu grupām, brīvi krustojas un ražo

Bioķīmiskā metode
Bioķīmiskās metodes ir balstītas uz enzīmu sistēmu aktivitātes izpēti (vai nu pēc paša fermenta aktivitātes, vai pēc šī enzīma katalizēto reakcijas galaproduktu skaita). Bioķīmiskās vielas

Molekulārā ģenētiskā metode
Visas molekulārās ģenētiskās metodes ir balstītas uz DNS struktūras izpēti. DNS analīzes posmi: 1. DNS izolēšana no šūnām, kas satur kodolus (asinis

DNS sintēzes polimerāzes ķēdes reakcija
Polimerāze ķēdes reakcija(PCR) ir DNS amplifikācijas (reproducēšanas) metode in vitro, ar kuras palīdzību dažu stundu laikā var identificēt un reproducēt interesējošo DNS fragmentu, kura izmērs ir no 80.

Nr Pilns vārds Genotips Ivanovs AA Petrovs Aa

Novērotais genotips un alēļu frekvences
Genotipi, alēles Gadījumu skaits Biežums (frakcijās) AA 1 / 5 = 0,2 Aa

Novērotās un paredzamās genotipu un alēļu frekvences
Novērotais gadījumu skaits Novērotais biežums Paredzamais AA biežums (p2)

Novērotais genotips un alēļu frekvences
Nē Spēja mēli izrullēt caurulītē Genotipi Es varu (jā) A_

Piena vēzis - bīstama slimība, kas pēc statistikas ieņem pirmo vietu starp sieviešu vēža slimībām. Šīs slimības attīstības risks palielinās visām sievietēm, kas vecākas par 40 gadiem, un to var izraisīt vairāki citi faktori. Visticamākie krūts vēža cēloņi ir aptaukošanās, ģenētiska vai iedzimta predispozīcija, agrs sākums menstruācijas un to novēlota pabeigšana, hormonālā vai staru terapija.

Turklāt saslimstības risks ir palielināts sievietēm, kuras nav dzemdējušas un kurām jau ir bijis vēzis. Arī vīrieši var saslimt ar krūts vēzi.

Diagnozes veidi un metodes

Pirmais krūts vēža diagnostikas posms ir kārtējā mamologa pārbaude. Sievietēm, kas vecākas par 40 gadiem, šādas pārbaudes jāveic vismaz reizi divos gados. Ārsts veic piena dziedzeru vizuālo pārbaudi, palpāciju un mamogrāfiju. Vizuālās slimības attīstības pazīmes var ietvert:

Galvenā informācija

Krūts rentgenogrāfija (mamogrāfija) ļauj noteikt audzēja klātbūtni, izmēru un atrašanās vietu. Lai palielinātu iegūto rezultātu precizitāti, tiek izmantota kontrastvielas ieviešanas tehnoloģija. Ja audzējs jau ir konstatēts, tad tiek izmantota pneimocistogrāfijas metode - audzēja šķidruma izņemšana un gaisa ievadīšana dobumā. Ja audzēja klātbūtne nav norādīta, tad tiek izmantota duktogrāfija - kontrastvielas ievadīšana piena kanālos.

Šīs metodes ļauj vizualizēt veidojumu klātbūtni krūšu audos.

Ja audzēja klātbūtne kļūst acīmredzama arī mamogrāfijā, pacientam tiek izsniegts nosūtījums diagnostikas pasākumu kompleksam:

Izmantojot ultraskaņu, ārsts var atšķirt audzēju no cistas un noskaidrot veidošanās vietu. Pēc tam no tā tiek ņemts audu paraugs biopsijai. Biopsija ļauj noskaidrot audzēja veidu: labdabīgs vai ļaundabīgs, kā arī noteikt, vai audzējs ir atkarīgs no hormoniem. Šī informācija ļauj ārstam izlemt par ārstēšanas stratēģiju, bet ne vienmēr ļauj noteikt stadiju. Bieži vien pat ar visiem nepieciešamajiem diagnostikas pasākumiem to var noteikt tikai pēc operācijas.

Histoloģisko pētījumu mehānisms

Audu biopsija tiek veikta gan pirms, gan pēc operācijas. Procedūra tiek veikta pēc veidojuma lokalizācijas noskaidrošanas.

Biopsija ir audu gabala noņemšanas process, un tā izpēti sauc par "histoloģisko izmeklēšanu" vai vienkārši "histoloģiju".

Medicīnas darbinieks ar speciālu adatu izņem no audzēja nelielu audu daudzumu vai no pacienta ķermeņa jau izņemtu audzēju nosūta histoloģiskai izmeklēšanai. Pēc tam audu fragments tiek īpaši iekrāsots un apstrādāts, lai palielinātu kontrastu un atvieglotu pētīšanu. Speciālists apskata griezumu ar mikroskopa palīdzību un sniedz atzinumu par audzēja veidošanās kvalitāti. Šajā pētījumā daudz kas ir atkarīgs no laboratorijas tehniķa, kurš sniedz secinājumu, uzmanības un kvalifikācijas.

Līdzīgs pētījums ir imūnhistoķīmija. Kopumā to var saukt arī par “histoloģiju”, jo metode ir balstīta uz audu izpēti, bet imūnhistoķīmija ir progresīvāka analīzes metode. Šajā pētījumā audi tiek iekrāsoti arī ar īpašiem reaģentiem, kas ne tikai uzlabo vizuālo kontrastu, bet arī īpašā veidā apvieno (“iezīmē”) ar antivielām, kas ļauj noskaidrot vairāk audzēja īpašību. Šajā gadījumā reakcija notiek daudz ātrāk, kas ļauj ātri iegūt analīzes rezultātus.

Imūnhistoķīmija ļauj ne tikai noskaidrot audzēja veidu, bet arī plānot pacienta ārstēšanas stratēģiju, pamatojoties uz audzēja audu jutīguma noteikšanu pret. dažādi veidi terapeitiskie efekti. Turklāt šis pētījums ir maksimāli automatizēts, kas ļauj līdz minimumam samazināt cilvēciskā faktora izraisītas diagnostikas kļūdas iespējamību.

