שיטת צביעת FISH (הכלאה פלואורסצנטי באתרו) פותחה במעבדה הלאומית של ליברמור (ארה"ב) בשנת 1986. זוהי שיטה חדשה ביסודה לחקר כרומוזומים - השיטה של ​​זיהוי DNA פלואורסצנטי על ידי הכלאה במקום עם בדיקות מולקולריות ספציפיות. השיטה מבוססת על יכולת ה-DNA הכרומוזומלי להיקשר בתנאים מסוימים לשברי DNA (DNA probes), הכוללים רצפי נוקלאוטידים משלימים ל-DNA הכרומוזומלי. בדיקות DNA מסומנות מראש עם חומרים מיוחדים (לדוגמה, ביוטין או דיגוקסיגנין). בדיקות DNA מסומנות מוחלות על תכשירים ציטוגנטיים של כרומוזומי מטאפאזה שהוכנו להכלאה. לאחר התרחשות הכלאה, התכשירים מטופלים בצבעי פלורסנט מיוחדים המצומדים בחומרים שיכולים להיקשר באופן סלקטיבי לביוטין או דיגוקסיגנין. לכל כרומוזום יש צבע מסוים. הכלאה יכולה להתבצע גם עם בדיקות מסומנות רדיואקטיבית. ניתוח ציטוגנטי מתבצע תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי באור אולטרה סגול.

שיטת FISH משמשת לזיהוי מחיקות קטנות וטרנסלוקציות. חילופים כרומוזומליים (טרנסלוקציות ודיצנטריות) בין כרומוזומים בצבעים שונים מזוהים בקלות כמבנים מרובי צבעים.

סוף העבודה -

נושא זה שייך ל:

מודול למידה. ביולוגיה של התא

השכלה מקצועית גבוהה.. האוניברסיטה לרפואה ממלכתית בשקיר.. משרד הבריאות והפיתוח החברתי..

אם אתה צריך חומר נוסף בנושא זה, או שלא מצאת את מה שחיפשת, אנו ממליצים להשתמש בחיפוש במאגר העבודות שלנו:

מה נעשה עם החומר שהתקבל:

אם החומר הזה התברר כמועיל עבורך, תוכל לשמור אותו בדף שלך ברשתות החברתיות:

צִיוּץ

כל הנושאים בסעיף זה:

מודול למידה. יסודות הגנטיקה הכללית והרפואית
(הנחיות לסטודנטים) דיסציפלינה אקדמית ביולוגיה לכיוון ההכנה General Medicine Co.

כללים לרישום עבודות מעבדה
מרכיב הכרחי במחקר המיקרוסקופי של אובייקט הוא הסקיצה שלו באלבום. מטרת הסקיצה היא להבין טוב יותר ולתקן בזיכרון את מבנה האובייקט, צורת מבנים בודדים.

עבודה מעשית
1. הכנת תכשיר זמני "תאי סרט בצל" על מנת להכין תכשיר זמני עם סרט בצל יש להסיר

המבנה של ממברנות ציטופלזמיות. תפקוד תחבורה של ממברנות
2. מטרות למידה: לדעת: - מבנה ממברנה ביולוגית אוניברסלית - דפוסי הובלה פסיבית של חומרים דרך ממברנות

המבנה של תאים איקריוטים. ציטופלזמה ומרכיביה
2. מטרות למידה: לדעת: - תכונות של הארגון תאים איקריוטיים- המבנה והתפקוד של האברונים של הציטופלזמה

אברונים המעורבים בסינתזה של חומרים
בכל תא מבוצעת סינתזה של חומרים האופייניים לו, שהם או חומרי בנייה למבנים חדשים שנוצרו במקום אלה שחוקים, או אנזימים המעורבים בתגובות ביוכימיות.

אברונים בעלי תפקוד מגן ועיכול
ליזוזומים אברונים אלו ידועים מאז שנות ה-50, כאשר הביוכימאי הבלגי דה דוב גילה בתאי כבד גרגירים קטנים המכילים הידרוליטים

אברונים המעורבים באספקת האנרגיה של התא
הרוב המכריע של תפקודי התא כרוך בהוצאת אנרגיה. תא חי יוצר אותו כתוצאה מתהליכי חיזור המתרחשים ללא הרף, המהווים

אברונים המעורבים בחלוקת תאים ובתנועה
אלה כוללים את מרכז התא ונגזרותיו - cilia ו flagella. מרכז התא מרכז התא נמצא בתאי בעלי חיים ובחלקם

עבודה מעשית מס' 1
1. ניתוח מיקרוסקופי של התכשיר הקבוע "תסביך גולגי בתאים גנגליון עמוד השדרה» על ההכנה, תאי עצב על שם

ריבוזומים
זוהה באמצעות אלקטרון מיקרוסקופיבתאים של כל האורגניזמים של פרו-ואוקריוטים, גודלם הוא 8-35 ננומטר, הם סמוכים לממברנה החיצונית של הרשת האנדופלזמית. מתבצע על ריבוזומים

רטיקולום אנדופלזמי גרגירי
בחן את המבנה התת-מיקרוסקופי של הרשת האנדופלזמית המחוספסת במיקרוסקופ אלקטרוני. שלושה אזורים של תאים אצינריים של הלבלב של הרעבים עטלף. לפני

מיקרוטובולים ציטופלסמיים
צינוריות ציטופלזמה נמצאות בתאים של כל אורגניזמים של בעלי חיים וצמחים. אלה תצורות גליליות חוטיות באורך 20-30 מיקרון, 1

פעילות מיטוטית ברקמות ובתאים
נכון לעכשיו, המחזוריות המיטוטית ואופן הפעילות המיטוטית של רקמות רבות של בעלי חיים וצמחים נחקרו. התברר שלכל רקמה יש רמה מסוימת של פעילות מיטוטית. על מ

מיטוזיס (חלוקה עקיפה) בתאי שורש הבצל
עם הגדלה נמוכה של המיקרוסקופ, מצא את אזור הרבייה של קצה הבצל, שים במרכז שדה הראייה אזור עם תאים המתחלקים באופן פעיל לעין. לאחר מכן הגדר את התרופה לעלייה גדולה

אמיטוזיס (חלוקה ישירה) בתאי כבד עכברים
בחן תאי כבד של עכבר בהגדלה גבוהה של המיקרוסקופ. בהכנה, לתאים יש צורה רבת פנים. בתאים שאינם מתחלקים, הגרעין מעוגל בגרעין. בחלוקת תאים שהתחילו

סינקריון ביצית אסקריס
עם הגדלה נמוכה של המיקרוסקופ, מצא קטע של רחם התולעת העגולה מלא בזקיקים עם ביצים. הצג את הדגימה בהגדלה גבוהה. הציטופלזמה בביצה מתכווצת ומתקלפת

מבנה ותפקודים של DNA ו-RNA. מבנה גנים וויסות ביטוי גנים בפרו-אוקריוטים. שלבים של ביוסינתזה של חלבון
2. מטרות למידה: לדעת: - תרכובת כימיתותכונות הארגון של חומצות גרעין; - הבדלים בין DNA ל-RNA;

דפוסי תורשה של תכונות בהצלבה מונוהיברידית. סוגי אינטראקציה של גנים אללים
2. מטרות למידה: לדעת: - דפוסי הצלבה מונוהיברידית; - הלכות I ו-II של מנדל; - סוגי אינטראקציה

חוק ההורשה העצמאית של תכונות. סוגי אינטראקציה של גנים לא אללים
2. מטרות למידה: לדעת: - דפוסי הצלבה די-ופוליהיברידיים; - III חוק מנדל; - סוגי אינטראקציה

השונות כנכס של החיים, צורתה. שונות פנוטיפית (שינוי או לא תורשתית). שונות גנוטיפית
2. מטרות למידה: לדעת: - הצורות העיקריות של השונות; - לקבל רעיונות על החדירה וכושר ההבעה של ההכרה

עבודה עצמאית של תלמידים בפיקוח מורה
עבודה מעשית קביעת מידת השונות של תכונה ומקדם השונות בהתאם לתנאי הסביבה.