Ir arī mūsdienīgi diagnostikas pasākumi, kas ļauj noteikt audzēja klātbūtni organismā: tas ir spektrālais asins tests, imunoloģiskā (bioķīmiskā) analīze, audzēja audu FISH tests. Ģenētiskā asins analīze ļauj jebkurai sievietei pārbaudīt, vai viņai ir vai nav krūts vēža priekšnoteikumi. CT un MRI ļauj precīzi noteikt audzēja atrašanās vietu un uzraudzīt tā attīstības dinamiku, novērtējot audzēja struktūru.

Kā atklāt vēzi, izmantojot asins analīzi?

Asins analīzi parasti nosaka ārsts pēc ultraskaņas izmeklēšanas. Ir situācijas, kad pacients pēc savas iniciatīvas nodod asinis logu marķieriem vai ģenētiskai analīzei, lai noteiktu noslieci uz krūts vēzi. Dažos gadījumos vispārēja asins analīze var būt iemesls sazināties ar onkoloģijas klīniku (kopā ar mezgla palpāciju vai vizuālām vēža pazīmēm).

Bioķīmiskā analīze

Asinis kā izpētes materiāls ļauj veikt šādus diagnostikas pasākumus:

Tajā pašā laikā tikai pirmās divas analīzes var saukt par specializētām vēža noteikšanas metodēm, no kurām otrā ir vairāk preventīva nekā operatīva. Divas citas asins analīzes tiek veiktas galvenokārt pirms operācijas, lai noteiktu ķermeņa stāvokli un procesa apjomu. Taču, kā jau minēts, ja krūtīs ir jūtams kamols un vispārējā asins analīzē ir vairāk nekā divi negatīvi diagnostikas koeficienti, tas ir iemesls konsultēties ar speciālistu. Negatīvie koeficienti ir rādītāji ārpus normas noteiktos asins sastāva parametros.

Bioķīmiskā asins analīze var noteikt antivielu klātbūtni pret audzēja šūnām. Šādus ķermeņus sauc par audzēju marķieriem. Audzēja marķieru skaits un veids ir atkarīgs no specifikas (lokalizācijas) vēža audzējs un tās attīstības stadija. Audzēja marķieri ietver:

Krūts vēža gadījumā ārstējošo ārstu galvenokārt interesēs audzēja marķiera CA-15-3 klātbūtne, jo tā klātbūtne asinīs nepārprotami norāda uz krūts vēzi. Rezultāta atšifrēšana aizņem vidēji vienu dienu. Bioķīmiskā analīze tiek veikta vairākas reizes slimības gaitā. Asinis šim nolūkam tiek ņemtas no vēnas dienas pirmajā pusē tukšā dūšā. Divas nedēļas pirms testa pacients pārtrauc lietot visu zāles(jāapstiprina ārstējošajam ārstam). Divas dienas pirms asins nodošanas nedrīkst lietot alkoholu, treknu vai ceptu pārtiku.

Stundu pirms procedūras nedrīkst smēķēt un vēlams mazināt emocionālo stresu. Asinis uz bioķīmiskā analīze Parasti tās netiek lietotas uzreiz pēc staru un fizioterapeitiskās ārstēšanas.

Ģenētisko faktoru noteikšana

Pirms runāt par ģenētisko asins analīzi, ir vērts uzsvērt atšķirību starp jēdzieniem “ģenētiskais” un “iedzimts”. Ģenētiskais faktors vēža rašanās ir plašāks jēdziens, kas nozīmē ne tikai radinieku klātbūtni ar krūts vēzi, bet arī specifisku gēnu mutāciju, kas palielina šīs slimības risku.

Iedzimtība norāda uz iespējamu krūts vēža risku, pamatojoties uz ģimenes vēsturi. Tajā pašā laikā mutanta gēnu var saņemt ne tikai sievietes, bet arī vīrieši, taču tā nesējs ne vienmēr saslimst.

Jebkura sieviete var iziet ģenētisko testu. Tas ir īpaši ieteicams tiem, kuru tiešajiem radiniekiem ir bijis krūts vēzis. Pirms asins nodošanas analīzei pacientam jārunā ar speciālistu ģenētikas jomā, kurš izskaidros rezultātu atšifrēšanas nianses. Pirms asins nodošanas pacientam nav nepieciešama īpaša sagatavošanās.

Saņemšanas gadījumā pozitīvs rezultāts BRCA gēnu mutācijas, bet citu neesamības gadījumā satraucoši simptomi, nav jākrīt panikā. Sievietēm, kurām ir šo gēnu mutācijas, profilaktiskos nolūkos var ieteikt regulāri veikt pašpārbaudi un fiziskas pārbaudes. Pēc 40 gadiem ir jēga domāt par olnīcu un krūšu izņemšanu, jaunākām sievietēm, kuras nākotnē neplāno bērnus, dažreiz tiek ieteikts lietot kontracepcijas līdzekļus. Lēmums par šiem pasākumiem pilnībā gulstas uz pašas sievietes pleciem un prasa pārdomātu pieeju un konsultācijas ar ārstiem.

Jaunākās diagnostikas metodes

Spektrālā analīze asinis atklāj audzēju klātbūtni organismā ar varbūtību līdz 93%. Šī ir salīdzinoši lēta diagnostikas metode, kuras pamatā ir asins seruma apstarošana ar infrasarkano spektru un tā molekulārā sastāva analīzi.

Secinājums par spektrālo asins analīzi tiek sniegts saskaņā ar “klātbūtnes-prombūtnes” principu, un tā mērķis ir identificēt lielāko daļu ļaundabīgo audzēju veidu. Šis tests var arī noteikt krūts vēža attīstības stadiju. Rezultāti tiek atšifrēti laboratorijā, un tiem nav nepieciešams papildu ārsta atzinums.

Lai ziedotu asinis spektrālai analīzei, 2 mēnešus pirms procedūras jāpārtrauc medikamentu lietošana. No rentgena vai cita veida apstarošanas, kā arī ķīmijterapijas brīža jāpaiet vismaz 3 mēnešiem. Turklāt sievietei asins savākšanas laikā nedrīkst būt grūtniecība vai menstruācijas. Asins paraugu ņemšana notiek tukšā dūšā dienas pirmajā pusē. Spektrālā asins analīze aizņem vidēji 12 darba dienas.

Viens no jaunākās metodes Vēža diagnoze ir tā sauktais “zivju tests” (FISH, fluorescences hibridizācija). Tā efektivitāte joprojām tiek apspriesta; galvenais jautājums par tā iespējamību ir dārgā izpētes procedūra. Metodes būtība ir šūnu fragmentu marķēšana ar fluorescējošu sastāvu un turpmāka šūnu mikroskopiskā izmeklēšana. Pamatojoties uz to, ar kurām ģenētiskā materiāla daļām ir saistīti iezīmētie fragmenti, var saprast, vai pacientam ir nosliece uz vēzi un kādas ārstēšanas metodes būs aktuālas konkrētajā gadījumā.

FISH testam nav nepieciešamas pilnībā nobriedušas šūnas, tāpēc to var veikt daudz ātrāk nekā citus laboratorijas testus. Turklāt FISH metode ļauj skaidrāk novērot ģenētiskos bojājumus, ko nav iespējams izdarīt ar cita veida analīzēm. FISH testu visbiežāk izmanto krūts vēža noteikšanai, taču tas darbojas arī vairāku citu vēža veidu noteikšanai.

FISH testa trūkumi ietver ne tikai tā augstās izmaksas, bet arī tā nespēju darboties dažos hromosomu reģionos marķējumu specifikas dēļ. Turklāt FISH tests ignorē dažus mutāciju un bojājumu veidus ģenētiskais kods, kas var būt svarīgs diagnostikas izlaidums. Salīdzinošie FISH pētījumi ar lētāku IHC testu neliecināja par būtisku priekšrocību, nosakot vēža šūnu jutību pret Herceptin. Tomēr FISH tests pašlaik ir ātrākais starp ļoti precīzām vēža diagnostikas metodēm.

Vadītājs
"Onkoģenētika"

Žusina
Jūlija Gennadievna

Beidzis Voroņežas štata Pediatrijas fakultāti medicīnas universitāte viņiem. N.N. Burdenko 2014. gadā.

2015. gads - prakse terapijā VSMU vārdā nosauktajā Fakultātes terapijas katedrā. N.N. Burdenko.

2015 - sertifikācijas kurss specialitātē “Hematoloģija” Hematoloģijas pētniecības centrā Maskavā.

2015-2016 – terapeits VGKBSMP Nr.1.

2016. gads - tika apstiprināta kandidāta zinātniskā grāda promocijas darba tēma medicīnas zinātnes"mācās klīniskā gaita slimība un prognoze pacientiem ar hronisku obstruktīvu plaušu slimību ar anēmisku sindromu. Vairāk nekā 10 publicētu darbu līdzautors. Zinātnisko un praktisko ģenētikas un onkoloģijas konferenču dalībnieks.

2017. gads - padziļinātas apmācības kurss par tēmu: “Ģenētisko pētījumu rezultātu interpretācija pacientiem ar iedzimtām slimībām”.

Kopš 2017. gada rezidentūra specialitātē “Ģenētika” uz RMANPO bāzes.

Vadītājs
"Ģenētika"

Kanivets
Iļja Vjačeslavovičs

Kanivets Iļja Vjačeslavovičs, ģenētiķis, medicīnas zinātņu kandidāts, medicīnas ģenētiskā centra Genomed ģenētikas nodaļas vadītājs. Medicīniskās ģenētikas nodaļas asistente, krievu valoda medicīnas akadēmija nepārtraukta profesionālā izglītība.

2009. gadā absolvējis Maskavas Valsts medicīnas un zobārstniecības universitātes Medicīnas fakultāti, bet 2011. gadā – rezidentūru specialitātē “Ģenētika” šīs pašas universitātes Medicīnas ģenētikas katedrā. 2017. gadā viņš aizstāvēja disertāciju medicīnas zinātņu kandidāta grāda iegūšanai par tēmu: DNS sekciju (CNV) kopiju skaita variāciju molekulārā diagnostika bērniem ar iedzimtām malformācijām, fenotipiskām anomālijām un/vai. garīga atpalicība izmantojot augsta blīvuma SNP oligonukleotīdu mikromasīvus"

No 2011.-2017.gadam viņš strādāja par ģenētiķi vārdā nosauktajā Bērnu klīniskajā slimnīcā. N.F. Filatovs, Federālās valsts budžeta iestādes “Medicīnas ģenētisko pētījumu centrs” zinātnisko konsultāciju nodaļa. No 2014. gada līdz mūsdienām viņš ir medicīnas centra Genomed ģenētikas nodaļas vadītājs.

Galvenās darbības jomas: iedzimtu slimību un iedzimtu anomāliju, epilepsijas pacientu diagnostika un vadība, medicīniskā un ģenētiskā konsultēšana ģimenēm, kurās piedzimis bērns ar iedzimtu patoloģiju vai attīstības defektiem, prenatālā diagnostika. Konsultācijas laikā tiek analizēti klīniskie dati un ģenealoģija, lai noteiktu klīnisko hipotēzi un nepieciešamo ģenētisko testu apjomu. Pamatojoties uz aptaujas rezultātiem, dati tiek interpretēti un saņemtā informācija tiek skaidrota konsultantiem.

Viņš ir viens no projekta “Ģenētikas skola” dibinātājiem. Regulāri uzstājas ar prezentācijām konferencēs. Lasa lekcijas ģenētiķiem, neirologiem un akušieriem-ginekologiem, kā arī pārmantoto slimību pacientu vecākiem. Viņš ir vairāk nekā 20 rakstu un recenziju autors un līdzautors Krievijas un ārvalstu žurnālos.

Profesionālo interešu joma ir mūsdienu genoma mēroga pētījumu ieviešana klīniskajā praksē un to rezultātu interpretācija.

Pieņemšanas laiks: T, P 16-19

Vadītājs
"Neiroloģija"

Šarkovs
Artjoms Aleksejevičs

Šarkovs Artjoms Aleksejevičs– neirologs, epileptologs

2012. gadā studējis starptautiskās programmas “Austrumu medicīna” ietvaros Tegu Haanu Universitātē Dienvidkorejā.

Kopš 2012. gada - līdzdalība ģenētisko testu xGenCloud interpretācijas datu bāzes un algoritma organizēšanā (https://www.xgencloud.com/, projektu vadītājs - Igors Ugarovs)

2013. gadā absolvējis Krievijas Nacionālās pētniecības medicīnas universitātes Pediatrijas fakultāti, kas nosaukta N.I. Pirogovs.