ניתוח אילן יוחסין
לא כל שיטות הגנטיקה ישימות לניתוח תורשה של תכונות מסוימות בבני אדם. עם זאת, על ידי לימוד הפנוטיפים של כמה דורות של קרובי משפחה, ניתן לקבוע את אופי הירושה

שיטה תאומה לחקר הגנטיקה האנושית
שיטת התאומים מעריכה את התפקיד היחסי של גורמים גנטיים וסביבתיים בהתפתחות של תכונה או מחלה מסוימת. תאומים הם מונוזיגוטים (זהים) ודיזיגוטים (פעמים

שיטה דרמטוגליפית לחקר הגנטיקה האנושית
ניתוח דרמטוגליפי הוא חקר הדפוסים הפפילריים של האצבעות, כפות הידיים והרגליים. באזורים אלה של העור יש פפילות עוריות גדולות, והאפידרמיס המכסה אותם יוצר g

שיטה ציטוגנטית בחקר הגנטיקה האנושית
בין שיטות רבות לחקר הפתולוגיה התורשתית האנושית, השיטה הציטוגנטית תופסת מקום חשוב. בעזרת השיטה הציטוגנטית ניתן לנתח את היסודות החומריים של תורשתי

מחקר של מערך הכרומוזומים
זה יכול להתבצע בשתי דרכים: 1) בשיטה ישירה - חקר כרומוזומי מטאפאזה בתאים מתחלקים, למשל, מח עצם(הוא

עבודה מעשית
1. צפייה בתכשיר ההדגמה "קריוטיפ אנושי" במעבדה הציטוגנטית בהגדלה X90 נראים לויקוציטים בשדה הראייה

ניתוח קריוטיפ בחולים עם מחלות כרומוזומליות (מתוך תמונות)
מס' 1. טריזומיה על כרומוזום 13 (תסמונת פטאו). קריוטיפ 47, +13. מס' 2. טריזומיה על כרומוזום 18 (תסמונת אדוארדס). קריוטיפ 47, +18. מס' 3. טריזומיה על כרומוזום 21 (מחלת דאון).

ביצוע ניתוח טביעות אצבע
כדי ליצור טביעות אצבע משלך, אתה צריך את הציוד הבא: רולר צילום, זכוכית בגודל 20x20 ס"מ, חתיכת גומי קצף, דיו להדפסה (או דומה

ניתוח ציטוגנטי של הקריוטיפ (מבוסס על צילומי מיקרו של לוחות מטאפאזה)
1. שרטטו את לוח המטאפאזה. 2. חשבו סה"ככרומוזומים. 3. זהה את הכרומוזומים של קבוצות A (3 זוגות של כרומוזומים מטאצנטריים גדולים), B (שני זוגות גדולים

שיטת אקספרס לחקר כרומטין X-sex בגרעיני האפיתל של רירית הפה
לפני נטילת גרידה, המטופל מתבקש לנשוך את הקרום הרירי של הלחי בשיניו ולנגב את פני השטח הפנימיים של הלחי במפית גזה. הליך זה הכרחי כדי להסיר את התאים ההרוסים, ז

שיטה אוכלוסייה-סטטיסטית
אוכלוסיה היא קבוצה של פרטים מאותו מין המאכלסים אותה טריטוריה במשך זמן רב, מבודדים יחסית מקבוצות אחרות של פרטים ממין זה, מתרבים זה בזה באופן חופשי ונותנים.

שיטה ביוכימית
שיטות ביוכימיות מבוססות על חקר הפעילות של מערכות אנזימים (או על ידי פעילות האנזים עצמו או על ידי כמות התוצרים הסופיים של התגובה המזוזת על ידי אנזים זה). ביוכימיקלים

שיטה גנטית מולקולרית
כל השיטות הגנטיות המולקולריות מבוססות על חקר מבנה ה-DNA. שלבי ניתוח ה-DNA: 1. בידוד ה-DNA מתאי המכילים גרעינים (דם

תגובת שרשרת פולימראז של סינתזת DNA
פולימראז תגובת שרשרת(PCR) - שיטת הגברה (ריבוי) של DNA במבחנה, בעזרתה ניתן, תוך מספר שעות, לזהות ולהכפיל קטע DNA מעניין מ-80

מס' שם מלא גנוטיפ איבנוב AA Petrov Aa

נצפו תדרים של גנוטיפ ואללים
גנוטיפים, אללים מספר מקרים תדירות (במניות) АА 1/5 = 0.2 Аа

תדרים נצפים וצפויים של גנוטיפים ואללים
מספר מקרים שנצפה תדירות צפויה של AA (p2)

נצפו תדרים של גנוטיפ ואללים
№ p / p יכולת לגלגל את הלשון לתוך צינור גנוטיפים אני יכול (כן) A_

סרטן החלב - מחלה מסוכנת, אשר, על פי הסטטיסטיקה, נמצאת במקום הראשון מבין המחלות הסרטניות בנשים. הסיכון ללקות במחלה זו עולה אצל כל הנשים מעל גיל 40 ועשוי לנבוע ממספר גורמים אחרים. בין הגורמים הסבירים ביותר לסרטן השד כוללים השמנת יתר, נטייה גנטית או תורשתית, התחלה מוקדמתהווסת והשלמה המאוחרת, טיפול הורמונלי או הקרנות.

בנוסף, הסיכון לתחלואה מוגבר בנשים בטלניות ובנשים שכבר חלו בסרטן. גברים יכולים גם לפתח סרטן שד.

סוגי ושיטות אבחון

השלב הראשון באבחון סרטן השד הוא בדיקה שגרתית אצל ממולוגית. נשים מעל גיל 40 צריכות לעבור את הבדיקות הללו לפחות פעם בשנתיים. הרופא מבצע בדיקה ויזואלית, מישוש וממוגרפיה של בלוטות החלב. סימנים חזותיים להתפתחות המחלה יכולים להיות:

מידע כללי

צילום רנטגן של השד (ממוגרפיה) מאפשר לקבוע את נוכחותו, הגודל והמיקום של הגידול. כדי לשפר את הדיוק של התוצאות שהושגו, נעשה שימוש בטכנולוגיה של החדרת חומר ניגוד. אם הגידול כבר זוהה, אזי משתמשים בשיטה של ​​פנאומוציסטוגרפיה - הסרת נוזל הגידול והחדרת אוויר לחלל. אם לא צוינה נוכחות של גידול, נעשה שימוש בדקטוגרפיה - הכנסת חומר ניגוד לצינורות החלב.

שיטות אלה מאפשרות לך לדמיין את נוכחותם של תצורות ברקמות של בלוטת החלב.

אם נוכחות של גידול מתגלה גם בממוגרפיה, המטופל מקבל הפניה למערכת של אמצעי אבחון:

באולטרסאונד, הרופא יכול להבחין בין גידול לציסטה ולהבהיר את הלוקליזציה של היווצרות. לאחר מכן, נלקחת ממנו דגימת רקמה לצורך ביופסיה. ביופסיה מאפשרת לגלות את סוג ההיווצרות: שפיר או ממאיר, וכן לקבוע אם הגידול תלוי הורמונלי. מידע זה מאפשר לרופא להחליט על אסטרטגיית טיפול, אך לא תמיד מאפשר לקבוע את השלב. לעתים קרובות, גם עם כל אמצעי האבחון הדרושים, ניתן לקבוע זאת רק לאחר הניתוח.