No 2013. līdz 2015. gadam studējis neiroloģijas klīniskajā rezidentūrā Federālajā valsts budžeta iestādē "Neiroloģijas zinātniskais centrs".

Kopš 2015. gada viņš strādā par neirologu un pētnieku akadēmiķa Yu.E. vārdā nosauktajā Pediatrijas zinātniski pētnieciskajā klīniskajā institūtā. Veltishchev GBOU VPO RNIMU im. N.I. Pirogovs. Viņš strādā arī par neirologu un ārstu video-EEG novērošanas laboratorijā vārdā nosauktajās Epileptoloģijas un neiroloģijas centra klīnikās. A.A. Kazarjans" un "Epilepsijas centrs".

2015. gadā viņš pabeidza apmācību Itālijā skolā “2nd International Residential Course on Drug Resistant Epilepsies, ILAE, 2015”.

2015. gadā padziļināta apmācība - “Klīniskā un molekulārā ģenētika ārstniecības personām”, RDKB, RUSNANO.

2016. gadā padziļinātas apmācības - “Molekulārās ģenētikas pamati” bioinformātiķa, Ph.D. vadībā. Konovalova F.A.

Kopš 2016. gada - laboratorijas Genomed neiroloģiskā virziena vadītājs.

2016. gadā viņš pabeidza apmācību Itālijā skolā “San Servolo international advanced course: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016”.

2016. gadā padziļināta apmācība - “Inovatīvās ģenētiskās tehnoloģijas ārstiem”, “Laboratoriskās medicīnas institūts”.

2017. gadā – skola “NGS in Medical Genetics 2017”, Maskavas Valsts pētniecības centrs

Šobrīd diriģē Zinātniskie pētījumi epilepsijas ģenētikas jomā profesora MD vadībā. Belousova E.D. un profesors, medicīnas zinātņu doktors. Dadali E.L.

Apstiprināta medicīnas zinātņu kandidāta grāda promocijas darba tēma “Agrīnas epilepsijas encefalopātiju monogēno variantu klīniskie un ģenētiskie raksturojumi”.

Galvenās darbības jomas ir epilepsijas diagnostika un ārstēšana bērniem un pieaugušajiem. Šaurā specializācija – epilepsijas ķirurģiskā ārstēšana, epilepsijas ģenētika. Neiroģenētika.

Zinātniskās publikācijas

Šarkovs A., Šarkova I., Golovtejevs A., Ugarovs I. “Optimizācija diferenciāldiagnoze un XGenCloud ekspertu sistēmas ģenētisko testu rezultātu interpretācija noteiktām epilepsijas formām. Medicīniskā ģenētika, Nr. 4, 2015, 1. lpp. 41.
*
Šarkovs A.A., Vorobjovs A.N., Troickis A.A., Savkina I.S., Dorofejeva M.Ju., Melikjans A.G., Golovtejevs A.L. "Epilepsijas operācija multifokāliem smadzeņu bojājumiem bērniem ar tuberozo sklerozi." XIV Krievijas kongresa "INOVATĪVĀS TEHNOLOĢIJAS PEDIATRIJĀ UN BĒRNU ĶIRURĢIJĀ" tēzes. Krievijas Perinatoloģijas un pediatrijas biļetens, 4, 2015. - 226.-227.lpp.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Šarkova A.A. "Molekulārās ģenētiskās pieejas monogēnu idiopātisku un simptomātisku epilepsiju diagnosticēšanai." XIV Krievijas kongresa tēzes "INOVATĪVĀS TEHNOLOĢIJAS PEDIATRIJĀ UN BĒRNU ĶIRURĢIJĀ." Krievijas perinatoloģijas un pediatrijas biļetens, 4, 2015. - 221. lpp.
*
Šarkovs A.A., Dadali E.L., Šarkova I.V. "Rets 2. tipa agrīnas epilepsijas encefalopātijas variants, ko izraisa CDKL5 gēna mutācijas vīriešu dzimuma pacientam." Konference "Epileptoloģija neirozinātņu sistēmā". Konferences materiālu krājums: / Rediģēja: prof. Neznanova N.G., prof. Mihailova V.A. Sanktpēterburga: 2015. – lpp. 210-212.
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troickis A.A., Golovtejevs A.L., Poļakovs A.V. Jauns mioklonusa epilepsijas 3. tipa alēlais variants, ko izraisa mutācijas KCTD7 gēnā // Medicīniskā ģenētika.-2015.- 14. sēj.-nr.9.- 44.-47.lpp.
*
Dadali E.L., Šarkova I.V., Šarkova A.A., Akimova I.A. "Klīniskās un ģenētiskās pazīmes un mūsdienu metodes iedzimtu epilepsiju diagnosticēšanai." Materiālu krājums “Molekulārās bioloģiskās tehnoloģijas medicīnas praksē” / Red. Korespondējošais biedrs RAIN A.B. Masļeņņikova.- Jautājums. 24.- Novosibirska: Akademizdat, 2016.- 262: lpp. 52-63
*
Belousova E.D., Dorofejeva M.Ju., Šarkova A.A. Epilepsija bumbuļveida sklerozes gadījumā. Grāmatā "Smadzeņu slimības, medicīniskie un sociālie aspekti", ko rediģēja Gusev E.I., Gekht A.B., Maskava; 2016. gads; lpp.391-399
*
Dadali E.L., Šarkovs A.A., Šarkova I.V., Kanivets I.V., Konovalovs F.A., Akimova I.A. Iedzimtas slimības un sindromi, ko pavada drudža lēkmes: klīniskās un ģenētiskās īpašības un diagnostikas metodes. //Krievijas Bērnu neiroloģijas žurnāls.- T. 11.- Nr.2, lpp. 33-41. doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
*
Šarkovs A.A., Konovalovs F.A., Šarkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. Molekulārās ģenētiskās pieejas epilepsijas encefalopātijas diagnosticēšanai. Abstraktu krājums “VI BALTIJAS KONGRESS PAR BĒRNU NEIROLOĢIJU” / Profesore Guzeva V.I. Sanktpēterburga, 2016, lpp. 391
*
Hemisferotomija pret zālēm rezistentas epilepsijas ārstēšanai bērniem ar divpusēju smadzeņu bojājumu Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Abstraktu krājums “VI BALTIJAS KONGRESS PAR BĒRNU NEIROLOĢIJU” / Profesore Guzeva V.I. Sanktpēterburga, 2016, lpp. 157.
*
*
Raksts: Agrīnas epilepsijas encefalopātiju ģenētika un diferencēta ārstēšana. A.A. Šarkovs*, I.V. Šarkova, E.D. Belousova, E.L. Jā, viņi to izdarīja. Neiroloģijas un psihiatrijas žurnāls, 9, 2016; Vol. 2doi: 10.17116/jnevro 20161169267-73
*
Golovtejevs A.L., Šarkovs A.A., Troickis A.A., Altunina G.E., Zemļanskis M.Ju., Kopačevs D.N., Dorofejeva M.Ju. "Ķirurģiskā epilepsijas ārstēšana bumbuļveida sklerozes gadījumā", ko rediģēja Dorofeeva M.Yu., Maskava; 2017. gads; 274. lpp
*
Jauns starptautiskās klasifikācijas epilepsija un epilepsijas lēkmes no Starptautiskās līgas pret epilepsiju. Neiroloģijas un psihiatrijas žurnāls. C.C. Korsakovs. 2017. T. 117. Nr. 7. P. 99-106