המנגנון של מחקרים היסטולוגיים

ביופסיית רקמה מתבצעת הן לפני הניתוח והן לאחריו. ההליך מתבצע לאחר בירור לוקליזציה של החינוך.

ביופסיה היא תהליך של הסרת פיסת רקמה, והמחקר שלה נקרא "בדיקה היסטולוגית" או פשוט "היסטולוגיה".

עובד רפואי, באמצעות מחט מיוחדת, לוקח כמות קטנה של רקמה מהניאופלזמה, או שהגידול שכבר הוסר מגופו של המטופל נשלח לבדיקה היסטולוגית. לאחר מכן מוכתם שבר הרקמה ומעובד בצורה מיוחדת כדי להגביר את הניגודיות ולהקל על המחקר. הפרוסה נבדקת במיקרוסקופ על ידי מומחה ונותנת מסקנה לגבי איכות היווצרות הגידול. הרבה במחקר זה תלוי בתשומת הלב ובכישוריו של עוזר המעבדה שנותן את המסקנה.

מחקר קשור הוא אימונוהיסטוכימיה. באופן כללי, זה יכול להיקרא גם "היסטולוגיה", כי. השיטה מבוססת על חקר רקמות, אך אימונוהיסטוכימיה היא שיטת ניתוח מתקדמת יותר. הרקמה במחקר זה מוכתמת גם עם ריאגנטים מיוחדים, אשר לא רק משפרים את הניגודיות החזותית, אלא גם משלבים ("תווית") עם נוגדנים בצורה מיוחדת, המאפשרת לציין מאפיינים נוספים של הניאופלזמה. התגובה במקרה זה מתרחשת הרבה יותר מהר, מה שמאפשר לך לקבל במהירות את תוצאות הניתוח.

אימונוהיסטוכימיה מאפשרת לא רק להבהיר את סוג הניאופלזמה, אלא גם לתכנן אסטרטגיית טיפול בחולה המבוססת על זיהוי רגישות רקמת הגידול ל סוגים שוניםהשפעה טיפולית. בנוסף, התנהלות מחקר זה אוטומטית ככל האפשר, מה שממזער את הסבירות לטעות אבחון הנובעת מהגורם האנושי.

ישנם גם אמצעי אבחון מודרניים המאפשרים לזהות נוכחות של גידול בגוף: זהו ניתוח ספקטרלי של דם, ניתוח אימונולוגי (ביוכימי), בדיקת FISH של רקמת הגידול. בדיקת דם גנטית מאפשרת לכל אישה לוודא נוכחות או היעדר תנאים מוקדמים להופעת סרטן השד. CT ו-MRI מאפשרים לקבוע במדויק את הלוקליזציה של הגידול ולעקוב אחר הדינמיקה של התפתחותו, להעריך את מבנה הניאופלזמה.

איך לזהות סרטן בבדיקת דם?

בדיקת דם ניתנת בעיקר על ידי רופא לאחר בדיקת אולטרסאונד. ישנם מצבים בהם מטופל, מיוזמתו, תורם דם עבור סמני חלונות או ניתוח גנטי על מנת לקבוע האם יש לו נטייה לסרטן השד. במקרים מסוימים, בדיקת דם כללית עשויה לשמש סיבה לפנייה למרפאה אונקולוגית (לצד מישוש חותם או סימנים חזותיים של סרטן).

ניתוח ביוכימי

דם כחומר למחקר מאפשר את אמצעי האבחון הבאים:

יחד עם זאת, רק שני הניתוחים הראשונים יכולים להיקרא שיטות מיוחדות לקביעת סרטן, השנייה שבהן היא אמצעי מניעה יותר מאשר מבצעית. שתי בדיקות דם נוספות מתבצעות בעיקר לפני הניתוח לקביעת מצב הגוף והיקף התהליך. עם זאת, כפי שכבר הוזכר, אם מורגש אטימה בחזה ובמקביל בדיקת דם כללית מראה יותר משני מקדמי אבחון שליליים, זו סיבה לפנות למומחה. מקדמים שליליים הם אינדיקטורים מחוץ לנורמה בפרמטרים מסוימים של הרכב הדם.

בדיקת דם ביוכימית חושפת נוכחות של נוגדנים לתאי גידול. גופים כאלה נקראים סמני גידול. מספר וסוג סמני הגידול תלויים בפרטים הספציפיים (לוקליזציה) גידול סרטניושלבי התפתחותו. סמני גידול כוללים:

במקרה של סרטן שד, הרופא המטפל יתעניין בעיקר בנוכחות סמן הגידול CA-15-3, שכן הימצאותו בדם מעידה באופן חד משמעי על מחלת סרטן השד. פענוח התוצאה לוקח בממוצע יום אחד. ניתוח ביוכימי מתבצע מספר פעמים במהלך המחלה. דם עבורו נלקח מוריד בבוקר על קיבה ריקה. שבועיים לפני הבדיקה, המטופל מפסיק ליטול הכל תרופות(לפרט על ידי הרופא המטפל). יומיים לפני תרומת דם, אתה לא יכול לקחת אלכוהול, מזון שומני ומטוגן.

שעה לפני ההליך, לא ניתן לעשן ורצוי להפחית מתח רגשי. דם על ניתוח ביוכימיבדרך כלל לא מוותרים מיד לאחר הקרנות ופיזיותרפיה.

הגדרה של גורמים גנטיים

לפני שמדברים על בדיקת דם גנטית, יש להדגיש את ההבדל בין המושגים "גנטית" ו"תורשתי". גורם גנטיהתרחשות סרטן היא מושג רחב יותר המרמז לא רק על נוכחות של קרובי משפחה עם סרטן שד, אלא גם על מוטציה גנטית ספציפית, שבגללה הסיכון למחלה זו עולה.

הגורם התורשתי מרמז על סיכון פוטנציאלי לסרטן השד על סמך היסטוריה משפחתית. יחד עם זאת, לא רק נשים, אלא גם גברים יכולים לקבל גן מוטנטי, אך הנשא שלו לא בהכרח יחלה.

כל אישה יכולה לעבור ניתוח גנטי. זה מומלץ במיוחד לאלו שקרוביהם הישירים חלו בסרטן השד. לפני הליך תרומת דם לניתוח, מומחה בתחום הגנטיקה צריך לדבר עם המטופל, שיסביר את הניואנסים של פענוח התוצאות. אין צורך בהכנה מיוחדת מהמטופל לפני תרומת דם.

במקרה של קבלה תוצאה חיוביתמוטציות בגנים BRCA, אך בהיעדר אחרים תסמיני חרדה, אין צורך להיכנס לפאניקה. לנשים עם מוטציה בגנים אלו ניתן להמליץ ​​על בדיקות עצמיות ובדיקות גופניות קבועות כאמצעי מניעה. לאחר 40 שנה, הגיוני לחשוב על הסרת השחלות והשדיים; לנשים צעירות יותר שאינן מתכננות להביא ילדים בעתיד מומלץ לפעמים לקחת אמצעי מניעה. ההחלטה על אמצעים אלו מונחת כולה על כתפיה של האישה עצמה ודורשת גישה מתחשבת והתייעצות עם רופאים.

שיטות האבחון העדכניות ביותר

ניתוח ספקטרלידם חושף נוכחות של ניאופלזמות בגוף עם הסתברות של עד 93%. זוהי שיטת אבחון זולה יחסית המבוססת על הקרנת אינפרא אדום של סרום הדם וניתוח ההרכב המולקולרי שלו.