Vadītājs
"Pirmsdzemdību diagnoze"

Kijeva
Jūlija Kirilovna

2011. gadā absolvējusi Maskavas Valsts medicīnas un zobārstniecības universitāti. A.I. Evdokimova ieguvusi vispārējās medicīnas grādu.Studējusi rezidentūru tās pašas universitātes Medicīnas ģenētikas katedrā ar grādu ģenētikā.

2015. gadā izgāja praksi Dzemdniecībā un ginekoloģijā Federālās valsts budžeta profesionālās augstākās izglītības iestādes "MSUPP" Ārstu padziļinātās apmācības medicīnas institūtā

Kopš 2013.gada viņš vada konsultācijas Veselības departamenta Valsts budžeta iestādē "Ģimenes plānošanas un reprodukcijas centrs".

Kopš 2017. gada ir laboratorijas Genomed virziena “Prenatālā diagnostika” vadītājs.

Regulāri uzstājas konferencēs un semināros. Lasa lekcijas dažādiem ārstiem speciālistiem reprodukcijas un prenatālās diagnostikas jomā

Sniedz medicīniskas un ģenētiskas konsultācijas grūtniecēm par pirmsdzemdību diagnostiku, lai novērstu bērnu piedzimšanu ar iedzimtus defektus attīstību, kā arī ģimenes ar, iespējams, iedzimtu vai iedzimtu patoloģiju. Interpretē iegūtos DNS diagnostikas rezultātus.

SPECIĀLISTI

Latipovs
Artūrs Šamilēvičs

Latipovs Artūrs Šamiļevičs ir augstākās kvalifikācijas kategorijas ārsts ģenētiķis.

Pēc Kazaņas Valsts medicīnas institūta Medicīnas fakultātes beigšanas 1976. gadā viņš ilgus gadus strādāja, vispirms par ārstu medicīniskās ģenētikas birojā, pēc tam par Tatarstānas Republikas slimnīcas medicīniski ģenētiskā centra vadītāju. Tatarstānas Republikas Veselības ministrijas galvenais speciālists un Kazaņas Medicīnas universitātes katedru pasniedzējs.

Autoram vairāk nekā 20 zinātniskie darbi par reproduktīvās un bioķīmiskās ģenētikas problēmām, daudzu pašmāju un starptautisko kongresu un konferenču dalībnieks par medicīniskās ģenētikas problēmām. Viņš centra praktiskajā darbā ieviesa grūtnieču un jaundzimušo masveida skrīninga metodes attiecībā uz iedzimtām slimībām un veica tūkstošiem invazīvu procedūru aizdomām par augļa iedzimtām slimībām dažādos grūtniecības posmos.

Kopš 2012. gada viņa strādā Medicīnas ģenētikas katedrā ar kursu prenatālajā diagnostikā Krievijas Pēcdiploma izglītības akadēmijā.

Zinātnisko interešu joma: vielmaiņas slimības bērniem, prenatālā diagnostika.

Pieņemšanas laiks: T 12-15, S 10-14

Ārsti tiek pieņemti pēc pieraksta.

Ģenētiķis

Gabelko
Deniss Igorevičs

2009. gadā absolvējis vārdā nosaukto KSMU Medicīnas fakultāti. S. V. Kurašova (specialitāte “Vispārējā medicīna”).

Stažēšanās Federālās veselības un sociālās attīstības aģentūras Sanktpēterburgas Medicīnas pēcdiploma izglītības akadēmijā (specialitāte “Ģenētika”).

Prakse terapijā. Primārā pārkvalifikācija specialitātē " Ultraskaņas diagnostika" Kopš 2016. gada viņš ir Fundamentālo pamatzināšanu katedras darbinieks klīniskā medicīna Fundamentālās medicīnas un bioloģijas institūts.

Profesionālo interešu joma: pirmsdzemdību diagnostika, modernu skrīninga un diagnostikas metožu izmantošana augļa ģenētiskās patoloģijas noteikšanai. Pārmantoto slimību atkārtošanās riska noteikšana ģimenē.

Zinātnisko un praktisko ģenētikas un dzemdniecības un ginekoloģijas konferenču dalībniece.

Darba pieredze 5 gadi.

Konsultācija pēc pieraksta

Ārsti tiek pieņemti pēc pieraksta.

Ģenētiķis

Grišina
Kristīna Aleksandrovna

Viņa 2015. gadā absolvējusi Maskavas Valsts medicīnas un zobārstniecības universitāti, iegūstot vispārējās medicīnas grādu. Tajā pašā gadā viņa iestājās rezidentūrā specialitātē 08/30/30 “Ģenētika” Federālajā valsts budžeta iestādē “Medicīnas ģenētisko pētījumu centrs”.
Viņa tika pieņemta darbā Sarežģīti pārmantotu slimību molekulārās ģenētikas laboratorijā (vadītājs Dr. A.V. Karpukhin) 2015. gada martā par zinātnisko asistenti. Kopš 2015. gada septembra viņa ir pārcelta uz zinātniskās asistentes amatu. Viņš ir vairāk nekā 10 rakstu un kopsavilkumu autors un līdzautors par klīnisko ģenētiku, onkoģenētiku un molekulāro onkoloģiju Krievijas un ārvalstu žurnālos. Regulārs medicīnas ģenētikas konferenču dalībnieks.

Zinātnisko un praktisko interešu joma: medicīniskā un ģenētiskā konsultēšana pacientiem ar iedzimtu sindromu un multifaktoriālu patoloģiju.

Ģenētiķa konsultācija ļauj atbildēt uz šādiem jautājumiem:

Vai bērna simptomu pazīmes iedzimta slimība kādi pētījumi ir nepieciešami, lai noteiktu cēloni precīzas prognozes noteikšana ieteikumi prenatālās diagnostikas veikšanai un rezultātu izvērtēšanai viss, kas jāzina, plānojot ģimeni konsultācija, plānojot IVF konsultācijas klātienē un tiešsaistē

piedalījās zinātniski praktiskajā skolā „Inovatīvās ģenētiskās tehnoloģijas ārstiem: pielietojums in klīniskā prakse", Eiropas Cilvēka ģenētikas biedrības (ESHG) konference un citas konferences, kas veltītas cilvēka ģenētikai.

Sniedz medicīniskās un ģenētiskās konsultācijas ģimenēm ar aizdomām par iedzimtām vai iedzimtām patoloģijām, t.sk. monogēnas slimības un hromosomu anomālijas, nosaka indikācijas laboratorisko ģenētisko pētījumu veikšanai un interpretē DNS diagnostikas rezultātus. Konsultē grūtnieces par pirmsdzemdību diagnostiku, lai novērstu bērnu ar iedzimtām anomālijām piedzimšanu.

Ģenētiķis, akušieris-ginekologs, medicīnas zinātņu kandidāts

Kudrjavceva
Jeļena Vladimirovna

Ģenētiķis, akušieris-ginekologs, medicīnas zinātņu kandidāts.

Speciālists reproduktīvās konsultācijas un iedzimtas patoloģijas jomā.

2005. gadā absolvējis Urālas Valsts medicīnas akadēmiju.

Rezidentūra dzemdniecībā un ginekoloģijā

Prakse specialitātē "Ģenētika"

Profesionālā pārkvalifikācija specialitātē “Ultraskaņas diagnostika”

Aktivitātes:

• Neauglība un spontāns aborts
Vasilisa Jurievna



Viņa ir absolvējusi Ņižņijnovgorodas Valsts medicīnas akadēmijas Medicīnas fakultāti (specialitāte “Vispārējā medicīna”). Viņa absolvējusi klīnisko rezidentūru FBGNU "MGNC" ar grādu ģenētikā. 2014. gadā viņa pabeidza stažēšanos Maternitātes un bērnības klīnikā (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, Trieste, Itālija).

Kopš 2016. gada strādā par ārstu konsultantu uzņēmumā Genomed LLC.

Regulāri piedalās zinātniskās un praktiskās konferencēs par ģenētiku.

Galvenās darbības: Konsultācijas par ģenētisko slimību klīnisko un laboratorisko diagnostiku un rezultātu interpretāciju. Pacientu un viņu ģimeņu ārstēšana ar aizdomām par iedzimtu patoloģiju. Konsultācijas plānojot grūtniecību, kā arī grūtniecības laikā, par pirmsdzemdību diagnostiku, lai nepieļautu bērnu ar iedzimtām patoloģijām piedzimšanu.

Tā kā FISH tests var noteikt ģenētiskas novirzes, kas izraisa vēzi, tas tā ir efektīva metode noteiktu vēža veidu diagnostika. Testu izmanto arī, lai apstiprinātu diagnozi un ļauj iegūt Papildus informācija O iespējamais rezultāts slimību un ķīmijterapijas lietošanas lietderīgumu.

Piemēram, pacientiem ar krūts vēzi no biopsijas iegūto audu FISH pārbaude palīdz noteikt HER2 gēna kopiju klātbūtni šūnās.

Šūnām ar HER2 gēna kopijām ir vairāk HER2 receptoru, kas saņem signālus, kas stimulē vēža šūnu augšanu krūtīs. Tādēļ pacientiem ar HER2 gēna kopijām ieteicams lietot Herceptin (trastuzumabu), līdzekli, kas inhibē HER2 receptoru spēju uztvert signālus.

FISH testa augsto izmaksu un relatīvās nepieejamības dēļ biežāk tiek izmantots cits krūts vēža noteikšanas tests - imūnhistohotomija (IHC).

Medicīnas aprindās notiek diskusijas par to augsta efektivitāte FISH tests salīdzinājumā ar standarta testiem. Tomēr, pateicoties tehnoloģiju attīstībai, FISH tests kļūst lētāks un plašāk pieejams dažādos klīniskos apstākļos.

Kā darbojas FISH tests?

Veicot FISH testu pacienta audu paraugam, tiek izmantoti fluorescējošie marķējumi, kas saistās tikai ar noteiktas jomas hromosomas. Pēc tam, izmantojot fluorescējošu mikroskopu, tiek noteikti hromosomu apgabali, ar kuriem ir saistītas fluorescējošās zondes, un to klātbūtne. iespējamās novirzes, provocējot vēža attīstību.

IN vēža šūnas Var konstatēt šādas novirzes:

• translokācija - hromosomas sekcijas pārvietošana uz jaunu pozīciju tajā pašā vai citā hromosomā;
• inversija - hromosomas daļas pagriešana par 180 grādiem, vienlaikus saglabājot saikni ar pašu hromosomu;
• dzēšana - hromosomas daļas zudums;
• dublēšanās ir hromosomas daļas dubultošanās, kas izraisa gēnu kopiju pārpalikumu šūnā.

Translokācijas palīdz diagnosticēt dažus leikēmijas, limfomas un sarkomas veidus. Dublēšanās klātbūtne krūts vēža šūnās palīdz ārstam izvēlēties optimālo ārstēšanu.

FISH testa priekšrocība salīdzinājumā ar standarta citoģenētiskajiem testiem (kas pārbauda šūnu ģenētisko sastāvu) ir tāda, ka ar to var noteikt pat vismazākās ģenētiskās izmaiņas, kuras nevar redzēt ar parasto mikroskopu.