המסקנה על הניתוח הספקטרלי של דם ניתנת על פי עקרון "נוכחות-היעדר" ומטרתה לזהות את רוב סוגי הגידולים הממאירים. כמו כן, מחקר זה מסוגל לקבוע את שלב ההתפתחות של סרטן השד. פירוש התוצאות מתבצע במעבדה ואינו מצריך חוות דעת נוספת של רופא.

על מנת לתרום דם לניתוח ספקטרלי, יש צורך להשלים את צריכת התרופות חודשיים לפני ההליך. מרגע צילום רנטגן או חשיפה אחרת, כמו גם כימותרפיה, חייבים לעבור לפחות 3 חודשים. בנוסף, אסור לאישה להיות בהריון או במחזור בזמן דגימת הדם. דגימת דם מתבצעת על קיבה ריקה בבוקר. ניתוח ספקטרלי של דם לוקח בממוצע 12 ימי עבודה.

אחד מ השיטות העדכניות ביותראבחנה של סרטן היא מה שנקרא "בדיקת דגים" (FISH, הכלאה פלואורסצנטית). האפקטיביות שלו עדיין בדיון, הנושא העיקרי של היתכנותו הוא הליך המחקר היקר. המהות של השיטה מורכבת מתיוג שברי תאים בהרכב פלואורסצנטי ובדיקה מיקרוסקופית נוספת של תאים. לפי אילו חלקים מהחומר הגנטי יצרו קשר עם השברים המסומנים, ניתן להבין האם למטופל יש נטייה לסרטן ואילו שיטות טיפול יהיו רלוונטיות במקרה מסוים.

בדיקת FISH אינה מצריכה תאים בשלים לחלוטין, ולכן ניתוח זה מהיר בהרבה מבדיקות מעבדה אחרות. בנוסף, שיטת FISH מאפשרת לך לצפות בצורה ברורה יותר בנזק גנטי, דבר שאינו אפשרי בסוגים אחרים של ניתוחים. בדיקת FISH משמשת לרוב במיוחד לאיתור סרטן השד, אך היא פועלת גם לאיתור סוגים אחרים של סרטן.

החסרונות של בדיקת FISH כוללים, בנוסף לעלות הגבוהה שלה, את חוסר האפשרות לעבוד על חלקים מסוימים של הכרומוזומים בגלל הספציפיות של הסימנים. בנוסף, בדיקת FISH מתעלמת מסוגים מסוימים של מוטציות והתמוטטויות. קוד גנטי, מה שיכול להיות מחדל חשוב באבחון. מחקרים השוואתיים של FISH עם בדיקת IHC הזולה יותר לא גילו יתרונות משמעותיים בקביעת הרגישות להרצפטין של תאים סרטניים. עם זאת, בדיקת FISH היא כיום המהירה ביותר מבין שיטות הדיוק הגבוהות לאבחון סרטן.

ראש
"אונקוגנטיקה"

ז'וסינה
יוליה גנאדייבנה

בוגר הפקולטה לרפואת ילדים של מדינת וורונז' האוניברסיטה הרפואיתאוֹתָם. נ.נ. ברדנקו בשנת 2014.

2015 - התמחות בטיפול על בסיס המחלקה לטיפול בפקולטה של ​​האוניברסיטה הרפואית הממלכתית של וורונז'. נ.נ. ברדנקו.

2015 - קורס הסמכה בהתמחות "המטולוגיה" על בסיס מרכז המחקר ההמטולוגי במוסקבה.

2015-2016 – מטפלת של VGKBSMP מס' 1.

2016 - אישרה את נושא עבודת הגמר לתואר מועמד מדע רפואי"לומד קורס קלינימחלה ופרוגנוזה בחולים עם מחלת ריאות חסימתית כרונית עם תסמונת אנמית. מחבר שותף של יותר מ-10 פרסומים. משתתפת בכנסים מדעיים ומעשיים בנושאי גנטיקה ואונקולוגיה.

2017 - השתלמויות בנושא: "פרשנות תוצאות מחקרים גנטיים בחולים עם מחלות תורשתיות".

משנת 2017 תושבות בהתמחות "גנטיקה" על בסיס RMANPO.

ראש
"גנטיקה"

קניבטס
איליה ויאצ'סלבוביץ'

קניבץ איליה ויאצ'סלבוביץ', גנטיקאי, מועמד למדעי הרפואה, ראש המחלקה הגנטית של המרכז הגנטי הרפואי Genomed. עוזרת המחלקה לגנטיקה רפואית של הרוסי האקדמיה לרפואההשכלה מקצועית מתמשכת.

הוא סיים את לימודיו בפקולטה לרפואה של האוניברסיטה הממלכתית של מוסקבה לרפואה ורפואת שיניים בשנת 2009, ובשנת 2011 סיים התמחות בהתמחות "גנטיקה" במחלקה לגנטיקה רפואית של אותה אוניברסיטה. בשנת 2017 הגן על התזה שלו לתואר מועמד למדעי הרפואה בנושא: אבחון מולקולרי של וריאציות מספר העתקות של מקטעי DNA (CNVs) בילדים עם מומים מולדים, פנוטיפ ו/או חריגות פיגור שכליבעת שימוש במיקרו-מערכי SNP אוליגונוקלאוטידים בצפיפות גבוהה"

בשנים 2011-2017 עבד כגנטיקאי בבית החולים הקליני לילדים. נ.פ. פילטוב, מחלקת ייעוץ מדעי של המוסד המדעי התקציבי של המדינה הפדרלית "מרכז מחקר גנטי רפואי". משנת 2014 ועד היום, הוא היה אחראי על המחלקה הגנטית של MHC Genomed.

פעילויות עיקריות: אבחון וניהול חולים עם מחלות תורשתיות ומומים מולדים, אפילפסיה, ייעוץ גנטי רפואי למשפחות בהן נולד ילד עם פתולוגיה תורשתית או מומים, אבחון טרום לידתי. במהלך הייעוץ מתבצע ניתוח נתונים קליניים וגניאלוגיה לקביעת ההשערה הקלינית וכמות הבדיקות הגנטיות הנדרשות. על סמך תוצאות הסקר, הנתונים מתפרשים והמידע המתקבל מוסבר ליועצים.

הוא אחד ממייסדי פרויקט בית הספר לגנטיקה. עושה באופן קבוע מצגות בכנסים. הוא מרצה עבור גנטיקאים, נוירולוגים ומיילדות-גינקולוגים, וכן עבור הורים לחולים במחלות תורשתיות. הוא המחבר והמחבר של יותר מ-20 מאמרים וסקירות בכתבי עת רוסיים וזרים.

תחום האינטרסים המקצועיים הוא הכנסת מחקרים מודרניים רחבי גנום לפרקטיקה הקלינית, פרשנות התוצאות שלהם.

שעות קבלת קהל: ד', ו' 16-19

ראש
"נוירולוגיה"

שרקוב
ארטם אלכסייביץ'

שרקוב ארטיום אלכסייביץ'– נוירולוג, אפילפטולוג

בשנת 2012, הוא למד במסגרת התוכנית הבינלאומית "רפואה מזרחית" באוניברסיטת Daegu Haanu בדרום קוריאה.

מאז 2012 - השתתפות בארגון מסד הנתונים והאלגוריתם לפירוש בדיקות גנטיות של xGenCloud (https://www.xgencloud.com/, מנהל פרויקט - איגור אוגארוב)

בשנת 2013 סיים את לימודיו בפקולטה לרפואת ילדים של האוניברסיטה הלאומית למחקר רפואי ברוסיה על שם N.I. פירוגוב.

משנת 2013 עד 2015, הוא למד התמחות קלינית בנוירולוגיה במוסד הפדרלי התקציבי המדעי "המרכז המדעי לנוירולוגיה".

מאז 2015 הוא עובד כנוירולוג, חוקר במכון המחקר המדעי לרפואת ילדים על שם האקדמיה יו.אי. Veltishchev GBOU VPO RNIMU אותם. נ.א. פירוגוב. הוא גם עובד כנוירולוג ורופא במעבדה לניטור וידאו-EEG במרפאות המרכז לאפילפטולוגיה ונוירולוגיה על שם א.י. A.A. Ghazaryan" ו"מרכז לאפילפסיה".

בשנת 2015, למד באיטליה בבית הספר "קורס מגורים בינלאומי שני בנושא אפילפסיות עמידות לתרופות, ILAE, 2015".

בשנת 2015 השתלמויות - "גנטיקה קלינית ומולקולרית לרופאים עוסקים", RCCH, RUSNANO.

בשנת 2016 השתלמויות - "יסודות הגנטיקה המולקולרית" בהנחיית ביואינפורמטיקה, Ph.D. Konovalova F.A.

מאז 2016 - ראש הכיוון הנוירולוגי של המעבדה "Genomed".

בשנת 2016 למד באיטליה בבית הספר "קורס מתקדם בינלאומי בסן סרולו: חקר מוח ומנתח אפילפסיה, ILAE, 2016".

בשנת 2016 השתלמויות - "טכנולוגיות גנטיות חדשניות לרופאים", "המכון לרפואת מעבדה".

בשנת 2017 - בית הספר "NGS בגנטיקה רפואית 2017", המרכז המדעי של מוסקבה

כרגע מנצח מחקר מדעיבתחום הגנטיקה לאפילפסיה בהדרכת פרופ' ד"ר מד. Belousova E.D. ופרופסור, ד.מ.ס. דדאלי א.ל.

אושר נושא עבודת הגמר לתואר מועמד למדעי הרפואה "מאפיינים קליניים וגנטיים של וריאנטים מונוגניים של אנצפלופתיה אפילפטית מוקדמת".

תחומי הפעילות העיקריים הם אבחון וטיפול באפילפסיה בילדים ומבוגרים. התמחות צרה - טיפול כירורגי באפילפסיה, גנטיקה של אפילפסיה. נוירוגנטיקה.

פרסומים מדעיים

Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. "אופטימיזציה אבחנה מבדלתופרשנות של תוצאות הבדיקות הגנטיות על ידי מערכת המומחים XGenCloud בצורות מסוימות של אפילפסיה. גנטיקה רפואית, מס' 4, 2015, עמ'. 41.
*
Sharkov A.A., Vorobyov A.N., Troitsky A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. "ניתוח לאפילפסיה בנגעים מולטיפוקליים במוח בילדים עם טרשת שחפת". תקצירים של הקונגרס הרוסי ה-14 "טכנולוגיות חדשניות ברפואת ילדים וכירורגיית ילדים". עלון רוסי לפרינאטולוגיה ורפואת ילדים, 4, 2015. - עמ' 226-227.
*
Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. "גישות גנטיות מולקולריות לאבחון של אפילפסיה אידיופטית וסימפטומטית מונוגנית". תקציר הקונגרס הרוסי ה-14 "טכנולוגיות חדשניות ברפואת ילדים וכירורגיית ילדים". עלון רוסי לפרינאטולוגיה ורפואת ילדים, 4, 2015. - עמ' 221.
*
Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. "גרסה נדירה של אנצפלופתיה אפילפטית מוקדמת מסוג 2 הנגרמת על ידי מוטציות בגן CDKL5 בחולה זכר." כנס "אפילפטולוגיה במערכת מדעי המוח". אוסף חומרי הכנס: / עריכה: פרופ. Neznanova N.G., פרופ. מיכאילובה V.A. סנט פטרסבורג: 2015. - עמ'. 210-212.
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troitsky A.A., Golovteev A.L., Polyakov A.V. וריאנט אללי חדש של אפילפסיה מסוג 3 myoclonus הנגרמת על ידי מוטציות בגן KCTD7 // Medical Genetics.-2015.- v.14.-№9.- p.44-47
*
Dadali E.L., Sharkova I.V., Sharkov A.A., Akimova I.A. "מאפיינים קליניים וגנטיים ושיטות מודרניות לאבחון אפילפסיה תורשתית". אוסף חומרים "טכנולוגיות ביולוגיות מולקולריות בפרקטיקה רפואית" / אד. חבר מקביל RANEN A.B. Maslennikova.- גיליון. 24.- נובוסיבירסק: Academizdat, 2016.- 262: p. 52-63
*
Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. אפילפסיה בטרשת שחפת. ב"מחלות מוח, היבטים רפואיים וחברתיים" בעריכת Gusev E.I., Gekht A.B., Moscow; 2016; עמ' 391-399
*
Dadali E.L., Sharkov A.A., Sharkova I.V., Kanivets I.V., Konovalov F.A., Akimova I.A. מחלות ותסמונות תורשתיות המלוות בעוויתות חום: מאפיינים קליניים וגנטיים ושיטות אבחון. //Russian Journal of Children's Neurology.- ת' 11.- מס' 2, עמ'. 33-41. doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
*
Sharkov A.A., Konovalov F.A., Sharkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. גישות גנטיות מולקולריות לאבחון של אנצפלופתיה אפילפטית. אוסף תקצירים "VI BALTIC CONGRESS ON CHILDREN'S NEUROLOGY" / בעריכת פרופסור גוזבה V.I. סנט פטרסבורג, 2016, עמ'. 391
*
המיספרוטומיה באפילפסיה עמידה לתרופות בילדים עם נזק מוחי דו-צדדי Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. אוסף תקצירים "VI BALTIC CONGRESS ON CHILDREN'S NEUROLOGY" / בעריכת פרופסור גוזבה V.I. סנט פטרסבורג, 2016, עמ'. 157.
*
*
מאמר: גנטיקה וטיפול מובחן באנצפלופתיה אפילפטית מוקדמת. א.א. שרקוב*, I.V. שרקובה, E.D. בלוסובה, א.ל. דדאלי. כתב עת לנוירולוגיה ופסיכיאטריה, 9, 2016; נושא. 2doi:10.17116/jnevro20161169267-73
*
Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. "טיפול כירורגי באפילפסיה בטרשת שחפת" בעריכת Dorofeeva M.Yu., מוסקבה; 2017; עמ' 274
*
חָדָשׁ סיווגים בינלאומייםאפילפסיה והתקפי אפילפסיה של הליגה הבינלאומית לאפילפסיה. כתב עת לנוירולוגיה ופסיכיאטריה. C.C. קורסקוב. 2017. ו' 117. מס' 7. ש' 99-106

ראש
"אבחון טרום לידתי"

קייב
יוליה קירילובנה

בשנת 2011 סיימה את לימודיה באוניברסיטה הממלכתית לרפואה ושיניים במוסקבה. א.י. אבדוקימובה בעלת תואר ברפואה כללית למדה במחלקה לגנטיקה רפואית של אותה אוניברסיטה עם תואר בגנטיקה

בשנת 2015, היא השלימה התמחות במיילדות וגינקולוגיה במכון הרפואי להשכלה רפואית לתואר שני של המוסד הפדרלי לתקציב תקציבי להשכלה מקצועית גבוהה "MGUPP"

משנת 2013 עורך מינוי ייעוץ במרכז לתכנון ורבייה משפחתית, דז"מ

משנת 2017 הוא ראש מחלקת "אבחון טרום לידתי" במעבדת הגנומד

מעביר באופן קבוע מצגות בכנסים וסמינרים. מקריא הרצאות לרופאים בהתמחויות שונות בתחום הרבייה ואבחון טרום לידתי

עורך ייעוץ גנטי רפואי לנשים בהריון באבחון טרום לידתי על מנת למנוע לידת ילדים עם מומים מולדיםהתפתחות, כמו גם משפחות עם כנראה פתולוגיה תורשתית או מולדת. מבצע פרשנות של התוצאות המתקבלות של אבחון DNA.