Vēl viena svarīga FISH testa atšķirība ir spēja to veikt šūnās, kuras vēl nav sākušas aktīvi attīstīties. Citus testus šūnām veic tikai pēc tam, kad tās ir ieaugušas laboratorijas apstākļi divu nedēļu laikā, tāpēc viss process var ilgt pat trīs nedēļas, un FISH testa rezultāti ir zināmi dažu dienu laikā.

FISH testa piemēri vēža diagnostikai

Lai gan FISH testu visbiežāk izmanto, lai analizētu krūts vēža ģenētiskās novirzes, tas var sniegt arī svarīgu informāciju par citiem vēža veidiem.

Piemēram, diagnosticējot vēzi Urīnpūslis Urīna šūnu FISH tests sniedz precīzākus rezultātus nekā patoloģisku šūnu testi. Turklāt tas ļauj noteikt urīnpūšļa vēža recidīvu 3-6 mēnešus agrāk.

FISH tests palīdz arī noteikt hromosomu anomālijas leikēmijas gadījumā, tostarp šūnas, kas norāda uz agresīvu formu hroniska limfoleikoze(HLL). Pacientiem ar agresīvu CLL var būt nepieciešams steidzama ārstēšana, savukārt mazāk agresīvās formās var pietikt ar novērošanu.

FISH testa strīds

Ne visi eksperti piekrīt, ka FISH tests ir visprecīzākais tests pret Herceptin jutīgu vēža diagnosticēšanai.

2010. gadā zinātnieki no Mayo institūta Īrijā ziņoja, ka lētākais IHC tests bija gandrīz tikpat efektīvs kā FISH tests, lai noteiktu jutību pret Herceptin.

Citi eksperti ir kritizējuši FISH testu par to, ka tas nespēj noteikt nelielas mutācijas, piemēram, nelielas dzēšanas, ievietošanas un punktu mutācijas, kā arī par dažu inversiju ignorēšanu.

FISH testa uzlabošana

Neskatoties uz to, ka FISH testa tehnoloģija vēl neļauj analizēt visus hromosomu reģionus, tā pastāvīgi attīstās šajā virzienā.

Piemēram, 2007. gadā Kanādas zinātnieki paziņoja par mikroskopa priekšmetstikliņa izmēra mikroshēmas izstrādi, kas ļautu veikt FISH testus, izmantojot ierīci, kas iederas plaukstā.

Šis uzlabotais tests, ko sauc par FISH testu mikroshēmā, sniegs rezultātus vienas dienas laikā un maksās mazāk nekā citi testi.

Īsā atbilde: Fluorescences in situ hibridizācijas (FISH) metode ietver unikālu DNS nukleotīdu sekvenču izmantošanu kā zondi, lai meklētu vēlamās DNS sekvences materiālā, kas iegūts no pacienta. Metodes pamatā ir DNS zondes komplementāra saistīšanās ar metafāzes hromosomu vai starpfāzu šūnu DNS. DNS zonde un pārbaudāmā DNS tiek denaturētas, un veidojas vienpavediena DNS. DNS zondi pievieno hromosomu preparātam un inkubē noteikts laiks. Ar fluorohromu iezīmētas zondes esamību vai neesamību DNS pēc hibridizācijas nosaka, pārbaudot hromosomas, izmantojot fluorescences mikroskopiju.

Detalizēta atbilde: Fluorescējošā hibridizācijas metode in situļauj identificēt atsevišķas hromosomas vai to atsevišķās sekcijas metafāzes hromosomu vai starpfāžu kodolu preparātos, pamatojoties uz DNS zondes, kas konjugēta ar fluorescējošu marķējumu, un vēlamās hromosomas sadaļas komplementāru mijiedarbību. Lai vizualizētu peptīdu-nukleīnskābju savienojumus hromosomā, PNA zondes, pamatojoties uz olbaltumvielu produkts.
Metodes pamatā ir DNS zondes komplementāra saistīšanās ar metafāzes hromosomu vai starpfāzu šūnu DNS, un tā ietver šādas darbības:
1. Denaturācija divpavedienu zondes DNS un mērķa DNS uz vienpavedienu DNS augstas temperatūras vai ķīmisku vielu ietekmē.
2. Hibridizācija DNS zonde ar mērķa DNS saskaņā ar komplementaritātes principu, lai izveidotu divpavedienu hibrīda molekulu
3. Pēchibridizācijas mazgāšana lai noņemtu nehibridizētu DNS zondi
4. Analīze hibridizācijas signālus ar fluorescences mikroskopu

Priekšrocības FISH molekulārās ģenētiskās diagnostikas metodes ietver ātru analīzi liels skaitsšūnas, augsta jutība un specifiskums, spēja pētīt nekulturētas un nedalošas šūnas.
Trūkumi metode ir neiespējamība iegūt informāciju par fiziskais stāvoklis DNS vai hromosomu reģions tiek pētīts.
FISH izmanto pirmsdzemdību molekulārģenētiskajā diagnostikā un audzēju raksturošanā; pediatrijas praksē to parasti izmanto, lai identificētu submikroskopiskas dzēšanas, kas saistītas ar specifiskiem attīstības defektiem. Sindromi, kuru pamatā ir mikrodelīcijas, iepriekš tika uzskatīti par nezināmas etioloģijas slimībām, jo ​​​​hromosomu dzēšana un pārkārtošanās izraisot attīstībuŠīs slimības parasti netiek vizualizētas ar tradicionālajām hromosomu analīzes metodēm. Šādas nelielas dzēšanas konkrētos hromosomu reģionos var noteikt ar lielu precizitāti FISH metode. Submikroskopisku dzēšanu izraisītas slimības ietver Pradera-Villi, Andželmana, Viljamsa, Millera-Dīkera, Smita-Madžeņa sindromi un velokardiofaciālais sindroms. FISH atvieglo šo sindromu diagnostiku netipiskos gadījumos, īpaši zīdaiņa vecumā, kad vēl trūkst daudzu diagnostikas testu. nozīmīgas pazīmes slimības. Šīs molekulārās ģenētiskās diagnostikas metodes izmantošana ir ieteicama arī pusaudža un pieaugušā vecumā, kad tas ir tipisks Klīniskās pazīmes bērnībai raksturīgās slimības mainās.