מומחים

לאטיפוב
ארתור שמילביץ'

לטיפוב ארתור שמילביץ' - רופא גנטיקאי מקטגוריית ההסמכה הגבוהה ביותר.

לאחר שסיים את לימודיו בפקולטה לרפואה של המכון הרפואי הממלכתי של קאזאן בשנת 1976, במשך שנים רבות עבד תחילה כרופא במשרד לגנטיקה רפואית, ולאחר מכן כראש המרכז הגנטי הרפואי של בית החולים הרפובליקני בטטרסטן, המומחה הראשי של משרד הבריאות של הרפובליקה של טטרסטן, מורה במחלקות של האוניברסיטה הרפואית של קאזאן.

מחבר של למעלה מ-20 עבודות מדעיותעל בעיות הגנטיקה הרבייה והביוכימית, משתתף בקונגרסים וכנסים מקומיים ובינלאומיים רבים בנושא בעיות הגנטיקה הרפואית. הוא הכניס לעבודה המעשית של המרכז שיטות של בדיקה המונית של נשים הרות ויילודים למחלות תורשתיות, ביצע אלפי הליכים פולשניים לחשודים במחלות תורשתיות של העובר בשלבים שונים של ההריון.

משנת 2012 היא עובדת במחלקה לגנטיקה רפואית עם קורס לאבחון טרום לידתי באקדמיה הרוסית לחינוך לתארים מתקדמים.

תחומי מחקר - מחלות מטבוליות בילדים, אבחון טרום לידתי.

שעות קבלת קהל: ד' 12-15, שבת 10-14

רופאים מתקבלים בתיאום מראש.

גנטיקאי

גאבלקו
דניס איגורביץ'

בשנת 2009 סיים את לימודיו בפקולטה לרפואה של KSMU על שם. S. V. Kurashova (התמחות "רפואה").

התמחות באקדמיה הרפואית של סנט פטרסבורג ללימודים מתקדמים של הסוכנות הפדרלית לבריאות ופיתוח חברתי (התמחות "גנטיקה").

התמחות בטיפול. הסבה ראשונית בהתמחות" אבחון אולטרסאונד". משנת 2016 הוא עובד במחלקה של המחלקה ליסודות היסוד תרופה קליניתהמכון לרפואה יסודית וביולוגיה.

תחומי עניין מקצועיים: אבחון טרום לידתי, שימוש בשיטות סקר ואבחון מודרניות לזיהוי הפתולוגיה הגנטית של העובר. קביעת הסיכון להישנות מחלות תורשתיות במשפחה.

משתתפת בכנסים מדעיים ומעשיים בנושאי גנטיקה ומיילדות וגינקולוגיה.

ניסיון בעבודה 5 שנים.

ייעוץ בתיאום מראש

רופאים מתקבלים בתיאום מראש.

גנטיקאי

גרישינה
כריסטינה אלכסנדרובנה

בשנת 2015 סיימה את לימודיה ברפואה כללית באוניברסיטה הממלכתית לרפואה ושיניים במוסקבה. באותה שנה, היא נכנסה להתמחות בהתמחות 30.08.30 "גנטיקה" במוסד הפדרלי התקציבי התקציבי "מרכז מחקר גנטי רפואי".
היא התקבלה לעבודה במעבדה לגנטיקה מולקולרית של מחלות תורשתיות מורכבות (ראש - דוקטור למדעי הביולוגיה Karpukhin A.V.) במרץ 2015 כעוזרת במעבדת מחקר. מספטמבר 2015 היא הועברה לתפקיד חוקרת. הוא מחבר ומחבר שותף של יותר מ-10 מאמרים ותקצירים על גנטיקה קלינית, אונקוגנטיקה ואונקולוגיה מולקולרית בכתבי עת רוסיים וזרים. משתתף קבוע בכנסים בנושא גנטיקה רפואית.

תחום תחומי עניין מדעי ומעשי: ייעוץ גנטי רפואי למטופלים עם פתולוגיה תסמונתית תורשתית ורב-פקטוריאלית.

התייעצות עם גנטיקאי מאפשרת לך לענות על השאלות הבאות:

האם הסימפטומים של הילד הם סימנים מחלה תורשתית איזה מחקר נדרש כדי לזהות את הסיבה קביעת תחזית מדויקת המלצות לביצוע והערכת התוצאות של אבחון טרום לידתי כל מה שאתה צריך לדעת על תכנון משפחה ייעוץ לתכנון הפריה חוץ גופית יעוץ שטח ומקוון

לקח חלק בבית הספר המדעי-מעשי "טכנולוגיות גנטיות חדשניות לרופאים: יישום ב פרקטיקה קלינית", כנסים של האגודה האירופית לגנטיקה אנושית (ESHG) וכנסים אחרים המוקדשים לגנטיקה אנושית.

מעניק ייעוץ גנטי רפואי למשפחות עם חשד לפתולוגיה תורשתית או מולדת, לרבות מחלות מונוגניותוהפרעות כרומוזומליות, קובע את האינדיקציות למחקרים גנטיים במעבדה, מפרש את התוצאות של אבחון DNA. מייעצת לנשים בהריון באבחון טרום לידתי על מנת למנוע לידת ילדים עם מומים מולדים.

גנטיקאי, מיילד-גינקולוג, מועמד למדעי הרפואה

קודריאבצבה
אלנה ולדימירובנה

גנטיקאי, מיילד-גינקולוג, מועמד למדעי הרפואה.

מומחית בתחום ייעוץ רבייה ופתולוגיה תורשתית.

בוגר האקדמיה הרפואית של מדינת אורל בשנת 2005.

התמחות במיילדות וגינקולוגיה

התמחות בהתמחות "גנטיקה"

הסבה מקצועית בהתמחות "אבחון אולטרסאונד"

פעילויות:

• אי פוריות והפלה
ואסיליסה יורייבנה



היא בוגרת האקדמיה הרפואית הממלכתית של ניז'ני נובגורוד, הפקולטה לרפואה (התמחות "רפואה"). היא סיימה את ההתמחות הקלינית של FBGNU "MGNTS" עם תואר ב"גנטיקה". בשנת 2014 סיימה התמחות בקליניקה לאמהות וילדות (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, טריאסטה, איטליה).

מאז 2016, היא עובדת כרופאה יועצת בחברת Genomed LLC.

משתתף באופן קבוע בכנסים מדעיים ומעשיים בנושאי גנטיקה.

פעילויות עיקריות: ייעוץ באבחון קליני ומעבדתי של מחלות גנטיות ופרשנות תוצאות. טיפול בחולים ובני משפחותיהם עם חשד לפתולוגיה תורשתית. ייעוץ בעת תכנון הריון, וכן במהלך ההריון באבחון טרום לידתי על מנת למנוע לידת ילדים עם פתולוגיה מולדת.

מכיוון שבדיקת ה-FISH מזהה חריגות גנטיות הגורמות לסרטן, היא כן שיטה יעילהאבחנה של סוגים מסוימים של סרטן. הבדיקה משמשת גם לאישור האבחנה ומאפשרת לקבל מידע נוסף O תוצאה אפשריתמחלה והכדאיות להשתמש בכימותרפיה.

לדוגמה, בחולות עם סרטן השד, בדיקת FISH של רקמות שנלקחה במהלך ביופסיה עוזרת לקבוע את נוכחותם של עותקים של הגן HER2 בתאים.