121. DNS zondes. To izmantošana iedzimtu slimību noteikšanā.

Īss apskats

DNS zonde irīss DNS fragments, kas konjugēts ar fluoresceīnu, enzīmu vai radioaktīvo izotopu, ko izmanto hibridizācijai ar mērķa DNS molekulas komplementāro reģionu.

Galvenā daļa

DNS diagnostikas sistēmas

Informācija par visu organisma īpašību daudzveidību ir ietverta tā ģenētiskajā materiālā. Tādējādi baktēriju patogenitāti nosaka konkrēta gēna vai gēnu kopas klātbūtne, un konkrēta gēna bojājuma rezultātā rodas iedzimta ģenētiska slimība. DNS segments, kas nosaka doto bioloģiskā īpašība, ir stingri noteikta nukleotīdu secība un var kalpot kā diagnostikas marķieris.

Daudzu ātru un uzticamu diagnostikas metožu pamatā ir nukleīnskābju hibridizācija – divu dažādu DNS molekulu komplementāru segmentu savienošana pārī. Procedūra iekšā vispārīgs izklāsts ir šāds.

1. Vienpavedienu DNS mērķa fiksācija uz membrānfiltra.

2. Marķētas vienpavedienu DNS zondes pielietošana, kas noteiktos apstākļos (temperatūra un jonu stiprums) savienojas ar mērķa DNS.

3. Nomazgājiet filtru, lai noņemtu lieko nesaistīto iezīmēto DNS zondi.

4. Zondes/mērķa hibrīda molekulu noteikšana.

Diagnostikas testos, kuru pamatā ir nukleīnskābju hibridizācija, galvenie ir trīs komponenti: DNS zonde, mērķa DNS un metode hibridizācijas signāla noteikšanai. Atklāšanas sistēmai jābūt ļoti specifiskai un ļoti jutīgai.

* Fluoresceīns (dioksifluorāns, uranīns A) - organiskais savienojums, fluorescējoša krāsviela. Analītiskajā ķīmijā fluoresceīnu izmanto kā luminiscējošu skābes bāzes indikatoru. Bioķīmijā un molekulārā bioloģija fluoresceīna izotiocianāta atvasinājumi kā bioloģiskas krāsvielas antigēnu un antivielu noteikšanai.

* Atklāšana ir kaut kā atklāšana, identificēšana, atrašana.

*konjugācija=konjugācija

*Ja DNS maisījums, piemēram, cilvēka un peles, tiek izkausēts un atkvēlināts vienā “mēģenē”, dažas peles DNS ķēžu sadaļas atkal apvienosies ar cilvēka DNS ķēžu komplementārām sekcijām, veidojot hibrīdus. Šādu vietu skaits ir atkarīgs no sugas radniecības pakāpes. Jo tuvāk sugas atrodas viena otrai, jo vairāk ir DNS virkņu komplementaritātes jomu. Šo fenomenu sauc DNS-DNS hibridizācija.

122. Tiešās DNS diagnostikas izmantošanas metodes un nosacījumi.

Īss apskats:

Izmantojot tiešās metodes, tiek konstatēti pārkāpumi DNS primārajā nukleotīdu secībā (mutācijas un to veidi). Tiešās metodes raksturo precizitāte, kas sasniedz gandrīz 100%.

Tiešās diagnostikas mērķis ir identificēt mutantu alēles (DNS primārās nukleotīdu secības novirzes, mutācijas un to veidus).

Tiešās DNS diagnostikas metodes trūkums ir nepieciešamība zināt precīzu gēna atrašanās vietu un tā mutāciju spektru. Tiešās DNS diagnostikas metodes ir indicētas tādām slimībām kā fenilketonūrija (mutācija R408W), cistiskā fibroze (visbiežākā mutācija delF508), Hantingtona horeja (trinukleotīdu atkārtojumu paplašināšanās – CTG atkārtojumi) u.c.

Pilna atbilde:

Izmantojot tiešās metodes, tiek konstatēti pārkāpumi DNS primārajā nukleotīdu secībā (mutācijas un to veidi). Tiešās metodes raksturo precizitāte, kas sasniedz gandrīz 100%. Tomēr praksē šīs metodes var izmantot noteiktos apstākļos:

1) zināma par iedzimtas slimības attīstību atbildīgā gēna citoģenētiskā lokalizācija,

2) slimības gēnam jābūt klonētam un jāzina tā nukleotīdu secība.

Tiešās diagnostikas mērķis ir identificēt mutantu alēles (DNS primārās nukleotīdu secības novirzes, mutācijas un to veidus). Tiešās DNS diagnostikas metodes augstā precizitāte vairumā gadījumu neprasa visu ģimenes locekļu DNS analīzi, jo atbilstošā gēna mutācijas identificēšana ļauj apstiprināt diagnozi ar gandrīz 100% precizitāti un noteikt visu ģimenes locekļu genotipu. slims bērns, ieskaitot heterozigotus nesējus.

Tiešās DNS diagnostikas metodes trūkums ir nepieciešamība zināt precīzu gēna atrašanās vietu un tā mutāciju spektru.

Tiešās DNS diagnostikas metodes ir indicētas tādām slimībām kā fenilketonūrija (mutācija R408W), cistiskā fibroze (visbiežākā mutācija delF508), Hantingtona horeja (trinukleotīdu atkārtojumu paplašināšanās – CTG atkārtojumi) u.c.

Tomēr līdz šim daudzu slimību gēni nav kartēti, to ekson-intronu organizācija nav zināma, un daudzas iedzimtas slimības ir raksturīga izteikta ģenētiskā neviendabība, kas neļauj pilnībā izmantot tiešās DNS diagnostikas metodes. Tāpēc tiešās DNS diagnostikas metodes informācijas saturs ir ļoti atšķirīgs. Tātad, diagnosticējot Hantingtona horeju, ahondroplaziju, tas ir 100%, fenilketonūrijai, cistiskajai fibrozei, adrenogenitālajam sindromam - no 70 līdz 80%, bet Vilsona-Konovalova slimībai un Dišena/Bekera miopātijai - 45-60%. Šajā sakarā tiek izmantotas iedzimtu slimību molekulārās ģenētiskās diagnostikas netiešās metodes.