לתאים עם עותקים של הגן HER2 יש יותר קולטני HER2, המקבלים אותות הממריצים את הצמיחה של תאים סרטניים בשד. לכן, למטופלים עם עותקים של הגן HER2, רצוי להשתמש ב-Herceptin (trastuzumab), תרופה המעכבת את יכולתם של קולטני HER2 לקלוט אותות.

בשל העלות הגבוהה וחוסר הנגישות היחסית של בדיקת FISH, נעשה שימוש נפוץ יותר בבדיקה נוספת לגילוי סרטן השד, אימונוהיסטוכימיה (IHC).

יש מחלוקת בחוגים רפואיים על יעילות גבוההבדיקת FISH לעומת בדיקות סטנדרטיות. עם זאת, עקב ההתקדמות הטכנולוגית, בדיקת FISH הופכת לזולה ונגישה יותר במגוון מסגרות קליניות.

איך מבחן FISH עובד

בעת ביצוע בדיקת FISH על דגימת רקמת מטופל, משתמשים בתוויות פלורסנט הנקשרות רק אליהן אזורים מסוימיםכרומוזומים. לאחר מכן, באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי, נקבעים אזורי הכרומוזומים שאליהם נקשרו הגשושיות הפלורסנטיות, ונוכחות של סטיות אפשריותמעורר התפתחות של סרטן.

IN תאים סרטנייםניתן למצוא את הסטיות הבאות:

• טרנסלוקציה - העברה של קטע של כרומוזום למיקום חדש על אותו כרומוזום או אחר;
• היפוך - סיבוב של קטע של כרומוזום ב-180 מעלות תוך שמירה על קשר עם הכרומוזום עצמו;
• מחיקה - אובדן חלק מהכרומוזום;
• שכפול - הכפלה של קטע של כרומוזום, המובילה לתוכן עודף של עותקים של גן בתא.

טרנסלוקציות עוזרות לאבחן סוגים מסוימים של לוקמיה, לימפומה וסרקומה. הימצאות שכפול בתאי סרטן השד מסייעת לרופא לבחור את הטיפול הטוב ביותר.

היתרון של בדיקת FISH על פני בדיקות ציטוגנטיות סטנדרטיות (הבודקות את ההרכב הגנטי של התאים) הוא בכך שהיא יכולה לזהות אפילו את השינויים הגנטיים הקטנים ביותר שלא ניתן לראות במיקרוסקופ רגיל.

תכונה חשובה נוספת של בדיקת FISH היא שניתן לבצע אותה על תאים שטרם החלו להתפתח באופן פעיל. בדיקות אחרות מבוצעות לתאים רק לאחר שצמחו פנימה תנאי מעבדהתוך שבועיים, כך שכל התהליך יכול להימשך עד שלושה שבועות, ותוצאות בדיקת ה-FISH זמינות תוך מספר ימים.

דוגמאות לבדיקת FISH לאבחון סרטן

למרות שבדיקת FISH משמשת לרוב לניתוח חריגות גנטיות בסרטן השד, היא גם מספקת מידע חשוב על סוגי סרטן אחרים.

למשל, בעת אבחון סרטן שַׁלפּוּחִית הַשֶׁתֶןבדיקת FISH לתאי שתן מדויקת יותר מבדיקות תאים לא טיפוסיות. בנוסף, זה מאפשר לך לקבוע את הישנות סרטן שלפוחית ​​השתן 3-6 חודשים קודם לכן.

בדיקת ה-FISH מסייעת גם בזיהוי הפרעות כרומוזומליות בלוקמיה, כולל תאים המעידים על צורה אגרסיבית. לוקמיה לימפוציטית כרונית(HLL). מטופלים עם CLL אגרסיבי עשויים לדרוש טיפול חירום, בעוד בצורות פחות אגרסיביות, התבוננות עשויה להספיק.

מחלוקת בדיקת FISH

לא כל המומחים מסכימים שבדיקת FISH היא הבדיקה המדויקת ביותר לאבחון סרטן הרגיש להרצפטין.

בשנת 2010, מדענים ממכון מאיו (אירלנד) הצהירו שבדיקת ה-IHC הזולה יותר יעילה בקביעת הרגישות להרצפטין כמעט כמו בדיקת ה-FISH.

מומחים אחרים מתחו ביקורת על מבחן ה-FISH על כך שלא הצליח לזהות מוטציות קטנות כמו מחיקות קטנות, הוספות ומוטציות נקודתיות, ועל התעלמות מהיפוכים מסוימים.

שיפור מבחן FISH

למרות העובדה שטכנולוגיית בדיקת FISH אינה מאפשרת עדיין לנתח את כל חלקי הכרומוזומים, היא מתפתחת כל הזמן בכיוון זה.

לדוגמה, בשנת 2007, מדענים קנדיים הכריזו על פיתוח של שבב בגודל שקופיות מיקרוסקופ שיאפשר לבצע בדיקת FISH באמצעות מכשיר שמתאים לכף ידך.

הנקרא FISH Test on a Chip, בדיקה משופרת זו תספק תוצאות ביום אחד ותעלה פחות מבדיקות אחרות.

תשובה קצרה: שיטת ההכלאה של פלואורסצנציה במקום (FISH - fluorescence in situ hybridization) כוללת שימוש ברצפי נוקלאוטידים DNA ייחודיים כבדיקה לחיפוש אחר רצפי ה-DNA הרצויים בחומר המתקבל מהמטופל. השיטה מבוססת על קשירה משלימה של בדיקת DNA ל-DNA של כרומוזומי מטאפאזה או תאי אינטרפאזה. בדיקת ה-DNA וה-DNA הבדיקה עוברים דנטורציה ליצירת DNA חד-גדילי. בדיקת DNA מתווספת לתכשיר הכרומוזום, מודגרת זמן מסויים. נוכחות או היעדר של בדיקה מסומנת פלואורכרום ב-DNA לאחר הכלאה נקבעת על ידי בדיקת כרומוזומים באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

תגובה מפורטת: שיטת הכלאה פלורסנטית באתרומאפשר לזהות כרומוזומים בודדים או אזורים בודדים שלהם על הכנות של כרומוזומים מטאפאזיים או גרעינים בין פאזיים המבוססים על אינטראקציה משלימה של בדיקת DNA המצומדת עם תווית פלואורסצנטית והאזור הרצוי בכרומוזום. כדי להמחיש תרכובות פפטיד-גרעין על הכרומוזום, PNA-probes מבוסס על מוצר חלבון.
השיטה מבוססת על קשירה משלימה של בדיקת DNA ל-DNA של כרומוזומי מטאפאזה או תאי אינטרפאזה וכוללת את השלבים הבאים:
1. דנטורציה DNA פרוב דו-גדילי ו-DNA מטרה לחד-גדילי בהשפעת חומרים כימיים או טמפרטורה גבוהה.
2. הַכלָאָהבדיקה של DNA עם יעד DNA על פי עקרון ההשלמה עם היווצרות מולקולה היברידית דו-גדילית
3. כביסה לאחר הכלאהכדי להסיר בדיקת DNA לא היברידית
4. אָנָלִיזָהאותות הכלאה עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי

יתרונותשיטות אבחון גנטיות מולקולריות של FISH כוללות ניתוח מהיר מספר גדולתאים, רגישות וסגוליות גבוהה, יכולת לחקור תאים לא ניתנים לתרבות ולא מתחלקים.
פגמיםשיטה הם חוסר היכולת להשיג מידע על מצבו הפיזי DNA או אזור כרומוזום במחקר.
FISH משמש באבחון גנטי מולקולרי טרום לידתי ולאפיון גידולים; בפרקטיקה של ילדים, הוא משמש, ככלל, לזיהוי מחיקות תת-מיקרוסקופיות הקשורות למומים ספציפיים. תסמונות המבוססות על מיקרו-מחיקות נחשבו בעבר למחלות של אטיולוגיה לא ידועה, שכן מחיקות וסידורים כרומוזומליים, גורם להתפתחותממחלות אלו בדרך כלל אינן מומחשות בשיטות מסורתיות של ניתוח כרומוזומלי. מחיקות קטנות כאלה באזורים ספציפיים של כרומוזומים ניתנות לזיהוי בדיוק רב. שיטת FISH. מחלות הנגרמות על ידי מחיקות תת-מיקרוסקופיות כוללות פראדר-ווילי, אנג'למן, וויליאמס, מילר-דיקר, תסמונות סמית-מג'ניס ותסמונת וולוקרדיופציאלית. FISH מקל על האבחנה של תסמונות אלו במקרים לא טיפוסיים, במיוחד בינקות, כאשר עדיין חסרים כלי אבחון רבים. תכונות משמעותיותמחלות. השימוש בשיטה זו של אבחון גנטי מולקולרי מומלץ גם בגיל ההתבגרות ובבגרות, כאשר אופייני סימנים קלינייםמחלות האופייניות לילדות עוברות שינויים.

121. בדיקות DNA. השימוש בהם בקביעת מחלות תורשתיות.

סקירה קצרה

בדיקת DNA היאשבר קצר של DNA המצומד לפלואורסין, אנזים או איזוטופ רדיואקטיבי, המשמש להכלאה לאזור המשלים של מולקולת ה-DNA היעד.

חלק ראשי

מערכות אבחון DNA

מידע על כל מגוון התכונות של אורגניזם כלול בחומר הגנטי שלו. כך, הפתוגניות של חיידקים נקבעת על פי הימצאות גן או קבוצת גנים ספציפיים בהם, ומחלה גנטית תורשתית מתרחשת כתוצאה מפגיעה בגן מסוים. פלח של DNA שקובע נתון תכונה ביולוגית, בעל רצף נוקלאוטידים מוגדר בקפדנות ויכול לשמש כסמן אבחנתי.

שיטות אבחון מהירות ואמינות רבות מבוססות על הכלאה של חומצות גרעין - זיווג של שני מקטעים משלימים של מולקולות DNA שונות. נוהל ב במונחים כללייםמורכב מהדברים הבאים.

1. קיבוע מטרת DNA חד-גדילית על מסנן ממברנה.

2. יישום של פרוב DNA חד-גדילי מסומן, אשר, בתנאים מסוימים (טמפרטורה וחוזק יוני), מזדווג עם DNA המטרה.

3. שטיפת המסנן כדי להסיר עודפי בדיקה לא קשורה ב-DNA.

4. איתור מולקולות היברידיות של בדיקה/מטרה.

בבדיקות אבחון המבוססות על הכלאה של חומצת גרעין, שלושה מרכיבים הם המפתח: בדיקה של DNA, יעד DNA ושיטת זיהוי אותות הכלאה. מערכת הזיהוי חייבת להיות מאוד ספציפית ורגישה מאוד.

* פלואורסין (דיאוקסיפלוראן, אורנין A) - תרכובת אורגנית, צבע ניאון. בכימיה אנליטית, fluorescein משמש כאינדיקטור חומצה-בסיס זוהר. בביוכימיה ו ביולוגיה מולקולריתנגזרות איזותיוציאנט של פלואורססאין כצבעים ביולוגיים לקביעת אנטיגנים ונוגדנים.

* איתור הוא זיהוי, זיהוי, מציאת משהו.

*צימוד=צימוד

*אם תערובת של דנ"א, למשל, אדם ועכבר, נמסה ומחושלת ב"מבחנה" אחת, אז חלקים מסוימים של שרשראות DNA של עכברים ישתלבו מחדש עם חלקים משלימים של שרשראות דנ"א אנושיות ליצירת הכלאיים. מספר אתרים כאלה תלוי במידת הקרבה של המין. ככל שהמינים קרובים יותר זה לזה, כך יש יותר אזורים של השלמה של גדילי DNA. תופעה זו נקראת הכלאה של DNA-DNA.

122. שיטות ותנאים לשימוש באבחון DNA ישיר.

סקירה קצרה:

באמצעות שיטות ישירות, מתגלות הפרעות ברצף הנוקלאוטידים הראשוני של ה-DNA (מוטציות וסוגיהם). שיטות ישירות מאופיינות בדיוק המגיע לכמעט 100%.

מטרת האבחון הישירה היא לזהות אללים מוטנטיים (חריגות ברצף הנוקלאוטידים הראשי של ה-DNA, מוטציות וסוגיהם).

החיסרון של אבחון DNA ישיר הוא הצורך לדעת את המיקום המדויק של הגן ואת ספקטרום המוטציות שלו. שיטות לאבחון DNA ישיר מיועדות למחלות כמו פנילקטונוריה (מוטציה R408W), סיסטיק פיברוזיס - (המוטציה הנפוצה ביותר ב-delF508), כוריאה של הנטינגטון (הרחבה של חזרות טרינוקלאוטידים-חזרות CTG) וכו'.

תשובה מלאה:

באמצעות שיטות ישירות, מתגלות הפרעות ברצף הנוקלאוטידים הראשוני של ה-DNA (מוטציות וסוגיהם). שיטות ישירות מאופיינות בדיוק המגיע לכמעט 100%. עם זאת, בפועל, ניתן ליישם שיטות אלה בתנאים מסוימים:

1) לוקליזציה ציטוגנטית ידועה של הגן האחראי להתפתחות מחלה תורשתית,

2) יש לשבט את גן המחלה ולדעת את רצף הנוקלאוטידים שלו.

מטרת האבחון הישירה היא לזהות אללים מוטנטיים (חריגות ברצף הנוקלאוטידים הראשי של ה-DNA, מוטציות וסוגיהם). הדיוק הגבוה של שיטת האבחון הישיר בדנ"א ברוב המקרים אינו מצריך ניתוח DNA של כל בני המשפחה, שכן גילוי מוטציה בגן המתאים מאפשר לאשר את האבחנה בכמעט 100% דיוק ולקבוע את הגנוטיפ של כל בני המשפחה של ילד חולה, כולל נשאים הטרוזיגוטיים.

החיסרון של אבחון DNA ישיר הוא הצורך לדעת את המיקום המדויק של הגן ואת ספקטרום המוטציות שלו.

שיטות לאבחון DNA ישיר מיועדות למחלות כמו פנילקטונוריה (מוטציה R408W), סיסטיק פיברוזיס - (המוטציה הנפוצה ביותר ב-delF508), כוריאה של הנטינגטון (הרחבה של חזרות טרינוקלאוטידים-חזרות CTG) וכו'.

עם זאת, עד כה, הגנים של מחלות רבות לא מופו, ארגון האקסון-אינטררון שלהם אינו ידוע, ורבים מחלות תורשתיותמאופיין בהטרוגניות גנטית מובהקת, שאינה מאפשרת שימוש מלא בשיטות ישירות לאבחון DNA. לכן, תוכן המידע של השיטה של ​​אבחון DNA ישיר משתנה מאוד. אז, באבחון של כוריאה של הנטינגטון, אכונדרופלזיה, זה 100%, עם פנילקטונוריה, חמצת ציסטית, תסמונת אדרנוגניטל - מ-70 עד 80%, ועם מחלת ווילסון-קונובלוב ומיופתיה של דושן / בקר - 45-60%. בהקשר זה, נעשה שימוש בשיטות עקיפות לאבחון גנטי מולקולרי של מחלות תורשתיות.